Trotz vun bemierkenswäert Verbesserung vun Thes 5-FU-baséiert adjuvant Chimiotherapie goen, de Réckwee Taux vun gastric Kriibs Patienten déi curative resection hi vun der adjuvant Chimiotherapie duerno bleift substantiell. Dofir ass et wichteg Cepheid ze lues fir de chemotherapeutic Efficacitéit vum 5-FU z'identifizéieren. Mir identifizéiert kuerzem NF-κB als Kandidat Réckwee Cepheid uweist zu gastric Kriibs. Fir d'biologesch Bedeitung vun NF-κB am Kontext vun 5-FU-baséiert Chimiotherapie diskutéieren, analyséiert mir de NF-κB-ofhängeg biologescher Äntwert op 5-FU Behandlung an gastric Kriibs Zell Linnen. Seven Genen vun 5-FU Behandlung an eng NF-κB-ofhängeg Manéier entschlof waren identifizéiert, fënnef vun deem si bekannt p53 Ziler. Knockdown vun RELA VerfÜgung, déi de p65 subunit vun NF-κB encodes, ofgeholl souwuel p53 an p53 Zil- FAQ Niveauen. Am Géigesaz, huet-NF κB net betraff vun TP53 VerfÜgung knockdown. Mir bewisen, och déi Zell Linnen Pro /Pro homozygosity zu codon72 vun p53 exon4 dotéiert, déi fir NF-κB verbindlech bis p53 wichteg ass, si méi resistent géint 5-FU wéi déi mat ARG /ARG homozygosity. Mir schléissen dass NF-κB eng wichteg Roll an der Äntwert op 5-FU Behandlung an gastric Kriibs Zell Linnen spillt, mat engem méiglech indemnité Funktioun vun p53. Dës Resultater hindeit, datt NF-κB ass eng potentiell 5-FU-chemosensitivity Cepheid Bewaacher dat 5-FU-entschlof Stress-Äntwert Weeër, dorënner p53 spigelen kann VerfÜgung Fro:. Endo F, Nishizuka SS, Kume K, Aoki K, Katagiri H, Aoki K, et al. (2014) A indemnité Roll vum NF-κB zu p53 an Äntwert zu 5-FU-Opgrond Chimiotherapie fir Gastric Cancer Zell zesummeféieren. PLoS NËMMEN 9 (2): e90155. Doi: 10.1371 /journal.pone.0090155 VerfÜgung Redakter: Thomas G. Hofmann, däitschen Cancer Research Center, Däitschland VerfÜgung Arnaque: 17 Oktober 2013; Akzeptéiert: 28. Januar 2014; Publizéiert: 27. Februar 2014 zu Copyright: © 2014 Endo et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung Funding:. Dës Aarbecht war vun MIAST (Medical Innovation vun Détailléiert Science a Technology) Projet vun Grant-zu-Hëllef fir strategesch Medical Science Research Center aus dem Educatiounsministère, Kultur, Wëssenschaft an Technologie vun Japan ënnerstëtzt, 2010-2014 (SSN, K.Ku. , GW); an Grant-zu-Hëllef fir wëssenschaftlech Fuerschung (C) (11863286) (S.S.N.), an (12877914) (K.Ko.). D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung d'Majoritéit vun gastric Kriibs vun der Welt ass am Osten Asien festgestallte [1], wou de Standard Therapie fir fortgeschratt gastric Cancers Agrëff an Chimiotherapie bleift. Kuerzem entwéckelt adjuvant chemotherapeutic regimens der curative gastrectomy fir fortgeschratt gastric Kriibs hun remarquabel Fortschrëtter a Saache Kontrollen Réckwee an Krankheet-gratis Iwwerliewe, besonnesch an der japanescher Populatioun [2], [3] war. Allerdéngs Erfahrung 30-40% vun de Patienten nach Réckwee trotz Chimiotherapie der curative gastrectomy Erhalen [3] a suggeréiert datt Patient Selectioun op molekulare Informatiounen baséiert eventuell ganz effikass kéint Chimiotherapie-mediated Net-Réckwee an Iwwerliewe Tariffer fir waarden. VerfÜgung fir gastric Kriibs Patienten fir wielt déi aus Chimiotherapie profitéiere kënnen, ass et wichteg, déi eenzel Sensibilitéite virun Chimiotherapie ze verstoen [4]. Post-grënnen adjuvant Chimiotherapie vun gastric Kriibs stellt eng Geleeënheet Patient-ofgeleet erhéijen zu Test éier se Chimiotherapie kréien. Opgeraf Potential biomarkers an dësem Kader op d'FAQ Niveau ze identifizéieren, gemellt mir virdrun e Rot Duerchmusterung System Zell Linn grouss FAQ Ausdrock benotzt profiling mat Réckproduktioun-Phase Protein flamenden Ofgrond (RPPAs) [5], [6] mat engem cell- kombinéiert baséiert Wuesstem assay System baséiert op dem Konzept vun NCI-60 Zell Linn Duerchmusterung Rot [7], [8]. Kandidat biomarkers baséieren op Korrelatioun Ech aus FAQ Ausdrock an Drogenofhängeger Empfindlechkeet Matrixentgasung isoléiert an da weider validéiert andeems surgically-geläscht uplanzen [9]. Baséierend op dëser Approche identifizéiert mir zwee biomarkers op d'FAQ Niveau, dorënner NF-κB an JNK, deem Niveau haten gutt Korrelatioun mat chemotherapeutic Äntwert. Déi héich Ausdrock vun NF-κB war mat engem aarmen hätt ze vergläichen, während JNK en ëmgedréit, et gesäit Korrelatioun gewisen. Dës ze lues waren och bei der molekulare Niveau validéiert gastrointestinal Kriibs Zell Linnen benotzen. Et gouf en Effet dass siRNA-mediated knockdown vun p65 dës bal ausschliesslech 5-FU Empfindlechkeet ënnert Moment-benotzt chemotherapeutic Drogen; mä dat ass net de Fall fir JNK knockdown [9]. Dofir, ofgeschloss mir dass NF-κB eng dominant Roll am 5-FU Behandlung spillt an JNK vläicht eng Luucht vun chronescher inflammation vun der gastric Hannergrond mucosae [10] ginn. Als eng Extensioun vun dëser Confirmatioun studéieren, géng mir dës Proteinen System a klären d'Roll vun NF-κB als Stress-inducible Transkriptiouns Faktor während 5-FU Behandlung ze entdecken. Mir évaluéiert och d'Roll vun p53 no 5-FU-mediated transactivation vun NF-κB [10], [11], well et ass bekannt, datt p53 an Äntwert op dës genotoxic Agent ageschalt ass [12]. An dëser Etude Rapport mir e Potential indemnité Roll vun NF-κB fir p53 duerch Analyse vun engem p53-NF-κB polymorphic Site bindend, codon 72 vun p53. Zesumme, proposéiere dëse Conclusiounen datt NF-κB /p53-codon72 engem sécherlech uweist fir 5-FU Empfindlechkeet ginn hätt. VerfÜgung Zell zesummeféieren VerfÜgung néng Mënsch gastric Kriibs Zell Linnen, dorënner Kato-III, KE39, MKN74, MKN7, NUGC4, GSS, GCIY, an MKN45 sech aus der RIKEN BioResource Center Zell Bank krut. IWT-1 war e de Novo VerfÜgung Zell Linn déi vun eisem Laboratoire vun enger japanescher männlech gastric Kriibs Patient etabléiert déi peritonitis carcinomatosa relapsed haten. D'Benotzung vun IWT-1 Zell Strëch duerch d'Iwate Medical University Finanzpolitiker Kritik Verwaltungsrot (H25-116, an HG H25-15) an der Famill vun den Donateuren Patient guttgeheescht, deen op der Zäit vum Opbau vun der Zell Linn mat enger gestuerwen no schrëftlech informéiert Zoustëmmung mat Respekt un d'Echantillonen huelen an nees d'Zell Linn. Zellen sech zu 70-80% confluency zu RPMI-1640 mat 10% An et Bovine serum (FBS) bei 37 ° C an der Präsenz vun 5% CO 2. VerfÜgung Virbereedunge Zell Lysate BTS vum centrifugation an Zell Pellets recoltéiert huet sech lysed benotzt Pink Respektiv mat 9 M urea (Fläch-Aldrich, St. Louis, MI, USA), 4% 3 - [(3-cholamidopropyl) dimethylammonio] -1 -propanesul-fonate (Haréi; Calbiochem, Merck Millipore, Darmstadt, Däitschland), 2% pH 8.0-10.5 Pharma-Lyte (GE Gesondheetswiesen Japan, Tokyo, Japan), an 65 mm DTT (GE Gesondheetswiesen Japan, Tokyo, Japan) wéi virdru beschriwwen [5], [13]. VerfÜgung Western Blot VerfÜgung SDS-PAGE Leeschtung war NuPAGE 4-12% Bis-TrisGel electrophoresis (Invitrogen, Karlsbad CA, USA) benotzt, XCell sécher Späert Mini-Zell (Invitrogen, Karlsbad CA, USA), an Power Bourse HC (BIO-RAD, Hercules, CA, USA). D'geléist Proteinen op der nominéiert goufen zu engem nitrocellulose Membran benotzt iBlot Mangue Blotting System (Invitrogen, Karlsbad CA, USA) transferéiert. Déi doraus resultéierend Schläimhait sech mat 5% iBlot (Obwuel Biosystems, Foster City, CA, USA) an 0,1% Tween-20 (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) zu TBS (TBST) fir 1 h gespaart. Schläimhait sech dann mat der uginn Primärschoul antibodies incubated, dorënner Pan-actin, p53 (Thermo Wëssenschaftlech, Kalamazoo, MI, USA); p21, TIGAR, an PUMAα /β (Santa Cruz Déi, Dallas, Suerge, USA); an NF-κB, α-tubulin, an PCNA (Zell sécher Technology Japan, Tokyo, Japan). Next, goufen d'Schläimhait zweemol fir 5 min mat TBST, incubated mat enger HRP-conjugated Secondaire antibody fir 1 h, gewäsch an dann zweemol fir 5 min an TBST gewäsch. Chemiluminescence erkennen reagents sech mat de Schläimhait fir 1-5 min incubated an dann Biller waren mat Image Quant LAS500 (GE Gesondheetswiesen Japan, Tokyo, Japan) chrétienne. Ze diskutéieren an sech FAQ Aféierungs- vum 5-FU, westlech blots laachen benotzt ImageJ (http://rsbweb.nih.gov/ij/). VerfÜgung Immunocytochemistry VerfÜgung BTS sech ze 70-80 ugebaut % confluency zu RPMI-1640 mat 10% FBS zu 4-Chambre wäiss Zuchstreck Otemschwieregkeeten Kultur-behandelt Glas drënner nà an duerno mat 5-FU behandelt wéi zu all Experimenter uginn. No der Zellen zu 50 μM vun 5-FU fir 4 h ausgesat goufen eng fréi transcriptional Äntwert ze gesinn, si vun 4% paraformaldehyde fix waren, permeabilized mat 0,2% Triton X-100 vun PBS, a mat DAPI (0.6 μM DAPI Kierchefënster, 50 μl RNase, an 5 ml PBS) bei Raumtemperatur fir 12 min. Anti-NF-κB p65, phospho-NF-κB p65 (Ser536), an phospho-p53 (Ser15) (Zell sécher Technology Japan, Tokyo, Japan), an p53 (Thermo Wëssenschaftlech: Zellen sech dann mat der folgender Primärschoul antibodies incubated , Kalamazoo, MI, USA). Endlech, goufen d'Zellen mat entweder Alexa Fluor488- oder 568-conjugated Secondaire antibody (Life Technologies Japan, Tokyo, Japan) incubated. A BX43 unisse microscope (Olympus, Tokyo, Japan) hat fir Bild Acquisitioun benotzt. VerfÜgung Gene Expression Profiling VerfÜgung MKN45 Zellen der Behandlung recoltéiert sech mat oder ouni 50. μM vun 5-FU fir 4 h . RNS war dann ofgebaut aus der recoltéiert Zellen an der Gentherapie Ausdrock profiling war no standing fir den Hiersteller d'Instruktioune (Natiirlech Drécken G3 Mënscherechter GE8 × 60 K, Agilent Technologies Japan, Tokyo, Japan). Raw Daten goufen éischt vun Partitur all Studiebäihëllefe Signal vun der 75. RELA an TP53 Gene Knockdown VerfÜgung BTS goufen ugebaut bis 70-80 % confluency zu RPMI-1640 mat 10% FBS zu 6-gutt Zell Kultur Placke nà an duerno mat NF-κB p65 oder p53 siRNA (Zell sécher Technology Japan, Tokyo, Japan) fir 48 h behandelt. Kuerz, war knockdown fir 10 min bei Raumtemperatur op eng Usammlung vun 3% mat Trans IT-TKO (Mirus Bio Corporation, Madison, allem, USA) gesuergt. Entspriechend Konzentratioune vun siRNAs fir vunenee Linn war mat der Trans IT-TKO Léisungen vun engem 20 min incubation bei Raumtemperatur duerno gemëscht. D'siRNA Konzentratioune benotzt sech wéi follegt zesummen: 100 nm p65 siRNA fir MKN45, an MKN74 Zellen, an 150 nm fir GSS a Kato-III Zellen; an 100 nm p53 siRNA fir MKN45, an GSS Zellen, an 50 nm fir MKN74 Zellen. No 48 h, goufen Zellen gesammelt an FAQ Niveauen sech duerch Western blot iwwerpréift. Zwee siRNA gesond verschiddene Message un d'selwecht Zil Gentherapie: et war fir all Gentherapie benotzt knockdown Spezifizitéit ze confirméieren. Zell Zyklus Verdeelung war mat der Tali Image-baséiert Cytometer (Life Technologies, Karlsbad CA, USA) évaluéieren. Fir de Maximum Effet vun siRNA op de 5-FU Äntwert gesinn, war d'Drogenofhängeger 48 h notéiert der siRNA transfected war, an de respektiven Zell Zyklus war no 24 h incubation gemooss mat 5-FU. All Experimenter waren op d'mannst dräi Mol widderholl. VerfÜgung TP53 Status an Codon72 Variant VerfÜgung DNA aus gastric Kriibs Zell Linnen ofgebaut gouf benotzt QIAmp DNA Mini Kit (QIAGEN Japan, Tokyo, Japan). Hinnen alleguer amplification fir den p53 VerfÜgung exon4 codon72 Variant (Table S1) an der p53 VerfÜgung exon5-9 stattfannen Leeschtung war wéi virdru beschriwwen [15], [16]. All Hinnen alleguer Produit gouf mat der Abi PRISM 3030xl genetesch Organer (Obwuel Biosystems, Foster City, CA, USA) Nepgen laut den Hiersteller d'Protokoll. Sequencing Resultater goufen benotzt FinchTV (PerkinElmer Japan, Tokyo, Japan) analyséiert a MEGA 5.1 Beta 3 [17]. VerfÜgung Wuesstem Herzogtum Assay VerfÜgung dausend Zellen pro gutt sech géint zu engem 96-gutt microplate. Twenty-véier Stonne méi spéit waren Zellen mat 5-FU fir 24 h behandelt. No 5-FU Behandlung, war d'Ëmwandlung vu liewege Zellen mat der Zell Counting Kit-8 (Dojindo cuisine Technologies, Kumamoto, Japan) an engem TriStar LB 941 microplate Lieser (Berthold Technologies, Bad Wildbad, Däitschland) gemooss. Fofzeg Prozent Wuesstem inhibition Konzentratioun (gi 50) war mat berechent Prism Software (Grafik Heft Software, La Jolla, CA, USA). Déi gi 50 Wäerter benotzt goufen kennenzeléieren tëscht 5-FU Efficacitéit an FAQ Niveauen op d'Produkt-Moment Korrelatioun souguer gemaach ginn ( r VerfÜgung). VerfÜgung Fluorouracil Induces NF-κB VerfÜgung typesch an Äntwert NF-κB gelooss bis 5-FU Behandlung ze bestätegen, mir der subcellular Lokalisatioun vun NF-κB an der MKN45 (p53 wëll Typ) verdanken, MKN74 (p53 Mann- ), GSS (p53 Mann-), a Kato-III (p53 homozygously geläscht) Zell Linnen. Western blot Analyse mat nuklear an cytoplasmic ufale bewisen, dass 5-FU NF-κB zu souwuel compartments zu MKN45 entschlof awer net an p53 Mann- Zell Linnen observéiert (Figebam. 1A-D). Mir iwwerpréift och den Effet vum 5-FU op NF-κB Lokalisatioun vun den Zellen vun immunocytochemistry (Figebam. 1E-H). NF-κB en der op d'Zytoplasma an onbehandelt MKN45 hierkommen 5-FU Behandlung eng Erhéijung vun NF-κB nuklear Lokaliséierung (Lalumi 1E.) Ëmmer; awer, war an der p53 Mann- Zell Linnen (Figebam. 1F-H) keng Erhéijung observéiert. Mir gesinn och eng drastesch Erhéijung vun phosphorylated NF-κB (p65 Ser536) an den helle MKN45 behandelt mat 5-FU, déi besot NF-κB vum 5-FU (Figebam. 1E) transactivated war. Konstitutive nuklear Lokalisatioun an heiansdo phosphorylation vun p53 war zu MKN74 observéiert awer schéngen net vun 5-FU (Figebam. 1G) entschlof ginn. Nuclear Lokalisatioun vun p53 war vun 5-FU vun GSS entschlof, mä d'Noutbrems Signal war liichtschwaache (Figebam. 1H). VerfÜgung p53 Ziler sinn entschlof op 5-FU Prefabrizéierten VerfÜgung Well NF-κB ass e Transkriptiouns Faktor (TF), seng nuklear Lokalisatioun op 5-FU Behandlung transactivation staark mobiliséiert. Mir identifizéiert widdert 7 gët ënnert iwwer 60.000 dass no 4 h vu 5-FU Behandlung an MKN45 benotzt Gentherapie Ausdrock profiling (Table 1) entschlof waren. Spannen, fënnef vun de 7 gët, nämlech BBC3 VerfÜgung (déi p53 encodes up-reegelen modulator vun apoptosis, Ausgläichsfinanzéierung), BTG2, C12orf5 VerfÜgung (déi probabel Fruktos-2,6-bisphosphatase encodes TIGAR), CDKN1A, an GPR87 VerfÜgung, si bekannt p53 Ziler [18] - [22]. D'Präsenz vun Promoteur bindend Siten sech duerch Scannen Promoteur e Message mat den Konsens Message vun NF-κB an p53 benotzt JASPAR sind (Table 1) [23] virausgesot. VerfÜgung Mir hu fonnt, datt p53 Niveauen am helle entschlof waren ähnlech zu deene vun NF-κB an Äntwert zu 5-FU Behandlung (Figebam. 1E). Traitement vun 5-FU fräi och de Niveau vun p53 phosphorylation um Ser15, proposéiert Iech seng transactivation (Figebam. 1E, Weir. [24]). An Tatsaach, war d'Majoritéit vun insgesamt p53 entschlof vum 5-FU phosphorylated gin. Mir gesinn och eng Zäit-ofhängeg Aféierungs- vun Genen, dorënner C12orf5 (TIGAR) VerfÜgung, BBC3 (Ausgläichsfinanzéierung) VerfÜgung, CDKN1A (p21) VerfÜgung, an BTG2 VerfÜgung vum 5-FU benotzt RT-Hinnen alleguer (Figebam. 1I). Geholl zesummen, proposéiere dës Resultater datt de bewosst Äntwert op 5-FU Behandlung souwuel NF-κB an p53 fir transcriptional Aktivéierung an dësem Kontext bezitt kann, an MKN45. VerfÜgung RELA Knockdown huet e Groussregioun Effekt op p53 Target Proteinen wéi TP53 Gene Knockdown VerfÜgung fir de reglementaresche Effet vun NF-κB an p53 an Äntwert zu 5-FU Behandlung diskutéieren, analyséiert mir d'FAQ Niveau vun p65, p53, wéi och bekannt p53 Ziler, p21, TIGAR, an Ausgläichsfinanzéierung, déi westlech blotting folgenden RELA VerfÜgung a TP53 VerfÜgung knockdown zu MKN45, MKN74, GSS, a Kato-III. RELA VerfÜgung knockdown ëmmer eng schéi geloss an p53 Niveauen an all Zell Linnen. Wéi erwaart, huet den Niveau vun p21, TIGAR, an Ausgläichsfinanzéierung och ofgeholl (Figebam. 2A). Ëmgedréit, iwwerdeems TP53 VerfÜgung knockdown p53 Niveau ofgeholl huet, dat huet en Afloss net p65 Niveauen. Wéi erwaart, huet den Niveau vun p53 Zil- Proteinen Verréngerung vun TP53 VerfÜgung knockdown; awer, war dës Reduktioun manner wéi d'Reduktioun déitlech RELA VerfÜgung knockdown (Figebam. 2B). An der Zell Zyklus Analyse, d'MKN74, GSS, a Kato-III zougedréckt Zell Linnen eng Hausse vun der S oder G2 Phase Ëmwandlung hierkommen MKN45 eng Erhéijung vun der G1 Ëmwandlung no 24 h aussetzt 5-FU an der p65 an Schatzkummer p53 knockdown ähnlech ze desinfizéieren loscht (Figebam. 2C). Dës Resultater kënnen unzeginn Segele vun der bewosst Stress Äntwert Maschinnen datt d'Zell Zyklus Verdeelung trotz der knockdown vun p65 an p53 geréiert. VerfÜgung TP53 Codon72 Pro Variant geet Low 5-FU Sensibilitéit an High NF-κB Niveauen Gene knockdown uginn experimentell Resultater datt d'Interaktioun tëscht NF-κB an p53 Proteinen kéint am Kontext vun 5-FU Behandlung wichteg ginn. Fir d'Méiglechkeet fir datt d' TP53 VerfÜgung codon72 Variant bewosst Äntwerte 5-FU Behandlung Afloss kann, mir Nepgen TP53 VerfÜgung codon72 wéi och kennen an den DNA bindend Domain coding Regiounen (dh, exons 5-8) vun 9 gastric Kriibs Zell Linnen (Table 2). De Status vun der codon72 Variant an TP53 VerfÜgung stattfannen net kloer Associatiounen vermëttelt huet. VerfÜgung Mir propagéieren nächst der Associatioun tëscht 5-FU Empfindlechkeet a TP53 VerfÜgung Status (Figebam. 3A ) souwéi de endogenous Niveau vun NF-κB an p53 (Figebam. 3B). GSS, GCIY, an MKN45 Linnen, déi de Pro homozygous Variant besëtzen, Schatzkummer héich Empfindlechkeet op 5-FU hierkommen d'KE39, MKN74, MKN7, NUGC4, an IWT1 Linnen: et ARG allele relativ héich Empfindlechkeet Schatzkummer. Kato-III, deen e grousse huet TP53 VerfÜgung Läschen [25], war déi sensibel bis 5-FU. NF-κB FAQ Niveauen sech besonnesch mat 5-FU Empfindlechkeet soll ( r VerfÜgung = 0,68; p VerfÜgung = 0,04;. Lalumi 3C); Ee, gouf et keng kloer Korrelatioun tëschent p53 Niveauen a 5-FU Empfindlechkeet ( r VerfÜgung = -0,04; p VerfÜgung = 0,95;. Lalumi 3D). Dës Resultater hindeit, datt Pro homozygosity mat 5-FU Resistenz verbonnen ass, iwwerdeems weder p53 stattfannen nach endogenous p53 Niveauen direkt der Empfindlechkeet 5-FU schellt. VerfÜgung Mir hun virdrun identifizéiert NF-κB wéi e Potential Cepheid Bewaacher fir Post-grënnen 5-FU-baséiert chemosensitivity fir fortgeschratt gastric Kriibs [9]. NF-κB eng inducible Transkriptiouns Faktor ass aus vun p65 (RelA), c-Rel, Rel-B, p50 /NF-κB1, an p52 /NF-κB2 [26], a spillt eng zentral Roll am immun Äntwerte an demagogesch cytokine Regulatioun [27] - [29]. Chang et al bewisen virdrun dass NF-κB entschlof uewen oder ënnen Regulatioun vun differentially ausgedréckt Genen am 5-FU-entschlof intestinal mucositis vun Pinguin proinflammatory cytokines, wéi IL-6, TNF-α, an IL-1β [10]. Dës 5-FU-entschlof demagogesch Äntwerte goufen als Deel vun de Stress-bestinn Prozesser ze ginn, dass an gastric mucosa zu desensitization vun 5-FU Efficacitéit Féierung kann [30]. Obwuel et ugeholl gouf, datt Aktivatioun vun NF-κB net direkt mat entholl Entwécklung an Werdegang [31], NF-κB gouf considéréiert gin eng grouss uweist an therapeutesch Zil- [32] verbonnen ass. Den direkte Beweis vun reduzéiert chemoresistance bis 5-FU vun siRNA fir RELA VerfÜgung zesumme mat den héije diskriminatoresch Muecht vun NF-κB nuklear staining an therapeutesch Resultater vun surgically geläscht Stoffer Suite eis weider Confirmatioun vun NF-κB zu Leeschtunge vun enger biologescher Embryone. VerfÜgung Eis transcriptional profiling Resultater bekannt datt verschidde p53 afgerappt Genen an Äntwert zu 5-FU, vun NF-κB och geschitt an déi transactivation up-regulariséiert goufen. Dës zwou grouss Transkriptiouns Facteuren hu schonn eemol gewisen an Äntwert ze genotoxic Agenten Co-regulariséiert ginn [33] - [35] an TNF-α [36], [37]. Ausserdeem gouf et déi Co-Aktivatioun vun p53 an NF-κB zu erhéijen behandelt mat genotoxic Agenten Féierung konnt zu therapeutesch Echec wéinst NF-κB-mediated Iwwerliewe sécher [38]. VerfÜgung Individuell knockdown vun proposéiert dës Transkriptiouns Faktore Gene afgerappt vun p53 opgedeckt goufen duerch p65 knockdown betraff logéiert den Effet vun p53 knockdown limitéiert war. Virdrun Rapporten hunn e kooperativer Relatioun tëscht p53 an NF-κB am Kontext vun autophagy, apoptosis, an S-Phase Bomm Aktivéierung [34], ugeholl [39] - [41]. Eis Resultater annoncéiert och dass NF-κB fir d'transcriptional Aktivitéit vun p53 kompenséiert kann wann der intakt Funktioun an Äntwert zu 5-FU Behandlung verluer ass. An Tatsaach, datt eng Majoritéit vun gastric Cancers Projet'en am p53 DNA bindend Domain Bier, also et transcriptionally Aarbechtslosegkeet [42] Stëmmung. Eng rezent Etude vum Frank et al VerfÜgung. datt codon72 polymorphism vun gemellt TP53 VerfÜgung der Fähegkeet vun p53 méi Effet mat NF-κB fir Gentherapie transactivation, besonnesch an der Aféierungs- vun apoptosis duerch caspase 4/11 [40] ze kooperéieren. Zesumme mat de Moment fannen, datt e puer transcriptional Aktivitéit vun p53 verlaangen NF-κB an Äntwert zu 5-FU, p53 codon 72 polymorphism fir seng NF-κB bindend ka méi Afloss ewéi mutational Status vun TP53 VerfÜgung oder FAQ Ausdrock Status vun p53 VerfÜgung den Impakt vun der codon72 polymorphism op spontan Kriibs Risiko aginn propagéieren gouf awer net conclusively wéinst limitéiert mënschlech Bevëlkerung an Déier Modeller etabléierter [40], [43] -. [45]. Allerdéngs kann d'codon72 polymorphism eng Roll am Erhalen etabléierten Kriibs Zellen wéi ausléisen bewosst malignant Transformatioun Leeschtung. An Tatsaach, hunn gemellt virdrun Studien, datt d'Pro /Pro allele mat Resistenz ze Chimiotherapie an aarme hätt am Elysée Discours assoziéiert ass [46] souwéi colorectal [47], Broscht [48] an gastric [49] Cancers an neuroblastomas [ ,,,0],43]. Eng Serie vun kënschtlech VerfÜgung Studien ënnerstëtzen och dëst Hypothes weist, datt d'ARG allele engem méi mächtegst apoptosis inducer wéi d'Pro allele ass [40], [50], [51]. Apoptosis ass ee vun de groussen Mechanismen entschlof vum 5-FU an domat ass et raisonabel hypothesize dass d'Efficacitéit vun de 5-FU-baséiert Chimiotherapie mat spezifesche p53 schiefgang assoziéiert ass [49]. Eis kënschtlech VerfÜgung Conclusiounen ënnerstëtzen dës epidemiological an experimentell Date a schloen eng méiglech Mechanismus fir de 5-FU-mediated p53-NF-κB Interaktioun am p53-codon72 bindend Site. VerfÜgung Wéi erwaart , eiser Etude bewisen, dass Zell Linnen mat der Pro allele méi resistent géint 5-FU wéi déi mat der ARG allele goufen. De Wuesstem Ennerdréckung Profil vun 9 gastric Kriibs Zell Linnen awer gutt Korrelatioun fir NF-κB FAQ Niveauen. Dës Resultater hindeit, datt d'ARG /ARG genotype eng staark Aféierungs- vun apoptosis wéi d'Pro /Pro genotype an der Präsenz vun 5-FU huet. Ënnert der Zell Linnen (all aus Japanesch gastric Kriibs Patienten ofgeleet), d'Verhältnis vun ARG /ARG: ARG /Pro: Pro /Pro war 4:1:3, iwwerdeems, datt an gesond Japanesch Patienten war 4.5:4.4:1 [52] . Dëst kann eng Auswiel Prozess spigelen dass während entholl Entwécklung an d'Schafe wéi eng Zell Linn existeiert. Virdrun meta-Analysë vun Kriibs Risiko an p53-codon72 schiefgang hindeit, datt d'Pro /Pro genotype eng héich Kriibs Risiko (manner fir d'ARG /ARG genotype) an asiatesch Populatiounsschichte huet [45], [53]. Allerdéngs bleift d'Bedeitung vu "Kriibs Risiko" fir Kriibs malignancy oder Behandlung Äntwert opgekläert ze ginn, well et normalerweis schwéier ass e Medeziner Etude vun genetesch schiefgang dominéiert zu Behuelen an de richtege genetesch Auswierkunge vun Behandlung bewäerten. Fir Datum, déi Rapporten eng Associatioun tëscht der p53 codon72 polymorphism beschreiwen an chemotherapeutic Äntwerte hu bewisen, dass d'ARG /ARG genotype engem ordentleche Äntwert op eng breet Palette vun Cancers mat konventionelle genotoxic Drogen [49], [54], [55] behandelt huet . Mir proposéieren eng putative Mechanismus fir Äntwert op 5-FU via NF-κB an p53 FAQ mat der p53 polymorphism verbonne bindend, an domat eng combinational Diagnos vun NF-κB FAQ Ausdrock an codon72 vläicht eng nëtzlech Luucht fir Post-grënnen adjuvant Chimiotherapie ginn. Huel vun e puer grousse Skala konsultéieren [52], [56], d'Ausmooss vum Bäitrëtt an ethnesch distributions vun der polymorphism bleift onkloer. Aktueller Daten iwwert ethnesch Ënnerscheeder fir d'polymorphism kann d'Differenzen zu Kriibs Risiko oder chemotherapeutic Äntwert Taux vun Patient Populatioun erklären. VerfÜgung Am Resumé, eis Conclusiounen weg datt NF-κB p53 transcriptional Aktivitéit an Äntwert zu 5-FU reguléieren, déi vläicht mat engem polymorphic Site vun p53 um codon72 verbonne ginn. Weider Medeziner an epidemiological Studien soll den Déngscht vun concomitant agebousst /genetesch Evaluatioun vun NF-κB /p53-codon72 zu surgically-geläscht gastric Kriibs uplanzen fir d'Efficacitéit vun der Post-grënnen 5-FU-baséiert adjuvant Chimiotherapie ze soe bewäerten. Aféierung VerfÜgung
spontan a Methode VerfÜgung
d'Pearson Basis ze bestëmmen Resultater VerfÜgung
Diskussioun VerfÜgung
Ennerstëtzung Informatiounen VerfÜgung Table S1. VerfÜgung Primer Message VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0090155.s001 VerfÜgung (DOCX) VerfÜgung
Studie beschreift initial Baseline gesond Darmmikrobiom Datebank an Iwwerflossprofil
Patienten op Immuntherapie solle méi Faser konsuméieren,
Proteinboten aus dem mënschleche Mikrobiom werfen Liicht op d'mënschlech Gesondheet
Alkohol beschiedegt de Mikrobiom am Mond
Wéi hëllefen Hostfaktoren wéi de Lungemikrobiom bei der SARS -CoV -2 Infektioun?
Apoptose ass e wichtege Mediateur vun der Pathogenese bei der Déierekoronavirus Infektioun
Neie Modell fir vaginale Mikrobiomtransplantatioun
Bakteriell Vaginose ass eng Bedingung déi Dausende vu Fraen weltwäit betrëfft, an ass net nëmme mat vaginale Symptomer verbonne mee mat Schwangerschaftsbedéngte Komplikatiounen abegraff virzäiteg Aarb
Tester benotzt fir GERD Diagnos
Bei e puer Patienten, mir kënnen gastroesophageal Reflux Krankheet verdächtegen, awer dSymptomer vum Patient kënne atypesch sinn. Oder mir mussen einfach eis Diagnos bestätegen. Sou maachen, bei Ogden
Mikroben verbonne mat Häerzinfarkt fanne Studie
Eng Studie, déi um ESC Kongress 2019 zu Paräis de leschte Weekend ofgehale gouf, weist datt anormal Mikropopulatioun am Kierper zu enger Behënnerung vun de stabile Koronarplacken féiere kann a féiere