Background VerfÜgung
Mycoplasma hyorhinis VerfÜgung ( M.hyorhinis , ass M.hy VerfÜgung) mat Entwécklung vun gastric an Aarbecht Cancers assoziéiert. D'NLRP3 inflammasome, e Protein komplex kontroléieren maturation vun wichteg pro-demagogesch cytokines interleukin (IL) -1β an IL-18, och zu tumorigenesis an Metastasen vun verschiddenen Cancers Équipe ass. VerfÜgung Methodik /Principal effektiv VerfÜgung fir ze klären, ob M.hy VerfÜgung entholl Entwécklung via inflammasome Aktivéierung gefördert, mir monocytes fir IL-1β an IL-18 Produktioun op M.hy VerfÜgung Géigespiller analyséiert. Wann ausgesat M.hy VerfÜgung, Schatzkummer Mënsch monocytes rapid a sécherlech IL-1β an IL-18 secretion. Mir identifizéiert weider dass Lipid-verbonne Membran FAQ (Lamp) aus M.hy VerfÜgung fir IL-1β Aféierungs- responsabel war. Opdroen kompetitiv inhibitors, Gentherapie spezifesch shRNA an der Gentherapie geziilte Mais, ubelaangt mir dass M.hy VerfÜgung entschlof IL-1β secretion war NLRP3-ofhängeg kënschtlech VerfÜgung a zu VIVO VerfÜgung . Cathepsin B Aktivitéit, K Konklusiounen VerfÜgung Eis Daten proposéiere datt Aktivatioun vun der NLRP3 inflammasome vun M.hy VerfÜgung kënnt mat sengem Promotioun vun gastric Kriibs Metastasen verbonne ginn, an anti M.hy VerfÜgung Therapie oder limitéieren NLRP3 sécher kéint effektiv Approche ginn fir Kontroll vun gastric Kriibs Fortschrëtt VerfÜgung Fro:. Xu Y, Li H, Chen W, Yao X, Y Xing, Wang X, et al. (2013) Mycoplasma hyorhinis VerfÜgung activéiert der NLRP3 Inflammasome a förderen Migratioun a Missiounen Gastric Cancer BTS. PLoS NËMMEN 8 (11): e77955. Doi: 10.1371 /journal.pone.0077955 VerfÜgung Redakter: Suresh Yenugu, Universitéit vun Hyderabad, Indien VerfÜgung Arnaque: Juni 5, 2013; Akzeptéiert: 6 September 2013; Publizéiert: November 6, 2013 VerfÜgung Copyright: © 2013 Xu et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung Funding:. Dës Aarbecht déi Subventioune vun 100 Talent plangen vun der chinesescher Akademie vun de Wëssenschaften, Natural Science Foundation vu China ënnerstëtzt gouf (91029707, 31170868), Shanghai Natural Science Fëllement (11ZR1442600), Novo Nordisk-Frankräich Research Foundation, SA-SIBS datt och plangen, wéi och Stipendien aus der National Key Programmer op ustiechend Genau (2012ZX10002007-003). D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung Mycoplasmas sinn pleomorphic, Mauer gratis, prokaryotic Organismen déi entweder op der eukaryotic Zell Schläimhait oder am Zellen wunnt, a si sinn d'klengste Organismen kapabel Self Gedächtnis [1]. Fir Datum, muss op d'mannst 16 mycoplasma Arten gouf aus Mënschen isoléiert [2]. Mycoplasma hyorhinis VerfÜgung ( M.hy VerfÜgung) war fir Mënschen Net-pathogenic als et dontknow flénke Otmungsproblemer TRACT Krankheet an inflammation vun der Broscht an Gelenker normalerweis infects [3], [4] . Allerdéngs, seet de Beweiser aktueller dass M.hy VerfÜgung Wonn am Mënschen an Medeziner Resultater heescht Resultat. M.hy VerfÜgung zu 56% vun gastric carcinoma fonnt huet, 55% vun Colon carcinoma an 52,6% vun haett carcinoma biopsies [5]. Desweideren, 36% Männer mat benign prostatic hyperplasia (BPH) an 52% Männer mat Aarbecht Kriibs sinn M.hy VerfÜgung sero-positiv. Dës Medeziner Conclusiounen proposéiere eng méiglech Verbindung tëschent M.hy VerfÜgung aussetzt mat gastric, Colon, haett an Aarbecht Cancers [5], [6]. VerfÜgung Beim microbial Krankheet Provider Muster Unerkennung kenne ( PRRs) wéi TLRs Sënn de pathogens an ausgeléist Synthes vu pro-demagogesch cytokines wéi pro-IL-1β a pro-IL-18 via NF-κB Aktivéierung. Gläichzäiteg, weider Grupp vun PRRs dorënner NLRP3 der ASC adapter FAQ rekrutéieren an der Aktivatioun vun caspase-1 a Féierung gaangen, wou en aktiv protease ass dass cleaves Virleefer Form vun cytokines och pro-IL-1β a pro-IL-18 an alen, secreted Form [7]. Pathogens oder usprochsvollen Agenten Ursaach KaliumiodidPëlle efflux, Mitochondrie Schued, Mitochondrie DNA release, Ros Produktioun, intracellular Kalzium Erhéijung oder bewosst cyclic Ofsenkung Leitmotiv immun Zellen, déi all zu caspase-1 Aktivéierung Équipe sinn [8], [9], [10 ], [11], [12], [13]. An dësem Prozess, den NLRP3, ASC an pro-caspase-1 Form enger molekulare Plattform genannt inflammasome. Esou wäit, eng Zuel vun inflammasomes identifizéiert ginn, vun hinnen, den NLRP3 inflammasome fonnt gouf mat entholl Entwécklung verbonne [14], [15], obwuel kontroverse aus verschidde Modeller gëtt [16], [17]. Trotzdeem, war IL-1β Rapport ze entholl Zell Wuesstem an Metastasen duerch verschidde pro-metastatic Genen Pinguin wéi Matrixentgasung metalloproteinases an endothelial Haftung Molekülle, souwéi TGF-β, chemokines a Wuesstem Faktoren [18] förderen. An engem Koreanesch Bevëlkerung, déi Kombinatioun vu fräi mucosal IL-1β Niveau an homozygosity fir IL-1β -31T Single Nukleotid polymorphism (SNP) sinn souwuel mat méi Risiko verbonnen fir gastric Kriibs [18]. Ausserdeem, tu et al. fonnt dass Mo-spezifesch Ausdrock vun mënschlecher IL-1β zu transgenic Mais bis spontan gastric inflammation a Kriibs [19] suggeréiert, weider gefouert, datt IL-1β Mënsch gastric carcinogenesis Promotioun kann. Am Géigesaz, verbessert IL-18 NK Zell Aktivitéit, verklengert tumorigenesis, induces apoptosis an bremst zu entholl Zellen angiogenesis anti-entholl Effekter huele [20], [21]. Ausserdeem, war en surfen Produktioun vun IL-18 fonnt fir d'pathogenesis vun Cancers ze droen an de Medeziner Resultat vun Patienten Afloss kann [22]. IL-18 war gemellt Matrixentgasung metalloprotease-9 Produktioun ze stimuléieren, geplatzt fräi Wanderung an Invasioun an coronary verstoppten glat Muskel Zellen an HL-60 Servicer sinn Leukämie Zellen [23], [24]. Et war Rapport och dass den serum IL-18 Niveau vun gastric Kriibs Patient Grupp déi vill méi héich war, wéi an gastric oppent Patient Grupp [25] an IL-18 kënnt via d'verwandelt-Regulatioun vun CD70 Metastasen an immun Auswee vun Mo. Kriibs Erhéijung an Ënnerhalt vun CD44 zu Mënsch gastric Kriibs Zell Linn NCI-N87 an SNU16 [26]. Et ass och eng kritesch Vermëttler vun VEGF-verstäerkte Migratioun zu Mënsch gastric Kriibs Zell Linnen SNU-601 [27]. D'virun Conclusiounen hindeit datt Mycoplasma hyorhinis VerfÜgung kann duerch activating inflammasome Wanderung an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen förderen. VerfÜgung Fir Datum, e breet Spektrum vun microbes och Viren, Bakterien, liewen an protozoa gewiescht identifizéiert der NLRP3 inflammasome [28] ze aktivéieren. Eng rezent Etude gewisen, dass Mycoplasma pneumoniae VerfÜgung war och kënnen IL-1β Produktioun vun mënschlech Zellen [29] zu induce. Mä, ob M.hy VerfÜgung, wat e wichtege Faktor am gastric Kriibs Entwécklung ass den uewen ernimmten [5], [30], [31], activéiert der NLRP3 inflammasome an ob dëst Aktivatioun dréit zu der gastric Kriibs Entwécklung bleiwen onbekannt. An dëser Etude, fonnt mir dass M.hy VerfÜgung IL-1β secretion zu engem NLRP3 inflammasome-ofhängeg Manéier ausgeléist, an déi doraus resultéierend IL-1β entschlof Wanderung an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen. VerfÜgung M.hy VerfÜgung Jang IL-1β an IL-18 Production zu THP-1 BTS VerfÜgung ob fir erauszefannen M.hy VerfÜgung induces IL -1β Produktioun vun Leitmotiv immun Zellen, iwwerwaacht mir eeler IL-1β Niveauen am mënschleche monocytic Zell Linn THP-1 Zellen mat ënnerschiddleche Montanten vun erausgefuerdert M.hy VerfÜgung. An dësem Experiment, war e staark Aféierungs- vun IL-1β an enger Portioun-ofhängeg Manéier observéiert (Dorënner 1A). Next, gemooss mir de pro-IL-1β mRNA Niveauen an d'Zellen a eeler IL-1β bei verschiddene Zäit Punkten an der Kultur supernatants FAQ Niveauen no M.hy VerfÜgung Erausfuerderung. Et war observéiert datt IL-1β mRNA Niveau bei 3 Stonnen no Géigespiller (Dorënner 1B) an eeler IL-1β (Dorënner 1c) an IL-18 (Dorënner 1D) FAQ Niveau erreecht 12 Stonnen no der Erausfuerderung erreecht. Desweideren, THP-1 ofgeleet macrophages och sécherlech secretion vun IL-1β, IL-18 souwéi aner demagogesch cytokines wéi IL-6 a IL-8 (Dorënner 1E, Dorënner S1) Schatzkummer. Fir d'uewen Conclusiounen zu THP-1 Zell Linn bestätegen, mir der IL-1β Produktioun am primäre Mënsch monocytes aus gesond Donateuren iwwerpréift erausgefuerdert mat M.hy VerfÜgung, Hellef IL-1β gouf och staark entschlof (Dorënner 1F) . Dës Donnéeë uginn dass M.hy VerfÜgung ausgeléist sécherlech IL-1β an IL-18 secretion vum Mënsch Servicer sinn Zellen. VerfÜgung Lamp ofgeleet vun M.hy VerfÜgung fir IL Persoun ass -1β Schulung duerch TLR2 VerfÜgung Next propagéieren mir ob Gedächtnis vun M.hy VerfÜgung fir IL-1β Produktioun vun monocytes néideg war. Als zu Dorënner 2A gewisen, M VerfÜgung .hy VerfÜgung vun Heizung oder ultra-violett (UV) Behandlung esou vill IL-1β secretion aus THP-1 Zellen als liewen M entschlof inactivated .hy VerfÜgung. Dëst uginn, datt bestëmmte heat- an UV- resistent Komponent vun M.hy VerfÜgung fir Aféierungs- vun IL-1β secretion responsabel war. Lipid-verbonne Membran FAQ (Lamp) ass Iwwerfloss op der Uewerfläch vun ausgedréckt M.hy VerfÜgung [32], a virdrun Etude fonnt dass Membran lipoproteins aus anere mycoplasma Arten IL-1β secretion entschlof [33]. Mir spekuléieren sou dass M.hy VerfÜgung ofgeleet Lamp (MLAMP) zu THP-1 Zellen fir d'IL-1β Aféierungs- responsabel gin kann. Mir ofgebaut Lamp dann aus M.hy VerfÜgung (Dorënner 2B) an der Méiglechen stoussen vun MLAMP getest IL-1β secretion zu THP-1 Zellen ze induce. Mir hu fonnt, datt MLAMP kloer secretion entschlof vun IL-1β an enger Portioun-ofhängeg Manéier, iwwerdeems d'meng Phase vun M.hy VerfÜgung Extrait net fäerdeg war sou ze maachen (Dorënner 2C). Fir d'méiglech RNS an /oder DNA kontaminéierte zu MLAMP auszeschléissen, behandelt mir de MLAPMs mat RNase an DNase an fonnt dass MLAMP de grousse Volet fir IL-1β Aféierungs- (Dorënner S2) war. VerfÜgung Et gouf confirméiert datt MLAMP haaptsächlech ageschalt NF-κB duerch TLR2 an TLR6 [34], [35]. Dofir, applizéiert mir éischt e T2.5 TLR2 neutralizing antibody der TLR2 Signal ze blockéieren, mat ConT2 Déngscht als isotype Kontroll [36]. Als zu Dorënner 2D gewisen, blockéiert T2.5 misst de IL-1β secretion vun TLR2 agonist P3CSK4 stimuléiert awer net vun der TLR4 ligand LPe. Wichtegst, IL-1β secretion vun M.hy VerfÜgung infizéiert Zelle betraff vun T2.5 reduzéiert huet, wat beweist, datt TLR2 zu MLAMP Équipe war ausgeléist IL-1β secretion zu Mënsch monocytes. Spannen, IL-1β secretion vun M.hy VerfÜgung Zellen infizéiert war net komplett vun T2.5 (Dorënner 2D) blockéiert, déi proposéiert datt TLR2-onofhängeg sécher Passerelle och zu MLAMP Équipe war ausgeléist IL-1β secretion, dat verdéngt weider Ermëttlungen an Zukunft. VerfÜgung M.hy VerfÜgung Induces IL-1β Secretion duerch Activatiounscode vun der NLRP3 Inflammasome VerfÜgung fir Test ob M.hy Weideren getest mir ob M.hy IL-1β secretion op bestëmmte inflammasome Komponente ofhängeg war entschlof VerfÜgung. Éischt, fonnt mir datt de spezifeschen caspase-1 inhibitor AC-YVAD-CHO ofgeholl IL-1β secretion zu THP-1 Zellen an enger Portioun-ofhängeg Manéier (Dorënner 3C). Nächst, wann spezifesch shRNA den Ausdrock vun caspase-1 an ASC (Dorënner 3D), IL-1β Produktioun staark op rofgaang war fir Hammers agestallt war M.hy VerfÜgung Géigespiller (Dorënner 3), wat beweist, dass M.hy VerfÜgung entschlof IL-1β secretion op caspase-1 an ASC ofhängeg war. VerfÜgung dann, mir getest, ob NLRP3 fir M.hy néideg war VerfÜgung IL-1β secretion entschlof. Éischt, fonnt mir datt de NLRP3 inhibitor Glybenclamide Trupen M.hy VerfÜgung entschlof IL-1β secretion an enger Portioun-ofhängeg Manéier (Dorënner 3F) [37]. Wann spezifesch shRNA Employé war den Ausdrock vun NLRP3 (Dorënner 3G), IL-1β Produktioun staark op rofgaang war fir Hammers M.hy VerfÜgung Géigespiller (Dorënner 3H), wat beweist, dass M.hy VerfÜgung entschlof IL-1β secretion war op NLRP3 ofhängeg. Dëst gouf weider vun immunoblotting bestätegt, an deem d'caspase-1 Aktivéierung an IL-1β Produktioun souwuel NLRP3 ofhängeg (Dorënner 3I) waren. Desweideren, fonnt mir weider, datt MLAMP de grousse Volet vum responsabel fir NLRP3 inflammasome Aktivéierung war M.hy VerfÜgung (Dorënner S2C). Ausserdeem war AIM2 inflammasome Rapport vun DNA ageschalt ginn [38], an hunn mir dass M.hy VerfÜgung DNA entschlof IL-1β secretion via AIM2 inflammasome (Dorënner S3A). Spannen, M.hy VerfÜgung entschlof IL-1β secretion war haaptsächlech ofhängeg op NLRP3, iwwerdeems AIM2 nëmmen deelweis Équipe (Dorënner S3A) war. Geholl zesummen, dës Resultater kloer bewisen, dass M.hy VerfÜgung IL-1β secretion duerch Aktivatioun vun der NLRP3 inflammasome zu Mënsch monocytic Zellen entschlof. VerfÜgung Mechanismen Basisdaten M.hy VerfÜgung ausgeléist NLRP3 inflammasome Activatiounscode VerfÜgung Activatiounscode vun NLRP3 inflammasome vun enger Rei vun stimuli hänkt op Cathepsin B Aktivitéit, K Ausserdeem, mir getest, ob M.hy VerfÜgung Géigespiller entschlof Ros Generatioun zu THP-1 Zellen . Fir dëst assay, THP-1 Zellen goufen éischt mat der redox-senisitive fluorophore DCFDA an dann erausgefuerdert mat M.hy VerfÜgung, ATP iwwerlaascht war als positive Kontroll abegraff. Als zu Dorënner 5A gewisen, 16,9% CM-H2DCFDA positive Zellen sech 30 Minutten nogewise no M.hy VerfÜgung Behandlung an onbehandelt Zellen zu 1,6% am Verglach. Dës Donnéeë ugeholl datt Ros zu NLRP3 inflammasome Aktivéierung an Äntwert bäidroen kënnen ze M.hy VerfÜgung Erausfuerderung. Fir dës Méiglechkeet z'iwwerpréiwen, pretreated mir THP-1 Zellen mat Ros inhibitor diphenyliodonium (dpi) fir 30 Minutten, a wou dann den Zellen mat M.hy VerfÜgung virun Miessung vun IL-1β Produktioun 6 Stonne méi spéit. Wéi erwaart, dramatesch reduzéiert dpi M.hy VerfÜgung IL-1β release (Dorënner 5B) entschlof. Eng rezent Etude gewisen, datt Ros inhibitor wéi dpi IL-1β release vun inhibiting NLRP3 Gentherapie Ausdrock an Maus macrophages ofgeschaf [40]. Dofir, iwwerwaacht mir och der mRNA Niveau vum pro-IL-1β an NLRP3 ënner dpi Behandlung. Mir hu fonnt, dass DPI Ofstand den Ausdrock vu pro-IL-1β an NLRP3 (Dorënner 5C-D) reduzéiert, déi mat der Opklärung vum Maus Zellen konsequent war [40]. Zousätzlech, iwwerpréift mir och der Aktivatioun vun caspase-1 a fonnt, datt héich Dosis (1 oder 10 μM) vun dpi Behandlung net de caspase-1 Aktivéierung iwwerdeems 100 μM vun dpi inhibited caspase-1 Aktivéierung (Dorënner 5E) Afloss huet. Dëst bewisen, dass DPI zu mënschlech Zellen mat NLRP3 inflammasome Aktivéierung duerch inhibition vun NLRP3 Transkriptiouns gestéiert souwéi caspase-1 Aktivitéit wou héich Dosis applizéiert gouf. Zesummen, proposéiere dës Donnéeën, déi Cathepsin B Aktivitéit, K M.hy VerfÜgung NLRP3 Inflammasome activéiert zu VIVO Wann Maus Réckemuerch hiirgestallt ofgeleet dendritic Zellen (BMDCs) sech mat M.hy VerfÜgung , eng nohalteg IL-1β Aféierungs- war (Dorënner 6A) observéiert. Weider Experimenter op BMDCs vom Wildwest-Typ (virstellen) Mais oder Mais erhéijen fir caspase-1, ASC oder NLRP3 mat M.hy VerfÜgung Géigespiller confirméiert datt M.hy VerfÜgung Aféierungs- vun IL- 1β war NLRP3 ofhängeg (Dorënner 6B) inflammasome. Ausserdeem, systemesch inoculation vun M.hy VerfÜgung zu virstellen Mais IL-1β Produktioun vun serum an peritoneal lavage Flesseggassystem (PLF) entschlof, mä net am Mais subtil ASC oder NLRP3 (Dorënner 6C-D). Spannen, war d'basal Niveau vun IL-1β zu ASC erhéijen Mais däitlech méi héich wéi déi vun virstellen oder NLRP3 erhéijen Mais, mä de Been mat M.hy VerfÜgung weider net de secretion vun IL-1β an esou Mais Erhéijung (Well 6C-D). Zesummen, confirméiert dëse Conclusiounen datt M.hy och NLRP3 inflammasome ageschalt VerfÜgung zu Mais kënschtlech VerfÜgung a zu VIVO VerfÜgung. VerfÜgung M. HY VerfÜgung entschlof IL-1β förderen Gastric entholl Zell Migratioun a Missiounen VerfÜgung D'virun Donnéeën kloer gewisen dass M.hy VerfÜgung konnt IL-1β Produktioun vun Leitmotiv immun Zellen duerch NLRP3 zu induce inflammasome Aktivéierung. Fréi Aids Studien Teamchef eng méiglech Roll vun mycoplasma zu der Entwécklung vun gastric Kriibs [5]. An Mycoplasma hyorhinis VerfÜgung bewisen huet entholl Zell Migratioun, Iwwerfall a Metastasen kënschtlech VerfÜgung a zu VIVO VerfÜgung [41] ze förderen. Mir Hypothes, datt et aner Mechanismus fir dës Promotioun existéieren kann, dat ass, datt M.hy VerfÜgung vun Spur gastric carcinogenesis an /oder Metastasen Promotioun kann IL-1β Produktioun. A mir confirméiert, datt M.hy VerfÜgung gastric Kriibs Zell Wanderung an Invasioun (Dorënner S5) steigen. Zanter M.hy VerfÜgung gastric Kriibs Zellen ze globalen bewisen huet ([41], Dorënner S4), ass et also méiglech, datt M.hy VerfÜgung direkt inflammasome Aktivéierung zu Kriibs Zellen induce kann. Allerdéngs war kee inflammasome Aktivatioun vun gastric Kriibs Zellen (Dorënner S6) fonnt. VerfÜgung Mir sech nächsten den Effet vun der Mënschheet recombinant IL-1β (rIL-1β) op gastric Kriibs Zell carcinogenesis zu enger Kolonie Opstellung assay, déi verroden, datt de rIL-1β net d'Prolifératioun vu gastric Kriibs Zell Linn MGC-803 (Dorënner S7) Afloss huet. Zanter IL-1β gemellt war Metastasen vun anere erhéijen ze förderen [18], vergewësseren mir d'Effete vun rIL-1β op der Migratioun an Invasioun vun MGC-803 Zellen. Eis Resultater gewisen, datt d'Chassis-803 Wanderung an Invasioun mat rIL-1β Behandlung verstäerkt goufen (Dorënner 7A an 7C), während Behandlung mat rIL-18 keen Effet (Dorënner 7B a 7D) show gemaach. Next, behandelt mir dës gastric Kriibs Zellen mat der Kultur supernatants vun M.hy VerfÜgung vun NLRP3, mat silencing macrophages oder macrophages erausgefuerdert THP-1 ofgeleet ASC an caspase-1 fir Migratioun a Invasioun assay. Eis Resultater gewisen, datt d'Kultur supernatants vun M.hy VerfÜgung Alaister macrophage Zelle betraff verstäerkte Wanderung an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen erausgefuerdert ginn, iwwerdeems d'Kultur supernatants aus der NLRP3, ASC oder caspase-1 knockdown macrophages net gemaach, wahrscheinlech wéinst der manner IL-1β secretion (Dorënner 8A an 8C). Dës verstäerkte Wanderung an Invasioun vun MGC-803 Zellen war vun bestéet d'Zellen mat anti-IL-1β MAB- (Dorënner 8B an 8D) ofgeschaaft. Geholl zesummen, eis Resultater bewisen, dass M.hy VerfÜgung Wanderung an Invasioun vun gastric Kriibs Zell Linn-803 MGC entschlof vun Spur IL-1β secretion aus monocytic Zellen. Desweideren, uginn eis Daten déi M.hy VerfÜgung inflammasome Aktivéierung entschlof Promotioun ka M.hy VerfÜgung Gedächtnis (Dorënner S8), déi e positive Feedback erschaaft an endlech féiert zu chronicity vun der Krankheet. Mycoplasmas z'ënnerscheeden selwer aus anere Bakterien duerch kleng Gréisst, Minutt Nepgen a opgepasst Zell Mauer. Vill mycoplasmas Kolonisatioun an Wonn via onvergläichleche etabléieren Stoffer zu Gaascht. Well hir dynamesch Uewerfläch Architektur antigenically an System villsäiteger ass, sinn mycoplasmas kapabel Provider immun Ugrëff vun hannerzéien an Adaptatioun ze vill liewenswichteg a verursaache chronescher Krankheeten [32]. Zënter der Identifikatioun vun M.hy VerfÜgung aus dontknow an 1962, war kleng Enquête iwwert dëse pathogen duerchgefouert bis et fonnt huet mat e puer Mënsch Cancers verbonne ginn [5], [41], [42], [ ,,,0],43]. Méi kuerzem, fonnt Wëssenschaftler dass M.hy VerfÜgung FAQ p37 fir Promotioun Kriibs Zell invasiveness an Metastasen responsabel war [30], [44]. Nieft dësem direkte Mechanismus, kann dës microbe och tumorigenesis oder Metastasen induce indirekt duerch eng lokal chronescher demagogesch Prozess. Et ass bekannt, datt IL-1β eng wichteg pro-demagogesch cytokine ass dass de Wuesstem vun Colon Kriibs Zellen a verbessert invasiveness an Metastasen vun B16 melanoma Zellen [19], [45] ënnerstëtzt. Overexpression vun IL-1β gouf fonnt gastric inflammation a Kriibs am Mais bis induce [19]. An dëser Etude, ze propagéieren mir ob der NLRP3 inflammasome, déi Kontrolle IL-1β maturation, déi vun M.hy VerfÜgung ausgeléist huet, an ob dëst Aktivatioun ze M.hy bäidroen kënnen VerfÜgung gastric Metastasen assoziéiert . Eis Resultater weisen, datt M.hy VerfÜgung der NLRP3 inflammasome ageschalt kënschtlech VerfÜgung a zu VIVO VerfÜgung, an der Promotioun vun gastric Kriibs Zell Wanderung an Invasioun vun M .hy VerfÜgung war ofhängeg op NLRP3 inflammasome Aktivéierung. Nieft NLRP3, fonnt mir dass M.hy VerfÜgung DNA och de AIM2 inflammasome ausgeléist, mä MLAMP Aktivatioun vun NLRP3 war d'dominant Komponent fir IL-1β Aféierungs- vun M.hy. Et war gemellt kuerzem datt acylated lipopeptide vun Hëtzt-ëmbruecht mycoplasma Acholeplasma laidlawii VerfÜgung (HKAL) IL-1β Produktioun duerch NLRP7 inflammasome zu mënschlech Zellen entschlof, iwwerdeems total HKAL entschlof IL-1β secretion deelweis war NLRP3 onselbstännegen [46], wat beweist, datt verschidde inflammasomes kann duerch verschidden mycoplasma ageschalt ginn. Eis Daten huet ausschléissen net méiglech Abannung vun NLRP7 zu M.hy VerfÜgung IL-1β Produktioun entschlof, mä M.hy VerfÜgung haaptsächlech ageschalt der NLRP3 inflammasome, well d'IL-1β secretion war bal komplett an der NLRP3 entsat Zellen (Dorënner 3H an 3I) ofgeschaaft. VerfÜgung Early Studien proposéiert datt Ros der NLRP3 inflammasome ageschalt caspase-1 vun activating [47]. rezent Enquête zougedréckt awer, datt Ros inhibitors mat der Reunioun vun IL-1β an NLRP3 gestéiert, awer net betraff Aktivatioun vun caspase-1 zu Maus Zellen [40]. An eiser Etude, obwuel Ros inhibition mat Allge dpi (10 μM) bedeitend der IL-1β Produktioun op reduzéiert M.hy VerfÜgung Erausfuerderung, huet et net de caspase-1 Rëss inhibit, déi Bewaacher vun inflammasome Aktivéierung. Allerdéngs, wann héich Dosis dpi (100 μM) applizéiert gouf, caspase-1 Rëss kloer inhibited (Dorënner 5E) war, a proposéiert, datt héich Dosis dpi kann de Montage vun inflammasome komplex oofgesinn, obwuel mer net eng Méiglechkeet, datt dës Effekt kéint ausgeschloss kënne goufen aus der NLRP3 mRNA Ofschaaffe vum baseline (Dorënner 5D) duerchgesat. Et ass wahrscheinlech, datt d'Ros inhibitor mat Amëschung kéint souwuel pro-IL-1β Synthes an caspase-1 Aktivéierung. VerfÜgung Wéi M.hy VerfÜgung ënnerstëtzt Ros Produktioun vun macrophage Synch bleift. D'Feele vu Zell Mauer aus M.hy VerfÜgung direkte Kontakt vum mycoplasma Membran an Provider Zell Membran verkraften, an dat Kontakt kënne mat eukaryotic Provider Zell fir Fusioun vun mycoplasma Féierung. Dëst Fusioun kënnen nëmmen net ze mycoplasma Komponente nodeems an der Provider Zell ze liwweren, mä och Enregistréiere vun der mycoplasma Membran Komponente an der Membran vun der eukaryotic Provider Zell erlaben. Kuerzem, M.hy VerfÜgung Schläimhait sech fonnt Phospholipase A (Pla) ze besëtzen, datt an de Plasma Membran Stéierungen Prozess Équipe kann dat op der Invasioun vum Provider Zellen existeiert [48], [49]. An dësem Prozess, kann d'Gaaschtland Zellen Ros produzéieren. Et wär derwäert vun enquêtéiert ob Pla fir den M.hy néideg ass VerfÜgung Ros Produktioun an IL-1β secretion entschlof. VerfÜgung Als vun eisen Daten Siicht, Dëst Broch, K Obwuel M .hy VerfÜgung ass net héich virulent, kann et chronescher Krankheet etabléieren. Vun e moderate a progressiv dÉxistenz Provider Zellen, induces et chromosomal Onstabilitéit an malignant Transformatioun, also entholl Wuesstem förderen, Migratioun oder Invasioun [50], [51]. D' M.hy VerfÜgung p37 FAQ gefördert gastric Kriibs Zell, Aarbecht carcinoma an melanoma Zell Linnen invasiveness [30], [31]. Zousätzlech, bäidroen kënnen och déi pro-demagogesch Mikro-Ëmwelt wéi IL-1β Produktioun un dësem Prozess [19]. Eis Etude fonnt dass M.hy VerfÜgung entschlof IL-1β Wanderung an Invasioun vun der gastric Kriibs Zellen gefördert, iwwerdeems M.hy VerfÜgung entschlof IL-18 zu der Wanderung an Invasioun net gemaach bäidroen vun gastric Kriibs Zellen, déi aus anere Rapporten anescht war [26], [27]. Eng méiglech Erklärung dofir ass, datt IL-18 gastric Kriibs Zellen Wanderung an Invasioun via d'Regulatioun vun CD70, CD44 an VEGF Ausdrock vun immun Zellen gefördert muss kënnen, déi eis weider Enquête verdéngt [26]. Aner Erklärung kéint sinn, datt d'Portioun rIL-18 se benotzt (150 Dummeldéng /ml) ass vill méi héich wéi dat wat mer benotzt [27]. Desweideren, IL-1β gefördert Wanderung an Invasioun vun der gastric Kriibs Zellen kann duerch Matrixentgasung metalloproteinase-9 (MMP9) wéi aner searchers gemellt [52] mediated ginn. Mä, fir direkt an méi staark Beweiser an den entspriechende Mechanismen iwwer d'Verbindung tëscht NLRP3 inflammasome Aktivéierung ausgeléist duerch M.hy, VerfÜgung an gastric Kriibs Metastasen, entspriechend Déier Modeller wéi den zu VIVO Zell Kultur VerfÜgung THP-1 Zellen, PMA-entschlof macrophages an gastric Kriibs Zell MGC-803 huet an RPMI 1640 mëttelfristeg mat essentiel Olivier Martinez haten. Mënsch monocytes huet isoléiert vun Percol TM Dicht-packt centrifugation (GE Gesondheetswiesen, Bio-Wëssenschaften, Schweden) vu Mënsch Randerscheinung Blutt mononuclear Zellen (PBMCs) kritt vu Shanghai Blood Center (Shanghai, China). VerfÜgung M.hy VerfÜgung Klischee an Hinnen alleguer Detektioun VerfÜgung M.hy VerfÜgung Klischee vun eiser Etude benotzt gouf vum knaschtege Zell Kultur kritt. Mycoplasm erkennen gouf duerch zwou Ronnen vun Hinnen alleguer mat Zell Kultur mëttelfristeg duerchgefouert [54]: Éischt, lafen Hinnen alleguer mat véier primers 5'-ACACCATGGGAGYTGGTAAT-3 ", 5'-CTTCWTCGACTTYCAGACCCAAGGCAT-3", 5'-AAAGTGGGCAATACCCAC GC-3 ", 5'-TCACGCTTAGATGCTTTCAGCG-3 "mat Zell cultured mëttelfristeg als Skelett. Zweet, huelt 1 μl vun den uewe Hinnen alleguer Produit als Skelett a lafen Hinnen alleguer mat dräi primers 5'-GTGSGGMTGGATCACCTCCT-3 ", 5'-GCATCCACCAWAWACY CTTT-3", 5'-CCACTGTGTGCCCTTTGTTCCT-3 ". Den éischten an zweete Hinnen alleguer leeft ënnert dem selwechten Zyklus Zoustand. Dunn Nepgen mir de Hinnen alleguer Produit an kritt de folgende Message: ACTCTTACTTAATTTAAAAGTTAATACAACTTTAATATT GCCTATTATTGCTAAAGATAAATATCTTAAGGTATTTTAATATTGGTAATCTATTTTAGAAATTTAATTTAAAAATTAAACTCGGTTATAAAAAAGATCGTTGAAATAATAAATATGAAGTTAATCATATTGTTATTTGCTATTCAGTTTTCAAAGAACTATAATTGAGAACTTAAAGCTCTCAAAACTAGACACGAATCGATTATGTAATAAGTCAATTAAGACTAACGGAAAGCGGAAAAAGAAGGTGATCCGTCCCCACG. Vum Héichuewen zu NCBI Datebank, dèi mir d'Informatioun, datt de mycoplasma ass M.hy VerfÜgung. Et kann SK76, GDL-1 oder MCLD Deformatioun ginn. VerfÜgung M.hy VerfÜgung Kultur, DNA erauszéien a MLAMP Virbereedunge VerfÜgung M.hy VerfÜgung war Territoire vun geännert SP-4 mëttelfristeg 20% nei-gebuer Bovine serum, 10% Happ ofzebauen, 1% Zocker, 0,00024% phenolsulfonphthalein, an 1000 IU /ml penicillin mat. DNA Reduktioun vun M.hy VerfÜgung gehaal huet no der Taktik mat der gëtt reagents vun Shanghai Lifefeng Déi Co., Ltd. M.hy VerfÜgung war den Faarf änneren Eenheeten (CCU) laachen pro Milliliter ëmschriwwen [55]. D'Reduktioun vun MLAMP war virdrun ëmschriwwen duerchgefouert [34]. VerfÜgung Real-Zäit Hinnen alleguer VerfÜgung NLRP3 an IL-1β mRNA Ausdrock vun Chemeschen real-Zäit Hinnen alleguer alles goufen. Relativer quantification vun Genen huet normalized géint eng endogenous Kontroll β-actin via Formule [2 Elisa VerfÜgung Supernatants aus cultured Zellen, Maus serum an Flesseggassystem peritoneal lavage Maus fir cytokines IL-1β analyséiert goufen, IL-18, IL-6 oder IL-8 secretion vun Elisa (BD Biosciences) no der Taktik vum Produzent. VerfÜgung Generatioun vun THP-1 BTS shRNAs gezielt Genen vun Scholdzënsen VerfÜgung shRNA vectors géint Mënscherechter NLRP3, caspase-1 an ASC ausdrécken, an hir Alaister vectors sinn Spende vum Dr. Jürg Tschopp [56]. Iwwer d'Generatioun vun THP-1 Zellen ausdrécken shRNAs, kuerz, NG GATGCGGAAGCTCTTCAGTTTCA vum Mënsch ASC coding Haaptrei, NG CAGGTTTGACTATCTGTTCT vum Mënsch NLRP3 coding Haaptrei, NG GTGAAGAGATCCTTCTGTA vun den 3 'UTR vum Mënsch caspase-1 waren an pSUPER gesaat.
Aféierung VerfÜgung
Resultater VerfÜgung
entschlof IL-1β secretion duerch inflammasome Aktivéierung, mir primed éischt geheescht LPe THP-1 ofgeleet macrophages wann ze kucken M.hy VerfÜgung inflammasome wëll ATP oder MSU aktivéieren kann, wat inflammasome activators bekannt sinn. Well dës Distanz an Dorënner 3A, M VerfÜgung .hy VerfÜgung konnt IL-1β release vun der primed Zellen ze induce. Next iwwerpréift mir de Rëss vun caspase-1 an oligomerization vun ASC, zwee wichteg Approchen fir d'inflammasome Aktivéierung. Mir hu fonnt, datt M.hy VerfÜgung der Rëss vun caspase-1 Opstieg an oligomerization vun ASC (Dorënner 3B), en direkten Aktivatioun vun inflammasome besot vun M.hy.
Diskussioun VerfÜgung
entholl Invasioun assay [53] an Patient Studien sinn fir weider studéieren an Zukunft gebraucht. VerfÜgung spontan a Methode VerfÜgung
DNA Metabarkodéierung kéint d'Analyse vun der mënschlecher Ernährung verbesseren
Länner mat eelere Populatiounen hu méi héich SARS-CoV-2 Infektiounen an Doudesfäll,
Genetik kann d'Kompositioun vum Mikrobiom méi beaflossen wéi Ëmweltfaktoren
Erstellt eng kierperlech a genetesch Kaart vu Cannabis sativa
Typ 1 Diabetis verbonne mat Darmmikrobiom a genetesche Faktoren
Darmmikroben a Wasps hëllefen Pestiziden ze iwwerwannen
Botzprodukter kënnen de Risiko fir Asthma vun der Kandheet fanne fënnt Studie
Laut enger neier Etude vu Fuerscher vun der Simon Fraser Universitys Faculty of Health Sciences (SFU), Belaaschtung fir Haushaltsreinigungsprodukter als Puppelcher kéint de Risiko fir Asthma bei Kanne
Kanner sinn immun virbereet op SARS-CoV-2
Op dmannst 30 nei Krankheeten sinn an de leschten 20 Joer opgetaucht a bedrohen elo zesummen dGesondheet vun Honnerte vu Millioune Leit. Fir vill vun dëse Krankheeten, et gëtt keng Behandlung, geheelt
Haushënn onwahrscheinlech SARS-CoV-2 ze iwwerdroen,
soen dFuerscher Fuerscher a Spuenien an Däitschland hunn eng Studie gemaach déi weist datt Haushënn onwahrscheinlech zu der Iwwerdroung a Gemeinschaftsverbreedung vu schwéiere akuten Otemschwieregkeet