Финансирование:. Это исследование была частично поддержана проектом, финансируемого Priority академического развития программы (PAPD) Цзянсу высших учебных заведений (http://jsycw.ec.js.edu.cn); Национальный фонд естественных наук Китая (30930080 и 81110027) (http://www.nsfc.gov.cn); Фонд рака центра Нанкин медицинского университета (08ZLKF08) (http://202.195.178.127/zlsys). Доноры не играет никакой роли в дизайн исследования, сбора и анализа данных, решение о публикации или подготовки рукописи
<р> Конкурирующие интересы:.. Авторы заявили, что не существует никаких конкурирующих интересов
Введение Пациенты и Образцы Строительство тканей Microarray (ТМА) и иммуногистохимии Во-первых, окрашивание р53 в ткани оценивали независимо друг от друга двумя патологи ослепленных к клиническим данным, применяя полуколичественный счет иммунореактивности (IRS) в учебной группе. Критерии для IRS скоринг были представлены в другом месте [23]. Интенсивность иммунное окрашивание было показано на рис. S2. Согласованность для окрашивания IRS счет р53 между двумя патологоанатомов было 74 (90%) в 82 опухолях обучающей выборки; и несколько несоответствий были решены на основе консенсуса с использованием мультиголовочный микроскопа. Изменчивость в окраске р53 4 (5%) в дублированных ядрах 82 опухолей. Эти случаи окрашивались целого слайд IHC и далее набрал связь между экспрессией р53 и клиникопатологическими параметров оценивали с помощью точного критерия Фишера. Дифференциальная экспрессия р53 в первичных опухолях и их соответствующих не опухолей оценивали с помощью теста Уилкоксона (сгруппированных) и корреляции Спирмена ранга порядка (сырье баллов). Корреляция между экспрессией р53 и JWA был создан Спирмена корреляции ранга порядка (сырье баллов) и точный критерий Фишера (сгруппированных). Вероятность различий в ОС, как функцию времени было установлено путем использования метода Каплана-Мейера, с лог-рангового для значения. Одномерный или многомерный регрессионный анализ Кокса проводили для оценки соотношения сырой опасности (ч), скорректированная подголовников и их 95% доверительный интервал (ДИ), с поправкой на вмешивающиеся факторы. Затем мы проанализировали прогностическое значение параметров с использованием зависимого от времени анализа кривых ROC для цензурированных данных и рассчитанную АУК кривых РПЦ. Мы оценивали выступления различных оценок путем построения графика (т, АУК [т]) при различных значениях последующего времени (т). Все статистические анализы были выполнены с помощью программного обеспечения статистической системы анализа (версия 9.1.3; SAS Institute, Cary, NC), STATA статистического программного обеспечения (версия 10.1; StataCorp, College Station, TX) и R программного обеспечения (версия 2.10.1; R Фонд статистических расчетов). Р-значение &л; 0,05 считали статистически значимым Повышенная экспрессия р53 в рака желудка в сравнении с нормальной Тканей Корреляция между p53 экспрессии и клинико-патологическими особенности у больных с только хирургическим лечением во всех трех когорт мы показали, что экспрессия p53 в раковых тканях достоверно коррелирует с метастазов в лимфатических узлах (N-категории). Повышенная экспрессия р53 была тесно связана с более высокой стадии TNM в обучении и тестировании когорты, но без значения в когорте валидации. Кроме того, увеличение экспрессии р53 была особенно связана с другими клинико-патологическими характеристиками, такими, как глубина инвазии (T-категории), отдаленными метастазами (М-категория), диаметр опухоли и гистологического типа в соответствующей группе. Интересно, что у всех пациентов, получавших лечение только хирургическим лечением (п = 817), мы обнаружили большее количество пациентов кишечного типа показали низкий уровень при большее число пациентов диффузного типа показали высокий уровень экспрессии p53 ( P
<р> рак желудка поражает около одного миллиона человек в год, являясь второй ведущей причиной рака, связанных с смертности во всем мире с общей выживаемости пять лет менее чем на 30% [1]. Неблагоприятный исход остается практически неизменным на протяжении последних десятилетий, несмотря на улучшение хирургического, химио- и лучевой терапии [2]. Поразительные различия в прогнозе среди пациентов после стандартной операции существуют, с указанием конкретных биомаркеров срочно необходимы [3]. Кроме того, отбор пациентов, которые выиграют от химиотерапии является серьезной проблемой, как большая фракция unnessesarily обрабатывают и только получить серьезные побочные эффекты [4]. Таким образом, эффективные молекулярные маркеры срочно необходимы, чтобы избежать чрезмерной или undertreatment.
<Р> Белок р53 (кодируемый геном человека TP53
), возможно, является самым известным из всех супрессоров опухолей, и характеризуется способностью индуцировать остановку клеточного цикла, репарации ДНК, физиологическое старение и апоптоз [5]. Мутации или функциональная инактивация р53 является почти универсальной чертой человеческого рака, играет решающую роль в онкогенеза, поскольку мутантного р53 может приобретать новые онкогенными свойствами [6] - [9]. Кроме того, в отличие от белка р53 дикого типа, который быстро разлагается, мутантные формы имеют длительный период полураспада, которые способствуют внутриядерный хранение, став обнаружить иммуногистохимии [10] - [12]. Накопление белка p53 в случае рака желудка был связан с прогнозом и прогнозирования лечения [13], [14]. Тем не менее, связанный с ним роль и механизм до сих пор остаются спорными [15], [16].
<Р> Наши недавние находки замешан, что JWA, также известный как ARL6ip5, аналогично с р53 в некоторых аспектах, имеет важное значение для выживания клеток и эффективно репарации ДНК после того, как окислительных повреждений ДНК, а также химически индуцированных клеток рака апоптозу [17], [18]. Кроме того, JWA и XRCC1, другой ДНК ремонт белок, может быть кандидатом прогностическим и прогностические биомаркеры для больных раком желудка [19]. Кроме того, ОНП из JWA
гена связаны с повышенной предрасположенностью к карциноме желудка в китайской популяции [20]. Таким образом, мы значительно заинтересованы, если JWA будет работать как Кооператор с р53 для улучшения предсказательной потенции при раке желудка.
<Р> Здесь мы стремились выяснить поступательную значимость и идентифицировать паттерны экспрессии p53 в трех крупных независимых когорт от больных раком желудка и изучить возможную прогностическую и прогностическую роль этого маркера. Более интригующе, гипотеза будет подтверждена ли P53 и JWA могут быть объединены в качестве нового предиктора с большей точностью при оценке выживаемости.
Материалы и методы
<р> исследовались три независимые ретроспективные когорты пациентов. Обучение и тестирование когорты Когорта были собраны в больнице Наньтун рака, Наньтун города, в восточной части провинции Цзянсу и когорта проверки был принят на работу в Исин Народной больницы, Исин города, в южной части провинции Цзянсу, Китай. Ткани были получены из соответствующих патологии подразделений. Критерии включения карциномы желудка лечение с радикальной гастрэктомии с или без адъювантной химиотерапии. Критерии исключения: пациенты с предыдущим раком желудка или активной не рак желудка. Кроме того, те, кто получил предоперационной химио- или лучевой терапии, были исключены. Письменное информированное согласие было получено от каждого пациента до приобретения ткани и перед операцией была проведена. Институциональное утверждение было приобретено у Ethical совета по рассмотрению Нанкин медицинского университета до этого исследования.
У пациентов, получавших только хирургическое лечение
<р> Обучение когорта включены 103 пациентов, которые только подверглись радикальной резекции желудка в онкологическом госпитале Наньтун от 1 го мая 1990 года по 1 ул июня 1995 года Тем не менее, 20 образцов были опущены из-за отсутствия данных был потерян и один образец во время получения антигена или без опухолевых клеток, присутствующих в ядре, так что 82 спаренных ткани пациента были наконец, оценивали на экспрессию р53.
<р> когорта тестирование состояло из всех 640 хирургических случаев из больницы Наньтун рака от 1 го декабря 2000 г. 1 го апреля 2005 года и когорта проверки включены все 1022 хирургический случаи в Исин народной больнице от 1 го января 1999 года по 31 го декабря 2006 г. Эти пациенты получали только или с послеоперационной адъювантной химиотерапии хирургии (подробнее см. S1). Распределение демографических характеристик и выбранные клиникопатологическими переменные пациентов между двумя районами (Наньтун и Исин) были описаны ранее [19]. Из-за отсутствия данных выживаемости, 998 из этих пациентов были включены только 578 и. Кроме того, из-за потери ядер или недостаточной опухолевых клеток в ткани, 485 и 588 опухолевые ядра анализировали на экспрессию р53 в когорте тестирования и проверки, соответственно.
пациентов, получавших лечение с адъювантной химиотерапией
<р> В учебной группе, ни один из пациентов не получали какой-либо форме адъювантной терапии. Из 485 пациентов, используемых для анализа в когорте тестирования, 111 пациентов (22,9%) были обработаны с адъювантной химиотерапии после лечебной резекции. В схемы включены комбинированной химиотерапии с фторурацилом, лейковорин и оксалиплатин (FLO) (6 случаев); монотерапия с митомицином С (46 случаев); производные фторурацил (47 случаев); и другие методы лечения (12 случаев). Из 588 пациентов в группе проверки, режим для 223 пациентов (37,9%) больных с послеоперационной химиотерапии включали комбинированной химиотерапии с FLO (87 случаев); комбинированная химиотерапия с фторурацилом, лейковорином и Platinol (ФЛП) (79 случаев); комбинированной химиотерапии с фторурацилом и паклитаксела (FP) (11 случаев); комбинированная химиотерапия с этопозид, лейковорин, фторурацил и Platinol (ELFP) (28 случаев); и других видов лечения (18cases). Что касается резектабельных больных раком желудка с химиотерапией, распределения демографических характеристик и выбранные клиникопатологическими переменные пациентов между FLO группой и группой FLP были сходными (все P
> 0,05), за исключением того, гистологического типа ( P
= .001, таблица S1). Кроме того, 7 патологически подтвержденным раком желудка и соответствующих нераковых свежезамороженной желудка тканей слизистой оболочки из недавних пациентов в онкологическом госпитале Наньтун были получены для Вестерн-блот-анализа.
<Р> Общая выживаемость (OS) была первичной конечной точкой этот анализ. Выживание время было установлено, с момента операции до даты смерти или до последнего наблюдения. Дата смерти для каждого случая была получена из записей пациентов или семей пациентов на основе последующих телефонных звонков и далее дважды проверяется местным отделом по гражданским делам и отдела общественной безопасности. Подробное клинико-патологический информация была получена. Критерии Лорен были использованы для классификации опухолей в текущем кишечного типа или диффузного типа [21] и постановочных в соответствии с опухолью, Node, метастаз (TNM) руководящих принципов [22].
<р> Парафиновые материал архивную ткани опухоли и окружающих нормальных тканей желудка использовали для строительства ТМА. ТМА были получены, как ранее опубликована [19]. Короче говоря, дублируют 1,0 мм сердечники диаметром ткани от каждого образца штамповали из парафинового блока опухоли и соответствующих неопухолевые тканей в учебной группе или из ядер первичных биопсий опухолей по проведению испытаний и проверки когорт. В качестве контрольной ткани, биопсии нормальных тканей желудка эпителия были вставлены в четырех углах и в центре каждого слайда.
<Р> Стандартный протокол был использован для иммунным окрашиванием ТМА. Подробный процесс был описан ранее [19]. IHC проводили с использованием DO7 моноклональных антител (1:80; Dako, Carpinteria, CA), который обнаруживает дикого типа и мутантные формы р53-белка, вместе с супер наборы HRP Elivision ™ (Maixin-Био, Фуцзянь, Китай) , применяя различные методы обнаружения и извлечения антигена. Упущение первичного антитела служили в качестве отрицательного контроля. Окрашивание десятки контрольных тканей в каждом микрочипов слайде были предварительно оценены в качестве контроля качества иммунным.
Оценка иммуногистохимии
. <Р> Оптимальное значение отсечки IRS получают приемно-оператора характеристики (ROC) анализа, а площадь под кривой (AUC) при различных значениях среза р53 IRS в течение 1, 3 и 5 лет общей продолжительности жизни была рассчитана. Оптимальное значение обрезания точек р53 IRS в Наньтун района когорты (комбинированной когорте обучения и тестирования когорты) был 4 из-за прогностическое значение этой точки отсечки для смерти был лучшим (рис. S3). В этих условиях, образцы с IRS и IRS 0-4 5-12 был классифицирован как низкий и высокий уровень экспрессии р53 в опухолях, соответственно. После установления иммуногистохимических критериев оценки в районную когорте Наньтун, экспрессия р53 в районной когорте Исин (валидация когорты) был забит одними и теми же патологоанатомов с точно такой же процедурой.
вестерн-блоттинга
<р> Вестерн-блоттинг проводили, как описано ранее [19]. Мышиные моноклональные анти-р53-антитела (1:1000, Dako, Carpinteria, CA), так и моноклональные анти-мышь β-актин антитела (1:2000; Beyotime биотехнологии, Наньтун, Китай), были использованы для первичного антитела. Иммунореактивного полосы были обнаружены с помощью набора для обнаружения блот Phototope-HRP Западной (Cell Signaling Technology Inc, Беверли, штат Массачусетс, США). Для денситометрическом анализа белка p53 полосы на помарки были измерены с помощью изображения J программного обеспечения (версия 1.44, Уэйн Расбанд, Национальные институты здравоохранения, США), после нормализации к соответствующему бета-актина уровне.
Статистический анализ
Результаты
<р> Семь пар образцов желудочного рака человека. , в том числе первичные желудочных раковых тканей и в норме у слизистую оболочку желудка, были отобраны для тестирования экспрессии белка р53 с помощью Вестерн-блоттинга. Повышенная экспрессия р53 наблюдались у 6 из 7 опухолей желудка по сравнению с сопряженным нормальной слизистой оболочки желудка (рис. 1А). Иммуногистохимическое окрашивание микрочипов желудка ткани (TMA) использовали для дальнейшего подтверждения экспрессии р53 в 82 больных раком желудка в обучающем когорте. Было показано, что p53 окрашивания в основном локализуется в ядрах (рис. 1В). Распределение разностей IRS для экспрессии p53 в опухолях и совпадающим, не являющимися опухолей была показана на рис. 1С. Кроме того, экспрессия р53 была значительно увеличена в 65 из 82 (79,2%) от рака желудка по сравнению с совпадающими нормальными желудочных тканей ( P
&л; .001, Уилкоксона тест; рис. 1в). Во всех трех независимых когорт пациентов, получавших лечение только с хирургическим вмешательством только, экспрессия р53 отрицательно коррелировала с JWA в раковых тканях ( P
&л; 0,001 для всех корреляций, таблица 1).
&л; .001, данные не показаны ). Экспрессия р53 не было никакой корреляции с возрастом и полом (Таблица 1).
Соотношение p53 экспрессии и ОС у пациентов, получавших только хирургическое лечение
<р> В учебной группе, 82 первичных образцов опухолей подходит для анализ показал статистически значимую отрицательную корреляцию между экспрессией р53 и общей 5-летней выживаемости с помощью кривых выживаемости Каплана-Мейера ( P
&л; 0,001). Эти результаты были подтверждены в двух независимых и больших когорт больных раком желудка с минимальными пять лет наблюдения (п = 374 и п = 365, соответственно) (рис. 2A-C). Другие существенные отрицательные предикторы для выживания путем однофакторного анализа в трех независимых когорт были узла метастаз лимфатический (N-категория, P
&л; .01 для всех, Таблица S2) и клинической стадии TNM ( P
≤.001 для всех, Таблица S2).
<р> многофакторный Cox регрессионный анализ показал, что низкий уровень экспрессии p53 был независимым положительным прогностическим фактором развития рака желудка во всех трех когорт ( P &
л; .001 для всех, таблица 2). Для дальнейшей оценки прогностическое значение экспрессии р53, мы провели анализ ROC зависящих от времени для цензурированных данных, которые показали, что сочетание клинических показателей риска (стадии TNM, гистологического типа и диаметра опухоли) и р53 вклад гораздо больше, чем только клинических параметров как в обучении и тестировании когорт (рис. 3). Например, в группе тестирования, АУК на 5 лет был 0,707 (95% ДИ = 0.653-0.761) для клинического балла риска, в то время как она была значительно увеличена до 0,856 (95% CI = 0.818-0.894) в сочетании с риском р53 Гол. Тем не менее, этот эффект не был значительным в когорте проверки в связи с относительно высокой AUC (около 0,8) клинических предикторов (рис. S4).
Корреляция между p53 экспрессии и ОС у больных с адъювантной химиотерапией
<р> При проверке и валидации когорт, ОС была проанализирована между пациентами, которые получали адъювантной химиотерапии по сравнению с теми, кто не сделал. Данные не показали никакой разницы в OS между хирургии только группы и любой схемы послеоперационной адъювантной химиотерапии (данные не показаны), кроме как в группе, получавшей fluorouracil- Лейковорин-оксалиплатина (FLO) (п = 87, лог-ранговый тест, P <бр> = 0,032, рис. 4). Многофакторный Cox регрессионный анализ, включая шесть переменных (возраст, пол, стадии TNM, гистологических типов, диаметр опухоли и химиотерапия) была проведена, чтобы показать преимущество химиотерапии на ОС. Был статистически значимое преимущество для тех, кто получил FLO химиотерапии после операции по хирургии одной только группе (ОР = 0,55; 95% ДИ = 0.37-0.82, данные не показаны). Следует отметить, что этот эффект был найден только у больных с высоким уровнем экспрессии р53, где адъювант FLO явно увеличилась ОС по сравнению с только хирургическим лечением (HR = 0,56; 95% ДИ = 0.35-0.89, таблица S3, лог-ранговый, P <бр> = 0,014, рис. 4).
<р> Мы также проанализировали значимость другой химиотерапии на основе платины, фторурацил-лейковорин-Platinol (ФЛП) режима (п = 79) в резектабельного рака желудка. Результаты не представляют существенной разницы в выживаемости (лог-ранговый тест, P
= 0,134, рис. S5), в то время как пациенты с низкой экспрессии p53, получающих ФЛП режим даже продемонстрировали худшую выживаемость по сравнению с получавшими хирургии только ( P
= 0,003, рис. S5). Кроме того, пациенты, проходящие лечение ФЛП с выражением высокой p53 не имели значительное несоответствие выживаемости по сравнению с теми, с только хирургическим лечением ( P
= 0,648, рис. S5). Далее многофакторный анализ выяснено, что более высокий риск смертности наблюдался у пациентов с низкой экспрессии p53, получающих лечение ФЛП по сравнению с хирургическим вмешательством только (HR = 1,91, 95% ДИ = 1,08 до 3,36, Таблица S4).
Синергетический эффект p53 с JWA выражением на ОС у пациентов, получавших только хирургии или адъювантной химиотерапии
<р> У больных с только хирургическим лечением были дополнительно разделены на три группы на основе окрашивания для р53 и JWA: p53 высокие с JWA низким, р53 низко с JWA высоко и как высоко или как низко. Было показано, что у пациентов с p53 низкой и высокой JWA имели лучший результат выживания в этих трех группах ( P
&л; .001, лог-ранговый тест;. Рис 2D-F). Многомерный Кокс регрессионный анализ показал, что комбинированное выражение низкой р53 и высокой JWA был независимый положительный прогностическим фактором рака желудка во всех трех когорт ( P
≪ +0,001 для всех, таблица 2). Для дальнейшей оценки прогностического значения р53 плюс выражения JWA мы провели еще один зависящий от времени анализ РПЦ, в котором указано, что сочетание клинического риска забить и р53 плюс JWA вклад больше, чем сотрудничество клинических показателей риска только с р53 в обоих обучение и тестирование когорты (рис. 3). Например, в учебной группе, АУК на 5 лет был 0,568 (95% ДИ = 0.400-0.737) для клинического балла риска плюс оценка риска р53, в то время как она была значительно увеличена до 0,865 (95% ДИ = 0.786-0.944), когда использовали сочетание клинических показателей риска с р53 плюс шкале риска JWA. Тем не менее, этот эффект был опять-таки не ясно, в когорте проверки в связи с упомянутой выше причине (рис. S4).
<Р> На основании вклада уровень экспрессии p53 в результатах химиотерапии, мы расслаивается таких пациентов в координации с JWA, как следующим образом: FLO группа лечения с высоким уровнем экспрессии p53 был разделен на максимуме с p53 JWA низким и р53 высоко с JWA высокой; и ФЛП лечение группы с выражением низкой р53 была также классифицирована в p53 с низким JWA низким и низким р53 с JWA высокой. OS была переоценена между этими подгруппами. Тем не менее, не очевидно, неравенство в выживаемости не была представлена в синергетической модели с JWA (рис. S6).
Обсуждение
<р> Рак желудка является гетерогенным заболеванием, где результат зависит даже у пациентов со сходными клиническими и патологическими функции. Даже с хирургическим вмешательством на ранних стадиях, то прогноз может быть мрачными, и адъювантной химиотерапии эффективен только в подгруппах пациентов. Новые молекулярные маркеры нужны как традиционные системы стадирования рака желудка недостаточно для прогнозирования результатов [24]. В данном исследовании мы записали и показали, что высокая экспрессия р53 была достоверно коррелирует с неблагоприятными клиникопатологическими параметров и снижение общей выживаемости пациентов. Кроме того, у пациентов с высокой экспрессии р53 в опухолях приобрела замечательную выгоду выживания от адъювантной первой линии химиотерапии на основе платины (FLO или ФЛП). Синергизм между p53 и JWA в прогнозировании исхода пациента была продемонстрирована, в то время как не наблюдалось никакой очевидной повышенной прогностическую ценность в отношении химиотерапии.
<Р> В настоящем исследовании мы обнаружили, очевидно, повышенная экспрессия белка р53 в опухолевых тканях желудка по сравнению с нормальным соответствием слизистую оболочку, что свидетельствует о потенциально важный статус р53 в желудочном канцерогенезе. Как сообщается, ген p53
мутирует почти 50% всех опухолей человека, включая рак желудка [25] и мутантного белка остается в клетках в течение более длительного времени, что позволяет обнаружение с помощью иммуногистохимии [26], [27 ]. Поэтому, как правило, признается, что положительное окрашивание, главным образом, представляет собой мутантные формы р53, тогда как белок р53 дикого типа разлагается быстрее, и появляется слабое или отрицательное окрашивание [10], [26]. Наши данные согласуются с исследованиями других исследователей, которые показали, что положительное выражение p53 было связано с неблагоприятными клиникопатологическими характеристиками и плохим прогнозом у больных раком желудка, перенесших целебное гастрэктомию [28] - [30]. Стоит отметить, что некоторые различия в клиникопатологическими особенности существуют между Наньтун и Исин когорт. Так как Наньтун больницы Рак является рак специальная больница в то время как Исин Народная больница носит комплексный характер, пациенты в первые часто находятся на более продвинутой стадии по сравнению с последним. Соответственно, пациенты в Наньтун когорты показали худшие характеристики клинико. Кроме того, P53 и экспрессии JWA были обнаружены только в этих тканях, но не в крови или сыворотке у больных раком желудка, из-за их не секретируемые белки. Интересно, что предыдущее исследование показало сильную корреляцию между высоким p53 аутоантител в сыворотке желудка больных аденокарциномы и плохим прогнозом, метастазов в лимфатических узлах и низкой дифференцировки [31]. Кроме того, было показано, что экспрессия р53 в опухолевых тканях желудка, коррелированных с сывороточных антител р53 [32]. У нас не было сывороток, собранных для подобного анализа, но это было бы очень интересно, как анализ крови проще и, вероятно, более воспроизводимым, чем immonohistochemistry. Что касается JWA, исследование сыворотки еще находится на рассмотрении и должна быть продемонстрирована в будущем.
<Р> Увлекательный и важный вопрос привлечения нас больше всего, почему бы высокий уровень экспрессии p53 игры точно противоположные роли на прогностической и прогнозного эффекта. Это явление может быть связано с различными формами р53 и их различных свойств в биологии рака и резистентности к лечению. Широко известно, мутантные белки р53 экспрессируется на высоком уровне во многих видов рака и способствовать злокачественной трансформации, пролиферации и метастазированию частично основано на ингибировании p53 дикого типа, а также другие члены семейства р53 [6], [33]. Мыши модели подшипников постучать в мутации р53 показало, что мутантные белки р53 могут управлять образования опухоли, инвазию и метастазирование посредством доминирующего отрицательного ингибирования р53 дикого типа наряду с усилением его функции, или «neomorphic» деятельности, которые могут ингибировать или активировать функцию других белков [34], [35]. Точно так же в нашем исследовании, высокий уровень экспрессии p53 в опухоли желудка коррелировало с метастазов в лимфатических узлах, более высокой стадии TNM и других неблагоприятных клиникопатологическими функций, что приводит к более агрессивным фенотипом с плохим прогнозом при отсутствии лечения. В противоположность этому, положительное прогнозируемое воздействие высокой экспрессии р53 на выживаемость в обеих платиной лечение пациентов может указывать на двойную роль р53 в химио- сопротивления. В настоящее время основным препятствием на платиновой химиотерапии является ремонт платины поврежденной ДНК, что приводит к увеличению сопротивления, снижение апоптоза, и, наконец, неудачи лечения. P53 дикого типа может частично играть такую роль в этом процессе посредством остановки клеточного цикла и следующий ремонт повреждений, вызванных химическими агентами [36] - [39]. И наоборот, мутантные белки р53 не могут функционировать в ДНК репарации повреждений, как их дикого типа коллегой, где пациенты становятся более чувствительными к воздействию химических веществ [36], [40], [41]. Однако, детальный механизм мутантного р53 в лечении платины необходимо дальнейшее расследование. Следует отметить, что пациенты получили больше пользы выживания от FLO, чем от FLP, который может быть частично благодаря тому, что FLO снижает токсичность по сравнению с ФЛП, как отмечалось ранее [19].
<Р> JWA является типичным реакцией на стресс ген, а также опухолевый супрессор [18], [42]. В пробирке и в естественных условиях исследования подтвердили, что потеря JWA подавлено дифференцировки клеток и повышенную клеточную миграцию и метастазирование [42] - [44]. Наши последние результаты проявляются низкую экспрессию JWA в опухолях желудка коррелировало с неблагоприятными клиникопатологическими показателей, но лучший исход химиотерапии [19]. В настоящем исследовании мы обнаружили, что JWA улучшила прогностическое значение p53, предполагая, что потеря JWA в сочетании с мутацией р53 может увеличить агрессивность опухоли и метастаз, которые, вероятно, потому, что JWA также является членом репарации ДНК пути и, возможно, играют взаимную роль в желудочном канцерогенезе. Интересно, что даже если оба маркера отдельно были предсказанием для обработки платины, сочетание не улучшает прогностическую ценность, но этот результат мешает небольшой группе пациентов в подгруппах. Большее число пациентов, получающих на основе платины режимов химиотерапии должна быть включена в нашем будущем исследования для дальнейшей проверки наших результатов. Кроме того, существует прямой регулирующий эффект не был продемонстрирован между р53 и JWA (данные не показаны), возможно, они действуют в различных путей ремонта [17], [18], [45] - [48] и косвенная связь существует между ними в определенных ситуациях. Кроме того, P53 и JWA могут синергетически регулировать одни и те же молекулы или сигнальные пути, которые должен быть выяснена в дальнейших исследованиях
<р> В заключение. Мы показали общую величину опухолевого р53 с JWA в качестве эффективных прогностических факторов в первый раз , в меру наших знаний. Несмотря на определенное совместное действие этих двух белков еще предстоит доказать, что может обеспечить потенциальные предикторы для адъювантной химиотерапии с режимом на основе платины.
подтверждающей информации, рис S1
.
Consort схема для исследования тканей микрочипов
DOI:. 10,1371 /journal.pone.0052348.s001
(TIF) Рисунок S2
.
Типичные изображения p53 иммуногистохимического окрашивания при раке желудка человека. А, отрицательное окрашивание; B, слабое положительное окрашивание; C, умеренное положительное окрашивание; D, сильное положительное окрашивание (А-D: Шкалы, 25 мкм)
DOI:. 10,1371 /journal.pone.0052348.s002
(TIF) Рисунок S3
.
ROC кривые, изображающие зависимость между площадью под кривой (AUC) при различных значениях среза Р53 иммунореактивности балла (IRS) в течение 1, 3 и 5 лет общей продолжительности жизни
DOI: 10.1371. /journal.pone. 0052348.s003
(TIF) Рисунок S4
.
ROC анализы для клинических показателей риска, комбинированной p53 или p53 плюс JWA и клинических показателей риска в когорте проверки. AUC = площадь под кривой
DOI:. 10,1371 /journal.pone.0052348.s004
(TIF) Рисунок S5
. Кривые
Выживание в соответствии с р53 паттерна экспрессии в когорте проверки обрабатывали или без ФЛП. значения P
были вычислены с помощью теста лог-ранга. Примечание: S, только хирургическое лечение; . ФЛП, фторурацил-лейковорин-Platinol
DOI: 10.1371 /journal.pone.0052348.s005
(TIF) Рис
S6.
Кривые выживаемости изображающие синергетический эффект p53 /паттерна экспрессии JWA в проверке когорте приемном адъювантной химиотерапии. значения P
были вычислены с помощью теста лог-ранга. Примечание: S, только хирургическое лечение; FLO, fluorouracil- Лейковорин-оксалиплатин; ФЛП, фторурацил-лейковорин-Platinol
DOI:. 10,1371 /journal.pone.0052348.s006
(TIF)
Таблица S1.
Распределение демографических и клинико-морфологических характеристик пациентов с или без химиотерапии
DOI: 10.1371. /journal.pone.0052348.s007
(DOC)
Таблица S2.
Этот пепто, вероятно, не поможет вашей язве
Качество сна может быть индикатором для более позднего исследования болезни Альцгеймера
Всегда ли гипертония приводит к тяжелой форме COVID-19?
Пищевые реакции регулируются микробиомом кишечника,
Ученые разрабатывают пептиды, которые восстанавливают баланс кишечных бактерий и предотвращают атеросклероз.
Исследование показывает противовирусные эффекты куркумина
Ограничения COVID-19 привели к 86-процентному снижению числа норовирусных инфекций в США,
находит исследование Начало пандемии COVID-19 привело к введению нескольких нефармацевтических вмешательств (НПИ) по всему миру. В то время как граждане США недовольны советом носить маски в обществен
Потеря кишечного эпителиального барьера, ответственного за MIS-C, связанный с COVID-19, у детей,
предлагает изучить Хотя коронавирусная болезнь 2019 (COVID-19) у детей встречается относительно редко и обычно протекает в легкой форме, некоторые, как известно, возвращались с редким, но серьезным, и
Пищеварительные проявления распространены, но незначительны среди госпитализированных пациентов с COVID-19
Команда из 121 исследователя из США и Канады сообщает, что, хотя пищеварительные проявления, похоже, обычны среди людей, госпитализированных с коронавирусной болезнью 2019 (COVID-19), большинство из н