PLoS One: Helicobacter pylori Elősegíti Epithelialis-mesenchymalis Átmenet a gyomorrák által mTOR gátlása miatt csökken a programozott sejthalál Protein 4 (PDCD4)

absztrakt katalógusa

Helicobacter pylori katalógusa, a Gram-negatív, mikroaerofil baktérium a gyomorban található, feltételezzük, hogy társítva karcinogenezis, invázió és metasztázis emésztési betegségek. Cytotoxin-asszociált gén A (CagA) egy onkogén protein H. pylori
által kódolt CAG patogenitási sziget fejlesztéséhez kapcsolódó gyomorrák. Az epithelialis-mesenchymalis átmenet (EMT) a fő biológiai eseményt invázió vagy metasztázis hámsejtek. H. pylori katalógusa elősegítheti EMT humán gyomor rákos sejtvonalak, de a konkrét mechanizmusok még homályos. Megvizsgáltuk a mögöttes molekuláris mechanizmusa EMT által kiváltott H. pylori
CagA gyomorrákban. Cikkünkben azt észleltük, gyomorrák példányok és a szomszédos, nem rákos mintákban immunhisztokémiai és megállapította megnövekedett expressziója az EMT kapcsolatos szabályozó fehérje TWIST1 és a mesenchymalis marker vimentint a rákos szövetekben, míg a programozott sejthalál faktor 4 (PDCD4) és az epithelialis marker E-cadherin csökkent a rákos mintákat. Ezek a változások kapcsolatban voltak mértékű szöveti rosszindulatú. Ezen túlmenően, PDCD4 és TWIST1 szintek összefügg. A gyomorrák sejtek kokultiváció CagA expressziós plazmid CagA aktivált TWIST1 és vimentin kifejezést és gátolja az E-cadherin által mTOR gátlása miatt csökken PDCD4. CagA is elősegítette mobilitását gyomorrák sejtek szabályozása által PDCD4. Így H. pylori katalógusa CagA indukált EMT gyomorrák sejtek, amely feltárja az új jelátviteli EMT gyomorrákban sejtvonalak. katalógusa

Citation: Yu H, J Zeng, Liang X. Wang W, Zhou Y, V Y, et al. (2014) Helicobacter pylori katalógusa Elősegíti Epithelialis-mesenchymalis Átmenet a gyomorrák által mTOR gátlása miatt csökken a programozott sejthalál Protein 4 (PDCD4). PLoS ONE 9 (8): e105306. doi: 10,1371 /journal.pone.0105306 katalógusa

Szerkesztő: Rajeev Samant, University of Alabama at Birmingham, Egyesült Államok katalógusa

Beérkezett: február 12, 2014; Elfogadva: július 21, 2014; Megjelent: augusztus 21, 2014 katalógusa

Copyright: © 2014 Yu et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Forrás: Ez a munka támogatta a Nemzeti Alap Research Program of China (no. 973 Program 2012CB911202), a Nemzeti Természettudományi Alapítvány Kína (nos: 81171536, 81371781, 81272654, 81372680 és 81170514), az Egészségügyi Tudományos és Technológiai Fejlesztési Program Shandong (nincs . 2013WS0209) és a Független innovációs Alapítvány Shandong Egyetem (sz. 2012TS106). A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa

Bevezető

Helicobacter pylori katalógusa ( H. pylori
) egy hélix alakú, Gram-negatív baktérium társított emésztőszervi betegségek, beleértve a krónikus gyomorhurut, gyomorfekély, gyomorrák, és nyálkahártya-asszociált limfoid szövet limfóma. H. pylori katalógusa került karcinogén az Egészségügyi Világszervezet és a Nemzetközi Ügynökség Rákkutató (WHO /IARC) 1994-ben [1], [2]. katalógusa

H. pylori katalógusa gének rendelkeznek cytotoxin-asszociált gén A (CagA) patogenitási sziget, amely kódolja a fő virulencia fehérje CagA és IV-es típusú szekréciós rendszer (T4SS). CagA szállítják, hogy a fogadó sejtek T4SS és indukálja a rák kialakulását és progresszióját [3]. H. pylori katalógusa is deregulációja sejtburjánzást, befolyásolja a normál apoptózis, befolyás sejtalak megszüntetnek junctionalis aktivitás és elősegíti egy hámsejt-to-mesenchymalis tranzíció (EMT) fenotípus után áthelyeződik a gazdasejt [4], [5]. A H. pylori katalógusa effektor fehérje CagA érinti a legtöbb ilyen utak. In vivo
kísérletek azt mutatták, hogy a transzgén expressziója CagA okozhat többszörös malignus egereken, ideértve a gyomornyálkahártya hiperplázia, myeloid leukémiát és a B-sejtes limfómák, vagy gyomor polipok és adenokarcinómák, a gyomor és a vékonybél [6]. A molekuláris mechanizmusa H. pylori katalógusa CagA egymásra a gazdasejt még nem tisztázott. katalógusa

Az EMT kezdetben elismert jellemzője embriogenezis, létfontosságú folyamat morfogenezisében az embrionális és a szív fejlődése. Azonban az is hozzájárul, hogy a szöveti fibrózis, tumor invázió és metasztázis. EMT jellemzi több elkülönülő tulajdonságok, mint például a veszteség a sejt adhézió, megnövekedett sejt mobilitás, ellenállás apoptózis, és néhány tulajdonságait őssejteket. Az EMT, epithelialis markerek, mint az E-cadherin megjelenítése csökkent expressziója és mesenchymalis markerek, mint a vimentin megjelenítése fokozott expressziója. Más szabályozó molekulák, mint a csiga, és csavarva SLUG mutatják változott kifejezés [7], [8], [9]. Onkogén utak, amelyek indukálják a EMT közé transzformáló növekedési faktor β (TGF-β), SRC, ETS Ras, Wnt /β-catenin, Notch, a nukleáris faktor-kB és az integrin [10], [11], [12].

fertőzés a humán patogén tényező H. pylori katalógusa feltételezzük vezet EMT, behatolása vagy áttétele a gyomorrák. Például túlszabályzását mátrixmetaiioproteináz 7 patogén H. pylori
részben attól függ, hogy a gasztrin, és lehet egy függvény a fejlesztés a gyomorrák, potenciálisan keresztül az EMT, által közvetve indukáló mellett a szolubilis heparinkötő endoteliális növekedési faktor [13]. H. pylori
CagA részt vesz invázió tumorsejtek által deregulációja c-met receptor jelátviteli [14]. Csakúgy, CagA növelheti az aktiválás a Wnt /β-catenin jelátviteli által megzavarja a stabilizációs a E-kadherin-β-catenin komplex. Így CagA létfontosságú szerepet játszik a fejlesztés intestinalis metaplasia [15]. Ezen túlmenően, microarray elemzés azt javasolta, hogy a foszforilációs állapotát CagA befolyásolhatja expresszióját EMT kapcsolatos gének a gyomorrák-sejtek [16]. Azonban keveset tudunk a mechanizmusokat, amelyek hátterében az EMT által indukált CagA. Katalógusa

A programozott sejthalál protein 4 (PDCD4) lokalizálódik a mag az osztódó sejtekben [17]. Ennek egyik fontos poszt-transzkripciós target mikroRNS (miR) miR-21, PDCD4 összefügg a tumor progresszió és a prognózis az emberi tüdő, vastagbél-, emlő- és gyomorrák [18], [19]. A tumor szuppresszor PDCD4 kötődhet eIF4A vagy eIF4G és gátolják fordítást. PDCD4 képes szabályozni a mitogén-aktivált protein-4-kináz 1 és az urokináz plazminogén aktivátor receptor (uPAR) expressziós hogy gátolják karcinóma invázió és intravasation [20], [21]. PDCD4 is befolyásolhatja a gének transzkripcióját. Kölcsönhatásban áll a DNS-kötő doménje TWIST1 és gátolja az Y-box kötő fehérje 1-expresszió [22]. Csakúgy, elvesztése PDCD4 kifejezés társul malignus transzformáció gyomorrákban [23], [24]. Downregulációját PDCD4 kapcsolódik a tumor differenciálódásának emésztőcsatorna rákok [25]. Azt azonban, hogy PDCD4 részt vesz az EMT által kiváltott CagA gyomorrákban és az adott mechanizmus még mindig szükség van további vizsgálatokat. Katalógusa

Itt feltártuk a szabályozás EMT-asszociált fehérjék és PDCD4 kifejezés a gyomor rákos szövetek és CagA aktiválása TWIST1 kifejezés és gátlása E-cadherin és PDCD4 kifejezés a gyomor rákos sejtekben. katalógusa

anyagok és módszerek katalógusa

a betegek és szövetminták katalógusa

a jóváhagyta a vizsgálatot az etikai Bizottságának Shandong Egyetem Orvostudományi és az összes mintát és információk begyűjtése írásos beleegyezését adta. Gyomor- tumorszövetmintákból illesztett nem rákos szöveteket gyűjtöttünk 30 beteg a műtét során a Qilu Kórház, Shandong Egyetem (Jinan, Kína) 2010-től 2012-ig sem a beteg kapott adjuváns kemoterápia vagy sugárkezelés a műtét előtt. Diagnózis a gyomorrák kialakulása volt szövettanilag is megerősítették hematoxilin-eozin festéssel. Katalógusa

Sejttenyésztés és transzfekció katalógusa

Az emberi gyomor rákos sejtvonalak (AGS, BGC-823, SGC-7901) kaptuk a Kínai Academia Sinica Cell Repository (Shanghai). A sejteket az ajánlott média és nedvesített atmoszférában, amely 5% CO _{2 37 ° C-antibiotikumok nélkül. SGC-7901 sejtek és BGC-823 sejteket tenyésztettünk RPMI 1640 tápközegben, amelyet 10% magzati borjúszérummal (FBS), és AGS sejteket F12 tápközegben, kiegészítve 10% FBS-sel. Média és FBS-t vásárolt Invitrogen (USA). Ezután sejteket tranziensen plazmidokkal transzfektált pCDNA3.1 vagy pCDNA3.1-CagA (ajándéka Dr. Yongliang Zhu, Zhejiang University, Kína) és pEGFP-C1 vagy pEGFP-C1-PDCD4 (épített, és feltéve, Dr. Youhai Chen , Perelman School of Medicine, University of Pennsylvania, Philadelphia, USA) segítségével az X-treme GENE HP transzfekciós reagens (Roche Diagnostics, Németország), a gyártó protokollja szerint. katalógusa}

RNS-izolálás, reverz transzkripció és qRT-PCR

Teljes RNS-t kivontuk a sejtekből használatával Trizol reagens (Invitrogen, USA). Reverz transzkripció részt a Superscript III First Strand Synthesis kit (Invitrogen). Gének expressziójának detektáltuk a kvantitatív valós idejű PCR SYBR Premix Ex Taq (Takara, Kína) és normalizálás részt a 2 ^{- △△ CT módszer viszonyítva p-aktin. Primer szekvenciákat a PDCD4, értelme, 5'-CAGTTGGTGGGCCAGTTTATTG-3 'és antiszensz, 5'-AGAAGCACGGTAGCCTTATCCA-3'; E-cadherin, értelme, 5'-AATCCAAAGCCTCAGGTCATAAACA-3 'és antiszensz, 5'-TTGGGTCGTTGTACTGAATGGTC-3'; CagA, értelme, 5'-CCGGGGTACCAATTGGAGAGCAGAACCG-3 'és antiszensz, 5'-CCGTCGAGTTAAGATTTTTGGAAACC-3'; és TWIST1, értelme, 5'-GGCATCACTATGGACTTTCTCTATT-3 'és antiszensz, 5'-GGCCAGTTTGATCCCAGTATT-3'; vimentin, értelme, 5'-CTCTTCCAAACTTTTCCTCCC-3 'és antiszensz, 5'-AGTTTCGTTGATAACCTGTCC-3'; Csiga, értelme, 5'-GGAAGCCTAACTACAGCGAGCT-3 'és antiszensz, 5'-TCCCAGATGAGCATTGGCA-3'; β-aktin, értelme, 5'-GTGGGGCGCCCCAGGCACCA-3 'és antiszensz, 5'-CTCCTTAATGTCACGCACGATTT-3'.}

Western-blot-analízis

Protein-t kivontuk a mintákat és SDS-PAGE- , majd PVDF membránokra vittük át (Millipore Corp., Billerica, MA, USA), amely blokkoltuk azonnal 5% -os zsírtalan tejjel TBST-ben, amely 1% Tween-20-on 1,5 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Miután mostuk foszfáttal pufferolt sóoldattal (PBS) 3-szor, membránokat elleni antitestek PDCD4 (1:500; Cell Signaling Technology, USA), TWIST1 (1:2000, Novus Biologicals, USA), csiga (1:1000 , Cell Signaling Technology, USA), a CagA (1:500, santa Cruz Biotechnology, santa Cruz, CA), E-cadherin (1:1000, Cell Signaling Technology, USA), a vimentin (1:1000, Cell Signaling Technology, USA ) és β-aktin (1:2000, Sigma-Aldrich, USA), mint a normalizálási kontroll, 4 ° C hőmérsékleten egy éjszakán, majd tormaperoxidázzal konjugált másodlagos antitestekkel szobahőmérsékleten 1 órán át. Miután egy mosás, immunreaktív sávokat láthatóvá fokozott kemilumineszcencia (Millipore Corp., Billerica, MA, USA). Western-blot vizsgálatot végeztünk 3-szor minden mintára. Protein vittük 20-50 ug sávonként.

Immunhisztokémia

paraffinba ágyazott szövet mintákat de-paraffinized xilollal dehidratáljuk egy fokozatos sorozat alkoholt. Antigén-visszanyerés hőkezeléssel végezzük 0,1 M citrát-puffer. És blokkolja az endogén peroxidáz aktivitást használt 3% H _{2 O 2. Ezután metszeteket elleni antitestekkel PDCD4 (1:200), Twist1 (1:500), vimentin (1:100) vagy E-cadherin (1:500), és a megfelelő torma peroxidázzal konjugált másodlagos antitestekkel és a DAB a sejtmagot. Antitestek immunhisztokémiai festésre voltak azok, amelyeket a Western blot. Végül hematoxylin használták counterstaining diák. Tumor differenciálódását rákos szövet határoztuk vak módon. Az első antitest váltotta foszfáttal pufferolt sóoldattal negatív kontrollként. A mintákat alatt nézve Nikon Eclipse E800 (Nikon, Tokyo, Japán) vizsgáltuk. Katalógusa}

Minden festett metszeteken nem észleltek, és szerzett 2 független vak vizsgálatot, és a diák kapott egy teljes festés index (SI) pontszám szerint a festődés intenzitása és a százalékos pozitív tumorsejtek. A festés intenzitását osztályozni, mint 0, nincs festés; 1, gyenge festést; 2, mérsékelt festés; és a 3., erős festődést. Tumorsejtek aránya szerint pontoztuk, 0, ≤20% pozitív tumorsejtek; 1, 20% -40% pozitív tumorsejteket; 2, 40% -60% pozitív tumorsejteket; 3, 60% -80% pozitív tumorsejteket; és 4, ≥80% pozitív tumorsejtek. Azáltal, hogy felméri a SI, a festési eredményeket véglegesen elszámolni 0-4, alacsony kifejezés; 4-6, mérsékelt kifejezés; és 6-12, magas expressziós. Ha a festés értelmezése különbözött a nyomozók, az adatokat a szakaszban elvetették. Katalógusa

Matrigel inváziós vizsgálat katalógusa

Matrigel inváziós vizsgálat érintett Transwell kamra (Costar, New York, USA). SGC-7901 sejteket transzfektáltunk 2 ng pCDNA3.1, pEGFP-C1; pCDNA3.1-CagA, pEGFP-C1; vagy pCDNA3.1-CagA, pEGFP-C1-PDCD4. 48 óra eltelte után, 1 × 10 ^{5 poszt-transzfektált sejteket tripszinizáltuk és a sejteket Transwell kamrák előzetesen bevont 20 ug Matrigel. Tápközeg, amely 20% FBS-t az alsó kamrában szolgált a kemoattraktáns, és a felső kamra tele volt közegben, amely 10% FBS-t. Nem költöztetett sejteket eltávolítottuk pamuttörlővel után 24, illetve 48 óra. Migráló sejtek, hogy az alsó a szűrő megfestettük 0,1% -os kristályibolya és megszámoltuk egy mikroszkóp. Végül, a megmaradó sejteket összegyűjtöttük a fehérje és RNS izolálás. Minden kezelést megismételjük 3-szor.}

Statisztikai analízis

Az adatokat átlag ± SD. Student t katalógusa tesztet vagy chi-négyzet próbával hasonlítottuk össze a 2. csoportban. Adatelemzés részt SPSS 12.0 (SPSS, Chicago, IL, USA). P katalógusa < 0,05 értéket tekintettük statisztikailag szignifikánsnak. Katalógusa

Eredmények katalógusa

1. Kifejeződése TWIST1, E-cadherin, vimentin és PDCD4 gyomorrákban katalógusa

Annak vizsgálatára, az egyesület EMT és a gyomorrák, mi betakarított 30 klinikai szövetminta gyomorrákos betegek. Biopszia osztották közepes /alacsony differenciálódás szövet, nagy differenciálódást szövet és nem rákos szövet szomszédos carcinoma hematoxilin-eozin festéssel (1A.). Immunhisztokémiai, TWIST1 és vimentin expressziója magasabb volt rosszindulatú szövetben, mint a nem-rákos szövet, míg a kifejezés a E-kadherin és PDCD4 volt ellentétes a TWIST1 (ábra. Az 1A-E). TWIST1 és PDCD4 expresszióját összefüggésbe hozták a mértéke a tumor differenciálódásának de nem szex vagy a kor (p = 0,021 és p = 0,013, 1. táblázat). Csakúgy, csökkent PDCD4 expresszió fordított összefüggésbe hozható a megváltozott TWIST1 kifejezés alatt gyomorrák (p = 0,035, 2. táblázat). Ezért EMT lehet fontos szerepet játszanak a gyomor karcinogenezis és fejlődés.

2. TWIST1, vimentin vagy E-cadherin a gyomor sejtvonalak szabályozza CagA katalógusa

Továbbá, feltártuk, hogy CagA, mint egy virulens tényező H. pylori katalógusa, befolyásolta az EMT és ezért támogatni az invázió és metasztázis gyomorrákban. Azért választottuk 3 humán gyomorrák sejtvonalak differenciálódása állapotok (AGS, jól differenciált, gyomornyálkahártya-sejtvonal; SGC-7901, mérsékelten differenciált sejtvonalban és BGC-823 rosszul differenciált sejtvonal). CagA expressziós plazmiddal transzfektáltuk különböző gyomor sejtvonalakban. Bár a morfológiai változások a CagA-transzfektált sejteket nem észleltünk (az adatokat nem mutatjuk be), a kifejezés a transzkripciós faktorok és a sejt markereket érintette CagA. Az mRNS és fehérje expressziója TWIST1 és vimentin volt túlszabályozott a CagA transzfekciós (2A.-G), és hogy a PDCD4 és E-cadherin-ben downregulált (ábra. A 2A-G), de nincs jelentős változás SNAIL expresszió volt megfigyelhető CagA transzfekció csoport. Ezért H. pylori katalógusa CagA befolyásolhatja EMT szabályozók beleértve TWIST1. Emellett az E-cadherin, fontos epitheliális marker és vimentin, mint mesenchymalis marker által szabályozott TWIST1, is befolyásolta CagA, és az EMT kapcsolatos gént PDCD4 volt downregulált. Katalógusa

3. Kifejeződése TWIST1, vimentin és E-cadherin befolyásolta PDCD4 katalógusa

A következőkben elemzett molekuláris mechanizmusa az EMT által szabályozott H. pylori
CagA gyomorrákban sejtekben. PDCD4 elnyomja sejtnövekedés keresztül közvetlen kölcsönhatás TWIST1 humán prosztatarák [22]. Immunhisztokémia és statisztikai elemzés is indokolja PDCD4 és TWIST1 létezett gyomorrák (1., 2. táblázat). Azonban azok a mechanizmusok mögöttes PDCD4 funkció a gyomorrák-sejtek nem voltak egyértelműek. Tehát AGS? GSC-7901 és BGC-823 sejtekben plazmiddal transzfektált a túltermelő PDCD4. PDCD4 mRNS és protein expresszióját felülszabályozott összes plazmid-transzfektált sejtvonalak (ábra. A 3A-G). Ezen túlmenően, mRNS és protein szinteket TWIST1 és vimentin, de nem csiga, csökkentek különböző mértékben, és az E-cadherin emelkedtek (ábra. A 3A-G). Ezért TWIST1, vimentin és E-cadherin expresszió lehet szabályozni PDCD4 gyomor epiteliális sejtekben.

4. Az EMT szabályozza CagA révén gátolja PDCD4 a gyomornyálkahártya-sejtek katalógusa

A fentiek alapján megállapításokat, hipotézisek, hogy az EMT folyamat által indukált H. pylori katalógusa CagA bekövetkeztek mTOR gátlása miatt csökken PDCD4, mi kotranszfektált gyomornyálkahártya-sejtek CagA plazmid és PDCD4 túltermelése plazmidot. A csökkent expressziója PDCD4 újrafedték CagA és túlzott mértékben PDCD4 transzfekció. Valamint, a fokozott expressziója TWIST1 és vimentin gátolta, és a csökkent expressziója az E-cadherin-ben fokozódik a ko-transzfektált csoport. Ezek a változások mind mRNS, mind fehérje szinten (4A., G). A migrációs humán gyomorrák sejtvonal SGC-7901 plazmiddal transzfektált határoztuk Matrigel inváziós esszében. Az eredmények azt mutatják, hogy ez indukáltunk CagA plazmid. Cell migrációs assay is kiderült, hogy PDCD4 túltermelése downregulált CagA okozta invázió és metasztázis képessége (ábra. 5A). Ábra. 5B mutatja az átállított sejtek számát az SGC-7901 in CagA transzfekciós csoport nyilvánvalóan több, mint a kontroll csoportban, míg az összeg a migrált sejt ko-transzfekcióval csoport lényegesen kisebb, mint CagA transzfekció csoport. A biológiai jelenségek bizonyítják EMT promóció CagA nyertük részben a megemelkedett PDCD4 kifejezést. A bizonyítékok alapján, azt következtetni, hogy PDCD4 szükséges lehet H. pylori katalógusa CagA közvetített gyomorrák progresszió. katalógusa

Vita katalógusa

A fő tanulmány megállapításai a következőképpen foglalhatók össze: 1) H. pylori
CagA felelős indukció TWIST1 vagy vimentin és gátolja az E-cadherin gyomor rákos sejtekben. 2) CagA indukált epithelialis-mesenchymalis átalakulás részben függ a szabályozó PDCD4. 3) TWIST1 és PDCD4 magában a EMT gyomorrák.

gyomorrák egy többlépéses és fokozatos betegség. A felesleges proliferációját hámsejtek fontos része a kezdeti tumor angiogenezis vagy a korai növekedés [5]. Ezt követően a sejtek invázióját, kezdetben tükröződik a membrán, tartották előrejelzője a végső szakaszban a rák; ez vezet végül áttétet és mortalitást [26]. Patogén fertőzések okozhatnak rákot daganatkeltés közös és malignus transzformációja gazdasejtekben. Mint fontos patogén kockázati tényező, Helicobacter pylori
szorosan kapcsolódó gyomorfekély-betegség, nyálkahártya-asszociált limfoid szövet limfóma gyomor, és gyomor adenokarcinóma [20], [27], [28], [29] . CagA, az egyik elv virulencia tényezők H. pylori katalógusa, serkenti előfordulása és a gyomorrák kialakulásával. Malignus A gazdasejtek transzformációja vonja regulationary hálózat, beleértve számos sejt proteinek, nem kódoló RNS-t, és más, a biológiai aktivitás molekulákat. Azonban a mechanizmus alapjául CagA hatása a gyomornyálkahártya annyira bonyolult és nem világos. Katalógusa

Az EMT erősen konzervált biológiai folyamat az embrionális szervek fejlődését, amely lehetővé teszi a hámsejtek elveszíteni epiteliális fenotípus és szerezzen mesenchymalis fenotípus. Ez magában foglalja a veszteség a sejt polaritásának hámsejtekben, elvesztése a képesség, hogy összekötő alapmembrán, hozzáférés a mesenchymális fenotípust, például magasabb migrációs és behatolás, anti-apoptózis, és a képesség, hogy lebontják az extracelluláris mátrix [8], [30] . EMT fontos szerepet játszik a krónikus gyulladásos betegségek, fibrotikus betegségek, tumor progresszió és a szöveti újjáépítési folyamatot, különösen a megszerzése migrációs és behatolás képességét a rosszindulatú hámsejtek. Rendellenes aktivitás a EMT epith felnőtt epiteliális sejtek gátolta sejtadhéziós molekulák, okozott csökkent sejtadhézió kapacitás, és ezáltal lehetővé tette a tumor sejtek terjedését a szervezetben, végül előmozdítása tumor metastasis [31], [32], [33]. Ezért EMT tartják az elején a invázió és metasztázis, és szintén a jele erős képessége invázió és metasztázis tumorsejtek. pylori katalógusa indukál epithelialis-mesenchymalis átalakulás TNF-α indukáló fehérje [34]. A jelenlegi tanulmány azt jelzi, CagA vezethet hámsejtek morfológiai változások. Azt javasolták, hogy CagA kifejezés nem csak elegendő ahhoz, hogy megzavarják az apikális csomópontok hanem hasonlítanak epitheliális a mesenchymális átmenet Madin-Darby kutya vese sejtek [35]. Hámsejtek fertőzött baktériumok megjelent különböző genomika változásokat, és ennek hatása a EMT markerek által indukált H. pylori katalógusa valószínűleg egy cagPaI-függő módon. Az adatok azt mutatták, hogy az epiteliális mesenchymalis tranzíció (EMT) val kapcsolatos gének voltak felfelé vagy lefelé szabályozni CagA-pozitív H. pylori
törzsek AGS [36], [37]. A jegyzet, a szabályozási hálózat CagA bevonásával a EMT gyomorrák még tisztázni kell. Katalógusa

Annak vizsgálatára, a specifikus mechanizmus EMT által támogatott CagA gyomorrákban, összehasonlítottuk a gének kifejeződését szomszédos nem tumorszövetmintákból gyomorrák szövetek immunhisztokémiai. Az eredmények azt mutatták, hogy a Twist1 /vimentin expressziót carcinoma szövetekben magasabb volt, mint a szomszédos, nem-tumor szövetekben, és az expressziója a közép /alacsony differenciálódás karcinóma szövetek magasabb, mint a magas differenciálódás szövetekben. Azonban az E-cadherin és PDCD4 csökkent a folyamat epithelialis-mesenchymalis átmenet gyomorrák. Érdekes, hogy létezik egy negatív korrelációt a kifejezése TWIST1 és PDCD4. A tanulmány szerint az EMT kapcsolatos gének olyan folyamat gyomorrák, összhangban a korábbi kutatások megfigyelésével elvesztése epithelialis fehérje és /vagy beszerzése expressziójának mesenchymalis fehérjék történt gyomorrák. Továbbá, azok rendre korrelációban rosszul differenciált szövettani előrehaladott stádiumban van és a szegény beteg eredményét [38]. Ezen túlmenően, PDCD4 egy újonnan talált molekula, amely alapvető szerepet játszik számos biológiai folyamatok, amelyek betegséget okoznak vagy előfordulását és fejlődését tumor. PDCD4 gátolja a fordítási folyamat kötődve transzlációs kezdő faktor eIF4A vagy eIF4G. Különböző induktorok apoptózis stimulálják és upregulate kifejezése PDCD4, ami további szabályozására P21, Cdk4, karboanhidráz II és JNK /c-Jun /AP-1. PDCD4 gátolhatja invázió kapcsolatos urokináz plazminogén aktivátor receptor expresszióját, invázió vagy beszűrődés az erek, és metasztázis; Ezért csökkent expressziója PDCD4 fontos szerepet játszik a tumor előfordulás, a fejlesztés és a prognózis [17], [33], [39], [40]. Tehát, vajon Twist1 és PDCD4 részt a CagA indukálta EMT. Katalógusa

Ezt találtunk EMT-asszociált transzkripciós faktorok és markerek expressziója CagA transzfektált gyomorrák sejtvonalakon. Adataink azt mutatják, hogy H. pylori katalógusa CagA is fel-expressziójának szabályozása TWIST1 és vimentin, de nem csiga, és szabályozza az E-cadherin és PDCD4 a gyomor sejtvonalak (AGS, SGC-7901 és BGC-823). Az eredmények nem voltak befolyásolja a differenciálódási állapotát transzfektált sejt. Bár mi nem tapasztaltunk morfológiai változásait CagA transzfektált sejtek, invázió és metasztázis képessége gyomorrák sejtek gyorsítható CagA keresztül transzwell sejt inváziós vizsgálat. Ez részben okozta funkcionális heterogenitását CagA különböző szövetekben. Így a hatása EMT által kiváltott H. pylori
még tovább kell vizsgálni. MiR-21 mozdítani TGF-β-indukált miofibroblaszt differenciálódási folyamat célzási PDCD4. A TGF-β indukálta miR-21 expresszió fibroblasztok és mir-183 downregulált PDCD4 és gátolta a TGF-β-indukált apoptózis humán hepatocelluláris karcinóma sejtek [41], [42]. Eközben a TGF-β szabályozott CSIGA, csavar, vagy ZEB1 és az érintett az EMT és metasztázis [43]. Sőt, PDCD4 találták, hogy részt vesz a transzkripció is. Valóban, a COOH végállomása Twist1 tartalmazó alap helix-loop-helix domént javasolták, hogy közvetített közvetlen interakció PDCD4 fehérjéket. Tehát, PDCD4 kölcsönhatásba lép a DNS-kötő doménje Twist1 és gátolja annak DNS-kötő képessége, hogy célgének humán prosztatarák-sejtek [22] .Ezért mi további teszteltük, hogy PDCD4 lehetne szabályozni TWIST1 gyomorkarcinómában sejtekben. A tanulmány azt mutatta, hogy TWIST1 le volt szabályozva által PDCD4 magas expressziós plazmid real-time PCR és Western blot, míg az E-cadherin expresszió volt szemben TWIST1 az AGS, SGC-7901 és BGC-823. Az mRNS expresszióját SNAIL volt downregulált AGS, SGC-7901, míg preotein expressziót nem észleltünk a változtatásokat. Ez lehet az oka, hogy a bonyolultsága a protein szintézist. Azaz, a fehérje nem csak szabályozott transzkripciós szinten, hanem fordítás és fordítsa szinten. Ez néha úgy tűnik, hogy az mRNS nem közvetlen jelzése fehérje szintje a sejtekben. Utolsó végeztünk további kutatások szerepe a PDCD4 a CagA kiváltott epithelialis-mesenchymalis átalakulás. Gyomornyálkahártya sejteket transzfektáltunk CagA expressziós plazmiddal és PDCD4 overexpressziója plazmidot egyszerre. Restaurálása PDCD4 kifejezés gátolhatja TWIST1 és vimentin, és indukálja az E-cadherin amely szabályozza CagA, PDCD4 is tanúsított, amely hatással lehet az invázió és metasztázis képessége a gyomor sejtek matrigel inváziós vizsgálat. Bár további vizsgálatok szükségesek, hogy teszteljék ezt a hipotézist, arra a következtetésre jutottunk, hogy alapvetően CagA kiváltott epithelialis-mesenchymalis átalakulás részben függ szabályozó PDCD4. Katalógusa

Összefoglalóan azt bizonyítják, hogy a H. pylori katalógusa CagA indukálnak TWIST1 kifejezés és EMT gyomorrák sejtek szabályozása által PDCD4 (6.). Mi bepillantást engednek a molekuláris hálózat gyomorrák okozta H. pylori fertőzés
, és a kínálat elméleti alapot PDCD4 mint biológiai célt diagnózis vagy kezelés a rák. A jövőbeni kutatások bevonásával egérmodellben vezethet jobb megértéséhez a szerepét PDCD4 a H. pylori
indukált EMT gyomorrák. katalógusa

• PLoS One: miR-30b, alulszabályozott gyomorrákban, elősegíti az apoptózist és gátolja a tumor növekedését célzás plazminogén aktivátor inhibitor-1
• PLoS One: Helicobacter pylori gyomor- Rák és nyombélfekély megmutatása Same filogeográfiai Origin az Andok régióban Colombia