aktueller Beweiser datt vill microRNAs an der tumorigenesis an Werdegang vun gastric Kriibs Équipe sinn, iwwerdeems de Medeziner Bedeitung gastric Kriibs vun microRNA-214 an ass ganz wéineg verstan an der exakt Roll vun microRNA-214 zu gastric Kriibs bleift obskur. Am Moment studéieren, Ausdrock Niveau vun microRNA-214 zu 80 gastric carcinoma Stoffer, 18 nontumourous gastric Stoffer, a 4 Zorte vun gastric Kriibs Zell Verse ëmgedréint Transkriptiouns laachen sech vun real-Zäit grouss polymerase Kette Reaktioun (RT-qPCR) gefollegt, an der Relatioun tëscht microRNA-214 Ausdrock an cliniopathological Charakteristiken dorënner hätt war lant. Fir d'Potential Roll vun microRNA-214 zu gastric Kriibs Zell biologescher gelooss ermëttelen, standing mir Zell Prolifératioun, apoptosis, Migratioun an Invasioun assays zu véier gastric Kriibs Zell Versen an en och gastric Zell Linn kënschtlech VerfÜgung. Eis Resultater weisen, datt microRNA-214 dramatesch an gastric Kriibs Stoffer an gastric Kriibs Zell Linnen downregulated war, am Verglach mat nontumourous gastric Stoffer. Stepwise downregulation vun microRNA-214 Ausdrock war ënner nontumourous gastric mucosa observéiert, nonmetastasis gastric Kriibs Stoffer, an Metastasen gastric Kriibs Stoffer. Den Ausdrock vun microRNA-214 huet vill inversely mat lymph Node Metastasen an entholl Gréisst soll awer hu keng Korrelatioun mat Iwwregens hätt de Patient. Ectopic Ausdrock vun microRNA-214 konnt Zell Wanderung an Invasioun Fähegkeet an SGC7901 an MKN45 gastric Kriibs Zellen inhibit. An knockdown vun microRNA-214 bedeitend Zell Prolifératioun vereinfacht, Migratioun an Invasioun an enger Zell-spezifesch Manéier zu MKN28, BGC823 an GES-1 Zellen. Kolonie Spannend Faktor 1 (CSF1) huet als Zil Gentherapie vun microRNA-214 identifizéiert. Am Resumé, hien huet eisen Daten datt microRNA-214 eng villverspriechend Roman uweist fir lymph Node Metastasen an Patienten mat gastric Kriibs ass. A mir identifizéiert datt downregulation vun microRNA-214 kënnen d'Prolifératioun, Iwwerfall a Migratioun vun gastric Kriibs Zellen duerch direkt gezielt CSF1 regléieren VerfÜgung Fro:. Wang YW, Shi DB, Chen X, Gao C, Gao P (2014 ) Clinicopathological Bedeitung vun MicroRNA-214 zu Gastric Cancer an Seng Effekt op Zell biologesch Erweiderung. PLoS NËMMEN 9 (3): e91307. Doi: 10.1371 /journal.pone.0091307 VerfÜgung Redakter: Terence Lee, Universitéit vun Hong Kong, Hong Kong VerfÜgung Arnaque: 25. Abrëll 2013; Akzeptéiert: 11. Februar 2014; Publizéiert: 10. Mäerz 2014 VerfÜgung Copyright: © 2014 Wang et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung Funding:. Dës Aarbecht gouf vun der National Natural Science Foundation of China (Nr 81172351 an 81372856) ënnerstëtzt. D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung Gastric Kriibs (GC) ass de véiert stäerkste gemeinsam Kriibs an der zweeter Virwaat Ursaach vum Kriibs veruerteelt weltwäit [1]. Trotz bedeitend Studien op der tumourigenesis an Werdegang vun GC, ass de pathogenesis vun dëse komplexe Krankheet ganz wéineg verstan. Sou, ass et vun kruzial Medeziner Wäert ze identifizéieren an der preziser molekulare Mechanismus vun der Entwécklung an Werdegang vun gastric carcinoma Équipe Markenzeeche. VerfÜgung Ausser konventionell genetesch a epigenetic Verfall vun FAQ-coding oncogenes an entholl-suppressor Genen vun der carcinogenesis vun GC, nonprotein-coding RNAs, besonnesch microRNAs (miRNAs), hunn als nei Spiller, datts Liicht op de Mechanismus vun GC Entwécklung [2] erweist. MiRNAs sinn endogenous 19-25 NG noncoding RNAs déi negatif vun Spur mRNA ofgeschnidden FAQ Ausdrock regléieren oder FAQ Iwwersetzung repressing, duerch Interaktioun mat der 3'-UTR vun Zil- mRNAs. Eng grouss Zuel vu miRNAs muss gemellt ginn an carcinogenesis an Entwécklung vum Mënsch Cancers, dorënner GC [2] fir matzemaachen - [4]. Dës miRNAs sinn normalerweis dysregulated a Funktioun entweder als entholl suppressors oder oncogenes an der Initiatioun an Werdegang vun mënschlech carcinomas. Zum Beispill, Tomono et al. gewisen hunn, datt Mir-375 zu gastric carcinoma downregulated ass an enormen seng proapoptotic Effet duerch PDK1 downregulating, engem kinase datt Akt phosphorylates, an am Tour, Hien der PI3K /Akt Passerelle [5]. [8 - Iwwerdeems Mir-21 ass déi negatif Regulatioun wichteg entholl suppressors wéi PTEN, PDCD4, an RECK, an dann eegens GC Zellen mat fräi invasiveness an d'Fähegkeet fir ze verhënneren anoikis [6] fir Promotioun entholl Prolifératioun an Invasioun an GC fonnt ]. Virdrun, hu mer fonnt, datt Mir-145 zu manifold Mënsch Kriibs Zellen downregulated war an Trupen dem Invasioun-Metastasen CASCADE am GC vun N-cadherin FAQ Iwwersetzung inhibiting [9], [10]. VerfÜgung Am Moment, déi Krankheete Bedeitung vun microRNA-214 (Mir-214) vun der Iwwregens hätt vun Patienten mat GC ass ganz wéineg verstan, an déi exakt Roll vum Mir-214 am GC bleift onkloer. Hei, ze propagéieren mir de Veräin tëscht Mir-214 Ausdrock an cliniopathological Parameteren wéi och den Effet vum Mir-214 op biologesche Verhaalen och Zell Prolifératioun, apoptosis, Migratioun an Invasioun vun GC Zellen évaluéieren. VerfÜgung Ray Echantillon VerfÜgung Ray Echantillon waren an engem ähnleche Manéier bereet wéi virdru beschriwwen [9]. Kuerz, 80 Echantillonen (aus 65 Männercher, 15 Weibchen; 58,3 ± 17,49 an 61,5 ± 9,162 Joer al, bzw.) vun GC Stoffer sech vu Patiente kritt déi vun 2004 bis 2006 Nontumourous mucosa chirurgesch resection um Qi Lu Hospital vun Shandong University mécht gastric méi wéi 3 cm aus erhéijen ewech war aus 18 vun deene Patienten a vun Ufank als Kontrollen ausgewielt. Keen vun de Patienten scho preoperative Behandlung, wéi Bestrahlungen Chimiotherapie goen. Uplanzen sech histologically no Lauren senger an der Weltgesondheetsorganisatioun (DÉI) senger Klassifikatiounen (IARC Press, Lyon, 2000), a kategoriséiert getippten no der UICC 2002 TNM klasséieren. VerfÜgung IFLA- Ausso VerfÜgung huet d'Etude vun der Ethik Comité vun School vun Medezin, Shandong University, Shandong, China (: 201101015 averstaane Code) abruecht. Mir kritt vun all Participanten an eiser Etude Équipe Awëllegung geschriwwen. VerfÜgung Zell Kultur VerfÜgung Véier Zorte vu mënschlechen GC Zell Strecken aus der American Type Kultur Collection (MKN28 an MKN45, Manassas, VA kritt USA,) an de Shanghai Cancer Institut (BGC823 an SGC7901, Shanghai, China). D'och gastric mucosal epithelial Zell Linn GES-1 war vun Peking ComWin Biotech Co., Ltd. (Peking, China) kritt. D'Zellen sech am RPMI 1640 Kultur mëttelfristeg ergänzt mat 10% An et Bovine serum (FBS) an engem humidified Zell incubator mat eng Atmosphär vu 5% CO 2 op 37 ° C haten. VerfÜgung MiRNA Extraktioun engem miRNeasy FFPE Kit (Bioteke, Peking, China) benotzt, isoléiert mir aus paraffin-Ënnerbewosstsinn Stoffer miRNA no der Taktik vum Produzent. Total RNS vun Zell Linnen war mat Trizol reagent (TaKaRa, Dalian, China) ofgebaut folgenden Fabrikant d'Protokoll. D'Qualitéit an Quantitéit vum RNS Echantillon waren déi Norm spectrophotometric Methoden (BioPhotometer plus; Eppendorf, Hamburg, Däitschland) évaluéieren an zu 2 NG verdënntem /μl fir RT-qPCR Analyse VerfÜgung Transkriptiouns vun real-Zäit duerno Réckproduktioun. grouss polymerase Kette Reaktioun (RT-qPCR) VerfÜgung MiRNA Ausdrock Niveauen mat engem SYBR Primescript miRNA RT Hinnen alleguer Kit (TaKaRa, Dalian, China) laut den Hiersteller d'Uweisungen mat engem Bio-Rad CFX ™ 96 C1000 Real quantitated hut System. Kuerz, huet den RNS Echantillon zu cDNA vun engem vun real-Zäit qPCR an normalized benotzt U6 klengen Nuklearsécherheet RNS (RNU6B) vun der 2. Zell transfection VerfÜgung Exponentially wuessen Zellen (1,5 × 10 Fir stabil Ausdrock vu Mir-214, SGC7901 an MKN45 Zellen sech transfected mat lentivirus Mir-214-ausdrécken Vecteure LV3-kann awer och sin -miR-214 oder eng negativ Kontroll LV3NC, déi GFP als Bewaacher FAQ huet, laut dem Protokoll d'Hiersteller (GenePharma, Shanghai, China). Dräi Deeg no transfection, den Ausdrock vun GFP FAQ war ënner fluorescence microscope iwwerwaacht. D'transfected Zellen sech mat puromycin (1,5 μg /ml) fir déi stably ausdrécken Mir-214 opgefouert. VerfÜgung Zell Prolifératioun assay VerfÜgung No transfection, goufen Zellen trypsinised, gezielt, an rakommen op 96 -well Placken op eng Dicht vu 5 × 10 Zell apoptosis assay VerfÜgung Dräi Deeg no transfection vum Mir-214 Virleefer oder inhibitor, goufen Zellen gesammelt an Kierchefënster mat der Annexin V-FITC /PI Apoptosis Detektioun Kit (BestBio, Shanghai, China) als virdru beschriwwen [12]. An dowéinst, sech Zellen trypsinized, gesammelt an da folgend Fabrikant d'Uweisungen mat der Annexin V-FITC /PI Apoptosis Detektioun Kit Kierchefënster. No incubation mat Annexin V-FITC an PI, goufen d'apoptotic Zellen direkt duerch onkontrolléiert cytometry analyséiert. Fréi goufen apoptotic Zellen wéi d'Populatioun definéiert, datt PI negativ an Annexin V-FITC positiv war, iwwerdeems spéiden apoptotic Zellen sech PI positiv an Annexin V-FITC positiv. D'total apoptotic Taux war den Ufank apoptotic Taux plus spéiden apoptotic Taux berechent. Annexin V-PE /7-vunda Apoptosis Detektioun Kit (KeyGEN, Nanjing, China) war fir d'apoptosis assay vun lentivirus Vecteure transfected Zellen, ähnlech zu de genannte Ëmwelt- benotzt. All Experimenter war zu triplicate gesuergt, an Daten goufen als Mëttel ± Fils presentéiert. VerfÜgung Zell Wanderung an Invasioun assays VerfÜgung Zell Wanderung an Invasioun assays gesuergt huet wéi virdru beschriwwen [13]. Migratioun assay mat Transwell gehaal huet Text mat 8.0 mm pore Gréisst Membran (24-gutt Format, Corning, New York, USA). Fir Invasioun Fähegkeet vun GC Zellen Moossnam, déi virdru waren ernimmt Text Pre-bedeckt mat Matrigel Matrixentgasung (BD Science, Sparks, MD, USA). D'Zellen (1 × 10 Luciferase assay VerfÜgung Dual-luciferase assays gesuergt huet wéi virdru beschriwwen [9]. D'3'-UTR Fragmenter vun CSF1 Gentherapie der Mir-214 bindend Site wouvun war vun Hinnen alleguer Kick vum MKN45 Zell RNS der primers zu Table S1 benotzt, an an der Xba1 Site vun Vecteure pmirGLO miRNA Zil- Ausdrock gesaat (Promega, San Lius Obispo, CA, USA). Déi doraus resultéierend Vecteure war pmirGLO-CSF1 genannt. Fir d'luciferase reporter assay, MKN45 an BGC823 Zellen sech zu engem 12-Meter zappen géint den Dag virdrun transfection. D'Zellen sech mat 30 nm vum Mir-214 Virleefer oder Mir-214 inhibitor, negativ Kontroll an 30 NG pmirGLO-CSF1 mat X-tremeGENE transfection reagent (Roche Obwuel Science) Co-transfected. mat der duebel luciferase assay System (Promega) an normalized zu Renilla luciferase Aktivitéit No 48 h transfection, war luciferase Aktivitéit gemooss. All Experimenter war zu triplicate gesuergt. VerfÜgung Western blot VerfÜgung Um 48 h der transfection mat Mir-214 Virleefer oder inhibitor, goufen Zellen ze westlech blot Analyse ënnerworf wéi virdru beschriwwen [19]. Kuerz war, FAQ vun Zellen oder Stoffer ofgebaut. Lysates sech duerch electrophoresis geléist, transferéiert ze nitrocellulose Schläimhait an blotted mat antibodies géint CSF1 (1:1000, Epitomics) oder β-actin (1:1000, Santa). Date goufen aus dräi onofhängeg Experimenter kritt. VerfÜgung statistique Analyse VerfÜgung Analysen goufen standing statistesch Pak Prism 5 Software benotzen (GraphPad Software, San Diego, CA, USA). Differenzen sech mat der d'Student analyséiert t VerfÜgung Azeton tëscht zwou Gruppen oder mat eent-Manéier ANOVA ënnert dräi Gruppen. D'Korrelatioun tëscht Mir-214 Ausdrock an entholl Gréisst vun der Primärschoul GC war vun Spearman d'Korrelatioun berechent. An d'Iwwerliewe rop, goufen Donnéeën vun Log-Platz Test analyséiert. Ze bestëmmen, op deem Mooss de Ausdrock vu Mir-214 effizient verschidde Krankheete subsettings, Receiver Fonctionnementskäschten charakteristesche (ROC) rop Analyse gebaut gouf separat kéint an der Géigend ënner dem Bou (AUC) war berechent d'Fähegkeet vum Mir-214 Ausdrock ze evaluéieren an differenzéiert tëschent Kriibs Fäll an nontumourous Fäll, an metastatic Stoffer an nonmetastatic Stoffer zu z'ënnerscheeden. P VerfÜgung -values manner wéi 0,05 statistesch relevant considéréiert goufen. VerfÜgung Mir-214 zu gastric carcinoma Stoffer a véier GC Zell Linnen, am Verglach mat nontumourous gastric mucosa downregulated ass VerfÜgung am Verglach mat 18 nontumourous gastric mucosa Echantillonen, Mir-214 huet vill downregulated (ongeféier sechs-fantastesch) zu 80 Primärschoul gastric Otemschwieregkeeten Echantillon (Dorënner 1A, P VerfÜgung = 0.0001). De Receiver charakteristesche (ROC) Kéieren vum Mir-214 Fonctionnementskäschten spigelt staark Trennung tëscht GC Stoffer an nontumourous Stoffer, mat engem Beräich, ënnert der Linn (AUC) vun 0.7764 (Dorënner S1A, 95% Vertraue nolauschterer (CI), 0.6466-0.9062). Konsequent, downregulation vum Mir-214 war zu véier gastric Zell Linnen validéiert. Als zu Dorënner 1c gewisen, déi Mir-214 Ausdrock Niveau vun de GC Zell Linnen MKN28, BGC823, MKN45, an SGC7901 Ofstand mat 18 nontumourous gastric Otemschwieregkeeten Echantillon Verglach attenuated war ( P VerfÜgung &Si besteet; 0,05). Mä mir festgestallt nach méi Ausdrock vun mir-214 zu GES-1, Zeil en och gastric epithelial Zell, wéi zu véier GC Zell Linnen (Dorënner 1c, P VerfÜgung &si besteet; 0,05). Mir spekuléieren der discordance mannst wéinst kann un der Differenz tëschent de Medeziner Echantillonen an Zell Linnen an Deel, well eng Zell Linn, vom ee Patient mat enger bestëmmter Krankheet, den Ausdrock miRNA duerstellt Ënnerschrëft vun nëmmen ee Medeziner Prouf a vläicht Ännerungen am Zell Kultur kënschtlech VerfÜgung; an anere Wierder, si Otemschwieregkeeten Echantillon vill méi wéi de Mënsch Kontext wéi Zell Linnen. Sou, kommentéieren mir dat Mir-214 Ausdrock vun mënschlecher GC Stoffer war méi representativ a kredibel wéi dat zu Zell Linnen fonnt. VerfÜgung Ofgeholl Mir-214 Ausdrock am GC ass mat lymph Node Metastasen an entholl Gréisst verbonne mä huet kee Korrelatioun mat Patient hätt VerfÜgung fir d'Potential clinicopathological Implikatioune vun verännert mir-214 Ausdrock festzestellen, kombinéiert mir de qPCR Resultater a Krankheete Parameteren. Kennenzeléieren tëscht der Mir-214 Ausdrock Niveau an clinicopathological Charakteristiken vun GC sinn an Table zesummegefaasst 1. Mir-214 Ausdrock war inversely mat entholl Gréisst (Table 1, soll t VerfÜgung Azeton, P VerfÜgung = 0,0265; Dorënner 1D, Spearman r = -0,2673, P VerfÜgung = 0.0083) an lymph Node Metastasen (Table 1, Figure1A, t VerfÜgung Azeton, P VerfÜgung = 0.0164). Allerdéngs war et kee groussen Ënnerscheed zu anere clinicopathological Funktiounen wéi Geschlecht, distal Metastasen, DÉI histological klasséieren, an histological Typ d'Lauren tëscht dësen zwou Gruppen. VerfÜgung Intriguingly, mir fonnt stepwise downregulation vum Mir-214 ënnert nontumourous gastric mucosa, nonmetastasis Stoffer, an Metastasen Stoffer (Dorënner 1A, eent-Manéier ANOVA, P VerfÜgung = 0.0006). Ze diskutéieren waren Mir-214 Ausdrock am GC als nei uweist fir lymph Node Metastasen, ROC Kéiren etabléiert. Mir observéiert kloer separations tëschent de Patienten mat lymph Node Metastasen an déi ouni lymph Node Metastasen, mat enger AUC vun 0.5880 (Dorënner S1B, 95% CI, 0.4526-0.7166). Der Primärschoul gastric Stoffer goufen ënnerdeelt weider an eng héich-Metastasen Grupp an engem héich-Metastasen Grupp no der Zuel vun lymph Node Metastasen (LNM): niddereg Metastasen esou Fäll mat manner wéi sechs LNM, a Fäll mat méi wéi sechs LNM definéiert gouf sech als héich Metastasen considéréiert. Wéi erwaart, huet Mir-214 Ausdrock ofgeholl Trainer an der Grupp héich-Metastasen Verglach zu der niddereg-Metastasen Grupp (Dorënner 1B, P VerfÜgung = 0.045). VerfÜgung An Aklang mat der Otemschwieregkeeten Prouf Donnéeën ugëtt déi Korrelatioun tëscht mir-214 Ausdrock an LNM, fonnt mir, datt d'mëttelméisseg-ënnerscheet Zell Linn Verglach zu MKN28, mir-214 Ausdrock vun der Pro ënnerscheet Zell Linnen MKN45 an BGC823, a virun allem de metastatic Zell Linn Ofstand manner war SGC7901 [14] ( P VerfÜgung &si besteet; 0,05) VerfÜgung Allerdéngs eis Donnéeën bewisen kee groussen Ënnerscheed vun mir-214 Ausdrock vun 18 Primärschoul gastric Otemschwieregkeeten Echantillonen an hire Premières Metastasen loci (Dorënner 1B. , P VerfÜgung = 0.2676). Dës Resultater hindeit, datt downregulation vum Mir-214 Ausdrock am fréie Phase vun LNM Entwécklung opgetrueden an stabil ouni weider attenuation am spéiden Etapp vun Metastasen. VerfÜgung Fir weider den Effet vum Mir-214 beschen op der Iwwregens hätt vun Patienten, analyséiert mir den Ausdrock Niveau vun mir-214 zu Fäll mat verschiddene Réckwee Status an Iwwerliewe Konditiounen. Mä eis Daten huet, datt et keng ausgeschwat Ënnerscheed tëschent de Réckwee Grupp war an der nonrelapse Grupp, oder tëschent de Iwwerliewe Grupp an den Doud Grupp (Dorënner 2A-B, t VerfÜgung Azeton, P Effekt vum mir-214 op Zell Prolifératioun vu GC Zellen VerfÜgung transfection Effizienz ze kontrolléieren, mir mir-214 Ausdrock vun RT-qPCR sech bei 24, 48, an 72 h der transfection vun der Raumstatioun-214 Virleefer oder Zellen inhibitor transfected a kontinuéierlech fonnt Mir-214 Ausdrock vun lentivirus vectors fir 4 Wochen behandelt Zellen. Wéi erwaart, transfection vun Virleefer Mir-214 effizient an bedeitend overexpression vum Mir-214 (Dorënner S2A-B, P VerfÜgung &Si besteet; 0,05) Schoss an Mir-214 inhibitor Contreras Mir-214 Ausdrock vun miR- reduzéiert 214 inhibitor-transfected Zellen wéi déi negativ Gruppen (Dorënner S3E-F, Dorënner S4 A, P VerfÜgung &Si besteet; 0,05). Och, fonnt mir dat mat lentivirus Vecteure LV3-kann awer och sin-Mir-214 transfected Zellen zu engem 7 bis 96-fantastesch Ännerung vum Mir-214 Ausdrock vun SGC7901 an MKN45 Zellen (Dorënner S3A-D Féierung konnt, P VerfÜgung &Si besteet; 0,05), mat 80% -90% Zellen ausdrécken der GFP Bewaacher FAQ (Dorënner S3A, B) VerfÜgung fir erauszefannen, ob Mir-214 der Verbreedung vun GC Zellen, hat Prolifératioun assay benotzt gouf Afloss hätt op. Zell Wuesstem ëmmer z'entdecken. Eis Daten zougedréckt datt overexpression vum Mir-214 mat lentiviurs vectors oder Mir-214 Virleefer net Zell Wuesstem vun SGC7901 Afloss huet (Dorënner 3A-B, Dorënner S2C-D, P > 0,05) an MKN45 Zell Linnen (Dorënner S2E-F, Dorënner S5A-B, P > 0,05). Allerdéngs fonnt mir dass downregualtion vum Mir-214 kéint d'Prolifératioun vu BGC823 (Dorënner 3C-D, P VerfÜgung = 0.0010) an GES-1 (Dorënner S4B-C, P VerfÜgung = Promotioun vun GC 0.0474), mee net MKN28 Zell Linn (Dorënner S5C-d, P VerfÜgung = 0.0938), an eng Zell-spezifesch Manéier. VerfÜgung Roll vum Mir-214 zu Zell Wanderung an Invasioun Zellen VerfÜgung Als mir-214 Ausdrock inversely mat lymph Node Metastasen verbonne war, mir waren besonnesch interesséiert d'Fähegkeet mir-214 Zell Wanderung an Invasioun ze beaflossen. Eis Resultater uginn dass SGC7901 an MKN45 transfected Zellen mat LV3-kann awer och sin-Mir-214 huet eng däitlech rofgaang Wanderung an Invasioun Méiglechen stoussen, am Verglach mat der LV3NC behandelt Zellen (Dorënner 4A-B, Dorënner S6A-B, P VerfÜgung &Si besteet; 0,05). A mir gesinn, datt downregualtion vum Mir-214 kéint d'Wanderung an Invasioun vun MKN28 (Dorënner 4C-D, P VerfÜgung = 0,0491 an P VerfÜgung = 0,0127, bzw.) vereinfacht. Obwuel knockdown vum Mir-214 Afloss hat net d'Migratioun vun GES-1 Zellen (Dorënner S4D-E, P VerfÜgung = 0.0879), silencing vum Mir-214 Nerve enger méi wéi 40% Erhéigung vun der invasiv Wunnengen vun deenen Zellen ( P VerfÜgung = 0.0046). Mä eis Daten zougedréckt datt transfection vum Mir-214 Virleefer net eng sécherlech Effekt op Zell Wanderung an Invasioun an SGC7901 (Dorënner S2G-H, P VerfÜgung > 0,05) hat an MKN45 (Dorënner S2I-J, P VerfÜgung &plain. 0,05) Zellen, am Verglach zu der jeweileger negativ Kontrollen VerfÜgung Influence vun Mir-214 op Zell apoptosis vun GC Zellen VerfÜgung den Effet vun miR- ënnersicht 214 op Zell apoptosis, standing mir apoptosis assays der Annexin V-FITC /PI staining Method benotzt. Eis Resultater bewisen, dass overexpression (Mir-214 Virleefer an lentivirus Vecteure) an knockdown vum Mir-214 net Zell apoptosis selbstverständlech Verglach mat negativen Kontrollen zu véier GC Zell Linnen (Dorënner 5, Dorënner S2K-N, P mir-214 Ziler direkt an Ugrëff-reguléieren CSF1 zu gastric Kriibs Zellen VerfÜgung fir Ziler vum mir-214 identifizéieren, mir TargetScan sind benotzt mir-214 Ziler am mënschleche gastric Kriibs ze virauszesoen. Ënnert de villen méiglech Kandidaten, hat mer déi zu Cancers an proliferation- an Metastasen-verbonne Genen, dorënner NOTCH2, FGFR1, CSF1 (Dorënner 6A), AGAP2, CREB1, fir weider Analyse overexpressed eraus. Eis Resultater weisen, datt Mir-214 Virleefer transfection bedeitend d'Aktivitéit vun enger luciferase reporter Gentherapie reduzéiert zu der CSF1 Äonen 3'-UTR, mat 29,60% an 30,61% Reduktioun, am Verglach zu den negativen Kontroll Gruppen (Dorënner 6B, P Mir sech weider den Ausdrock vun CSF1 FAQ duerch westlech blot an GC mat Mir-214 Virleefer oder inhibitor transfected Zellen. Konsequent mat der luciferase Resultater, war den Ausdrock vun CSF1 FAQ ofgeholl bedeitend an SGC7901 an MKN45 Zellen (Dorënner 6D-E, P VerfÜgung = 0,0037 an 0,0066, bzw.) transfected mat Mir-214 Virleefer a fräi vun MKN28 an BGC823 Zellen (Dorënner S7A-B, P VerfÜgung = 0,0049 an 0,0416, bzw.) transfected mat Mir-214 inhibitor, am Verglach mat de respektiven Kontrollen. Dës Donnéeë ugeholl, datt Mir-214 CSF1 Iwwersetzung an gastric Kriibs Zellen bremst. VerfÜgung Beweiser zouginn huet den entscheedende Impakt vun miRNA dysregulation op tumourigenesis vum Mënsch carcinomas Optakt [3], [4] . MiRNA dysregulation ënnerstëtzt Zell Prolifératioun, jidferengem Resistenz zu apoptosis, a verbessert invasiveness an Metastasen, duerch d'afgerappt entholl suppressors repressing oder der Heefung vun Zil- oncogenes Pinguin, an domat an d'Initiatioun, Werdegang Équipe ass, an Metastasen vum Mënsch erhéijen. VerfÜgung vun der Onmass vun miRNAs, dysregulation vum Mir-214 war am grousse Mënsch Cancers fonnt [15] - [22]. Downregulation vum Mir-214 zu cervical Kriibs huet duerch verschidden Gruppen gemellt gouf, an Mir-214 vum Wuesstem, Migratioun, an Invasioun vun cervical Kriibs Zellen vun gezielt oncogenes MEK3, JNK1, Plexin-B1, an GALNT7 gouf [15 inhibit dës Distanz zu ] - [17]. Mir-214 huet och déi Délaie aberrantly nik oncogene Ezh2 Heefung an nächster unchecked Zell Prolifératioun an Invasioun [18] gin Verréngerung vun Broscht Kriibs an droen zu Broscht tumourigenesis fonnt ginn. Allerdéngs, Penna et al. gewisen hunn, datt Mir-214 ass héich an mënschlechen melanomas ausgedréckt an dréit zu melanoma entholl Werdegang duerch Ennerdréckung vun TFAP2C, engem homologue vun e gutt etabléiert melanoma entholl suppressor [19]. Dës Resultater weisen, datt d'Roll vum Mir-214 zu Kriibs ass tissue- oder cell- spezifesch. VerfÜgung Eng rezent Etude vun Ueda et al. gewisen, datt mat de Medeziner Etapp, peritoneal Verbreedung an Iwwerliewe vu Patienten [20] dysregulation vum Mir-214 soll war. Allerdéngs bleift d'exakt Roll vum Mir-214 zu der Werdegang vun gastric carcinoma a seng Basisdaten molekulare Mechanismus Synch. Hei, weisen mir dat Mir-214 méi am GC reduzéiert huet, virun allem zu metastatic Stoffer, e Potential Roll vum Mir-214 suggeréiert an lymph Node Metastasen virausgesot, déi wäit vun eis ROC rop Analyse ënnerstëtzt gouf. Ausserdeem hunn mir déi niddreg Ausdrock vu Mir-214 eng Bunnschréiegt Richtung engem erweiderten entholl Gréisst haten. Fir Adress ob der dysregulation vum Mir-214 mat engem biologesche Bedeitung Bieren, geheescht mer e Suivi ze studéieren a funktionell Analyse vum Mir-214 kënschtlech VerfÜgung. Trotzdeem, proposéiere eis Daten dass Mir-214 keen Effekt op Patient Resultat huet, dorënner Réckwee Status an Iwwerliewensfro. Eis Daten zougedréckt datt overexpression vum Mir-214 mat lentivirus Mir-214-ausdrécken Vecteure dramatesch reduzéiert Wanderung an Invasioun vun GC Zell Linnen an knockdown vum Mir-214 konnt Zell Prolifératioun, apoptosis, Migratioun an Invasioun an enger Zell-spezifesch Manéier verstännegen, mat keen Afloss op Zell apoptosis. VerfÜgung CSF1 (Kolonie Spannend Faktor 1 (macrophage)) ass eng kritesch Faktor hematopoietic Wuesstem macrophage Zell dat, Prolifératioun an Aktivéierung sensibiliséieren an et ass och präsent an net-hematopoietic Zellen [21] . CSF-1 schellt bewosst Iwwerliewe an Prolifératioun via verbindlech bis seng receptor vun der c-fms Gentherapie encoded [22]. Virdrun Studie weisen dass CSF1 wichteg Roll an der Promotioun entholl angiogenesis zu leiomyosarcoma [23] an Lewis haett carcinoma Zellen via VEGF Aféierungs- Nofolleg [24]. Aligeti S et al. ugeholl, datt CSF1 positiven Effet vun der Uschloss un pleural mesothelial Zellen, Iwwerfall a Prolifératioun vu endometrial epithelial Zellen [25] huet. A gefördert serum Konzentratioune vun huet mat Krankheet Etapp, lymph Node Metastasen an aarme hätt an colorectal Kriibs Patienten soll ginn [26]. Hei identifizéiert mir CSF1 engem direkten Zil vum Mir-214 war am gastric Kriibs duerch luciferase assays a weider duerch westlech blot Analys confirméiert. Eis Date proposéiert datt downregulation vum Mir-214 kënnen d'Prolifératioun, Migratioun an Invasioun Kapazitéit vun gastric Kriibs Zell duerch d'CSF1-mediated Signal Passerelle vereinfachen. VerfÜgung An der leschter Etude, Ueda et al. gewisen, datt mat encadréiere globale Iwwerliewe vun 101 Patienten verbonne war relativ héich Ausdrock vu Mir-214 am GC (kritt vun der University of Tokyo a Hiroshima University) [20], allerdéngs uginn eis Daten dass Mir-214 net vill mam Patient soll war Resultat. Mir huelen un, datt dës Ënnerscheeder an de verschiddene miRNA Ausdrock ze erkennen Methoden wéinst kann, Echantillonen, a Suivi Mol tëschent hir Fuerschung an eist. Ueda et al. ënnerdeelt gouf d'Echantillonen an zwou Klassen (héich an niddreg Ausdrock) mat dem mengen Niveau vun miRNA Ausdrock gemooss op engem microRNA microarray als loung, während eiser Divisioun vun héich an niddreg Ausdrock Gruppen baséiert op der Steiren Niveau vum Ausdrock vun der qPCR Resultater verdengten . Intriguingly, an virdrun Studien, huet Mir-214 Ausdrock ginn an spillt Kriibs Verglach mat normal spillt Zellen vun Yang et al ze ginn upregulated gewisen. [27] hierkommen Géigendeel Resultater goufen duerch Nam et al gemellt. [28]. Zwee vun dësen zwou Gruppe benotzt miRNA microarrays der miRNA Ausdrock ze iwwerpréifen. Sou, kënne mer net d'Méiglechkeet vir, dass microarray Analyse net esou sensibel a korrekt kann de Begrëff Profiler vun enger bestëmmter miRNA an analyséiert. Well fir den Effet vum Mir-214 op der Iwwregens hätt vun Patienten mat GC, deelweis konsequent mat de Resultater vun Ueda et al., Mir hunn och eng Tendenz, datt héich Ausdrock vu Mir-214 fir Iwwerliewe encadréiere war wann de Suivi Zäit war méi wéi 40 Méint (iwwerschloen Verhältnis (SH) = 1.19 fir globale Iwwerliewe, HR = 1,23 fir Réckwee-gratis Iwwerliewe), wéi zu Dorënner 2 gewisen, obwuel den Trend net statistesch relevant war. An all Fall, weider Ermëttlungen mat engem groussen Kohort a verschidden Experimenter Astellunge sinn néideg dës Fro ze klären. VerfÜgung Als fir d'discordance vum Mir-214 lentivirus vectors a Virleefer transfection assays, mir watfir et ass eng spezifesch Konsequenz vun der biologescher Aktivitéite vun Mir-214. Eng moderéiert a stabil Ausdrock anstatt zéngdausende vu Net-physiopathological overexpresion vläicht Mir-214 Funktioun ze hëllefen. VerfÜgung deelgeholl zesummen, mir bewisen, dass Mir-214 méi am GC reduzéiert huet, virun allem zu metastatic Stoffer, proposéiert e Potenzial Roll vum Mir-214 zu lymph Node Metastasen virausgesot. Eis ROC rop Analyse zougedréckt a dem relativ héich Spezifizitéit an Empfindlechkeet vun Mir-214 fir GC Fäll aus nontumourous Kontrollen discriminating, an ofgetrennt Patienten mat an ouni Node Metastasen lymph, also potenziellen Déngscht wéi e Roman uweist fir GC an lymph Node Metastasen wourop, déi wäert duerstelle de Medeziner Gestioun vun GC ze vereinfachen. Mä eis Daten uginn dass Mir-214 keen Effekt op Patient hätt huet, wat beweist, datt Mir-214 eleng net genuch ass Patient Iwwerliewe ze beaflossen.
Aféierung VerfÜgung
spontan a Methode
Resultater VerfÜgung
> 0,05). Vun Note, ënnerdeelt mir de Patienten an héich-Ausdrock an héich-Ausdrock Gruppen baséiert op der Steiren Niveau vum Mir-214 Ausdrock, an Kaplan-Meier Iwwerliewe Kéiren zougedréckt kee groussen Korrelatioun tëscht Mir-214 Ausdrock an Réckwee-gratis Iwwerliewe (Dorënner 2C , iwwerschloen Verhältnis (SH) 1.23, 95% Vertraue nolauschterer (CI) 0.6596-2.285; P VerfÜgung = 0.5781) oder allgemeng Iwwerliewe (Dorënner 2D, HR 1,20, 95% CI 0.6667-2.151; P VerfÜgung = 0.5832) an Patienten mat GC. VerfÜgung
> 0,05) an gastric Zell Linn GES-1 och (Daten dës net). An Tatsaach, hunn mir eng Tendenz vum pro-apoptosis Fähegkeet vum Mir-214 Virleefer vun MKN45 Zell Linn (Dorënner S2M-N, P VerfÜgung = 0.0606), Ee, d'Differenz net statistesch relevant war. VerfÜgung
= 0,0227 an 0,0093, respektiv, fir MKN45 an BGC823 Zell Linnen). Well wann Mir-214 inhibitor transfected war, war vun 34,49% an 42,25% vun MKN45 an BGC823 Zellen luciferase Aktivitéit fräi Verglach mat de Kontrollen (Dorënner 6C, P VerfÜgung = 0,0115 an 0,0085, bzw.). VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung
Darmbakterien verbonne mat méi staarke Muskelen bei eelere Leit
Spider Venom Peptid kéint hëllefen de Péng am irritablen Darmsyndrom ze stoppen
Lungemikrobiom viraussoen d'Gravitéit vun der COVID-19 Krankheet
Antike Primatmikrobiome kënne méi Informatioun iwwer d'mënschlech Entwécklung ginn
Firwat COVID-19 Patienten méi pathogen Bakterien an hiren Nues hunn
Dee Pepto hëlleft Wahrscheinlech Ären Ulcus net
Detailléiert Kaart vum mënschlechen Zongmikrobiom
Eng nei Studie am Journal publizéiert Zellberichter am Mäerz 2020 bericht dBenotzung vu fortgeschrattem a schnelle Spektral Imaging Techniken fir eng detailléiert Kaart vu mikrobielle Gemeinschaften
Patienten mat IBS kéinte vu Vitamin D Ergänzunge profitéieren,
proposéiert nei Fuerschung Laut enger neier Etude vu Fuerscher vun der University of Sheffield, Vitamin D Ergänzunge huelen kann hëllefen déi schmerzhafte Symptomer vum Irritable Bowel Syndrome (IBS)
Lungemikrobiom viraussoen d'Gravitéit vun der COVID-19 Krankheet
En neit Virdruck Fuerschungspabeier gepost op medRxiv * Server fonnt Ännerungen am Lungemikrobiom wärend engem schwéieren akuten respiratoresche Syndrom Coronavirus 2 (SARS-CoV-2) Infektioun beaflos