PLoS One: Klinikopatológiai jelentősége mikroRNS-214 gyomorrákban és hatása a sejtbiológiai Behaviour

absztrakt

Egyre több bizonyíték jelzi, hogy számos mikroRNS amelyek részt vesznek a tumorigenezis és progressziójában gyomorrák, míg a klinikai jelentősége mikro-RNS-214 a gyomorrák kevéssé tisztázott, és a pontos szerepe a mikro-RNS-214 gyomorrák ismeretlen marad. A jelen vizsgálatban, expressziós szintjeit mikro-RNS-214 80 gyomorkarcinóma szövetekben, 18 nontumourous gyomor szövetek, és 4 fajta gyomorrák sejtvonalak mennyiségileg reverz transzkripció, majd valós idejű kvantitatív polimeráz láncreakció (RT-qPCR), és a kapcsolat a mikro-RNS-214 expresszió és cliniopathological jellemzők, beleértve a prognózis tárni. Hogy vizsgálja meg a lehetséges szerepe mikroRNS-214 gyomorrákban sejt biológiai viselkedése, végeztünk sejtburjánzást, az apoptózis, a migráció és behatolás vizsgálatokban négy gyomorrák sejtvonalakon és halhatatlanná gyomor sejtvonal in vitro katalógusa. Eredményeink azt mutatták, hogy a mikro-RNS-214-ben drámaian csökkent expressziót a gyomorrák szövetek és gyomor rákos sejtvonalakban, míg nontumourous gyomor szövetekben. Lépésenkénti downregulációját mikroRNS-214 expresszió volt megfigyelhető között nontumourous gyomornyálkahártya, nonmetastasis gyomorrák szöveteket, és áttétek gyomorrák szövetekben. A kifejezés a mikro-RNS-214 szignifikánsan fordítottan arányos nyirokcsomó-metasztázis és tumor méretét, de nem volt összefüggés a beteg prognózisa. Méhen kívüli expressziója mikro-RNS-214 képes gátolni a sejtek migrációját és invázióját képesség SGC7901 és MKN45 gyomor rákos sejteket. És kiütése mikro-RNS-214 jelentősen megkönnyítette a sejtproliferációt, a migrációt és inváziót egy sejt-specifikus módon MKN28, BGC823 GES-1 sejtekben. Kolónia stimuláló faktor 1 (CSF1) azonosították, mint a cél gén mikro-RNS-214. Összefoglalva, a adatok kimutatták, hogy a mikro-RNS-214 egy ígéretes új biomarker nyirokcsomó-metasztázis gyomorrákos betegeknél. És megállapította, hogy downregulációját mikroRNS-214 szabályozhatják a proliferáció, invázió és a migráció a gyomorrák sejtek közvetlenül megcélzó CSF1. Katalógusa

Citation: Wang YW, Shi DB, Chen X, Gao C, Gao P (2014 ) Klinikopatológiai jelentősége mikroRNS-214 gyomorrákban és hatása a sejtbiológiai magatartás. PLoS ONE 9 (3): e91307. doi: 10,1371 /journal.pone.0091307 katalógusa

Szerkesztő: Terence Lee, University of Hong Kong, Hong Kong katalógusa

Beérkezett: április 25, 2013; Elfogadva: február 11, 2014; Megjelent: március 10, 2014 katalógusa

Copyright: © 2014 Wang et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Forrás: Ez a munka támogatta a Nemzeti Természettudományi Alapítvány Kína (No. 81172351 és 81372856). A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa

Bevezető

a gyomorrák (GC) a negyedik leggyakoribb daganat a második vezető daganatos halálok világszerte. [1] Annak ellenére, hogy jelentős tanulmányok tumorgenesisben és progressziójának GC, patogenezisének e komplex betegség nehezen érthető. Így is alapvető klinikai érték azonosítására és jellemzésére a pontos molekuláris mechanizmus részt vesz a fejlesztés és progressziójában gyomorrák.

Eltekintve a hagyományos genetikai és epigenetikai megváltozása fehérje-kódoló onkogének és a tumor-szuppresszor gének a karcinogenitási GC, nem fehérje-kódoló RNS-ek, főleg mikroRNS (miRNS), alakultak, mint egy új játékos, hogy fényt derítsen a mechanizmus GC fejlesztés [2]. MiRNS-ek endogén 19-25 nt nem kódoló RNS-ek, amelyek negatívan szabályozzák a protein expresszióját elősegítő mRNS lebomlás vagy represszáló fehérjeszintézist, kölcsönhatás révén a 3'-UTR-target mRNS-ek. Egyre több miRNS leírták, hogy részt vegyenek a karcinogenezis és fejlesztése az emberi rákos megbetegedések, beleértve a GC [2] - [4]. Ezek a miRNS általában diszreguláit és a funkció akár tumorszuppresszorok vagy onkogének a kialakulásában és progressziójában a humán karcinómák. Például Tsukamoto és munkatársai. kimutatták, hogy a miR-375 downregulált gyomor karcinóma és fejti ki a proapoptotikus hatása révén mTOR gátlása miatt csökken PDK1, egy kináz, amely foszforilezi az Akt, és viszont, elnyomja a PI3K /Akt útvonal [5]. Míg a miR-21 Azt találtuk, hogy elősegítik a tumor proliferációját és invázióját GC által negatívan szabályozó fontos tumorszuppresszorok, mint a PTEN, PDCD4, és RECK, majd ruházza GC sejtek fokozott invazivitásának és a képesség, hogy elkerülje anoikis [6] - [8 ]. Korábban azt találtuk, hogy a miR-145-ben downregulált a sokrétű emberi rákos sejteket, és elnyomott az invázió-metasztázis kaszkád GC gátlásával N-kadherin fehérje fordítás [9], [10].

Jelenleg, a klinikai jelentősége mikroRNS-214 (miR-214) a betegek prognózisát GC nehezen érthető, és a pontos szerepe a miR-214 GC továbbra is tisztázatlan. Itt azt vizsgáltuk, a szövetség között miR-214 expresszió és cliniopathological paramétereit, valamint értékelte a hatását a miR-214 biológiai viselkedés, beleértve a sejtek szaporodását, az apoptózis, a migráció és invázió GC sejteket. Katalógusa

Anyagok és módszerek

a szövetmintákat

Tissue mintákat készítettünk hasonló módon, mint a korábban ismertetett [9]. Röviden, 80 minta (65 férfi, 15 nő; 58,3 ± 17,49 és 61,5 ± 9,162 éves -kal) a GC szöveteket szereztünk átesett betegek sebészi eltávolítását Qi Lu Kórház Shandong Egyetem 2004-től 2006-Nontumourous gyomornyálkahártya több, mint 3 cm távolságban tumorok véletlenszerűen kiválasztott 18 E betegek és alkalmaztunk kontrollként. Egyik beteg részesült preoperatív kezelésnek, mint például sugárterápia vagy kemoterápia. A mintákat gépelt szövettanilag szerint Lauren és az Egészségügyi Világszervezet (WHO) által besorolások (IARC Press, Lyon, 2000), és kategorizált szerint UICC 2002 TNM osztályozás. Katalógusa

Etikai nyilatkozat katalógusa

a tanulmány által jóváhagyott Etikai Bizottsága School of Medicine, Shandong Egyetem, Shandong, Kína (jóváhagyási kód: 201101015). Kaptunk írásos beleegyezését adta az összes résztvevők a vizsgálatba. Katalógusa

Sejtkultúra katalógusa

Négy fajta ember GC sejtvonalak az American Type Culture Collection (MKN28 és MKN45 Manassas, VA , USA) és a Shanghai Cancer Institute (BGC823 és SGC7901, Shanghai, Kína). A halhatatlanná gyomor nyálkahártya epiteliálissejtvonalából GES-1 kaptuk a pekingi ComWin Biotech Co., Ltd. (Peking, Kína). A sejteket tartottunk fenn RPMI 1640 tápközegben, kiegészítve 10% magzati borjúszérummal (FBS), párásított sejt inkubátorban, atmoszférában, 5% CO _{2 37 ° C-on.}

miRNS extrakció

egy miRNeasy FFPE Kit (Bioteke, Peking, Kína) izolált miRNS paraffinba ágyazott szövetek, a gyártó utasításai szerint. A teljes RNS-sejtvonalak extraháltuk Trizol reagens (TaKaRa, Dalian, Kína), a gyártó utasításai szerint. A minőség és a mennyiség az RNS mintákat megbecsülhetjük standard spektrofotometriás módszerekkel (BioPhotometer plusz; Eppendorf, Hamburg, Németország), és hígítottunk 2 ng /

• PLoS One: Emelkedett plazma D-dimer-szint korrelál a hosszú távú túlélés a gyomorrák Patients
• PLoS One: HIF-1 alfa túltermelése összefüggést mutat a rossz Teljes túlélés és betegségmentes túlélés a gyomorrákos betegek utáni Gastrectomy