PLoS ONE: Сыворотка HER2 является потенциальным заменителем ткани HER2 статуса в рака желудка: систематический обзор и мета-Analysis

Абстрактный
<р> Определение уровня экспрессии эпидермального фактора роста человеческого рецептора 2 (HER2) в опухоли ткань имеет большое значение для персонализированной терапии рака желудка. Хотя некоторые исследования изучали, может ли сыворотки HER2 служить в качестве суррогата ткани HER2 статуса, результаты были противоречивыми. Поэтому мы провели мета-анализ опубликованных клинических исследований в попытке решить эту проблему. PubMed, EMBASE, веб-математических наук, библиотека Cochrane и Science Direct опрашивались для соответствующих исследований, которые могли бы обеспечить достаточные данные для построения 2 × 2 таблицы сопряженности. Качество исследований, включенных в мета-анализ был оценен в соответствии с пересмотренной оценки качества диагностической точности исследований (QUADAS-2) критериев. Отношение объединяли чувствительность, специфичность и диагностические коэффициенты (ДОР) были рассчитаны для приемлемых исследований. Резюме приемник операционной характеристической кривой (СДОК) была построена и площадь под СДОК (Ausroc) был использован для оценки общей диагностической эффективности. Восемь исследований, содержащих в общей сложности 1170 участников были включены в наш мета-анализ. Объединенную чувствительность, специфичность и ДОР были 0,39 (95% ДИ: 0.21-0.61), 0.98 (95% ДИ: 0.87-1.00), и 27 (95% ДИ: 9-81), соответственно. Ausroc был 0,77 (95% ДИ: 0.73-0.80) и Дикс воронкообразный график предложил отсутствие систематической ошибки (р = 0,91). Мета-регрессионный анализ показал, что пороговый эффект был основным источником неоднородности. Анализы для оценки уровней HER2 в сыворотке весьма специфичны и демонстрируют умеренную диагностическую производительность состояния тканей HER2 при раке желудка
<р> Образец цитирования:. Чжан K, Цуй J, Xi H, Бянь S, Ma L, W Шен, и др , (2015) Сыворотка HER2 является потенциальным заменителем ткани HER2 статуса в рака желудка: систематический обзор и мета-анализ. PLoS ONE 10 (8): e0136322. DOI: 10.1371 /journal.pone.0136322
<р> Редактор: Эльда Tagliabue, Fondazione IRCCS Istituto Nazionale дей Tumori, ИТАЛИЯ
<р> Поступило: 17 марта 2015; Принято: 2 августа 2015 года; Опубликовано: 20 августа 2015
<р> Copyright: © 2015 Чжан и др. Это статья открытого доступа распространяется в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution, которая позволяет неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе, при условии, что оригинальный автор и источник кредитуются
<р> Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в пределах своих подтверждающей информации, файлов бумаги и
<р> Финансирование:. работа выполнена при финансовой поддержке грантов от Национального научного фонда природы Китая, грант от Народно-освободительной армии медицинской техники (№№ 81272698, 81101883, 81172368). Проект Содействие развитию молодежи (13QNP185), грант от специального научно-исследовательского фонда сектора здравоохранения из Национального здоровья и планирования семьи комиссии Китая (№ 201302016), грант от исследований в области здравоохранения капитала и развития специальной (№ 2011 -5001-01), грант от медицинского и исследовательского проекта фонда PLA (No.11BJZ17), грант от ключевого проекта медицинских технологий PLA научных исследований в 12-м научно-исследовательских проектов в 12-й пятилетний план (№ BWS12J049), а также грант от проекта при поддержке программы исследований и разработок Национальный Высокие технологии Китая (№ 2012AA02A504)
<р> Конкурирующие интересы:.. Авторы заявили, что не существует никаких конкурирующих интересов

Введение

в последние несколько лет мы стали свидетелями новаторским достижений в области применения персонализированного лечения на основе генетического фона пациента. Для рака желудка, 2010 фазы III трастузумаб рак желудка (ТОГА) клиническое исследование продемонстрировало эффективность и безопасность трастузумаба в управлении эпидермального фактора роста человеческого рецептора 2 (HER2) -положительным передовые желудка или желудочно-пищеводного соединения рака (GEJ) [1 ]. HER2 кодируется HER2 /Neu
онкоген и принадлежит к HER семейству рецепторов тирозинкиназы. Эти рецепторы играют центральную роль в регуляции различных клеточных процессов, включая рост, выживание и миграции, и представляют собой молекулярные кандидаты терапевтические мишени в диапазоне типов рака [2]. Гиперэкспрессией HER2 наблюдается у 6% до 35% от рака желудка [3] и соотношение между этой избыточной экспрессии и прогноз пациента остается спорным [4-6]. HER2-положительных пациентов с раком желудка претендовать на трастузумаба на основе терапии, и, следовательно, определение статуса HER2 в ткани опухоли пациента имеет большое значение перед введением анти-HER2 целенаправленного лечения.
<Р> В современной клинической практике , образцы тканей, полученные с помощью хирургического вмешательства или биопсии, в основном используется для оценки HER2 статус пациента после анализа с помощью иммуногистохимии (IHC) или флуоресценции в гибридизация (FISH) в [7, 8]. Тем не менее, эти инвазивные процедуры не могут быть выполнены несколько раз для проверки динамических изменений статуса HER2 во время лечения пациента или последующих мер, поскольку они представляют собой непрактичные методы для ответа мониторинга лечения. Кроме того, осложнения, связанные с биопсией могут встречаться [9]. Кроме того, противоречивые результаты IHC или анализа FISH, которые могут возникнуть из-за различий в процедурах обработки образцов между различными лабораториями, наличие нестандартных анализов и скоринговых систем, или присущего гетерогенности в опухолевых клетках, также может оказаться проблематичным [10, 11]. С учетом таких потенциальных недостатков, исследователи стали более заинтересованы в разработке более удобных, воспроизводимые и менее инвазивные методы обнаружения для выявления HER2-положительных пациентов.
<Р> Уровень экспрессии сывороточного HER2 представляет собой неинвазивный биомаркеров, которые могут дополнить текущий HER2 испытания. Исследования показали относительно высокий уровень соответствия между повышенным уровнем сывороточного HER2 и положительным статусом HER2 в опухолевых тканях [12, 13]. Кроме того, было сообщено, что сыворотка против HER2 потенциально могут быть использованы для мониторинга рецидива рака молочной железы [14]. По сравнению с биопсией, серологический анализ HER2 обеспечивает более воспроизводимую и подходящий вариант в качестве теста общего скрининга для определения характеристик генетического профиля больного раком, и, следовательно, будет в значительной мере способствовать области таргетной терапии рака. Что касается рака желудка было проведено несколько клинических центрах исследовали корреляции между сывороточным HER2 и клинико-патологическими характеристиками в дополнение к ткани HER2 статуса больных [15-17]. Изменения в сыворотке уровней HER2 во время химиотерапии были коррелируют с ответом на химиотерапию у больных с HER2-позитивными опухолями [18]. Тем не менее, эти исследования отличаются во многих аспектах, таких как размер когорты, время выборки, опухоль-узел-метастазирования (TNM) стадии, а также пороговые значения, все из которых осложнит возможность сделать окончательные выводы.
<Р> В это исследование поэтому мы провели мета-анализ для исследования диагностической точности сыворотки для определения HER2 опухоли HER2 статуса. Насколько нам известно, эта работа не была выполнена ранее.

методы
<р> Мета-анализ был проведен в соответствии со стандартными руководящими принципами для систематических обзоров диагностической точности испытаний [19] и использовали товары Preferred отчетности для систематических обзоров и мета-анализов (PRISMA) заявление [20] в качестве шаблона для представления (S1 PRISMA Контрольный список).

стратегия поиска
<р> PubMed, EMBASE, Web науки, были найдены Кокрановская библиотека и наука Прямые электронные базы данных для записей, записанных с момента создания базы данных по 17 января 2015. элементы следующих трех категорий были применены в различных комбинациях при допросах баз данных: ( "сыворотки" или " растворимый ") и (" эпидермального роста человеческий рецептор фактора 2 "или" HER2 "или" C-ErbB-2 ") и (" рак желудка "или" желудка новообразование "или" опухоль желудка "). ограничение английский язык был применен для всех поисков. Обзорные статьи и ссылки на списки были также вручную просеивали для соответствующих исследований.

Исследование выбора
<р> Два исследователя независимо друг от друга рассмотрел абстрактное и название каждой публикации, чтобы определить те статьи, которые, вполне вероятно, чтобы оценить диагностическое значение сывороточного HER2 при раке желудка. Когда были определены такие статьи с полными текстами были дополнительно экранированы для оценки исследования значимости. Приемлемые исследования были выбраны в соответствии со следующими критериями включения: I) уровни экспрессии сыворотке и ткани HER2, были обнаружены у больных раком желудка; б) диагноз рака желудка была подтверждена гистологической или цитологическое обследование; III) достаточное количество данных было доступно для построения таблица сопряженности 2 × 2. Критерии исключения были следующими: I) дубликатами; II) тезисов конференции, комментарии, письма и испытания на животных; III) недостаточно данных для расчета чувствительности и специфичности, то есть, ложные и истинные плюсы и минусы не были доступны. Когда существует неопределенность в отношении критериев отбора, обсуждение будет проходить между двумя следователями и старшим следователем, пока не был достигнут консенсус.

извлечение и качество данных
оценка <р> Два исследователя независимо друг от друга извлекали данные из каждого исследования , например, фамилии первого автора, год издания, страны происхождения, обучающихся участников, TNM стадии, основным подтипа опухоли (классификация Лорен), методы обнаружения сыворотки HER2, отсечения значение, а число верных срабатываний (TP ), ложных срабатываний (FP), ложных негативов (FN) и истинные негативы (TN). Когда различные пороговые значения были использованы в том же исследовании, были извлечены предварительно заданное значение и связанное с ним чувствительность и специфичность [16, 21].
<Р> методологическое качество каждого из приемлемых исследований оценивали с помощью пересмотренной оценки качества диагностической точности исследований (QUADAS-2) критерии [22], которые состоят из четырех ключевых областей, которые обсуждают выбор пациента, тест-индекс, эталонными стандартными и впадающие и сроки. Каждый домен имеет дело с риском смещения в то время как первые три домена также имеют дело с проблемами в отношении применимости. Сигнализации вопросы были включены, чтобы помочь судить с точки зрения риска смещения и проблем с применимости. Вопросы не ответил, как "Да", "нет" или "неясными" и сформулированы таким образом, что "да" означает низкий риск смещения /проблем и "нет" означает высокий риск смещения /проблем.

Статистический анализ
<р> 2 × 2 таблица была построена для расчета чувствительности, специфичности, положительные отношения правдоподобия (ГНР), отрицательного отношения правдоподобия (NLR) и диагностическое отношение шансов (DOR) с помощью двумерных моделей регрессии, в соответствии с рекомендациями Точность Cochrane диагностической проверки рабочей группы [19]. Двумерную модель учитывает потенциальный эффект компромисс между чувствительностью и специфичностью [23]. ГНР рассчитывается следующим образом: чувствительность /(1-специфичность) в то время как NLR рассчитывается следующим образом: (1-чувствительность) /специфичность. Как правило, PLR > 5,0 и NLR &л; 0,2 были признаны клинически полезным [24, 25]. ДОР является превалирование независимый индикатор, который сочетает в себе чувствительность и специфичность, и рассчитывается как: PLR /РНБ [26]. Сводный приемник эксплуатационная характеристика (СДОК) кривая была построена и площадь под SROC (Ausroc) вычисленной.
<Р> Я
^{2
статистики [27], который описывает процент от общего изменения во всех исследованиях, которое связано с неоднородностью, а не случайно, была использована для оценки между исследованиями гетерогенность, на сумму свыше 50% указывает на существование значительной неоднородности. Я
2
статистика вычисляется следующим образом: 100% × (Q-ДФ) /Q, где Q является гетерогенность статистики и ДФ Кокрена степеней свободы. Значение Я
2
колеблется от 0-100%, при этом 0% не подразумевая не наблюдается гетерогенность, а большие значения указывает на возрастающую гетерогенность. Неоднородность вызванное пороговый эффект оценивали с помощью коэффициента корреляции Спирмена, как описано ранее [28-30]. Univariable и многомерные анализы мета-регрессии были проведены для определения количества Непороговых эффекта гетерогенности между исследованиями. Дикс воронку участок был применен для оценки систематической ошибки и уровня значимости а = 0,05 использовали для определения статистической значимости [31].
<Р> Все анализы проводились с использованием программного обеспечения Stata (версия 12.0, StataCorp, College Station, Texas США).}

Результаты
<р> После исключения дупликации, первоначальный поиск выдал 1504 записей, из которых было рассмотрено 15 статей, потенциально пригодных для включения в мета-анализ. После рассмотрения полнотекстовых статей, еще семь были исключены [32-38], в результате чего в общей сложности восемь статей для обобщенного анализа [15-18, 21, 39-41]. Блок-схема подведения итогов процедуры отбора изучения права показана на рис 1.
<р> В общей сложности 1170 пациентов с раком желудка были включены в мета-анализ с медианным возрастом пациента среди исследований в пределах от 53 до 71 лет. Четыре исследования были проведены ретроспективно образом, в то время как остальные не уточнили конструкцию. Семь исследований брали пробы крови до какого-либо лечения и в одном исследовании были взяты образцы после лечения. Распространенность гиперэкспрессией HER2 в больных раком желудка во всех исследованиях колебалась от 6,7% до 61,6%. Оптимальное отсечка значение было предварительно указано в пяти исследованиях. В этих исследованиях использовали концентрацию в сыворотке крови HER2 15,0 нг /мл (Управлением по контролю за продуктами и лекарствами, рекомендованных для рака молочной железы) или 15,2 нг /мл (рекомендуется в инструкции изготовителя для соответствующего коммерческого набора). Оставшиеся три исследования использовали концентрацию сыворотки HER2 здоровых лиц управления, как точка отсечки. Для определения уровней сывороточного HER2, а хемилюминесценции иммунологические (CLIA) был использован в пяти исследованиях и твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA), был использован в остальных трех исследованиях. Индивидуальные характеристики исследования приведены в таблице 1.
<р> Качество включенных исследований оценивали по QUADAS-2. Графическое резюме методологической оценки включенных исследований показана на рис 2.
<р> Для включенных исследований, общая складочный чувствительность составила 0,39 (95% ДИ: 0.21-0.61) и объединяют специфичность 0,98 ( 95% ДИ: 0.87-1.00; рис 3). Объединенную ГНР и NLR были 16.6 (95% ДИ: 4.5-61.5) и 0,62 (95% ДИ: 0.46-0.85), соответственно. Площадь под SROC был 0,77 (95% ДИ: 0.73-0.80; Рис 4) и ДОР было 27 (95% ДИ: 9-81). Результаты приведены в таблице 2. Фаган номограмма был использован для определения вероятности после теста на основе фиксированного предтестовой вероятности (рис 5).
<Р> Изменчивость между исследованиями (т.е. гетерогенность) было обнаружено, что иметь высокий уровень как чувствительность ( Я
^{2
= 80,27%) и специфичность ( Я
2
= 95,67% ). Затем мы исследовали, существует ли пороговый эффект, где вариации чувствительности и специфичности коррелируют с различиями в отсечения стоимости сыворотки HER2 в включенных исследованиях. Удивительно, но двумерную модель анализа показал, что существует отрицательная корреляция между чувствительностью и специфичностью и что 100% гетерогенности, вероятно, будет связано с пороговым эффектом. Коэффициент корреляции Спирмена был -1. Этот тип эффекта часто может привести к плечевым типа кривой, когда чувствительность заговор против специфичности [23], как показано на рис 4. Мы также исследовали другие потенциальные источники гетерогенности мета-регрессионного анализа. TNM стадии, пациент размер группы, время отбора проб, метод обнаружения и этнической принадлежности были использованы в качестве регрессоров. Univariable мета-регрессионный анализ показал, что размер группы пациентов составила гетерогенности чувствительности, в то время как TNM стадия, время выборки и этнической принадлежности составила гетерогенности специфичности (рис 6). Тем не менее, когда все вышеуказанные ковариатов были включены в совместную модель анализа, мета-регрессионный анализ показал, что ни один не были ответственны за гетерогенность (р значения 0,66, 0,07, 0,68 0,79 и 0,15 для стадии, размер группы пациентов, времени выборки, обнаружение способ и этнической принадлежности, соответственно).
<р> Наконец, Дикс воронкообразный график указывает на отсутствие систематической ошибки (р = 0,91) (рис 7).}

Обсуждение
<р> HER2-мишенью терапия требует определения статуса HER2 у больных раком. В клинической практике, хирургические образцы и биопсии часто используются для решения этой проблемы. Тем не менее, хирургические образцы, как правило, не доступны для пациентов, которые не требуют удаления опухоли и биопсию ткани может дать ложно-отрицательный результат из-за гетерогенной экспрессии HER2 в опухоли [42]. Хирургические образцы и биопсию ткани обеспечивают лишь ограниченную информацию о HER2 статус пациента, потому что они не позволяют в режиме реального времени картину состояния HER2 во время прогрессирования и лечения заболевания. В отличие от этого, уровни сывороточного HER2 может быть легко и неоднократно исследовали, а также в менее инвазивным способом. Сыворотка мониторинг HER2 также менее трудоемким, чем хирургические методы и имеет потенциал, чтобы быть выполнены с помощью автоматизированных тестов, позволяющих провести объективный анализ. Несколько исследований показали высокий уровень согласованности между концентрацией сыворотки HER2 и тканевой HER2 статус [12, 43]. В нашем настоящем мета-анализа, мы обнаружили, что в сыворотке крови HER2 показали высокую специфичность для обнаружения тканей HER2 статуса при раке желудка.
<Р> Ausroc обеспечивает глобальную оценку диагностической эффективности. В соответствии с предлагаемыми руководящими принципами для интерпретации значения Ausroc [44], сыворотка HER2 была умеренной (0,7 &Лт; АУК &Лт; 0,9) диагностическая способность к различению HER2-положительных больных раком желудка с HER2-отрицательных пациентов. ДОР может принимать значения от нуля до бесконечности, причем более высокие значения указывают на более дискриминационный тест производительности. Наш объединенный анализ дали DOR 27, что указывает на умеренное диагностическое значение сывороточного HER2 в прогнозировании состояния опухоли HER2. В клинических условиях, важно знать, как конкретный результат теста предсказывает риск ненормальности, таким образом, отношения правдоподобия часто используются, которые указывают на степень, в которой данный тест будет повысить или понизить вероятность наличия заболевания [24]. Номограмма Фаган представляет собой графический инструмент, который помогает врачам использовать результаты испытаний, чтобы оценить вероятность пациента наличия заболевания [45]. В номограмме, линия, проведенная из предтестовой вероятности пациента (обычно оценивается в соответствии с местными данными о распространенности и опубликованных отчетов) через отношение правдоподобия теста пересекается с послетестовым вероятность, что указывает на возможность пациента иметь заболевание после того, как результаты испытаний известны. На рисунке 5, с объединенном PLR 17 и гипотетического предтестовой вероятности 16% (срединный распространенности для восьми исследований), использование сыворотки HER2 в качестве теста для лечения HER2-положительного диагноза опухоли поднимет пост-тест вероятность того, до 76%, что означает, что вероятность больных раком желудка, имеющих положительное увеличение состояния от 16% до 76% в случае положительного теста сыворотки HER2 HER-2 тканевым. И наоборот, при объединенном NLR 0,62, вероятность после теста снижается с 16% до 11% после отрицательного результата теста сыворотки HER2. Эти результаты показывают, что, следовательно, результат теста HER2 в сыворотке крови имеет умеренную диагностическое значение при определении статуса HER2 пациента.
<Р> Обобщённые оценки чувствительности и специфичности были связаны с Я
^{2 Сеть 80,27% и 95,67% соответственно, что подразумевает наличие гетерогенности. К нашему удивлению, анализ двумерным модель показала, что все гетерогенность, вероятно, будет следствием порогового эффекта. Пороговый эффект возникает, когда исследования, включенные в мета-анализе используют различные числовые значения отрезные, чтобы определить результат теста в качестве положительного [19]. Пороговые значения в диагностических тестах представляют собой серьезную озабоченность как различные пороговые значения могут привести к изменениям в чувствительности и специфичности. Из исследований, включенных в наш мета-анализ, пять используется отсечения точек, которые были рекомендованы либо Управлением по контролю за качеством пищевых продуктов и медикаментов для рака молочной железы или изготовителем конкретного коммерческого набора, используемого в исследовании. Остальные три исследования использовали уровни HER2 в сыворотке крови, рассчитанные для здоровых людей в качестве контроля точки отсечки и концентрации этих контрольных колебалась от трех исследований. Использование пороговых значений, которые были установлены для рака молочной железы может быть неподходящим для больных раком желудка. Пэн и др. определили оптимальный отсечения точки сыворотки HER2 в 10,65 нг /мл для больных раком желудка, что ниже, чем температура 15,0 нг /мл среза более обычно применяется [21]. При использовании этого 10,65 нг /мл порог, анализ РПЦ дали лучшую чувствительность по сравнению с полученным в 15,0 нг /мл порога (67,4% против 40%), в то время как специфичность осталась неизменной на уровне 78,9%. Однако в другом исследовании [16] было установлено, что оптимальная сыворотки HER2 отсечка значение для прогнозирования ткани HER2 статуса при раке желудка, чтобы быть 16,35 нг /мл, что превышает 15,0 нг /мл порог. Эти результаты свидетельствуют о том, что оптимальное значение сыворотки HER2 отсечка для пациентов с раком желудка, могут отличаться от используемых для больных раком молочной железы. Kong и др. даже предположили, что различные этнические группы имеют разные значения отрезные и что это может быть полезным для установления пороговых значений для каждой этнической популяции [46]. Это область исследований, которая явно требует дальнейшего изучения.
<Р> Чтобы исследовать другие потенциальные факторы, которые могут объяснить гетерогенность, мы также провели мета-регрессионного анализа. Multivariable мета-регрессионный анализ показал, что стадия TNM, размер группы пациентов, время выборки, метод обнаружения и этнической принадлежности не были ответственны за разнородности. Эта находка также подтверждается наш предыдущий результат, что гетерогенность, вероятно, будет полностью следствием порогового эффекта. Ввиду небольшого числа исследований, включенных в наш анализ, мы бы интерпретировать данные в более осторожной форме и позволяют предположить, что относительно небольшое число исследований, имеющих право может поставить под угрозу мощность теста.}

Важно иметь в виду потенциальные ограничения настоящего мета-анализа. Во-первых, несмотря на поиски углубленного нескольких электронных баз данных, количество включенных исследований было небольшим. Во-вторых, все исследования были из Азии, что может привести к некоторому присущего предвзятости. В-третьих, мы не могли определить идеальный отсечения значение для теста сыворотки HER2, поскольку исходные данные не были представлены в опубликованных отчетах. Масштабные перспективные рандомизированные исследования необходимы для решения этой проблемы. В-четвертых, результаты оценки качества, показанные на рис 2 показывают, что существует возможный риск предвзятости и опасения в отношении применимости в процедуре отбора пациентов во включенных исследованиях.
<Р> Насколько нам известно, наше исследование представляет собой впервые сообщил мета-анализ, направленный на оценку клинической полезности сыворотки HER2 в диагностике состояния опухоли HER2. Наш анализ показал, что в сыворотке крови HER2 имели высокую специфичность и умеренное диагностическое значение для различения HER2-положительных больных раком желудка с HER2-отрицательных пациентов, предлагая свой потенциал в качестве суррогатного биомаркера статуса HER2. Перспективные исследования в настоящее время необходимы для дальнейшего подтверждения наших выводов. В частности, способность предсказывать прогноз пациента и реакции путем мониторинга уровней HER2 в сыворотке крови во время прогрессирования заболевания и требует обращения дополнительного расследования.

Поддержка Информация
S1 PRISMA Контрольный список.
DOI: 10.1371 /journal.pone.0136322.s001
(DOC)

• PLoS ONE: Апоптические Влияние HIF-1 ингибирование Combined с глюкозой плюс инсулина на лечение рака желудка в условиях…
• PLoS ONE: Мультирезистентный сопротивления Связанные Длинные Некодирующих РНК Профиль Анализ экспрессии рака ж…