Ploche ONE: Differential Expression of fosfolipázy C Epsilon 1 je spojená s chronickou atrofickú gastritídou a žalúdočné Cancer

abstraktné

Pozadie

Chronický zápal hrá príčinnú úlohu v žalúdku iniciáciu nádoru. Identifikácia prediktívnych biomarkerov žalúdočné zápalu na vzniku nádorov nám pomôže rozlíšiť rakovinou žalúdka od atrofickej gastritídy a stanovenie diagnózy skorých štádií rakoviny žalúdka. Fosfolipáza C epsilon 1 (PLCε1) je hlásená hrať zásadnú úlohu pri zápale a vzniku nádorov. Táto štúdia bola zameraná na vyšetriť klinický význam PLCε1 v iniciácii a progresii rakoviny žalúdka.

Metodické /hlavných zistení

Po prvé, mRNA a proteín vyjadrenie PLCε1 boli analyzované reverznej transkripcie -PCR a westernovým prenosom za normálnych žalúdočnej sliznice epitelu bunkových línií GES-1 a žalúdočné nádorových bunkových línií AGS, SGC7901 a MGC803. Výsledky ukázali, ako mRNA a proteínové hladiny PLCε1 bola up-regulované v buniek karcinómu žalúdka v porovnaní s normálnou žalúdočnej slizničnej epiteliálne bunky. Po druhé, tento výsledok bolo potvrdené imunohistochemické zisťovanie v mikroskopickej sústavy tkanív, vrátane 74 párových rakovinou žalúdka a priľahlých normálneho tkaniva. Po tretie, čo nezávislosť imunohistochemická analýza vzoriek 799 chronických atrofickú gastritídou tkanív preukázali, že PLCε1 výraz v atrofickú gastritídou tkanivách boli down-regulované, pretože PLCε1 výraz bol negatívny u 524 (65,6%) atrofickú gastritídu. Okrem toho uzavreté klinickej tkaniva z atrofickú gastritídu ťažkú ​​a pacientov s karcinómom žalúdka boli použité ďalej potvrdzujú predchádzajúce výsledky analýzou mRNA a proteínových hladín expresie PLCε1 v klinických vzorkách.

Závery /významov

naše výsledky naznačujú, že PLCε1 proteín môže byť potenciálny biomarker pre odlíšenie karcinómu žalúdka z zápal lézie, a mohol by mať veľký potenciál v aplikáciách, ako je stanovenie diagnózy a predbežného varovania počiatočného štádia rakoviny žalúdka

Citácia :. J Chen wang W, Zhang T, Ji J, Q Qian, Lu L, et al. (2012) Differential Expression of fosfolipázy C Epsilon 1 je spojená s chronickou atrofickú gastritídou a rakoviny žalúdka. PLoS ONE 7 (10): e47563. doi: 10,1371 /journal.pone.0047563

Editor: Javier S. Castresana, University of Navarra, Španielsko |

prijatá: 22. júna 2012; Prijaté: 18.září 2012; Uverejnené: 15.října 2012

Copyright: © Chen et al. Toto je článok o otvorený prístup distribuovaný pod podmienkami Creative Commons Attribution licencie, ktorá umožňuje neobmedzené použitie, distribúciu a reprodukciu v nejakom médiu, za predpokladu, že pôvodný autor a zdroj sú pripísané

Financovanie :. Toto dielo bola podporovaná Národným Key základného výskumu programu Číny (973 projektov) (2010CB933900), New Century Vynikajúca Talent Ministerstva školstva Číny (NCET-08-0350), špeciálne infekčných chorôb Ťažiskovým projektom Číny (2009ZX10004-311), národné Natural Science Foundation of China (31170961 a 31100717), Shanghai Science and Technology Fund (12ZR1415800) a Shanghai Jiao Tong University fondu inovácie pre postgraduálnych študentov (z-340 - 007). Platcovia mal žiadnu úlohu v dizajne štúdie, zber a analýzu dát, rozhodnutie publikovať, alebo prípravu rukopisu

Konkurenčné záujmy: .. Autori vyhlásili, že žiadne konkurenčné záujmy neexistujú

Úvod

karcinóm žalúdka je štvrtým spoločné nádory v celom svete. Výskyt rakoviny žalúdka neustále rastie z dôvodu nedávnej zmeny životného štýlu a stravy návyky v Číne [1]. Čo sa týka rakoviny žalúdka, prežitie závisí na včasnú diagnostiku ochorení. Typicky, čím skôr sa detekuje a diagnostikovaná rakovina, bude úspešnejší liečba byť. Z tohto dôvodu je veľmi dôležité pre zlepšenie rýchlosti včasnej diagnostiky a začiatkom liečby rakoviny žalúdka. Snažili sme sa vytvoriť skoré rakoviny žalúdka systém predbežného varovania na základe génovej analýzy výraz microarray od roku 2005 [2]. Medzitým sme tiež dúfali, že nájde skoré rakovinové bunky žalúdočné in vivo
multi-mode cielené zobrazovacích techník [3] - [7]. Avšak, chýba z biomarkeru rakoviny žalúdka je stále hlavnou prekážkou pre včasnú diagnózu.

V súčasnej dobe je dobre prijímané, že Helicobacter pylori
( H. Pylori
) hrá kauzálny úlohu pri spúšťaní chronický zápal (gastritídu) vedúce k malignity, a bol klasifikovaný ako určitý ľudský karcinogén Medzinárodnou agentúrou pre výskum rakoviny (IARC) [8] - [10]. Okrem toho, na základe histologické rozdiely medzi chronické gastritídy a rakoviny žalúdka, v počiatočnej fáze rakoviny žalúdka je často detekovaná endoskopia. Preto skúmanie molekulárnych a biologických zmien, vrátane zosilnenie génov a aktiváciou, ktoré sa vyskytujú chronické gastritídy k rakovine žalúdka, môže poskytnúť niektoré nové pohľady na patológiu tejto choroby a nových prognostických markerov. Avšak, aktuálne, existuje len málo správ o riešenie osobitných biomarkerov, ktoré môžu odlišujú žalúdočné zápal žalúdočnej od vzniku nádorov.

fosfoinositidového špecifickej fosfolipázy C (PLC) predstavuje veľkú rodinu, ktorý katalyzuje hydrolýzu fosfatidylinozitol 4, 5-bisfosfát do dvoch dôležitých druhých poslov, diacylglyceroly a inositol 1,4,5-trisfosfatu, ktoré zahŕňajú šesť rodiny cicavčích PLC izoforiem (β, γ, δ, ε, ζ a η) [11] - [13]. Medzi nimi, PLCε je novo identifikovaná člen PLC rodiny [12]. Je to kľúčový downstream effecter Ras rodinných malých GTPase: Ras, Rap1 a Rap2 [12], [14], [15]

V poslednej dobe sa veľa práce oznámil, že PLCε1 hral kľúčovú úlohu pri vzniku nádorov a. zápal. Bolo zistené, PLCε1 expresie koreluje s ľudskou rakovinou močového mechúra a Vyradenie PLCε1 in vitro stroje a in vivo
inhiboval rast nádoru močového mechúra [16], [17]. Okrem toho bolo publikované, že PLCε1 je nadmerne exprimovaný v rakovinu kože [18]. V PLCε ^{- /- myší, vykazovala výraznú odolnosť proti vzniku nádorov a 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetát (TPA), zápal kože -induce [18], [19]. Následné štúdie ukázali, že PLCε hrá rozhodujúcu úlohu v črevnej spontánneho vzniku nádorov sa zosilnením angiogenézy a zápalu pomocou adenomatóznej polypózy coli (APC) Min /+ myší model [20].}

Okrem toho je PLCε aktivácia produkcie cytokínov v neimúnnych kožných buniek v rôznych zápalových reakcií, a túto dôležitú funkciu PLCε bola ďalej potvrdená u transgénnych myší exprimujúcich PLCε [21], [22]. Na druhej strane, PLCε bol vyžadovaný pre tumor necrosis faktor (TNF-a) indukovaná chemokiny (C-C motív) ligand 2 (CCL2) expresiu v ľudských keratinocytov a spolupracuje s nukleárnej faktor kappa B (NF-kB) dráhy [23]. Takáto funkcia PLCε zápalu je jedinečný medzi izoenzýmami PLC [13].

V poslednej dobe, dva jednonukleotidové polymorfizmus (SNP), rs2274223 a rs11187870 v PLCε1 loci boli identifikované ako nové citlivosti lokuse pre žalúdočné rakoviny u čínskych obyvateľstvo podľa genómu širokým analýzy génov združenia (GWAS) [24] - [26]. Tieto výsledky potvrdili asociáciu medzi PLCε1 a rizikom rakoviny žalúdka.

V tejto štúdii sme skúmali expresného profilu PLCε1 v žalúdku človeka tkanív, vrátane normálne, atrofická gastritída, a nádorovom tkanive, a urobil na hypotézu úloha PLCε1 v chronickom zápale a vzniku nádorov rakoviny žalúdka. V porovnaní s normálnymi tkanivami, sme zistili, že PLCε1 proteín bol vysoko exprimovaný v žalúdočných rakovinové tkanive, vzhľadom k tomu, že bola down-regulované v atrofické žalúdočných tkanivách. Naše výsledky silne naznačujú, že PLCε1 môže byť potenciálne sľubné biomarker pre odlíšenie rakoviny žalúdka od atrofickej gastritídy a môže byť potenciálny biomarker pre diagnostiku v ranom štádiu rakoviny žalúdka.

Materiály a metódy

Etické závierka

štúdia bola schválená etickou komisiou dňa Sun Yat-sen University Cancer Center a etiky výboru pričlenené nemocnice Shanghai Jiao Tong University a písomný informovaný súhlas bol získaný od každého subjektu.

bunkové línie

SV40-transformovanej nesmrteľné žalúdočné epitelové bunky GES-1 boli zachované v našom ústave a udržiavaný podľa odporúčaní [27]. Tri žalúdočné nádorových bunkových línií AGS, SGC7901 a MGC803 boli získané z Čínskej akadémie vied Cell Bank of Type Culture Collection a uchovávané v našom laboratóriu. Všetky bunkové línie boli kultivované v Dulbecco modifikovanom Eagle médiu (DMEM) doplnenom 10% fetálnym teľacím sérom (FCS) (Sigma Chemical, St. Louis, MO), 100 jednotiek /ml penicilínu a 0,1 mg /ml streptomycínu. Bunky boli udržiavané pri teplote 37 ° C vo vlhkej komore s 5% CO _2.

RNA extrakcia a reverznej transkripcie-PCR

Celková RNA z buniek a tkanív vzoriek bola extrahovaná za použitia činidlo TRIzolu (Invitrogen) podľa inštrukcií výrobcu. Extrahovaná RNA bola vopred ošetrená prosté RNázy DNázy a 2 ug RNA z každej vzorky bola použitá pre syntézu cDNA ošetrený náhodných hexamérov. Pre PCR-sprostredkovaná amplifikácie PLCε1 cDNA, počiatočné amplifikáciu za použitia PLCε1-špecifických primerov bola vykonaná pomocou kroku denaturácie pri teplote 95 ° C počas 10 minút a následne 30 denaturáciu cyklov pri teplote 95 ° C počas 60 s, nasadnutie primérov pri 55 ° C počas 30 s, a predĺženie primeru pri 72 ° C počas 30 s. Po ukončení cyklistických krokov, konečná extenzia pri teplote 72 ° C počas 5 minút sa vykonáva pred tým, než bola reakcia zastavená a skladovať pri teplote 4 ° C. Údaje boli normalizované na expresné geometrický priemer génu upratovanie glyceraldehyd-3-fosfát dehydrogenázy (GAPDH) pre riadenie variability expresných hladín. Reverzný transkripcie-PCR bol navrhnutý s použitím Primer Express Software verzia 3.0 (Applied Biosystems). Sekvencie sense a antisencie primery boli nasledujúce: 5'-GCAAGAAGTGGCCTTCTCAG-3 '(F) a 5'-GAACTTGAAGGGAGGGCATT -3' (R) pre PLCε1, 5'-GCTCCTCCTGAGCGCAAG-3 '(F) a 5' CATCTGCTGGAAGGTGGACA. - 3 '(R) pre GAPDH

Western Blotting

Bunky boli pozberané v vzorkovacím pufri [62,5 mmol /l Tris-HCl (pH 6,8), 2% SDS, 10% glycerolu a 5% 2-h-mercaptoetanolu]. Všetky čerstvé tkanivá boli založený na prášok v tekutom dusíku a potom lyžovanie pufrom vzorkovania. Koncentrácia proteínu bola stanovená testom Bradford (Bio-Rad Laboratories). Rovnaká množstvo proteínov, boli aplikované na 9% polyakrylamidovom gélu SDS (SDS-PAGE), oddelených elektroforeticky a prenesené na PVDF membrány (Amersham Pharmacia Biotech). Bola membrána inkubovaná s anti-králičie protilátkou (PLCε1 1: 250; Sigma). PLCε1 expresia bola detekovaná s chrenovou peroxidázou konjugovaná kozia anti-králičia IgG (1: 2,000; Amersham Pharmacia Biotech) a zvýšenou kit chemiluminiscencie (Amersham Pharmacia Biotech) podľa pokynov výrobcu. β-aktínu detekované anti-beta-aktínu králičie protilátkou (riedenie 1: 1,000, Sigma) bol použitý ako kontrola nanášania

pacientov, vzorky tkaniva a mikroskopické sústavy tkanív

Pacienti s atrofickú. zápal žalúdka a rakovina boli vybrané z pacientov, ktorí boli naplánované na endoskopiou hornej časti GIT pre rutinné skríning rakoviny žalúdka u pričlenené nemocnice Shanghai Jiao Tong University a Sun Yat-sen University Cancer Center od januára 2003 do decembra 2009. Vylúčili sme pacientov, ktorí mali obdržal protivredové látky alebo antibiotiká po dobu až dvoch mesiacov pred šetrením a tých, ktorí mali históriu rakoviny žalúdka, žalúdočný alebo duodenálny vred alebo žalúdočné chirurgii. . Hematoxylínom a eosínu (H &E) farbenie tkanív pacientov bola vykonaná na stanovenie histologický obraz

Stupeň atrofia bola klasifikovaná do troch úrovní závažnosti, v závislosti na vzhľade slizničných rias a ciev, a to nasledovne: miernej (transparentné jemné krvné cievy a žltkasté zafarbenie obmedzená na spodnej časti tela, so silnými slizničných rias), stredná (jasne priehľadné krvné cievy a žlto-šedivej zafarbenie až do strednej a hornej časti tela, s preriedili a prižmúrenými slizničných rias) a ťažkú (jasne transparentné veľké krvné cievy a graygreenish odfarbenie až k hornej časti tela, s vymiznutím slizničných rias na vzduchu insuflácie). Použitie týchto kritérií je odôvodnený predchádzajúce správy týkajúce sa súladu medzi endoskopie a histologických nálezov pre atrofickú gastritídu [28], [29]. Keď boli potvrdené aj endoskopické a histologické nálezy, 799 atrofické gastritída pacientov, vrátane 281 mierne, 265 stredným a ťažkým 253, v uvedenom poradí, boli zaradení do našej štúdie. Na 799 pacientov bolo zahrnutých 439 samca a samice 320, s mediálnym veku 35,6 rokov (rozmedzie 18-55 rokov).

Každá vzorka nádoru bol pridelený histologického stupňa založenú na Svetovou zdravotníckou organizáciou (WHO) klasifikačné kritériá. Všetci pacienti s rakovinou žalúdka boli predstavené pomocou 7. ročník Medzinárodnej únie proti rakovine (UICC) nádorom Node-metastázy (TNM) predstavovať systém. Pacienti s rakovinou boli zaradení do našej štúdii, keď bola ich diagnóza histologicky potvrdená. Normálny tkanivá boli oprávnené, ak ich endoskopická diagnóza bola normálna. Po skríningu H &E-nafarbená pre optimálnu tkaniva nádorové a normálne tkanivá, priliehajúce k nádoru vo vzdialenosti 10 cm od nádoru sme konštruované TMA sklíčka s 74 spárovaných nádorového tkaniva a priľahlé k nádorovom tkanive (spolupracuje s Shanghai biočipu , Shanghai, Čína) .v 74 onkologickí pacienti žalúdočnej (vekový rozsah 40-84 rokov, priemerný vek = 63,77 rokov, 23 žien a 35 samcov) zahŕňali 36 prípadov (skoré štádium pTNM i = 11, pTNM etapu II = 25) a 36 pokročilých prípadov (pTNM štádium III = 32, pTNM štádium IV = 6). Medzi nimi 6 (0,81%) bolo klasifikované ako dobre diferencovaný adenokarcinóm, 40 (54,1%) ako stredne diferencovaný a 25 (33,8%) ako zle diferencovaný adenokarcinóm.

Imunohistochémia

Imunohistochemické analýza bola použitá pre stanovenie expresného profilu PLCε1 proteínu v 74 uzavreté rakovina žalúdka u tkanív a 799 atrofickej gastritídy vzoriek. V stručnosti, parafínové vložené vzorky boli narezané do 4 um sekcií a pečie sa za teploty 60 ° C po dobu 2 hodín a následne sa Deparafinizace xylénu a rehydratovaný. Rezy boli ponorené do EDTA antigénne načítanie vyrovnávacej pamäte a v mikrovlnnej rúre pre antigénne vyhľadávanie, po ktorej bol podávaný 3% peroxidu vodíka v metanole uhasiť endogénnej peroxidázy, s následnou inkubáciou s 1% hovädzieho sérového albumínu na blokovanie nešpecifickej väzby. Rezy boli inkubované s králičie anti-PLCε1 (1:50; Sigma) cez noc pri 4 ° C. Normálny kozie sérum bolo použité ako negatívna kontrola. Po umytí sa tkanivové rezy boli ošetrené s biotinylizované anti-králičie sekundárne protilátky (Zymed) nasleduje ďalšie inkubácie s streptavidín-chrenová peroxidáza (Zymed) komplexu. Tkanivové rezy potom boli ponorené do 3, 3 'Diaminobenzidine a kontrastne 10% Mayer hematoxylínom, dehydrované, a nasadol.

Bodovanie PLCε1 imunohistochémia

PLCε1 imunoreaktivity bola hodnotená nezávisle 3 patológov ( WW, QQ a LL), ktorí boli zaslepení k výsledkom pacientov. Percento pozitívne zafarbených buniek a intenzita farbenia buniek bola stanovená pomocou každého pozorovateľa, a priemer 3 skóre bolo vypočítané. Sme náhodne vybraných 10 vysoko výkonné pole (zväčšenie, × 400 100 buniek na high-power pole) a počítal 1000 bunky. Ak je stredná percento PLCε1-pozitívnych buniek sa blíži 0% alebo 100%, štandardná odchýlka (SD), sa nachádza v blízkosti 0 ° C; a, ak je stredná hodnota približne 50%, SD je približne 5%. To znamená, že SD nezvyšuje so strednou hodnotou. V tejto štúdii, PLCε1 expresia bola odstupňovaná nasledovne: tkanivo s pozitívnym farbením cytoplazmatickú v ≤ 25% buniek sa triedi negatívne, a tkanivá s kladným cytoplazmatickú farbením v teplotu 25% buniek bola odstupňovaná pozitívna [30]
<. h3> Štatistická analýza

Všetky štatistické analýzy boli vykonané pomocou štatistického softvérového balíka SPSS 17.0. Wilcoxonův testovacia metóda bola použitá pre analýzu týchto uzavreté gastrických nádorov tkaniva v mikroskopickej sústavy tkanív. Test a Fisherov presný testy použité pre analýzu týchto karcinómu žalúdka a ťažkú ​​atrofickou gastritídou, a tiež boli vykonané na stanovenie významu vzťahov medzi PLCε1 prejavu a patologickým vlastnosti. Každý experiment sa uskutočnilo nezávisle aspoň dvakrát s podobnými výsledkami. p
. ≪ 0,05 Vo všetkých prípadoch bola považovaná za štatisticky významnú

Výsledky

Up-regulované Vyjadrenie PLCε1 v žalúdku nádorových bunkových línií

Po prvé, sme zistili mRNA a proteínové expresiu PLCε1 v rôznych bunkových líniách žalúdočných (obrázok 1). Analýza reverznej transkripcie-PCR a Western blot analýzy boli vykonané v nasledujúcich vzorkách odvodených z normálnej žalúdočnej sliznice buniek GES-1 a tri žalúdočné nádorových bunkových línií AGS, SGC7901 a MGC803. Zistili sme, že všetky žalúdočné rakovina bunkové línie odhalil vyšší expresiu PLCε1 než u normálnych kontrol žalúdočných buniek na oboch mRNA a proteínovej úrovni.

PLCε1 je up-regulovaný v rakovina žalúdka lézií, ale down-regulované v atrofickú gastritídou lézií

Potom sme skúmali úlohu PLCε1 v oboch nádorových a normálnych tkanív v žalúdočnej rakovina mikroskopické sústavy tkanív. Ako je znázornené na obrázku 2, sme pozorovali, že obaja nádor a normálneho tkaniva preukázali pozitívny expresie PLCε1. Avšak, ako je uvedené v tabuľke 1, tkanivo microarray analýzy dát ukázali, že percento PLCε1 pozitívne expresie v nádorovom tkanive je podstatne vyššia ako v susedných normálnych tkanivách Wilcoxonův test analýzy (73,0% oproti 20,3%, p
. < 0,01)

Ak chcete zistiť PLCε1 výraz v zápalovom prostredí, sme rozšírili PLCε1 imunohistochemické analýzou s použitím iného nezávislého sadu parafínových tkanivových rezoch z 799 vzoriek atrofickú gastritídou tkanív. Imunohistochemické Výsledky ukázali, že PLCε1 výraz bol pozitívny v 275 (37,0%), atrofická gastritída, vrátane 106 (37,7%), mierne atrofická gastritída, 98 (26,0%), stredne atrofickej gastritídy a 71 (28,1%) vo vážnych atrofickej, v danom poradí. Okrem toho, výraz PLCε1 korelovala so stupňom atrofia ( p
= 0,036) (pozri tabuľku 2). Preto v porovnaní s nádorovými a normálnymi tkanivami, atrofické gastritída vzorky znížil expresiu PLCε1 ( p Hotel &0,001) (pozri tabuľku 2)

potom sa potvrdili tieto výsledky imunohistochemické mikroskopické sústavy tkanív pomocou reverznej. -transcription-PCR a Western blot analýza troch spárovaná gastrickej rakoviny a priľahlé normálneho tkaniva a tri párové závažné atrofickej gastritídy, a priľahlé normálne tkanivá, ktoré boli odobraté z rovnakého pacienta. V porovnaní so susednými normálnych tkanivách, tri skúmané nádorov žalúdka vidieť up-regulácia expresie PLCε1 tak na úrovni mRNA a proteínovej úrovni, ale všetky z ťažkých atrofickú gastritídou tkanív mali nižšie expresiu PLCε1 (pozri Figure.3). V súlade s výsledkami z imunohistochemické analýzou mikroskopické sústavy tkanív, združené analýza tiež ukázala, PLCε1 bol nadmerne exprimovaný v nádore, ale down-regulované v závažnej atrofickej gastritídy, v porovnaní s spárovaných priľahlé normálneho tkaniva.

navrhol Tieto pozorovania že stav PLCε1 expresie bola veľmi odlišná v rámci zápalu proti vzniku nádorov. Naše výsledky naznačujú, že vysoko naše výsledky naznačujú, že vysoko PLCε1 proteín by mohol byť potenciálny biomarker rakoviny žalúdka.

Korelácia medzi PLCε1 a patologickým Funkcia

Nie je žiadny štatisticky významný rozdiel PLCε1 výrazu v patologickým údaje, ako je vek, pohlavie, veľkosť nádoru, triedenie, klinickom štádiu, medzi pacientmi v rôznych štádiách rakoviny žalúdka v mikroskopickej sústavy tkanív (uvedené v tabuľke S1).

Najmä, ako je znázornené na obrázku 2, PLCε1 expresie proteínov v cytoplazme bol často detekovaná u všetkých nádorových tkanivách, normálne tkaniva, ale menej často v atrofickú gastritídou tkanivách.

Avšak, ako je znázornené na obrázku 4, v mikroskopické sústavy tkanív, pozitívny PLCε1 expresie boli pozorované u zápalových buniek a lymfocyty u 13 (48,1%), susediace vzorky normálneho tkaniva lymfatické uzliny z metastáz (N0), pacientov s rakovinou žalúdka (zobrazené na obrázku 4A). Okrem toho, v ťažkých atrofickou gastritídou tkanív, 6 (2,37%) vzorky vykázali pozitívne PLCε1 expresiu v zápalových bunkách a lymfatických tkanív (Obrázok 4B). Tak, tieto výsledky naznačujú, že expresia PLCε1 môžu byť spojené s zápalových buniek inváziou pri tvorbe nádorov a nádorových metastáz.

Diskusia

, naša štúdia ukázala, že po prvé PLCε1 bola up-regulované u človeka žalúdočné nádorové tkanivá, ale down-regulovať zápal v prostredí, v porovnaní s normálnymi tkanivami. Diferenciálnej expresie v rôznych tkanivách PLCε1 veľmi naznačujú, že expresia PLCε1 môže hrať kľúčovú úlohu v zápalu a vzniku nádorov.

Zápal je uznávaný ako zásadný zložka lokálneho prostredia udržanie vývoj nádoru, vrátane iniciácie, propagácie , malígny konverzie, invázie a metastáz [31]. Kauzálny vzťah medzi žalúdočné propagácie tumoru a zápalov bola podporená z pozorovania, že zápal spôsobený Helicobacter pylori
infekcie môže zvýšiť riziko navodenie nádorového rastu [8] - [10]. V poslednej dobe, početné správy ukázali, že hladiny expresie PLCε1 sú veľmi spojené so zápalom a vzniku nádorov [19] - [21], [23]. Avšak molekulárnej mechanizmus stojaci biologický význam PLCε1 vo vývoji rakoviny žalúdka a postupu zostáva nejasná. Naša štúdia poskytuje dôkazy, že PLCε1 up-regulácia by mohla byť dôležitá v progresii rakoviny žalúdka. Najmä jeho down-regulácia zápalu prostredie, vysoko navrhol, že PLCε1 môže byť dôležitý biologický marker, a môžu byť použité pre odlíšenie žalúdočné rakovina stave od atrofické lézie fáze.

Okrem toho, v našej práci, môže byť proteín PLCε1 detekované v zápalových buniek a tkanív lymfocytov v niektorých susedných normálnych tkanivách u N0 stupňa a niektorých závažných atrofickú gastritídou tkanív. U cicavcov, PLCε1 je údajne byť vyjadrené v non-imunitných buniek, ako sú epidermálne keratinocyty, dermálnych fibroblastoch a epiteliálnych bunkách, ale nie v bunkách imunitného systému, ako sú lymfocyty, granulocytov, makrofágov a dendritických buniek [21], [32], [33]. . Naše výsledky naznačujú, že funkciou PLCε1 proteínu karcinómu žalúdka môže byť spojený s jeho expresie v imunitnom systéme

Podľa týchto dostupných výsledkov sme navrhli možný mechanizmus PLCε1 proteínu fungujúceho v tumorigenezi karcinómu žalúdka: PLCε1 proteín ako effecter Ras a Rap malých GTPase [12], [14] [15], je na prvý pohľad vyjadrený v bežných žalúdočných slizníc. V priebehu progresie atrofickej žalúdočné lézie, expresia PLCε1 proteínu je znížená, aby sa zabránilo predčasnej zápal prenikaniu podľa PLCε ^{- /- myši vykazuje označené rezistenciu k TPA-indukovať zápal kože [18], [19]. So zvyšujúcou sa doby a stupňa zápalu žalúdočnej lézie atrofickej, PLCε1 proteín sa postupne exprimovaný v bunkách imunitného systému, pretože PLCε bola požadovaná v rôznych zápalových reakcií [21], [22], ktoré môžu nakoniec vyvolať tvorbu karcinómu žalúdka. Súčasne PLCε1 proteín dostane vyššiu expresiu v rakovinových bunkách žalúdka, pretože PLCε nadmerné expresie môže podporovať črevnú nádorového APC Min /+ myší [20].}

V súhrne, up-regulácia expresie PLCε1 v žalúdočnej rakovina ale down-regulácia v atrofickú gastritídu bolo pozorované našej štúdii. Dôležitosť role PLCε1 u karcinómu žalúdka je ďalej zvýraznený nášho zistenia jeho inverznej korelácie s chronickou atrofickú gastritídu. Tieto výsledky naznačujú, že nielen PLCε1 môže byť použitý ako prognostický indikátor pre odlíšenie karcinómu žalúdka z atrofickej gastritídy, ale tiež vyžadujú ďalšie štúdie s cieľom stanoviť možné spojenie medzi biologickú funkciu PLCε1 a patogenéze rakoviny žalúdka. Naše štúdie tiež ukazujú, že PLCε1 môže mať dôležitú úlohu pri vzniku nádorov karcinómu žalúdka, a to najmä v počiatočnej fáze, a môže predstavovať nový marker diagnostiku počiatočnej fáze karcinómu žalúdka.

Podporné informácie
tabuľka S1.
Vzťah medzi PLCε1 expresných a patologickým charakteristikám
doi :. 10,1371 /journal.pone.0047563.s001
(DOC)

• Ploche ONE: Reg IV je priamym cieľom črevnej transkripčný faktor CDX2 v rakoviny žalúdka
• Ploche ONE: Adenovirový Dodávka EMX2 Génové tlmí rast v žalúdočnej rakoviny u ľudí