PLoS ONE: diferencinė ekspresija fosfolipazę C Epsilon 1 yra susijusi su lėtiniu gastritu ir skrandžio atrofijos Cancer

Anotacija

Fonas

Lėtinis uždegimas vaidina priežastinis vaidmenį skrandžio naviko pradžios. Prognostinių biologinių žymenų skrandžio uždegimas Tumorigenesis identifikavimas padės mums atskirti skrandžio vėžiu nuo atrofijos gastritas ir nustatyti ankstyvos stadijos skrandžio vėžio diagnozę. Fosfolipazę C Epsilon 1 (PLCε1) Pranešama, kad vaidinti svarbų vaidmenį uždegimas ir Tumorigenesis. Šis tyrimas buvo skirtas ištirti klinikinė reikšmė PLCε1 į inicijavimo ir progresavimą skrandžio vėžio.

Metodologija /Pagrindinės išvados

Pirmiausia, iRNR ir baltymų ekspresija PLCε1 buvo analizuojami atvirkštinės transkripcijos -PCR ir Imunoblotingo normaliomis skrandžio gleivinės epitelio ląstelių linija Ges-1 ir skrandžio vėžio ląstelių linijų AGS, SGC7901 ir MGC803. Rezultatai parodė tiek mRNR ir baltymų lygius PLCε1 buvo iki reguliuojama skrandžio vėžio ląstelių, lyginant su įprastomis skrandžio gleivinės epitelio ląstelių. Antra, šis rezultatas buvo patvirtinta imunohistocheminiu aptikti audinių mikrogardelės įskaitant 74 suporuotas skrandžio vėžio ir gretimuose normaliuose audiniuose. Trečia, nepriklausomybė imunohistocheminis analizė 799 lėtinių atrofijos gastritas audinių pavyzdžių rodo, kad PLCε1 išraiška atrofijos gastritas audiniuose buvo žemyn reguliuojama nuo PLCε1 išraiška buvo neigiamas 524 (65,6%) atrofinį gastritas. Be to, suderintos klinikiniai audiniai iš atrofinį sunkus gastritu ir skrandžio vėžiu sergantiems pacientams buvo naudojami toliau patvirtina ankstesnius rezultatus analizuojant iRNR ir baltymų koncentracijos išraišką PLCε1 klinikinių mėginių.

Išvados /significances

Mūsų rezultatai rodo, kad PLCε1 baltymas gali būti potencialus biologinis atskirti skrandžio vėžiu nuo uždegimo pažeidimo ir gali turėti didelį potencialą programų, tokių kaip diagnozuoti ir išankstinio įspėjimo apie ankstyvos stadijos skrandžio vėžio

nurodomoji dalis:. Chen J Wang W, Zhang, T, Ji J, Qian Q, Lu L, ir kt., (2012) Diferencialo išraiška fosfolipazę C Epsilon 1 yra susijusi su lėtiniu atrofijos gastritu ir skrandžio vėžio. PLoS vieną iš 7 (10): e47563. Doi: 10,1371 /journal.pone.0047563

redaktorius: Javier S. Castresana, Navaros universitetas, Ispanija

Įstojo: Gegužės 22, 2012 m Priimta rugsėjo 18, 2012 m Paskelbta: Vasaris 15, 2012

Visos teisės saugomos: © Chen et al., Tai atviros prieigos straipsnis platinama pagal Creative Commons Attribution licencija, kuri leidžia nevaržomai naudotis, paskirstymo ir dauginimąsi bet kokioje laikmenoje sąlygomis, su sąlyga, kad pirmasis autorius ir šaltinis įskaitomos

Finansavimas:. Šis darbas parėmė Nacionalinės Pagrindiniai pagrindinių mokslinių tyrimų programą Kinijos (973 projektas) (2010CB933900), New Century Puikus Talent ministerijos švietimo Kinijos (NCET-08-0350), specialūs Infekcinė liga Pagrindiniai projekto Kinijoje (2009ZX10004-311), Nacionalinis Gamtos mokslų fondas Kinijoje (31170961 ir 31100717), Šanchajus mokslo ir technologijų fondo (12ZR1415800) ir Šanchajaus Jiao Tong universiteto inovacijų fondas, baigusių (Z 340-007). Į finansuotojai neturėjo vaidmenį studijų dizainas, duomenų rinkimo ir analizės, sprendimų skelbti, ar ruošiant rankraštį

konkuruojančių interesų.. Autoriai pareiškė, kad nėra konkuruojantys interesai egzistuoja

Įvadas

Skrandžio vėžys yra ketvirtas bendras navikai pasaulyje. Skrandžio vėžio dažnis nuolat didėja, nes naujausių pakeitimų gyvenimo būdo ir dietos įpročius Kinijoje [1]. Kaip skrandžio vėžiu, išgyvenamumo dažnis priklauso nuo ankstyvos ligos diagnostikos. Paprastai, kuo anksčiau vėžys nustatomas ir diagnozuota, tuo daugiau sėkmingas gydymas bus. Todėl yra labai svarbu gerinti ankstyvos diagnozės ir gydymo pradžioje dėl skrandžio vėžio normas. Mes bandėme sukurti išankstinio skrandžio vėžys anksto perspėjimo sistemą remiantis genų ekspresijos mikrogardeliq analizę nuo 2005 m [2]. Tuo tarpu, mes taip pat tikėjosi rasti anksti skrandžio vėžio ląsteles vivo
pagal Multi-mode skirta vaizdo technika [3] - [7]. Tačiau trūksta ir biologinis žymuo skrandžio vėžio vis dar yra pagrindinė kliūtis ankstyvajai diagnostikai.

Šiandien jis yra gerai priimta, kad Helicobacter pylori
( H. Pylori
) vaidina priežastinis vaidmuo sukeliant lėtinis uždegimas (gastritas), todėl piktybinių navikų, ir buvo klasifikuojama kaip tam tikrą žmogaus kancerogenams Tarptautinės agentūros vėžio tyrimų (IARC) [8] - [10]. Be to, remiantis histologinio skirtumų tarp lėtiniu gastritu ir skrandžio vėžio, ankstyvojo etapo skrandžio vėžys dažnai aptinkamas endoskopija. Taigi, tyrimas molekulinės ir biologinių pokyčių, įskaitant geno ir aktyvinimas, kurie atsiranda iš lėtiniu gastritu skrandžio vėžio, gali pateikti keletą naujų įžvalgų šios ligos ir naujų prognostinių žymenų patologija. Tačiau iki šiol, yra keletas pranešimų apie reagavimo į ypatingas biologinius žymenis, kurie gali atskirti skrandžio uždegimą nuo skrandžio Tumorigenesis.

Phosphoinositide konkrečių fosfolipazę C (PLC) sudaro didelę šeimą, kuri katalizuoja fosfatidil 4 hidrolizę 5-bisfosfato į dvi gyvybiškai antrojo pasiuntinius, diacilglicerolio ir inozitolio 1,4,5-trisphosphate, tarp kurių yra šešios šeimos žinduolių PLC izoformų (β, γ, δ, ε, Š-ir η) [11] - [13]. Tarp jų, PLCε yra naujai nustatyta narys PLC šeimos [12]. Tai pagrindinis pasroviui effecter Ras šeimos mažų GTPases: Ras, Rap1 ir Rap2 [12], [14], [15]

Neseniai daug darbų pranešė, kad PLCε1 suvaidino lemiamą vaidmenį Tumorigenesis ir. uždegimas. PLCε1 išraiška buvo nustatyta, kad jie koreliuoja su žmogaus šlapimo pūslės vėžio, ir PLCε1 parbloškimo in vitro
ir in vivo
slopinamas šlapimo pūslės naviko augimo [16], [17]. Be to, buvo pranešta, kad PLCε1 yra per išreikštas odos vėžio [18]. Be PLCε ^{- /- pelių, tai eksponuojami pažymėtą atsparumą navikų susidarymo ir į 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetato (TPA) -induce odos uždegimas [18], [19]. Vėlesni tyrimai parodė, kad PLCε grojo svarbius vaidmenis spontaniškai žarnyno Tumorigenesis su padidinimo angiogenezę ir uždegimas naudojant adenomatozinio polipoze coli (APC) Min /+ pelės modelis [20].}

Be to, PLCε buvo reikalaujama aktyvavimo citokinų gamybą neimunizuotiems odos ląstelių uždegiminių reakcijų įvairovė, ir šio svarbi funkcija PLCε dar kartą patvirtino transgeninių pelių per išreiškiančias, iš PLCε [21], [22]. Kita vertus, PLCε buvo reikalingas auglio nekrozės faktoriaus (TNF) indukuotų chemokinas (C-C motyvas) ligando 2 (CCL2) išraiškos žmogaus keratinocitų ir bendradarbiauja su branduolinės veiksnys kapa B (NF-κB) reakcijų grandinei [23]. Toks PLCε funkcija uždegimas yra unikalus tarp PLC izofermentų [13].

Neseniai du vieno nukleotido polimorfizmas (SNP) rs2274223 ir rs11187870 į PLCε1 lokusų buvo įvardyti kaip romano jautrumo lokuso skrandžio vėžio kinų gyventojai pagal genomo plataus genų asociacijos analizė (GWAS) [24] - [26]. Šie rezultatai patvirtino ryšį tarp PLCε1 ir rizikos skrandžio vėžio asociacija.

Šiame tyrime mes išnagrinėjo išraiška modelio PLCε1 į žmogaus skrandžio audiniuose, įskaitant normalus, atrofinį gastritas ir navikų audiniuose, ir padarė hipotezę dėl vaidmuo PLCε1 lėtinis uždegimas ir Tumorigenesis skrandžio vėžio. Palyginti su įprastomis audinių, mes nustatėme, kad PLCε1 baltymas labai išreikštas skrandžio vėžio audiniuose, o ji buvo žemyn reguliuojama atrofijos skrandžio audinius. Mūsų rezultatai aiškiai rodo, kad PLCε1 gali būti potencialiai perspektyvus biologinis atskirti skrandžio vėžiu nuo atrofijos gastritas ir gali būti potencialus biologinis diagnozuoti ankstyvos stadijos skrandžio vėžį.

Medžiagos ir metodai

Etikos ataskaitos

tyrimas patvirtino etikos komiteto Sun Yat-sen universiteto onkologijos centro ir etikos komiteto pirmasis filialas ligoninės Šanchajaus Jiao Tong universiteto, ir raštu informuoti sutikimas buvo gautas iš kiekvieno dalyko.

Mobilaus ryšio linijos

SV40 transformuotos nemirtingos skrandžio epitelio ląstelių GES-1 buvo išsaugota mūsų instituto ir prižiūrimi, kaip rekomendavo [27]. Trys skrandžio vėžio ląstelių linijas, AGS, SGC7901 ir MGC803 buvo gauti iš Kinijos mokslų akademijos Mobilusis bankas tipas Kultūros kolekcijos ir saugomi mūsų laboratorijoje. Visi ląstelių linijos buvo auginamos Dulbecco modifikuota Eagle terpė (DMEM) papildytas 10% serumas iš veršiuko embriono (FCS) ( "Sigma cheminis, St. Louis, MO), 100 vienetų /ml penicilino ir 0,1 mg /ml streptomicino. Ląstelės buvo palaikoma 37 ° C temperatūroje drėgnoje kameroje su 5% CO _2.

RNR ekstrahavimas ir atvirkštinės transkripcijos-PGR

Iš viso RNR iš ląstelių ir audinių mėginių buvo ekstrahuojamas naudojant Trizol reagentas (Invitrogen) pagal gamintojo nurodymus. Išskirtas RNR buvo iš anksto apdoroti RNazės-laisvo DNaze, ir 2 mikrogramai RNR iš kiekvieno mėginio buvo naudojamas sintezei gruntuotas su heksamerų. PGR-tarpininkaujant amplifikaciją PLCε1 kDNR, pradiniam stiprinimui naudojama PLCε1-specifinius pradmenis buvo padaryta su denatūracijos žingsnio ne mažesnis nei 95 ° C temperatūroje 10 min, po to 30 denatūravimo ciklų, esant 95 ° C temperatūroje 60 S, gruntas atkaitinimo 55 ° C temperatūroje dėl 30 s, ir gruntas pratęsimas 72 ° C temperatūroje 30 s. Užbaigus ciklus žingsnių, galutinis išplėtimas 72 ° C temperatūroje 5 min buvo atliktas prieš reakcija, kuri buvo sustabdyta ir saugomi 4 ° C temperatūroje. Ekspresijos duomenys buvo normalizuotas pagal geometrinis vidurkis Namų ūkis gliceraldehido-3-fosfato dehidrogenazės (GAPDH) geno kontroliuoti ekspresijos lygių kintamumą. Atvirkštinės transkripcijos-PGR buvo sukurta naudojant Gruntas Express "programinės įrangos versija 3.0 (taikomoji BIOSYSTEMS). Prasminės ir priešprasmės pradmenų sekas buvo taip: 5'-GCAAGAAGTGGCCTTCTCAG-3 '(F) ir 5'-GAACTTGAAGGGAGGGCATT -3' (R), kai PLCε1, 5'-GCTCCTCCTGAGCGCAAG-3 '(F) ir 5'- CATCTGCTGGAAGGTGGACA -. 3 "(R), už GAPDH

Imunoblotingo

Ląstelės buvo nukirsta mėginių ėmimo buferio [62,5 mmol /l Tris-HCl (pH 6,8), 2% SDS, 10% glicerolio , ir 5% 2-h-merkaptoetanolio]. Visi švieži audiniai buvo įžemintos, kad būtų miltelių skystame azote ir tada lizuojamos bandinių ėmimo buferio. Baltymo koncentracija buvo nustatomas pagal Bradford tyrimo (Bio-Rad Laboratories). Lygios kiekiai baltymų buvo taikomos iki 9% poliakrilamido SDS geliai (SDS-PAGE), išskirti elektroforezės ir perkeliamas ant polivinilidenfluorido membranomis (Amersham Pharmacia Biotech). Membrana buvo inkubuojami su kovos su PLCε1 triušio antikūno (1:250; Sigma). PLCε1 išraiška buvo aptiktas su krienų peroksidazės konjuguoto ožkos anti-triušio IgG (1:2,000; Amersham Pharmacia Biotech) ir sustiprintą cheminės liuminescencijos Kit (Amersham Pharmacia Biotech) pagal gamintojo instrukcijas. β-aktino aptikta anti-beta-aktino triušio antikūnai (1:1,000 skiedimo; Sigma ") buvo naudojama kaip pakrovimo kontrolę

pacientams Audinių egzempliorių ir audinių mikrogardeliq

Pacientai, kurių atrofijos. gastritas ir vėžys buvo atrinkti iš pacientų, kuriems buvo planuojama už viršutinės virškinimo trakto endoskopija už kasdieninį patikrinimą dėl skrandžio vėžio ties pirmasis filialas ligoninės Šanchajaus Jiao Tong universiteto ir Sun Yat-sen universiteto onkologijos centro nuo 2003 metų sausio iki 2009 gruodžio Mes pašalinti ligoniai, kurie turėjo gavo antiopinės agentai ar antibiotikai iki dviejų mėnesių iki tyrimo ir tie, kurie turėjo istorijas skrandžio vėžiui, skrandžio arba dvylikapirštės žarnos opa, ar skrandžio operacija. . Hematoksilinu ir eozinu (H & R) dėmių ant paciento audinių buvo padaryta siekiant nustatyti histopatologinis funkcijas

iš atrofijos laipsnis buvo suskirstyti į trijų lygių sunkumo, atsižvelgiant į gleivinės raukšlės ir kraujagyslių išvaizdą, taip: vidutinio stiprumo (skaidrios smulkios kraujagyslės ir gelsvos spalvos tik apatinę kūno, su storu gleivinės raukšlės), vidutinio sunkumo (aiškiai skaidrus kraujagyslės ir geltonai-pilkšvos spalvos iki vidurio ir viršutinės kūno dalies, su ištempti ir susiaurėjusių gleivinės raukšlės) ir sunkus (aiškiai skaidrios Didieji kraujo indai ir graygreenish spalvos iki viršutinės kūno dalies, su išnykimo gleivinės raukšlės oro įpūtimo). Šių kriterijų taikymas yra pateisinamas ankstesnėse ataskaitose dėl tarp endoskopijos ir histologinių išvadų nuoseklumą už atrofinį gastritas [28], [29]. Kai tiek endoskopija ir histologiniai išvados buvo patvirtintos, 799 atrofinių gastritas pacientai įskaitant 281 švelniu 265 vidutinio sunkumo ir 253 sunkus, atitinkamai, buvo įtraukti į mūsų studiją. Į 799 pacientai buvo įtraukti 439 vyrų ir 320 moterų, su žiniasklaidos amžiaus 35,6 metų (diapazonas, 18-55 metų).

Kiekvienas naviko pavyzdys buvo priskirtas histologiniai balu, atsižvelgiant į Pasaulio sveikatos organizacijos (PSO) klasifikavimo kriterijus. Visi skrandžio vėžiu sergantiems pacientams buvo pastatytas naudojant 7-osios redakcijos Tarptautinė sąjunga prieš Vėžys (UICC) naviku limfmazgius Metastazė (TNM) sustojimo sistema. Pacientai, sergantys vėžiu, buvo įtraukti į mūsų studiją, kai jų diagnozė buvo histologiškai patvirtinta. Normalūs audiniai buvo tinkamos, jeigu jų endoskopinė diagnostika buvo normalus. Po to, kai atrankos H & E-dažytų skaidres optimaliai naviko audinio ir normalaus audinio greta naviko su 10 cm atstumu nuo naviko, mes pastatytas PMA skaidres su 74 suderintų porų vėžinių audinių ir greta naviko audinių (bendradarbiauja su Šanchajaus biochip , Šanchajus, Kinija) .Sriegines 74 skrandžio vėžiu sergančių pacientų (amžiaus ribos = 40-84 metų; amžiaus vidurkis = 63.77 m; 23 moterys ir 35 vyrai) įtraukti 36 pirmalaikius atvejus (pTNM I etapas = 11, pTNM II pakopos = 25) ir 36 pažangių atvejai (pTNM III etapas = 32, pTNM IV stadijos = 6). Tarp jų, 6 (0,81%) buvo klasifikuojamas kaip gerai diferencijuotą adenokarcinoma, 40 (54,1%), taip saikingai diferencijuojamos, ir 25 (33,8%), kaip blogai diferencijuotą adenokarcinoma.

imunohistocheminis

Imunohistocheminis analizė buvo siekiama nustatyti raiškos modelis PLCε1 baltymų 74 suderintų žmogaus skrandžio vėžio audiniuose ir 799 atrofijos gastritas pavyzdžius. Trumpai tariant, parafine mėginiai buvo supjaustyti 4 pm skyriuose ir kepamas esant 60 ° C temperatūroje 2 val, po to deparaffinization su ksileno ir rehidrataciją. Skyriai buvo panardintas į EDTA antigeno pakartotinio buferio ir microwaved už antigeno paieška, po kurio jie buvo gydomi 3% vandenilio peroksido metanolio numalšinti vidinį peroksidazės aktyvumo, po inkubacijos su 1% albumino galvijų serumo blokuoti nespecifinis privalomas. Dalys buvo inkubuotos su triušio anti PLCε1 (1:50; Sigma) per naktį 4 ° C temperatūroje. Normalus ožkos serumas buvo naudojamas kaip neigiama kontrolė. Po plovimo, audinio skyriai buvo gydomi biotinilintu anti-triušio antrinio antikūno (Zymed), po to toliau inkubacijos su streptavidino-krienų peroksidazės komplekso (Zymed). tada audinio skyriai buvo panardintas į 3, 3'-diaminobenzidinu ir counterstained su 10% Mayer hematoksilinu, dehidratuoti, ir sumontuoti.

Balai iš PLCε1 imunohistocheminis

PLCε1 reaktyvumas buvo įvertintas nepriklausomai 3 patologai ( WW, QQ ir LL), kurie buvo apakinti pacientų rezultatus. Iš teigiamai tamsintas ląstelių ir intensyvumo Dažymo ląstelių procentas buvo nustatomas kiekvieno stebėtojo ir buvo skaičiuojamas 3 balai vidurkis. Mes atsitiktinai atrinko 10 aukšto galingumo laukuose (priartinimas, x 400; 100 ląstelių viename didelės galios laukas) ir skaičiuojami 1000 ląsteles. Kai procentinės dalies PLCε1-teigiamų ląstelių vidurkis yra artimas 0% arba 100%, standartinis nuokrypis (SD) yra artimas 0; ir, kai vidurkis yra maždaug 50%, SD yra maždaug 5%. Tokiu būdu, SD nedidina su vidurkio. Šiame tyrime PLCε1 išraiška buvo rūšiuojami taip: audinys su teigiamu citoplazmos dažymo metu ≤ 25% ląstelių buvo rūšiuojami neigiamas, ir audinių teigiamas citoplazmos dažymo IN > 25% ląstelių buvo rūšiuojami teigiamas [30]
<. H3> statistinė analizė

Visi statistinės analizės buvo atlikta naudojant "SPSS 17.0 statistinį programinį paketą. Vilkoksono bandymo metodas buvo naudojamas analizuoti tuos atitiko skrandžio auglių audinių audinio microarray. Bandymas ir Fisher'io testai naudojamas analizuoti tuos skrandžio vėžiu ir sunkia atrofijos gastritas, taip pat buvo atliekama siekiant nustatyti tarp PLCε1 saviraiškos ir clinicopathologic savybių santykių reikšmę. Kiekvienas eksperimentas buvo atliekamas nepriklausomai bent du kartus su panašių rezultatų. P
. ≪ 0,05 visais atvejais buvo laikomas statistiškai reikšmingas

Rezultatai

Iki reguliuojama išraiška PLCε1 skrandžio vėžio ląstelių linijas

Pirmiausia, mes aptiko iRNR ir baltymų ekspresiją PLCε1 įvairiais skrandžio ląstelių linijų (1 paveikslas). Atvirkštinės transkripcijos-PGR analizė ir imunoblotingu analizė buvo atlikta šių mėginių, gautų iš normalių skrandžio gleivinės ląstelių GES-1 ir trijų skrandžio vėžio ląstelių linijų AGS, SGC7901 ir MGC803. Mes nustatėme, kad visi skrandžio vėžio ląstelių linijas parodė didesnį PLCε1 išraišką negu įprastomis skrandžio ląstelių kontrolės abiejuose mRNR ir baltymų lygius.

PLCε1 yra up-reguliuojama skrandžio vėžys pažeidimai, bet žemyn reguliuojama atrofijos gastritas pažeidimai

Tada mes tyrė PLCε1 vaidmenį tiek vėžinių ir sveikų audinių ir skrandžio vėžio audinių microarray. Kaip parodyta 2 paveiksle, mes nustatėme, kad tiek naviką ir audiniai įrodytas teigiamas išraiška PLCε1. Tačiau, kaip parodyta 1 lentelėje, audinių mikrogardelių duomenų analizė parodė, kad PLCε1 teigiamą išraiškos procentas navikų audiniuose, yra žymiai didesnis nei, kad gretimų normalius audinius Wilcoxon testą analizės (73,0%, lyginant su 20,3%, p
. < 0,01)

Norėdami nustatyti PLCε1 išraišką uždegimas aplinkoje, mes praplėtėme PLCε1 imunohistocheminės analizę, naudojant kitą nepriklausomą rinkinį parafino įterptųjų audinių skyriuose 799 atrofijos gastritas audinių pavyzdžius. Į imunohistocheminius rezultatai parodė, kad PLCε1 išraiška buvo teigiamas 275 (37,0%) atrofinė gastritas įskaitant 106 (37,7%) švelniu atrofinį gastritas, 98 (26,0%) vidutinio atrofinį gastritas ir 71 (28,1%) Sunkiais atrofijos, atitinkamai. Be to, PLCε1 išraiška buvo susietas su atrofijos laipsnį ( P
= 0,036) (2 lentelė). Todėl, palyginti su naviko ir normaliuose audiniuose, atrofinių gastritas mėginiai sumažėjo PLCε1 išraiška ( P
< 0,001) (2 lentelė)

tada patvirtino šiuos Imunohistocheminiais audinių microarray rezultatus atvirkščiai. -transcription-PGR ir imunoblotingu analizė trijų prijungtų skrandžio vėžio ir gretimų normaliuose audiniuose ir trijų prijungtų sunkios atrofinio gastrito ir gretimų sveikų audinių, kurie buvo paimtos iš to paties paciento. Palyginti su gretimuose normaliuose audiniuose, trys nagrinėjami skrandžio navikų rodomas naujausias reguliavimo PLCε1 išraiška tiek mRNR ir baltymų koncentracijos, bet visi sunkių atrofijos gastritas audiniuose buvo mažiau išraišką PLCε1 (žr Figure.3). Pagal susitarimą su imunohistocheminio audinių mikrogardeliq analizės rezultatais, suporuotas analizė taip pat parodė, PLCε1 buvo per išreikštas naviko, bet žemyn reguliuojama sunkus atrofinį gastritas, palyginti su suderintų gretimuose normaliuose audiniuose.

Siūloma Šios pastabos kad PLCε1 išraiška statusas buvo labai skiriasi nuo uždegimo, palyginti su Tumorigenesis kontekste. Mūsų rezultatai labai rekomenduojame, kad mūsų rezultatai labai rekomenduojame, kad PLCε1 baltymas gali būti potencialus biologinis skrandžio vėžio.

koreliacija tarp PLCε1 ir Clinicopathologic Įranga

Nėra statistiškai reikšmingas skirtumas PLCε1 išraiška clinicopathologic duomenys, pavyzdžiui, amžiaus, lyties, naviko dydį, klasifikavimo, klinikinių etape, tarp pacientų etapuose skrandžio vėžio audinių microarray (parodyta S1 lentelėje).

Ypač, kaip parodyta 2 paveiksle, PLCε1 baltymo ekspresiją į citoplazmą buvo dažnai aptinkamos visose navikų audiniuose, normaliomis audiniuose, bet rečiau atrofijos gastritas audiniuose.

tačiau, kaip parodyta 4 paveiksle, ją audinių mikrogardelės, teigiamas PLCε1 išraiška buvo pastebėtas uždegiminių ląstelių ir limfocitų 13 (48,1%) gretimuose normaliuose audiniuose mėginiai iš limfmazgis metastazių (N0) skrandžio vėžiu sergančių pacientų (parodyta 4A pav). Be to, sunkiais atrofijos gastritas audinių, 6 (2,37%) mėginiai parodė teigiamą PLCε1 išraišką uždegiminių ląstelių arba limfinius audinius (4b pav.) Taigi, šie rezultatai rodo, kad PLCε1 išraiška gali būti susijęs su uždegimo ląstelių invaziją per Tumorigenesis ir naviko metastazių.

Diskusijos

Čia, mūsų tyrime pirmiausia parodė, kad PLCε1 buvo iki-reglamentuotas žmogaus skrandžio navikų audiniuose, bet buvo žemyn reguliuojama uždegimas aplinką, palyginti su sveikų audinių. Diferencialas išraiška PLCε1 įvairių audinių labai siūlė, kad PLCε1 išraiška galėtų vaidinti pagrindinį vaidmenį uždegimas ir Tumorigenesis.

Uždegimas, yra apskaitomas kaip gyvybiškai sudedamoji vietos aplinkai išlaikyti auglio vystymąsi, įskaitant inicijavimą, skatinimas , piktybiniai konversija, invazija, ir metastazės [31]. Priežastinis ryšys tarp skrandžio naviko skatinimo ir uždegimas buvo remiama iš pastabų, kad uždegimas sukelia Helicobacter pylori
infekcija gali padidinti vėžinių skatinimo riziką [8] - [10]. Neseniai, parodė, daug pranešimų, kad PLCε1 ekspresijos lygis yra labai susijęs su uždegimu ir tumorigenezei [19] - [21], [23]. Tačiau molekulinės mechanizmo, lemiančio biologinę reikšmę PLCε1 skrandžio vėžio išsivystymo ir progresavimo lieka miglotas. Mūsų tyrimas pateikė įrodymų, kad PLCε1 iki reguliavimas gali būti svarbus skrandžio vėžio progresavimą. Ypač, jos žemyn-reguliavimas uždegimas aplinkos, labai pasiūlė, kad PLCε1 gali būti svarbus biologinis, ir gali būti naudojamas atskirti skrandžio vėžio statusą nuo atrofinio lezijų etape.

Be to, mūsų darbe, PLCε1 baltymas gali būti aptikta uždegiminių ląstelių ir limfocitų audiniuose kai gretimuose normaliuose audiniuose prie N0 laipsnį ir kai kuriomis sunkiomis atrofijos gastritas audiniuose. Žinduolių, PLCε1 yra pranešė, kad turi būti išreiškiama ne-imuninių ląstelių, tokių kaip epidermio keratinocitų, odos fibroblastuose, ir epitelio ląstelių, bet ne į imuninių ląstelių, tokių kaip limfocitų, granuliocitų, makrofagų, ir dendritinės ląstelės [21], [32], [33]. . Mūsų rezultatai rodo, kad PLCε1 baltymų funkcija skrandžio vėžio gali būti susijusi su jo išraiškos imuninei sistemai

Pagal šiuos gautus rezultatus, mes pasiūlėme galimą mechanizmą PLCε1 baltymų funk Tumorigenesis skrandžio vėžio: PLCε1 baltymas kaip Ras effecter ir Rap mažų GTPases [12], [14], [15], yra ne pirmas išreikštas įprastais skrandžio gleivinės audiniuose. Į progresavimo atrofinį skrandžio pažeidimo žinoma, PLCε1 baltymų ekspresija sumažėjo užkirsti kelią ankstyvam uždegimas infiltraciją, pagal PLCε ^{- /- pelės eksponatų pažymėti pasipriešinimą TPA-sukelti odos uždegimą [18], [19]. Su vis laikas ir laipsnio uždegimas atrofinio skrandžio pažeidimo, PLCε1 baltymas yra palaipsniui išreikštas imuninių ląstelių, nes PLCε buvo reikalaujama uždegiminių reakcijų [21] įvairovė, [22], kuri galiausiai gali sukelti skrandžio vėžio išsidėstymą. Tuo pačiu metu, PLCε1 baltymų gauna didesnę raišką skrandžio vėžio ląsteles, nes PLCε per išraiška gali skatinti žarnyno tumorigenezei APC min /+ peles [20].}

Apibendrinant, iki-reguliavimo PLCε1 išraiškos skrandžio vėžys, bet žemyn reguliavimas atrofinį gastritas buvo pastebėtas mūsų tyrime. Svarba vaidmuo PLCε1 skrandžio vėžio dar labiau pabrėžia mūsų išvada dėl jos atvirkštinė koreliacija su lėtine atrofinį gastritas. Šie rezultatai ne tik rodo, kad PLCε1 gali būti naudojamas kaip prognostiniu rodiklis, siekiant atskirti skrandžio vėžį iš atrofinio gastrito, bet taip pat patvirtina tolesnius tyrimus, kad būtų nustatytas galimas ryšį tarp biologinės funkcijos PLCε1 ir skrandžio vėžio patogenezės. Mūsų tyrimai taip pat rodo, kad PLCε1 gali turėti svarbų vaidmenį Tumorigenesis skrandžio vėžio, ypač ankstyvoje stadijoje ir gali tapti nauju žymeklį diagnozuoti ankstyvos stadijos skrandžio vėžį.

Pagalbinė informacija
Stalo S1. Viesbutis The santykiai tarp PLCε1 išraiška ir clinicopathologic savybių
Doi:. 10,1371 /journal.pone.0047563.s001
(DOC)

• PLoS ONE: Įm IV yra tiesioginis Tikslinė žarnyno transkripcijos faktoriaus CDX2 skrandžio vėžio
• PLoS ONE: adenovirusiniai Pristatymas apie EMX2 Genų slopina augimo į žmogaus skrandžio vėžio