PLoS ONE: differentiële expressie van fosfolipase C Epsilon 1 wordt geassocieerd met chronische atrofische gastritis en Cancer

De abstracte

Achtergrond

Een chronische ontsteking speelt een causale rol in de maag tumor initiatie. De identificatie van predictieve biomarkers van maagontsteking tot het ontstaan ​​van tumoren zal ons helpen om maagkanker van atrofische gastritis onderscheiden en vast te stellen de diagnose van een vroeg stadium van maagkanker. Fosfolipase C epsilon 1 (PLCε1) is naar verluidt een belangrijke rol spelen bij de ontsteking en het ontstaan ​​van tumoren. Dit onderzoek is gericht op de klinische betekenis van PLCε1 in de initiatie en progressie van maagkanker te onderzoeken.

Methodologie /voornaamste bevindingen

In de eerste plaats, het mRNA en eiwit expressie van PLCε1 werden geanalyseerd door omgekeerde transcriptie -PCR en Western blotting in normale maagslijmvlies epitheliale cellijn GES-1 en maagkanker cellijnen AGS, SGC7901 en MGC803. De resultaten toonden zowel mRNA en eiwitniveaus van PLCε1 werden opwaarts gereguleerd bij maagkanker cellen tegenover normale maagslijmvlies epitheelcellen. Ten tweede werd dit resultaat bevestigd door immunohistochemische detectie in een tissue microarray inclusief 74 gekoppeld maagkanker en aangrenzende normale weefsels. Ten derde, een onafhankelijkheid immunohistochemische analyse van 799 chronische atrofische gastritis weefselmonsters aangetoond dat PLCε1 expressie in atrofische gastritis weefsels werden down-gereguleerd sinds PLCε1 expressie negatief in 524 (65,6%) atrofische gastritis was. Daarnaast werden gevonden klinische weefsels ernstige atrofische gastritis en kankerpatiënten gebruikt om de voorgaande resultaten bevestigen verder door het analyseren van mRNA en eiwitniveaus expressie van PLCε1 in klinische monsters.

Conclusies /betekenissen

onze resultaten suggereren dat PLCε1 eiwit potentiële biomarker voor maagkanker onderscheiden van ontsteking laesie kan zijn en kan een groot potentieel in toepassingen zoals diagnostiek en voorwaarschuwing van beginnende maagkanker hebben

Citation:. Chen J , Wang w, T Zhang, Ji J, Qian Q, L Lu, et al. (2012) differentiële expressie van fosfolipase C Epsilon 1 wordt geassocieerd met chronische atrofische gastritis en maagkanker. PLoS ONE 7 (10): e47563. doi: 10.1371 /journal.pone.0047563

Editor: Javier S. Castresana, Universiteit van Navarra, Spanje

Ontvangen: 22 juni 2012; Aanvaard: 18 september 2012; Gepubliceerd: 15 oktober 2012

Copyright: © Chen et al. Dit is een open-access artikel gedistribueerd onder de voorwaarden van de Creative Commons Attribution License, die onbeperkt gebruik, distributie en reproductie maakt in elk medium, op voorwaarde dat de oorspronkelijke auteur en de bron worden gecrediteerd

Financiering:. Dit werk werd gesteund door de National Key Basic Research Program van China (973 Project) (2010CB933900), New Century Uitstekende Talent van het ministerie van Onderwijs van China (NCET-08-0350), Speciale Infectieziekten Key Project van China (2009ZX10004-311), National Natural Science Foundation of China (31170961 en 31100717), Shanghai Science and Technology Fund (12ZR1415800) en Shanghai Jiao Tong University Innovation Fund Voor Postacademisch (Z-340-007). De financiers hadden geen rol in de studie design, het verzamelen van gegevens en analyse, besluit te publiceren, of de voorbereiding van het manuscript

Competing belangen:.. De auteurs hebben verklaard dat er geen tegenstrijdige belangen bestaan ​​

Introductie

Maagkanker is de vierde voorkomende tumoren in de wereldgeschiedenis. De incidentie van maagkanker neemt gestaag toe als gevolg van de recente veranderingen in de levensstijl en voeding gewoonten in China [1]. Wat maagkanker, overleving afhankelijk van de vroege diagnose van de ziekte. Typisch, hoe eerder een kanker wordt gedetecteerd en gediagnosticeerd, hoe succesvoller de behandeling. Daarom is het erg belangrijk om de tarieven van vroege diagnose en behandeling van maagkanker verbeteren. We hebben geprobeerd om een ​​maagkanker pre-warning system vroeg op basis van genexpressie microarray-analyse vast te stellen sinds 2005 [2]. Ondertussen hebben we ook hoopten de vroege maagkanker cellen voorbeeld In vivo
door multi-mode gerichte afbeeldingstechnieken [3] - [7]. Echter, bij gebrek van biomarker voor maagkanker is nog steeds het belangrijkste obstakel voor een vroege diagnose.

Vandaag de dag is het goed aanvaard dat Helicobacter pylori
( H. Pylori
) toneelstukken een causale rol bij het ontstaan ​​van de chronische ontsteking (gastritis) leidt tot maligniteit, en is geclassificeerd als een definitief menselijk carcinogeen door het Internationaal Agentschap voor Onderzoek naar Kanker (IARC) [8] - [10]. Bovendien, gebaseerd op de histologische verschillen tussen chronische gastritis en maagkanker, beginnende maagkanker wordt vaak ontdekt door endoscopie. Aldus onderzoek naar de moleculaire en biologische veranderingen, zoals genamplificatie en activeringen, die het gevolg zijn van chronische gastritis maagkanker, kunnen nieuwe inzichten in de pathologie van deze ziekten en prognostische markers. Echter, tot op heden zijn er weinig rapporten over aan bijzondere biomarkers die maagontsteking aan maag- tumorigenese kan onderscheiden.

De Phosphoinositide-specifieke fosfolipase C (PLC) is een grote familie die de hydrolyse van fosfatidylinositol 4 katalyseert, 5-bisfosfaat in twee essentiële second messengers, diacylglycerol en inositol 1,4,5-trifosfaat, waarin zes families van zoogdier PLC isovormen omvatten (β, γ, δ, ε, ζ en η) [11] - [13]. Onder hen, PLCε is een nieuw geïdentificeerde lid van PLC familie [12]. Het is een belangrijke downstream-effector van Ras familie kleine GTPases: Ras, Rap1 en Rap2 [12], [14], [15]

Onlangs, veel werken gemeld dat PLCε1 een cruciale rol gespeeld bij het ontstaan ​​van tumoren en. ontsteking. PLCε1 meningsuiting is gevonden te correleren met de menselijke blaaskanker, en de knock-down van PLCε1 In vitro Kopen en In vivo
geremd blaas tumorgroei [16], [17]. Bovendien is gerapporteerd dat PLCε1 wordt tot overexpressie gebracht in huidkanker [18]. In PLCε ^{- /- muizen, vertoonde duidelijke resistentie tegen tumorvorming en de 12-O-tetradecanoylforbol-13-acetaat (TPA) -induce huidontsteking [18], [19]. Latere studies toonden aan dat PLCε cruciale rol gespeeld in spontane intestinale tumorigenese met vergroting van angiogenese en ontsteking door het adenomateuze polyposis coli (APC) Min /+ muismodel [20].}

Bovendien PLCε moest activatie van cytokineproductie in niet-immune huidcellen in verschillende ontstekingsreacties, en deze belangrijke functie van PLCε werd verder bevestigd in transgene muizen met overexpressie PLCε [21], [22]. Aan de andere kant werd PLCε vereist voor tumornecrosefactor (TNFa) geïnduceerde chemokine (C-C motif) ligand 2 (CCL2) expressie in humane keratinocyten en werkt samen met nucleaire factor kappa B (NF-kB) pathway [23]. Een dergelijke functie van PLCε inflammatie is uniek onder de PLC isoenzymen [13].

Onlangs zijn twee enkele nucleotide polymorfisme (SNP) en rs2274223 rs11187870 in PLCε1 loci geïdentificeerd als nieuwe locus voor maagkanker in het Chinees bevolking genoomwijde gen-associatie studie (GWAS) [24] - [26]. Deze resultaten bevestigden het verband tussen PLCε1 en risico op maagkanker.

In dit onderzoek onderzochten we het expressiepatroon van PLCε1 in humane gastrische weefsels waaronder normale, atrofische gastritis en tumorweefsels, en maakte een hypothese over de PLCε1 rol bij chronische ontstekingen en tumorigenese van maagkanker. In vergelijking met normale weefsels, vonden we dat PLCε1 eiwit in hoge mate werd uitgedrukt in maagkanker weefsels, terwijl het werd down-gereguleerd in atrofische maag weefsels. Onze resultaten suggereren sterk dat PLCε1 een potentieel veelbelovende biomarker voor het onderscheiden van maagkanker van atrofische gastritis kunnen zijn en zou een potentiële biomarker voor de diagnose van een vroeg stadium van maagkanker zijn.

Materialen en methoden

Ethic Statements

het onderzoek werd goedgekeurd door de ethische commissie van Sun Yat-sen University Cancer Center en de ethische commissie van de eerste Affiliated Hospital van de Shanghai Jiao Tong University, en schriftelijke toestemming is verkregen van elk onderwerp.

Cellijnen

De-SV40 getransformeerde onsterfelijk maag epitheelcellen GES-1 werden bewaard in ons instituut en onderhouden zoals aanbevolen [27]. Drie maagkanker cellijnen AGS, SGC7901 en MGC803 werden verkregen van de Chinese Academie van Wetenschappen Cell Bank of Type Culture Collection en bewaard in ons laboratorium. Alle cellijnen werden gekweekt in Dulbecco's Gemodificeerd Eagle Medium (DMEM) aangevuld met 10% foetaal kalfsserum (FCS) (Sigma Chemical, St. Louis, MO), 100 eenheden /ml penicilline en 0,1 mg /ml streptomycine. De cellen werden bij 37 ° C in een vochtige kamer gehouden met 5% CO _2.

RNA extractie en reverse transcriptie-PCR

Totaal RNA uit cellen en weefsels monsters werd geëxtraheerd met behulp de Trizol reagens (Invitrogen) volgens de instructies van de fabrikant. Het geëxtraheerde RNA werd voorbehandeld met RNase-vrij DNase, en 2 ug RNA van elk monster werd gebruikt voor cDNA-synthese geprimed met willekeurige hexameren. Voor PCR gemedieerde amplificatie van PLCε1 cDNA, een eerste amplificatie met behulp PLCε1-specifieke primers werd uitgevoerd met een denaturatiestap bij 95 ° C gedurende 10 min gevolgd door 30 denaturatie cycli bij 95 ° C gedurende 60 s, primer annealing bij 55 ° C 30 s en primerverlenging bij 72 ° C gedurende 30 s. Na afloop van de fietsen stappen, een laatste verlenging bij 72 ° C gedurende 5 minuten werd uitgevoerd voordat de reactie werd gestopt en opgeslagen bij 4 ° C. Expressie gegevens werden genormaliseerd naar het meetkundig gemiddelde van de housekeeping glyceraldehyde-3-fosfaat dehydrogenase (GAPDH) gen om de variabiliteit in expressieniveaus regelen. Reverse transcriptie-PCR werd ontworpen met behulp van de Primer Express Software versie 3.0 (Applied Biosystems). De sequenties van de sense en antisense-primers waren als volgt: 5'-GCAAGAAGTGGCCTTCTCAG-3 '(F) en 5'-GAACTTGAAGGGAGGGCATT -3 (R) voor PLCε1, 5'-GCTCCTCCTGAGCGCAAG-3' (F) en 5'- CATCTGCTGGAAGGTGGACA -. 3 '(R) voor GAPDH

Western Blotting

De cellen werden achtereenvolgens bemonsteren buffer [62,5 mmol /L Tris-HCl (pH 6,8), 2% SDS, 10% glycerol geoogst en 5% 2-h-mercaptoethanol]. Alle verse weefsels werden geaard om poeder in vloeibare stikstof en vervolgens gelyseerd met de bemonstering buffer. De eiwitconcentratie werd bepaald door Bradford test (Bio-Rad Laboratories). Gelijke hoeveelheden eiwitten werden op 9% SDS polyacrylamide gels (SDS-PAGE), elektroforetisch gescheiden en overgebracht op polyvinylideenfluoride membranen (Amersham Pharmacia Biotech). Het membraan werd geïncubeerd met anti PLCε1 konijn antilichaam (1:250; Sigma). PLCε1 expressie werd gedetecteerd met mierikswortelperoxidase-geconjugeerd geit anti-konijn IgG (1:2,000; Amersham Pharmacia Biotech) en een versterkte chemiluminescentie (Amersham Pharmacia Biotech) volgens de instructies van de fabrikant. β-actine gedetecteerd met een anti-β-actine konijn antilichaam (1:1,000 verdunning; Sigma) werd gebruikt als ladingcontrole

Patiënten weefselmonsters Tissue Microarray

Patiënten met atrofische. gastritis en kanker werden geselecteerd uit patiënten die waren gepland voor de bovenste gastro-intestinale endoscopie voor routinematige screening op maagkanker bij het First Affiliated Hospital van de Shanghai Jiao Tong University en Sun Yat-sen University Cancer Center van januari 2003 tot december 2009. We uitgesloten patiënten die ontving anti-ulcus middelen of antibiotica voor maximaal twee maanden voor het onderzoek en degenen die geschiedenis van maagkanker, maag- of darmzweren of maag geopereerd. . Hematoxyline en eosine (H &E) kleuring van patiënten weefsels werd gedaan histopathologische kenmerken bepalen

De mate van atrofie werd ingedeeld in drie intensiteit, als de gedaante van slijmvliesplooien en vaatstelsel, als volgt: mild (transparante fijne bloedvaten en gelige verkleuring beperkt tot het onderlichaam, met dikke mucosale plooien), matig (duidelijk transparant bloedvaten en geel-grijze verkleuring tot het midden en het bovenlichaam, met verdunde en versmald mucosale plooien), en ernstige (duidelijk transparante grote bloedvaten en graygreenish verkleuring tot het bovenlichaam, met de verdwijning van mucosale plooien op luchtinsufflatie). Het gebruik van deze criteria wordt gerechtvaardigd door de eerdere verslagen over de samenhang tussen de endoscopie en histologische bevindingen voor atrofische gastritis [28], [29]. Wanneer zowel endoscopie en histologische bevindingen werden bevestigd, 799 atrofische gastritis patiënten, waaronder 281 mild, matig 265 en 253 ernstig, respectievelijk, werden geïncludeerd in onze studie. De 799 patiënten werden opgenomen 439 mannelijke en 320 vrouwelijke, met een media leeftijd van 35,6 jaar (bereik 18-55 jaar).

Elk tumormonster werd een histologische graad op basis van de World Health Organization toegewezen (WHO) indelingscriteria. Alle maagkanker patiënten werden opgevoerd met behulp van de 7e editie van de International Union Against Cancer (UICC) Tumor-Node-metastase (TNM) staging-systeem. Patiënten met kanker werden geïncludeerd in onze studie bij hun diagnose histologisch werd bevestigd. De normale weefsels kwamen in aanmerking als hun endoscopische diagnose normaal was. Na screening H &E-gekleurde coupes optimale tumorweefsel en normaal weefsel grenzend aan tumor met een afstand van 10 cm van de tumor, construeerden we TMA glijdt met 74 overeenkomstige paren van tumorweefsels en grenzend aan de tumorweefsels (samen met Shanghai Biochip , Shanghai, China) .De 74 maagkanker patiënten (leeftijd = 40-84 jaar, de gemiddelde leeftijd = 63,77 jaar, 23 vrouwen en 35 mannen) omvatte 36 vroege gevallen (pTNM stadium I = 11, pTNM fase II = 25) en 36 gevorderde gevallen (pTNM stadium III = 32, pTNM stadium IV = 6). Onder deze, 6 (0,81%) werden geclassificeerd als goed gedifferentieerd adenocarcinoom, 40 (54,1%) als matig gedifferentieerd, en 25 (33,8%) als slecht gedifferentieerd adenocarcinoom.

Immunohistochemie

Immunohistochemische analyse werd gebruikt om het expressiepatroon van PLCε1 eiwit vast te 74 voldoen aan menselijke maagkanker weefsels en 799 atrofische gastritis monsters. In het kort werden in paraffine ingebedde monsters gesneden in 4 pm secties en gebakken bij 60 ° C gedurende 2 uur gevolgd door deparaffinisatie met xyleen en gerehydrateerd. De secties werden ondergedompeld in EDTA antigene retrieval buffer en correct voor antigene opvragen, waarna ze met 3% waterstofperoxide in methanol behandeld om de endogene peroxidase activiteit doven, gevolgd door incubatie met 1% runderserumalbumine niet-specifieke binding te blokkeren. Secties werden geïncubeerd met konijn anti PLCε1 (01:50; Sigma) gedurende de nacht bij 4 ° C. Normaal geit serum werd gebruikt als een negatieve controle. Na wassen, werden weefselcoupes behandeld met gebiotinyleerd anti-konijn secundair antilichaam (Zymed) gevolgd door verdere incubatie met streptavidine-mierikswortel peroxidase complex (Zymed). Weefsel secties werden vervolgens ondergedompeld in 3, 3'-diaminobenzidine en tegengekleurd met 10% Mayer's hematoxyline, uitgedroogd, en gemonteerd.

Scoring van PLCε1 Immunohistochemie

PLCε1 immunoreactiviteit werd onafhankelijk beoordeeld door 3 pathologen ( WW, QQ en LL) die waren geblindeerd patient outcomes. Het percentage van positief gekleurde cellen en de intensiteit van de gekleurde cellen werd bepaald door elke waarnemer en de gemiddelde scores van 3 berekend. We willekeurig gekozen 10 high-power velden (vergroting, × 400; 100 cellen per high-power field) en telde 1000 cellen. Als het gemiddelde percentage van PLCε1-positieve cellen dicht bij 0% en 100%, de standaarddeviatie (SD) bijna 0; en, wanneer het gemiddelde ongeveer 50%, de SD ongeveer 5%. Aldus heeft het SD niet toe met het gemiddelde. In deze studie werd PLCε1 uitdrukking als volgt ingedeeld: weefsel met positieve cytoplasmatische kleuring in ≤25% van de cellen was negatief gesorteerd, en weefsel met positieve cytoplasmatische kleuring in > 25% van de cellen werd ingedeeld positief [30]
<. h3> statistische analyse

Alle statistische analyses werden uitgevoerd met behulp van de SPSS 17.0 statistische software pakket. De Wilcoxon-test werd gebruikt om die gepaard maagtumoren weefsels in het weefsel microarray analyse. De test en de exacte toets van Fisher gebruikt om die maagkanker en ernstige atrofische gastritis te analyseren, en ook werden uitgevoerd om de betekenis van de relatie tussen PLCε1 expressie en clinicopathologic kenmerken te bepalen. Elk experiment werd het gedurende ten minste tweemaal uitgevoerd met vergelijkbare resultaten. p
. ≪ 0,05 in alle gevallen werd beschouwd als statistisch significant

Resultaten

Up-gereguleerde expressie van PLCε1 bij maagkanker cellijnen

In de eerste plaats, we merken op dat de mRNA en eiwitexpressie van PLCε1 in verschillende maag cellijnen (figuur 1). Reverse transcriptie-PCR-analyse en Western vlekanalyse werd uitgevoerd op deze monsters afkomstig van normale maagslijmvlies cellen GES-1 en drie maagkanker cellijnen AGS, SGC7901 en MGC803. We vonden dat alle maagkanker cellijnen bleek hoger PLCε1 expressie dan in normale maag cel controles op zowel mRNA en eiwit niveaus.

PLCε1 is up-gereguleerd bij maagkanker Letsels maar down-gereguleerd in atrofische gastritis letsels

Vervolgens onderzochten wij de rol van PLCε1 zowel tumor en normale weefsels in een maagkanker tissue microarray. Zoals getoond in figuur 2, observeerden we dat zowel tumor en normale weefsels toonden de positieve uitdrukking van PLCε1. Zoals getoond in tabel 1, had tissue microarray data analyse blijkt dat het percentage PLCε1 positieve expressie in tumorweefsel significant hoger dan in aangrenzende normale weefsels door Wilcoxon-test analyse (73,0% versus 20,3%, p
<. 0,01)

Om PLCε1 meningsuiting in ontsteking milieu te bepalen, uitgebreid we PLCε1 immunohistochemische analyse met behulp van een andere onafhankelijke set van in paraffine ingebedde weefselcoupes van 799 atrofische gastritis weefselmonsters. De immunohistochemische resultaten toonden aan dat PLCε1 expressie positief was in 275 (37,0%), atrofische gastritis, waaronder 106 (37,7%) milde atrofische gastritis, 98 (26,0%) een matige atrofische gastritis en 71 (28,1%) bij ernstige atrofische, respectievelijk. Bovendien werd de PLCε1 expressie correleerde met de mate van atrofie ( p
= 0,036) (zie tabel 2). Derhalve tegen tumor en normale weefsels was atrofische gastritis monsters afgenomen PLCε1 expressie ( p
< 0,001) (zie tabel 2)

Vervolgens bevestigde deze immunohistochemische tissue microarray resultaten door omgekeerde. Transcriptie-PCR en Western blotting analyse van drie gepaarde maagkanker en aangrenzende normale weefsels en drie gepaarde ernstige atrofische gastritis en aangrenzende normale weefsels die werden genomen van dezelfde patiënt. Vergeleken met aangrenzende normale weefsels, drie onderzochte maagtumoren getoond up-regulatie van expressie PLCε1 zowel mRNA en eiwitniveaus, maar ernstige atrofische gastritis weefsels hadden lagere expressie van PLCε1 (zie Afbeelding 3.). In overeenstemming met de resultaten van immunohistochemische tissue microarray analyse, de gepaarde analyse toonde ook PLCε1 werd tot overexpressie gebracht in tumoren, maar down-gereguleerd in ernstige atrofische gastritis in vergelijking met de overeenkomende aangrenzende normale weefsels.

Deze waarnemingen gesuggereerd deze status PLCε1 expressie was zeer verschillend in de context van ontsteking versus tumorigenese. Onze resultaten sterk suggereren dat onze resultaten sterk suggereren dat de PLCε1 eiwit een potentiële biomarker van maagkanker kan zijn.

De correlaties tussen PLCε1 en Clinicopathologische kenmerken

Er is geen statistisch significant verschil van PLCε1 meningsuiting in clinicopathologic gegevens, zoals leeftijd, geslacht, tumorgrootte, classificatie, klinisch stadium, tussen patiënten in verschillende stadia van maagkanker in het weefsel microarray (Tabel S1).

bijzonder, zoals getoond in figuur 2, PLCε1 eiwitexpressie in cytoplasma werd vaak aangetroffen in alle tumorweefsels, normale weefsels maar minder frequent in atrofische gastritis weefsels.

zoals getoond in figuur 4, in het weefsel microarray, positieve PLCε1 expressie waargenomen in ontstekingscellen en lymfocyten in 13 (48.1%) aangrenzend normaal weefsel monsters van ganglionaire metastasen (N0) maagkankerpatienten (figuur 4A). Bovendien is in ernstige atrofische gastritis weefsels, 6 (2,37%) monsters vertoonden positieve PLCε1 expressie in ontstekingscellen of lymfeweefsel (Figuur 4B). Dus deze resultaten impliceren dat de expressie van PLCε1 kan gepaard gaan met inflammatoire cellen invasie tijdens tumorigenese en tumormetastasen.

Discussie

Hier ons onderzoek aangetoond dat enerzijds PLCε1 was opwaarts gereguleerd in menselijke maag tumorweefsels, maar werd down-gereguleerd in inflammatie omgeving tegen normale weefsels. De differentiële expressie van PLCε1 in verschillende weefsels sterk gesuggereerd dat de expressie van PLCε1 een belangrijke rol bij ontsteking en tumorigenese kan spelen.

Ontsteking wordt erkend als een wezenlijk bestanddeel van het lokale milieu ondersteunen tumorontwikkeling, waaronder initiatie, promotie , maligne conversie, invasie en metastase [31]. Een causaal verband tussen de maag tumorontwikkeling en ontsteking is ondersteund door de waarnemingen dat de ontsteking veroorzaakt door Helicobacter pylori
infectie kan het risico van tumorontwikkeling verhogen [8] - [10]. Onlangs hebben talrijke rapporten aangetoond dat PLCε1 expressieniveaus sterk geassocieerd met ontsteking en tumorigenese [19] - [21], [23]. Echter, het moleculaire mechanisme achter de biologische betekenis van PLCε1 in maag kankerontwikkeling en progressie blijft onduidelijk. Ons onderzoek heeft aangetoond dat PLCε1 opregulatie kan belangrijk in de progressie van maagkanker te ontvangen. Bovendien staat de neerwaartse regulatie van ontsteking milieu sterk aanbevolen dat PLCε1 een belangrijke biomarker kan zijn en kan worden gebruikt om maagkanker status in atrofische laesie fase onderscheiden.

Bovendien, in ons werk, PLCε1 eiwit kan gedetecteerd in ontstekingscellen en lymfocyt weefsels in een aantal aangrenzende normale weefsels bij N0 graden en bepaalde ernstige atrofische gastritis weefsels. Bij zoogdieren wordt PLCε1 gerapporteerd worden uitgedrukt in niet-immuuncellen zoals epidermale keratinocyten, dermale fibroblasten en epitheelcellen, maar niet in immune cellen zoals lymfocyten, granulocyten, macrofagen en dendritische cellen [21], [32], [33]. . Onze resultaten suggereren dat de functie van PLCε1 eiwit bij maagkanker kan worden gekoppeld aan de expressie in het immuunsysteem

Volgens deze beschikbare resultaten stelden wij een mogelijk mechanisme van PLCε1 eiwitten functioneren in tumorigenese van maagkanker: PLCε1 eiwit als een effector van Ras en Rap kleine GTPases [12], [14], [15] is aanvankelijk uitgedrukt in normale weefsels maagslijmvlies. Tijdens voortgang van atrofische gastrische laesie wordt PLCε1 eiwitexpressie verminderde vroege infiltratie van ontsteking te voorkomen, volgens PLCε ^{- /- muizen vertoont gemarkeerd weerstand tegen de TPA-induceren huidontsteking [18], [19]. Met toenemende tijd en mate van ontsteking van atrofische gastrische laesie wordt PLCε1 eiwit geleidelijk expressie in immuuncellen omdat PLCε in verschillende ontstekingsreacties [21] diende, [22], die uiteindelijk de vorming van maagkanker kan veroorzaken. Tegelijkertijd PLCε1 eiwit krijgt hogere expressie bij maagkanker cellen omdat PLCε overexpressie kan intestinale ontstaan ​​van tumoren bevorderen in Apc Min /+ muizen [20].}

In het kort, up-regulatie van PLCε1 meningsuiting in de maag kanker, maar down-regulatie in atrofische gastritis werd waargenomen door onze studie. Het belang rol van PLCε1 bij maagkanker wordt verder benadrukt door onze bevinding van de inverse correlatie met chronische atrofische gastritis. Deze resultaten suggereren dat niet alleen PLCε1 kan worden gebruikt als een prognostische indicator maagkanker onderscheiden van atrofische gastritis, maar ook tijdig nader onderzoek naar een mogelijk verband tussen de biologische functie van PLCε1 en de pathogenese van maagkanker vastgesteld. Onze onderzoeken tonen ook aan dat PLCε1 een belangrijke rol spelen bij tumorigenese van maagkanker kan zijn, vooral in een vroeg stadium, en kan een nieuwe merker vormen voor diagnose beginnende maagkanker.

Ondersteunende informatie
Tabel S1.
De relatie tussen PLCε1 expressie en clinicopathologic kenmerken
doi:. 10.1371 /journal.pone.0047563.s001
(DOC)

• PLoS ONE: Reg IV is een directe doel van Intestinal transcriptiefactor CDX2 bij maagkanker
• PLoS ONE: Adenovirale levering van de EMX2 Gene onderdrukt groei in Human MaagKanker