Plos ONE: Diferencialni Izražanje fosfolipaze C Epsilon 1 je povezana s kronično atrofični gastritis in želodca Cancer

Povzetek

Ozadje

Kronično vnetje ima vzročno vlogo v želodcu tumorjev. Identifikacija napovednih biomarkerjev iz želodca, vnetje na tumorigeneze nam bo pomagalo razlikovati raka želodca iz atrofični gastritis in postavitev diagnoze raka želodca v zgodnji fazi. Fosfolipaze C epsilon 1 (PLCε1) je poročalo, da igrajo ključno vlogo pri vnetju in tumorigeneze. Cilj raziskave je bil raziskati klinični pomen PLCε1 na začetku in napredovanje raka želodca.

Metodologija /Glavne ugotovitve

Prvič, mRNA in proteina izraz PLCε1 so bili analizirani z reverzno transkripcijo -PCR in Western blot v normalnih želodca sluznica epitelijskih celic vrstice GES-1 in želodčni rak celične linije AGS, SGC7901 in MGC803. Rezultati so pokazali tako mRNA in ravni proteinskih PLCε1 so up-urejena v želodčnih rakavih celic v primerjavi z običajnimi želodčne sluznice epitelijskih celic. Drugič, ta rezultat potrjuje imunohistokemičnim detekcijo v mikromrež tkiva, vključno z 74 seznanjeno raka želodca in sosednjih normalnih tkivih. Tretjič, neodvisnost imunohistokemični analizi 799 kroničnih atrofični osebkov gastritis tkiva je pokazala, da so bile PLCε1 izraz v atrofični gastritis tkivih navzdol urejeno, saj je bil PLCε1 izraz negativen v 524 (65,6%), atrofični gastritis. Poleg tega so bili uporabljeni ujema klinični tkiva iz atrofični hudo gastritis in bolnikov z rakom želodca, da še dodatno potrjujejo predhodne rezultate z analizo mRNA in vsebnosti beljakovin izražanje PLCε1 v kliničnih vzorcih.

Sklepi /pomene

Naši rezultati kažejo, da lahko PLCε1 protein potencialni biomarkerjev za razlikovanje raka želodca iz vnetje lezije, in bi lahko imela velik potencial v aplikacijah, kot so diagnozo in predhodnega opozorila raka želodca zgodnje

Navedba. Chen J Wang W Zhang T Ji J Qian Q, Lu L, et al. (2012) diferenciala Izražanje fosfolipaze C Epsilon 1 je povezana s kronično atrofični gastritis in želodca raka. PLoS ONE 7 (10): e47563. doi: 10,1371 /journal.pone.0047563

Urednik: Javier S. Castresana, University of Navarra, Španija

Prejeto: 22. junij, 2012; Sprejeto: 18. september 2012; Objavljeno: 15. oktober 2012

Copyright: © Chen et al. To je odprtega dostopa članek razširja pod pogoji Creative Commons Attribution License, ki omogoča neomejeno uporabo, distribucijo in razmnoževanje v katerem koli mediju, pod pogojem, da prvotni avtor in vir knjižijo

Financiranje:. To delo je podprl državnega Key Temeljni raziskovalni program Kitajske (973 Project) (2010CB933900), New Century Odlično Talent Ministrstva za šolstvo Kitajske (NCET-08-0350), posebne okužba bolezni ključni projekt Kitajske (2009ZX10004-311), National, ki jih Natural Science Foundation of China (31170961 in 31100717), Shanghai znanost in tehnologijo sklada (12ZR1415800) in Shanghai Jiao Tong sklada Univerze v inovacije za podiplomcev v Ljubljani (z-340-007). Med financerji imel nobene vloge pri oblikovanju študije, zbiranje in analizo podatkov, sklep, da se objavi, ali pripravi rokopisa

nasprotujočimi si interesi.. Avtorji so izjavili, da ne obstajajo konkurenčni interesi

Uvod

rak želodca je četrti skupni tumorji na svetu. Incidenca raka želodca se stalno povečuje zaradi nedavnih sprememb življenjskega sloga in prehrane navad na Kitajskem [1]. Kot je za rakom želodca, stopnja preživetja odvisna od zgodnje odkrivanje bolezni. Značilno je, da je prejšnja se rak odkrije in postavili diagnozo, bo bolj uspešna zdravljenje. Zato je zelo pomembno izboljšanje stopnje zgodnje diagnosticiranje in zgodnje zdravljenje raka želodca. Poskušali smo ugotoviti, zgodnje raka želodca pred opozorilni sistem, ki temelji na genskem analize izraz mikromrež od leta 2005 [2]. Medtem pa smo tudi upali, da bi našli zgodnje želodčne rakave celice in vivo
s večnačinovne ciljno tehnike slikanja [3] - [7]. Vendar pa brez biomarkerja za raka želodca, je še vedno glavna ovira za zgodnjo diagnozo.

Danes je dobro znano, da Helicobacter pylori
( H. Pylori
) igra vzročno vlogo pri sprožitvi kronično vnetje (gastritis), ki vodi do malignih bolezni, in je bila uvrščena določen rakotvorne snovi za ljudi Mednarodna agencija za raziskave raka (IARC) [8] - [10]. Poleg tega, ki temelji na histoloških razlik med kroničnega gastritisa in želodčnega raka, v zgodnji fazi želodčni rak pogosto zazna endoskopijo. Tako lahko preiskava molekularnih in bioloških sprememb, vključno z genskim ojačanje in aktivacij, ki nastanejo zaradi kroničnega gastritisa raka želodca, zagotoviti nekatere nove poglede na patologijo te bolezni in novih prognostičnih označevalcev. Vendar pa se do sedaj še ni nekaj poročil o obravnavanju posebnih biomarkerjev, ki se lahko razlikuje želodčne vnetje iz želodca tumorigeneze.

fosfoinozitidnih specifične fosfolipaze C (PLC), predstavlja veliko družino, ki katalizira hidrolizo fosfatidilinozitola 4, 5-bifosfat v dveh ključnih drugi sli, diacilglicerol in inozitol 1,4,5-trisphosphate, ki vključujejo šest družin PLC izooblik sesalcev (β, γ, δ, ε, ζ in η) [11] - [13]. Med njimi PLCε je na novo opredeljena član PLC družine [12]. To je ključni navzdol effecter od Ras družinskih malih GTPases: Ras, Rap1 in Rap2 [12] [14] [15]

V zadnjem času veliko dela, je poročala, da PLCε1 igral ključno vlogo pri tumorigeneze in. vnetje. PLCε1 izraz bilo ugotovljeno, da sovpada z rakom mehurja človeškega in rasklapanje od PLCε1 vitro
in vivo
inhibirana rast tumor na mehurju [16], [17]. Poleg tega je bilo poročali, da je PLCε1 prekomerno izražen v kožnega raka [18]. V PLCε ^{- /- miši, je razstavljen izrazito odpor do nastanka tumorjev in za 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetat (TPA) vnetje -induce kože [18], [19]. Kasnejše študije so pokazale, da PLCε igrali ključne vloge v spontanem črevesne tumorigeneze s povečanjem angiogenezo in vnetja s pomočjo adenomatozne polipoze coli (APC) Min /+ modela mouse [20].}

Poleg tega je potrebno PLCε pri aktiviranju produkcije citokinov pri neimunih kožnih celic v različnih vnetnih reakcij in s tem pomembno funkcijo PLCε bil nadalje potrjen v transgenih miših prekomerno izražanje PLCε [21], [22]. Po drugi strani pa je PLCε potrebna za tumor nekrotizirajočega faktorja (TNF) inducirano kemokin (Ci-C motiv) liganda 2 (CCL2) izražanja v človeških keratinocitov in sodeluje z jedrsko faktor kappa B (NF-κB) poti [23]. Takšna funkcija PLCε vnetje je edinstven med PLC izoencimov [13].

V zadnjem času so bili dva polimorfizma posameznih nukleotidov (SNP) rs2274223 in rs11187870 v PLCε1 lokusih opredeljena kot nova občutljivosti locus za raka želodca v kitajščini prebivalstvo po genom široko gen-pridružitvenega analizo (GWAS) [24] - [26]. Ti rezultati so potrdili povezavo med PLCε1 in tveganje želodca raka.

V tej študiji smo preučili izraz vzorec PLCε1 v človeške želodčne tkivih normalno, atrofični gastritis in tumorskih tkivih, in so hipoteze o vloga PLCε1 pri kroničnem vnetju in tumorigeneze raka želodca. V primerjavi z običajnimi tkiva, smo ugotovili, da je bil PLCε1 protein zelo izražene v želodčnih tkivih raka, medtem ko je bil dol-urejeno v atrofije želodčne tkivih. Naši rezultati nakazujejo, da lahko PLCε1 je potencialno obeta biomarkerjev za razlikovanje raka želodca iz atrofični gastritis in je lahko potencialno biomarkerjev za diagnosticiranje raka želodca v zgodnji fazi.

Materiali in metode

Etični Izjave

študijo je odobril Odbor za etiko Sun Yat-sen University Cancer Center in Odbor za etiko prve odvisnimi bolnišnici Shanghai Jiao Tong University, in pisno privolitev je bila pridobljena iz vsakega predmeta.

celične linije

-SV40 preoblikovala nesmrtne želodca epitelijskih celic GES-1 so bile ohranjene v našem inštitutu in vzdrževati v skladu s priporočili [27]. Tri želodca rakave celične linije AGS, SGC7901 in MGC803 so bili pridobljeni iz kitajske akademije znanosti Cell Banke Type Culture Collection in se hranijo v našem laboratoriju. Vse celične linije smo kultivirali v Dulbeccovem spremenjenimi Eagle medij (DMEM), dopolnjenem z 10% fetalnega telečjega seruma (FCS) (Sigma Chemical, St. Louis, MO), 100 enot /ml penicilina in 0,1 mg /ml streptomicin. Celice smo vzdrževali pri 37 ° C v navlaženi komori s 5% CO 2.

RNK Pridobivanje in povratne Transkripcija PCR

Skupna RNK iz celic in tkiv vzorce smo ekstrahirali _{uporabi Trizol reagent (Invitrogen), v skladu z navodili proizvajalca. Ekstrahirana RNA smo obdelali z RNaze proste DNaze in 2 ug RNA iz vsakega vzorca smo uporabili za cDNA sintezo napolniti z naključnimi heksamerov. Za PCR-posredovana ojačitve PLCε1 cDNA, začetni pomnoževanje z uporabo PLCε1-specifičnih primerjev je bila opravljena s korakom denaturacija pri 95 ° C za 10 minut, čemur sledi 30 denaturaciji ciklov pri 95 ° C za 60 sekund, premaz žarjenje pri 55 ° C 30 s, in primer podaljšanje pri 72 ° C za 30 sekund. Ob zaključku kolesarske korakov končno razširitev pri 72 ° C 5 min smo izvedli še preden smo reakcijo ustavili in shranili pri 4 ° C. Podatki izraz smo normalizirali na aritmetična za gospodinjstvo gliceraldehid-3-fosfat dehidrogenaze (GAPDH) gena za nadzor spremenljivost stopnjah izražanja. Reverzno transkripcijo-PCR je bil zasnovan z različico Primer Express Software 3.0 (Applied Biosystems). Sekvence smiselnimi in protismiselnimi primerji so bili naslednji: 5'-GCAAGAAGTGGCCTTCTCAG-3 '(F) in 5'-GAACTTGAAGGGAGGGCATT -3' (R) za PLCε1, 5'-GCTCCTCCTGAGCGCAAG-3 '(F) in 5' CATCTGCTGGAAGGTGGACA -. 3 '(R) za GAPDH}

Western blot

Celice so bile pobrane v pufru za vzorčenje [62,5 mmol /L Tris-HCI (pH 6,8), 2% SDS, 10% glicerol in 5% 2-h-merkaptoetanola]. Vse sveže tkiva smo ozemljeni, da prašek v tekočem dušiku in nato liziramo s pufrom za vzorčenje. Koncentracija proteina smo določili s testom Bradfordu (Bio-Rad Laboratories). Enaka količina beljakovin so bili uporabljeni za 9% poliakrilamidnih SDS geli (SDS-PAGE), ločenih elektroforetsko in prenese na poliviniliden fluorida membrane (Amersham Pharmacia Biotech). Membrana je bila inkubirana z kuncev protitelesom anti PLCε1 (1:250; Sigma). PLCε1 izraz je bila odkrita s hrenovo peroksidazo konjugiranih kozje anti-kunčjega IgG (1:2,000; Amersham Pharmacia Biotech) in izboljšano kemiluminiscentnim komplet (Amersham Pharmacia Biotech), v skladu z navodili proizvajalca. β-aktina zazna z anti-beta-aktin kunčjega protitelesa (1:1,000 redčenje, Sigma) smo uporabili kot kontrolo nakladanje

pacientov, vzorci tkiva in tkiva Mikromrežni

Bolniki z atrofični. gastritis in rak so bili izbrani iz bolnikov, ki so predvidene za zgornjega dela prebavil endoskopijo za rutinsko presejanje za raka želodca na prve odvisnimi bolnišnici Shanghai Jiao Tong University in Sun Yat-sen University Cancer Center od januarja 2003 do decembra 2009. Nismo pa bolniki, ki so imeli prejela anti-razjeda sredstva ali antibiotikov za največ dva meseca pred pregledom, in tistimi, ki so imeli zgodovino raka želodca, želodca ali dvanajstnika ali želodca operacijo. . Hematoxylin in eozin (H & E) obarvanje na tkivih bolnikov je bilo narejeno za določitev Histopatološka funkcije

Stopnja atrofije so razvrščeni v tri stopnje resnosti, glede na izgled sluznice gub in ožilja, kot sledi: blage (preglednih drobne krvne žile in rumenkasto obarvanje omejeno na spodnji del telesa, z debelimi gubami sluznice), zmerno (jasno pregleden krvne žile in rumeno-siva razbarvanje do sredine in zgornji del telesa, s stanjšano in zmanjšal gube sluznice), in hudo (jasno preglednih velike krvne žile in graygreenish razbarvanje do zgornjega dela telesa, z izginotjem sluzničnih gub o zračnem insuflacijo). Uporaba teh meril je utemeljena v prejšnjih poročilih o skladnosti med endoskopijo in histoloških ugotovitev za atrofični gastritis [28], [29]. Ko so potrdili tudi endoskopijo in histološke ugotovitve, 799 atrofične bolniki gastritis, vključno s 281 blago, 265 zmerno in 253 hudo, oziroma, je bilo vključenih v našo raziskavo. V 799 bolnikov je bilo vključenih 439 moških in 320 ženske, z medijsko starost 35,6 let (razpon, 18-55 let).

Vsak tumor vzorec je bil dodeljen histološko oceno, ki temelji na podatkih Svetovne zdravstvene organizacije (WHO) merila za razvrščanje. Vsi bolniki z rakom želodca so potekali z uporabo 7. izdaja Mednarodna zveza proti raku (UICC) tumor-Node-Metastasis (TNM) sistem odrov. Bolniki z rakom so sodelovali v naši raziskavi, ko je bila njihova diagnoza histološko potrjeni. Normalne tkiva so bili upravičeni, če je bil njihov endoskopsko diagnoza normalno. Po pregledu H & E-barvna stekelca za optimalno tkiva tumorja in normalnega tkiva, ki mejijo na tumorja z razdalje 10 cm od tumorja, smo zgradili TMA stekelca z 74 izravnanih parov tumorskih tkiv in ob tumorskih tkivih (sodelovanje s Shanghai biochip , Šanghaj, Kitajska) .The 74 bolnikov želodca z rakom (starostna skupina = 40-84 let, povprečna starost = 63.77 let, 23 ženskih in 35 moških), vključenih 36 zgodnjih primerov (pTNM fazo I = 11, oder pTNM II = 25) in 36 naprednih primerih (pTNM fazi III = 32, pTNM faza IV = 6). Med njimi je bilo 6 (0,81%) razvrščen kot dobro diferenciran adenokarcinom, 40 (54,1%) kot zmerno razlikujejo, in 25 (33,8%) kot slabo diferenciran adenokarcinom.

Imunohistokemija

Imunohistokemijsko analiza je bila uporabljena za določitev ekspresijski vzorec PLCε1 proteina v 74 izravnanih človeške želodčne tkiv rakom in 799 atrofični gastritis vzorcev. Na kratko smo parafinski vgrajeni osebki narežemo na 4 um odseke in pekli pri 60 ° C 2 uri, čemur sledi deparaffinization z ksilena in hidracijo. Odseki so bili potopljeni v EDTA antigenski pridobivanja pasu in microwaved za antigenski priklic, po kateri so bili zdravljeni z 3% vodikovega peroksida v metanolu pogasiti endogene peroksidaze aktivnost, ki ji sledi inkubacijo z 1% goveji serumski albumin, da blokira nespecifične vezave. Odseki inkubiramo pri kuncih anti PLCε1 (1:50; Sigma) preko noči pri 4 ° C. Normalna kozji serum smo uporabili kot negativno kontrolo. Po izpiranju smo sekcije tkiva obdelamo z biotinilovanim anti-kunčjega sekundarnega protitelesa (Zymed), čemur sledi nadaljnja inkubacijo s streptavidin-hrenovo peroksidazo kompleksa (Zymed). Tkivo oddelki so nato potopi v 3, 3 'diaminobenzidine in jih nasprotno z 10% Mayer je hematoksilin, dehidrirani, in vgrajeni.

Točkovanje PLCε1 imunohistokemija

PLCε1 radioinkorporacijo je bila ocenjena neodvisno 3 patologov ( WW, QQ in LL), ki so bili zaslepljeni, da rezultati pri pacientih. Odstotek pozitivno obarvanih celic in intenzivnost obarvanja celicah je bila določena z vsakega opazovalca in smo izračunali povprečje 3 točk. Smo naključno izbrali 10 visoke moči polja (povečava, × 400, 100 celic na področju visoke moči) in šteje 1000 celic. Ko je povprečna odstotka PLCε1 pozitivnih celic blizu 0% ali 100%, standardni odklon (SD) je blizu 0; in, kadar je povprečna približno 50%, SD je približno 5%. Tako SD ne povečuje s povprečjem. V tej študiji je bila PLCε1 izraz ocenjena kot sledi: tkiva s pozitivnim citoplazemskega obarvanje v ≤ 25% celic smo ocenili negativno in tkiva s pozitivnim citoplazemskega obarvanje v > 25% celic smo ocenili pozitivno [30]
<. h3> Statistična analiza

Vse statistične analize so bile izvedene s pomočjo SPSS 17,0 statistični programski paket. Preskusna metoda Wilcoxonov je bila uporabljena za analizo teh ujemajo želodčne tumorje tkiva v mikromrež tkiva. Test in Fisherjev testi uporabljajo za analizo tistih raka na želodcu in hudo atrofični gastritis in tudi smo izvedli za določitev pomen odnosa med PLCε1 izražanja in clinicopathologic značilnosti. Vsak poskus smo izvedli neodvisno vsaj dvakrat s podobnimi rezultati. p
. ≪ 0.05 V vseh primerih je zdelo statistično značilno

Rezultati

Up-urejeno Podajanje PLCε1 v želodcu rakave celične linije

Prvič, smo odkrili mRNA in protein ekspresije PLCε1 v različnih želodčnih celičnih linij (slika 1). Povratne analiza prepis-PCR in Western blot analizo so bile izvedene na teh vzorcev, ki izhajajo iz normalnih želodca sluzničnih celic GES-1 in tri želodca rakave celične linije AGS, SGC7901 in MGC803. Ugotovili smo, da vsi želodca rakave celične linije pokazala višjo PLCε1 izraz, kot je v normalnih želodčnih nadzor celic na obeh mRNA in beljakovin ravni.

PLCε1 je reguliran želodčnega raka Poökodbe vendar navzdol urejeno v atrofični gastritis Poökodbe

Potem smo raziskovali vlogo PLCε1 tako v tumorskih in normalnih tkivih v želodčni mikromrež rak tkiva. Kot je prikazano na sliki 2, smo ugotovili, da sta tumor in normalnih tkiv pokazale pozitiven izražanje PLCε1. Vendar, kot je prikazano v tabeli 1, je tkivo analizo podatkov mikromrež pokazala, da je odstotek PLCε1 pozitivnega izražanja v tumorskih tkivih znatno višja od tiste v sosednjih normalnih tkivih Wilcoxonov analizo vzorca (73,0% v primerjavi z 20,3%, p
. < 0,01)

Za določitev PLCε1 izraz v vnetje okolju, smo razširili PLCε1 imunohistokemičnim analizo z uporabo drugega neodvisnega niza odsekov tkivno parafinskih vgrajeni v 799 atrofični osebkov gastritis tkiva. V Imunohistokemične Rezultati so pokazali, da je bila PLCε1 izraz pozitiven v 275 (37,0%), atrofični gastritis vključno s 106 (37,7%), blago atrofični gastritis, 98 (26,0%), zmerno atrofični gastritis in 71 (28,1%) v hudo atrofični oz. Poleg tega je bil PLCε1 izraz povezana s stopnjo atrofije ( p
= 0,036) (glej tabelo 2). Zato je v primerjavi z tumorskih in normalnih tkivih, je atrofične vzorci gastritis zmanjšala PLCε1 izraz ( p
< 0,001) (glej tabelo 2)

smo nato potrdili te imunohistokemijske rezultate tkivo mikromrež po obratnem vrstnem redu. -transcription-PCR in odtisi analiza Western treh paru raka želodca in sosednjih normalnih tkiv in tri seznanjeno hude atrofični gastritis in sosednjih normalnih tkiv, ki so bili sprejeti na istem bolniku. V primerjavi s sosednjimi normalnih tkivih, tri preučil želodčnih tumorjev prikazani navzgor regulacijo PLCε1 izražanja na ravni mRNA in koncentracije proteina, toda vse hujših atrofičnega gastritisa tkiv imela nižjo ekspresijo PLCε1 (glej Figure.3). V dogovoru z rezultati imunohistokemičnim analize tkiva mikromrež je v paru Analiza je tudi pokazala, PLCε1 je prekomerno izražen v tumor, vendar navzdol urejeno v hudo atrofični gastritis v primerjavi z izravnanih sosednjih normalnih tkivih.

predlagal Te ugotovitve ta status PLCε1 izraz je v okviru vnetja v primerjavi tumorigeneze zelo različna. Naši rezultati zelo predlagamo, da naši rezultati zelo predlagamo, da bi se lahko PLCε1 protein potencialna biološkega označevalca raka želodca.

Korelacije med PLCε1 in Clinicopathologic funkcije

Ni statistično pomembne razlike v PLCε1 izražanja clinicopathologic podatki, kot so starost, spol, velikost tumorja, razvrščanje, klinični fazi, med bolniki v različnih fazah raka želodca na mikromrežnem tkiva (prikazan v tabeli S1).

Zlasti, kot je prikazano na sliki 2, PLCε1 proteinski izraz v citoplazmi je pogosto odkrili v vseh tumorskih tkiv, normalnih tkivih, toda pogosto manj atrofičnega gastritisa tkivih.

vendar, kot je prikazano na sliki 4, v mikromrežnem tkiva pozitivno PLCε1 izraz so pri vnetnih celic opazili in limfocitov v 13 (48,1%) sosednje običajne vzorce tkiva iz bezgavka metastaz (n0) bolnikov z rakom želodca (kot je prikazano na sliki 4A). Poleg tega je v hudih atrofični gastritis tkiv, 6 (2,37%) vzorcev je pokazala pozitivno PLCε1 izražanje pri vnetnih celic ali limfnih tkiv (slika 4b). Tako ti rezultati pomenijo, da se izraz PLCε1 lahko povezana z vnetnih celic invazijo v tumorigeneze in tumorskih metastaz.

Pogovor

Tukaj, v naši raziskavi najprej dokazati, da je bil PLCε1 up-urejena v človeškem tumorja želodca tkiva, vendar je bil navzdol urejena v vnetja okolju, v primerjavi z običajnimi tkiva. Razlika v izraz PLCε1 v različnih tkivih zelo predlagal, da bi izraz PLCε1 igrajo ključno vlogo pri vnetju in tumorigeneze.

Vnetje je priznan kot pomemben sestavni del lokalnega okolja, ohranjanje razvoja tumorja, vključno z iniciacijo, promocija maligne pretvorbe, invazija, in metastaze [31]. Vzročna zveza med želodca napredovanja tumorja in vnetja je podprt iz stališč, da je vnetje, ki ga povzroča Helicobacter pylori
okužba lahko poveča tveganje napredovanja tumorja [8] - [10]. Nedavno so številna poročila pokazali, da so stopnje izraženosti PLCε1 zelo povezana z vnetjem in tumorigeneze [19] - [21], [23]. Vendar pa je molekularni mehanizem temelji biološki pomen PLCε1 v razvoj želodčnega raka in napredovanje ostaja nejasna. Naša študija je dokazala, da se regulacija bi lahko PLCε1 pomembno pri napredovanju raka želodca. Zlasti njegov navzdol predpis vnetja okolju, zelo predlagali, da so lahko PLCε1 pomembno biomarkerjev, in se lahko uporabijo za razlikovanje stanje želodčni raka iz atrofičnemu fazi lezije.

Poleg tega je pri našem delu, PLCε1 protein mogoče zaznali pri vnetnih celic in limfocitov tkiv v nekaterih sosednjih normalnih tkiv na N0 stopnje in pri nekaterih hudih atrofični gastritis tkiva. Pri sesalcih, je PLCε1 poročal izraženi v non-imunskih celic, kot so epidermalni keratinociti, dermalnih fibroblastih in epitelijskih celic, vendar ne v imunskih celicah, kot so limfociti, granulocitov, makrofagov in dendritičnih celic [21], [32] [33]. . Naši rezultati kažejo, da je funkcija PLCε1 beljakovin pri raku želodca je lahko povezana z njegovo ekspresijo v imunskem sistemu

V skladu s temi razpoložljivih rezultatov, smo predlagali možne mehanizem PLCε1 beljakovin delovanje v tumorigeneze raka želodca: PLCε1 protein kot effecter v Ras in Rap malih GTPases [12], [14], [15] je sprva izražen v normalnih želodčne sluznice tkiva. V okviru napredovanja atrofičnega želodca lezije, ki je PLCε1 protein izražanje zmanjšal za preprečevanje zgodnje infiltracijo vnetje, po katerem PLCε ^{- /- miši predmeti označeni odpornost proti TPA-induciranje kožnega vnetja [18], [19]. S povečanjem pravočasno in stopnjo vnetja atrofičnega želodca lezije, ki je PLCε1 protein postopoma izražen v imunskih celic, ker je PLCε zahteva različne vnetne reakcije [21], [22], kar lahko končno inducira nastanek raka želodca. Hkrati PLCε1 beljakovin dobi višjo izraz v želodčnih rakave celice, ker PLCε prekomerno ekspresijo lahko spodbuja črevesno tumorigeneze v APC Min /+ miši [20].}

Če povzamemo, up-regulacijo PLCε1 izražanja v želodcu rak, ampak navzdol ureditev v atrofični gastritis opazili naši rezultati. Vloga pomen PLCε1 pri raku želodca je dodatno poudarjena z našo ugotovitvijo njene inverzne korelaciji s kronično atrofični gastritis. Ti rezultati ne samo kažejo, da se PLCε1 lahko uporabijo kot prognostičnega kazalnik razlikovati raka želodca, atrofičnega gastritisa, ampak tudi upravičujejo dodatne študije za vzpostavitev morebitno povezavo med biološke funkcije PLCε1 in patogenezi raka želodca. Naše raziskave tudi kažejo, da ima lahko PLCε1 pomembno vlogo pri tumorigeneze raka želodca, še posebej v začetni fazi in lahko predstavljajo nov označevalec za diagnosticiranje raka želodca v zgodnji fazi.

Podpora Informacije
Tabela S1.
Odnos med PLCε1 izražanja in clinicopathologic značilnosti
doi:. 10,1371 /journal.pone.0047563.s001
(DOC)

• Plos ONE: Reg IV je neposreden cilj črevesnih prepisovalni dejavnik CDX2 želodčnega raka
• Plos ONE: Adenoviralni Dostava EMX2 Gene zavira rast v humani Rak želodca