RhoE, en ny medlem i Rho-proteinfamiljen, är en viktig reglerare av cellskelettet och cellmigration. Vår grupp har tidigare visat att RhoE som ett direkt mål för HIF-1α och förmedlar hypoxi-inducerad epitelial till mesenkymala övergång i gastric cancerceller. Därför antog vi att RhoE kan spela en viktig roll i magcancer metastaser. I den aktuella studien har vi undersökt roll RhoE uttryck i magcancer, cellinvasion och metastasering, och påverkan av RhoE om reglering av potentiella uttrycket av nedströms gener. RhoE uttryck höjdes i magcancer vävnader jämfört med normala mag vävnader. Vi fann också ett nära samband mellan den histologiska grad och diagnos av patienten. Uppreglering av RhoE förbättras avsevärt flytt och invasiva förmåga gastric cancerceller både In vitro Mössor och In vivo Citation:. Feng B, Li K, Zhong H, Ren G, Wang H, Shang Y, et al. (2013) RhoE Främjar Metastas i ventrikelcancer genom en mekanism Beroende på ökat uttryck av CXCR4. PLoS ONE 8 (11): e81709. doi: 10.1371 /journal.pone.0081709 Redaktör: Sharmila Shankar, University of Kansas Medical Center, USA Mottagna: 11 januari 2013, Accepteras: 24 Oktober 2013; Publicerad: 29 november 2013 Copyright: © 2013 Feng et al. Detta är en öppen tillgång artikel distribueras enligt villkoren i Creative Commons Attribution License, som tillåter obegränsad användning, distribution och reproduktion i alla medier, förutsatt den ursprungliga författaren och källan kredit Finansiering:. Detta arbete stöddes av National Basic Research Program of China (No: 2009CB521700), National högteknologi forsknings- och utvecklingsprogram Kina (nr: 2006AA02A253) och National Science and Technology stödprogram under elfte femårsplanen Period (No: 2006BAI02A14). Finansiärerna hade ingen roll i studiedesign, datainsamling och analys, beslut att publicera, eller beredning av manuskriptet Konkurrerande intressen:.. Författarna har förklarat att inga konkurrerande intressen finns Introduktion Gastric cancer är den näst vanligaste orsaken till cancerrelaterad död i världen och tumörmetastaser är det största hindret för en framgångsrik behandling och den främsta orsaken till patientens dödlighet [1,2]. I årtionden har många studier försökt förstå de processer och mekanismer för metastaser i magcancer. Under de senaste åren har det visat sig att epitelial mesenkymala övergång (EMT) är av avgörande betydelse i denna process och i hög grad bidrar till cancercellinvasion och metastas. En möjlig orsak är att under EMT är cytoskelettet grunden module, vilket leder till spridning av tumörceller [3]. RhoE tillhör en undergrupp av Rho proteiner som spelar nyckelroller i cytoskelettet formation , cellmotilitet, cellcykeln och apoptos [4,5]. Till skillnad från de typiska Rho proteiner, vilken cykel mellan en aktiv GTP-bundet tillstånd och en vilande BNP-bundet tillstånd, RhoE saknar inneboende GTPas aktivitet och alltid presenteras som den aktiva GTP-bundna formen [6]. Denna unika egenskap indikerar att funktionen av RhoE är huvudsakligen regleras genom dess uttryck snarare än av dess aktivitet. Nyligen har flera studier funnit att onormalt uttryck av RhoE förknippades med cancer och att RhoE kan verka antingen som en tumörsuppressorgen eller en onkogen, beroende på varifrån cancern [7-9]. På samma sätt har RhoE varierande påverkan på metastaser i olika cancerformer. I melanom, RhoE stöder migration och invasivitet hos tumörceller genom att reglera aktincytoskelettet [10]. Men i hepatocellulär cancer, RhoE representerar sig själv som en suppressor protein av tumörmetastas [11,12]. Tidigare vår grupp har funnit att RhoE förstärktes i gastric cancerceller genom induktion av HIF-1α expression under hypoxiska förhållanden och främjas EMT av gastric cancerceller [13]. Således, hypotes vi att RhoE kan ha ett positivt bidrag i metastasering av magcancer. I den aktuella studien undersökte vi effekten av RhoE på metastas av gastric cancerceller och de bakomliggande mekanismerna. cellodling Den mänskliga magcancer cellinjer SGC7901, MKN-45, MKN-28, KATO-III och den normala gastrointestinala cellinje GES bevarades i vårt institut [14-16]. Dessutom magcancer cell- linje SGC7901-M, som har en hög metastatisk potential, och SGC7901-NM, som har en dålig metastaserande förmåga, upprättades och underhållas i vårt institut [17]. Alla celler hölls i RPMI 1640-medium kompletterat med 10% fetalt bovint serum (GIBCO, Carlsbad, CA, USA) och odlades vid 37 ° C i en fullständigt fuktad atmosfär av 5% CO2. Tissue Array För immunfärgning applikationer, var två vävnadssamlingar av human magcancer kommersiellt köpt från träffa Biotech Co Ltd (Shanghai, Kina). En vävnadsuppsättning innehöll 90 tumörvävnads fläckar och matchas angränsande icke-tumörvävnad fläckar som erhölls från 90 patienter (med 5.3-6.1 års uppföljning). Tillverkaren förutsatt att kön, ålder, och kliniskt patologiska parametrar hos patienterna. Den andra uppsättningen innehöll 120 platser med 40 primära tumörvävnads fläckar, 40 matchade angränsande icke-tumörvävnad fläckar, och 40 matchade lymfnodmetastaser fläckar. Immunohistokemi utfördes med användning av Histostain ™ Plus kit (Zhongshan Goldenbridge Biotech, Kina) enligt tillverkarens anvisningar. Mus-anti-RhoE antikropp (spädd 1: 100; Upstate, MA, USA) eller anti-CXCR4-antikropp (spädd 1: 200; Sigma-Aldrich, MO, USA) användes i IHC-analys såsom första antikropp. Mus-IgG användes i stället för den första antikroppen som den negativa kontrollen i dessa studier. Det erhållna resultatet var semikvantitativt utvärderas genom att tilldela poäng för intensiteten av immunoreaktivitet och för den andel av celler som positivt färgade som beskrivs av andra. Intensiteten av immunreaktivitet delades in i fyra kategorier och gjorde som frånvarande (-; poäng: 0), svag (+; poäng: 1), måttlig (++; poäng: 2), eller stark (+++, poäng: 3 ) i enlighet med färgningsintensitet som observerades i huvuddelen av gastriska epitelceller. Andelen positiva celler delas in i fyra grupper: (1), 0-25% av tumörceller som uppvisar immunoreaktivitet; (2), 25-50% av cellerna; (3), 50-75 procentenheter av celler; och (4), 75-100% av cellerna. Den totala poängen var produkten av den två [18]. Proteinprover extraherades från celler eller vävnader genom sonikering i en lyseringsbuffert (150 mM NaCl, 50 mM Tris HCl (pH 8,8), 0,1% SDS, 2 mM EDTA, 1 mM PMSF, 1% NP40, 5
. Dessutom nedreglering av RhoE minskat den metastatiska potentialen av cancerceller. PCR array och efterföljande transwell analys visade att regleringen av magcancer metastas av RhoE delvis förmedlas av CXCR4. Denna observation antydde att CXCR4 kan vara en nedströms effektor för RhoE. Sammanfattningsvis identifierade vår studie RhoE som ett nytt prognostisk biomarkör och metastatiskt befrämjande genen för magcancer
Material och metoder
Immunohistokemi
Western blot-analys
Tandköttssjukdom och esofageal och magcancerrisk
Amerikanska forskare har publicerat sina nya fynd om tandköttssjukdom i ett forskningsbrev i det senaste numret av tidskriften Mage betitlad, Parodontal sjukdom, tandlossning, och risk för esofageal
Tarm- och orala mikrobiomer förutsäger allvarligheten av COVID-19
En fråga som fortsätter att vara obesvarad under den pågående coronavirus-sjukdomen 2019 (COVID-19) har varit varför finns det ett utpräglat mönster när det gäller svår sjukdom? En intressant ny studi
Vita blodkroppar och deras roll i hjärnan
I en banbrytande studie, en grupp internationella forskare har funnit att hjärnan har specifika interna immunceller som hjälper till med normal hjärnutveckling och spelar en roll vid vissa neurologisk
