Dysregulated miRNAs Leeschtung kritescher Chargen während carcinogenesis a Kriibs Werdegang. Am Moment studéieren, war d'Funktioun vum Mir-1228 * zu Regulatioun Kriibs Werdegang vun gastric Kriibs ze propagéieren. Ofgeholl Ausdrock vun * Mir-1228 gouf zu Mënsch gastric Kriibs Stoffer vergläichen ze normal Stoffer observéiert. Duerno, war d'Roll vum Mir-1228 * bewäert zu VIVO VerfÜgung de Modell entholl xenograft benotzt. An dësem Modell, Mir-1228 * overexpression xenograft entholl Opstellung opgeléist. Doriwwer eraus, hien huet mir Mir-1228 * negatif reegelen NF-κB Aktivitéit zu SGC-7901 gastric Kriibs Zellen an fonnt dass CK2A2 eng Zilscheif vum Mir-1228 * war. Upregulation vum Mir-1228 * ofgeholl den Ausdrock vun mesenchymal lues a fräi epithelial Bewaacher E-cadherin suggeréiert potenziellen Roll an epithelial-mesenchymal Transitioun suppressing. Erginn, déi dëse Conclusiounen d'éischt Beweiser datt Mir-1228 * eng wichteg Roll spillt gastric Kriibs Wuesstem zu Regulatioun a virschloen, datt selektiv Restauratioun vum Mir-1228 * virdeelhaft wier fir gastric Kriibs Therapie VerfÜgung Fro:. Jia L , Wu J, Zhang L, Chen J, Zhong D, Xu S, et al. (2013) Restauratioun vum Mir-1228 * Expression Hien Epithelial-Mesenchymal Iwwergank zu Gastric Cancer. PLoS NËMMEN 8 (3): e58637. Doi: 10.1371 /journal.pone.0058637 VerfÜgung Redakter: Hiromu Suzuki, Sapporo Medical University, Japan VerfÜgung Arnaque: 25 Oktober 2012; Akzeptéiert: 5 Februar 2013; Publizéiert: 12. Mäerz 2013 VerfÜgung Copyright: © 2013 Jia et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung Funding:. D'Auteuren hu keng Ënnerstëtzung oder Fonge fir Rapport VerfÜgung Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren, datt keng Competitioun Interessen existéieren deklaréiert hunn VerfÜgung MicroRNAs (miRNAs) eng Klass vu kuerz sinn ( 20-23 nucleotides zu Längt), endogenous, Single-gekëmmert RNAs déi Gene Ausdrock ofgeschnidden vun dauernd respektiv Repressioun oder mRNA regléieren [1], [2]. Iwwert dës molekulare Mechanismen, besëtzen miRNAs normal biologescher Funktiounen, wéi Regulatioun vun Zell Prolifératioun, dat, an apoptosis. Ausserdem, hun dysregulated miRNAs gouf dës kritesch Rollen an Regulatioun carcinogenesis a Kriibs Werdegang [3], [4] ze spillen. Abberant miRNAs Ausdrock goufen an vill Arte vun malignancies dorënner gastric Kriibs observéiert [5]. VerfÜgung Epithelial-mesenchymal Transitioun (EMT) ass eng biologic reprogramming event datt epithelial Zell erlaabt Multiple biochemical Ännerungen ze forméieren engem mesenchymal Zell ze kréien phenotype. Iwwerdeems EMT kritescher fir adäquat embryonal Entwécklung ass, réit Beweiser waarden, datt de aberrant Aktivatioun vun EMT féiert zu malignant entholl Werdegang [6]. Et gouf gewisen, datt EMT e Schlëssel Prozess un der Entwécklung vun Kriibs Contributioun ass, duerch de Verloscht vun der epithelial Bewaacher E-cadherin, eng Erhéijung vun der mesenchymal Bewaacher Vimentin charakteriséiert, an eng Erhéijung vun der Opbau an invasiv Verhalen [7], [8]. VerfÜgung An eiser leschter Etude, déi vun der miRNA lackeleg pancreatic Kriibs Adelskreesser analyséiert, mir-1228 * als eent vun Kriibs-Zesummenhang miRNAs (Donnéeën net gewisen) fonnt gouf. Hei, mir gëtt Beweiser datt Mir-1228 * war verwandelt-reglementéiert gastric Kriibs Stoffer Verglach mat normal Stoffer. Restauratioun Ausdrock vu Mir-1228 * zu gastric Kriibs Zellen vill Zell Wanderung an entholl Wuesstem inhibit. Mechanistically, mir bewisen, dass Mir-1228 * bremst NF-κB Aktivéierung an EMT Hien potenziell. VerfÜgung Zell Kultur VerfÜgung Mënscherechter gastric Kriibs Zell Linnen SGC-7901 , AGS an BGC-823 huet sech aus dem Institut vun Biochimie a Zell Biologie (Chinese Akademie vun de Wëssenschaften) kaaft. Eng normal gastric epithelial Zell Linn GES-1 war vun der Peking Institut fir Cancer Research kaaft. Dës Zellen sech op 37 ° C an engem 5% CO2 incubator zu RPMI-1640 haten (SGC-7901 an BGC-823), F-12K (AGS) oder DMEM (GES-1) mëttelfristeg mat 10% An et Bovine serum nà [ ,,,0],9], [10]. VerfÜgung Séminairen Echantillon VerfÜgung fofzeg Puer gastric Kriibs an bascht Net-Kriibs Otemschwieregkeeten Echantillon sech vu Patiente kritt deen chirurgesch resection bei der zweeter laizistesch Spidol, College vun Medezin mécht , Zhejiang Universitéit. D'stemmt Net-Kriibs bascht Stoffer goufen ewech Site vun der entholl manst 5 cm kritt. Keen vun de Patienten hu radiotherapy Chimiotherapie virun der Chirurgie weiderentwéckelt. Ray Echantillon waren gesammelt, an flëssege Stéckstoff virgezunnen-gefruer, an bei -80 ° C gespäichert bis benotzt [11]. All Stoffer sech bestätegt histologically gastric adenocarcinomas gin. D'Etude gouf vun der Zweeter laizistesch Hospital IFLA- Comité vun Zhejiang University College vun Medezin virausgesat. D'ënnerschriwwen Awëllegung war vun all de Bedeelegten kritt oder aus Patienten Vertrieder wann direkt Zoustëmmung net kritt kéint. VerfÜgung RNS erauszéien a Real-Zäit Hinnen alleguer VerfÜgung Total RNS war vun der cultured Zellen ofgebaut oder Stoffer TRIzol (Invitrogen), an der Konzentratioun vun insgesamt RNS virgeschriwwen gouf benotzt. Synthes vun cDNA an real-Zäit Hinnen alleguer sech mat der TaqMan MicroRNA Réckproduktioun Transkriptioun Kit (Obwuel Biosystems) an der TaqMan MicroRNA Assay Kit (Obwuel Biosystems) gesuergt, bzw.. Real-Zäit Hinnen alleguer war op en Obwuel Biosystems StepOnePlus ™ Real-Time Hinnen alleguer System standing no de Protokoll. Den Ausdrock Niveau vum Mir-1228 * war bis RNU6B normalized. D'real-Zäit Hinnen alleguer Reaktioune waren am triplicate gesuergt. Der relativer Ausdrock vun miRNAs war mat der Komparativ CT Method berechent [12]. VerfÜgung entholl Inoculation Assay zu gewaltege Sträit Mais VerfÜgung Weiblech BALB /c athymic Sauna Mais am Alter vun 4 Wochen goufen am Laaf vun de Shanghai schafft Déieren Center (Chinese Akademie vun de Wëssenschaften). All d'Prozeduren sensibiliséieren Déieren sech duerch hun Déieren IFLA- Comité, College vun der Medezin, Zhejiang University guttgeheescht. Mir-1228 * oder Mir-NC stabil transfection SGC-7901 Zellen suspensions (2,5 × 10 Zell Migratioun VerfÜgung D'Migratioun Fähegkeet vum Mir-1228 * oder Mir-NC stabil transfection SGC-7901 Zellen sech Transwells (8-mm pore Gréisst fonnt benotzt, Corning). D'Transwells sech an der Plaque 24-gutt no. Frësch trypsinized an Katakombe Zellen sech zu 100 μl serum-gratis RPMI1640 mat 1% An et Bovine serum gespaart. Iwwer 1 × 10 Western Blot VerfÜgung Total Proteinen sech d'BCA Kit gemooss benotzt (Pierce) laut den Hiersteller d'Protokoll. D'Proteinen vun Zellen sech fir 2,5 Stonnen um 200 V. de NC Schläimhait vun electrophoresis op 12% SDS polyacrylamide gelies an elektro-blotted zu nitrocellulose (NC) Schläimhait fractioned sech mat erauszesichen Prellbock fir 1 Stonn bei Raumtemperatur incubated, gefollegt vun Iwwernuechtung Behandlung mat der Primärschoul antibody bei 4 ° C, an dann mat enger HRP-conjugated Secondaire antibody (MBL). Nom Wäschen, goufen d'reaktiv Bands no der Uweisungen d'Hiersteller andeems en ECL Western blot erkennen Kit (Millipore) fonnt. Antibodies gebraucht an dëser Erfarung huet Kanéngchen monoclonal anti-E-cadherin (Epitomics), anti-Vimentin (Epitomics), anti-β-catenin (Epitomics), anti-Wéngertsschleek (Zell sécher), anti-Slug (Zell sécher), anti -ZEB1 (Zell sécher), anti-ZEB2 (Santa Cruz), anti-CK2A2 (Santa Cruz) a Maus anti-GAPDH (KangChen Biotech). VerfÜgung Immunohistochemistry VerfÜgung Paraffin Rubriken, 3- μm an deck, sech op 60 ° C fir 2 h gebakene an deparaffinized. Antigen retrieval war fir 15 Minutten am Asaz citrate Natrium Prellbock (PH 7,2) 95 ° C standing an dann drënner waren fir 30 Minutte bei Raumtemperatur gi si. No 15 Minutte mat 3% Waasserstoff Hem behandelt ginn d'endogenous peroxidase ze blockéieren, huet de Rubriken fir 30 Minutten mat normal Geess serum confining flësseg behandelt Net-spezifesch bindend ze reduzéieren an dann Kanéngchen polyclonal anti-E-cadherin (Santa Cruz) oder Kanéngchen monoclonal anti-Vimentin (Epitomics) war de Rubriken fir 12 h bei 4 ° C incubated. No rewarming fir 1 h an wäschen fir 5 Mol, Rubriken sech fir 30 Minutte bei Raumtemperatur mat Première antibody incubated. Diaminobenzidine war fir Faarf Reaktioune gebraucht. VerfÜgung Plasmid Bau- a Zell Transfection VerfÜgung der Mir-1228 * Ausdrock Vecteure (Mir-1228 *) oder negativ Kontroll (Mir-NC) vum Klone gebaut gouf vun genannt oligonucleotides datt d'optimiséiert Mir-1228 * Desaccord-Glück Texter (Oligonucleotides sech entwéckelt wéi: erop staarkt, 5'-TGC TGG TGG GCG GGG GCA GGT GTG TGG Eenzelzäitfueren TGG CCA CTG ACT GAC CAC ACA CCC CCC CGC CCA C-3 ";. ënnen staarkt, 5'- CCT GGT GGG CGG GGG GGT GTG TGG TCA GTC Agt GGC CAA AAC CAC ACA CCT GCC CCC GCC CAC C-3 ") oder negativ Kontroll Desaccord-Glück an pcDNA6.2-GW /EmGFP Vecteure ( Invitrogen) [15]. Déi 2-KB Mir-1228 * Promoteur Regioun war Kick (Primers sech als entworf: vir, 5'-ATC Tag GGT zu Enn CTC ACT TGG AG CCA CAC Agées-3 "; Géigendeel, 5'-GAC Name Agées TCT zu Enn TCA Agées GTT GGG GTG TG-3 ".) an coloned zu pGL3-Enhancer Vecteure (Promega) [16], benannt als pGL3-Mir-1228 * -promoter. Déi eidel pGL3-Enhancer Vecteure protokolléiert als negativ Kontroll (pGL3-Kontroll). De Mir-1228 * Zil- Regioun vun der CK2A2 3'UTR Haaptrei war chemesch vun Shanghai Biotech Wierderbuch a gouf vun der pMIR-Dobäi luciferase plasmid (Obwuel Biosystems), benannt als pMIR-CK2A2 gesaat. D'pReceiver-c-Rel ORF Klon mat GFP-Markéierung gouf aus GeneCopoeia kaaft. Ze generéieren stabil transfected Zellen, huet de Bord-1228 * an Mir-NC Ausdrock gesond transfected an der SGC-7901 Zell Linn mat Lipofectamine 2000 (Invitrogen) laut den Hiersteller d'Uweisungen. No 48 Stonnen, war blasticidin (14 μg /ml) bis mëttelfristeg agefouert. D'pGL3-Mir-1228 * -promoter /Kontroll, GFP-c-Rel /Kontroll, pMIR-CK2A2 /Kontroll oder NF-κB reporter Vecteure (Promega) waren an SGC-7901 Zellen mat Lipofectamine 2000, Praxis-TkLanguage transiently transfected ( Promega) war wéi intern normalization [17]. VerfÜgung Luciferase reporter assay VerfÜgung Luciferase reporter assay war gesuergt an SGC-7901 Zellen benotzt. D'Zellen sech zweemol mat PBS gewäsch an am Popup- Lysis Respektiv (Promega) an der luciferase Aktivitéiten lyzed aus 20 μl lysate gemooss goufen mat der Dual-Luciferase Reporter Assay System (Promega) op GloMax 20/20 Luminometer (Promega). All waren d'Donnéeë kritt duerch d'Resultater aus op d'mannst dräi onofhängeg Widerhuelung averaging. VerfÜgung statistique Analys VerfÜgung Ënnerscheeder tëschent den Ausdrock Niveau vun der Raumstatioun-1228 * zu gastric Kriibs Patienten vun der Wilcoxon alles sech ënnerschriwwen-Platz Test. D'Medeziner Donnéeën sech mat der Chi-Feld Test analyséiert. Student an d'T-Test an ANOVA agestallt goufen d' kënschtlech VerfÜgung a zu VIVO VerfÜgung Donnéeën ze analyséieren. All P VerfÜgung Wäerter waren zwee-eesäitegen an Differenzen sech als statistesch relevant definéiert fir P VerfÜgung &Si besteet; 0,05. Resultater goufen andeems d'SPSS V.16.0 Software (SPSS INC) analyséieren. * P &Si besteet; 0,05, ** P &Si besteet; 0,01. VerfÜgung Mir-1228 * ass Dacks Down-reglementéiert Mënscherechter Gastric Cancer VerfÜgung wenden, fir festzestellen, ob de Bord-1228 * differentially zu Mënsch Primärschoul ausgedréckt ass gastric Cancers, war den Ausdrock Niveau vun der eeler Mir-1228 * benotzt iwwerpréift TaqMan real-Zäit Hinnen alleguer zu 50 Puer Mënsch gastric Kriibs Stoffer an hien huet misse-stemmt bascht noncancerous gastric Stoffer. Eis Resultater weisen, dass den Ausdrock Niveau vum Mir-1228 * bedeitend an gastric Kriibs Stoffer am Verglach mat der bascht noncancerous gastric Stoffer rofgaang war (Figebam. 1A). Iwwer 72% vun entholl Echantillon waren ënneschten ausgedréckt mat Mir-1228 * (Figebam. 1B). Benotzt 2 Weideren Mir-1228 * Ausdrock sech mat Bezuch zu der clinicopathological Charakteristiken vun de Patienten bewäert. All Patienten hu keng wäit Metastasen an all Stoffer goufen histologically mat gastric adenocarcinomas confirméiert. All Fäll (n = 50) waren an zwou Gruppen stratified: Mir-1228 * niddereg Ausdrock (n = 36) an Mir-1228 * héich Ausdrock (n = 14). De Mir-1228 * niddereg-Ausdrock Grupp haten Inklinatioun Richtung groussen entholl Gréisst. Mä, huet et keen groussen Relatiounen tëscht de Bord-1228 * Ausdrock an aner clinicopathologic Funktiounen wéi Alter, Geschlecht, histological Typ oder TNM Etapp (Table 1). VerfÜgung erhéicht Mir-1228 * Expression Hien Xenograft entholl Formatioun VerfÜgung fir funktionell Roll vum Mir-1228 * zu gastric Kriibs ze bewäerten, déi optimiséiert Mir-1228 * Desaccord-Glück war an pcDNA6.2-GW /EmGFP Vecteure gekloonten. Gastric Zell Linn SGC-7901 Zellen sech transfected mat pcDNA6.2-GW /EmGFP-Mir-1228 * oder pcDNA6.2-GW /EmGFP-NC Vecteure a stabil Zell Strecken generéiert an Mir-1228 * oder Mir-NC genannt, bzw.. Wéi erwaart, huet RT-Hinnen alleguer Analyse datt Mir-1228 * stabil Zellen eng Erhéijung vun alen Mir-1228 hat * Ausdrock wéini Mir-NC stabil Zellen vergläichen (Figebam. 2A). Et war keen morphologic Verännerung Mir-1228 * stabil-transfected Zellen am Verglach mat nontransfected Zellen. SGC-7901 Zellen mat oder ouni transfection vum Mir-1228 * sech subcutaneously an de Säite vun Sauna Mais implanted déi potentiell Auswierkunge vum Mir-1228 * op gastric Kriibs Wuesstem zu VIVO VerfÜgung ze diskutéieren. Overexpression vum Mir-1228 * Trupen bedeitend der entholl Wuesstem (Figebam. 2B). Mam Enn vun der experimentell Period, der Gréisst an naass Gewiicht vun erhéijen mat Mir-1228 * war overexpression däitlech méi kleng a méi niddreg wéi déi vun der Kontroll Grupp (Figebam. 2C-D). Sou, beweist d'Donnéeën, datt Mir-1228 * xenograft entholl Wuesstem vun gastric Kriibs Zellen bremst zu VIVO VerfÜgung. VerfÜgung NF-κB Activatiounscode verantwortlech fir d'niddreg Expression vum Mir-1228 * zu Gastric Cancer VerfÜgung rezenten Aarbecht huet bewisen, dass déi meescht miRNAs Transkriptiouns Faktor hunn (TF) bindend Siten a vill Etuden hu bericht, dass miRNAs vun TFs regulariséiert ginn [19]. Hei hu mir et geheescht bioinformatic Programmer (Promoter 2.0 a P-Match) ze identifizéieren Potential Reglementatioun vun miRNA-1228 * [16], [17]. Mir hunn dräi c-Rel Domainen an der 2-KB Mir-1228 * Promoteur Regioun bindend (Figebam. 3A). Zanter c-Rel subunit engem Member vun der NF-κB Famill an hyperactivation vun NF-κB Aktivitéit ass gouf mat gastric Kriibs gewise gin verbonne [20], [21]. Mir Hypothes, datt NF-κB Aktivéierung zu der downregulation vum Mir-1228 * zu gastric Kriibs zougeschriwwen ass. VerfÜgung eisem Hypothes ze beweisen, hunn mir e luciferase bauen mat Mir-1228 * Promoteur Regioun a bewäert hir Aktivitéit an Äntwert fir NF-κB Aktivéierung. An Experimenter vun culturing SGC-7901 Zellen fir 8 Stonnen an der Präsenz vun TNF-α (50 oder 100 Dummeldéng /ml, klassesch NF-κB Passerelle activator) an /oder pyrrolidine dithiocarbamate (PDTC, 100 μM) gemaach war, e oft benotzt inhibitor vun der Transkriptiouns Faktor NF-κB [22]. SGC-7901 Zellen sech mat pGL3-Mir-1228 transfected * -promoter oder pGL3-Kontroll, 24 Stonne méi spéit, transfected SGC-7901 Zellen fir 8 Stonnen ze TNF-α ausgesat goufen mat oder ouni PDTC ob NF-κB Aktivéierung reguléieren ze ermëttelen Mir-1228 * Promoteur Aktivitéit. Mir gesinn, datt TNF-α Behandlung Ofstand Mir-1228 inhibited * Promoteur Aktivitéit an inhibition vun NF-κB mat PDTC verhënnert TNF-α-mediated downregulation vun der Aktivitéit Niveauen (Figebam. 3B) suggeréiert datt NF-κB negatif miR- regléieren vläicht 1228 * Ausdrock. Fir weider festzestellen, ob NF-κB subunit c-Rel ass responsabel fir deregulating Mir-1228 *, transfected mir SGC-7901 Zellen Mir-1228 * -promoter mat oder ouni GFP-c-Rel an observéiert GFP engem groussen Verloscht vun luciferase Aktivitéit an -c-Rel Grupp wéi Kontroll (Figebam. 3C). Erginn, drop hindeit Donnéeën datt NF-κB subunits c-Rel dréit System fir d'downregulation vum Mir-1228 * zu gastric Kriibs. VerfÜgung Mir-1228 * Hien NF-κB Aktivitéit an CK2A2 Expression zu SGC-7901 fir den Afloss vum Mir-1228 * op der NF-κB sécher Passerelle, NF-κB reporter gesond an entweder Mir-1228 waren ze ermëttelen transfected * oder Mir-NC stabil transfected SGC-7901 Zellen an d'Aktivitéit vun NF-κB luciferase war no 48 Stonnen alles. Eis Resultater gewisen, datt d'Aktivitéit vun NF-κB vill vun overexpression vum Mir-1228 * rofgaang war (Figebam. 4A), engem negative Feedback Glück tëscht Mir-1228 * Ausdrock an NF-κB Aktivitéit gët. Fir weider afgerappt Ziler vum Mir-1228 * an der Passerelle NF-κB identifizéieren, standing mir Bioinformatik Analyse an fonnt CK2A2 war ee vun de putative Zil- Genen datt virausgesot huet. Benotzt Miranda an RNA22 [23], [24], läit mir ee Potenzial obligatoresch Site fir Mir-1228 * um 3'UTR vun CK2A2 (Figebam. 4B). CK2A2 ass ee subunit vun FAQ kinase CK2 déi an der NF-κB Passerelle Équipe ass [25], [26] an hiren Ausdrock observéiert gouf an e puer Cancers dorënner gastric Kriibs [27], [28] an-reglementéiert gin. Weider Ënnersich op der Associatioun tëscht CK2A2 an Mir-1228 * bewisen, dass d'FAQ Niveau vun CK2A2 war concomitantly verwandelt-reegelen op Mir-1228 * stabil overexpression zu SGC-7901 Zellen (Figebam. 4C). An fir z'iwwerpréiwen ob CK2A2 e richtegen Zil- vum Mir-1228 * ass, e Segment vum CK2A2 3'UTR der bindend Site wouvun war zu pMIR-Dobäi plasmid an der 3'UTR vun der luciferase Gentherapie gekloonten [29]. D'unisse Intensitéit vun de Rapporteur Gentherapie war vill an der Grupp ofgeholl, datt mat pMIR-CK2A2 an Mir-1228 Co-transfected war * Verglach zu der Kontroll (Figebam. 4D). Dës Resultater ugeholl, datt Mir-1228 * openee mat der CK2A2 mRNA 3'UTR. VerfÜgung Mir-1228 * bremst EMT VerfÜgung Et huet gemellt ginn, datt Aktivatioun vun NF-κB eng wesentlech Roll spillen an EMT fir Kriibs Werdegang [30], [31], an inhibition vun NF-κB Aktivitéit zu puer entholl Zell Linnen ëmmer eng reversal vun EMT [32]. Zanter Mir-1228 schéngt * fir NF-κB Aktivitéit negatif reguléieren, mir dofir propagéieren wann Mir-1228 * och negativ EMT zu gastric Kriibs regléieren konnt. Western blot zougedréckt datt overexpression vum Mir-1228 * zu SGC-7901 Zellen verwandelt-reegelen mesenchymal lues (Vimentin, β-catenin, Wéngertsschleek, Slug, an ZEB1 /2), iwwerdeems weider-reegelen epithelial Bewaacher E-cadherin (Figebam. 5A ). Ausserdeem, ëmmer Mir-1228 * overexpression enger Ofsenkung vun Zell Migratioun (Figebam. 5B-C). EMT-Zesummenhang Proteinen ze weider bestätegen Ännerunge vum Mir-1228 * transfected SGC-7901 Zellen am xenograft Modell war Immunohistochemical staining agestallt. Et gouf gewisen, dass den Ausdrock vun Vimentin rofgaang ass an der Expressioun vun E-cadherin fräi wéi mat deenen an Kontroll Zellen am Verglach (Figebam. 5D). D'ähnlechen bruet huet an aner gastric Kriibs Zell Linn AGS (Figebam. S1) observéiert. D'Daten déi éischte Beweis dass Mir-1228 * Restauratioun vun gastric Kriibs negatif EMT reguléieren. VerfÜgung Gastric Kriibs ass déi véiert stäerkste gemeinsam malignant entholl weltwäit an elo ass den zweete Spëtzekandidat Ursaach vun Kriibs-Zesummenhang veruerteelt [33], [34]. Obwuel aktuell Praxis, datt Chimiotherapie oder Bestrahlung mat chirurgesch resection kombinéiert daitlech de globale Iwwerliewe vun gastric Kriibs Patienten geklomm ass, ass de globale 5-Joer Iwwerliewe Taux nach héich. Gastric carcinogenesis ass als eng multifactorial an multistep Prozess ze gin dass den Aktivéierungscode vu oncogenes an der inactivation vun entholl suppressor Genen doranner [35]. VerfÜgung miRNAs endogenous Net-FAQ-coding kuerz RNAs sinn déi wichteg Roll vun bewosst Leeschtung Physiologie, Entwécklung, a Krankheeten déi Gene Ausdrock negatif Regulatioun. Analysen vun miRNA Ausdrock Profiler hu gewisen, dass vill miRNAs aberrantly ausgedréckt ginn a mat tumorigenesis, Werdegang soll, an hätt vun verschiddenen haematological zolitt erhéijen dorënner gastric Kriibs [36]. Ze identifizéieren a entschlësselen kann der biologescher Funktiounen vun miRNAs Dereguléierung an gastric Kriibs hëllefen eis fir besser de pathogenesis vun dëser déidlecher Krankheet verstoen a stellt Roman Méiglechkeeten miRNA-baséiert Therapien ze entwéckelen. Zum Beispill, Mir-221 an Mir-222 goufen positiv gastric Kriibs Zell gewise gin Prolifératioun an Invasioun Regulatioun, suggeréiert datt wielt inhibition vun deene miRNAs fir gastric Kriibs Behandlungen virdeelhaft ginn [37]. miRNAs spillen eng wichteg Roll an der aetiology an pathogenesis vun verschiddenen Cancers vun enger Zuel vun oncogenes oder entholl suppressors Genen gezielt. Mir-21 ass an H. pylori-Krankheet gastric mucosa an gastric Kriibs Stoffer overexpressed. Ugewannt Ausdrock vu Mir-21 erhéigt de invasiveness vun gastric Kriibs Zellen, RECK ass den direkten Zil vum Mir-21 [38]. Mir-218 bremst der Invasioun an Metastasen vun gastric Kriibs vun der Robo1 receptor gezielt [39]. Ueda et al [40] identifizéiert 22 bis-reglementéiert an 13 verwandelt-reegelen miRNAs zu gastric Kriibs versus Net-entholl mucosa, Low Ausdrock vun loosse-7g an Mir-433 an héich Ausdrock vu Mir-214 verbonne waren mat encadréiere Resultat am Allgemengen Iwwerliewe onofhängeg vu Krankheete covariates, vun Invasioun, lymph-Node Metastasen, a Etapp dorënner Déift. Mir-375 ass dacks verwandelt-reglementéiert gastric Kriibs a Funktioun als entholl suppressor gastric Kriibs Zell Prolifératioun potenziell ze regléieren vun der JAK2 oncogene gezielt [10]. Eis aner Etude zougedréckt Mir-1228 * war eng epithelial Kriibs-Zesummenhang miRNA (hien). Mä nëmmen e puer Fuerschunge vum Mir-1228 * muss gemellt ginn. Guled et al [41] bewisen, dass Mir-1228 * war zu malignant Vollek Echantillon Verglach mat normal Echantillon héich ausgedréckt. Mä de biologeschen Funktioun vun dëser miRNA huet nach net bewäert ginn. Am Moment studéieren, identifizéiert mir datt * Mir-1228 war verwandelt-reglementéiert méi wéi 70% vun Echantillon gastric Kriibs wann Verglach mat hirem nontumor garantéieren an déi experimentéierte Beweis, datt et esou eng entholl suppressor Funktioun kann duerch EMT negatif Regulatioun an inhibiting NF -κB Aktivitéit. VerfÜgung Eis Donnéen uginn Linnen downregulation vum Mir-1228 * zu gastric Kriibs Stoffer an gastric Zell Kriibs. Verschidde molekulare Mechanismen Féierung ze miRNA dysregulation, wéi genetesch stattfannen, epigenetic aberration an dereguléierte transcriptional Aktivitéit [42]. TFs konnt an miRNA Ausdrock vun verbindlech bis Promoteur Regiounen, entweder gestallt oder agebousst Kontexter [43] regléieren. Ze ermëttelen wéi Mir-1228 * war zu gastric Kriibs dereguléierte, analyséiert mir den 2-KB Promoteur Regioun Offloss vun der Raumstatioun-1228 * an fonnt dräi putative c-Rel bindend Beräicher. Obwuel NF-κB bescht fir seng transcriptional Aktivéierung Funktioun, rezent Aarbecht mat p65 bekannt ass, hien RelB an c-Rel datt NF-κB kann spezifesch Genen verwandelt-regléieren [17], [44], [45]. Mat Hëllef vun engem Mir-1228 * Promoteur-reporter bauen déi Texter 2-KB Fragmenter vun der Raumstatioun-1228 * Promoteur, fonnt mir dass NF-κB Passerelle activator TNF-α ofgeholl Mir-1228 * Promoteur Aktivitéit. An NF-κB inhibitor PDTC bemierkenswäert antagonized TNF-α-mediated Mir-1228 * Promoteur niddreg Aktivitéit. Eis Daten zougedréckt och dass c-Rel konnt direkt * Promoteur mat Mir-1228 bis Photo'en an negativ hiren Ausdrock regléieren. Zanter c-Rel subunit engem Member vun der NF-κB Famill ass, phenocopied NF-κB Aktivéierung d'Auswierkunge vun c-Rel zu Regulatioun Mir-1228 * Ausdrock, suggeréiert datt NF-κB Passerelle negatif zu der downregulation vum Mir-1228 Équipe war * zu gastric Kriibs. Ausserdeem, schéinen Mir-1228 * overexpression och an der downregulation vun NF-κB Aktivitéit. Dofir, Direktive eis Daten enger duebeler negativen Feedback Glück tëscht NF-κB an Mir-1228 *. Déi genau Mechanismus, wéi dës negativ Réckkopplung iwwerhaapt brauch weider studéiert ginn. VerfÜgung CK2A2 ass ee subunit vun FAQ kinase CK2, déi eng héich conserved a ganzen FAQ serine /threonine kinase ass. Overexpression vun CK2 gouf zu enger Rei vun Cancers, inklusiv deenen vun der mammary drüs Aarbecht, Nier, haett, Kapp an den Hals an Mo [27], [46] observéiert. Overexpression vun CK2 an der mammary Glands vun transgenic Mais bewierkt hyperplasia an dysplasia datt schliisslech zu adenocarcinomas Féierung [47]. CK2 waren am Kapp an Hals squamous Zell carcinoma Linnen an Stoffer overexpressed. Knockdown vun CK2 subunits differentially inhibited IκBα ofgeschnidden, NF-κB nuklear Lokalisatioun, phosphorylation, DNA bindend, an reporter Aktivitéit [25]. CK2 spillt eng wichteg Roll an Her-2 /neu sécher, IκB ofgeschnidden an NF-κB Aktivéierung Spur [26]. An dëser Etude, awer mir dat Mir-1228 * den Ausdrock vun CK2A2 op d'FAQ Niveau reduzéiert. D'luciferase assay mat engem reporter der Mir-1228 * mat um 3'UTR vun CK2A2 mRNA bindend Haaptrei ugeholl, datt Mir-1228 * direkt d'3'UTR vun CK2A2 Ziler. Geholl zesummen, weg dës Donnéeën, datt d'Ennerdréckung vun NF-κB Aktivitéit vum Mir-1228 * kann CK2A2 Ausdrock duerch gezielt. EMT ass elo all an eng Rei vu Krankheeten dorënner de Werdegang vun Kriibs ze geschéien bekannt. Et gëtt ugeholl, datt EMT e wichtege Prozess ass diffusen Histologie zu Form a lancéieren Metastasen vun der motility vun entholl Zellen Tempo [48]. EMT ass duerch verschidden oncogenic sécher Weeër wéi AKT an NF-κB [49], [50] gereegelt. Speziell, Aktivatioun vun NF-κB gouf EMT ze förderen dës iwwerdeems inhibition vun NF-κB Aktivitéit zu mesenchymal Zell engem reversal vun EMT [30] Ursaachen. Verloscht vun E-cadherin Ausdrock an de falschen Eck geschéckt vun vimentin Ausdrock sinn als déi wichtegst molekulare lues vun EMT ginn [51]. TFs, wéi Wéngertsschleek, Slug, ZEB1 an ZEB2, goufen eng kritesch Roll ze hun gewisen. miRNAs hunn wichteg Roll an der EMT Prozess Regulatioun. De Mir-200 Famill an Mir-205 EMT regléieren vun ZEB1 an ZEB2 gezielt, déi Funktioun als transcriptional repressors vun E-cadherin Ausdrock, domat d'aggressiveness vun Kriibs Zellen reduzéieren [52]. Stabil Ausdrock vu Mir-155 bremst vill Zellen aus amgaang EMT an bremst den Ausdrock vun enger Zuel vu Genen zu der Aféierungs- vun EMT Zesummenhang [53]. Overexpression vun CK2 war an der carcinogenesis an Entwécklung vun Colorectal Kriibs duerch Regulatioun vun EMT-Zesummenhang Genen [54] Équipe. Aktivatioun vun CK2 an c-Rel induces EMT via eng aryl Kuelewaasserstoff receptor an Slug sécher Passerelle [55]. An eiser Etude, Restauratioun vum Mir-1228 * EMT phenotype opgeléist an gastric Kriibs Zell Migratioun reduzéiert, dat eventuell ze Mir-1228 * -mediated downregulation vun NF-κB Aktivitéit Spezialfäegkeeten konnt an duerch CK2A2 Ausdrock gezielt. VerfÜgung D' presentéieren Aarbecht identifizéiren Mir-1228 * als negativ regulator vun NF-κB Aktivitéit an Héichpunkter seng Roll EMT an gastric Kriibs Wuesstem zu suppressing hindeit, datt selektiv Restauratioun vum Mir-1228 * kéint fir gastric Kriibs Therapie positiv sinn. VerfÜgung D'Auteuren Merci Dr. Yongliang Zhu am Zweete laizistesch Hospital vun Zhejiang University College vun Medezin fir technesch Assistenz. VerfÜgung
Aféierung VerfÜgung
spontan a Methode VerfÜgung
Resultater VerfÜgung
Diskussioun VerfÜgung
Ennerstëtzung Informatiounen VerfÜgung Dorënner S1. VerfÜgung Effekt vum Mir-1228 * op EMT zu AGS Zellen. (A) Western blot Analyse vun epithelial Bewaacher E-cadherin an mesenchymal Bewaacher Vimentin zu Mir-1228 * stabil transfected AGS Zellen a Kontroll. (B) Transwell Migratioun assay zougedréckt datt AGS Zellen stabil transfected mat Mir-1228 * no ënnen Opbau Potential am Verglach mat Mir-NC (× 100) VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0058637.s001 VerfÜgung ( Intrigue) VerfÜgung
Arbeschterlidder VerfÜgung
Heartburn verstoen
Grouss Studie fënnt datt d'SARS-CoV-2 viral Last déi niddregst bei Kanner ass
Bakterien am Gebuertskanal verbonne mat engem nidderegen Risiko fir Eierstockskriibs
Studie suggeréiert eng Verbindung tëscht probiotescher Notzung an "Gehirnfogginess"
Nei computational Modellermethod virausgesäit wéi Darmmikroben sech mat der Zäit veränneren
Mouthwash beaflosst d'Auswierkunge vun der Übung
Kanner sinn immun virbereet op SARS-CoV-2
Op dmannst 30 nei Krankheeten sinn an de leschten 20 Joer opgetaucht a bedrohen elo zesummen dGesondheet vun Honnerte vu Millioune Leit. Fir vill vun dëse Krankheeten, et gëtt keng Behandlung, geheelt
Leaky Darm a Raumfluch - de Mechanismus opgedeckt
Eng nei Studie iwwer dEffekter vun der simuléierter Mikrogravitatioun, dKonditioun, déi Astronauten am Weltraum stellen, stéiert depithelial Barriär vum Darm, an den Effekt bestoe bleift och nodeems d
Metformin kann hëllefe leckeren Darm
En Team vu Fuerscher vun der University of California, San Diego, hunn erfollegräich Darmorganoiden an hirem Labo benotzt fir dAuswierkunge vu Medikamenter ze weisen fir Bedéngungen ze behandelen wéi