Abstract
Tetrandrine, en bis-benzylisoquinoline alkaloid isolert fra tørket rot av Hang-Fang-Chi ( Stephania Citation. Qin R, Shen H, Cao Y, Fang Y, Li H, Chen Q, et al. (2013) Tetrandrine induserer Mitokondrier-mediert apoptose i Human Gastric Cancer BGC-823 celler. PLoS ONE 8 (10): e76486. doi: 10,1371 /journal.pone.0076486 Redaktør: Lucia R. Languino, Thomas Jefferson University, USA mottatt: 16. desember, 2012; Godkjent: 27 august 2013; Publisert: 01.10.2013 Copyright: © 2013 Qin et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres Finansiering:. Dette arbeidet ble støttet av følgende tilskudd: tilskudd fra National Natural Science Foundation of China (81070423 og 81101677), tilskudd fra Science Foundation Natural i Jiangsu-provinsen (BK 2010332). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer Innledning i Kina, magekreft, en av de mest vanlige ondartede svulster, som følge av en akkumulering av genetiske og epigenetiske hendelser, fortsatt har en høy insidens og dødelighet [1-3]. Det er flere faktorer som forårsaker angrep av magekreft, slik som Helicobacter pylori-infeksjon Tetrandrine (C 38H 42N 2o 6, MW 622,730 ) er en bis-benzylisoquinoline alkaloid isolert fra tørket rot av Hang-Fang-Chi ( Stephania Siden tetrandrine har et stort potensial i anti-kreft terapi, er det viktig å studere det systematisk for å forstå dens mekanisme. Derfor, i denne studien undersøkte vi de mulige mekanismer for tetrandrine på menneskelige mage kreftceller in vitro Hotell og in vivo Materialer og reagenser Tetrandrine ble hentet fra Jiangxi Yintao Pharmaceutical Development Company (Jiangxi, Kina). Antistoffer ble hentet fra følgende kilder: antistoffer mot BCL-2, Bax, BCL-XL, Caspase-3, -8, -9, cytokrom c Den menneskelige magekreft cellelinje BGC-823 ble kjøpt fra Shanghai Cell Biology, Chinese Academy of Sciences (Shanghai, Kina). Celler ble dyrket i Dulbeccos modifiserte Eagles medium (DMEM) (Gibco BRL, Grand Island, NY, USA), supplert med 10% føtalt bovint serum (Hyclone, Logan, UT, USA), 1% penicillin og 1% streptomycin i en fuktig atmosfære med 95% luft og 5% CO 2 ved 37 ° C. Celleviabilitet assay Cellelevedyktigheten ble målt ved MTT-analyse. I korte trekk ble celler sådd i 96-brønns plater ved en tetthet på 1 x 10 4 celler /brønn. Etter 36 timer ble cellene behandlet med eller uten tetrandrine ved variable konsentrasjoner på 24, 48 og 72 timer; og fosfat-bufret saltvann (PBS) tjente som en negativ kontroll. Deretter ble 20 ul av MTT-fargestoff-oppløsning (0,5 mg /ml, oppløst i PBS og filtrert gjennom en 0,2-mm membran) ble tilsatt til hver brønn og inkubert ved 37 ° C i 4 timer. Deretter ble 150 ul dimetylsulfoksid tilsatt til hver brønn, og platene ble inkubert ved 37 ° C i ytterligere 10 min. Absorbans ble målt ved 490 nm ved anvendelse av en 96-brønn mikroplateleser. IC 50 verdien ble definert som konsentrasjonen av stoff som hemmer 50% cellevekst sammenlignet med kontrollgruppen. Gastric kreftceller ble vasket to ganger med PBS, og deretter 100 ul av RIPA lysebuffer (Beyotime, Kina) ble tilsatt til hver brønn for å lyse cellene i omtrent 20 min. Deretter ble blandingen sentrifugert ved 12.000 g Total cellulær RNA ble isolert ved anvendelse av Trizol reagens ( Invitrogen) ved å følge fremstilling protokoll og oppløst i DEPC-behandlet vann. Konsentrasjonen av total RNA ble målt ved UV-absorbans-spektroskopi. Revers transkripsjon ble utført ved hjelp av en RevertAid ™ First Strand cDNA Synthesis Kit (Fermentas MBI, Waltham, MA, USA) etter produsentens protokoll. Det nylig syntetiserte cDNA ble amplifisert ved polymerasekjedereaksjon (Fermentas). Sekvensene av hver primer anvendt i denne studien er vist i tabell 1. Den polymerase chain reaksjonsbetingelser er oppført som følger: 95 ° C i 3 minutter, 95 ° C i 5 minutter, 58 ° C i 30 min, og 72 ° C i 30 minutter, fulgt av 40 sykluser ved 94 ° C i 15 s og 60 ° C i 1 min. Alle forsøk ble utført in triplo. Annexin V-propidiumjodid bindingsanalysen I korte trekk ble cellene sådd ut i 6-brønns plater og behandlet med forskjellige konsentrasjoner av tetrandrine til 24 timer, og PBS tjente som en negativ kontroll. Deretter ble cellene resuspendert i 500 ul kald bindingsbuffer. Cellesuspensjoner suspen~~POS=TRUNC ble farget mot Annexin-V og propidiumjodid (BD Pharmingen TM, Becton Dickinson, San Jose, CA, USA) i henhold til produsentens instruksjoner, og deretter flowcytometri analyse ble utført av en FACS (Coulter, Becton Dickinson). Caspase-3 aktivitetsanalyse Kort, celler ble inkubert i en 6-brønns plate ved en konsentrasjon på 4 x 10 5 /brønn og ble behandlet med den angitte konsentrasjon av narkotika. et like stort volum av PBS ble anvendt som en negativ kontroll. Caspase-3-aktivitet ble målt ved anvendelse av en caspase-3-aktivitet analysesett (Beyotime, Kina) etter produsentens anvisninger. Absorbansen ble deretter målt ved 405 nm ved hjelp av en mikroplateleser. Alle forsøkene ble utført i tre eksemplarer. Prosedyrer som involverer dyr og deres omsorg ble gjennomført i samsvar med NIH retningslinjer (NIH Pub. No.85-23, revidert 1996) og ble godkjent av Animal Care og bruk Committee av de tilknyttede Folkets sykehus, Jiangsu University. Dyreforsøk Kvinne hårløse mus (BALB /c nu /nu), 4-6 uker gamle, ble hentet fra Experimental Animal Center of the Chinese Academy of Science (Shanghai, Kina) og holdt under spesifikke patogen-frie forhold i et biologisk skap på Forsøksdyr Facility Jiangsu University. Dyrene ble holdt i en 12-timers lys-mørke-syklus. Romtemperatur opprettholdes på rundt 20 ° C, og fuktighet ble holdt på ca 50% i et rom med en filtrert luft. Å etablere en BALB /c-mus xenograft modell av human magekreft, BGC-823-celler ved en konsentrasjon på 5,0 x 106/150 ul ble injisert inn i den høyre flanken til hver BALB /c naken mus. Omtrent 10 dager senere (tumorstørrelsen nådde 120-150 mm3), nakne mus ble tilfeldig delt i tre grupper (N = 5) og gitt de følgende behandlinger: Kontroll (behandlet med normal saltoppløsning), lav dosegruppe (behandlet med 40 mg /kg tetrandrine), og høy dosegruppe (behandlet med 120 mg /kg tetrandrine). BALB /c-mus ble injisert intraperitonealt med tetrandrine (200 ul, 40 mg /kg eller 120 mg /kg) eller et tilsvarende volum av fysiologisk saltvann, en gang daglig i 3 uker, respektivt. Tumorstørrelsen ble målt hver 3. dag i to vinkelrette dimensjoner med Vernier calipers, og tumorvolumet (TV) ble beregnet ved formelen: TV = lengde (mm) x bredde 2 (mm 2) × 0,5 . Relativ tumorvolum (RTV) ble beregnet i henhold til følgende formel: RTV = tv t /TV 0, hvor TV 0 er tumorvolumet på dag 0 og TV t er svulsten volum på en gitt dag t. I mellomtiden ble dyrene veid to ganger pr uke. Ved slutten av forsøket ble tumorene skåret ut og fiksert i formalin for ytterligere analyse. parafininnstøpte prøver skåret ut fra BGC-823 nakne mus ble farget ved anvendelse av følgende antistoffer : BCL-2 og Bax (BOOSTER), BCL-XL, aktivert caspase-3, og aktivert caspase-9 (Santa Cruz) for immunhistokjemi. Bilder ble tatt med et fluorescens-mikroskop (Carl Zeiss). Alle forsøkene ble utført minst tre ganger, og alle data ble presentert som gjennomsnitt ± standard avvik (SD). Statistiske forskjeller ble bestemt ved en-veis ANOVA SPSS 16,0 programvare. En P-verdi mindre enn 0,05 ble ansett for å være betydelig. cytotoksiske effekten av tetrandrine på BGC-823 celler Den kjemiske strukturen til tetrandrine er vist i figur 1A. Den anti-proliferative effekt av tetrandrine ble undersøkt i BGC-823 celler ved anvendelse av MTT-analysen. Som vist i Figur 1B, ble cellene behandlet i 24, 48, og 72 timer med forskjellige konsentrasjoner av tetrandrine. Tetrandrine ble funnet å hemme veksten av BGC-823-celler i en dose- og tidsavhengig måte. BGC-823-celler ble signifikant inhibert ved tetrandrine ved 10 ug /ml ( P Tetrandrine-mediert anti-kreft egenskaper har blitt rapportert å være assosiert med apoptose [9-12]. Følgelig, undersøkte vi muligheten for tetrandrine-indusert apoptose av BGC-823-celler ved anvendelse av en strømningscytometri-analyse. Som målt ved strømningscytometri, er effekten av tetrandrine på BGC-823 celle apoptose vist i figur 2A og B, med 24-h tetrandrine behandlinger på 0, 6, 8, og 10 ug /ml resulterer i 4,35%, 11,4% , 17,72% og 32,34% av apoptotiske celler, henholdsvis, og tetrandrine (8 ug /ml) i 0, 12, 24, og 48 timer resulterer i 3,4%, 6,64%, 19,15% og 25,85% av apoptotiske celler, respektivt (figur 2C og D). Disse dataene klart indikerte at tetrandrine indusert apoptose i BGC-823-celler i en dose- og tidsavhengig måte. Antallet apoptotiske celler økte sammen med tetrandrine konsentrasjon og behandlingstiden. For å undersøke mer spesifikk mekanisme på induksjon av apoptose i BGC -823 cellene ved tetrandrine, vi har oppdaget at ekspresjonen av apoptose-relaterte proteiner ved Western blotting og deres mRNA-nivå ved sanntids (RT) -PCR. Her studerte vi uttrykk for Bax, Bad, Bak, Bcl-2, og BCL-XL i BGC-823 celler behandlet med tetrandrine. Etter 24 timer med eksponering for tetrandrine, Bax, Bad, og Bak protein uttrykk ble doseavhengig økt, mens BCL-2 og Bcl-xl protein uttrykk var doseavhengig redusert (figur 3A). Vi fant også at tetrandrine kan oppregulere ekspresjonen av Bax og nedregulere ekspresjon av Bcl-2 i en tidsavhengig måte (figur 3B). For å bestemme hvorvidt tetrandrine vil påvirke gentranskripsjon av bcl-2, bcl-xl, og Bax, ble deres mRNA-ekspresjon undersøkt ved hjelp av RT-PCR (figur 3C). RT-PCR resultatene klart falt sammen med dem presentert i figur 3A. For å undersøke om tetrandrine-indusert apoptose var assosiert med aktivering av kaspase-medlemmer, målte vi ekspresjonen av kaspasene i BGC-823-celler behandlet med forskjellige konsentrasjoner av tetrandrine ved hjelp av Western blotting. Resultatene viste en doseavhengig økning av spaltet caspase-3 og spaltet caspase-9 i tetrandrine- behandlede celler (figur 4A). Imidlertid ikke detekterbare nivåer av spaltede kaspase-3 og kaspase-spaltet 9 ble funnet i cellene i fravær av tetrandrine behandling (data ikke vist). For ytterligere å bestemme hvilken rolle caspaseaktivering i tetrandrine-indusert apoptose, ble BGC-823-celler forbehandlet med pan-kaspaseinhibitor Z-VAD-FMK (10 uM) i 4 timer, og deretter behandlet med 8 ug /ml tetrandrine for 24 h. Sammenlignet med kontrollen, ble de relative aktivitetene av caspase-3 økte i BGC-823-celler behandlet med kun tetrandrine (figur 4B). I tillegg utgivelsen av cytokrom c Siden tetrandrine ble funnet å hemme veksten av BGC-823 celler in vitro Tetrandrine-indusert apoptose i BGC-823 xenografter Immunohistochemistry analyse av tumorvev skåret ut fra BGC-823 xenopodet hårløse mus bekreftet at apoptose hadde skjedd i tetrandrine behandlet svulster og at mitokondrie veien spilt en betydelig rolle ved apoptose. Det var fem nakne mus i hver gruppe. Vi har observert at ekspresjon av Bcl-2 og Bcl-xl ble redusert, mens proteinnivåer Bax, aktivert caspase-3, caspase-aktivert og 9 ble betydelig forbedret ved tetrandrine (figur 6). Alle disse funnene sterkt bekreftet at tetrandrine kan indusere apoptose, i samsvar med in vitro Magekreft, den fjerde vanligste diagnosen svulst bak kreft i lunge, bryst, tykktarm og endetarm, fører til nesten en million årlige dødsfall og har vært den andre årsaken til kreft-relaterte dødelighet på verdensbasis [23-26]. Kirurgi, kjemoradioterapi, og molekylær målrettet terapi har vært de viktigste behandlingsstrategier i behandling av magekreft [27]. Selv kirurgisk reseksjon har vært den mest effektive helbredende behandling, resultatene er inkonsekvent og begrenset av svulst tilbakefall og chemoresistance. Konvensjonelle kjemoterapeutiske legemidler, som for eksempel PTX 5-fluorouracil og cisplatin drepe kreftceller ved å fremkalle apoptose og autofagi; men kreftceller kan bli resistente mot narkotika-indusert apoptose [17,28,29]. Det er rapportert at tetrandrine har sterk anti-tumor aktivitet både in vitro Hotell og i vivo For det første, vår resultatene viste at tetrandrine effektivt hemmet BGC-823 celleproliferasjon analysert ved MTT i en dose- og tidsavhengig måte. I mellomtiden, IC 50-årene av tetrandrine var omtrent 6,1, 4,5 og 3,7 ug /ml i BGC823 celler for 24, 48 og 72 timer henholdsvis. Ifølge tidligere studier, cellegifter drepe solide tumorer hovedsakelig ved å indusere apoptose [30-32]. Vi fant at apoptose ble indusert ved tetrandrine på en konsentrasjonsavhengig måte ved strømningscytometri-analyse med økt tidlige apoptotiske celler og sent apoptotiske celler i magekreft BGC-823-celler. i mammalske celler, apoptose kan utløses av den ytre vei aktivert ved døden reseptoren og indre vei regulert av BCL-2 familiemedlemmer og caspase kaskader i mitokondrie [33,34]. I vår studie, tetrandrine økt uttrykk av de pro-apoptotiske proteiner Bax, Bad, og Bak og redusert protein nivåer av BCL-2 og Bcl-xl. Derfor er det et øket forhold av anti- og pro-apoptotiske proteinekspresjon, slik som Bax /Bcl-2-forhold, ville føre til tap av mitokondriemembranpotensialet. Dysfunctioning mitokondrier utgivelser cytokrom c Det er rapportert at tetrandrine kunne snu motstanden mot mange kjemoterapi narkotika, for eksempel Ptx og doxorubicin i KBv200 og K562 naken mus xenograft modeller [38,39]. Tetrandrine besitter også en sterk evne til å hemme angiogenese i hjernesvulst hos rotter [40]. Videre er resultatene indikerte at tetrandrine oppviste sterk anti-tumor-aktivitet ved å hemme tumorvekst og indusering av apoptose i den etablerte BGC-823 naken mus xenograft modell. Som konklusjon, våre data viste at tetrandrine vesentlig indusert apoptose i humane magekreft BGC-823 celler og dens naken mus xenograft modeller. Tetrandrine-indusert apoptose var assosiert med aktivering av apoptose indre reaksjonsvei. Basert på disse resultatene, kan tetrandrine ha stort potensial i behandlingen av menneskelige magekreft i fremtiden. Vi vil gjerne takke medlemmene i klinisk medisin Institutt for Jiangsu-universitetet for deres teknisk assistanse.
tetrandra
S. Moore), har blitt rapportert å ha anti-kreft effekt på mange svulster. I denne studien undersøkte vi tetrandrine-indusert apoptose på human magekreft BGC-823 celler in vitro Hotell og in vivo
. Resultatene viste at tetrandrine signifikant inhiberte cellelevedyktighet i en dose- og tidsavhengig måte og apoptose. Det økte apoptose; oppregulering av Bax, Bak og Bad; og nedregulering av Bcl-2 og Bcl-xl i BGC-823 celler. Videre tetrandrine økt aktivering av kaspase-3 og -9, frigjøring av cytokrom c
, og oppregulering av apaf-1, noe som tyder på at tetrandrine-indusert apoptose var relatert til den mitokondrielle pathway. I mellomtiden, forbehandling med pan-caspase inhibitor z-VAD-FMK i BGC-823 celler reduserte tetrandrine-indusert apoptose ved å blokkere aktivering av kaspaser. Videre tetrandrine effektivt hemmet tumorvekst via apoptose-induksjon, noe som ble bekreftet ved immunhistokjemisk analyse i en naken mus xenograft modell. Til sammen har vi konkludert med at tetrandrine betydelig hemmet spredning av magekreft BGC-823 celler gjennom mitokondriene avhengige apoptose, som kan spille en lovende rolle i mage kreftbehandling
, diett, tobakk, og så videre [4]. Avhengig av omstendighetene, de fleste pasienter med magekreft behov for kirurgi, kjemoterapi og /eller kjemoradioterapi [5]. Tidligere studier har vist at magekreft er en kompleks genetisk sykdom relatert til onkogener eller tumor suppressors [6].
tetrandra
S. Moore). Nylig har de ulike biologiske aktiviteter av tetrandrine blitt studert intensivt på grunn av sitt store bruk i leddgikt, arytmi, betennelse, silikose, ulike typer svulster, og reversere multilegemiddelresistens [7,8]. Det er rapportert at tetrandrine har betydelige effekter på tumorer inkludert bremse tumorvekst og øke dyr overlevelsestid og overlevelsesraten [9-12]. Tetrandrine bevirker en G1 cellesyklus blokade og induserer apoptose i forskjellige celletyper. Men de nøyaktige mekanismer som tetrandrine initierer apoptose og hemmer celleveksten i gastrisk tumorceller forblir uklar [13]. Det er rapportert at codelivery av paclitaxel (Ptx) og tetrandrine av nanopartikler effektivt kan forsterke cytotoksisiteten til Ptx ved sekvensiell inhibering av ROS-avhengige Akt reaksjonsvei og aktivering av apoptotiske reaksjonsveier basert på oksydasjon terapi mot magekreft [14]. Imidlertid, som et terapeutisk middel, Ptx har uunngåelig alvorlige bivirkninger på grunn av dets ikke-spesifikke toksiske effekter, og spesielle oppløsningsmidler, og tumorceller kan bli mer motstandsdyktig mot Ptx-indusert apoptose [15-17]. En tidligere studie har vist at tetrandrine har en synergistisk effekt med kjemoterapeutika på apoptose av magekreft cellelinjer [18]. Videre er et derivat (H1) av tetrandrine utøver god anti-multilegemiddelresistens-aktivitet ved å initiere den intrinsiske reaksjonsvei apoptose og hemmer aktivering av ERK1 /2 og akt1 /2 [19]. Disse funnene tyder på at tetrandrine kan erstatte Ptx som første linje kjemoterapi for magekreft.
.
Materialer og metoder
, Apaf-en, og β-aktin var fra Santa Cruz Bioteknologi (Santa Cruz, CA, USA); anti-Bad og Bak var fra BioWorld Technology (St. Louis Park, MN, USA). Den Trizol agenssettet ble kjøpt fra Invitrogen (Grand Island, NY, USA). MTT (3- (4, 5-dimetyltiazol-2-yl) -2, 5-difenyltetrazoliumbromid) ble kjøpt fra Sigma-Aldrich (St. Louis, Missouri, USA).
Cell kultur
Western blotting
i 15 min, og supernatanten ble oppsamlet. Proteinkonsentrasjonen ble detektert ved anvendelse av en BCA Protein Assay Kit (Beyotime, Kina) i henhold til produsentens instruksjoner. Totalt protein ble separert ved SDS-PAGE på 8%, 10% og 12% polyakrylamidgeler og overført elektroforetisk til polyvinylidendifluorid (PVDF) membraner (Millipore, Bedford, MA, USA). Etter blokkering i 2 timer eller over natten med 5% ikke-fettholdig tørrmelk (oppløst i Tris-bufret saltvann-Tween 20 buffer, TBST), ble membranene inkubert med primære antistoffer (1: 500 til 1: 1000 fortynning) i 2 timer ved romtemperatur eller over natten ved 4 ° C og deretter vasket tre ganger med TBST (5 mM Tris-HCl, pH 7,4, 136 mM NaCl, 0,1% Tween 20) før omsetning med pepperrot peroksidase (HRP) -konjugert sekundære antistoff (1: 5000 -1: 10000) i 1 time ved romtemperatur. Etter vasking tre ganger i 10 minutter hver med TBST ble membranene behandlet med ECL western blotting deteksjonsreagens.
Kvantitativ sanntids-polymerase kjedereaksjon
Gene
Sense primer (5 'til 3')
Antisense primer (5 'til 3’)
bcl-2GGATCCAGGATAACGGAGGCCCAGATAGGCACCCAGGGTbaxACCAAGAAGCTGAGCGAGTGTACAAACATGGTCACGGTCTGCbclxlGGCAGGCGACGAGTTTGACCCATCCCGGAAGAGTTCATβ-actinTGGCACCCAGCACAATGAACTAAGTCATAGTCCGCCTAGAAGCATable 1. Sekvenser av primere for genene brukt i denne studien.
CSV ned CSV
Etikk uttalelse
Tetrandrine behandling av subkutane BGC-823 svulster hos mus
Immunhistokjemisk analyse
Statistisk analyse
Resultater
< 0,05). IC 50 verdi var 6,104 ± 0,786, 4,471 ± 0,650 og 3,744 ± 0,573 etter 24, 48 og 72 timer av tetrandrine behandling, henholdsvis. Således ble 6, 8, og 10 ug /ml bestemt som de representative konsentrasjoner i følgende studier.
Induksjon av apoptose ved tetrandrine
Tetrandrine-mediert uttrykk for BCL-2 familiemedlemmer
Tetrandrine-indusert apoptose via en mitokondrie vei i BGC-823 celler
økte på en doseavhengig måte ved tetrandrine. En representativ flowcytometri Resultatet viste at cellene forbehandlet med Z-VAD-FMK sterkt redusert tetrandrine-indusert apoptose, og at bare et lite antall av apoptotiske celler ble påvist (figur 4C). Deretter undersøkte vi ekspresjonsnivået av cytoplasmatisk cytokrom c
, som frigjøres fra mitochondria inn i cytoplasma i løpet av apoptose, handlet på apoptotisk protease-aktiverende faktor-1 (Apaf-1) ved å øke bindingen av Apaf- 1 til ATP /dATP, og induserte caspase-9-avhengig aktivering av kaspase-3 [20-22]. Det ble funnet at tetrandrine signifikant økt ekspresjon av cytokrom cytoplasmatiske c
og Apaf-1 i BGC-823-celler på en doseavhengig måte (figur 4D). Sammen utgjør disse funnene antydet at en mitokondriene-mediert caspase kaskade veien var involvert i tetrandrine-indusert apoptose.
Anti-tumor effekt av tetrandrine på BGC-823 nakne mus xenografter
, vi evaluert anti-tumor effekt av tetrandrine in vivo
med etablerte xenograft modeller ytterligere. Som vist i figur 5A, kan tetrandrine effektivt å hemme tumorvekst etter en 24-dagers behandling. Ved slutten av 24 dager var den gjennomsnittlige tumorvolum var 493.06 mm 3 og 1243.00 mm 3 i høydosegruppen og lavdose-gruppen, henholdsvis, svarende til 80,52% og 50,9% hemning hastighet sammenlignet med kontroll gruppe. I tillegg ble tumorvekten redusert som et resultat av behandling med tetrandrine ved begge konsentrasjoner (Figur 5B &Co. tabell 2). Dette resultat viser at en høy dose av tetrandrine hadde en sterkere anti-tumoreffekt enn en lav dose på BGC-823 xenograft modell.
Gruppe (n = 5)
Tumor volum (mm 3)
Hemmende Rate (%)
Tumorvekt vekt~~POS=HEADCOMP (g)
Hemmende Rate (%)
control2531.78 ± 153.251.194 ± 0.10Tet (40 mg /kg) 1243,00 ± 55,19 ** * 50.900.641 ± 0,06 *** 46.31Tet (120 mg /kg) 493,06 ± 145,63 *** 80.520.298 ± 0,09 *** 75.04Table 2. Hemming av tetrandrine (Tet) på tumorvekst av nakne mus
*** P
<.; 0.001 versus
kontrollgruppen. CSV Last ned CSV
studien.
Diskusjoner
i mange kreftceller, slik som A549 humane lungekarcinomceller, blærekreftceller, tykktarmskreftceller, hepatomceller, og så videre [9-12]. En tidligere studie viste at tetrandrine kan spille en lovende rolle ved synergistisk interaksjon med kjemoterapeutika muligens av sine synergieffekter på indusere apoptose og downregulating kjemoterapeutika assosierte gener i MKN-28 celler og BGC-823 celler [18]. Imidlertid har mekanisme tetrandrine på menneskelige magekreft BGC-823 celler ikke blitt identifisert. I denne studien viste vi at tetrandrine viste potent antitumoraktivitet mot human magekreft in vitro Hotell og in vivo
, belyse de underliggende virkningsmekanismer.
, som akkumuleres i cytosol og danner et kompleks med apaf-en. I den intrinsiske reaksjonsvei, som en effektor, blir caspase-3 spaltet ved aktivering av kaspase-9 [35-37]. I denne studien, viste vi at caspase-9 og caspase-3 ble aktivert av tetrandrine. Den pan-caspase inhibitor z-VAD-FMK redusert apoptose i BGC-823 celler, noe som indikerer at mitokondrie pathway spiller en sentral rolle i tetrandrine-indusert apoptose.
Takk