PLoS ONE: Tetrandrine izaziva Mitohondriji posredovani apoptozu u ljudskim karcinoma želuca BGC-823 stanica

Sažetak pregled

Tetrandrine, bis-benzylisoquinoline alkaloid izoliran iz osušenog korijena Hang-Fang-Chi ( Stephania pregled tetrandra pregled S. Moore), bio je objavljeno je da posjeduje antikancerogeno djelovanje na mnogim tumorima. U ovoj studiji ispitivali smo tetrandrine inducirana apoptoza na ljudskoj raka želuca BGC-823 stanice In vitro
i in vivo pregled. Rezultati su pokazali da tetrandrine značajno inhibiraju održivost stanica u dozi i vremenski ovisan način i inducirane apoptoze. To je povećao apoptoze; regulaciju Bax, Bak i loše; i podreguliranje Bcl-2 i Bcl-XL kod BGC-823 stanicama. Štoviše, tetrandrine povećava aktivaciju kaspaze-3 i -9, oslobađanje citokroma c pregled i doreguliranje apaf-1, što ukazuje da tetrandrine inducirana apoptoza je povezana s mitohondrijskom puta. U međuvremenu, prethodna obrada s pan-inhibitora kaspaze z-VAD-FMK u BGC-823 stanicama smanjenih tetrandrine-inducirana apoptoza blokira aktivaciju kaspaze. Nadalje, tetrandrine učinkovito inhibirati rast tumora putem indukcijom apoptoze, koja je potvrđena pomoću imunohistokemijske analize u golih miševa modelu ksenografta. Uzeti zajedno, zaključili smo da tetrandrine značajno inhibira proliferaciju raka želuca BGC-823 stanicama kroz mitohondrija ovisne apoptoze, što može igrati obećavajuću ulogu u želučanom terapiji raka pregled

Izvor:. Qin R, Shen H, Cao Y, Fang Y, Li H, Chen Q, et al. (2013) Tetrandrine inducira Mitohondriji posredovani apoptozu u ljudskim rak želuca BGC-823 stanicama. PLoS ONE 8 (10): e76486. doi: 10,1371 /journal.pone.0076486 pregled

Urednik: Lucija R. Languino, Thomas Jefferson University, United States of America pregled

Primljeno: 16. prosinca 2012; Prihvaćeno: 27. kolovoza 2013. godine; Objavljeno: 1. listopada 2013 pregled

Copyright: © 2013 Qin i sur. Ovo je otvorenog pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan

financiranja. Ovo djelo bio podržan od sljedećih grantova: potpora iz Nacionalne zaklade prirodoslovni Kine (81070423 i 81101677), potpora iz prirodnog Science Foundation provinciji Jiangsu (BK 2.010.332). U financijeri nisu imali ulogu u studiju dizajna, prikupljanja i analize podataka, Odluka o objavi, ili pripremu rukopisa pregled

U konkurenciji interese.. Autori su izjavili da ne postoje suprotstavljeni interesi pregled

Uvod pregled

U Kini, rak želuca, jedan je od najčešćih zloćudnih tumora, koje proizlazi iz akumulacije genetskih i epigenetičkim događaja, još uvijek ima visoku pojavnost i smrtnost [1-3]. Postoji nekoliko faktora koji uzrokuju pojavu raka želuca, kao što su Helicobacter pylori pregled, infekcije, ishrana, uporaba duhana, i tako dalje. [4] Ovisno o okolnostima, većina pacijenata s rakom želuca potrebno operacije, kemoterapije i /ili kemoradioterapiji [5]. Prethodne studije su pokazale da je rak želuca je kompleksna genetska bolest povezana s onkogena ili tumorske smetnji [6]. Pregled

Tetrandrine (C _{38H 42N 2O 6, MW 622,730 ) je bis-benzylisoquinoline alkaloid izoliran iz osušenog korijena Hang-Fang-Chi ( Stephania pregled tetrandra pregled S. Moore). Nedavno, različitih bioloških aktivnosti tetrandrine su intenzivno proučavali zbog svoje široke primjene kod artritisa, aritmije, upale, silikoza, raznih vrsta tumora, i preokrenuti otpornost na mnoge lijekove [7,8]. To je izvijestio da tetrandrine ima značajne učinke na tumore, uključujući usporavanje rasta tumora i povećava životinja vrijeme preživljenja i stopu preživljavanja [9-12]. Tetrandrine uzrokuje blokadu u G1 staničnog ciklusa, te potiče apoptozu kod različitih tipova stanica. Međutim, točni mehanizmi po kojima tetrandrine inicira apoptozu i inhibiciji rasta stanica u želučanim tumorske stanice ostaju nejasni [13]. To je izvijestio da codelivery paklitaksela (PTX) i tetrandrine od nanočestica može učinkovito povećati citotoksičnost PTX sekvencijskom inhibicije ROS-ovisne Akt puta i aktiviranje apoptoze na temelju oksidacije terapiji protiv raka želuca [14]. Međutim, kao terapijsko sredstvo, Ptx neizbježno ima ozbiljne nuspojave zbog njegove nespecifičnim toksičnih učinaka i posebnim otapala i tumorskih stanica može postati rezistentni na Ptx-inducirane apoptoze [15-17]. Prethodno istraživanje je pokazalo da tetrandrine ima sinergistički učinak s kemoterapeutskim sredstvima na apoptozu želučanih staničnim linijama raka [18]. Nadalje, derivati ​​(H1) na tetrandrine pokazuje dobru anti-višestruka rezistentnim djelovanjem inicirajući intrinzične apoptozu put i inhibirati aktivaciju ERK1 /2 i Akt1 /2 [19]. Ovi rezultati ukazuju na to da tetrandrine može zamijeniti PTX kao prva linija kemoterapije raka želuca. Pregled}

Od tetrandrine ima veliki potencijal u terapiji protiv raka, važno je proučiti sustavno razumijevanju mehanizma. Dakle, u ovoj studiji istražili smo moguće mehanizme tetrandrine na ljudskim stanicama raka želuca In vitro
i in vivo pregled. Pregled

Materijali i Metode pregled

Materijali i reagensi

Tetrandrine je dobiven od Jiangxi Yintao Pharmaceutical Development Company (Jiangxi, Kina). Antitijela su dobiveni iz sljedećih izvora: antitijela protiv Bcl-2, Bax, Bcl-XL, kaspaze-3, -8, -9, citokroma c
, Apaf-1 i β-aktin su iz Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, USA); anti-Bad i Bak bili iz Bioworld tehnologije (Louis Park Sv, MN, USA). Kit reagensa Trizol nabavljen je od Invitrogen (Grand Island, NY, USA). MTT (3- (4, 5-dimetiltiazol-2-il) -2, 5-difeniltetrazolij bromid) je nabavljen od Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Pregled

Stanična kultura pregled

ljudski rak želuca stanične linije BGC-823 je kupljen iz Šangaja Cell Biology, kineske akademije znanosti (Shanghai, Kina). Stanice su uzgojene u Dulbecco modificiranom Eagle mediju (DMEM) (Gibco BRL, Grand Island, NY, USA), uz dodatak 10% fetalnog goveđeg seruma (Hyclone, Logan, UT, USA), 1% penicilina i 1% streptomicin u vlažnoj atmosferi 95% zraka i 5% CO _{2 na 37 ° C. pregled}

Stanična održivost test pregled

Stanična vijabilnost mjerena je MTT pokusom. Ukratko, stanice su nasađene na ploče s 96 jažica u gustoći od 1 x 10 ^{4 stanica /jažici. Nakon 36 sati, stanice se tretira sa ili bez tetrandrine pri različitim koncentracijama tijekom 24, 48, i 72 sata; i fosfatno puferiranoj fiziološkoj otopini (PBS) je poslužio kao negativna kontrola. Zatim se 20 ul MTT otopine boje (0,5 mg /ml, otopljenog u PBS-u, te filtrira kroz 0,2 mm membranu) je dodan u svaku jažicu i inkubirano na 37 ° C tijekom 4 sata. Nakon toga, 150 ul dimetil sulfoksida se doda u svaku jažicu i ploče se inkubiraju na 37 ° C tijekom dodatnih 10 min. Apsorbancija je mjerena na 490 nm upotrebom čitača za mikroploče s 96-jažica. IC _{50 vrijednost definirana je kao koncentracija lijeka koja inhibira 50% rast stanica u odnosu na kontrolu. Pregled}}

Western blot pregled

želucu stanice raka su isprane dva puta s PBS, a zatim 100 ul RIPA puferu za lizu (Beyotime, Kina) doda se u svaku jažicu kako bi se analizirale stanice za oko 20 min. Zatim se smjesa centrifugira pri 12000 g pregled 15 min, a supernatant se sakupi. Koncentracija proteina je otkriven pomoću BCA protein assay kit (Beyotime, Kina) prema uputama proizvođača. Ukupni protein se odvoji sa SDS-PAGE na 8%, 10%, 12% poliakrilamidnim gelovima i elektroforetski na polivinilidenfluorid (PVDF) membranu (Millipore, Bedford, MA, USA). Nakon blokiranja tijekom 2 sata ili preko noći s 5% bezmasnim sušenim mlijekom (otopljenog u Tris-puferiranoj slanoj otopini Tween 20 puferu PBST), membrane su bile inkubirane s primarnim antitijelima (1: 500 do 1: 1000 razrjeđenje) kroz 2 h na sobne temperature ili preko noći na 4 ° C i zatim isprane tri puta s TBST (5 mM Tris-HCl, pH 7.4, 136 mM NaCl, 0.1% Tween 20) prije reakcije sa peroksidazom hrena (HRP), koje je konjugirano sekundarnih antitijela (1: 5000 -1: 10000) tijekom 1 h na sobnoj temperaturi. Nakon ispiranja tri puta tijekom 10 minuta, svaki s TBST, membrane se pomiješa s ECL Western blot-reagens za otkrivanje. Pregled

kvantitativni realnom vremenu lančane reakcije polimeraze pregled

Ukupna stanična RNA je izolirana koristeći Trizol reagens ( invitrogen) u skladu sa protokolom za proizvodnju i otopi u DEPC-tretirane vode. Koncentracija ukupne RNA mjeri UV apsorbancijom spektroskopijom. Reverzna transkripcija je provedena uporabom RevertAid ™ Prvo Strand cDNA Synthesis Kit (Fermentas MBI, Waltham, MA, USA) prema protokolu proizvođača. Novo sintetiziran cDNA je lančanom reakcijom polimeraze (Fermantas). Sekvence svakog primera korištenih u ovoj studiji prikazani su u Tablici 1. polimeraznog lanca reakcijski uvjeti su navedeni kako slijedi: 95 ° C 3 min, 95 ° C kroz 5 minuta, 58 ° C kroz 30 min, i 72 ° C 30 minuta nakon čega slijedi 40 ciklusa na 94 ° C tijekom 15 sekundi i 60 ° C tijekom 1 min. Sva ispitivanja su provedena u triplikatu. Pregled gen pregled pozitivnoj početnici (5 '3')
negativne početnice (5 ' 3’)
bcl-2GGATCCAGGATAACGGAGGCCCAGATAGGCACCCAGGGTbaxACCAAGAAGCTGAGCGAGTGTACAAACATGGTCACGGTCTGCbclxlGGCAGGCGACGAGTTTGACCCATCCCGGAAGAGTTCATβ-actinTGGCACCCAGCACAATGAACTAAGTCATAGTCCGCCTAGAAGCATable 1. Sekvence prajmera za gene koji se koriste u ovom ispitivanju.
CSV Svi CSV

aneksina V-propidij-jodida Test vezivanja pregled

Ukratko, stanice su posađene na ploče sa 6 jažica, te obradi s različitim koncentracije tetrandrine za 24 sata, i PBS koji je poslužio kao negativna kontrola. Zatim, stanice su ponovno suspendirane u 500 ul hladnog veznog pufera. Stanične suspenzije su obojene na Annexin-V i propidij jodida (BD PharMingen ^{TM, Becton Dickinson, san Jose, CA, USA) prema uputama proizvođača, te protočno citometrijska analiza provedena je po FACS (Coulter, Becton Dickinson). pregled}

Caspase-3 aktivnosti test pregled

Ukratko, stanice inkubirani su u ploču s 6 jažica u u koncentraciji od 4 × 10 ^{5 /jažici i pomiješa s naznačenim koncentracije lijekova. jednaki volumen PBS je korišten kao negativna kontrola. Caspase-3 aktivnosti je izmjerena pomoću kaspaze-3 aktivnosti test kit (Beyotime Kina) prema uputama proizvođača. Apsorbancija izmjerena je na 405 nm pomoću čitača mikroploče. Svi eksperimenti su provedeni u tri primjerka. Pregled}

Etika izjava pregled

Postupke životinje i njihovu brigu su provedeni u skladu s NIH smjernicama (NIH Pub. No.85-23, revidiran 1996.) i su odobreni od strane njega i uporaba odbora životinja od povezanih narodne bolnice, Jiangsu Sveučilišta. pregled

eksperimenti na životinjama

Ženski golih miševa (BALB /c nu /nu), 4-6 tjedana, dobiveni su iz eksperimentalnih životinja središte kineske akademije znanosti (Shanghai, Kina) i drži pod određenim uvjetima bez patogena u biološkom kabinetu u pogonu laboratorijskim životinjama Sveučilišta Jiangsu. Životinje su održavane u 12-satnom ciklusu svjetlost-tama u. Sobna temperatura održava na oko 20 ° C, a vlaga se drži na oko 50% u sobi s filtriranom dovod zraka. pregled

Tetrandrine liječenje potkožnog BGC-823 tumora kod miševa pregled

Da bi se uspostavila BALB /c miša ksenograft modela humanog karcinoma želuca, BGC-823 stanice u koncentraciji od 5,0 × 106/150 ul je injektirano u desni bok svakog BALB /c bezdlakih miševa. Otprilike 10 dana kasnije (veličina tumora dosegla 120-150 mm3), golih miševa je nasumično podijeljeno u tri skupine (n = 5), a s obzirom na slijedeće tretmane: Kontrola (tretirani s normalnom otopinom soli), niske doze grupe (tretirani s 40 mg /kg tetrandrine) i visoka doza skupinu (pomiješa s 120 mg /kg tetrandrine). BALB /c miševi su injicirani intraperitonealno tetrandrine (200 ul, 40 mg /kg ili 120 mg /kg) ili jednakim volumenom fiziološke otopine, dva puta dnevno, u trajanju od 3 tjedna, respektivno. Veličina tumora je mjerena svaka 3 dana u dva okomita dimenzija sa šestara, a volumen tumora (TV) izračunata je prema formuli: TV = duljina (mm) x širina ^{2 (mm 2) × 0,5 , Relativna volumen tumora (RTV) izračunat je prema sljedećoj formuli: RTV = TV _{t /TV 0, gdje je TV 0 je volumen tumora na dan 0 i TV t je tumor volumen u određenom danu t. U međuvremenu, životinje su vagane dva puta tjedno. Na kraju eksperimenta, tumori su bili odstranjeni i fiksirana u formalinu za daljnju analizu. Pregled}}

Imunohistokemijska analiza pregled

parafin uklopljenih uzoraka izreže iz BGC-823 golih miševa su obojene primjenom slijedećih antitijela : Bcl-2 i Bax (Boster), Bcl-xl, aktivirane kaspaze-3, i aktivirane kaspaze-9 (Santa Cruz) za imunohistokemiju. Slike su snimljene s fluorescentnim mikroskopom (Carl Zeiss). Pregled

Statistička analiza pregled

Svi pokusi su izvedeni najmanje tri puta, a svi podaci su prikazani kao prosjek ± standardna devijacija (SD). Statističke razlike su određene jednosmjerna ANOVA pomoću SPSS 16,0 softvera. Vrijednost p manja od 0,05 smatra se značajnim. Pregled

Rezultati pregled

citotoksični učinak tetrandrine na BGC-823 stanicama pregled

Kemijska struktura tetrandrine prikazan je na slici 1A. Antiproliferativno djelovanje tetrandrine ispitan je u BGC-823 stanica primjenom MTT pokusa. Kao što je prikazano na slici 1B, stanice su tretirane tijekom 24, 48 i 72 sata s različitim koncentracijama tetrandrine. Tetrandrine nađeno je da značajno inhibiraju rast BGC-823 stanice u dozi i vremenski ovisan način. BGC-823 stanice bile su značajno inhibirana tetrandrine pri 10 ug /ml ( P pregled i 0.05). IC _{50 vrijednost je bila 6,104 ± 0,786, 4,471 ± 0,650 i 3,744 ± 0,573 nakon 24, 48 i 72 sata od tretmana tetrandrine, respektivno. Dakle, 6, 8 i 10 ug /ml određena kao predstavnik koncentracijama u sljedećim studijama. Pregled}

Indukcija apoptoze tetrandrine pregled

Tetrandrine-om sposobnosti protiv raka su izvijestili da je povezan s apoptozom [9-12]. S tim u skladu, istraživali smo sposobnost tetrandrine apoptozi BGC-823 stanica, uporabom protočne citometrije testu. Kako je mjereno protočnom citometrijom, učinci tetrandrine na BGC-823 stanične apoptoze prikazani su na Slici 2A i B, a tetrandrine tretmana u 24-0, 6, 8 i 10 ug /ml rezultira 4,35%, 11,4%, , 17,72% i 32.34% apoptičnih stanica, odnosno, i tetrandrine (8 ug /ml) 0, 12, 24, i 48 sati što je rezultiralo u 3,4%, 6,64%, 19.15% i 25.85% apoptičnih stanica, odnosno (Slika 2C i D). Ovi podaci jasno ukazuju da induciranu apoptozu tetrandrine u BGC-823 stanica u dozi i vremenski ovisan način. Brojevi apoptoze stanica povećan uz koncentracijski tetrandrine i obradu vrijeme. Pregled

Tetrandrine posredovani izraz Bcl-2 članova obitelji

Kako bi istražili više specifični mehanizam na indukciju apoptoze u BGC -823 stanica po tetrandrine, otkrili smo ekspresiju apoptoze vezanih proteina Western hibridizacija i njihovoj razini mRNA u realnom vremenu (RT) -PCR. Ovdje smo proučavali izraze Bax, Bad, Bak, Bcl-2 i Bcl-xl u BGC-823 stanice tretirane tetrandrine. Nakon 24 sata izlaganja tetrandrine, Bax, Bad i Bak ekspresija proteina je ovisno o dozi u porastu, dok Bcl-2 i Bcl-xl ekspresija proteina bila je smanjena ovisno o dozi (Slika 3a). Također smo otkrili da tetrandrine može povećanju ekspresije Bax i dodatno regulira ekspresiju Bcl-2 na vremenski ovisan način (slika 3B). Da bi se odredilo da li tetrandrine utjecati na transkripciju gena bcl-2, Bcl-XL i Bax, njihove mRNA je ispitana pomoću RT-PCR (Slika 3C). Rezultati RT-PCR jasno podudara s onima prikazanim na Slici 3A. Pregled

Tetrandrine-inducirana apoptoza je preko mitohondrijske put u BGC-823 stanicama pregled

Kako bi istražili da li tetrandrine inducirana apoptoza je bio povezan s aktiviranje članova kaspaza, mjerili smo ekspresiju kaspaze u BGC-823 stanicama koje su tretirane s različitim koncentracijama tetrandrine pomoću 'Western blot. Rezultati su pokazali visinu u dozi ovisnu cijepaju caspase-3 i cijepaju caspase-9 u tetrandrine- tretiranih stanica (Slika 4A). Međutim, nondetectable razine cijepanog kaspaze-3 i cijepana kaspaza-9 nađeni su u stanicama u odsutnosti tetrandrine tretmana (podaci nisu prikazani). Kako bi dodatno utvrdili ulogu aktivacije kaspaze u tetrandrine apoptozi, BGC-823 stanice se predtretira s pan-inhibitora kaspaze z VAD-FMK (10 uM) tijekom 4 sata, a zatim se obrađuje s 8 ug /ml tetrandrine za 24 h. U odnosu na kontrolu, relativne aktivnosti kaspaze-3 su povećani u BGC-823 stanicama koje su tretirane sa samo tetrandrine (Slika 4B). Osim toga, oslobađanje citokroma c pregled povećan na način ovisan o dozi od tetrandrine. Predstavnik protočna citometrija rezultat pokazali su da stanice koje su prethodno sa z-VAD-FMK snažno smanjuje tetrandrine-inducirana apoptoza, te da je samo mali broj apoptotičnih stanica pronađen (Slika 4C). Zatim smo ispitali razinu ekspresije citoplazmatski citokroma c pregled, koji se oslobađa iz mitohondrija u citoplazmi tijekom apoptoze, djelovao na apoptoze proteaze aktivirajući faktor-1 (Apaf-1) povećanjem vezanja Apaf- 1 do ATP /dATP i induciraju caspase-9 ovisna aktivacija kaspaze-3 [20-22]. Nađeno je da tetrandrine značajno povećava ekspresiju citokroma citoplazmatske c pregled i Apaf-1 u BGC-823 stanice na način ovisan o dozi (slika 4D). Zajedno, ovi nalazi sugeriraju da mitohondriji posredovane kaspaze kaskadni put je bio uključen u tetrandrine apoptozi. Pregled

Anti-tumor učinak tetrandrine na BGC-823 golih miševa ksenografta pregled

Budući tetrandrine pronađen značajno inhibiraju rast BGC-823 stanicama In vitro pregled, mi i dalje ocjenjuju učinak anti-tumorsku tetrandrine In vivo
s utvrđenim modelima stranog tijela. Kao što je prikazano na slici 5A, tetrandrine mogao učinkovito inhibiraju rast tumora nakon tretmana od 24 dana. Na kraju 24 dana, prosječni volumeni tumora bili 493.06 mm ^{3 i 1243.00 mm 3 u skupinu visoke doze i niske doze grupe, respektivno, što odgovara 80.52% i 50.9% brzine inhibicije u odnosu na kontrolu skupina. Pored toga, masa tumora je bila smanjena kao rezultat tretmana s tetrandrine kod obje koncentracije (slika 5b & tablica 2). Ovaj rezultat je pokazalo da visoka doza tetrandrine imao jači antitumorski učinak od niske doze na BGC-823 modelu ksenografta.
Grupe (n = 5) pregled volumen tumora (mm 3)
inhibicijska stopa (%) pregled, masa tumora (g) pregled inhibicijska stopa (%) pregled control2531.78 ± 153.251.194 ± 0.10Tet (40 mg /kg) 1.243,00 ± 55,19 ** * 50.900.641 ± 0,06 *** 46.31Tet (120 mg /kg) 493,06 ± 145,63 *** 80.520.298 ± 0,09 *** 75.04Table 2. Inhibicija tetrandrine (Tet) na rast tumora golih miševa pregled *** P izvoznici <. 0.001 u odnosu pregled kontrolna skupina. CSV Preuzmite CSV}

Tetrandrine-inducirana apoptoza u BGC-823 ksenografta pregled

Imunohistokem analiza tumorskog tkiva izrezan iz BGC-823 bezdlakih miševima potvrdili da apoptoza dogodilo u tumorima tetrandrine-liječi i da je mitohondrijski put igrao značajnu ulogu tijekom apoptoze. Bilo je pet golih miševa u svakoj skupini. Opazili smo da je ekspresija bcl-2 i Bcl-XL je smanjen, dok se razina proteina Bax, aktivirane kaspaze-3, i aktivirane kaspaze-9 značajno povećati tetrandrine (Slika 6). Svi ovi rezultati snažno potvrđuje da tetrandrine inducira apoptozu, u skladu s in vitro
studiji. Pregled

Rasprava pregled

karcinoma želuca, četvrti najčešće dijagnosticira novotvorina iza raka pluća, dojke, debelog crijeva i rektuma, uzrokuje gotovo milijun godišnje smrtnih slučajeva, te je drugi uzrok smrtnosti od raka povezanih u svijetu [23-26]. Kirurgija, kemoradioterapiji i molekulskoj ciljane terapije su glavni strategije liječenja u liječenju želuca raka [27]. Iako je kirurška resekcija je najučinkovitiji tretman za liječenje, rezultati su nedosljedni i ograničeni tumor recidiva i kemijska otpornost. Konvencionalni lijekovi za kemoterapiju, kao što je PTX, 5-fluorouracil, cisplatina i klanje stanica tumora induciranjem apoptoze i autophagy; ali tumorske stanice mogu postati otporne na apoptozu uzrokovane lijekovima [17,28,29]. pregled

To je izvijestio da tetrandrine ima jake anti-tumorsku aktivnost i In vitro pregled i u vivo pregled u mnogim stanicama raka, kao što su stanice A549 ljudskog karcinoma pluća, stanica karcinoma mjehura, stanica raka crijeva, stanicama hepatoma i slično [9-12]. Prethodna studija pokazala da tetrandrine može igrati obećavajuću ulogu po sinergijsku interakciju s kemoterapijskih agenasa eventualno njihovi sinergijskih učinaka na indukciji apoptoze i snižavanje kemoterapijskih gene sredstvo povezane u MKN-28 stanica i BGC-823 stanicama [18]. Međutim, mehanizam tetrandrine ljudskih karcinoma želuca BGC-823 stanica nije identificiran. U ovom istraživanju, pokazali smo da tetrandrine pokazuju potentnu antitumorsko djelovanje prema ljudskom raka želuca In vitro pregled i in vivo pregled, razjašnjenje temeljne mehanizme djelovanja. Pregled

Kao prvo, naš Rezultati su pokazali da tetrandrine učinkovito inhibirati BGC-823 stanična proliferacija ispitana pomoću MTT u dozi i vremenski ovisan način. U međuvremenu, IC _{50-tih godina tetrandrine je oko 6.1, 4.5, i 3.7 ug /ml u BGC823 stanicama za 24, 48 i 72 h, respektivno. Prema prethodnim istraživanjima, kemoterapeutika ubiti solidnih tumora uglavnom pomoću poticanja apoptoze [30-32]. Pronašli smo da je apoptoza inducirana tetrandrine na način ovisan o koncentraciji kroz analize protočnom citometrijom s povećanim ranim apoptotičnih stanica i kasno apoptotičnih stanica raka želuca BGC-823 stanicama. pregled}

U stanicama sisavaca, apoptoza može se pokrenuti je vanjska staza aktivira smrti receptor i unutrašnjeg toka regulirano Bcl-2 članova obitelji i kaspaze kaskada u mitohondrija [33,34]. U našoj studiji, tetrandrine povećao ekspresiju pro apoptoze proteina Bax, loše, a Bak i smanjena razina proteina bcl-2 i Bcl-XL. Prema tome, povećani omjer anti-pro-apoptoze ekspresiju proteina, kao što su omjer Bax /Bcl-2, dovesti do gubitka mitohondrijskog membranskog potencijala. Dysfunctioning mitohondriji oslobađa citokrom c pregled, koji se nakuplja u citosolu i tvori kompleks s apaf-1. U unutarnjoj stazi, kao efektora, kaspaza-3 odcjepljuje aktivacijom caspase-9 [35-37]. U ovom istraživanju, pokazali smo da kaspaze-9 i caspase-3 je aktiviran pomoću tetrandrine. Inhibitor pan-kaspaze z-VAD-FMK smanjuje apoptozu u BGC-823 stanicama, što ukazuje da je mitohondrijski put igra središnju ulogu u tetrandrine inducirana apoptoza. Pregled

To je izvijestio da tetrandrine mogao preokrenuti otpornost na mnoge kemoterapijski lijekovi, kao što su PTX i doksorubicin u KBv200 i K562 golog miša modelima ksenografta [38,39]. Tetrandrine posjeduje snažnu sposobnost da inhibiraju angiogenezu glioma u štakora [40]. Nadalje, naši rezultati pokazuju da tetrandrine izlaže snažan anti-tumorsku aktivnost inhibicijom rasta tumora i inducira apoptozu u utvrđenom BGC-823 golih miša modelu ksenografta. Pregled

U zaključku, naši podaci pokazuju da tetrandrine značajno inducirana apoptoza u čovjeka rak želuca BGC-823 stanice i njezine gole miš modelima stranog tijela. Tetrandrine inducirana apoptoza je povezana s aktivacijom intrinzičnog apoptoze putem. Na temelju tih rezultata, tetrandrine mogao imati veliki potencijal u liječenju ljudskog karcinoma želuca u budućnosti. Pregled

Izvori pregled

Želimo se zahvaliti članovima kliničke medicine Odjela Sveučilišta Jiangsu za njihovu tehnička pomoć. pregled

• PLoS ONE: SULF2 Metilacija je povezana s in vitro cisplatinom osjetljivosti i kliničke učinkovitosti za rak želuca pacijenata s modificiranom FOLFOX Regimen
• PLoS ONE: Down-regulacija Claudin-18 je povezana s proliferativni i invazivni potencijal rak želuca na invazivne Front