PLoS ONE: полиморфизм (rs2295080) в MTOR промоторной области и его ассоциации с рака желудка в китайской популяции

Абстрактный

Фон

В качестве императивного части PI3K /Akt /MTOR пути, мишень рапамицина у млекопитающих (МРМ) было показано, что увеличение клеток рака желудка и опухолей. Наше исследование исследовали связь между полиморфизмом одного нуклеотида (SNP) rs2295080 в MTOR
промоторной области и риск развития рака желудка (GC).

Методы
<р> Семьсот пятьдесят -три (753) желудка пациентов аденокарциномы и совпадающая 854 здоровых испытуемых были набраны в исследовании ассоциации рака и 60 ткани были использованы для проверки выражения MTOR
. Безусловная логистической регрессии была выбрана для оценки ассоциации между rs2295080 T > G полиморфизм и GC риск. Затем мы исследовали функциональные возможности этого промотора генетического варианта с помощью анализа люциферазы и EMSA.

Результаты
<р> Люди с G аллеля имели 23% снижение риска GC, по сравнению с теми, проведения аллель Т (скорректированный OR = 0,77, 95% ДИ = 0.65-0.92). Этот защитный эффект G аллеля выделялся лучше в мужской группе. В то же время, пациенты GC, несущие TG /GG генотип также отображается сниженный уровень мРНК MTOR
( P
= 0,004). В люциферазы, аллеля Т, как правило, для усиления транскрипционной активности MTOR
с приблизительной 0,5 раз по сравнению с G аллеля. Кроме того, EMSA тесты пояснил, что различные аллели rs2295080 отображаются различные сродства к некоторому транскрипционный фактор.

Заключение
<р> MTOR
промотор полиморфизма rs2295080 был достоверно связан с GC риском. Это SNP, которые эффективно влияют на экспрессию MTOR
, может быть новым биомаркером ранней диагностики рака желудка и подходящий показатель использования ингибитора MTOR для лечения GC
<р> Образец цитирования:. Сю М, G Тао, Кан М, Гао Y, Чжу H, Гонг W и др. (2013) полиморфизма (rs2295080) в MTOR
промоторной области и его ассоциации с рака желудка в китайской популяции. PLoS ONE 8 (3): e60080. DOI: 10.1371 /journal.pone.0060080
<р> Редактор: Паоло Peterlongo, IFOM, Fondazione Istituto FIRC ди Oncologia Molecolare, Италия
<р> Поступило: 26 ноября 2012 года; Принято: 21 февраля, 2013 года; Опубликовано: 29 марта 2013
<р> Copyright: © 2013 Xu и др. Это статья с открытым доступом распространяется в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution, которая позволяет неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе, при условии, что оригинальный автор и источник кредитуются

Финансирование:. Это исследование была частично поддержана Национальным фондом естественных наук Китая (81230068, 30972444, 81001274 и 81102089), ключ программы фонда естественных наук провинции Цзянсу (BK2010080), фонд естественных наук провинции Цзянсу (BK2011773 и BK2012842), ключ программы для фундаментальных исследований Цзянсу провинциального департамента образования (11KJB330002 и 12KJA330002), Цин-Lan проекта Цзянсу провинциального департамента образования и приоритет Академическая программа развития Цзянсу высших учебных заведений (общественного здравоохранения и профилактической медицины). Мы также хотели бы поблагодарить Ло Y (центр Нанкин крови Красного Креста) за ее помощь с функциональными экспериментами. Доноры не играет никакой роли в дизайн исследования, сбора и анализа данных, решение о публикации или подготовки рукописи
<р> Конкурирующие интересы:. Авторы не заявили ни одного конфликта интересов

Введение <. BR>

рак желудка (GC) является наиболее часто встречающихся рака во всем мире среди мужчин с 640,556 и женщин с 349,042 новых случаев и смертей, связанных с 738,069 в 2008 году [1]. С учетом терапевтической эффективности, хирургическая резекция может быть первичным лечебным средством для лечения ранней стадии у пациентов GC [2]. К сожалению, большинство больных раком желудка обнаруживаются в продвинутой стадии, в течение которого опухоль неоперабельной являются больше. Кроме того, рецидив после операции еще одно страшное событие для бедных выживаемости 5 лет. Принимая во внимание пациентов с прогрессирующим или рецидивирующим раком желудка, нет сомнений в том, что открытие биомаркеров и их применение сопровождается традиционной диагностики может быть ценным показателем и обширная помощь в разработке стратегии профилактики и лечения.
<Р> млекопитающим мишень рапамицина (МРМ) состоит из 2549 аминокислот, расположенных в весьма консервативном домене [3]. Конструктивно, MTOR содержит рапамицин-связывающий домен в его центральной части и домен киназы в С-конце [4]. В качестве ключевого компонента PI3K /Akt /MTOR пути, MTOR тесно отношение к капитальным клеточных процессов, таких как рост клеток, пролиферации, обмена веществ, миграции, ангиогенеза и апоптоза [5] - [7]. До сих пор, MTOR
продукты не заинтересованы в виде двух отдельных комплексов (т.е. mTORC1 и mTORC2) с различной чувствительностью [8], [9]. mTORC1 является рапамицин-чувствительный комплекс, который включает в себя MTOR плюс FK506-связывающий белок 12 кДа (FKBP12), LST8 млекопитающих (mLST8), а также нормативно-ассоциированный белок МРМ (хищных птиц). В противоположность этому, mTORC2 состоит с SIN1, mLST8 и рапамицин-нечувствительным спутником MTOR (Rictor) [10] - [12]. Дисрегуляция MTOR
часто появляется в различных видах рака в течение канцерогенеза и ухудшения качества. Тем не менее, причины этого явления аномальным все еще пресыщен дебаты.
<Р> Ряд исследований исследовали роль одиночных нуклеотидных полиморфизмов (SNP) из MTOR
гена в этиологии рака в различные органы, в том числе рака пищевода [13], рак легкого [14], рак мочевого пузыря [15], рак толстой кишки, рак прямой кишки [16], и острый лимфобластный лейкоз [17]. Большинство из этих полиморфизмов найти в экзонов или интронов с неизвестными функциональными эффектами. В последнее время все большее число исследований были сосредоточены на сидения полиморфизмов в гене промоторной области, которые оказались влиять на способность связываться с некоторыми транскрипционных факторов (ТФ) и воздействовать на следующую транскрипцию генов. В данном исследовании мы предположили, что MTOR
rs2295080 T > G полиморфизма в области промотора может влиять на восприимчивость к GC. Чтобы проверить эту гипотезу, мы генотипированы частоту МРМ
rs2295080, чтобы проверить его значение на GC риска в нашей постоянной, госпитальной, случай-контроль исследования в китайской популяции. Следовательно, мы регистрировал MTOR
уровни мРНК с различными генотипами в тканях больных раком желудка. Кроме того, мы также характеризовали функциональные возможности этого генетического варианта на MTOR
промотор транскрипции с помощью анализа люциферазы и EMSA.

Материалы и методы

Учебные предметы
<р> Это исследование включало 753 пациентов с гистологически подтвержденным аденокарциномы желудка и рак 854 контрольных образцов. Все пациенты были набраны из клинических исследований базы рака Нанкин медицинского университета в период с марта 2006 года и январе 2010 года и все, демографической и клинической информации, включая возраст, пол, размер опухоли, опухоли, гистологических типов, глубина инвазии, метастазирования узла лимфы, отдаленные метастазы, и стадии TNM, были получены с помощью короткого вопросника и клинические медицинские записи.
<р> частотные соответствием управления в этих случаях в зависимости от возраста (± 5 лет) и пола были собраны в тот же период и регионах не связаны генетическая связь с язвенной болезнью и пищеварительной системы опухолей. Каждый участник подписал письменное информированное согласие и пожертвовал 5 мл венозной крови для экстракции геномной ДНК. Протокол исследования был одобрен этическими комитетами Нанкин медицинского университета.

ДНК Добыча и SNP генотипирования
<р> геномную ДНК экстрагировали из образцов крови, как описано ранее [18]. Генотипа была завершена TaqMan SNP генотипирования Пробирной с использованием ABI 7900HT ПЦР в реальном времени (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) и системы обнаружения последовательности версии 2.4 (SDS 2.4). Последовательности праймеров и зондов были доступны по требованию, и средства управления содержатся для каждой пластины для обеспечения точности генотипирования. Анализ генотипирование проводили два человека независимо друг от друга в слепом. Более 10% образцов были выбраны случайным образом для подтверждения, и результаты были 100% согласные. Праймеры и зонды были перечислены в таблице S1.

Культура клеток и строительство Promoter Репортер Плазмиды
<р> Одна нормальная слизистая оболочка желудка эпителиальных клеток линии (GES-1) и три различных желудочных линий раковых клеток (КУП -823, MGC-803 и SGC-7901) были приняты в данном исследовании. Все клетки культивировали в модифицированной по Egale средний /высокий уровень глюкозы в культуральной среде Дульбекко с добавлением 10% FBS, 10 мМ HEPES, 2 мМ L-глутамина, 1 мМ пирувата натрия, 100 ед /мл пенициллина и 100 мкг /мл стрептомицина при 37 ° C в увлажненной атмосфере, содержащей 95% воздуха и 5% CO <суб> 2. Большинство реагентов были получены от GIBCO (Берлингтон, Онтарио, Канада)

В люциферазы плазмид, человек MTOR
последовательности промотора с различными аллелей rs2295080 T &Гт. G полиморфизма были синтезированы и построены в pGL3 основного вектора (Promega, Madison, WI, USA) по Generay Company (Шанхай, Китай). Все плазмиды были подтверждены секвенированием ДНК. Грунтовки, участвующих в испытании, были перечислены в таблице S2.

Переходная Трансфекция и анализа люциферазы
<р> GES-1, КУП-823, MGC-803 и SGC-7901 клетки были трансфицированы Липофектамином 2000 (Invitrogen, Carlsbad, CA, США) с 0,8 мкг каждого построенного вектора, либо с аллеля Т или с G-аллеля. Одновременно с этим 10 нг PRL-SV40 на лунку также трансфицировали в качестве внутреннего контроля для коррекции эффективности трансфекции. Перед этим, клетки высевали на 24-луночные планшеты в течение ночи, чтобы обеспечить 90% -95% сплошности во время трансфекции. Через двадцать четыре часа после трансфекции, активность люциферазы измеряли с помощью двойного люциферазы репортерной системы анализа (Promega, Madison, WI, USA) и выражается как отношение люциферазы светлячка к рениллы люциферазы деятельности. Все клетки были сделаны в трех экземплярах с теми же условиями

электрофоретической подвижности сдвига Анализ (EMSA)
<р> Смысл зондовые последовательности были следующими: rs2295080 Т зонд, 5'-AGGGTTCCCATCCCTGAGGAC-3 ';. rs2295080 G зонд, 5'-AGGGTTCCCAGCCCTGAGGAC-3 '. Ядерные белки экстрагировали NE-PERTM ядра и цитоплазмы экстракции реагентов (Pierce, Rock-брод, Иллинойс, США). ДНК-зонды получали с Биотин 3'-конца ДНК-маркирование Kit (Pierce, Rock-брод, Иллинойс, США). Электрофорезная сдвиг подвижности анализ (EMSA) проводили с помощью набора LightShift Хемилюминесцентный EMSA (Pierce, Rock-брод, Иллинойс, США). Реакции связывания проводили следующим образом: Ядерные экстракты (8 мкг белка) и буфером для связывания 1 × с 2,5% глицерина, 5 мМ MgCl <суб> 2, 50 нг /мкл поли (ди-ПСТ), 0,05% NP-40, и 20 фмоль меченных биотином rs2295080 Т /rs2295080 G зонды инкубировали на льду в течение 30 мин в объеме 20 мкл. Для получения конкурентных исследований, ядерные экстракты инкубировали с немеченого олигонуклеотида в течение 30 мин перед добавлением меченого олигонуклеотида.

Уровни экспрессии МРМ
мРНК.

Общую РНК из 60 желудка раковые ткани, включенных в 753 случаях, с разными генотипами были извлечены с использованием тризола Реагент (Invitrogen, Карлсбад, Калифорния, США). МРНК измеряли с помощью количественного в реальном времени ПЦР (ABI 7300) после того, как обратной транскрипции. GAPDH, был использован в качестве внутреннего количественного контроля для каждого образца. Праймеры, используемые для амплификации MTOR были F: 5'-TTGCTTGAGGTGCTACTG-3 'и R: 5'-CTGACTTGACTTGGATTCTG-3'; праймеры для GAPDH были F: 5'-AAGGTGAAGGTCGGAGTCAAC-3 'и R: 5'-GGGGTCATTGATGGCAACAATA-3'. Относительное количественное определение MTOR
мРНК была рассчитана с использованием метода 2-ΔΔCt. Сложите изменения были нормализованы по отношению к GAPDH, и каждый анализ был осуществлен в трех экземплярах.

Статистический анализ.
<Р> Харди-Вайнберга (HWE) оценивали с помощью критерия хи-квадрат доброте согласия Пирсона для сравнения наблюдаемых частот генотипов с ожидаемым среди контрольной группы. Ассоциации между генотипами и риском развития рака желудка оценивались путем вычисления отношения шансов (ОШ) и 95% доверительный интервал (ДИ) от анализа логистической регрессии с учетом возраста и пола. Двустороннее χ 2 испытания статистической значимости были выполнены с использованием программного обеспечения SAS (версия 9.1.3; SAS Institute, Inc., Cary, NC, USA) и P
&л; 0,05 считали статистически значение.

Результаты

характеристики субъектов исследования
<р> выбранные характеристики этих случаев и контроля приведены в таблице 1. случаи и средства управления, как представляется, адекватно согласованы на возраст ( P
= 0,424) и секс ( P
= 0,406). Среди 753 случаев, опухолевые сайты включены 295 рак кардии (39,2%) и 458 рак не-кардии (60,8%). У пациентов с типом диффузным (437, 58,0%) показывает несколько более высокий коэффициент, чем кишечного типа (316, 42,0%). На основе TNM классификации Американского Объединенного комитета по вопросам рака (AJCC стадии рака руководства, 6 ^{е издание) [19], 17.3%, 17.3%, 50.6% и 14.8% пациентов имели Т1, Т2, Т3, и Т4 соответственно. В то же время, 60,6% пациентов представлены положительный метастаз лимфатических узлов и 13,0% существовали отдаленные метастазы. В соответствии с этими клиническими характеристиками, все пациенты были окончательно определены на стадии I, II, III и IV с 26,8%, 21,9%, 35,3% и 16,0%, соответственно.}

общий эффект rs2295080 полиморфизма на Риск ГК
<р> распределение генотипов и аллелей rs2295080 представлены в таблице 2. частоты генотипов в контроле были в согласии с моделью HWE ( P
= 0,569). Как показано в таблице 2, частоты генотипов rs2295080 были 64,0%, 32,7% и 3,3% для генотипов ТТ, ТГ, и GG среди случаев, а 58,2%, 35,7% и 6,1% в группе контроля, соответственно. Разница между случаями и контролем было статистически значимым ( P = 0,008
). Кроме того, частота аллеля G была значительно ниже среди больных, чем в контрольной (19,7% против 23,9%, P
= 0,003). Кроме того, суммарная частота генотипа TG /GG был ниже среди больных, чем в контрольной (36,0% против 41,8%, P
= 0,016). При принятии ТТ генотип в качестве ссылки, мы обнаружили, что вариант генотипы (TG и GG) были связаны с уменьшением риска GC таким образом, доза-реакция по сравнению с генотипом TT (скорректированное OR = 0,83, 95% ДИ = 0.67-1.02 для TG и 0.49, 0.30-0.80 для GG; P
<суб> тренд = 0,003). Кроме того, мы также наблюдали, что комбинированные ТГ /GG генотипы, ассоциированные с статистически значительно ниже чувствительности к GC по сравнению с генотипом ТТ (0,78, 0.64-0.96). Взятые вместе, эти данные свидетельствуют о том, что MTOR
rs2295080 G аллель может быть предполагаемый защитный аллель.

Мужчины были более восприимчивыми к рака желудка с rs2295080 полиморфизма
<р> Как устоявшихся, возраст и пол являются важными факторами в опухоли канцерогенеза, включая рак желудка. Согласно анализу стратификации с возрастом и половых факторов, мы обнаружили, что значимая связь наблюдалась в мужской группе, а не в группе женщин (таблица 3). У мужчин, ношение rs2295080 G аллель был значительно снизился фактор риска (OR = 0,72, 95% ДИ = 0.56-0.93 для TG /GG по сравнению с ТТ), по сравнению с проведением аллель Т. Тем не менее, не было статистически значимых различий между молодыми и старыми предметами.

стратифицированному Анализ ассоциаций между rs2295080 полиморфизм и клинические показатели рака желудка
<р> Мы провели анализ стратификации rs2295080 полиморфизма все предметы по клиническим особенностям GC. Среди всех независимых переменных, защитные эффекты были в основном наблюдались в подгруппах пациентов с кардиального раком желудка (OR = 0,68, 95% ДИ = 0.52-0.91), кишечного типа (0.73, 0.56-0.96), T3 глубины инвазии (0,78, 0,60 -1,00), метастазирование положительный лимфатических узлов (0,79, 0.62-1.00), отрицательный отдаленных метастазов (0,76, 0.62-0.94), и локализованным стадия (0,76, 0.59-0.98) (таблица 4).

Влияние rs2295080 полиморфизма на транскрипционной активности

Для того, чтобы получить представление о биологической функционального эффекта rs2295080 полиморфизма на MTOR
транскрипция, ГЭС-1, BGC823, MGC803 и SGC-7901-клетки трансфицировали с различными отчет о люциферазы плазмид, в том числе дикого типа (аллель Т) и мутировать типа (G аллеля). Как показано на рис. 1А, мы обнаружили, что активность транскрипции аллеля Т была выше, чем G аллеля с приблизительно в 1,5 раза в выше четырех клеточных линий, предполагая, что rs2295080 G аллель работал в качестве защитника по поводу рака желудка путем снижения транскрипции MTOR
.

Ядерная белка связывающая активность Варианты в rs2295080
<р> Далее, мы провели эксперимент EMSA для анализа биологических последствий rs2295050 полиморфизма в SGC-7901 клеток. Одна сильная полоса (белковый комплекс) был сдвинут, когда ядерные экстракты инкубировали с биотин-меченый rs2295080 Т зондом, в то время как наблюдалась слабая полоса, когда ядерные экстракты инкубировали с биотин-меченый с rs2295080 G зондом. Сдвинутые полосы были значительно ингибировалась молярным избытком немеченого rs2295080 T или rs2295080 G конкурента от дозы зависит образом (рис. 1, б). Эти результаты показали, что rs2295080 G аллель может уменьшить ядерный белок связывающей активности до некоторой степени.

Ассоциация между MTOR
rs2295080 полиморфизм и выражение Уровни MTOR
мРНК <бр>

Шестьдесят три желудка раковые ткани с различными генотипами MTOR
rs2295080 были доступны в нашем настоящем исследовании. Из-за низкой частоты GG генотипа, мы добавили его в образцах с TG генотипа для анализа. Как показано на рис. 2, уровни экспрессии MTOR
мРНК была значительно выше у пациентов с генотипом ТТ, чем у больных с ТГ или GG генотипа (среднее значение ± SEM ТТ по сравнению с TG /GG: 12,35 ± 1,51 против 6,17 ± 1,32, P
= 0,004).

Обсуждение
<р> В настоящем исследовании мы показали, что аллель G MTOR
промотор полиморфизма rs2295080 был связан со значительным снижение риска GC. Мы обнаружили, что Т к G изменение rs2295080 существенно изменили транскрипционной активности MTOR
гена с помощью влияния на связывание некоторого фактора транскрипции. Мы также наблюдали, что MTOR
rs2295080 T аллель был связан с более высоким MTOR
уровни экспрессии мРНК в естественных условиях
.
<Р> Млекопитающих целевой рапамицина (МРМ) , также известный как FRAP1, является одним необходимым членом PI3K /Akt /МРМ пути и центральную роль в метаболических сигналов [20], [21]. Он может быть активирован с помощью инсулина, инсулиноподобный факторы роста и другие факторы роста, и инактивируют в процессе клеточного голодания. MTOR существует два различных вида комплекса, названные mTORC1 и mTORC2, соответственно [22]. MTORC1 комплекс фосфорилирует его вниз по течению эффекторный p70S6K, что может вызвать деградацию субстрата инсулинового рецептора и дальнейшему увеличению инсулина управляемой Akt активности. MTORC2 комплекс фосфорилирует С-конец Akt на ser473, что может привести к целой активации Akt [9]. В качестве терапевтической мишени в других раковых заболеваний [4], [8], [23] - [27], MTOR может также стал потенциальной мишенью для лечения рака желудка, спонтанно. Сиролимус [28] и эверолимус [29], ингибиторы MTOR, были идентифицированы привести к остановке клеточного цикла G1 и ингибирует размножение желудочных клеточных линий. В последнее время, роман потенциал MTOR
промотор полиморфизма rs2295080 был описан в ряде исследований [30] - [32]. Тем не менее, недостаточные функциональные исследования были проведены, чтобы оценить роль этого генетического варианта в регулировании MTOR
выражение. В GC, наши результаты при условии доказательства того, что rs2295080 аллель Т может повысить транскрипционную активность MTOR
в некоторой степени в клеточной линии GES-1 после того, как трансфицировали в пробирке
. И далее люциферазы анализа в трех желудочных линий раковых клеток (т.е. КУП-823, MGC-803 и SGC-7901) еще раз подтвердил этот эффект rs2295080 полиморфизма. Эти результаты в нашем настоящем исследовании были в соответствии с результатами в почечной клеточной линии рака шейки и линии раковых клеток [32]. В EMSA анализе, rs2295080 было предсказано, чтобы найти на потенциального сайта связывания, чьи полиморфные варианты могли бы повлиять на рекрута факторов транскрипции (при помощи программы P-MATCH, которая использует сайты связывания в TRANSFAC; www.gene-regulation.com). Взятые вместе эти результаты, вполне вероятно, что MTOR
rs2295080 полиморфизм может влиять на уровень экспрессии MTOR
и индивидуальной восприимчивости к различным раковых образований.

SNP rs2295080, а также как еще один интрон SNP rs11121704, было впервые сообщено Хильдебрандтом и др.
найти в потенциал MTOR
промоторной области [13]. Как описано в раке пищевода, rs2295080, казалось, никакой связи или функции с выживанием после химиолучевой и хирургии. Но до сих пор, некоторые исследования не выявили влияния этого полиморфизма в MTOR
для риска развития рака [30] - [32], все из которых считаются rs2295080 аллель Т в качестве фактора риска. В текущем исследовании, связь между rs2295080 аллеля Т и GC риска согласуется с результатами предыдущих трех исследований [30] - [32]. Кроме того, наши результаты также предположил, что этот полиморфизм может быть биологической сутью в развитии GC. Из-за различных групп населения и различных механизмов, среди возникновения, развития и выживания, мы предположили, этнической принадлежности и различия механистические различия могли бы объяснить эти диссонансов.
<Р> Другой роман результат приходит из ассоциации между мужчинами и женщинами и MTOR <бр> rs2295080 полиморфизм в стратифицированной анализа. Это rs2295080 полиморфизм показал более сильное значение у мужчин, чем у женщин. Кроме того, Hartgrink и др
. (2009) сообщил, соотношение мужчин и женщин, инфицированных раком желудка составляет около 2:01 в год [33]. Дальнейшее объяснение связей этих результатов нужно искать, и различные виды экспрессии гормонов у мужчин и женщин стать лучшим фактором, рационально. В исследовании рака молочной железы, Galoian и др.
Дал данные, которые prolinerich полипептид-1 оказывает антипролиферативное действие посредством ингибирования активности киназы MTOR в ЭР-отрицательными MDA-231, но не тормозящий эффект не существует в полостной T47 -D клетка, которая выступает в качестве клеточной линии ER-положительным [34]. Тем не менее, для изучения андрогенов, считалось, что андроген может стимулировать МРМ активность в клетках рака простаты PTEN-дефицитных. Недавнее исследование рецептора андрогена улучшила роль андрогенов в повышающей регуляции mTORC2 активности [35]. Вполне вероятно, что андроген, вместо эстрогена, может увеличить MTOR
выражение; андрогенов может привести к высокой заболеваемости раком желудка у мужчин и сильное значение MTOR
rs2295080 в мужской группе в нашем исследовании.
<р> Некоторые ограничения нашего исследования следует отметить следующие , Во-первых, rs2295080 был не единственным полиморфизм значительно существующий на MTOR
, и важность объединения ОНП не уделялось должного внимания в нашем исследовании. Во-вторых, в качестве важнейших факторов в желудочном канцерогенезе недостатки хеликобактерной Информация, курение информации, а также питьевой информации также было недостаточно в нашем исследовании, это неблагоприятный для нас для дальнейшего изучения последствий этого полиморфизма. Кроме того, из-за относительного небольшого размера выборки в нашем исследовании, никаких существенных результатов не казалось, можно найти в отдельных слоев (возрастных подгрупп, женской подгруппе, и других клинико-патологических подгрупп) стратифицированных анализа (Таблица S3 и S4). Далее более обширное исследование с большим количеством информации, как ожидается, чтобы проверить наши выводы.

В заключение, наше исследование освещал MTOR
rs2295080 размещая в промоторной области MTOR
ген был значительно связано с риском развития рака желудка у китайского населения.

поддержка Информация
таблице S1.
праймеры и зонды используются для генотипирования
DOI:. 10,1371 /journal.pone.0060080.s001
(DOC)
Таблица S2.
Грунтовки для строительства плазмид
DOI: 10.1371. /journal.pone.0060080.s002
(DOC)
Таблица S3.
Взаимодействие анализ MTOR
rs2295080 полиморфизма и возраст или статус секс в исследовании случай-контроль
DOI: 10.1371 /. journal.pone.0060080.s003
(DOC)
Таблица S4.
Взаимодействие анализа MTOR
rs2295080 полиморфизм и возраст /пол или клинические символы в тематическом исследовании только
DOI:. 10,1371 /journal.pone.0060080.s004
(DOC) <бр>

Выражение признательности
<р> Мы хотели бы поблагодарить Ло Y (Нанкин Красного Креста центр крови) за ее помощь с функциональными экспериментами.

• PLoS ONE: Ассоциация между глутатион S-трансферазы T1 Null генотипа и рак желудка риска: мета-анализ 48 Studies
• PLoS ONE: Ассоциация среди полиморфизмов генов EGFR экзонов, образа жизни и риска рака желудка с Гендерные различия…