Plos ONE: polimorfizma (rs2295080) v mTOR Promotor regijo in njene povezave s Rak želodca v kitajski Prebivalstvo

Povzetek

Ozadje

Kot nujnih del PI3K /Akt /mTOR poti, cilj sesalcev rapamicina (mTOR) je bilo dokazano, da povečanje želodčne rakavih celic in tumorjev. Naše raziskave raziskati odnos med polimorfizma posameznih nukleotidov (SNP) rs2295080 v mTOR
promotor regijo in tveganje za raka želodca (GC).

Metode

Seven sto petdeset -Tri (753) adenokarcinomom želodca bolnikov in 854 ujemajo zdravih osebah je bilo zaposlenih v študiji raka združenja in 60 tkiva smo uporabili za testiranje izražanje mTOR
. Brezpogojna logistične regresije je bil izbran za oceno pridružitvi med rs2295080 T > G polimorfizem in GC tveganja. Nato smo preučili uporabnost te promotorja genetske variante, ki jih luciferazni test in EMSA.

Rezultati

Posamezniki z alel G je za 23% zmanjšala tveganje za GC, primerjali s tistimi, ki opravljajo alel T (prilagojena OR = 0,77, 95% CI = 0,65-0,92). Ta zaščitni učinek alel G izstopala bolje v moški skupini. Medtem, bolniki GC prevažajo TG /GG genotip prikaže tudi zmanjšano raven mRNA za mTOR
( P
= 0,004). V luciferazni test, alel T večinoma za povečanje transkripcijski dejavnost mTOR
s približno 0,5-krat več kot alel G. Poleg tega so testi EMSA je pojasnil, da različni aleli za rs2295080 prikazane različne afinitete do neke transkripcijski faktor.

Zaključek

mTOR
promotor polimorfizem rs2295080 signifikantno povezana z GC tveganjem. Ta SNP, ki učinkovito vplivajo na izražanje mTOR
, lahko nov biomarker zgodnje odkrivanje raka želodca in primeren kazalnik uporabo zaviralec mTOR za zdravljenje GC

Navedba. Xu M, Tao G Kang M Gao Y, Zhu H Gong W, et al. (2013) polimorfizma (rs2295080) v mTOR
Promotor regijo in njene povezave s Rak želodca v kitajskega prebivalstva. PLoS ONE 8 (3): e60080. doi: 10,1371 /journal.pone.0060080

Urednik: Paolo Peterlongo, IFOM, Fondazione Istituto FIRC di Oncologia Molecolare, Italija

Prejeto: 26. november 2012; Sprejeto: 21. februar 2013; Objavljeno: 29. marec 2013

Copyright: © 2013 Xu et al. To je odprtega dostopa članek razširja pod pogoji Creative Commons Attribution License, ki omogoča neomejeno uporabo, distribucijo in razmnoževanje v katerem koli mediju, pod pogojem, da prvotni avtor in vir knjižijo

Financiranje:. Ta študija je delno podprta z National Natural Science Foundation Kitajske (81230068, 30972444, 81001274 in 81102089), Key Program Natural Science Foundation provinci Jiangsu (BK2010080), Natural Science Foundation provinci Jiangsu (BK2011773 in BK2012842), Key Program za temeljne raziskave Jiangsu deželnega ministrstva za izobraževanje (11KJB330002 in 12KJA330002), Qing-Lan projekta Jiangsu deželnega ministrstva za šolstvo in prednostne Academic Program razvoj Jiangsu visokošolskih zavodov (javno zdravje in preventivna medicina). Prav tako bi se rad zahvalil Luo Y (Nanjing Red Cross Blood Center) za njeno pomoč pri funkcionalnih preizkusov. Med financerji imel nobene vloge pri oblikovanju študije, zbiranje in analizo podatkov, sklep, da se objavi, ali pripravi rokopisa

nasprotujočimi si interesi. Avtorji so prijavili nobenega navzkrižja interesov

Uvod <. br>

rak želodca (GC) je rak najpogosteje pojavljajo po vsem svetu med moškimi z 640,556 in ženske z 349,042 novih primerov in 738,069 povezanih smrti v letu 2008 [1]. Ob upoštevanju terapevtske učinkovitosti, lahko kirurško resekcijo primarna kurativno zdravljenje zgodnejši fazi bolnikov GC [2]. Na žalost, večina bolnikov z rakom želodca odkrili v fazi, v tem času pa so tumor neizrezljivih več. Poleg tega ponovitve po operaciji je še ena grozna dogodek za slabe 5-letno stopnjo preživetja. Glede na bolnikov z napredovalim ali ponavljajočih raka želodca, ni dvoma, da bi lahko odkritje biomarkerjev in njihove uporabe spremlja s tradicionalnimi diagnozo dragocen pokazatelj in obsežno pomoč za oblikovanje strategije preprečevanja in zdravljenja.

sesalcev ciljna od rapamicin (mTOR) sestoji iz 2.549 aminokislin razporejenih v visoko ohranjenem področju [3]. Strukturno mTOR vsebuje rapamicin veže na domeno v svojem osrednjem delu in kinazno domeno pri C-terminalu [4]. Kot ključni element PI3K /Akt /mTOR poti, mTOR je tesno pomembne za kapitalske celične procese, kot so celično rast, proliferacijo, presnove, migracije, angiogenezo in apoptoze [5] - [7]. Do sedaj, mTOR
izdelki so to dve različni kompleksov (tj mTORC1 in mTORC2) z različno stopnjo občutljivosti [8], [9]. mTORC1 je rapamicin občutljiv kompleks, ki obsega mTOR plus FK506-vezavo protein 12 kDa (FKBP12), sesalcev LST8 (mLST8) in regulativno povezano protein mTOR (raptor). V nasprotju s tem, mTORC2 sestavljen z Sin1, mLST8 in rapamicina-neobčutljiv spremljevalca mTOR (rictor) [10] - [12]. Disregulacijo mTOR
pogosto pojavlja v različnih vrst raka, med kancerogenosti in poslabšanja. Vendar pa so razlogi za to odklonskega pojava še glutted z razpravami.

Številne študije so raziskovali vlogo posameznih nukleotidnih polimorfizmov (SNP) za mTOR
genov pri nastanku raka v različni organi, vključno z požiralnika raka [13], pljučnega raka [14], raka na mehurju [15], rak debelega črevesa, rak danke [16], in akutno limfoblastno levkemijo [17]. Večina teh SNP poiskati v eksonov ali intronov z neznanimi funkcionalnimi učinki. V zadnjem času je vse več raziskav osredotoča na sedeže ang SNP v genu promotorja regiji, ki se je izkazalo, da vplivajo na zavezujoče sposobnost z nekaj transkripcijskih faktorjev (TF) in vplivajo na naslednje gensko transkripcijo. V tej študiji, smo predpostavili, da je mTOR
rs2295080 T > G polimorfizem v promotorski regiji lahko vplivajo na občutljivost za GC. Da bi to hipotezo preverili, smo genotipizacijo pogostost mTOR
rs2295080 preizkusiti svoj pomen na GC tveganja v našem teku, primerov in kontrol študiji, ki temelji bolnišnici v kitajskega prebivalstva. Zato smo zaznali mTOR
ravni mRNK z različnimi genotipi v tkivih bolnikov z rakom želodca. Poleg tega smo še bolj značilna za pravilno delovanje te genske variante na mTOR
promotor transkripcije s luciferazni test in EMSA.

Materiali in metode

Študijski predmeti

Ta študija je obsegala 753 bolnikov s histološko potrjeni adenokarcinomom želodca in 854 kontrol rakave bolezni. Vsi bolniki so bili zaposleni od raka Klinične raziskave zbirke Nanjing Medical University med marcem 2006 in januarjem 2010. In vseh demografskih in kliničnih podatkov, vključno starost, spol, velikost tumorja, lokacija tumorja, histoloških tipov, globina invazije, bezgavk metastaze, oddaljene metastaze, in stopnja TNM, so bili pridobljeni z uporabo kratek vprašalnik in klinične zdravstvene kartoteke.

nadzor frekvence usklajena v teh primerih po starosti (± 5 let) in spolu so bili zbrani v istem obdobju in regij nepovezan genetsko povezana z želodčno boleznijo in prebavil tumorjev. Vsak udeleženec podpisali privolitev pisno in podarili 5 ml venske krvi za ekstrakcijo genomske DNA. Raziskava Protokol je bil odobren s strani Institutional Review Board Nanjing Medical University.

DNK Pridobivanje in SNP genotipizacijo

genomske DNK je bila vzeta iz krvnih vzorcih, kot je opisano zgoraj [18]. Genotipizacija je bila zaključena s TaqMan SNP genotipizacijo Vsebnost uporabo ABI 7900HT realnem času PCR System (Applied Biosystems, Foster City, CA, ZDA) in sistem za zaznavanje Sequence različice 2.4 (SDS 2.4). Sekvence začetnih oligonukleotidov in sonde so na voljo na zahtevo, in kontrole so vsebovala za vsako ploščo, da se zagotovi točnost genotipizacije. Genotipizacijo Test smo izvedli dve osebi neodvisno slepi način. Več kot 10% vzorcev je bilo naključno izbranih za potrditev, in rezultati so bili 100% skladnih. Temeljni premazi in sonde so navedeni v tabeli S1.

Cell Kultura in gradnja Promotor Reporter plazmide

Ena normalna želodčne sluznice epitelijskih celic linija (GES-1) in tri različne želodčne rakave celične linije (BGC -823, MGC-803, in SGC-7901) so bile sprejete v tej študiji. Vse celice smo gojili v spremenjenimi Egale Medium /visoki glukoze gojišča Dulbeccovem z 10% FBS, 10 mM HEPES, 2 mM L-glutamina, 1 mM piruvat natrij, 100 U /ml penicilina in 100 fig /ml streptomicina pri 37 ° C v vlažni atmosferi, ki vsebuje 95% zraka in 5% CO _{2. Večina reagentov so bili pridobljeni iz Gibco (Burlington, Ontario, Kanada)}

V luciferazno novinar plazmidov, človeško mTOR
promotorske sekvence z različnimi alel za rs2295080 T >. G polimorfizem smo sintetizirali in izdelan v pGL3-bazni vektor (Promega, Madison, WI, ZDA) Generay Company (Shanghai, Kitajska). Vsi plazmidi so potrdile zaporedja DNK. Temeljni premazi, ki sodelujejo v testu so navedene v tabeli S2.

prehodna Transfekcija in luciferazni test

GES-1, BGC-823, MGC-803, in SGC-7901 celice transfektirali z Lipofectamine 2000 (Invitrogen, Carlsbad, CA, ZDA) z 0,8 ug vsakega konstruirane vektorja, bodisi alel T ali alel G. Hkrati je bilo 10 ng PRL-SV40 na vrtino transfektiramo tudi kot notranji nadzor za odpravo učinkovitosti transfekcije. Pred njim, smo celice zasejali v 24-vdolbinami čez noč, da se zagotovi 90% -95% strnjene ob transfekciji. Štiriindvajset ur po transfekciji smo luciferazno aktivnost merjena z dvojno luciferazni reporterskega testa sistema (Promega, Madison, WI, ZDA) in izražen kot razmerje Firefly luciferaze do Renilla luciferaze aktivnosti. Vse celice so bile izvedene v treh izvodih pod enakimi pogoji

Shift Elektroforetskimi mobilnost Vsebnost (EMSA)

Občutek sekvence sonda so bili naslednji: sonda T rs2295080, 5'-AGGGTTCCCATCCCTGAGGAC-3 ". rs2295080 G sonda, 5'-AGGGTTCCCAGCCCTGAGGAC-3 '. Jedrske proteini so bili pridobljeni z NE-PERTM jedrski in citoplazme Pridobivanje reagentov (Pierce, Rock-ford, IL, USA). DNA sonde smo pripravili z Biotin 3'-End DNK Označevanje Kit (Pierce, Rock-ford, IL, ZDA). Elektroforetskimi premik mobilnost test (EMSA) je bila izvedena z LightShift kemiluminescenčni EMSA Kit (Pierce, Rock-ford, IL, USA). Vezavo reakcije smo izvedli, kot sledi: jedrske ekstraktov (8 mikrogramov proteina) in 1 x vezavo varovalne z 2,5% glicerola, 5 mM MgCl _{2, 50 ng /ul poli (di-DC), 0,05% NP-40, in 20 fmol-biotin označeni rs2295080 T /rs2295080 G sonde smo inkubirali na ledu 30 minut v volumnu 20 ul. Za študije o konkurenci, so jedrske ekstrakti inkubirali z neoznačeno oligonukleotida za 30 minut pred dodatkom oznako oligonukleotida.}

raven izražanja mTOR
mRNA.

Total RNA od 60 želodca rak tkiva, ki so vključeni v 753 primerih, pri čemer so različne genotipe, pridobljeni z uporabo TRIzola Reagent (Invitrogen, Carlsbad, CA, ZDA). MRNA smo merili s kvantitativno PCR v realnem času (ABI 7300) po reverzno transkripcijo. GAPDH smo uporabili kot interni kvantitativne kontrole za vsak vzorec. Se primerji, ki se uporabljajo za mTOR pomnoževanje bili F: 5'-TTGCTTGAGGTGCTACTG-3 'in R: 5'-CTGACTTGACTTGGATTCTG-3'; primerji za GAPDH bili F: 5'-AAGGTGAAGGTCGGAGTCAAC-3 'in R: 5'-GGGGTCATTGATGGCAACAATA-3'. Relativna kvantifikacija mTOR
mRNA je bila izračunana po metodi 2-ΔΔCt. Kratno spremembe smo normalizirali glede na GAPDH, in vsak test smo naredili v treh izvodih.

Statistična analiza.

Hardy-Weinberg ravnovesje (HWE) je ocenil hi-kvadrat dobroti fit testa primerjati ugotovljene genotipov s pričakovano med kontrolami. Združenja med genotipi in tveganje za raka želodca so bili ocenjeni z izračunom razmerja obetov (OR) in 95% intervali zaupanja (CIS) iz logističnih regresijskih analiz s prilagoditvijo za starost in spol. Two-sided χ ^{2 preizkusi statistične značilnosti smo izvedli s pomočjo SAS programske opreme (različica 9.1.3, SAS Institute, Inc., Cary, NC, ZDA) in P
< 0.05 smo imeli statistično pomen.}

Rezultati

značilnosti študijskih predmetov

izbrane značilnosti teh primerov in kontrol so povzeti v tabeli 1. primerov in kontrol je zdelo, da je treba ustrezno uskladiti na starost ( P
= 0,424) in spol ( P
= 0,406). Med 753 primeri, tumor strani vključenih 295 Cardia rak (39,2%) in 458 non-Cardia rak (60,8%). Bolniki z vrsto razpršenega (437, 58,0%) je pokazala nekoliko višje razmerje od črevesne tip (316, 42,0%). Temelji na klasifikaciji TNM Skupnega odbora ameriškega raka (AJCC rak počivališču priročniku, 6 ^{th izdaja) [19], 17,3%, 17,3%, 50,6% in 14,8% bolnikov je imelo T1, T2, T3, in T4 oz. Medtem, 60,6% bolnikov, ki so predstavljena pozitivno limfnega vozla metastaze in 13,0% obstajala oddaljenih metastaz. Po teh kliničnih značilnosti, so vsi bolniki na koncu ugotovil, da fazi I, II, III in IV s 26,8%, 21,9%, 35,3% in 16,0% oz.}

skupne učinke rs2295080 polimorfizma na Tveganje za GC

distribucije genotipov in alelov frekvence rs2295080 so prikazani v tabeli 2. genotipov pri kontrolah so bili v dogovoru z vzorcem HWE ( P
= 0.569). Kot je prikazano v tabeli 2, so genotip frekvence rs2295080 64,0%, 32,7% in 3,3% za genotip TT, TG in GG med primerih, in 58,2%, 35,7% in 6,1% med kontrolami, oz. Razlika med malimi in nadzora je bila statistično značilna ( P =
0,008). Prav tako je bil alel frekvenca G bistveno nižja pri primerih, ki niso nadzora (19,7% v primerjavi z 23,9%, P
= 0,003). Poleg tega je bil skupni TG /GG genotip frekvenca nižja pri primerih, ki niso nadzora (36,0% v primerjavi z 41,8%, P
= 0,016). Pri sprejemanju TT genotipa kot referenca, smo ugotovili, da so bile variantne genotipi (TG in GG), povezano z manjšim tveganjem za GC v način odgovora na odmerek v primerjavi z genotipom TT (popravljeni OR = 0,83, 95% CI = 0.67-1.02 TG, in 0,49, 0.30-0.80 za GG; P
_{trend = 0,003). Prav tako smo tudi ugotovili, da so združene genotipi TG /GG, povezani z statistično pomembno nižji dovzetnosti GC primerjavi z genotipom TT (0.78, 0.64-0.96). Če povzamemo, ti podatki kažejo, da je mTOR
rs2295080 G alel lahko domnevni zaščitni alel.}

Samci so bolj dovzetne za Rak želodca z rs2295080 polimorfizem

Ker je uveljavljena, so pomembni dejavniki pri tumorja rakotvornost, vključno z rakom želodca, starost in spol. Glede na analizo stratifikacije na starost in spol dejavnikov, smo ugotovili, da je pomembna povezava opazili pri moških skupini, namesto v ženski skupini (tabela 3). Pri moških, ki prevažajo rs2295080 alel G je občutno zmanjšala dejavnik tveganja (OR = 0,72, 95% IZ = 0.56-0.93 za TG /GG v primerjavi s TT), ki primerja s knjigovodsko alel T. Vendar pa ni bilo statistično značilne razlike med mladimi in starimi predmeti.

sloji Analiza združenj med rs2295080 polimorfizem in kliničnih spremenljivk želodčnega raka

smo izvedli analizo razslojevanje rs2295080 polimorfizma v vsi subjekti po kliničnih značilnosti GC. Med vsemi neodvisnimi spremenljivkami, so opazili predvsem zaščitne učinke v podskupinah bolnikov z rakom Cardia želodca (OR = 0,68, 95% CI = 0.52-0.91), črevesnih tipa (0,73, 0,56-0,96), T3 globina invazije (0,78, 0,60 -1,00), vozlišče metastaze pozitiven limfnih (0,79, 0,62-1,00), negativnega oddaljene metastaze (0,76, 0,62-0,94), in lokalizirane stopnji (0,76, 0,59-0,98) (tabela 4).

Vpliv rs2295080 polimorfizma na transkripcijske aktivnosti

Da bi dobili vpogled v biološke funkcionalni učinek rs2295080 polimorfizma na mTOR
prepis, GES-1, BGC823, MGC803 in SGC-7901 celice smo transfektirali z različnimi poročilo luciferaza plazmidi, vključno divjega tipa (alela T) in mutacije tipa (G alelov). Kot je prikazano na sliki. 1A, smo ugotovili, da je bil prepis dejavnost alel T višja od alel G s približno 1,5-krat v zgoraj štirih celičnih linijah, kar kaže, da alel rs2295080 G delal kot gol za rakom želodca, z zmanjšanjem transkripcijo mTOR
.

Jedrska Protein Vezava aktivnost variant v rs2295080

Nato smo izvedli EMSA poskus za analizo bioloških posledic rs2295050 polimorfizma v SGC-7901 celic. Ena močna skupina (proteinski kompleks) je premaknilo, ko so jedrske ekstrakte inkubiramo s sondo rs2295080 T-biotina označeni, medtem ko so opazili šibkejša skupina, ko so jedrske ekstrakte inkubiramo z biotinom označene s sondo rs2295080 G. Da preusmeriti trakovi so znatno inhibiran z molskim prebitkom neoznačenega rs2295080 T ali rs2295080 G konkurent v skladu z odmerkom odvisne (sl. 1B). Ti rezultati so pokazali, da bi lahko rs2295080 alel G zmanjša aktivnost vezave jedrske beljakovin do neke mere.

zveza med mTOR
rs2295080 polimorfizem in izražanjem mTOR
mRNA

Sixty-tri želodčni rak tkiva z različnimi genotipi je bilo v naši tej študiji so mTOR
rs2295080. Zaradi nizke frekvence GG genotipa, smo dodali v vzorcih z TG genotip za analizo. Kot je prikazano na sliki. 2, stopnje izraženosti v mTOR
mRNA je bil bistveno večji pri osebah s TT genotipa kot pri tistih, ki imajo TG ali GG genotipa (srednja vrednost ± SEM TT v primerjavi TG /GG: 12,35 ± 1,51 v primerjavi z 6,17 ± 1,32, P
= 0,004).

Pogovor

v tej študiji smo dokazali, da alel G mTOR
promotor polimorfizem rs2295080 je bila povezana z bistveno zmanjšalo tveganje za GC. Ugotovili smo, da je sprememba T G v rs2295080 bistveno spremenjeni transkripcijske aktivnosti mTOR
gen preko vplivanja vezavo nekaterih transkripcijski faktor. Opazili smo tudi, da je mTOR
alel rs2295080 T je bilo povezano z višjimi mTOR
ravni mRNA izraz in vivo
.

sesalcev tarča rapamicina (mTOR) , znan tudi kot FRAP1, je eden potrebno član PI3K /Akt /mTOR poti in osrednji presnove signalizacijo [20], [21]. Je mogoče aktivirati z inzulina, rastnih faktorjev insulinu podobnega in drugih rastnih faktorjev in inaktiviramo pri celičnem lakote. mTOR obstaja dveh različnih vrst kompleksa, tako imenovane mTORC1 in mTORC2, oziroma [22]. MTORC1 kompleks fosforilira svoje prodajne effecter p70S6k, ki bi lahko povzročili degradacijo substrata insulin receptorja in dodatno povečanje Akt aktivnost inzulina pogon. MTORC2 kompleks fosforilira C-terminusa Akt na Ser473, kar bi lahko privedlo do celotnega aktivacijo Akt [9]. Kot terapevtske tarče v drugih rakov [4], [8], [23] - [27], mTOR lahko pojavile tudi kot potencialni cilj za zdravljenje raka želodca, spontano. Sirolimusa [28] in everolimusu [29], so inhibitorji mTOR, so bile ugotovljene za posledico G1 ustavitev celičnega cikla in inhibira proliferacijo celičnih linij želodca. V zadnjem času, nova potencialna mTOR
promotor polimorfizem rs2295080 je bila opisana v več študijah [30] - [32]. Vendar pa je bilo dovolj funkcionalne študije za ovrednotenje vloge te genske variante pri urejanju mTOR
izraz. V GC, naše ugotovitve predložila dokaze, da rs2295080 alel T lahko poveča aktivnost prepisovanja mTOR
do neke mere GES-1 celične linije po transfektirali in vitro
. In nadalje luciferazni test v treh želodčnih raka celičnih linijah (tj BGC-823, MGC-803, in SGC-7901), potrjuje ta učinek rs2295080 polimorfizma. Ti rezultati v naši tej študiji so bili v skladu z rezultati v ledvičnih skladu rakave celice in materničnega vratu, rak celične linije [32]. V EMSA testu, je bil rs2295080 napovedano najti na potencialnega vezavnega mesta, katerih polimorfna variante bi lahko vplivala na zaposliti od transkripcijskih faktorjev (z uporabo programa p-tekmo, ki se uporablja zavezujoč mesta v TRANSFAC; www.gene-regulation.com). Sprejeti te rezultate skupaj, je verjetno, da je mTOR
rs2295080 polimorfizem lahko vplivajo na nivo ekspresije mTOR
in individualne občutljivosti za različnimi vrstami raka.

SNP rs2295080, kot tudi kot drugo intron SNP rs11121704, je bila prvič poročali Hildebrandt et al.
najti v mTOR
potencial promotor regije [13]. Kot je opisano v raka na požiralniku, rs2295080 zdelo nobene povezave ali funkcije z preživetja po kemoradioterapija in kirurgije. Ampak do zdaj, so številne študije ugotovil učinek tega polimorfizma v mTOR
za tveganje za nastanek raka [30] - [32], kar vse velja rs2295080 alel T kot dejavnik tveganja. V sedanji raziskavi je bila povezava med alel rs2295080 T in GC tveganja v skladu z rezultati prejšnjih treh študij [30] - [32]. Poleg tega naši rezultati tudi kažejo, da bi bila ta polimorfizem biološki Bistvo pri razvoju GC. Zaradi različnih populacijah in različnih mehanizmov med pojavom, razvoj in preživetje, smo predvidevali razlike narodnosti in mehanističnih razlike lahko razložiti te neskladnosti.

Še en roman rezultat izhaja iz povezave med spoloma in mTOR
rs2295080 polimorfizem v razslojeni analizo. Ta rs2295080 polimorfizem pokazala bolj močan pomen pri moških kot pri ženskah. Poleg tega Hartgrink et al
. (2009) je poročal razmerje moških do žensk, okuženih z rakom želodca je okoli 02:01 na leto [33]. potrebuje dodatna pojasnila za povezovanje teh rezultatov, ki jih je treba iskati, in različne vrste hormonov izražanja pri moških in ženskah postati najboljši premislek, racionalno. V študiji raka dojke, Galoian et al.
Je dal podatke, ki prolinerich polipeptid-1 izvaja antiproliferativnega učinka preko inhibicijo mTOR aktivnosti kinaze v ER-negativnih MDA-231, vendar ne zaviralni učinek na luminalno T47 obstaja -D celic, ki deluje kot celični liniji ER-pozitivnih [34]. Vendar pa za študij androgena, se je verjelo, da bi androgena spodbuditi aktivnosti mTOR PTEN s pomanjkanjem rakavih celic prostate. Nedavna študija na androgene receptorje izboljšal vlogo androgen v up-urejanje mTORC2 dejavnost [35]. Verjetno je, da androgen, namesto estrogena lahko poveča mTOR
izražanja; androgen lahko privede do visoke incidence raka želodca pri moških in močan pomen mTOR
rs2295080 v male skupine v naši raziskavi.

Nekateri omejitve našega te študije je treba poudariti, kot sledi . Prvič, rs2295080 ni bil edini polimorfizem bistveno obstoječe na mTOR
, in pomen, ki združujejo SNP je bila zanemarjena v naši raziskavi. Drugič, kot ključnih dejavnikov v želodcu rakotvornosti je primanjkuje Helicobacter pylori
informacije so kajenje informacije in pitje informacije tudi nezadostna v naši raziskavi, je neugoden za nas tudi za nadaljnjo preiskavo učinkov tega polimorfizma. Poleg tega je zaradi relativno majhnega vzorca v naši raziskavi, je bilo videti nobenih pomembnih rezultatov je mogoče najti zlasti plasteh (starostnih podskupinah, ženski podskupini, in drugih klinično-patološko podskupin) za stratificiran analize (Tabela S3 in S4). je bilo pričakovati, nadalje večji študiji z več informacij, da preverijo svoje ugotovitve.

Na koncu, v naši raziskavi osvetljeni mTOR
rs2295080 kje v promotorja regiji mTOR
gen je bil bistveno povezana s tveganjem za raka želodca v kitajskega prebivalstva.

Podpora Informacije
Tabela S1.
Netilke in sonde se uporabljajo za genotipizacijo
doi:. 10,1371 /journal.pone.0060080.s001
(DOC)
tabeli S2.
premazi za gradnjo plazmidov
DOI:. 10,1371 /journal.pone.0060080.s002
(DOC)
Tabela S3.
Interakcija analize mTOR
rs2295080 polimorfizem in starosti ali stanja na seks v študiji primerov in kontrol
doi: 10.1371. /journal.pone.0060080.s003
(DOC)
tabeli S4.
Interakcija analize mTOR
rs2295080 polimorfizem in starost /spol ali klinični znaki v samo študijo primera
doi:. 10,1371 /journal.pone.0060080.s004
(DOC)

Priznanja

radi bi se zahvalil Luo Y (Nanjing Red Cross Blood Center) za njeno pomoč pri funkcionalnih preizkusov.

• Plos ONE: Zveza med glutation S-transferaza T1 Null genotipom in želodca raka tveganja: Meta-analiza 48 Studies
• Plos ONE: Zveza med polimorfizmov v EGFR Gene eksonov, načina življenja in tveganja želodčnega raka z razlikami med spoloma v kitajski Han Subjects