PLoS ONE: miR-29a Hemmt Zellproliferation und induziert Zellzyklusarrest durch die Herabregulation von p42.3 in menschlichen Magenkrebs

Abstrakt

Als neu identifiziert und charakterisiert Gen, p42.3 mit Zellproliferation und Tumorigenität verbunden. Die Expression von p42.3 ist in der menschlichen Magenkrebs (GC), während die zugrunde liegenden Wirkmechanismen sind nicht gut verstanden upregulated. MicroRNAs (miRNAs) sind bekannt lebenswichtige regulatorische Rollen in vielen zellulären Prozessen spielen. Hier nutzten wir Bioinformatik und experimentelle Ansätze, um die regulatorische Beziehung zwischen miRNAs und dem p42.3-Gen zu untersuchen. Wir haben gezeigt, dass miR-29a sowohl bei p42.3 Expression der mRNA und Protein-Ebene über direkt Bindung an seinen 3'UTR verdrängen könnte. Des Weiteren wurde eine inverse Beziehung zwischen miR-29a und p42.3 Expression in Magenkrebs-Zelllinien und GC Gewebeproben, insbesondere in Fällen beobachtet, wo p42.3 downregulated wurde. Insgesamt haben wir bisher nicht erkannte Rollen von miR-29a aufgeklärt und darauf hingewiesen, dass miR-29a funktionieren kann, zumindest teilweise durch das p42.3-Gen in menschlichen GC Targeting

Citation:. Cui Y Su WY , Xing J, Wang YC Wang P, Chen XY, et al. (2011) miR-29a Hemmt Zellproliferation und induziert Zellzyklusarrest durch die Herabregulation von p42.3 in menschlichen Magenkrebs. PLoS ONE 6 (10): e25872. doi: 10.1371 /journal.pone.0025872

Editor: Alfons Navarro, Universität Barcelona, ​​Spanien

Empfangen: 28. Februar 2011; Akzeptiert: 13. September 2011; Veröffentlicht am: 5. Oktober 2011

© 2011 Cui et al. Dies ist eine Open-Access-Artikel unter den Bedingungen der Lizenz Creative Commons, die uneingeschränkte Nutzung erlaubt, die Verteilung und Vervielfältigung in jedem Medium, vorausgesetzt, der ursprüngliche Autor und Quelle genannt werden

Finanzierung:. Diese Arbeit wurde durch Zuschüsse aus dem National Grund Research Program of China 973-Programm (2010CB5293 unterstützt, der National Natural Science Foundation of Key-Programm (Nr 30830055) und das Ministerium der National High Technology Research und Development Program von China (863 Program) (2006AA02A402, . of Public Health, China (Nr 200802094) zu FJY die Geldgeber hatten keine Rolle in Studiendesign, Datenerfassung und Analyse, Entscheidung oder Vorbereitung des Manuskripts zur Veröffentlichung

Konkurrierende Interessen:. die Autoren erklärten dass keine Interessenkonflikte bestehen.

Einführung

p42.3 ist ein neues Gen, das vor kurzem isoliert und identifiziert durch die mRNA Differential-Display (mRNADD) Technik. die cDNA voller Länge von p42 wurde 0,3 ist ungefähr 4,0 kb, und das Gen kodiert für ein 389 Aminosäuren (aa) Protein, das eine Molekularmasse von 42,3 kDa haben geschätzt. Weitere Forschung hat ergeben, dass seine Expression Zellzyklus-abhängig bei Magenkrebs (GC) Zelllinien ist. Seine Proteinexpression Spitzen während der M-Phase des Zellzyklus, bevor sie allmählich nach der Zellteilung abnimmt; Dies zeigt an, dass p42.3 in der Zellzyklusregulation beteiligt sein können. Darüber hinaus Silencing p42.3 von small interfering RNA (siRNA) führt zur Hochregulierung von CHK2 und die Herabregulation von Cyclin B1, die Regulation des Zellzyklus beteiligt zwei Schlüsselproteine ​​sind [1], [2]. Während RT-PCR und immunhistochemische Analysen haben gezeigt, dass p42.3 in GC verglichen mit normalen Gewebeproben hochreguliert wird, hat funktionelle Forschung vorgeschlagen, dass die Depletion von p42.3 bei der Hemmung der GC Zellproliferation und Koloniebildung nicht nur resultieren in vitro
, sondern auch deutlich Tumorigenität in Nacktmäusen verringern kann [3]. Obwohl frühere Studien, die eine entscheidende Rolle für das p42.3-Gen in der Pathologie der GC vorgeschlagen haben, bleiben die spezifischen zugrunde liegenden Mechanismen ihrer Wirkung geklärt werden.

MicroRNAs (miRNAs) einer Klasse von kleinen bestehen (~ 22 Nukleotide), endogene, nicht-kodierenden RNAs, die wichtige regulatorische Rolle bei der Genexpression zu spielen sind bekannt [4]. Das primäre Transkript wird miRNA pri-miRNA [5] genannt, die durch RNA-Polymerase II oder III transkribiert wird, [6], [7]. Die pri-miRNA wird dann durch den Drosha-DGCR8 Mikroprozessor Komplex gespalten, um das Vorläufermolekül hairpin (pre-miRNA), die aus dem Kern wird dann durch Exportin-5 /Ran-GTP in das Zytoplasma exportiert zu erzeugen. Mit Hilfe eines Komplexes, der die RNase Dicer und die doppelsträngige RNA-bindendes Protein enthält, TRBP, die ca. 70-Nukleotid-pre-miRNA wird in reife miRNA verarbeitet [8]. Die funktionelle Strang der reifen miRNA wird in der Komplex (RISC), zum Schweigen zu bringen induzierte RNA-geladen, die die Proteine ​​enthält, argonaute (vor) und Tnrc6, während der andere Strang in der Regel abgebaut wird [9]. Die reife miRNA führt RISC auf die unvollkommene komplementären Sequenzen in Ziel-mRNAs, die verwandtes mRNA-Translation zu unterdrücken, transcript Zerfall fördern, oder beides [10]. Es wird geschätzt, daß die meisten kodierenden Gene wahrscheinlich durch miRNAs reguliert werden und, während ein miRNA kann mehr als eine Zielgenen regulieren, bestimmte Gene können von mehreren miRNAs reguliert werden [11].

Growing Hinweise darauf, dass miRNAs beteiligt sind in einem weiten Bereich von physiologischen und pathologischen Prozessen, einschließlich der Entwicklung, Differenzierung, Proliferation und Apoptose [12.13,14,15]. Obwohl Anomalien der miRNA-Expression in vielen menschlichen Tumoren festgestellt wurden, einschließlich Dickdarm-, Magen- und Brustkrebs [16], [17], ist die Zahl solcher Tumoren noch zu erweitern. Allerdings bleiben die detaillierten Funktionen von miRNA in Tumoren aufgeklärt werden.

Jüngste Studien haben vorgeschlagen, dass miR-29 komplexe Funktionen bei verschiedenen Erkrankungen hat. MiR-29a kann als Tumor-Suppressor sowohl Lungen- und Bauchspeicheldrüsenkrebszelllinien und damit die Überexpression von exogenen miR-29a führt zu einer deutlichen Verringerung der Invasivität und der Proliferation dieser Zellinien [18] verhalten. Die Tumorsuppressor-Rolle von miR-29a ist auch durch seine beobachtet Herunterregulation in einem breiten Spektrum von soliden Tumoren, einschließlich Neuroblastom, Sarkome und Hirntumoren [19] unterstützt. Im Gegensatz dazu ist miR-29a in indolent humanen B-Zell chronischer lymphatischer Leukämie (B-CLL) [20] und akute myeloische Leukämie (AML) [21], nach oben reguliert, die eine mögliche Tumorpromotor Rolle vermuten lässt. Darüber hinaus kann die aberrante Expression von miR-29a in viele nicht maligne Erkrankungen gefunden werden, einschließlich Leberfibrose [22], Diabetes [23] und die Alzheimer-Erkrankung [24]. Obwohl viele Gene bereits bestätigt worden, um die direkte Ziele von miR-29a, wie PPM1D zu sein [25], PI3K [26] und Neuron-Navigator 3 [24], stellen sie ein sehr kleiner Bruchteil der gesamten Gene, miR-29a Ziele.

im vorliegenden Bericht zeigen wir, dass p42.3 Ausdruck auf den Ebenen der beiden mRNA und Protein von miR-29a über eine direkte Ausrichtung der 3'UTR von p42.3 kontrolliert wurde. MiR-29a könnte die Zellproliferation unterdrücken und Zellzyklusarrest induzieren, zumindest teilweise über die Herabregulation von p42.3 Ausdruck. Darüber hinaus fanden wir, dass die Expression von p42.3-Protein invers mit miR-29a-Expression in humanen Geweben GC korreliert.

Ergebnisse

• PLoS ONE: Verlust des Proteins Promyelozytenleukämie in Magenkrebs: Implikationen für die IP-10 Expression und Tumor-infiltrierende Lymphocytes
• PLoS ONE: prognostische Bedeutung von miR-181b und miR-21 in Magenkrebs-Patienten behandelt mit S-1 /Oxaliplatin oder Doxifluridin /Oxaliplatin