PLOS ONE: Susceptibilité génétique sur CagA-Interacting Molécules et Gene-Environnement Interaction avec phytoestrogènes: Un facteur de risque putatifs pour gastrique Cancer

Résumé

Objectifs

Pour évaluer si les gènes qui codent pour CagA- interagissant molécules ( SRC
, PTPN11
, CRK
, Crkl
, CSK
, c-MET
et GRB2
) sont associés à un risque de cancer de l'estomac et si une interaction entre ces gènes et les phytoestrogènes modifier le risque de cancer de l'estomac

Méthodes

Dans la phase de découverte, 137. SNPs candidats dans sept gènes ont été analysés dans 76 incidents gastriques cas de cancer et 322 témoins appariés du Cancer Cohort Korean multi-Center. Cinq SNP significatifs dans trois gènes ( SRC
, c-MET
et CRK
) ont été réévalués dans 386 cas et 348 contrôles dans la phase d'extension. Les odds ratios (RUP) pour le risque de cancer gastrique ont été estimés ajustés pour l'âge, le tabagisme, H. et séropositivité CagA souche positivité pylori. ORs récapitulées dans la population totale de l'étude (462 cas et 670 témoins) ont été présentés en utilisant pooled- et méta-analyse. Les concentrations plasmatiques de phytoestrogènes (génistéine, daidzéine, équol et entérolactone) ont été mesurées en utilisant la fluorescence en temps résolu.

SRC
rs6122566, rs6124914, c

Résultats -MET
rs41739, et CRK
rs7208768 ont montré des effets génétiques significatifs pour le cancer gastrique dans les deux méta-analyse groupée et sans hétérogénéité (pool OR = 3,96 [IC 95% 2,05 à 7,65], 1.24 [95 % CI = 1,01 à 1,53], 1,19 [IC à 95% = 1,01 à 1,41] et 1,37 [IC à 95% = 1,15 à 1,62], respectivement; meta OR = 4,59 [IC 95% 2,74 à 7,70], 1,36 [95% CI = 1,09 à 1,70], 1,20 [IC à 95% = 1,00 à 1,44] et 1,32 [IC à 95% = 1,10 à 1,57], respectivement). allèle Risque de CRK
rs7208768 eu une augmentation significative du risque de cancer gastrique à des niveaux faibles de phytoestrogènes ( p interaction
< 0,05).

Conclusions

Nos résultats suggèrent que SRC
, c-MET
et CRK
jouer un rôle clé dans la carcinogenèse gastrique en modulant transductions de signal CagA et l'interaction entre les CRK
gène et phytoestrogènes modifient le risque de cancer de l'estomac

Citation:. Yang JJ, Cho LY, Ko KP, Shin A, Ma SH, Choi BY, et al. (2012) Susceptibilité génétique sur CagA-Interacting Molécules et Gene-Environnement Interaction avec phytoestrogènes: Un facteur de risque putatifs pour le cancer gastrique. PLoS ONE 7 (2): e31020. doi: 10.1371 /journal.pone.0031020

Editeur: Deodutta Roy, Florida International University, États-Unis d'Amérique

Reçu 30 Novembre 2011; Accepté le 29 Décembre 2011; Publié: 24 Février 2012 |

Droit d'auteur: © 2012 Yang et al. Ceci est un article en accès libre distribué sous les termes de la licence Creative Commons Attribution, qui permet une utilisation sans restriction, la distribution et la reproduction sur tout support, à condition que l'auteur et la source originelle sont crédités

Financement:. Cette étude a été soutenue par une subvention du national R & le programme Laboratoire de recherche de base (BRL) par la national Research Foundation de Corée D programme de lutte contre le cancer, Ministère de la Santé et des Affaires sociales, République de Corée (0520140), et financé par le ministère de éducation, la science et la technologie (2.011-0001564). Les bailleurs de fonds ont joué aucun rôle dans la conception de l'étude, la collecte et l'analyse des données, la décision de publier, ou de la préparation du manuscrit

Intérêts concurrents:.. Les auteurs ont déclaré aucun conflit d'intérêts existent

Introduction

Helicobacter pylori
( H. pylori
), un groupe I carcinogène gastrique humaine par l'Agence internationale pour la recherche sur le cancer (CIRC) [1], est la plus forte facteur de risque dans le développement du cancer de l'estomac, et persistant H. pylori de l'infection est la première étape vers la carcinogenèse gastrique [1] - [3]. En dépit de nombreuses preuves que H. pylori
joue un rôle crucial dans la carcinogenèse gastrique, seule une petite partie des personnes infectées développent un cancer gastrique. Cela implique que d'autres facteurs impliqués dans le mécanisme pathogène de la H. pylori
peut modifier la sensibilité individuelle du cancer gastrique. Nos études antérieures ont démontré H. pylori de l'infection elle-même n'a pas été associée au risque de cancer de l'estomac, mais spécifiquement CagA positif H. pylori de l'infection a augmenté de façon significative le risque de cancer gastrique par 3,57 fois [4], [5].

cytotoxine associé gène A (CagA), une protéine sécrétée par immunodominant H.
pylori, semble être l'un des facteurs de modification pathogènes [6] - [8]. Après avoir infecté H. pylori
dans les cellules épithéliales gastriques, CagA agit comme un composant cancérigène et virulente majeure par CagA séquentielle voie de transduction du signal. La première étape commence par l'interaction entre le CagA et diverses protéines telles que la SRC SHP2, CRK, Crkl et CSK après phosphorylation et c-MET et GRB2 sans phosphorylation [9] - [12]. Tyrosine CagA phosphorylée par les kinases de la famille SRC interagit avec SHP2 tyrosine phosphatase (codée par le PTPN11
oncogène), CRK, Crkl et CSK et induit la diffusion cellulaire, la dissociation et la mortalité liées au développement du cancer [8], [12] - [15]. En outre, CagA non phosphorylée interagit avec c-MET et GRB2 qui favorise la réponse tumorigène, y compris la prolifération cellulaire et les changements morphologiques, tels que la formation de Colibri [8], [16] - [19]. Cette translocation CagA et son interaction cellulaire avec ces protéines peut être une étape d'initiation cruciale dans la carcinogenèse gastrique [9] - [12].

altération cellulaire dans le CagA positif H. mécanisme pathogène de pylori semble expliquer la sensibilité différente du cancer gastrique chez les H. Pylori
personnes infectées. Puisque les fonctions cellulaires peuvent être régulées par leurs gènes de l'hôte, les variantes génétiques liées aux molécules interagissant CagA peuvent être la clé pour personne susceptibilité au cancer gastrique. Sur la base des différences génétiques putatifs, nous avons supposé que les gènes qui codent pour des protéines de CagA interagissant peuvent modifier le risque de cancer gastrique. De plus, nous nous sommes concentrés sur les phytoestrogènes comme modificateur d'effet dans le processus de transduction de signal de CagA. Des études ont rapporté que les phyto-oestrogènes ayant des propriétés anti-inflammatoires, anti-bactériennes et anti-oxydantes peuvent inhiber H. l'activité et le cancer gastrique de la croissance cellulaire et la prolifération de pylori [20] - [22]. En particulier, la génistéine, l'un des phyto-œstrogènes et d'inhibiteurs de kinases phosphatases, est signalé comme étant un inhibiteur efficace pour CagA phosphorylation [23].

Pour évaluer les hypothèses, une analyse génétique en deux étapes qui a porté sur les gènes qui codent directement molécules CagA liant, SRC
, PTPN11
, CRK
, Crkl
, CSK
, c- MET
et GRB2
, a été réalisée qui comprenait: 1) la phase de découverte qui tamisé et identifié des polymorphismes nucléotidiques simples (SNP) avec une association génétique significative sur le cancer de l'estomac; 2) la phase d'extension qui ré-analysé les SNP les plus importants dans la phase de découverte. En outre, dans une sous-analyse, nous avons évalué l'interaction gène-environnement pour déterminer si les niveaux de phytoestrogènes modifier l'association entre les polymorphismes de gènes qui codent directement des molécules et le risque de cancer de l'estomac CagA contraignant.

Méthodes

Ethique Déclaration

les protocoles d'étude ont été approuvés par le conseil d'administration de l'Hôpital Université nationale de Séoul (H-0110-084-002 pour l'étude KMCC et C-0910-049-297 Institutional Review pour le cas imbriqué courant étude -contrôle) et par le conseil de l'hôpital universitaire de Hanyang Institutional Review (2003-4). En outre, tous les participants ont signé un formulaire de consentement éclairé avant d'entrer dans les études.

Population
Étude

Deux phases étude d'association génétique a été réalisée. La population de l'étude cas-témoins nichée a été recruté à partir du Multi-Cancer Center cohorte coréenne (KMCC). Des informations détaillées sur l'KMCC est décrit ailleurs [24]. En bref, les participants ont été recrutés dans quatre zones urbaines et rurales (Haman, Chungju, Uljin et Youngil) en Corée. Information sur les caractéristiques individuelles, y compris le mode de vie général et l'exposition environnementale ont été recueillies au moyen de questionnaires sur la base d'interviews standardisées. Des échantillons de sang et d'urine tache ont également été recueillies. Tous les participants ont été suivis passivement à travers informatisés couplages d'enregistrements au registre national du cancer, le certificat de décès national, et l'assurance maladie des dossiers médicaux. Les méthodes de suivi passif de la KMCC ont été signalés à être très efficace et complet [25].

En Décembre 2002, un total de 136 cas de cancer gastrique défini selon la Classification statistique internationale des maladies et connexes problèmes de santé 10e révision (CIM-10, C16) ont été identifiés dans la phase de découverte. Parmi eux, 84 cas à l'exclusion des cas diagnostiqués avant le recrutement (n = 36) et sans échantillons de sang (n = 16) ont été initialement sélectionnés pour le génotypage. Quatre témoins sans cancer (n = 336) ont été appariés à chaque cas de cancer de l'estomac par un échantillonnage de densité d'incidence fondée sur l'âge (± 5 ans), le sexe, quartier résidentiel, et l'année d'inscription. Huit cas et 14 contrôles ont été exclus en raison de la performance de génotypage pauvres, et donc, 76 cas et 322 témoins ont été inclus dans la phase de découverte.

Dans la phase d'extension, 388 cancer gastrique ensembles cas-témoins ont été sélectionnés comme suit : 1) 334 cas de cancer gastrique, y compris 136 cas identifiés le 31 Décembre 2002 ont été constatées à partir du KMCC en Décembre 31, 2008. en excluant les cas analysés dans la phase de découverte (N = 84) et sans échantillons de sang (N = 51), 199 cas de cancer gastrique ont été appariés 1:01 à des contrôles en fonction de l'âge (± 5 ans), le sexe, et l'année d'inscription. 2) 189 cas de cancer gastrique nouvellement diagnostiqués à Chungnam University Hospital et Hanyang Hospital GURI Université avec le consentement éclairé ont été recrutés à partir de Mars 2002 à Septembre 2006. Des échantillons de sang ont été prélevés au moment du diagnostic ou avant la chirurgie du cancer gastrique. En outre, 189 contrôles communautaires appariés par âge (± 5 ans), le sexe et l'année d'inscription (de 2001 à 2005) ont été choisis au hasard parmi les KMCC. Sur les 388 cancer gastrique matchs cas-témoins, deux cas et 40 contrôles ont été éliminés en raison d'une mauvaise génotypage et de l'échantillon insuffisant et enfin, 386 cas et 348 témoins ont été analysés dans la phase d'extension.

Les gènes candidats et la sélection SNP

Dans la voie de transduction du signal CagA, CagA se lie directement à sept protéines qui conduisent à des processus séquentiels. les gènes de l'hôte codant pour les sept protéines ont été sélectionnés comme suit: virus v-Crk sarcome CT10 oncogène homolog ( CRK
); v-Crk virus du sarcome CT10 oncogène homolog (aviaire) -comme ( Crkl
); c-Src tyrosine kinase ( CSK
); le facteur de croissance protéique lié au récepteur 2 ( GRB2
); Met proto-oncogène ( c-MET
); le facteur nucléaire des cellules T activées, la protéine tyrosine phosphatase, type non-récepteur 11 ( PTPN11
) codant SHP2 tyrosine phosphatase et v-Src sarcome (Schmidt-Ruppin A-2) homologue d'un oncogene viral ( . SRC de
)

SNPs candidats ont été sélectionnés en fonction de trois critères: SNP aurait 1) une pertinence fonctionnelle possible pour le cancer dans les études précédentes; 2) la fréquence de l'allèle mineur (MAF) > 0,05 dans la population asiatique dans les bases de données publiques telles que SNP500Cancer ou le projet international HapMap en utilisant ID dbSNP (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/snp); et en même temps 3) MAF > 0,05 en japonais (JET) dans le projet international HapMap. Enfin, 137 SNPs avec un score de conception = 1.1 et r ^{2 > 0,8 ont été génotypés pour dépister les SNP importants pour le risque de cancer de l'estomac. 108 SNP sont situés dans la région intronique; 24 Les SNP sont situés dans la région de promoteur (région flanquante ou UTR); cinq SNP sont situés dans la région codante.}

Génotypage

Dans la phase de découverte, 137 SNP dans sept gènes candidats codant pour des protéines qui interagissent CagA ont été génotypés. Après avoir mesuré les concentrations d'ADN génomique pour tous les sujets de l'étude par un spectrophotomètre (NanoDrop ND-1000, Nanodrop Technologies), le génotypage a été réalisée en utilisant un dosage GoldenGate ™ (Illumina®, San Diego, CA, USA). Pour assurer un contrôle de qualité et d'évaluer le taux de concordance intra-sujet, 52 échantillons en double ont été répartis au hasard dans la plaque de génotypage. Les taux de concordance pour tous les essais étaient supérieurs à 99%. Sur les 137 SNPs, 21 SNP ont été abandonnées en raison de l'échec de génotypage (4 SNP), le taux d'appel SNP < 90% (7 SNP), HWE < 0,0001 (1 SNP) et MAF ≤0.05 (9 SNP). Huit cas et 14 contrôles ont également été exclus en raison de génotypage taux d'appel < 90%. Enfin, 116 SNP dans sept gènes (taux de 99,6% de génotypage) dans 76 cas et 322 contrôles ont été analysés

Dans la phase d'extension, cinq SNP avec un p-
valeur <brut. 0.02, SNP marqueurs ou des scores plus élevés de conception (rs6122566 et rs6124914 dans SRC
; rs41739 et rs41737 dans c-MET
; rs7208768 dans CRK
) identifiés dans l'analyse de découverte ont été génotypés en utilisant le Illumina GoldenGate VeraCode Assay avec BeadXpress selon le protocole du fabricant (Illumina®, USA) [26]. Afin d'assurer la fiabilité des méthodes de génotypage dans les deux phases de 188 échantillons ont été génotypées deux fois par chaque méthode. Le taux de concordance était > 98,4%. Deux cas et 40 contrôles avec l'ADN insuffisante (n = 15) ou le taux d'appel de génotypage < 90% (n = 27) ont été exclus. Enfin, cinq SNP dans trois gènes (taux de 99,6% de génotypage) ont été analysés dans 386 cas et 348 témoins.

H. infection et CagA la séropositivité
pylori

​​ H. infection et CagA la séropositivité pylori ont été évalués en utilisant un dosage de immunoblot, Helico blot 2.1 ™ (MP Biomedicals Asie-Pacifique, Singapour). Helico blot 2.1 ™ kits ont été rapportés d'avoir une grande sensibilité et une spécificité (sensibilité, 99% identique à la fois, car la spécificité, 98% et 90%, respectivement). [27]

Les mesures de biomarqueurs phytoestrogènes

les concentrations plasmatiques de quatre biomarqueurs phytoestrogènes qui étaient 1) isoflavones: génistéine, daidzéine et equol (daidzéine métabolites) et 2) lignanes: enterolactone ont été mesurées en utilisant fluoroimmunoassay kits de résolution temporelle (Labmaster, Finlande). Après que les biomarqueurs phytoestrogène libres ont été extraites de 200 pi d'échantillon de plasma, le victor3 ™ 1420 Multilabel compteur de fluorescence résolue dans le temps mesurée (Perkin-Elmer). méthodes de mesure détaillés pour les biomarqueurs de phytoestrogènes sont décrits ailleurs [28]. Sur la population totale de l'étude, les concentrations plasmatiques des quatre biomarqueurs ont été mesurées dans 406 cas et 417 contrôles avec le volume plasmatique suffisant (> 200 pi).

L'analyse statistique

Pour comparer les caractéristiques de base entre les cas de cancer gastrique et des contrôles, le test du chi carré et étudiants T-
tests ont été effectués. P
-values ​​pour la différence dans la proportion pour le sexe, l'âge, H. pylori de l'infection, CagA et VacA séropositivité, le tabagisme, la consommation d'alcool, et de l'histoire de la gastrite entre les cas et les contrôles ont été déterminés.

Hardy-Weinberg (HWE) dans le groupe de contrôle a été évaluée en utilisant le chi- essai carré ou le test exact de Fisher avec un niveau de coupure de HWE < 0,0001. Dans la phase de découverte, minimum global p
-values ​​( p
< 0,05) dans le test du rapport de vraisemblance (LRT) avec 1 degré de liberté (df) dans le modèle additif et LRT avec 2 df dans le modèle génotypique ont été calculés pour sélectionner les SNP importants. En utilisant trois modèles génétiques, additifs, modèles récessifs et dominants, l'association entre les SNP sélectionnés et le risque de cancer de l'estomac a été analysé. Permutés p
-values ​​ont été estimées par 100.000 tests de permutation dans la seule analyse SNP. Pour éviter de fausses associations avec des résultats faussement positifs, le corrigé permutés p
-values ​​sur la condition de plusieurs SNP et le taux de fausses découvertes (FDR) à l'aide d'une méthode Benjamini-Hochberg ont été calculées [29]. le risque de cancer gastrique a été estimé que les rapports de cotes (RUP) et les intervalles de confiance à 95% (IC) en utilisant le modèle de régression logistique inconditionnelle ajustement pour les facteurs de risque qui étaient l'âge, le tabagisme (jamais vs.
jamais), H. pylori de l'infection (positive vs.
négatif) et CagA séropositivité (positive vs.
négatif). En outre, l'analyse des haplotypes a été réalisée pour les gènes contenant SNPs associés significativement à partir d'une analyse des SNP individuels en utilisant le logiciel 4.1 Haploview (de www.broad.mit.edu/mpg/haploview/).

Dans la phase d'extension, le plus important SNP identifiés dans la phase de découverte ont été réévalués. Sur la base de l'additif ou des modèles récessifs, le risque de cancer de l'estomac a été estimé que les RUP et les IC à 95% en utilisant le modèle de régression logistique inconditionnelle ajustement pour les mêmes covariables mentionnés ci-dessus. Pour résumer les résultats de la découverte et les phases d'extension, pooled- et méta-analyse ont été menées. En utilisant le modèle à effets fixes, résumées ORs et IC à 95% ont été calculés. En outre, l'hétérogénéité des études a été évaluée par les statistiques Cochran Q [30].

En utilisant l'analyse de la variance et covariance (ANCOVA) avec l'âge, le tabagisme (jamais vs.
Jamais), H. pylori de l'infection (positive vs.
négatif) et CagA séropositivité (positive vs.
négatif) comme facteurs de risque potentiels pour le cancer gastrique, les moyens de les niveaux de biomarqueurs phytoestrogènes entre les cas et les témoins ont été comparés. analyse stratifiée par des niveaux élevés et faibles de biomarqueurs de phytoestrogènes (génistéine, daidzéine, équol et entérolactone) où les niveaux de coupure ont été déterminées par l'analyse Spline a été réalisée en utilisant des modèles de régression logistique inconditionnelle. Les effets d'interaction entre les SNP les plus significatifs et les biomarqueurs de phytoestrogènes ont également été calculées comme RUP et IC à 95% ajusté pour l'âge, le tabagisme (jamais vs.
jamais), H. pylori de l'infection (positive vs.
négatif) et CagA séropositivité (positive vs.
négatif).

Toutes les analyses statistiques ont été réalisées avec la version du logiciel SAS 9.2 ( SAS Institute, Cary, Caroline du Nord), et PLINK version logicielle 1.07 (http://pngu.mgh.harvard.edu/purcell/plink) [31]. Les méta-analyses ont été effectuées en utilisant STATA la version 10 (Stata, College Station, TX).

Résultats

Il n'y avait pas de différence significative entre les cas et les témoins selon le sexe, H. pylori de l'infection, /VacA séropositivité, état CagA fumer /boire et de l'histoire de l'ulcère gastrique dans la découverte et de vulgarisation phases (p > 0,05). CagA /VacA et la séropositivité proportion de fumeurs actuels étaient significativement plus élevés chez les cas de cancer gastrique dans les données regroupées ( p
= 0,03, p
< 0,01, p
= 0,02, respectivement) (tableau S1).

sur les 116 SNPs dans les sept gènes candidats codant CagA protéines interagissant analysées dans la phase de découverte, 22 SNP dans trois gènes, SRC
, c-MET
et CRK
, étaient significativement associés à un cancer gastrique ( p
-lrt < 0,05). SRC
rs6122566 risque significativement accru de cancer gastrique dans les modèles récessifs (OR = 4,90 [IC 95% 1,19 à 14,2]). Treize SNP qui étaient rs41739, rs16945, rs41738, rs6566, rs10435378, rs41737, rs2023748, rs41736, rs41735, rs6951311, rs183642, rs2237717 et rs38859 dans le gène c-MET ont montré un effet gène-dose significative dans le linéaire tests de tendance ( p
< 0,05). CRK
rs7208768 ont eu un effet peu significatif gène-dose. 100.000 tests de permutation dans la seule analyse SNP ont montré SRC
rs6122566, Les rs41739 de c-MET et CRK
rs7208768 avec le plus significatif permutée p
- valeur dans chaque gène ( p
_{permutation = 0,00284, p
permutation = 0,00989, p
permutation = 0,01392, respectivement). L'importance marginale de la permuté p corrigée
-value a été observée pour SRC
rs6122566 ( p
= 0,0918), mais tous les FDR p
-values dans tous les modèles génétiques ne sont pas significatives ( p
> 0,2). (Tableau S2)}

blocs haplotypes ont été identifiés par le tracé de LD (Figure S1). Le plus grand bloc a été construit avec les SNP les plus importants, y compris rs41739, rs6566 et rs41738, mais l'omnibus p
-value n'a pas été significative ( p
> 0,05). Quatre blocs définis par SRC
et un bloc défini par CRK
n'a pas montré la signification statistique dans le test omnibus. Les résultats de l'analyse des haplotypes ne l'ont pas présenter de l'information au-delà des résultats SNP individuels (données non présentées).

Dans la phase d'extension, deux SNP, rs6122566 et rs6124914, dans SRC
gènes et rs7208768 dans CRK
restaient significativement associés à un risque accru de cancer gastrique (OR = 4,01 [IC à 95%: 1,62 à 9,96]; OR = 1,30 [IC à 95%: 1,00 à 1,70]; OR = 1,33, [IC à 95%: 1,08 à 1,64], respectivement). Les associations entre les SNP dans le gène c-MET (rs41739 et rs41737) et le risque de cancer gastrique ont été atténuées. Dans l'analyse combinée qui comprenait la découverte et l'extension des phases, l'estimation du risque de SRC
rs6122566 dans le modèle récessif était significativement associée à un cancer gastrique dans les deux mis en commun et les méta-analyses (OR = 3,96 [95% CI: 2,05 à 7,65]; OR = 4,59 [IC à 95%: 2,74 à 7,70], respectivement). En outre, SRC
rs6124914, c-MET
rs41739 et CRK
rs7208768 ont montré des effets gène-dose significative pour le cancer gastrique dans les deux analyses. Il n'y avait aucune hétérogénéité entre les analyses (test de Cochran Q, p
> 0,05). (Tableau S3)

Parmi un total de 823 sujets (406 cas et 417 témoins) qui ont été mesurés les taux plasmatiques des quatre biomarqueurs de phytoestrogènes, les concentrations globales de génistéine, daidzéine et enterolactone dans les cas étaient significativement inférieurs à ceux des témoins (génistéine 167,6 nmol /L dans les cas vs.
200,2 nmol /L dans les contrôles , p
= 0,0004; daidzéine 91,4 nmol /L dans les cas vs
131,6 nmol /L dans les contrôles, p
. < 0,0001; enterolactone 51,0 nmol /L cas vs
77,7 nmol /L dans les contrôles, p
<. 0,0001). Les concentrations plasmatiques globales de equol, un métabolite daidzéine, étaient plus faibles dans les cas mais pas statistiquement significative (50,3 nmol /L pour les cas vs
62,2 nmol /L pour les contrôles;. p = 0,0977
) . Dans une analyse stratifiée selon les biomarqueurs de phytoestrogènes, une importante interaction gène-environnement a été observée dans CRK
. allèle Risque de CRK
rs7208768 avait un risque significativement accru de cancer gastrique à des niveaux de phytoestrogènes bas. Plus précisément, l'allèle de rs7208768 était associée à un risque accru de cancer de l'estomac au génistéine bas, daidzéine, equol et enterolactone et statistiquement significative (OR = 1,91 [IC à 95%: 1,44 à 2,52] à basse génistéine; OR = 2,09, [IC à 95%: 1,46 à 3,01] à basse daidzéine; OR = 1,87 [IC à 95%: 1,26 à 2,78] à basse equol; OR = 1,77 [IC à 95%: 1,10 à 2,85] à faible enterolactone). Le p
-interaction était significative ( p = 0,0001
, p = 0,0013
, p = 0,0147
, p
= 0,0404, respectivement) (tableau S4).

Bien que des analyses stratifiées supplémentaires ont également été menées pour détecter une interaction entre CagA séropositivité et chaque effet de gène pour le risque de cancer de l'estomac, les interactions ne sont pas significatives dans aucun des trois gènes, SRC
, c-MET
et CRK
(données non présentées).

Discussion

CagA sécrétant H. pylori de l'infection semble jouer un rôle important dans la carcinogenèse gastrique par voie de transduction du signal de CagA séquentiel. CagA se lie d'abord à sept composants protéiques pour activer les réponses cellulaires aberrantes qui sont à la base du développement d'un cancer gastrique. Etant donné que la fonction de la protéine peut être régulée par les gènes hôtes, des gènes qui codent pour des molécules qui interagissent CagA peuvent être capables de modifier le risque de cancer gastrique. Pour évaluer cette hypothèse, nous génotypage 137 SNP dans sept gènes candidats et démontré que les variantes génétiques de SRC
(rs6122566 et rs6124914), (le rs41739) de c-MET et CRK
(rs7208768) étaient significativement associés au risque de cancer gastrique. En outre, un effet interactif de CRK
polymorphisme génétique, rs7208768 et quatre biomarqueurs phytoestrogènes, la génistéine, la daidzéine, equol et enterolactone sur le risque de cancer de l'estomac ont été analysés.

SRC, une protéine non-récepteur tyrosine kinase (TK), semble être essentielle dans la carcinogenèse gastrique. Une fois injecté dans les cellules epitheliales gastriques, CagA subit une phosphorylation de la tyrosine par les kinases de la famille SRC [8], [12], [18]. La phosphorylation de la tyrosine de CagA est une étape intégrale dans la détermination du mécanisme de signalisation cellulaire séquentiel. Parce que certains CagA interagissant molécules telles que SHP-2, CRK et CSK ne sont en mesure de répondre avec CagA phosphorylée, SRC peut être plus important en influençant de d'autres fonctions cellulaires et induire le développement du cancer gastrique. En outre, la SRC a été rapporté à jouer un rôle crucial dans la progression tumorale et la médiation développement du cancer et des métastases [32]. L'activité cellulaire de SRC semble être modifiée par le gène hôte et nos résultats indiquent que SRC
rs6122566 et rs6124914 peuvent être modificateurs de risque dans la carcinogenèse gastrique. SRC
variations génétiques qui influencent la capacité cellulaire dans les cellules épithéliales gastriques sont associés à un risque de cancer de l'estomac.

Malgré l'importance atténuée dans l'analyse d'extension, c-MET
qui est synonyme de
HGFR (récepteur du facteur de croissance des hépatocytes) peut être un gène de risque indépendant pour le cancer gastrique. De nombreuses études antérieures ont rapporté que c-MET, l'un des TKs récepteur, favorise la croissance invasive de la tumeur, l'invasion des cellules, et la mortalité, et l'amplification et /ou la surexpression de c-MET a été associée à divers carcinome humain, y compris le cancer gastrique [17], [ ,,,0],33] - [36]. En termes de c-MET mécanisme cellulaire, CagA joue un rôle en tant que protéine adaptatrice, Gab, pour médier la signalisation TK du récepteur en contrôlant un ensemble de composants en aval au niveau du récepteur activé tels que Grb2, PLCy, et SHP-2 [37], [38]. En mimant fonctionnellement la protéine adaptatrice Gab, CagA pourrait stimuler la prolifération anormale des cellules et de la mortalité epitherial gastrique [39]. Dans la présente étude, un polymorphisme de le gène c-MET (rs41739) était significativement associé au risque de cancer gastrique et un facteur susceptible génétique possible sur le cancer gastrique. Conformément à l'importance et la fonction cellulaire, le gène c-MET semble modifier le risque de carcinogenèse gastrique par voie signal de CagA de transduction.

CRK protéine adaptatrice qui a isoformes d'épissage, CRK-I ( SH2-SH3) et CRK-II (SH2-SH3-SH3), se lie à TKs et contrôle la transcription et du cytosquelette réorganisation modulation des activités cellulaires [40]. En outre, cette protéine adaptatrice intègre divers signaux cellulaires et son dérèglement est relié au carcinome humain [41]. Interaction entre CRK et CagA phosphorylée a été signalé comme étant une condition préalable biologique qui conduit au changement morphologique, la diffusion cellulaire et la dérégulation de l'adhésion cellule-cellule dans l'épithélium gastrique [14]. Plusieurs études ont montré que la surexpression de CRK est associé à divers types de cancers humains, y compris les poumons, l'estomac et le cancer du côlon [42], [43]. Nos résultats confirment également le potentiel génétique de CRK
rs7208768 sur le développement du cancer de l'estomac et à la fois l'ampleur génétique et cellulaire de CRK.

Plus intéressant, des interactions significatives entre le CRK
polymorphisme génétique et quatre phytoestrogènes biomarqueurs, la génistéine, la daidzéine, equol et enterolactone, modifié le risque de cancer gastrique. Des études ont indiqué des effets protecteurs de phytoestrogènes sur le cancer gastrique [20], [28] et en particulier, la génistéine inhibe le signal de ERK cascade de transduction induite par H. pylori infection
jouant un rôle d'inhibiteur de tyrosine kinase [44]. Considérant CRK est la principale molécule amont de l'activation ERK, les variantes génétiques à risque de CRK
pour activer la signalisation ERK peut être bloquée par des phytoestrogènes, et arbitrer le développement du cancer gastrique.

SRC, c-MET et CRK sont également impliqués dans la TKs de protéine qui est une famille multigénique diversifiée qui contrôle cellulaire voie de transduction du signal de médiation une gamme de processus cellulaires en aval et joue un rôle important dans le développement de diverses maladies cliniques [45], [46]. TKs sont également connus comme oncogènes impliqués dans les tumeurs malignes humaines. SRC appartient à un TK non récepteur c-MET est un récepteur TK, tandis que CRK est une protéine adaptatrice qui se lie aux protéines TK phosphorylé et renforce les principales protéines de la voie de transduction du signal [41]. Ces trois molécules codées par SRC
, c-MET
et CRK
gènes peuvent indépendamment induire la différenciation cellulaire, l'adhérence, la mort et des changements morphologiques par transmiting signaux cellulaires liés à leurs activités de savoirs traditionnels indépendamment de l'interaction avec CagA. Futhermore, les gènes liés à l'action TK semblent jouer un rôle crucial en tant que facteur susceptible de cancer gastrique compte tenu de la génistéine qui est un inhibiteur de la tyrosine kinase peut réduire le risque de cancer gastrique [28]. Cela indique que les susceptibilités génétiques de SRC
, c-MET
et CRK
dans la carcinogenèse gastrique doivent être traités comme des facteurs de risque indépendants qui modifient le signal transduction cellulaire TK manières à charge parce que les personnes non infectées avec CagA sécrétant H. Pylori
peut être à risque de cancer de l'estomac selon les variantes génétiques individuelles des trois gènes.

Bien que PTPN11
, Crkl
, CSK
, et GRB2
n'a montré aucune association significative avec le cancer gastrique dans la présente étude, les effets génétiques ne devraient pas être négligés. Au niveau cellulaire, ces molécules sont significativement liés aux effets aberrants qui sous-tendent la carcinogenèse gastrique [12]. Comme l'un des proto-oncogènes humains, PTPN11
code cytoplasmique tyrosine phosphatase avec SHP2 et peut induire une hyperactivation aberrante de la signalisation ERK [47]. Une étude a également signalé que variant génétique de PTPN11 augmente le risque d'atrophie gastrique et cancer chez CagA positif H. les personnes infectées par pylori [48]. Dans le signal de voie de transduction de CagA, Crkl fonctionne tout à fait similaire à CRK; CSK frustre une activité de SRC kinase de la famille et de la signalisation CagA-SHP2; et GRB2 agit comme un déclencheur pour activer la voie RAS /MEK /ERK [14], [18], [49]. D'autres études avec un plus grand nombre de cas de cancer de l'estomac et une couverture plus large des polymorphismes génétiques dans ces gènes sont justifiées.

carcinogenèse gastrique induite par CagA positif H. Pylori de l'infection peut être inférer de nos résultats de l'étude et l'examen des mécanismes cellulaires [16], [18], [47] (figure S2). Une fois CagA est injecté dans les cellules ephithelial gastriques, SRC lance CagA phosphorylation qui interagit avec la protéine de CRK adaptateur et SHP2 pour promouvoir l'activation de ERK. une. une. b. c. ré. e. F. g.

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