PLoS ONE: Hipoksija Stimulira EMT želučanog stanica raka kroz autokrinc TGF-beta Signalizacija

Sažetak pregled

epitela mezenhimalne tranzicije (EMT) smatra se da je povezana s zloćudnosti stanica raka i odgovorni za invazije i metastaziranja raka. Mi smo ranije izvijestili da je udaljena metastaza je bio povezan s hipoksijom u raka želuca. Mi smo stoga istraživali učinak uslijed nedostatka kisika stanje na EMT želučanih stanica raka. Želučani stanice raka su kultivirane u normoxia (21% O _{2) ili hipoksijom (1% O 2) 24 h. EMT je ocijenjena kao postotak stanica vretenastom ukupnih stanica. procijenjen učinak transformirajući čimbenik rasta β1 (TGFβ1) ili inhibitora tirozin kinaze na EMT. Razina izraz TGFβ1 pregled i TGFβR pregled je procijenjena u realnom vremenu RT-PCR. Proizvodnja TGFβ1 iz stanica karcinoma je mjerena pomoću ELISA testa. Hipoksija stimulira EMT od OCUM-2MD3 i OCUM-12 stanica, ali ne i da od OCUM-2M stanica. Razina izraz TGFβ1 pregled mRNA pod hipoksije bio je znatno veći nego u normoxia u sve tri stanične linije. Razina izraz TGFβR pregled mRNA bila značajno povećana hipoksije u OCUM-2MD3 stanica, ali ne u OCUM-2M stanica. TGFβR inhibitor, SB431542 ili Ki26894, značajno je smanjen EMT od OCUM-2MD3 i OCUM-12. TGFβ1 proizvodnja iz OCUM-2MD3 i OCUM-12 stanica bila je značajno povećana u hipoksije u usporedbi s onom u normoxia. Ovi rezultati pokazuju da bi hipoksija stimulira EMT želučanih stanica karcinoma preko autokrinog TGF-beta /TGFβR signalizacije pregled}

Izvor. Matsuoka J, yashiro M Doi Y, Fuyuhiro Y, Kato Y, shinto O, et al. (2013) Hipoksija stimulira EMT želučane stanica raka kroz autokrinc TGF-beta signalizacija. PLoS ONE 8 (5): e62310. doi: 10,1371 /journal.pone.0062310 pregled

Urednik: Claudio M. Costa-Neto Sveučilišta u São Paulo, Brazil pregled

Primljeno: 19. listopada 2012; Prihvaćeno: 19 ožujka 2013; Objavljeno: 17. svibanj 2013 pregled

Copyright: © 2013 Matsuoka et al. Ovo je otvorenog pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan

financiranja. Ova studija je podržan u sklopu koje je National Cancer Centar za istraživanje i razvoj fonda (23-a-9), te Grants-u pomoć za znanstvena istraživanja (KAKENHI, br. 20591573, 22390262 i 23390329) od Ministarstva prosvjete, znanosti, Sport, Kultura i tehnologije Japana. U financijeri nisu imali ulogu u studiju dizajna, prikupljanja i analize podataka, Odluka o objavi, ili pripremu rukopisa

suprotstavljenih interesa. Autori imaju sljedeće interese. KS, TS, i AM su zaposlenici Kyowa Hakko Kirin Co Ltd Ki26894, koji je korišten u ovom istraživanju, je proizvod Kyowa Hakko Kirin Co. Ltd. Nema daljnjih patenti, proizvodi u razvoju ili proizvode na tržištu za proglašenje , To ništa ne mijenja pridržavanje autorovih svim PLoS ONE politika na razmjenu podataka i materijala, kao što je opisano u online vodič za autore. Pregled

Uvod pregled

epitela mezenhimalne prijelaza (EMT) karakterizira promjene u morfologiji stanica tijekom koje epitelne stanice poprimaju mczcnhimnog svojstva dok gubitka stanica-stanica interakcije i apicobasal polaritet [1], [2]. U epitelnih karcinoma, EMT je priznat kao jedan od mehanizama odgovornih za pokretanje invazivnih i metastatskih ponašanja [3] - [5] pregled

nedostatka kisika u okolini postoji u nekim regijama čvrstih tumora koji pokazuju ubrzani rast, jer angiogeneze. u karcinomima je heterogena [6]. Hipoksija smatra da je povezana s agresivnim tumorskim fenotipova želučanog karcinoma [7], [8], uključujući metastatički sposobnost stanica raka [6], [9]. Klinički i eksperimentalni podaci također pružaju dokaze o povezanosti između nedostatka kisika u okolini i lošom prognozom [10], [11]. Stoga je važno za budući razvoj liječenja raka shvaćanja mehanizma od metastaze induciranog hipoksijom. Pregled

On je izvijestio da su različiti topljivi čimbenici, uključujući i transformirajući faktor rasta-β1 (TGFβ1) [12], [ ,,,0],13], epidermalni faktor rasta (EGF) [14], inzulinu sličan faktor-1 rasta (IGF1) [15], faktor rasta fibroblasta (FGF) [16], faktor rasta hepatocita (HGF) [17] su korelirani s EMT , TGF-beta signali imaju važnu ulogu u različitim aspektima metastatskog širenja stanica raka, kao što su migracije, invazije i EMT [12], [13]. Je TGF-beta ligandi vežu vrsti TGF-beta receptor II (TGFβRII), koji tada tvori kompleks s bilo TGFβR tipa I ili II. TGFβR tipa I (TGFβRI) odašilje signale unutar stanice kroz drugi glasnik Smad proteina [13], [18]. Daljnji signali se prenose putem TGFβRI, koja fosforilira receptora regulirano Smad proteine ​​[19], [20] pregled

Nekoliko studija pokazalo da hipoksiji stanje može izazvati EMT stanica raka [21] -. [24] ali je molekularni mehanizam odgovoran za EMT pod uslijed nedostatka kisika uvjet ostaje nejasno. Mi smo stoga istraživali učinak hipoksije na morfološkim karakteristikama želučanih stanica raka pojasniti mehanizme odgovorne za hipoksijom induciranog EMT. pregled

Materijali i metode

Stanična kultura i Stanične linije pregled

korišteni su sedam raka želuca stanične linije. OCUM-2MD3 [25], OCUM-12 [26], OCUM-2M [27], KATO-III [28] i MKN-45 [29] su izvedeni iz difuznih tipa želučanog karcinoma. MKN-74 [29] i MKN-7 [29] su izvedeni iz intestinalnog tipa. OCUM-2M, OCUM-2MD3 i OCUM-12 su establised u našem laboratoriju, kao što je prethodno opisano [25] - [27]. Ukratko, OCUM-12was izvedeni iz ascites povezanih s difuzno tipa želučanog karcinoma, a OCUM-2MD3 stanica, kćer stanične linije s velikim potencijalom peritonejsku metastaza, osnovan je iz OCUM-2M stanica pomoću ortotropnih modelu tumora, roditeljska stanična linija ascites povezana s difuzno tipa želučanog karcinoma. Druge stanične linije dobivene su od banke stanica JCRB (Osaka, Japan) ili American Type Culture Collection (Rockville, MD). Stanice se kultiviraju na 37 ° C u 21% O _{2 (normoxia) ili 1% O 2 (hipoksija). Uvjetima hipoksije su održavane koristeći modularni inkubator komore (Hirasawa, Tokyo, Japan) s 5% CO 2 i 1% O uravnotežen 2 s N 2 plina. Medij za kulture sastojao se od Dulbeccovom modificiranom Eagle mediju (DMEM;, Nikken proton, Osaka, Japan) s 10% fetalnog goveđeg seruma (. Nichirei Bio), 100 IU /ml penicilina (ICN Biomedicals, Costa Mesa, CA), 100 ug /ml streptomicina (ICN Biomedicals), i 0,5 mM natrijevog piruvata (Cambrex, Walkersville, MD). pregled}

Morfološki mijenja

stanice raka su kultivirane u normoksičnim ili hipoksične 24 h, i morfologija stanica uočeno mikroskopski. EMT je određen kada je poligonalni ili vretena oblik je pronađena u stanicama raka koje faznokontrastne mikroskopom. Učestalost EMT je procijenjena po stopi od poligonalne ili vretenastom stanica u svim stanicama raka; EMT stopa = broj poligonalne ili vretena oblik stanica /ukupan broj stanica × 100 (%). Pregled

Efekti različitih topivih faktora na morfološke promjene pregled

Ispitali smo učinke raznih topljivih čimbenika uključujući EGF (Pepro Tec, Rocky Hill, NJ), IGF1 (Pepro Tec), vaskularni endotelni faktor rasta stanica (VEGF; R &D Systems, Minneapolis, MN), osnovno-FGF (Sigma, Saint Louis, MO), trombocite derivirane faktor rasta BB homodimer (PDGF-BB; Pepro Tech), HGF (Pepro Tech) TGFβ1 (king Brewing, Kakogawa, Japan), u morfologiji stanica raka. Stanice su uzgojene u DMEM koji sadrži jedan od gore navedenih faktora na željenoj koncentraciji, na 37 ° C u normoxia. Morfologija stanice je ispitana nakon 24 sata. Pokusi su provedeni za svaku faktor u duplikatu. Pregled

Efekti neutraliziranje antitijela na morfološke promjene pregled

koristi za neutralizaciju antitijela, kao što su anti-HGF antitijela (Genzyme Techne, MPLS, MN, USA), anti-TGF-beta antitijela (R &D systems), anti-PDGF-BB (Genzyme), anti-FGF7 (R &D systems), anti-VEGFR3 (R &D systems). Stanice su uzgajane u DMEM koji sadrži jedan od gore navedenih protutijela na 100 ug /ml, na 37 ° C, kod hipoksije. Morfologija stanice je ispitana nakon 24 sata. Pregled

Učinak različitih inhibitora phospholylation morfoloških promjena pregled

Nakon stanica postignut djelomičnu Stanice su dodana TGF-beta ili svaki inhibitor i inkubira u hipoksičkog stanja ili normoxia 24 h. Zatim, morfološke rezultati su ispitani u usporedbi s kontrolom. Pet mali sintetski inhibitori phospholylation, Ki26894 (TGFβRI inhibitora, 10 uM, Kirin Pharma, Mishima, Japan), SB431542 (inhibitor TGFβRI, 10 uM, Sigma, Saint Louis, MO), sunitinib (SU11248, 20 nM, inhibitor tirozin kinaze protiv VEGFR, PDGFR, c-kit, FGFR2 i Flt3, LKT Laboratories, St. kantica, MN), PD173074 (inhibitor FGF /VEGF receptor tirozin kinaze, 5 nM, Santa Cruz, CA), lapatinib (GW572016, 10 nM, a inhibitor tirozin kinaze protiv EGFR i erbB2, Toronto istraživanja kemikalije), a PHA665752 (c-MET inhibitor, 2 uM;. Pfizer, San Diego, CA, USA) su korišteni pregled

Kvantitativna realnom vremenu preokrenuti transkriptaze-polimeraze Lančana reakcija (RT-PCR) pregled

Kvantitativna RT-PCR ispitati TGFβ1 pregled, TGFβRI, TGFβRII
i vimentin pregled mRNA izraze. Stanice raka se inkubiraju u normoksičnim uvjetima i pod uvjetima hipoksije 24 h. Nakon inkubacije, ukupna stanična RNA je ekstrahirana pomoću trizolne reagensa (Invitrogen, Carlsbad, CA), u skladu s uputama proizvođača. Nakon uklanjanja genomske DNA DNase, cDNA je pripremljena iz 2 ug RNA s Maloney virusom mišjeg leukemije reverzne transkriptaze (Invitrogen) pomoću nasumičnih početnika (Invitrogen). Da bi se odredilo promjene puta u svakom genu, real-time RT-PCR na ABI Prism 7000 (tnom City, CA), pomoću komercijalno dostupnih Gene Expression testovi za TGFβ1
(Hs00998130,), TGFβRI pregled (Hs00610319), TGFβRII pregled (Hs00559661), vimentin pregled (Hs00958116), Twist pregled (Hs01675818), Zeb1
(Hs 00232783), Snail1 pregled (Hs00195591), VEGFA pregled (Hs00900055). PCR je izvršena na 95 ° C za 15 s i 60 ° C 60 sekundi 40 ciklusa. Gliceraldehid-3-fosfat dehidrogenaze (GAPDH) je korišten kao interni standard za normalizaciju razine mRNA za razlike u koncentraciji uzorka i opterećenja. Fold promjene u ekspresiji svake ciljne mRNA u odnosu na GAPDH je izračunata na temelju praga ciklusa (CT) kao 2 ^{-Δ (ΔCt), gdje je ΔCt = Ct ciljno-Ct GAPDH i Δ (ΔCt) = ΔCt _{hipoksija-ΔCt normoxia. Kvantitativne PCR reakcije izvršene su u triplikatu. Pregled}}

Western blot analiza pregled

istraživanjem učinka hipoksije na Smad2 fosforilacije, stanice raka su inkubirani u normoksičnim ili hipoksične 24 h, respektivno. Stanice su lizirane u puferu za liziranje i alikvoti koji sadrže 50 ug ukupnog proteina podvrgnuti su natrijev dodecil sulfat-poliakrilamid gel elektroforeze; Proteinske vrpce su prebačene u polivinilidenfluorid membrane (Millipore, Billerica, MA). Membrana se inkubira u TBS-T (10 mM TBS i 0.05% Tween 20) s dodatkom 5% nemasnog mlijeka i 5% goveđeg albumina (Sigma), na sobnoj temperaturi 1 sat. Zatim se membrana je stavljen u TBS-T koji sadrži otopinu primarnog antitijela p-Smad2 (Ser ^{465/467 1: 1000, Cell Signalling Technology) i Smad2 /3 (1: 1000, Cell Signaling Technology), vimentin (1: 1000; Cell Signalling Technology), anti-βactin (1: 1000, Sigma) i ostavi da reagira na 4 ° C preko noći. Zatim, svako se protutijelo se ispere tri puta sa TBS-T kroz 10 min, a na peroksidazu sekundarnog antitijela označenog (GE Healthcare, Buckinghamsire, UK) reaktivna s Doda se primarno antitijelo. Opsezi su detektirani pomoću pojačane kemiluminiscencije sustav (Wako, Osaka, Japan). Pregled}

imunosorbentnog ispitivanja enzim vezanog (ELISA) pregled

proizvodnja TGFβ1 iz stanica karcinoma je mjeren kvantitativnim sendvič enzim immunoassay tehnika upotrebom Quantikine ljudski TGFβ1 ELISA kompleta prema uputama manufacturer`s (R &D systems). Stanice raka inkubirani u hipoksijom ili normoxia 24 h, medij je zamijenjen na 3 ml DMEM bez seruma. Stanice se inkubiraju u hipoksijom ili normoxia, još 24 sati. Uvjetnog medij (CM) iz svake posude i centrifugira na 1000 g pregled 5 minuta. TGFβ1 razina seruma CM je mjerena pomoću ELISA. ELISA pronašli su i aktivne i latentne TGF-beta. Pregled

Statistička analiza pregled

Usporedbe između skupova podataka su s Studentov t pregled -test ili Kruskal-Wallis jednosmjerna ANOVA strane redovi zatim Dunnov višestruke usporedbe. Razlike koje se smatraju statistički značajna kada je P vrijednost je bila. ≪ 0,05 pregled

Rezultati

Učinci hipoksije na stanici raka morfologije Netlogu

hipoksiji stanje znatno povećao broj poligonalnog ili vretenastom stanicama koje prolaze kroz EMT među OCUM-2MD3 ili OCUM-12 stanice, ali ne i kod OCUM-2M, MKN-7 MKN-45, MKN-74, ili KATO-III stanice (Sl. 1A i sl. S1). Stanična morfologija OCUM-2MD3 i OCUM-12 velikih promjena nakon 4 sata na hipoksične kulturi. Nakon 12 sati u kulturi, povećana brzina EMT opažena je i kod stanične linije. Stopa EMT od OCUM-2MD3 i OCUM-12 stanica bila je najviša u 24 sati uslijed nedostatka kisika kulture (Sl. 1b). Budući da su morfološke promjene su vidljive na 24 sata kulture pod hipoksije, molekularni mehanizmi EMT su analizirani na 24 sata kulture pod uvjetima hipoksije koriste OCUM-2MD3, OCUM-12, OCUM-2M stanice. Pregled

učinci različitih faktora rasta na morfologiju stanica raka pregled

Topljivi faktori su korišteni u koncentraciji od 10 ili 100 ng /ml. OCUM-2MD3 i OCUM-12 stanice postaju vretena obliku nakon dodatka TGFβ1 ili HGF, ali ne i nakon dodatka EGF, FGF2, FGF7, IGF1, VEGF ili PDGF-BB, nakon 24 sati pod normoxia (Tablica 1). Nasuprot tome, OCUM-2M stanice pokazale nikakve promjene morfološku nakon dodatka svih čimbenika (Sl. 2). Pregled

Učinci neutralizirajuća antitijela na morfologiju stanica raka u hipoksija

EMT izazvana je hipoksijom je djelomično inhibiran anti-TGF-β1 antitijela na 100 ug /ml, ali ne i anti-HGF protutijela (Tablica 2). pregled

Efekti hipoksije na TGFβ1 pregled, TGFβRI
i TGFβRII pregled mRNA želučanih stanica raka pregled

razina ekspresije TGF-beta pregled bio je značajno (p < 0,001) povećana pod uslijed nedostatka kisika stanja u svim OCUM -2MD3, OCUM-12, OCUM-2M stanice, u usporedbi s razinom pod normoxia (Sl. 3A). Izraz razine TGFβRI pregled i TGFβRII pregled znatno su povećane pod uslijed nedostatka kisika stanja u OCUM-2MD3 stanica. Nasuprot tome, razina TGFβR1 pregled i TGFβR2 pregled, izraz značajno su smanjeni pod uslijed nedostatka kisika stanja u OCUM-2M stanica (Sl. 3B). Pregled

Utjecaj hipoksije na TGFβ1 proizvodnju oslobađa iz želuca stanica karcinoma pregled

TGFβ1 proizvodnja iz OCUM-2MD3 i OCUM-12 stanica bilo je značajno (p < 0.001) povećana u hipoksije odnosu na normoxia, ali ne i da se od OCUM-2M stanica (Slika 3C. ). pregled

Efekti hipoksije na Smad2 fosforilaciju staničnim linijama karcinoma želuca

OCUM-2MD3 i OCUM-12 ćelija, Smad2 fosforilacija je povećan pod uslijed nedostatka kisika stanju, u usporedbi s onom pod normoksičnim stanje. Za razliku od toga, Smad2 fosforilacija nije povećana pod uslijed nedostatka kisika stanja u OCUM-2M stanica (Sl. 4). Pregled

Učinci inhibitora fosforilacija kinaze na EMT i vimentin izražavanja u hipoksija Netlogu

Bilo je od TGFβR inhibitori fosforilacije, Ki26894 i SB431542, inhibirani morfološke promjene OCUM-2MD3 i OCUM-12 stanica pod uslijed nedostatka kisika stanju, ali još tri inhibitori, lapatinib sunitinib, a PHA665752, nije (slika 5A, 5B). S druge strane, niti jedan od inhibitora nije imao učinka na morfologiju OCUM-2MD3 i OCUM-12 stanica pod normoxia (podaci nisu prikazani). Razina ekspresije u vimentin Netlogu, koja je služila kao marker EMT, značajno je povećan s hipoksijom, a smanjena je za bilo koji od inhibitora TGFβR Ki26894 i SB431542 (Slika 5C). Razina vimentin protein također je povećan u hipoksije, a smanjena je za bilo koji od TGFβR inhibitora Ki26894 i SB431542 (Slika 5D). pregled

Efekti uslijed nedostatka kisika stanja na čimbenike koji su povezani s EMT. pregled

hipoksičnih stanje značajno povećao VEGF-a pregled razini mRNA u OCUM-2M, OCUM-2MD3 i OCUM-12 stanica. Razina izraz Twist pregled ili Zeb1 pregled značajno je povećan za hipoksije u OCUM-2MD3 i OCUM-12 stanice, ali je smanjen u OCUM-2M stanica. Povećana ekspresija Twist Netlogu ili Zeb1 pregled smanjena je za bilo koji od inhibitora TGFβR Ki26894 i SB431542 u OCUM-12 stanica. Hipoksiji stanje nije utjecalo na razinu ekspresije u Snail1 pregled (Slika 6). Pregled

Rasprava pregled

Nedavno je nekoliko studija pokazalo da hipoksiji mikrookoliša okružuje čvrstih tumorskih stanica možda doprinijeti raka progresije [30] - [34]. Međutim, molekularni mehanizmi, odgovorni za napredovanje raka u hipoksije ostaje nejasan. To je izvijestio da je hipoksija je jedan od okidača za EMT [35]. U ovom istraživanju, hipoksiji stanje inducirane EMT u difuzna tipa želučanih staničnim linijama karcinoma OCUM-2MD3 i OCUM-12, ali ne u crijevni tipa stanica. Difuzna tipa raka želuca se odlikuje visokom malignosti od crijevna tipa rakom želuca [36]. EMT potencijal stanica raka pod hipoksija može biti jedan od razloga za visoke malignog potencijala difuzna tipa raka želuca. Pregled

Mnoge studije su izvijestili da je nekoliko molekula mogla utjecati EMT stanica raka, uključujući i TGF-beta [23 ], [37], EGF [38] i PDGF [39]. U ovom istraživanju, TGF-beta stimulira EMT od OCUM-2MD3 i OCUM-12 stanice, ali EGF i PDGF nije. Osim toga, EMT indukcija pod uslijed nedostatka kisika uvjet je značajno smanjen za anti-TGF-beta neutraliziranja protutijela ili inhibitora TGFβR fosforilacije u oba OCUM-2MD3 i OCUM-12 stanica. Uzeti zajedno, ovi rezultati pokazuju da je razina proizvodnje TGF-beta u stanicama karcinoma je znatno povećana u hipoksije, te su razine ekspresije TGFβR i Smad2 fosforilacije povećani hipoksijom. Vimentin karakteristično je komponenta mezenhimske stanice i obično se ne izražava u epitelnim stanicama. Budući da je izraz vimentin pregled u epitelnim stanicama igra bitnu ulogu u EMT kroz interakciju s aktina i drugih posrednih filamenata [40], vimentin bio korišten kao EMT markera u ovoj studiji. Razina izraz vimentin pregled značajno je povećan s hipoksijom, a smanjena je za inhibitora TGFβR fosforilacije Ki26894 i SB431542. Ovi nalazi sugeriraju da EMT pod hipoksičkog stanja povezana s autokrini TGF-beta /TGFβR signalizacije difuzno tipa raka želuca. Nekoliko studija izvijestio korelaciju između EMT i TGF-beta signalne do hipoksije. [2], [21], [23], [32], [37] U karcinoma želuca, što je objavljeno da EMT korelaciji s malignosti stanica raka i odgovoran je za invazije i metastaziranja raka. Međutim, mehanizmi odgovorni za EMT želučanih stanica raka ostaju nejasni. Ovaj rad je pojasnio da je EMT želučanih stanica raka bila je izazvana pomoću TGF-beta signalizacija pod hipoksije. TGFβR inhibitori bi stoga biti obećavajuće tvari za liječenje želučane metastaziranja raka. Pregled

hipoksiju stimulira EMT od OCUM-2MD3 stanicama, ali ne i onaj OCUM-2M stanica. EMT je uključen u promoviranje invazije i metastaziranja raka. Dok OCUM-2MD3 je "kćer" stanična linija OCUM-2M [25], [34], OCUM-2MD3 stanice imaju veći potencijal za metastaze na peritoneum na miševe od OCUM-2M stanica [25], [34] , Stanice raka slobodne migrirati u peritonealnoj šupljini su izloženi hipoksiji zbog nedostatka proksimalni hranjenja posudi [41]. Razina izraz TGFβ1 pregled mRNA pod hipoksije bio je znatno veći nego u normoxia u sve tri stanične linije. Nasuprot tome, razina ekspresije TGFβRI pregled i TGFβRII pregled mRNA je značajno povećao hipoksijom u OCUM-2MD3 stanica, ali ne u OCUM-2M stanica. Različite reakcije TGFβR pregled izraz između normoxia i hipoksije može biti jedan od ključnih razloga za EMT hipoksijom induciranog. Mi smo ranije izvijestili da je želučani stanice raka pod hipoksije pokazala EMT i visoke selica i invazivne aktivnosti u usporedbi sa stanicama karcinoma u normoxia [34]. Up-regulacija EMT od hipoksije stanica raka može biti jedan od razloga za veći potencijal za metastaze na peritoneum u OCUM-2MD3 stanica u usporedbi s OCUM-2M stanica. Pregled

hipoksično stanje značajno povećava razinu ekspresije Twist
i Zeb1 pregled u OCUM-2MD3 i OCUM-12 stanica, ali ne i da je u OCUM-2M stanica. Hipoksije veći aktivnost Twist pregled i Zeb1 pregled, izraz je smanjen sa TGFβR inhibitora (Ki26894 i SB431542) u OCUM-12 stanica. EMT do hipoksije može biti djelomično regulirano transkripcijskih faktora, Twist pregled i Zeb1.

Iako HGF utjecati na rak morfologije stanica u OCUM-2MD3 i OCUM-12 ćelija, hipoksije inducirana EMT nije bila inhibirana s anti-HGF neutralizirajuće antitijelo ili inhibitor c-Met bilo OCUM-2MD3 ili OCUM-12 stanica. HGF proizvodnje nije detektiran u OCUM-2MD3 ili OCUM-12 stanicama, pod ili hipoksijom i normoxia (podaci nisu prikazani). Većina HGF proizlazi iz stromalnih stanica raka želuca [42]. A HGF možda igra važnu ulogu za hipoksijom inducirane EMT, HGF mogu stimulirati EMT tumorskih stanica preko interakcije s rakom strome. Pregled

hipoksije inducirana EMT of OCUM-2MD3 stanica djelomično inhibirana TGFβR ali razne druge inhibitore, uključujući c-Met inhibitorom, inhibitorom PDGF, inhibitora EGFR i inhibitora VEGFR, nije imao učinak na EMT hipoksija induciran u ovoj studiji. Ovi rezultati ukazuju na to da drugi čimbenik (e) može biti povezano s hipoksijom induciranog EMT u nekim stanicama raka. U budućim istraživanjima, to će biti potrebno ispitati druge nove čimbenike koji mogu promijeniti morfologiju raka. Pregled

U zaključku, autokrina TGF-beta /TGFβR signalizacija pod hipoksija može biti jedan od faktora koji je povezan s agresivnim fenotipa EMT u stanice karcinoma želuca. TGF-beta /TGFβR signalni inhibitori čini se terapijski obećavajuće u rak želuca.

popratne podatke Slika S1. pregled Morfološke promjene stanica želuca pod uslijed nedostatka kisika stanju. U MKN-7 u MKN-45, MKN-74, te Kato-III, morfološke promjene nisu pronađeni pod hipoksije pregled doi:. 10,1371 /journal.pone.0062310.s001 pregled (TIF) pregled

• PLoS ONE: Janus kinaze 2 polimorfizmi povezani su s rizikom u bolesnika s rakom želuca u kineskoj Population
• PLoS ONE: više-na-više veza između mikroRNA i ciljnih gena u želučanom Cancer