PLoS ONE: Prekomjerna ekspresija Lin28 Smanjuje kemijske osjetljivosti želučanog stanica raka na Oksaliplatin, paklitaksel, doksorubicin i fluorouracilom u dijelu preko mikrornk-107

Sažetak pregled

Visoko Lin28 izraz povezan je s lošijim patološkim tumor reakcija na lokalno pacijenata s uznapredovalim rakom želuca prolaze neoadjuvant kemoterapije. Međutim, karakteristike Lin28 i mehanizam njegovog djelovanja u otpornosti kemoterapije je još uvijek nejasno. U ovom istraživanju, otkrili smo da unos od Lin28 u želučanih stanica raka (MKN45 i MKN28) povećala njihova otpornost na kemo-lijekova oksaliplatina (Oxa), paklitaksel (PTX), doksorubicin (ADM), a fluorouracil (5-FU) u odnosu s želuca stanicama raka transficiranih s kontrolnom vektoru. Kad obaranje Lin28 ekspresijom Lin28 malom ometa RNA (siRNA) je in vitro, otkrili smo da je otpornost na kemo-lijekova smanjena. Nadalje, utvrdili smo da Lin28 se regulira c-myc i P-gp-dolje-regulira cilindričnu D1. Na kraju, otkrili smo da Mir-107 je meta mikrornk od Lin28 i da sudjeluje u mehanizmu otpora kemoterapije. Naši rezultati ukazuju na to da Lin28 /Mir-107 put može biti jedan od mnogih signalnih putova uređena Lin28 a povezanih s rakom želuca kemoterapije otpora pregled

Izvor:. Teng R, Hu Y, Zhou J, Seifer B, chen Y, Shen J, et al. (2015) Prekomjerna ekspresija Lin28 Smanjuje kemijske osjetljivosti želučanog stanica raka na Oksaliplatin, paklitaksel, doksorubicin i fluorouracilom u dijelu preko mikrornk-107. PLoS ONE 10 (12): e0143716. doi: 10,1371 /journal.pone.0143716 pregled

Urednica: Nataša Kyprianou Sveučilišta Kentucky College of Medicine, Sjedinjene Američke Države pregled

Primljeno: 23. lipnja 2015; Prihvaćeno: 8. studenoga 2015; Objavljeno: 4. prosinca 2015 pregled

Copyright: © 2015 Teng i sur. Ovo je otvoreno pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan pregled

Podaci Dostupnost: sve relevantne podatke su u radu i njegove popratne podatke datoteka pregled

Financiranje:. Podrška dao je Zhejiang Provincial Natural Science Foundation iz Kine: LQ13H160014 [http://www.zjnsf.gov.cn/b/home.aspx] . pregled

suprotstavljenih interesa. autori su izjavili da ne postoje suprotstavljeni interesi pregled

Uvod pregled

rak želuca je čest klinički probavni sustav maligni tumor sa stopom smrtnosti, to je na trećem mjestu u svijetu [1]. Naša zemlja je područje koje je sklona raka želuca. Posljednjih godina, neo-adjuvant kemoterapija daju pacijentima s karcinomom želuca produljiti preživljavanje. Ipak, pet godina stopa preživljavanja od onih s uznapredovalim rakom želuca je još uvijek niži od 30% [2]. Otpornost Kemoterapija je vodeći uzrok neuspjeha raka želuca i drugih tumora tretmana. Stoga, mehanizam otpornosti kemoterapije raka želuca trenutno jedan od glavnih briga u želučanim studijama raka. Pregled

Lin28 je visoko konzerviran protein RNA se veže za koji je pokazano da sudjeluje u indukciji pluripotentnih matičnih stanica i održavanje matičnih Broj ćelija nalik na rak. Novije studije su izvijestili da aberantna aktivacija Lin28 dobro korelira s prognozom različitih karcinoma, uključujući karcinom dojke, jajnika, pluća, debelog crijeva i rak jetre [3-6]. Naša prethodna studija pokazala je da Lin28 ekspresija također je povezana s lošom preživljavanja kod pacijenata s karcinomom želuca [7], a druga studija pokazala je da je ekspresija Lin28 korelira s rezistencijom na paklitaksel kod ljudskih stanica raka dojke [8]. Štoviše, Lin28 izraz je povezana s patološkim tumorskog odgovora na lokalnoj razini pacijenata s uznapredovalim rakom želuca prolaze neo-adjuvantna kemoterapija. Međutim, molekularni mehanizam u pozadini ove rezultate ostaje nejasno [9]. Pregled

Lin28 promovira tumorigenezi od potiskivanja tumor supresor miRNAs kao što je neka-7 obitelji, koji je povezan s drogama otpor [8]. Međutim, kao ciljane Mirna od Lin28, Mir-107 je rijetko spominju kao faktor otpornosti na rak želuca. Mir-107 ekspresije niže kod različitih malignih bolesti kao što su karcinom debelog crijeva, glave i vrata, karcinomom pankreasa i karcinom želuca [10-13]. Mir-107 regulira nizvodno gene koji su uključeni u staničnu diferencijaciju i proliferaciju, metabolizam, stres odgovora i formiranje krvnih žila [10-14]. U ovoj studiji istraživali smo Lin28 /Mir-107 put i njegovu ulogu u otpornosti na želučanu stanica karcinoma na kemoterapiju. Možda smo identificirali novu potencijalnu metu za kemoterapije otporan na rak želuca. Pregled

Materijali i metode pregled

1. Kultura stanica i plazmid transfekcija pregled

Ljudski rak želuca stanične linije MKN-28 i MKN-45 su dobiveni kao dar od profesora Sung Hoon drami (Yonsei University College of Medicine, Seoul, Koreja). Stanice su kultivirane u RPMI 1640 mediju (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), uz dodatak 10% fetalnog goveđeg seruma (MP Biomedicals, Costa Mesa, CA, USA) u vlažnoj atmosferi s 5% CO2 pri 37 ° C. Oksaliplatin, paklitaksel, doksorubicin, te fluorouracil nabavljeni su od Sigma (St. Louis, MO). Plazmid pcDNA3.1-Lin28 transfektirana Xtreme GENA HP DNA transfekcijski reagens (Roche Applied Science, Mannheim, Njemačka) prema naputku proizvođača. Stabilne Lin28-izražavanje klonovi su dodatno odabrani i kulturan s odgovarajućim neomicin sadržava 1640 mediju. Pregled

2. U stvarnom vremenu kvantitativni PCR pregled

Real-time q-PCR analize su izvedene sa sustavom za detekciju ABI Prism 7500 sekvenci (tnom City, CA, USA). Ukratko, 20 jal reakcijske smjese koja sadrži 2 ul cDNA šablone i 1 ul svaki smislenih i anti-sense klicama (Promega Gotaq q-PCR® Master Mix sustava, Madison, WI, USA) koji je amplificiran na sljedeći način: denaturacija na 95 ° C kroz 10 min i 40 ciklusa 95 ° C 30 s, 60 ° C tijekom 30 s, te 72 ° C tijekom 40 sekundi. Realnom vremenu q-PCR reakcije provedene su u triplikatu za svaki uzorak, a srednja vrijednost je korištena za izračun razine mRNA. Kvantitativna analiza izvedena je pomoću usporedne CT metode. U Lin28 i Mir-107 kopirati brojeve u tumorskim tkivima su normalizirani na mRNA kopirati brojeve u ponudi gena gliceraldehid 3-fosfat dehidrogenaze (GAPDH) kako bi se dobila vrijednost 2 ^{-Δ CT. Nizovi primera su kao što slijedi u tabeli 1.}

3. Stanica za otpornost na lijek Ispitivanje pregled

održivost stanica je mjeren korištenjem MTT [3- (4,5-Dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazolijevog bromida] analizi (Amresco, Solon, OH, USA) u skladu s protokolom proizvođača. Stanice su nasađene u ploče s 96 jažica u gustoći od 5 x 10 ^{3 stanica po udubljenju. Nakon tretmana, stanice su bile inkubirane s 5 mg /ml MTT tijekom 4 sata. Zatim, medij je uklonjen i dodano je 150 ml sterilizirane otopine u DMSO, zatim se inkubira na 37 ° C tijekom 4 sata. Vrijednost OD dobiven je na valnim duljinama 570 nm i 630 nm. Vrijednost OD (570 nm do 630 nm) može posredno odražava broj stanica i aktivnost prema sljedećoj formuli: postotak preživljavanja = dozirati grupu OD570-630 /ne doza grupa OD570-630. zatim je generirana Koncentracija krivulja preživljavanja stanica /droge. pregled}

4. Western blot analiza

Stanični lizati su razdvojeni elektroforezom na 4-15% natrij-dodecil-sulfat-poliakrilamidnom gradijent minigel a (SDSPAGE) (Bio-Rad, Hercules, CA) i elektroforetski prenesu u nitroceluloznu membranu (Amersham Pharmacia , Piscataway, NJ). Western blot istraživani s antitijelima protiv Lin28, GAPDH (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), kaspaze i cijepa kaspaze, ciklin D1, NF-kB (stanične signalizacije, Beverly, MA), CDK6, c-myc (Abcam trgovanje ( Shanghai) Company, Šangaj, Kina), P-gp i Bcl-2 (Huan Biotechnology, Peking, Kina). Proteinske vrpce su detektirane pojačanom kemiluminescencijom (Amersham Pharmacia, Piscataway, NJ). Pregled

5. Protočnom citometrijom Test pregled

Stanice (2 x 10 ^{5 po udubljenju) je stavljeno u šest jažica i pomiješa s paklitakselom. Nakon 72 sata, stanice su fiksirane u 70% etanolu i obojene s propidij jodida (PI). Sadržaj DNA je analizirana s epova Profil II protočnom citometru (Beckman Coulter, Fullerton, CA) s Multicycle softvera (Phoenix sustava protoka, San Diego, CA). Svi eksperimenti su ponovljeni najmanje dva puta. PI je također koristi u sprezi s Annexin V (BD Biosciences, San Jose, CA), kako bi se utvrdilo da li stanice su održiva, apoptoze ili nekrotično. Pregled}

6. Mirna Transfekcija i otkrivanje pregled

Stanice su nasađene u kulturi ploče sa šest te i transfektirane s 50 nM pre-MIR-107 kupljen od Applied Biosystems (Carlsbad, CA) ili kontrolirati pre-Mirne prema uputama proizvođača. Kvantitativno realnom vremenu lančana reakcija polimeraze (PCR) pomoću TaqMan mikrornk reverzne transkripcije Kit i brzog stvarnom vremenu PCR System (Applied Biosystems, Carlsbad, CA) prema protokolu proizvođača. Mnogostrukost promjene razine Mir-107 mikrornk je izračunata a normaliziran na HSA-Mir-423 kontrola punjenja. Pregled

7. Životinje pregled

BALB /c miševa u dobi od 3-4 tjedana i težine 18-22 g su kupljene od SLAC laboratorijska životinja društva (SCXK-2007-004, Šangaj, Kina) i smješteno je pet po kavezu u specifičan bez patogena (SPF) okruženju. Životinje su ostavljene da se aklimatiziraju na stambenih objekata za 7 dana prije velikih eksperimenti. Postupci za rukovanje životinja su provedena u skladu s P. R. Kina propisa o uporabi i održavanju laboratorijskih životinja i odobren od strane pokusnoj životinji Etičkog povjerenstva Sveučilišta Zhejiang (Zhejiang, Kina). pregled

8. Ksenograft Ispitivanje i liječenje pregled

Ukratko, skupine od šest BALB /c miševima je injektirano subkutano 1 x 10 ^{6 MKN45 /Lin28, MKN45 /Vector ili MKN45 stanica u desnu slabinu. Volumen tumora je izračunata pomoću formule: V = 1/2 * A pregled * b pregled 2, gdje je A
i b
su najduži i najkraći promjer mase tumora (u milimetrima), respektivno. Kad su tumori dosegli približno 80 mm 3, miševi su tretirani s injekcijom ADM (50 mg /kg) i oksa (5um /kg) svaki tjedan tijekom 2 tjedna. Kvantitativne promjene u tjelesnoj težini i tumora volumena izmjerene su svaka tri dana po jednog pojedinca korištenjem ravnoteže i šestara. Nema anestetici su korišteni u eksperimentima mišu. Pregled}

9. Statistička analiza pregled

Svi eksperimenti su provedeni tri puta s triplikatne uzorke. Analiza varijance i t-test se koristi za usporedbu vrijednosti uzoraka za testiranje i kontrolnih. P-vrijednost manja od 0,05 smatrala se statistički značajnom. Statistica 6.1 software je korišten za sve statističke analize. Značaj je ocijenjena od strane studentskog t-testa. Pregled

Rezultati

1. In vitro ispitivanja promjena osjetljivosti kemoterapije u želučanih stanica raka koje stabilno eksprimiraju Lin28

izabrani su i kultivirane dva soja želučanih stanica raka s negativnim izrazom Lin28 (MKN45 i MKN28). Identificirali smo želučane stanice raka sa stabilnim Lin28 izražavanja od otpornih ubačenim klonovima (MKN45 /Lin28 /C2 i MKN28 /Lin28 /C3) pomoću Western blot-a Q-PCR (slika 1).

odabranu MKN45 /Lin28C2, MKN45 /Vector, MKN45, MKN28 /Lin28C3, MKN28 /Vector i MKN28 stanice su testirane na osjetljivost kemoterapija lijeka. Odabrali smo sljedeće četiri najčešće korištene kliničke lijekove za kemoterapiju u liječenju karcinoma želuca: Oksa, PTX, ADM i 5-FU. Tretman s Oxa, Ptx i ADM trajala 48 sati, dok se 5-Fu liječenje trajalo 72 sata. Nakon Lin28 transfekcije, MKN45 i MKN28 stanice imaju smanjenu osjetljivost na Oxa, PTX, ADM i 5-FU koji je bio najizraženiji za Oksa i PTX. IC50 vrijednosti bile su više nego dvostruko u odnosu na poredbenu skupinu (Slika 1). Pregled

Temeljem MTT pokusom, koristili smo citometrije kako bi se otkrile razlike u apoptozu između Lin28 pozitivnih i negativnih stanica Lin28- nakon kemoterapije PTX izloženosti. MKN45 /Lin28, MKN45 /Vektor i MKN45 stanične grupe dobile 0 uM i 0,1 uM PTX liječenje tijekom 24 sata, te dvaput bojenje je provedena za otkrivanje staničnoj apoptozi. Apoptotični postotak transficiranih Lin28 stanica je bila manja od one ne transficiranih stanica (p < 0.05). Osim toga, western blotovi proteina sakupljeni iz stanica koje su tretirane s 0,1 uM PTX pokazala da je apoptoza smanjen MKN45 /Lin28 stanice kao što je prikazano preko smanjenja u aktivacijom caspase 9 i kaspaze 3 (slika 2). Pregled

Transient transfekcija siRNA-Lin28 treba inhibirati nivo ekspresija u Lin28 MKN45 /Lin28 i MKN28 /Lin28 stanica 48 sati nakon prijenosa prema eksperimentalnim smjernicama proizvođača reagensa. Lin28 ekspresija proteina je otkriven i povezana osjetljivost lijek ispitan. Izraz Lin28 RNA u želučanim stanicama raka otkriven je q-PCR, a ekspresija proteina je otkriven western blot analizom (Slika 3). pregled

P-PCR je pokazao da je ekspresija Lin28 mRNA u MKN45 /Lin28 /SI-Lin28 ( 48 h) i MKN45 /Lin28 /si-Lin28 (72 h) stanica bio je znatno niži nego u MKN45 stanica /Lin28 /si-kontrole (p < 0.01). Ovaj transfekcija efekt također je potvrđena u MKN28 /Lin28 stanica. Western blot je otkrio da Lin28 si RNA značajno inhibira Lin28 ekspresiju proteina u MKN45 /Lin28 i MKN28 /Lin28 stanica. Pregled

MTT test je izveden na vrstama četiri stanične (MKN45 /Lin28 /si kontrole, MKN45 /Lin28 /si-Lin28, MKN28 /Lin28 /si kontrole i MKN28 /Lin28 /si-Lin28 stanica) koje su bile transficirane s Lin28 siRNA 48 sati procijeniti osjetljivost kemoterapijom. Odlučili smo koristiti lijekove za kemoterapiju koja je imala najizraženiji efekti u prethodno testiranje: Oksa, PTX i ADM. Odabrali smo gradijent koncentracije od 5-6, prema preliminarnim rezultatima preliminarnih pokusa. Smetnje koje siRNA smanjuje ekspresiju Lin28 i Lin28-pozitivne stanične linije imale povećanu osjetljivost na lijekove za kemoterapiju (Slika 3). Pregled

Sljedeći otkrivena osjetljivost stanica na različite kemoterapije droga nakon down-regulation of Lin28 , Stanice su podijeljeni u 4 skupine, MKN45 /Lin28 /si-kontrole, MKN45 /Lin28 /si-Lin28, MKN28 /Lin28 /si-kontrole i MKN28 /Lin28 /si-Lin28, a testirane su na lijekove za kemoterapiju Oksa i PTX redom , Kemoterapiji koncentracije lijeka (oksa- 3.2 ug /mL i PTX 1 uM) odabrani su u skladu s rezultatima prethodnim eksperimentima. Broj apoptoze MKN45 /Lin28 i MKN28 /Lin28 stanica bio je manji nego što je MKN45 /Lin28 /SI-Lin28 i MKN28 /Lin28 /si-Lin28 stanica (p < 0,05). Ovaj rezultat pokazuje da dolje regulacija Lin28 izražavanja može povećati staničnu apoptozu (Slika 3). Pregled

2. Molekularni mehanizmi kojima Lin28 promjene u osjetljivosti kemoterapije pregled

otkrili lijek otpora vezanih uz razinu ekspresije gena s Q-PCR u MKN45 /Lin28 i MKN45 /vektor cells.P-gp, i c-myc razini RNA značajno povećan i Ciklin D1 razini RNA su smanjene, dok su druge Bcl-2, CDK6, NF-kB, TOP II nije pokazao značajnu razliku između MKN45 /Lin28 i MKN45 /vektor cells.Also ovih lijekova otpora vezanih gena izrazi su pod istragom western blot u MKN45 /Lin28 i MKN45 /Vector stanica, koji su pokazali konzistentan trend da P-gp i C-myc proteina izraz povećana, dok Ciklin D1 smanjuje. Međutim, Bcl-2 ekspresija smanjen, NF-kB ekspresija nije se mijenjala, a ekspresija ciklina D1 i protein kinaze CDK6 je smanjen (Sl 4). Pregled

Nakon Lin28 ekspresija je inhibiran transfekcijom s Lin28 siRNA, razine RNA za P-gp, c-myc i ciklin D1 se procjenjuju. Nakon smanjenja razine RNA Lin28, P-gp i C-myc su značajno pale regulirano, dok Ciklin D1 razine značajno povećala. Otkrivanje P-gp, c-myc, i ciklin D1 ekspresiju western blotting otkriva da nakon inhibicije Lin28 ekspresije, P-gp i c-myc izražavanja proteina bila je značajno podregulirani, a ekspresija ciklina D1 značajno doreguliran ( Slika 4.). pregled

3. Mir-107 je ciljni mikrornk od Lin28 pregled

Dok ispitivanja Lin28 RNA i razine miR-107 u želučanim staničnim linijama raka, otkrili smo međusobnu inhibiciju Lin28 i Mir-107 u staničnim linijama MKN45 i AGS. Osim toga, Mir-107 je dolje regulirana u MKN45 /Lin28 i MKN28 /Lin28 stanica. Obaranje ekspresije Lin28 preokrenuo tu inhibiciju. U follow-up eksperiment, Lin28-pozitivnih stanica, MKN45 /Lin28 i MKN28 /Lin28, transficirane su pre-mir-107 i bili su u daljnjem tekstu; MKN45 /Lin28 /pre-MIR-107 i MKN28 /Lin28 /pre- mir-107 stanice. Stanice s pre-Mir-kontrolne stanice su pozvani MKN45 /Lin28 /pre-Mir-Control i MKN28 /Lin28 /pre-Mir-Control. Anti-Mir-107 ili kontrolu transfekcije u Lin28-negativnih stanica, MKN45 /Vector, dala MKN45 /Vector /anti-Mir-107 i MKN45 /Vector /anti-Mir-kontrolnim stanicama, respektivno. Četrdeset osam sati nakon transfekcije, RNA je sakupljena i podvrgnut q-PCR kako bi se otkrile razlike u miR-107 ekspresiju u MKN45 /Lin28, MKN28 /Lin28, MKN45 /Vector, i MKN28 /Vector stanica. Učinak obaranje Lin28 ekspresiju Lin28 siRNA također je ocijenjena. Nakon transfekcije s Lin28, Mir-107 je izraz bio značajno pale regulirano, dok je nakon obaranje Lin28 izražavanja, izražavanje Mir-107 porastao. Četrdeset osam sati nakon transfekcije pre-Mir-107, Lin28 RNA bile su značajno smanjile, i 96 sati nakon transfekcije, ekspresija Lin28 protein je dalje bio niži od onog iz kontrolne skupine ne-transfektirana. Ovo otkriće pokazuje da Mir-107 može regulirati izražavanje Lin28 (Slika 5). Pregled

4. Mir-107 sudjeluje u Lin28 rezistencije kemo-lijekova pregled

kemoterapija Osjetljivost 4 staničnih skupina, MKN45 /Lin28 /pre-Mir-kontrole, MKN45 /Lin28 /pre-Mir-107, MKN28 /Lin28 /pre-Mir-kontrola i MKN28 /Lin28 /pre-Mir-107, ispitan je pomoću metode MTT 48 sata nakon transfekcije s pre-MIR-107. Mi smo izabrali lijekove za kemoterapiju koja je imala najizraženiji učinak tijekom pred-testiranje, Oksa, PTX i ADM, i odabrao koncentracijski gradijent 5-6 prema preliminarnim rezultatima iz prethodnih eksperimenata. Rezultati su pokazali da je uvođenje pre-Mir-107 u Lin28-pozitivne stanice može povećati osjetljivost stanica na kemoterapiju. Apoptoza testiranje pokazalo da je broj MKN45 /Lin28 apoptotičnih stanica porasla nakon transfekcije s pre-MIR-107 (p < 0,05). MTT ispitivanje MKN45 /Lin28 /anti-Mir-kontrole i MKN45 /Lin28 /anti-Mir-107 kemoterapija osjetljivost pokazali da inhibiciju ekspresije Mir-107 u MKN45 smanjuje osjetljivost na PTX (Slika 5). Pregled

Western hibridizacija i q-PCR, otkrili smo otpornih vezanih gena i proteina razine lijeka u MKN45 /Lin28 stanica koje su transfekcirati s pre-Mir-107, uključujući i one c-myc, P-gp, i ciklin D1. Rezultati su pokazali da je 48 sati nakon transfekcije s MIR-107, RNA i proteina ekspresije c-myc i P-gp smanjila (p < 0,01), dok je ekspresija ciklina D1 (P 0,05) (slika 5). pregled

5. Lin28 povezana kemo-lijekova otpor in vivo pregled

Nakon 2 ciklusa kemoterapije, otkrili smo da su stranog tijela tumori MKN45 /Lin28 stanica nije smanjio volumen i postao veći nego kod drugih skupina (MKN45 /Vector i MKN45 ). U oba MKN45 /Lin28 i MKN45 /Vector grupa, jedan od miševa je umro, tako da kemoterapija je zaustavljen. A tumori su bili odstranjeni i analizirane njihove količine. Otkrili smo da su MKN45 /Lin28 stranog tijela tumori bili veći od ostalih tumora nakon ADM i Oksa kemoterapije (p < 0,01). (Slika 6) pregled

Rasprava pregled

U ovoj studiji istraživali smo udruga Lin28 izražavanja s kemoterapije osjetljivosti na želučanih stanica raka. otkrili smo da transfekcija Lin28 smanjuje osjetljivost želučanog staničnih linija raka i MKN45 MKN28 do četiri vrste kemoterapijskih reagensa (oksa, Ptx, ADM i 5-FU). Korištenje siRNA tehnologiju smetnji za obaranje Lin28 izraz mogao preokrenuti kemo-otpor. Također smo pokazali da Mir-107 može se regulirati Lin28 izraz, a također je služio kao jedan od mogućih ciljnih mikroRNA kako je uređeno Lin28. Prekomjerna ekspresija Lin28 do održavanoj c-myc i P-gp, dok se održavanoj ciklin D1, ovaj fenomene mogao preokrenuti tako Lin28 siRNA ili transfekcionog pre-MIR-107. To bi moglo biti presudno mehanizme kojima Lin28 smanjena kemijske osjetljivosti u želučanim stanicama raka. Prema našim saznanjima, ovo je prva studija koja pokazuje Lin28 /Mir-107 signalni put mogao biti uključen u pokret otpora kemo-lijekova kod raka želuca. Pregled

Kemoterapija je jedan od glavnih za liječenje pacijenata oboljelih od raka želuca, ali je još od 50% pacijenata će napredovati do otpora kemoterapije. Mogući mehanizmi otpora kemoterapije kod raka želuca trenutno se smatra da su transmembranskog transport transportera ABC, glutation S-transferaze, aktivnost DNA topoizomeraze, gen p53 rak mutaciju te povezanih s apoptozom putova. Nedavno istraživanje pokazalo je da mikrornk igra važnu ulogu u rak želuca kemoterapije otpornosti na lijekove [15]. U modelu otpornosti tumorskih stanica, uočeno je da je rak matične stanice imaju važnu ulogu u otpornosti na kemoterapiju. Gen C-myc je jedan od površinskih markera raka matičnih stanica, ali i onkogena povezana s neograničenom proliferacije, beskonačnog besmrtnosti, te promicanju stanične diobe [16]. Jedna studija je izvijestio da je 40% bolesnika s karcinomom želuca imaju gensku ekspresiju c-myc i da više C-myc izraz je povezana s lošijim prognozama [16-18]. Studije su također izvijestili korelaciju između gena i apoptoze c-myc. C-myc izražavanja može dovesti do smanjenja tumora staničnoj apoptozi. Apoptotski učestalost ćelija i osjetljivost na inducirane faktora ovise o razini proteina c-myc [19]. Osim toga, c-myc pretjerana ekspresija je povezana sa zračenjem i kemoterapija otpora. Nadalje, C-myc može regulira prema gore P-gp, što može izazvati effluxing od kemoterapijskih reagensa dovelo do otpora kemoterapije [20]. Staničnog ciklusa može utjecati na odgovor stanica raka prema nekim kemoterapijskih lijekova (kao što su PTX), koji ima ulogu u fazi G2 /S faza smanjuje osjetljivost na lijek. Stanični ciklus protein ciklin D ima tri podvrste, D1, D2, D3 i te je stanični ciklus faktor pokretanje. Njegova supresija transformirajući faktor rasta -β1 (TGF-β1) sprječava stanice od ulaska u stanični ciklus, tako da oni ostaju u stanju mirovanja [21]. Ciklin D posebno u kombinaciji s CDK4 /6 izvršile fosforilaciju i inaktivira retinoblastomskog proteina (PRB), čime se pridonosi G1 /S tranziciju i početka sinteze DNA [21]. U trenutnoj studiji, pronašli smo Lin28 nisu bili relevantni sa Bcl-2, NF-kB i TOPO II želučanih stanica raka. Partnerstvo između Lin28 i mikroRNA je dobro uspostavljena, kao što je neka-7, Mir-200c, Mir-143 [4,22]. Lin28 prekomjerna ekspresija regulira prema dolje mikrornk, dok mikrornk također može negativno utjecati na ekspresiju Lin28. Lin28 zajedno s TUT4 predstavlja negativni regulator, koji utječe sazrijevanje i homeostazu mikroRNA [4,22]. Reguliranjem nizvodno gene, mikrornk je uključen u staničnu diferencijaciju i proliferaciju, metabolizam stanica, odgovora na stres i formiranje krvnih žila. Cheng et al [23] otkrili da nakon inhibirajući Mir-107, promaknut je rast HeLa stanica raka vrata maternice i stanice raka A549 pluća. Marijn et al [24] nađeno da ekspresija Mir-107 stanica karcinoma jajnika otporne na lijekove je podregulirao. Naše istraživanje pokazalo je da Lin28 može obuzdati sazrijevanje Mir-107, te uvođenje Mir-107 povećati želučane stanica raka kemo-osjetljivost na Oxa, PTX i ADM. Nakon transfekcije anti-MIR-107, ta osjetljivost smanjena. Pre-miR-107 uzrokovalo smanjenje ekspresije Lin28, ilustrira da Lin28 /mir-107 puteve mogu biti uključeni u kemosenzitivnost promjene želuca. Pregled

Ukratko, pokazali smo kako Lin28 može inhibirati izraz MIR-107, čime se regulira c-myc, P-gp i podreguliranje Ciklin D1, kasnije rezultirati kemoterapije otpora želučanih stanica raka. Lin28 /Mir-107 put može se poslužiti i kao jedan od brojnih signalnih putova koji je povezan s rakom želuca kemoterapije otpora. Naša studija može pružiti nove uvide u želučanog raka kemijska otpornost mehanizam. Lin28 /Mir-107 može biti novi potencijalni terapeutski ciljevi za kemoterapije otporan na rak želuca. Pregled

popratne podatke
S1 tablicu. Minimalni podaci za svih ovih brojki pregled doi:. 10,1371 /journal.pone.0143716.s001 pregled (XLSX) pregled

• PLoS ONE: endoskopske resekcije usporedbi s gastrektomije se liječilo rane raka želuca: sustavni pregled i meta-Analysis
• PLoS ONE: Značaj serumskih Pepsinogens kao biomarker za rak želuca i atrofičnog gastritisa projekcije: sustavni pregled i meta-Analysis