PLoS ONE: intratumorsko IL-17-pozitivnih mastocita su glavni izvor IL-17 koji je prediktivno opstanka u rak želuca bolesnika

Sažetak pregled

interleukin-17 (IL-17) je rasprostranjen u tumorskom tkivu i smanjuje učinkovite anti-tumorskih imuni odgovor. Međutim, izvor povećanog tumorski infiltrirajući IL-17, njegov doprinos napredovanja tumora ljudskog raka želuca slabo dalje razumjeti. U ovom istraživanju, upisuje se 112 pacijenata oboljelih od raka želuca, imunofluorescencija je korišten za procjenu ko-lokaliziranje na CD3, CD4, CD56, CD20, CD68, i triptaza masnih stanica (MCT) sa IL-17. Imunohistokem se koristi za procjenu raspodjele gustoće krvnih žila (CD34), CD66b ^{+, CD68 +, i stanice FoxP3 + u različitim microanatomical područja. Prognostičku vrijednost određena je Kaplan-Meier analiza i Cox regresijska modela. Rezultati su pokazali da su masne stanice, ali ne i T stanice ili makrofage, su vrste dominantni stanica koje stvaraju IL-17 u raka želuca. Značajne pozitivne korelacije su razlike između gustoće mastocita-izvedenim IL-17 i kapilarama, neutrofili i regulacijskih T-stanica (Tregs). Nadalje, utvrdili smo da je većina vaskularne endotelne stanice izražavaju receptor interleukina-17 (IL-17R). Kaplan-Meier analiza je pokazala da povećanje intratumorsko infiltrirali mastociti i IL-17 + stanica, kao i MCT + IL-17 + stanica, značajno su povezani s lošijim ukupnog preživljavanja. Ovi rezultati pokazuju da mastociti glavni izvor IL-17 u karcinomu želuca i intratumorsko IL-17 infiltracija može promoviraju tumorski poboljšavajući angiogeneze u mikro tumora kroz os IL-17 /IL-17R. IL-17-pozitivnih mastociti pokazala je prognostički čimbenik kod raka želuca, što pokazuje da ciljanje imunoterapija masne stanice može biti učinkovita strategija za kontrolu intratumorsko IL-17 infiltracije, a time i preokrenuti imunosupresije u mikro tumora, olakšavanje imunoterapija za rak. Pregled}

Izvor: Liu X, Jin H, Zhang G, Lin X, Chen C, Sun J, et al. (2014) intratumorsko IL-17-pozitivnih mastocita su glavni izvor IL-17 koji je prediktivno opstanka u rak želuca bolesnika. PLoS ONE 9 (9): e106834. doi: 10,1371 /journal.pone.0106834 pregled

Urednik: Xin-yuan Guan, Sveučilište u Hong Kongu, Kina pregled

Primljeno: 12. svibnja 2014; Prihvaćeno: 1. kolovoz 2014; Objavljeno: 8. rujna 2014 pregled

Copyright: © 2014 Liu i sur. Ovo je otvorenog pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan pregled

Data Dostupnost:. The autori potvrđuju da su svi podaci na kojima se temelji nalaze u potpunosti na raspolaganju bez ograničenja. Svi relevantni podaci u radu i njegove popratne podatke datoteka pregled

Financiranje:. XSL je podržan od strane potpore Nacionalne zaklade za znanost u Kini (81273254 /H1006), http://www.nsfc.gov. cn /. U financijeri nisu imali ulogu u studiju dizajna, prikupljanja i analize podataka, Odluka o objavi, ili pripremu rukopisa pregled

U konkurenciji interese.. Autori su izjavili da ne postoje suprotstavljeni interesi pregled

Uvod pregled

Tijekom posljednjih nekoliko desetljeća, sve veća pozornost posvećuje mehanizmu (e) bijega imunosti u mikro tumora, a naročito odnos između upale i imunosupresije. Jedan od najvažnijih komponenata imunog sustava u upale povezane s rakom je odnedavno prepoznat kao interleukin-17 (IL-17). IL-17 ima plejotropskih funkcije i više ciljeva koji su u velikoj mjeri istraženi u mišjim modelima, no sve više povezana s ljudskim bolestima [1] - [5]. IL-17 je u različitim oblicima tumora, uključujući rak dojke [6], rak želuca [7], [8], raka debelog crijeva [9], kancerogenim tvarima inducirani karcinoma kože [10], intrahepatičnog kolangiokarcinom [11] i hepatocelularni karcinom [12]. IL-17 koje proizvode stanice postupno povećanje u broju u mikro tumora tijekom razvoja tumora i korelira sa slabom preživljavanje u bolesnika s karcinomom povezanih. Pregled

To je odavno smatra da je glavni stanični izvor IL-17 je CD4 ^{+ T limfociti (Th17 stanice). Nedavno, mnoge studije ciljanje IL-17 pokazala su da IL-17 proizvodnja nije ograničen na Th17 limfocita, ali je također nađen u različitim adaptivnih i urođenih imunih stanica, uključujući γδT stanice, NKT-stanice, NK stanice, mastociti, i granulociti [3], [13]. pregled}

rak želuca je jedna od najčešćih vrsta raka, a vodeći uzrok raka povezanih smrti u svijetu [14]. Više od 1 milijuna novih bolesnika s karcinomom želuca svake se godine dijagnosticira širom svijeta, od kojih je 42,5% u Kini. Tradicionalne terapeutske strategije, uključujući operacije, kemoterapije i radioterapije su glavni tretmani za rak želuca. Nedavno, imunoterapija od malignih bolesti je doveo u fokus [15] - [17]. Međutim, s tumorom povezan imunosupresija je veliki izazov za imunoterapiju, jer slabi citotoksično djelovanje učinkovitih T stanica i prirodnih stanica ubojica. Tijekom razvoja tumora, imunosupresija često je povezana s prekomjernom i nekontroliranim upale u tumorskom mikrookolišu [18]. Dobro je poznato da je više upalne stanice infiltriraju tumora, uključujući mastocite, makrofage podtipova, neutrofila, kao i T i B limfociti, znak za rak upalu povezanu s [19]. Pregled

U ovom istraživanju ispitali smo stanične izvora IL-17, distribucija, funkcionalnog značaja i prediktivne vrijednosti IL-17 koje proizvode stanice u 112 bolesnika s karcinomom želuca. Dajemo novi uvid u potencijalni mehanizam (a) IL-17 u mikro tumora u bolesnika s karcinomom želuca procjenom odnosa između IL-17 koje proizvode stanice i posrednika kod upala. Naš cilj je pružiti dodatne informacije koje mogu biti korisne za izradu učinkovitijih imunoterapije raka koje su usmjerene na IL-17. Pregled

materijali i postupci

Etika izjava pregled

Prije istraživanja , informirani pristanak dobiven je od svakog pacijenta. Odgovarajuća dopuštena nam je od strane Etičkog povjerenstva o povezanim bolnice prvi, Medical College, Zhejiang University. Pregled

Pacijent uzorci

U ukupno 112 pacijenata između veljače 2009. i ožujka 2010. godine u našoj bolnici su upisani , Pacijenti koji su se okupili izabrani su sljedeći kriteriji: a) dijagnosticirana kao rak želuca na temelju patologije; b) dobila učinkovitu resekcija. Kriteriji za isključenje bili pacijenti koji su imali dokaze o udaljenim metastazama, dokaz o istovremenim autoimune bolesti, HIV ili sifilis i bolesnika koji su primali antitumorski terapiju prije operacije. Kriteriji učinkovite resekcija su definirani kao resekcija bez ostatnog tumora (R0) ili mikroskopskog ostatnog tumora (R1) u skladu sa 7 ^{og izdanju American Joint Odbora protiv raka. Nakon kurativne resekcije, bolesnici su primali adjuvantne kemoterapije na temelju 5-fluorouracil i platine prema patološkom TNM klasifikaciji. Bolesnici su praćeni sa 3-6 mjesec intervalima, uključujući analize njihove periferne krvi za tumor markera i ultrazvuk, a poboljšana CT svakih 6 mjeseci, endoskop svakih 12 mjeseci. Klinička obilježja bolesnika prikazani su u tablici 1. pregled}

Imunohistokem i Imunofluorescencija pregled

Redovito hematoksilinom i eozinom bojenje je izvedena kako bi potvrdili patološku dijagnozu, intratumorsko područje je definirano kao manje od 2 cm na granici marginu tumora želuca, a normalno je regija definirana kao najmanje 5 cm graniče granicu tumora želuca. pregled

Imunohistokem pregled

Imunohistokem je izvedena kao što je opisano u prethodnom istraživanju [20]. Primarni antitijela su kozjim anti-IL-17 (R &D Systems, UK), miš anti-CD66b (BD Pharmingen, SAD), miš anti-CD68 (Abcam, SAD), miš anti-FoxP3 (Abcam, SAD), te miš anti-CD34 (Beijing Zhongshan Golden Bridge Biotech, Kina). Za negativnu kontrolu, primarna antitijela je zamijenjen slanom otopinom puferiranom fosfatom (PBS). Pregled

Imunofluorescencija pregled

za imunofluorescencije, upotrebljene su slične metodama, osim što je Aktivnost endogene peroksidaze je blokirana i ne primarni korišteno antitijelo je bio koktel antitijelo. Kozji anti-IL-17 i kozji anti-IL-17R (oba od R &D Systems, USA) su korišteni za otkrivene IL-17 ^{+ stanica i IL-17R izražavanja. Ploča antitijela koja reagiraju s CD3, CD20, CD34, CD56, c-kit (mišjim monoklonskim, svi iz Pekinga Zhongshan Golden Bridge Biotech, Kina), CD4 (mišjim monoklonskim, Leica, njemački), CD66 (mišje monoklonsko, BD Pharmingen, Korištene su USA), CD68, FoxP3 i triptaza masnih stanica (MCT) (mišje monoklonsko, svi iz Abcam, USA). Nakon inkubacije preko noći na 4 ° C, sekcije su podvrgnuti inkubacije smjesom sekundarnih antitijela: Alexa Fluor 488/568-konjugirani magareći anti-mišji ili Cy3 /Alexa Fluor 488-konjugirani magareći anti-kozji ili Alexa Fluor 488 magareći anti-zečji ( sve od Invitrogen, USA) na 37 ° C tijekom 1 h. Slajdovi su napunjeni s Vectashield sadrži DAPI (Vector Laboratories, USA) i vizualizirati pomoću fluorescentne imaging mikroskopa (Olympus BX51, Japan) u kombinaciji s CCD kamerom (Nikon DS-Ri1). Slike su analizirani pomoću 3.2 softver NIS-elemenata BR. Pregled}

Negativne kontrole, u kojoj je PBS koristiti umjesto primarne antitijela, uključene su za svaki marker. Pregled

kvantificiranja imunološkeg parametre

Podaci su dobiveni ručnim računajući pozitivno obojenih stanica u 10 reprezentativnih područja normalnih i intratumoralno područjima pod 400 × visoke snage uvećanja. Naime, vaskularne endotelne stanice ili klasteri smeđe obojane stanice su identificirani kao kapilarama samo ako su imali jasne granice sa susjednim strukturama [21]. Gustoće su određene računanje srednje broja pozitivno obojenih stanica po velike snage mikroskopskom polju (HPF). Dvostruko bojanjem odredi se brojanjem ručnog pozitivnih stanica u 10 velike snage polja; izračunate su omjeri IL-17 ekspresiju stanica po marker površine. Sve analize provedene su dvije neovisne, zaslijepljeni promatrača (GE Z i XK L), a prosječna grofova dva promatrača su korišteni u analizi koja slijedi. Pregled

Statistička analiza pregled

Vrijednosti medijana CD34 ^{+, CD66b +, CD68 +, FoxP3 + i triptaza masnih stanica (MCT +) i IL-17 + stanice su korištene kao izreza off definirati podskupina u našim rezultatima. Student t-testovi su korišteni za usporedbu infiltracije različitih staničnih imunoloških podskupova u tumorskom tkivu i odgovarajućeg normalnog tkiva. Hi-kvadrat test korišten je za procjenu odnosa između IL-17 koje proizvode stanice i klinikopatološkim značajke. Korelacija između gustoće krvnih žila (CD34), neutrofili (CD66b), makrofagi (CD68), regulatorne T stanice (FoxP3), i stanice IL-17 za proizvodnju određene su pomoću Pearsonov ili Spearmanov koeficijent korelacije. Sveukupno preživljenje definirano je kao interval između datuma operacije i datum smrti ili zadnji praćenja, ovisno o tome što se dogodilo ranije. Survival procjene funkcije izračunate su pomoću Kaplan-Meier metodi. COX proporcionalnih rizika model je korišten za procjenu učinka IL-17 koje proizvode stanice na ukupno preživljenje. Dvostrani vrijednost p < 0,05 ukazuju na statističku značajnost. Sve statističke analize provedene su pomoću GraphPad Prism (ver 5.00 za Windows,. GraphPad Software, San Diego, CA, USA) i SPSS. (Ver 16,0,. SPSS Inc., Chicago, IL, USA) softversko pregled}

Rezultati pregled

stanovništvo Studija pregled

pacijenata karakteristike prikazane su u tablici 1. u ukupno 78 mužjaka i 34 ženki su bili upisani. Starost ispitivane populacije u rasponu od 33 do 89 (medijan 60) godina. Bolesnika s karcinomom želuca 112, H. pylori stanje infekcije bio je pozitivan za 65 bolesnika, a 47 negativno. 110 bolesnika primila R0 resekcija i 2 pacijenti dobili R1 resekcija. Patološki TNM klasifikacije su na temelju 7 ^{og izdanju American Joint Odbora protiv raka: 33 bolesnika nije imao limfnog čvora metastaza, dok je 21 bilo N1, 22 su N2, a 36 su N3. 1 pacijent je pripadao Tis, 23 pacijenata je pripadao fazi sam, i 25, 63 bolesnika u fazi II, III, respektivno. 3 (2,7%) bolesnika je izgubio za praćenje i 39 (34,8%) bolesnika je umrlo tijekom perioda praćenja. Medijan praćenja vrijeme bilo 51 mjeseci, u rasponu od 39 do 57 mjeseci te stope preživljenja (OS) bili su 83,0% na 1 godinu, 71,4% na 3 godine, a 65,7% na 4 godine, odnosno. Pregled}

IL-17 je pretežno eksprimiraju MCT ^{+ mastociti}

slučajni uzorci 20 pacijenata iz cijele skupine su korišteni za procjenu distribuciju i fenotip IL-17 koje proizvode stanice u intratumorsko regiji i odgovarajući normalna tkiva (slika 1). našli smo citoplazmatski IL-17 u stanicama bojanje s jajolikog fenotip, kao što je prethodno [13] opisano, a u stanicama više nepravilnog oblika. Nadalje, utvrdili smo da su IL-17-izražavanje stanice su češći u intratumorsko tkiva od normalnog tkiva. Kako prepoznati da IL-17 ^{+ stanica u intratumorske tkiva, proveli smo eksperimente ko-lokaliziranje i izračunava udio IL-17 + stanica u svakoj podskupini. Kao prvo, proveli smo ko-lokaliziranje c-kit, dodatni marker mastocita, s triptaza masnih stanica (MCT), rezultati su pokazali da su svi MCT + stanica koje eksprimiraju c-kit (Sl. S1), što znači da MCT mogao biti koristi za identificirane mastocita reprezentativno. U stanicama jajolikog fenotipa, odabrali smo broj T-stanica, B-stanica i NK stanica, oznaka: Posebno CD3, CD4, CD20, i CD56, i ocijeniti njihovu ko-lokaliziranje s IL-17. Međutim, CD20 + IL-17 + i CD56 + IL-17 + stanice su identificirani, iako rijetko (< 1%; slika 2, gornji desni prikaz). Iako povremene CD3 + IL-17 + i CD4 + IL-17 + stanica zabilježene su, srednje postotke IL-17 + stanica u obje podskupine bile su 12,4% ( 2,2 - 34,1%) i 8,4% (0-26,7%, Slika 2, gornji lijevi paneli, tablica 2) Zatim smo istražili fenotip IL-17 + stanice nepravilnog oblika; makrofagi predloženi su kao potencijalni izvor IL-17 [22]. U skladu s tim, do 18,5% od IL-17-stanica koje proizvode u želučanog tkiva raka su makrofagi (Sl.2, donji lijevi panel; Tablica 2). Međutim, većina IL-17 koje proizvode stanice ostaju neidentificirani. Da bi se utvrdilo da li mastociti su dodatni izvor IL-17 u karcinomu želuca, proveli smo ko-lokaliziranje IL-17 i triptaza masnih stanica (MV). Otkrili smo da je većina IL-17 + stanica colocalized s MCT stanica +. (40-60% od IL-17 + stanica, Sl.2, donji desni panel; tablica 2)}

Distribucija MCT ^{+ IL-17 + stanica i korelacija s kliničkopatološkim značajke pregled}

kako bi potvrdili da mast-stanica izvedena IL-17 je bio glavni stanični izvor IL 17 u želučanoj mikrookoliša raka, proveli smo imunofluorescencija dvostruko bojenje intratumorsko i normalnih uzoraka tkiva iz 112 pacijenata. Većina IL-17 ^{+ stanice dvaput obojani snažno sa MCT (14-68,1% IL-17 stanica koje eksprimiraju) u intratumorsko tkivima (Sl. 3A). Otkrili smo da su se našle gustoća MCT + mastocita i IL-17 stanica + u intratumorsko tkivima biti znatno veći nego u normalnim tkivima (MCT + _{T vs MCT + N, 10,02 ± 4,06 vs 8,66 ± 3,29, p = 0,0023; IL-17 + T vs IL-17 + N, 8,16 ± 3,89 vs. 7,18 ± 3,48, p = 0,0165; Sl. 3B). Nadalje, gustoća MCT + IL-17 + stanica u intratumorsko tkiva bila je značajno viša nego u normalnim tkivima (4,55 ± 2,48 vs 3,93 ± 2,24, p = 0.0154; Sl. 3B).}}

Kako bi utvrdili značajne povezanost između kliničkopatološkim mogućnosti i MCT ^{+ IL-17 + stanica, hi-kvadrat testa ili Fisherov egzaktni test koji se koriste (prikazano u tablici 1). Međutim, MCT + IL-17 + stanice u intratumorsko tkiva nije bio u korelaciji s bilo kliničkih karakteristika ocjenjuje, uključujući i H. pylori infekcije status, veličina tumora, stupanj diferencijacije i razvrstavanje TNM. Pregled}

Povećana intratumorsko MCT ^{+ stanica, IL-17 + stanica i MCT + IL-17 + su gustoća stanica povezana s lošim ukupnog preživljavanja pregled}

Na univarijantne analize (Tablica 3), konvencionalna kliničkopatološkim ima prediktivan za siromašne ukupno preživljavanje (OS) su slabo diferenciranih tumora i napredne TNM stadij. Za daljnju analizu, brojevi MCT ^{+ stanica, IL-17 + stanica, te MCT + IL-17 + stanice su podijeljene u dvije skupine: iznad i ispod srednje vrijednosti. Kaplan-Meier krivulje preživljavanja pripremljeni su korištenjem log-rank testa kako bi dodatno istražiti povezanost s OS-om. Bolesnici s visokim brojem intratumorsko infiltriranih MCT stanice + i IL-17 stanice + imali su lošiju OS od onih s nižim brojem MCT + stanica (p = 0,004) i IL-17 + stanice (p = 0,014, sl. 4 B). Osim toga, bolesnici s višim brojem MCT + IL-17 + stanice imaju kraće trajanje preživljavanja od onih s nižim brojem MCT + IL-17 + stanica (p = 0,018, sl. . 4C) pregled}

varijable p < 0,1 u univarijatne analize bile su uključene u multivarijatne analize Cox proporcionalnih rizika, otkrili smo da su obje intratumorsko stanice MCT-pozitivne (HR = 2,057; 95% CI: 1.048-4.037; p = 0,036) i TNM stadij (HR = 3,832; 95% CI: 1,679-8,745, p = 0,001) bili su neovisni prognostički čimbenici (Tablica 3). Ukazuje na to da pacijenti s većim brojem intratumorsko MCT-pozitivne stanice su bile gotovo 2,1 puta veću vjerojatnost da će umrijeti od onih s nižim brojem tih stanica. Pregled

Imunohistokemijska karakteristike i povezanost između MCT ^{+ IL-17 + stanična gustoća i Imunokemijske varijable}

IL-17 je poznati pro-upalni faktor, koji mogu poticati tumorski rast kroz poticanje angiogeneze i regrutiranje neutrofila, te regrutiranje upalnih i imunoloških tipova stanica. Kako bi istražili mogući mehanizam (e) IL-17 nakupljanje u tumorskom mikro okolinu s lošom prognozom. Izvršili smo imunohistokemije raznih upalnih medijatora, posebno, mikrožilne gustoće, neutrofili, makrofage i regulacijskih T-stanica u cijelom ispitivane populacije ( n pregled = 112). Reprezentativni polja CD34 ^{+ kapilarama, CD66b + neutrofili, CD68 + makrofaga i FoxP3 + regulacijskih T-limfocita u intratumorsko i normalnog tkiva su prikazani na slici. 5A. Gustoćai intratumorsko CD34 + kapilarama (p = 0,0030), CD66b + neutrofili (p < 0.0001), CD68 + makrofagi (p 0,0001) i FoxP3 + regulatorne T limfociti (p <0,0001) bili su znatno veći od onih u normalnim tkivima (slika 5B) pregled}

Zatim, mi smo analizirali korelaciju između intratumorsko MVD, gustoće neutrofila, makrofaga gustoće, regulatorne gustoće T stanica i gustoće IL.. 17 ^{+ stanica, posebno MCT + IL-17 + stanica. Rezultati su pokazali značajnu korelaciju između MVD i IL-17 + stanice (r = 0,4040, p = 0,0001), dok je značajan, ali slabo, korelacije utvrđene između IL-17 + stanica i neutrofili (r = 0,2135, p = 0,0238) i Tregs (r = 0,2963, p = 0.0017) (podaci nisu prikazani). Međutim, mi i dalje analizirali povezanost između MCT + IL-17 + stanica i tih medijatora upale. Jači Nađena je korelacija između MCT + IL-17 + stanica i MVD (r = 0,4396, p 0,0001). Međutim, korelacija između MCT + IL-17 + stanice i neutrofile (r = 0,2578, p = 0,0061) i Tregs (r = 0,2898, p = 0,0021) bila je slična onoj IL-17 + stanice (što je prikazano na Slika 6). pregled}

ko-lokaliziranje između IL-17R i raznih upalnih i imunoloških stanica pregled

da bi istražili mehanizam (e) ispod usko odnosa između IL 17 proizvode stanice i MVD, kao i drugih upalnih i imunih stanica. Izvršili smo eksperimente ko-lokaliziranje za procjenu ekspresije IL-17R u vaskularnim endotelnim stanicama, neutrofila, makrofaga i regulacijskih T-stanica (nasumce odabranih, n = 20). Naši rezultati pokazuju da se većina vaskularne endotelne stanice koje eksprimiraju IL-17R (6-58% vaskularnih endotelnih stanica, Slika 7) u intratumorsko tkiva. U skladu s našim pretpostavkama, jedva neutrofili i regulatorne T stanice su otkrivene izražavaju IL-17R. Zanimljivo, pronašli smo ekspresiju IL-17R na površini tumorskih stanica. (Sl. S2). Pregled

Rasprava pregled

Imunološki bijeg igra ključnu ulogu u nastanku i razvoju raka. Medijatori i stanične efektore imunološkog sustava su važne komponente imunosupresivnog okruženju tumora. Ulogu interleukina-17, kao pro-upalni faktor privukao pažnju nedavno u raka, autoimune bolesti, te imunodeficijencije bolesti. CD4 ^{+ Th17 stanice su dugo mislili da će biti jedini stanični izvor IL-17 u ljudskom tumora mikro okolinu [23]. Međutim, dokazi pokazao je da razni tipovi stanica mogu proizvesti IL-17 [3], [24]. Mastociti, važan je stanična komponenta urođenog imunološkog sustava, prepoznati su kao važan stanični izvor IL-17. Zapravo, oni se mogu proizvesti i /ili izlučuju različite citokina i kemokina koji pridonose imunitet i upale, uključujući regrutiranje leukocita i proliferacije vaskularnih stanica. Nedavno je pokazano da mastociti prodrijeti u Mikrookoliš tumora putem SCF /c-kit signalnu stazu, vodeći do pogoršanja upale i imunosupresije [25]. Jarbola stanice izvedene IL-17 je istražen u nekoliko autoimunih bolesti, uključujući reumatoidni artritis [13], psorijaze [26], te spondilartritis [27], pri čemu mast stanicama su glavni stanični izvor IL-17, te su pokazali jaka korelacija s patogenezi i progresije bolesti. Međutim, izvor povećanog tumorski infiltrirajući IL-17 razine i doprinos progresije tumora, kao i temeljni mehanizam (s), slabo ostala razumio. Pregled}

ovoj studiji mi smo opazili da IL-17-stanica na u humanim uzorcima karcinoma želuca pokazuje dvije fenotipe. Neki su imali relativno redovite fenotip, elipsasti /plasmacytoid oblike, no neki su imali više nepravilnog oblika. Nadalje, ustanovili smo da IL-17 ^{+ limfociti sadrži samo ~ 10% od IL-17-stanica koje eksprimiraju, za razliku od prethodnih istraživanja na humanim tumorskim mikrookoliša [7], [23]. Nedavno, Bo Wang et al. [28] su otkrili da mastocite, ali ne i T stanice ili makrofage, su predominantni tip ekspresiju IL-17 u tkivu jednjaka karcinom skvamoznih stanica. Zanimljivo je, također otkrili da je većina IL-17 + stanica colocalized s MCT stanica + (14 - 68,1% od IL-17 + stanica), što ukazuje da su masne stanice su dominantni stanični izvor IL-17 kod humanih želuca raka. Nekoliko je studija pokazalo da IL-17 ne narušava imunološki nadzor i potiče angiogenezu i karcinogeneze u tumorima [1], [29], što ukazuje da je upala okoliša potaknut razina endogenog IL-17 može doprinijeti progresije tumora. Naši nalazi sugeriraju da je razina IL-17 stanicama koje izražavaju bila je veća u uzorcima tkiva tumora od odgovarajućih uobičajenih tkivnih uzoraka, te da mast-stanica izvedene IL-17 bila je obilniji u ljudske želučane raka. Kaplan-Meier analiza pokazala je da intratumoralno IL-17 + stanica i intratumoralno MCT + IL-17 + stanice su u korelaciji s lošijim preživljavanje u bolesnika s ljudskim rakom želuca. Pregled}

Precizni mehanizam (i) u osnovi povezanost povećanje razine IL-17 u tumor mikro uvjeta napredovanja tumora (svaki s) nejasno. Studija je izvijestio da IL-17 promicati razvoj tumora zapošljavanjem mijeloidne izvedeni supresorskih stanica (MDSCs), kao što su CD 11 ^{+ Gr1 + stanica, do tumora okoliš [30]. Međutim, nekoliko istraživanja pokazala su da IL-17 može poboljšati rast endotelnih stanica krvnih žila i utjecati na angiogeni napredak povećanjem sekrecije citokina kao što je TNF-a, IL-8, a VEGF [29], [31] uključujući studiju koja je izvijestila da IL-17-posredovane parakrinu mrežu potiče otpornost tumora na anti-angiogeneze terapije [32]. U skladu s time, naši rezultati ukazuju na značajnu korelaciju između MVD i IL-17 + stanica. Dobro je utvrđeno da mastociti može stimulirati proliferaciju krvnih žila [33], u našem istraživanju pronašli smo više značajnu korelaciju između MVD i MCT + IL-17 + stanica, koji pokazuju da se radi o IL-17 proizvodi mastociti imaju jači učinak na angiogenezu. Osim toga, otkrili smo da je većina vaskularne endotelne stanice koje izlučuju IL-17R, još zanimljivije, otkrili smo da su želučane stanice raka bile su pozitivne za IL-17R. Prethodne studije su izvijestili da IL-17R ekspresija povezana je sa tumorom malignosti [34], [35]. Kombiniranjem ovih rezultata, IL-17 se infiltracija promoviraju tumorski poboljšavajući angiogeneze u mikro tumora kroz os IL-17 /IL-17R, funkcija na vaskularne endotelne stanice i tumorske stanice. Drugi mogući mehanizam leži u popunjavanja upalnih stanica s IL-17, kao što su neutrofili i makrofagi. Pokazano je da IL-17 potiče tumorski rast kroz izravne učinke na neutrofila [36], [37]. U našoj studiji, intratumoralno IL-17 + stanica i MCT + IL-17 + stanica oba pokazala slabe, ali značajne, korelacije s brojem intratumorske neutrofila, a intratumorsko makrofagi nisu pokazali značaj. Iako je jedva neutrofili su pronađeni izražavanja IL-17R. Jarbola izveden IL-17 može igrati važnu ulogu u regrutiranju neutrofila pomoću CXC kemokina, poput CCL2, kao što je prethodno opisano [38]. Dokazi iz različitih vrsta karcinoma pokazuju da je udio regulacijskih T-stanica (Tregs) povećana u tkivu tumora u bolesnika s višestrukim malignoma [39], [40]. To je izvijestio da je Tregs zapošljavanje imao je ključnu ulogu u uspostavljanju tumora mikroklima VEGF-bogata i povećanja tumorske angiogeneze [41]. Prethodna studija je izvijestila regulatornu ulogu mastocita u koji su u interakciji s konvencionalnim CD4 + T stanica za proizvodnju IL-10 za proizvodnju regulacijskih T-stanica kroz os ICOSL /ICOS [42]. Ganeshan et al. [43] izvijestili da Tregs zapravo poboljšati, a ne spriječiti, proizvodnju mastocita IL-6, a plejotropnim citokina, koje je pokazalo da igraju ključnu ulogu u regulaciji ravnoteže između IL-17-stanica koje proizvode i FoxP3 + regulacijske T-stanice. Dakle, intenzivne povezanosti može postojati između Tregs i IL-17-proizvode mastocita. U našoj studiji, korelacija između IL-17 + stanica i Tregs bila slaba, ali statistički značajna kao i MCT + IL-17 + stanica. Ovi rezultati pokazuju da je IL-17 za proizvodnju masne stanice može inducirati diferencijaciju i nakupljanje Tregs izlučuju raznih citokina i kemokina, što bi trebalo dodatno razjasniti. Pregled}

Prema našim saznanjima, ovo je prvo izvješće od fenotipa i distribucija intratumorsko IL-17 koje proizvode stanice i njihov klinički značaj, a posebno prognostička vrijednost intratumorsko mastocita-izvedenim IL-17 u rak želuca. Naši podaci pokazuju da većina IL-17 koje proizvode stanice su mastociti, dok IL-17 ^{+ limfociti su bili rijetki. Nadalje, utvrdili smo da intratumoralno IL-17 + stanica i intratumoralno MCT + IL-17 + stanice su u korelaciji s lošijim opstanak. Međutim, mehanizam (e) mast stanične infiltracije u mikro tumor i specifični mehanizam između s povećanom ekspresijom IL-17 i upalnih i imunoloških stanica ostaje nepoznanica. Nadalje, osebujna funkcija pohranjuju i izlučivanje IL-17 još uvijek je potrebno da bude prikazano. Prema tome, prospektivne studije s naglaskom na zapošljavanje mastocita i IL-17 proizvodnje u mikro tumora želuca su potrebni za procjenu koliki je utjecaj intratumorsko jarbola potječe iz stanica IL-17 i dalje. Pregled}

popratne podatke pregled slike S1. pregled, ko-lokaliziranje između c-kit i triptaza masnih stanica (MCT) pregled, doi:. 10,1371 /journal.pone.0106834.s001 pregled (TIF) pregled Slika S2. pregled, ko-lokaliziranje između IL-17R (zeleno) i neutrofili, makrofage, regulacijskih T-stanica (narančaste)
DOI:. 10.1371 /journal.pone.0106834.s002
(TIF)

Priznanja pregled

zahvaljujemo Lin Zhou, Haijang Xie i Xiaowen Feng u Key Lab kombiniranog Multi-transplantacije organa, Ministarstvo za javno zdravstvo, prvi u poslovnoj vezi bolnica Medicinskog fakulteta Sveučilišta Zhejiang za tehničku podršku u imunohistokemija i imunofluorescencije. pregled

• PLoS ONE: inhibitorni učinak Pseudolaric kiseline B na rak želuca i višestruke rezistencije na lijekove putem Cox-2 /PKC-α /P-gp Pathway
• PLoS ONE: Mir-30b, Down-regulirana u rak želuca, potiče apoptozu i suzbija rast tumorskih ciljajući inhibitor aktivatora plazminogena-1