PLoS One: tumorba IL-17-pozitív hízósejtek a fő forrása az IL-17 Ez előrevetíti Survival gyomorrákban Patients

absztrakt katalógusa

Az interleukin-17 (IL-17) is elterjedt tumorszövet, és elnyomja a hatékony anti-tumor immunválaszt. Ugyanakkor a forrása a fokozott tumor-infiltráló IL-17 és ez hozzájárul a tumor progresszióját az emberi gyomorrák Továbbra sem tisztázottak. Ebben a vizsgálatban azt beiratkozott 112 gyomorrákos betegek, immunfluoreszcenciával arra használták, hogy értékelje a kolokalizációját CD3, CD4, CD56, CD20, CD68 és a hízósejt triptáz (MCT) együtt az IL-17. Immunhisztokémiai értékelésére használt eloszlásának mikroerek sűrűség (CD34), CD66b ^{+, CD68 + és FoxP3 + sejtek különböző microanatomical területeken. Prognosztikai értékét határoztuk meg Kaplan-Meier analízis és a Cox-féle regressziós modell. Az eredmények azt mutatták, hogy a hízósejtek, de nem a T-sejtek vagy makrofágok, voltak túlsúlyban lévő sejttípusok előállítására IL-17 a gyomorrák. Jelentős pozitív korrelációt mutattunk sűrűsége közötti hízósejtek származó IL-17 és az erek, neutrofil és a szabályozó T-sejtek (Treg). Nagycsaládok, azt találtuk, hogy a legtöbb vaszkuláris endoteliális expresszáló sejtek interleukin-17 receptor (IL-17R). Kaplan-Meier-analízis kimutatta, hogy a növekvő tumorba beszűrődött hízósejtek és az IL-17 + sejtek, valamint MCT + IL-17 + sejteket, szignifikáns összefüggést mutattak a rosszabb teljes túlélés. Ezek az eredmények azt mutatták, hogy a hízósejtek voltak a fő forrása az IL-17 a gyomorrák, és tumorba IL-17 infiltráció lehet mozdítani a tumor progresszióját fokozásával angiogenezis a tumor mikrokörnyezetében keresztül a tengely az IL-17 /IL-17R. IL-17-pozitív hízósejtek mutatott prognosztikai faktor a gyomorrák, jelezve, hogy az immunterápia célzási hízósejtek lehet egy hatékony stratégia, hogy ellenőrizzék tumorba IL-17 infiltráció, és következésképpen fordított immunszuppresszió a tumor mikrokörnyezetében, megkönnyítve rák immunterápia.}

bevezető hivatkozás: Liu X, Jin H, Zhang G, Lin X, Chen C, a Sun J, et al. (2014) tumorba IL-17-pozitív hízósejtek a fő forrása az IL-17 Ez előrevetíti a túlélés gyomorrákos betegek. PLoS ONE 9 (9): e106834. doi: 10,1371 /journal.pone.0106834 katalógusa

Szerkesztő: Xin Yuan Guan, The University of Hong Kong, Kína katalógusa

Beérkezett: 2014. május 12; Elfogadva: augusztus 1, 2014; Megjelent: szeptember 8, 2014 katalógusa

Copyright: © 2014 Liu et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Az adatok elérhetősége: A szerzők megerősítik, hogy az összes adatot a megállapításokat alátámasztó teljes mértékben hozzáférhető, korlátozás nélkül. Minden lényeges adat a papír és az azt támogató információs fájlokat. Katalógusa

Forrás: XSL támogatott a támogatási The National Science Foundation of China (81273254 /H1006), http://www.nsfc.gov. cn /. A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa

Bevezető

az elmúlt évtizedekben egyre nagyobb figyelmet fordítottak a mechanizmus (ok) a menekülés immunológiai a tumor mikrokörnyezetében, és különösen a kapcsolatát gyulladás és immunszuppresszió. Az egyik legfontosabb összetevői az immunrendszer kapcsolatos gyulladás rák nemrég ismerték az interleukin-17 (IL-17). IL-17 van pleiotropiás funkciók és a többszörös célok többsége már feltárt egér modellek, de egyre inkább kapcsolódik a humán betegségek [1] - [5]. IL-17 azonosították a különböző tumorok, beleértve az emlőrákot [6], gyomorrák [7], [8], kolorektális rák, [9] karcinogén indukált bőrrák [10], intrahepatikus cholangiocarcinoma [11], és a hepatocelluláris karcinóma [12]. IL-17-termelő sejtek fokozatosan növekedni a számot a tumor mikrokörnyezetében során a tumor fejlődését és korrelálnak a rossz túlélési rákkal kapcsolatos betegeknél.

már régóta tekintik, hogy a fő celluláris forrását az IL-17 CD4 ^{+ T-limfociták (Th17 sejtek). Az utóbbi időben számos tanulmány célzási IL-17 kimutatták, hogy az IL-17-termelés nem korlátozódik Th17 limfociták, de megtalálható a különböző adaptív és a veleszületett immunrendszer sejtek, beleértve γδT sejtek, NKT-sejtek, NK-sejtek, hízósejtek, és granulociták [3], [13].}

gyomorrák egyik leggyakoribb ráktípus, és egy vezető oka a rák okozta halál világszerte [14]. Több mint 1 millió új esetet diagnosztizálnak gyomorrákos évente világszerte, 42,5% -uk Kínában. A hagyományos terápiás stratégiák, beleértve a műtét, kemoterápia és sugárterápia a fő kezelések a gyomorrák. Nemrégiben immunterápia malignomákat került a fókuszba [15] - [17]. Azonban, a tumor-asszociált immunszuppresszió nagy kihívást jelent immunterápiás, mert gyengíti a citotoxikus aktivitásának hatékony T-sejtek és a természetes ölősejtek. Során a tumor fejlődését, tumor immunszuppresszió gyakran társul túlzott és ellenőrizetlen gyulladás a tumor mikrokörnyezetében [18]. Jól ismert, hogy a többszörös gyulladásos sejtek beszivárog tumorok, beleértve a hízósejtek, makrofágok altípusok, neutrofil sejtek, valamint a T és B limfociták, fémjelzi a rákkal kapcsolatos gyulladás [19].

A jelenlegi vizsgálatban megvizsgáltuk a celluláris forrását IL-17, a forgalmazás, a funkcionális jelentősége, és a prediktív értéke az IL-17-termelő sejtek 112 gyomorrákos betegeknél. Mi olyan új betekintést a lehetséges mechanizmus (ok) az IL-17 a tumor mikrokörnyezetében betegeknél gyomorrák kiértékelésével közötti kapcsolat az IL-17-termelő sejtek és a gyulladásos mediátorok. Célunk, hogy több információt, amely hasznos lehet a kialakítása és hatékonyabb a rák immunterápiás célzó IL-17. Katalógusa

Anyagok és módszerek katalógusa

Etikai nyilatkozat katalógusa

Mielőtt a kutatás tájékozott beleegyezésüket adták a betegnél. Megfelelő engedélyt kapott az illetékes etikai bizottság az első Kapcsolt Kórház, Medical College, Zhejiang University. Katalógusa

betegmintát

Összesen 112 beteg között 2009. február 2010. március mi kórházban vontak . A betegek, akik megfeleltek az alábbi kritériumok kerültek kiválasztásra: a) a diagnosztizált gyomorrák alapuló patológia; b) kapott hatékony eltávolítását. A kizárási kritériumok voltak betegek, akik bizonyítékokat távoli áttétek, bizonyítékok egyidejű autoimmun betegség, HIV, szifilisz vagy a betegek, akik rákellenes terápia műtét előtt. A kritériumok hatékony eltávolítását definiáltuk reszekció nem reziduális tumor (R0) vagy mikroszkopikus reziduális tumor (R1) szerint 7 ^{th kiadásában az American Joint a bizottság Cancer. Miután kuratív rezekció, beteg kapott adjuváns kemoterápiát alapján 5-fluorouracil és platina szerint a patológiás TNM osztályozás. A betegeket-up 3-6 hónapos időközzel, beleértve vizsgálatokat a perifériás vérből tumormarkerek és ultrahang és CT 6 havonta, endoszkóp 12 havonta. Betegek klinikai jellemzőit mutatja az 1. táblázat}

Immunhisztokémia és immunofluoreszcens

rutin hematoxilin-eozin festést végeztünk, hogy igazoljuk a patológiai diagnózis, tumorba régió definiáltuk kevesebb, mint 2 cm határos árrés a gyomorrák, míg a szokásos régió definíció szerint legalább 5 cm határos a különbözet ​​a gyomor tumor. katalógusa

az immunhisztokémiai katalógusa

az immunhisztokémiai leírtak szerint végeztük a korábbi tanulmány [20]. Primer antitesteket kecske anti-IL-17 (R &D Systems, Egyesült Királyság), az egér anti-CD66b (BD Pharmingen, USA), az egér anti-CD68 (ABCAM, USA), az egér anti-FoxP3 (ABCAM, USA), és egér anti-CD34 (Beijing Zhongshan Golden Bridge Biotech, Kína). A negatív kontroll, a primer antitest váltotta foszfáttal pufferolt sóoldattal (PBS).

Immunfluoreszcens

immunfluoreszcencia, hasonló módszereket használtak, kivéve, hogy az endogén peroxidáz aktivitást nem blokkolja, és a elsődleges Ab felhasznált ellenanyag koktélt. Kecske anti-IL-17 és kecske anti-IL-17R (mind az R &D Systems, USA) használtunk az észlelt IL-17 ^{+ sejtek és IL-17R kifejezést. A panel reaktív antitestek CD3, CD20, CD34, CD56, c-kit (egér monoklonális, mind a pekingi Zhongshan Golden Bridge Biotech, Kína), a CD4 (egér monoklonális, Leica, német), CD66 (egér monoklonális, BD Pharmingen, USA), CD68, FoxP3 és hízósejt triptáz (MCT) (egér monoklonális, mind a ABCAM, USA) használtunk. Az inkubálás után egy éjszakán át 4 ° C-on, a szekciók ment inkubációs elegyével másodlagos antitestek: Alexa Fluor 488/568-A konjugált szamár anti-egér vagy Cy3 /Alexa Fluor 488-konjugált szamár anti-kecske vagy Alexa Fluor 488 szamár anti-nyúl ( minden Invitrogen, USA) 37 ° C-on 1 órán át. A metszeteket Vectashield tartalmazó DAPI-t (Vector Laboratories, USA), és láthatóvá tettük fluoreszcens képalkotó mikroszkóp (Olympus BX51, Japán), CCD-kamerával (Nikon DS-Ri1). A képek analizáltuk a NIS-elemek BR 3.2 szoftver.}

A negatív kontrollok, amelyekben PBS-t használunk az elsődleges ellenanyagok kerültek minden marker.

számszerűsítése immunfestés paraméterek

adatokat kaptunk úgy, hogy kézzel számolva pozitívan festődött sejteket 10 reprezentatív területeken normális és intratumorális régiók alatt 400 × nagy teljesítményű nagyítás. Pontosabban, a vaszkuláris endoteliális sejtek vagy sejt halmazok barna-festett sejteket azonosították mikroerek csak ha volt egyértelmű határok, amelyet a szomszédos szerkezetek [21]. Sűrűséget határozza meg a számítási átlagos számát a pozitívan festődő sejtek per nagyteljesítményű mikroszkópos mezőt (HPF). Kettős festéssel határoztuk meg kézi számlálással pozitív sejtek 10 nagy teljesítményű a területeken; az arányokat az IL-17-et expresszáló sejt per felületi marker számoltunk. Minden analíziseket két független, vak megfigyelők (GE Z és XK L), és az átlagos számít a két megfigyelő használták az itt következő elemzésben. Katalógusa

A statisztikai elemzés katalógusa

A medián CD34 ^{+, CD66b +, CD68 +, FoxP3 + és a hízósejt triptáz (MCT +) és az IL-17 + sejteket alkalmaztunk forgácsolási off meghatározására alcsoport eredményeinket. Student-féle t-próbát használtunk összehasonlítani beszűrődése különböző immun-sejt-alcsoportok daganatos szövet és a megfelelő normál szövetben. Chi-négyzet tesztet alkalmaztuk közötti kapcsolat értékelésére IL-17-termelő sejtek és a klinikopatológiai jellemzői. Közötti korrelációk mikroerek sűrűség (CD34), neutrofil (CD66b), makrofágok (CD68), a szabályozó T-sejtek (FoxP3), és az IL-17-termelő sejteket értékelhető a Pearson-féle vagy Spearman-féle korrelációs együtthatót. A teljes túlélés definíció az intervallum között időpontja a műtét és a halál időpontját vagy az utolsó utánkövetés amelyik korábban lépett. Túlélési függvény becslése számoltunk a Kaplan-Meier-módszerrel. A Cox-féle modell segítségével értékelték az IL-17-termelő sejtek a teljes túlélést. A kétoldalas p értéke < 0,05 értéket tekintettük statisztikailag szignifikánsnak. Minden statisztikai analízist GraphPad Prism (ver. 5.00 for Windows; GraphPad Software, San Diego, CA, USA) és az SPSS (ver. 16,0; SPSS Inc., Chicago, IL, USA) szoftver.}

Eredmények katalógusa

Study lakosság katalógusa

a betegek jellemzőit az 1. táblázat mutatja összesen 78 hím és 34 nőstény vontunk be. Az életkor, a vizsgálati populáció között mozgott 33-89 (medián 60) év volt. A 112 gyomorrákos betegek H. pylori fertőzés állapotának pozitív volt 65 beteg, míg 47 negatív volt. 110 beteg kapott R0 reszekció és 2 beteg kapott R1 reszekció. Patológiai TNM osztályozás alapján végezték 7 ^{th kiadásában az American Joint a bizottság Cancer: 33 betegnél nem nyirokcsomómetastasis, 21 volt az N1, N2 22-nél, és 36 volt N3. 1 beteg tartozott Tis, 23 beteg tartozott I. stádiumú, 25, 63 beteg szakaszainak II, III, ill. 3 (2,7%) beteg elvesztette a nyomon követés és 39 (34,8%) beteg halt meg a megfigyelési időszak alatt. A medián követési idő 51 hónap, kezdve 39-57 hónap, és a teljes túlélés (OS) aránya 83,0% volt 1 év, 71,4% a 3 éves és 65,7% 4 év volt. Katalógusa}

IL-17-ben fejezzük ki túlnyomórészt MCT ^{+ hízósejtek}

minták véletlenszerű 20 beteg a teljes kohorsz arra használni, hogy értékelje az elosztó és fenotípus az IL-17-termelő sejtek tumorba régióban, és a megfelelő normál szövetekben (1. ábra). Találtunk citoplazmatikus IL-17 festődés sejtekben egy tojásdad fenotípust, a korábban leírtak szerint [13], és a sejteket egy több szabálytalan alakú. Továbbá azt találtuk, hogy az IL-17-et expresszáló sejtek voltak gyakoribbak tumorba szövetekben, mint a normál szövetekben. Azonosításához Az IL-17 ^{+ sejtek tumorba szövetekben, végeztünk kolokalizációja kísérleteket és számított aránya az IL-17 + sejtek mindegyik alcsoportjában. Először is végeztünk kolokalizációját c-kit, egy további hízósejt marker, a hízósejt triptáz (MCT), az eredmények azt mutatták, hogy az összes MCT + expresszáló sejtek c-kit (ábra. S1), jelezve, hogy az MCT lehetne használt azonosított hízósejtek reprezentatív. A sejtek a tojásdad fenotípus, mi kiválasztott néhány T-sejt, B-sejt, és NK-sejt markereket: konkrétan, CD3, CD4, CD20, és a CD56, és értékelte azok kolokalizációjának IL-17. Azonban CD20 + IL-17 + és a CD56 + IL-17 + sejteket azonosítottak, bár ritkán (< 1%; 2. ábra, jobb felső panelek). Bár alkalmi CD3 + IL-17 + és CD4 + IL-17 + sejteket figyelhető meg, az átlagos százalékos IL-17 + sejtek mindkét alcsoport volt 12,4% ( 2,2-34,1%) és 8,4% (0-26,7%; 2. ábra, bal felső panel; 2. táblázat) a következőkben vizsgáltuk a fenotípus az IL-17 + sejtek szabálytalan alakú; makrofágok már javasolták a potenciális forrásai az IL-17-termelés [22]. Ezzel összhangban, akár 18,5% az IL-17-termelő sejtek gyomorrák szövetekben voltak makrofágok (2.ábra, bal alsó panel; 2. táblázat). Azonban a legtöbb az IL-17-termelő sejtek maradt azonosítatlan. Annak meghatározására, hogy a hízósejtek voltak egy további forrása a IL-17 termelés gyomorrák, végeztünk kolokalizációját IL-17 és hízósejt triptáz (MCT). Azt találtuk, hogy a legtöbb IL-17 + sejtek kolokalizált az MCT + sejtek (40-60% az IL-17 + sejtek; 2. ábra, jobb alsó panel; 2. táblázat).}

megoszlása ​​MCT ^{+ IL-17 + sejtek és korreláció klinikopatológiai jellemzők katalógusa}

Annak igazolására, hogy mast-sejt-eredetű IL-17 volt az egyik fő forrása a celluláris IL 17. a gyomorrák mikrokörnyezet végeztünk immunfluoreszcens kettős festés a tumorba és normál minta szövetekben a 112 beteg. A legtöbb IL-17 ^{+ sejteket duplán festett erősen MCT (14-68,1% IL-17 expresszáló sejtek) tumorba szövetekben (ábra. 3A). Azt találtuk, hogy a sűrűsége MCT + hízósejtek és az IL-17 + sejtek tumorba szöveteket úgy találták, hogy szignifikánsan magasabb, mint a normál szövetekben (MCT + _{T vs. MCT + N 10,02 ± 4,06 vs. 8,66 ± 3,29, p = 0,0023; IL-17 + T vs. IL-17 + N, 8,16 ± 3,89 vs. 7,18 ± 3,48, p = 0,0165; ábra. 3B). Továbbá, a sűrűség az MCT + IL-17 + sejtek tumorba szövetekben jelentősen magasabb volt, mint a normál szövetekben (4,55 ± 2,48 vs. 3,93 ± 2,24, p = 0,0154; ábra. 3B).}}

azonosításához között jelentős kapcsolatokat klinikopatológiai jellemzők és MCT ^{+ IL-17 + sejtek, a chi-négyzet próba vagy Fisher-féle egzakt tesztet alkalmaztunk (1. táblázat mutatja). Azonban MCT + IL-17 + sejtek a tumorba szövetekben nem korrelált a klinikai jellemző értékelték, beleértve a H. pylori fertőzés állapotáról, a daganat mérete, mértéke a differenciálás és besorolásának TNM. Katalógusa}

fokozott tumorba MCT ^{+ sejtek IL-17 + sejtek, MCT + IL-17 + sejtek sűrűségét korrelált az általában gyenge túléléssel katalógusa}

egyváltozós elemzés (3. táblázat), a hagyományos klinikopatológiai jellemzők prediktív szegény teljes túlélés (OS) volt gyengén differenciált, és a fejlett TNM. A további elemzés, a számok az MCT ^{+ sejtek, IL-17 + sejtek, és MCT + IL-17 + sejteket két csoportra osztottuk: felett és alatt a medián értékeket. Kaplan-Meier túlélési görbéket készítünk a log-rank teszt, hogy tovább vizsgálják a szövetség túléléssel. A betegek, akiknek nagyszámú tumorba infiltráló MCT + sejtek és IL-17 + sejtek volt rosszabb OS, mint az alacsonyabb számú MCT + sejtek (p = 0,004) és az IL-17 + sejtek (p = 0,014, Fig. 4B). Továbbá, a betegek nagyobb számban MCT + IL-17 + sejtek rövidebb volt a túlélési időtartama, mint az alacsonyabb számú MCT + IL-17 + sejtek (p = 0,018, Fig. 4C). katalógusa}

a változók P < 0,1 egyváltozós elemzések vontak be egy többváltozós Cox analízis azt találtuk, hogy mind a tumorba MCT-pozitív sejtek (HR = 2,057; 95% CI: 1,048-4,037; p = 0,036) és a TNM (HR = 3,832; 95% CI: 1,679-8,745; p = 0,001) független prognosztikai faktorok (3. táblázat). Jelezve, hogy a betegek nagyobb számban tumorba MCT-pozitív sejteket csaknem 2,1-szeres nagyobb valószínűséggel halnak meg, mint az alacsonyabb számú ezeket a sejteket. Katalógusa

Az immunhisztokémiai jellemzőit és a szövetség között MCT ^{+ IL-17 + sejtsűrűség és immunkémiai változók}

IL-17 egy ismert pro-gyulladásos faktor, ami elősegíti a tumor növekedés révén előmozdítása angiogenezis és a toborzás neutrofilek, valamint toborzása egyéb gyulladásos és immun sejttípusokban. Hogy vizsgálja meg a lehetséges mechanizmus (ok) az IL-17-felhalmozódás a tumor mikrokörnyezetében rossz prognózissal. Végeztünk immunhisztokémiai különféle gyulladásos mediátorok, mikroerek sűrűség, neutrofil sejtek, makrofágok és a szabályozó T-sejtek a teljes vizsgált populációban ( n katalógusa = 112). Reprezentatív mezők CD34 ^{+ mikroerek, CD66b + neutrofilek, CD68 + makrofágok, és FoxP3 + szabályozó T-limfociták in tumorba és a normál szöveti ábrán mutatjuk be. 5A. A sűrűsége tumorba CD34 + erek (p = 0,0030), CD66b + neutrofil (p < 0,0001), CD68 + makrofágok (p < 0,0001) és FoxP3 + szabályozó T-limfociták (p <0,0001) szignifikánsan magasabb volt, mint a normál szövetekben (ábra. 5B). katalógusa}

Továbbá, elemeztük az összefüggést tumorba MVD, neutrofil sűrűség, makrofágok sűrűségével, a szabályozó T-sejtek sűrűsége, és a sűrűsége IL 17 ^{+ sejtek, különösen MCT + IL-17 + sejtek. Az eredmények szignifikáns korrelációt MVD és IL-17 + sejtek (r = 0,4040, p = 0,0001), míg jelentős, de gyenge, korrelációkat között található az IL-17 + sejtek és a neutrofilek (r = 0,2135, p = 0,0238), és Treg (r = 0,2963, p = 0,0017) (az adatokat nem mutatjuk be). Mi azonban tovább elemezte az összefüggést MCT + IL-17 + sejtek és azok gyulladásos mediátorok. Erősebb szignifikáns korrelációt találtunk MCT + IL-17 + sejtek és MVD (r = 0,4396, p < 0,0001). Ugyanakkor a közötti korrelációk MCT + IL-17 + sejtek és a neutrofilek (r = 0,2578, p = 0,0061), és Treg (r = 0,2898, p = 0,0021) hasonló volt, hogy az IL-17 + sejtek (a 6. ábrán látható). katalógusa}

kolokalizációja az IL-17R és különféle gyulladásos és immunsejtek katalógusa

Annak érdekében, hogy vizsgálja meg a mechanizmus (ok) alapján szoros kapcsolatát IL 17 termelő sejtek és MVD, valamint más gyulladásos és immunsejtek. Végeztünk kolokalizációját kísérletben, hogy értékeljük az IL-17R a vaszkuláris endoteliális sejtek, neutrofil sejtek, a makrofágok és a szabályozó T-sejtek (random kiválasztott, n = 20). Eredményeink azt mutatták, hogy a legtöbb vaszkuláris endoteliális expresszáló sejtek IL-17R (6-58% a vaszkuláris endoteliális sejtek; ábra7) a tumorba szövetekben. Összhangban a hipotézist, alig neutrofil és szabályozó T sejtet találtak kifejező IL-17R. Érdekes módon azt találtuk, az IL-17R, a tumorsejtek felületén. (Ábra. S2). Katalógusa

Vita katalógusa

Immune escape kulcsszerepet játszik a Genesis és a rák kialakulása. A mediátorok és celluláris effektorok az immunrendszer fontos elemei egy immunszuppresszív tumor környezetében. A szerepe az interleukin-17, mint a pro-gyulladásos faktor, felkeltette a figyelmet a közelmúltban a rák, az autoimmun betegségek, és immunhiányos betegségeket. CD4 ^{+ Th17 sejtek sokáig azt gondolták, hogy az egyetlen celluláris forrását IL-17 a humán tumor mikrokörnyezetében [23]. Azonban egyre több bizonyíték bebizonyította, hogy különféle sejttípusok képes az IL-17 [3], [24]. Hízósejtek, fontos celluláris komponensének a veleszületett immunrendszer, már elismert fontos celluláris forrás az IL-17. Sőt, ezek a készítmények és /vagy szekretálnak a különböző citokinek és kemokinek, amelyek hozzájárulnak a immunvédelem és a gyulladást, ideértve a leukocyták és a vaszkuláris sejtek proliferációját. Nemrégiben bizonyítást nyert, hogy a hízósejtek hatolni a tumor mikrokörnyezetében keresztül az SCF /c-kit jelátviteli, ami súlyosbodása gyulladás és immunszuppresszió [25]. Mast-sejt-eredetű IL-17 vizsgálták számos autoimmun betegségek, beleértve a reumás ízületi gyulladás [13], a pszoriázis [26], és Spondylarthritis [27], amelyben hízósejteket egy nagy Cellular forrása az IL-17, és megmutatta szoros összefüggést patogenezisében és a betegség progresszióját. Ugyanakkor a forrása a fokozott tumor-infiltráló IL-17 szint és a hozzájárulása a progresszió a tumor, valamint a mögöttes mechanizmus (ok) maradt kevéssé ismert.}

A jelen tanulmányban, megfigyeltük hogy az IL-17-t expresszáló sejtek humán gyomorrák mintákat kiállított két fenotípus. Néhány volt egy viszonylag szabályos fenotípus, tojásdad /plasmacitoid formák, de néhány már több szabálytalan alakzatokat. Továbbá azt találtuk, hogy az IL-17 ^{+ limfociták amely csak körülbelül 10% -a az IL-17-et expresszáló sejtek, ellentétben a korábbi tanulmányok a humán tumor mikrokörnyezetet [7], [23]. Nemrégiben Bo Wang et al. [28] megállapította, hogy a hízósejtek, de nem T-sejtek vagy makrofágok, voltak az uralkodó típus expresszáló IL-17 in nyelőcső laphámrák szövetekben. Érdekes módon azt is megállapítottuk, hogy a legtöbb IL-17 + sejtek kolokalizált az MCT + sejtek (14-68,1% -a az IL-17 + sejtek), jelezve, hogy a hízósejtek voltak túlnyomó celluláris forrás az IL-17 a humán gyomor rák. Számos tanulmány kimutatta, hogy az IL-17 gátolja az immunrendszer felügyelet és elősegíti az angiogenezist és a karcinogenezis tumorokban [1], [29], ami arra utal, hogy a gyulladás környezet által vezérelt szintű endogén IL-17 hozzájárulhat a tumor progresszióját. Eredményeink azt javasolta, hogy az IL-17-t expresszáló sejtek magasabb volt tumorszövetben mintákban, mint a megfelelő normál szövetben mintákban és, hogy mast-sejt-eredetű IL-17 volt, sokkal nagyobb a humán gyomor rák. Kaplan-Meier analízis kimutatta, hogy intratumorális IL-17 + sejtek és intratumorális MCT + IL-17 + sejteket korrelál rosszabb túlélési humán gyomorrákos betegek. Katalógusa}

A pontos mechanizmus (ek) alapjául szolgáló közötti összefüggést növekvő szintű IL-17 a tumor mikrokörnyezetében és a tumor progresszióját marad (ok) nem világos. Egy tanulmány szerint az IL-17 elősegíti a tumor fejlődését toboroznak mieloid eredetű szupresszor sejtek (MDSCs), mint például a CD11b ^{+ Gr1 + sejtek a tumor környezetében [30]. Eközben Számos tanulmány igazolta, hogy az IL-17 is fokozza a növekedést a vaszkuláris endoteliális sejtek, és befolyásolhatja a angiogén folyamatban növelésével a váladék a citokinek, például a TNF-α, IL-8, és VEGF [29], [31], beleértve egy tanulmány, amely számolt az IL-17-közvetített parakrin hálózat elősegíti a tumor ellenállás antiangiogén terápia [32]. Ezzel összhangban eredményeink jeleztek szignifikáns korrelációt az MVD és IL-17 + sejtek. Azt jól megalapozott, hogy a hízósejtek ösztönözhetnek érrendszeri proliferáció [33], a tanulmányban, találtunk egy jelentősebb korrelációt MVD és MCT + IL-17 + sejtek, amelyek igazolják, hogy ezek az IL-17 termelő hízósejtek erősebb hatása angiogenezis elősegítésében. Ezen túlmenően azt találtuk, hogy a legtöbb vaszkuláris endoteliális expresszáló sejtek IL-17R, több Érdekes módon azt találtuk, hogy a gyomorrák sejt pozitív volt az IL-17R. Korábbi tanulmányok arról számoltak be, hogy az IL-17R-expresszió összefügg a tumor malignus [34], [35]. Kombinálása Ezek az eredmények, az IL-17-beszűrődés lehet mozdítani a tumor progresszióját fokozásával angiogenezis a tumor mikrokörnyezetében keresztül a tengely az IL-17 /IL-17R, függvény a vaszkuláris endoteliális sejtek és a tumorsejtek. Egy másik lehetséges mechanizmusa abban rejlik, gyulladásos sejtek az IL-17, mint a neutrofilek és a makrofágok. Bebizonyosodott, hogy az IL-17 elősegíti a tumor progresszióját közvetlen hatása van a neutrofilek toborzásának [36], [37]. Vizsgálatunkban intratumorális IL-17 + sejtek és MCT + IL-17 + sejtek egyaránt mutattak gyenge, de szignifikáns korrelációk a több tumorba neutrofilek, míg tumorba makrofágok nem mutatott jelentőségét. Bár alig neutrofil találtak kifejező IL-17R. Oszlop-eredetű IL-17 lehet, kulcsfontosságú szerepet játszanak a felvételi neutrofil által CXC-kemokinek, mint például a CCL2, a korábban leírtak szerint [38]. Bizonyíték különféle rákok azt bizonyítja, hogy az aránya a szabályozó T-sejtek (Treg sejtek) fokozott tumorszövetben multiplexes betegek malignus [39], [40]. Leírták, hogy a Treg sejtek toborzása volt egy kulcsfontosságú szerepet létrehozó egy VEGF-gazdag tumor mikrokörnyezetében és a növekvő tumor angiogenezis [41]. Korábbi tanulmány arról számolt be, a szabályozó szerepét hízósejtek, hogy kölcsönhatásba lépnek a hagyományos CD4 + T-sejtek generálásához az IL-10-termelő szabályozó T-sejtek révén tengelye ICOSL /ICOS [42]. Ganeshan et al. [43] beszámolt arról, hogy Treg sejtek ténylegesen növeli, hanem gátolják, hízósejt termelt IL-6, egy pleiotrop citokin, amelyről kimutatták, hogy döntő szerepet játszanak a szabályozásában közötti egyensúly az IL-17-termelő sejtek és FoxP3 + T szabályozó sejtek. Így intenzív összefüggések között létezhet Treg sejtek és IL-17-termelő hízósejtek. Vizsgálatunkban az összefüggést az IL-17 + sejtek és Treg sejtek gyenge volt, de szignifikáns, valamint az MCT + IL-17 + sejteket. Az eredmények azt mutatták, hogy az IL-17 termelő hízósejtek okozhat, a differenciálás és felhalmozási Treg szekretáiásával különféle citokinek és kemokinek, amelyet tovább kell tisztázni. Katalógusa}

Tudomásunk szerint ez az első jelentés a fenotípus és forgalmazása tumorba IL-17-termelő sejtek és klinikai jelentősége, és különösen a prognosztikai értéke tumorba hízósejt-eredetű IL-17 a gyomorrák. Adataink azt mutatják, hogy a legtöbb IL-17-termelő sejtek a hízósejtek, míg az IL-17 ^{+ limfociták ritkák voltak. Továbbá azt találtuk, hogy intratumorális IL-17 + sejtek és intratumorális MCT + IL-17 + sejteket korrelált a rosszabb túlélés. Azonban a mechanizmus (ok) a hízósejt beszivárgása a tumor mikrokörnyezetében, és a specifikus mechanizmus közötti túltermelő IL-17, valamint a gyulladásos és immunsejtek nagyrészt ismeretlen. Továbbá az egyedi funkciója a tárolt és szekréciós IL-17 még mindig szükség van, hogy illusztráljuk. Így prospektív vizsgálatok középpontjában a hízósejtek toborzás és az IL-17 termelést a gyomorban tumor mikrokörnyezetében szükségesek, hogy értékelje a prediktív értéke tumorba mast-sejt-eredetű IL-17 további. Katalógusa}

alátámasztó információk katalógusa ábra S1.
kolokalizációja közötti c-kit és hízósejtek tryptase (MCT). katalógusa doi: 10,1371 /journal.pone.0106834.s001 katalógusa (TIF) hotelben ábra S2.
kolokalizációja az IL-17R (zöld) és a neutrofil granulociták, makrofágok szabályozó T-sejtek (narancssárga). katalógusa doi: 10,1371 /journal.pone.0106834.s002 katalógusa (TIF) hotelben

Köszönetnyilvánítás

köszönjük Lin Zhou, Haiyang Xie és Xiaowen Feng a Key Lab Kombinált Multi-szervátültetés egészségügyi Minisztérium, első Affiliated Kórház, School of Medicine, Zhejiang Egyetem műszaki támogatás immunhisztokémia és Immunfluoreszcenciás. katalógusa

• PLoS One: A gátló hatását Pseudolaric Acid B gyomorkarcinóma és multidrog rezisztencia keresztül Cox-2 /PKC-α /P-gp Pathway
• PLoS One: miR-30b, alulszabályozott gyomorrákban, elősegíti az apoptózist és gátolja a tumor növekedését célzás plazminogén aktivátor inhibitor-1