PLoS One: karnozin gátolja a humán gyomorkarcinóma SGC-7901 sejtek révén Mind a mitokondriális légzés és Glikolízis utak

absztrakt

karnozin, egy természetesen előforduló dipeptid, a közelmúltban kimutatták, hogy tumorellenes aktivitással. Azonban az alapjául szolgáló mechanizmus nem tisztázott. Ebben a tanulmányban azt vizsgáltuk, a hatás mechanizmusát és karnozin a sejt életképességét és elterjedése a tenyésztett humán gyomorrák SGC-7901 sejtek. A karnozin kezelés nem okoz apoptózist vagy elhalás, de csökkent a szaporodási képességének SGC-7901 sejtek. Csikóhal elemzés azt mutatta, SGC-7901 sejtek tenyésztünk piruvát aktív mitokondriumok, és függ a mitokondriális oxidatív foszforiláció több mint glikolízis útvonala generációs ATP. Karnozin jelentősen csökkent az abszolút értéke a mitokondriális ATP-kapcsolt légzés, és csökkentette a maximális oxigénfogyasztás és tartalék légzési kapacitása, ami csökkentheti a mitokondriális funkció korrelált a proliferatív potenciállal. Egyidejűleg karnozin is csökken az extracelluláris savasodás mértéke és a glikolízis a SGC-7901 sejtek. Eredményeink azt mutatják, hogy a karnozin potenciális szabályozó energia anyagcseréjét SGC-7901 sejtek mind az anaerob és aerob úton, és amennyiben a nyom preklinikai és klinikai értékelés karnozin gyomorrák terápia. Katalógusa

Citation: Shen Y, Yang J, Li J., Shi X, Ouyang L, Tian Y, et al. (2014) A karnozin gátolja a humán gyomorkarcinóma SGC-7901 sejtek révén Mind a mitokondriális légzés és Glikolízis utak. PLoS ONE 9 (8): e104632. doi: 10,1371 /journal.pone.0104632 katalógusa

Szerkesztő: Salvatore V. Pizzo, Duke University Medical Center, Amerikai Egyesült Államok katalógusa

Beérkezett: február 14, 2014; Elfogadva: július 15, 2014; Megjelent: augusztus 12, 2014 katalógusa

Copyright: © 2014 Shen és mtsai. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Forrás: Ez a projekt támogatta a Nemzeti Természettudományi Alapítvány Kína (81102427), részben támogatott Zhejiang tartományi Tudományos Kutatási Alapítvány (Y2110322), a Program Zhejiang csapatunk vezető S & T Innovation (2010R50048) és Wenzhou város Science and Technology Project (2010S0094 ). A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa

Bevezető

gyomorrák egyik leggyakoribb rosszindulatú daganatok a világon. A gazdaságilag fejlődő országokban, a gyomorrák a második oka a rák okozta halál [1], [2]. Annak ellenére, hogy a javulás sebészeti és multimodális terápia, a teljes 5 éves túlélés aránya még mindig alacsony (15% -ról 35%), mert a magas kiújulás aránya, invázió és metasztázis [3]. Ezért a jelen, felfedezni több hatékony anti-tumor gyógyszerek kevesebb mellékhatással van szükség.

L-karnozin (β-alanil-L-hisztidin) a természetben előforduló dipeptid, amely által szintetizált endogén karnozin szintetáz. Széles körben elterjedtek az emlősök agyban, vázizomban, a gyomor, a vese, a szív és a bőr [4], [5]. Eddig nem sokat tudunk a fiziológiai funkciót, de számos feltételezett szerepét figyelembe vették, mint például a neurotranszmitter, gyulladásgátló szer, szabad gyökfogó, a mobil szerves pH-puffer és fémkelátképző [6], [7]. Leírták, hogy a karnozin egy potenciális terápiás ágens kezelésére Alzheimer-kór, a stroke, a cukorbetegség és más betegségek az érzékszervek [8], [9]. Csak a közelmúltban, bizonyítást nyert, hogy a karnozin is lehet egy anti-tumorkeltő hatásokat. Például, karnozin számoltak be, hogy rendelkezik a képességét, hogy gátolják a rosszindulatú gliomák növekedést [10], és ez a hatás révén fejtheti hatással glikolitikus energia-anyagcsere, a legjobban jellemzett metabolikus megfigyelt fenotípus tumorsejtekben, ismert, mint a Warburg hatás [11 ], [12]. katalógusa

az utóbbi időben fontos a mitokondriumok oxigén érzékelők, valamint a termelők ATP vált fókuszpontja rákkutatás és tanulmányok azt mutatták, fontos jelenség, hogy a mitokondriális anyagcsere, különösen citromsav ciklus aktivitás fontos a gyors elterjedése több rákos sejttípus [13], [14]. Azonban abban az esetben, humán gyomorrák-sejtek, kevés információ áll rendelkezésre, hogy milyen mértékben glikolízis és a mitokondriális oxidatív foszforiláció (OXPHOS) hozzájárulnak a sejtek energia termelés és a gyors proliferációt. Függetlenül attól, hogy a karnozin is gátolja a növekedést a humán gyomorrák sejtek továbbra is ismeretlen. És, hogy a gátló hatás karnozin a tumorsejtek növekedését is kapcsolódik a fellépés a mitokondriális légzés és OXPHOS tisztázatlan marad. Katalógusa

A közelmúltban, a csikóhal Bioscience XF96 extracelluláris Flux Analyzer arra használták, hogy egyszerre és folyamatosan figyelemmel kíséri mind a aerob és glikolitikus komponensek celluláris bioenergetika [15]. Ezért, a jelen tanulmány, feltártuk a hatását karnozin a növekedés humán gyomorrák sejtek és hogy tovább jellemezzük a bioenergetikai profilja tenyésztett humán gyomorrák sejt SGC-7901 és a szerepek karnozin az SGC-7901 sejtek energia metabolizmus a csikóhal Bioscience XF96 extracelluláris Flux Analyzer és az egyéb kapcsolódó technológiák. katalógusa

anyagok és módszerek katalógusa

Reagensek katalógusa

L-karnozin, nátrium-piruvát, rotenone, karbonil-cianid p-metoxi-hidrazon (FCCP), antimycin A, 3- [4,5-dimetil-tiazol-2-il] -2,5-diphenyltetra-zolium-bromid (MTT), metanol, tejsav a Sigmától (St. Louis, MO, USA). Penicillint, sztreptomicint, L-glutamin, tripszin, Dulbecco-féle módosított Eagle-féle tápközeg (DMEM), magzati szarvasmarha szérum voltak a GIBCO-BRL (Grand Island, NY, USA). Annexin V-FITC /PI apoptózis detektáló kit, BCA Protein Assay Kit és ATP vizsgáló Kit vásárolta Beyotime Intézet Biotechnology ((Nanjing, Kína). XF táptalajban és XF kalibráló oldatot vásárolt Seahorse Bioscience. Katalógusa

Sejtkultúra

emberi gyomorrák sejtvonalat SGC-7901 (SGC-7901), humán máj hepatocelluláris karcinóma sejtvonal (HepG2), és patkány C6 glióma sejtvonal (C6) vásároltunk a Shanghai Institute Cell Bank, kínai Tudományos Akadémia (az eredeti forrás: American Type Culture Collection, ATCC, Manassas, VA, USA). a sejteket DMEM-ben tenyésztjük táptalajban, amely 10% magzati borjúszérumot (FBS), 100 egység /ml penicillin G és 100 ug /ml sztreptomicinnel, és hőmérsékletét 37 ° C-on és 5% CO _{2, párásított inkubátorban. a sejteket tripszinnel kezeljük egy arány 01:03 után konfluencia használva 0,25% -os tripszin. átoltjuk sejtet oltunk 96-, 24- vagy 6-lyukú lemezekre sűrűségben 2 × 10 ^{3, 5 × 10 4, 2 × 10 5 vagy 1 × 10 6 sejt /lyuk volt.}}

MTT redukciós vizsgálat

Cell metabolikus aktivitás követtük nyomon a kolorimetriás MTT assay korábban leírtak szerint [16]. Röviden, a sejteket tenyésztjük, 96-lyukú lemezeken, és voltak 6 kút minden csoportban. Végén a kísérletekben a sejteket 0,5 mg /ml MTT-t 4 órán át 37 ° C-on. Ezután a felülúszó fázist eltávolítjuk, és 100

• PLoS One: Helicobacter pylori gyomor- Rák és nyombélfekély megmutatása Same filogeográfiai Origin az Andok régióban Colombia
• PLoS One: A hatásosság értékelése Részösszeg és a Total gastrectomiák a Robotic Surgery gyomorrák képest, hogy a nyitott és laparoszkópos reszekció: A Meta-Analysis