Background VerfÜgung
EMX2 ass e Mënsch orthologue vun der Villäicht sollte VerfÜgung eidel spiracles homeobox Gentherapie, datt zu embryogenesis agebonne ginn huet. Rezent Studien proposéiere méiglech Abannung vun EMX2 zu Mënsch Cancers; Ee, brauch d'Roll vun EMX2 zu carcinogenesis weider Weltraum. VerfÜgung Resultater VerfÜgung An dëser Etude, mir gemellt, datt verwandelt-Regulatioun vun EMX2 Ausdrock vill mat EMX2 Promoteur hypermethylation zu gastric Kriibs soll war. Staatsfinanzen EMX2 Ausdrock eng adenovirus Liwwerung System vun gastric Kriibs Zell Linnen subtil endogenous EMX2 Ausdrock benotzt Nerve inhibition vun Zell Prolifératioun an Wnt sécher Passerelle souwuel eng kënschtlech an zu engem Modell gastric Kriibs xenograft zu VIVO. Zousätzlech, observéiert mir dat mat der adenoviral EMX2 Ausdrock Vecteure behandelt Déieren wéi déi wesentlech besser Iwwerliewe hu mat eidelen adenoviral Vecteure behandelt. VerfÜgung Conclusioun VerfÜgung Eis Etude seet, datt EMX2 engem putative entholl suppressor ass an Mënsch gastric Kriibs. D'adenoviral-EMX2 kann als Roman Gentherapie fir d'Behandlung vu Patienten mat gastric Kriibs Potential hunn VerfÜgung Fro:. Li J, Mo M, Chen Z, Chen Z, Sheng Q Mu H, et al. (2012) Adenoviral Liwwerung vun der EMX2 Gene Hien Wuesstem an Human Gastric Cancer. PLoS NËMMEN 7 (9): e45970. Doi: 10.1371 /journal.pone.0045970 VerfÜgung Redakter: Masaru Katoh, National Cancer Center, Japan VerfÜgung Arnaque: 13. Abrëll 2012; Akzeptéiert: 23. August 2012; Publizéiert: 21. September 2012 VerfÜgung Copyright: © Li et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung Funding:. Dës Aarbecht der National Natural Science Foundation of China (31170732), d'Natural Science Foundation vun Zhejiang Province (Y2101329), an der Postdoctoral Science war déi Fongen vun der National Key Grondakommes Fuerschung an Entwécklung (973) plangen vu China (2011CB910800 an 2012CB917304) ënnerstëtzt, Foundation vun Zhejiang Province (2010-BSH-031). D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung Gastric Kriibs ass déi véiert stäerkste gemeinsam Kriibs a zweet Équipe gemeinsam Ursaach vum Kriibs-Zesummenhang mat Doudesfäll an der Welt [1], [2], [3]. Obwuel seng global Heefegkeet Fro huet, bleift d'Heefegkeet nach héich an asiatesch Länner [2], [4], [5]. Déi meescht vun gastric Kriibs Patienten sinn um fortgeschratt Etappen festgestallte [6]. Trotz vun Verbesserung vun Behandlung Strategien [7], [8], 5-Joer Iwwerliewe vu Patienten mat fortgeschratt gastric Kriibs déi konventionell Therapien dobäi bleift manner wéi 30% [4]. Dofir, sinn alternativ Approche dringend. VerfÜgung Gentherapie, dorënner Haren an Net-Haren Gentherapie Liwwerung System ass, eng villverspriechend Approche fir Kriibs Behandlung [9]. Ënnert all Moment sinn System, sinn recombinant adenovirus (Ad) vectors besonnesch villverspriechend. D'Virdeeler vum Ad vectors och d'Fähegkeet héich titers ze produzéieren, Fähegkeet Zellen effizient, Nepgen Stabilitéit, an nidderegen Niveau vun DNA Integratioun an Provider Nepgen [9], [10] zu globalen Partitur an Net-Partitur. Et ass confirméiert ginn, dass Restauratioun vun Genen duerch dës Approche ze entholl Réckgang féiert an induces apoptosis zu VIVO VerfÜgung ouni normal Stoffer [11] betrëfft, [12], [13]. VerfÜgung EMX2, de Mënsch ortholog vun der Villäicht sollte VerfÜgung eidel spiracles (Ems) homeobox Gentherapie, gehéiert zu der Homeobox Gentherapie Famill déi transcriptional reglementaresche Proteinen (Homeoprotein) essentiel fir vill Aspekter vum Wuesstem an dat [14] encodes. EMX2 spillt eng wichteg Roll am Gehir [15] a Vullen Entwécklung [16]. Mais ausser Collectioun homozygous EMX2 kennen dramatesch Gréisst Reduktioun vun caudal-medial Beräicher dorënner occipital cortex an Hippocampus [17], [18], [19]. Perturbation vun EMX2 Ausdrock kënnt der Verbreedung Taux vun Erwuessenen Mä Stammzellen [20] ofzeänneren. EMX2 Kontrollen och mammalian Reproduktioun vun endometrial Zell Prolifératioun ugepasst ouni dat effecting [21]. VerfÜgung rezenten Etuden proposéiere méiglech Abannung vun EMX2 zu Mënsch Cancers [22], [23], [24], [25]. Zum Beispill, huet EMX2 als entholl suppressor zu haett Kriibs Gewise ginn, an niddreg EMX2 Ausdrock ass verbonne mat ofgeholl globale Iwwerliewe a Terrain fräi Iwwerliewe vun Patienten mat haett adenocarcinomas [22], [23]. Et ass am Rapport och dass EMX2 Ausdrock zu normal endometrium vun postmenopausal Fraen räich ass, mee do oder an endometrial erhéijen reduzéiert, an EMX2 Niveau sinn negativ mat Prolifératioun [24], soll [25]. Desweideren, kann EMX2 tumorigenesis duerch Wnt sécher Passerelle regléieren, engem kriteschen Passerelle Regulatioun Zell Schicksal Determinatioun, Otemschwieregkeeten Entwécklung an tumorigenesis [26], [27], [28]. EMX2 ass als direkten repressor vun Wnt1 Ausdrock, an Sax-Ugrëff vun EMX2 Gentherapie induces an den Entwécklungslänner telencephalon an cortical dysplasia [29] ectopic Ausdrock vun Wnt1 fonnt. Epigenetic silencing vun der EMX2 Ausdrock kënnt fir aberrant Aktivatioun vun der Wnt sécher an haett Kriibs, a konsequent Prolifératioun an Metastasen [22] wichteg ginn. Allerdéngs mussen d'Funktioun vun EMX2 während tumorigenesis an entspriechend Mechanismus nach weider opgekläert ze ginn. An dëser Etude, Rapport mir EMX2 als putative entholl suppressor mënschlechen gastric Kriibs. Mir weisen der EMX2 downregulation a seng Korrelatioun mat methylation Status vun der Gentherapie Promoteur Regioun an gastric Kriibs. Mir weisen awer och, datt Restauratioun vun EMX2 eng adenoviral Liwwerung System benotzt bremst Zell Prolifératioun an Wnt sécher kënschtlech VerfÜgung, an Resultater zu besser Iwwerliewe vun engem gastric Kriibs xenograft Modell zu VIVO VerfÜgung. Eis Daten proposéiere betraff der therapeutesch Potential vun benotzt der Ad-EMX2 als Gentherapie fir Zukunft Behandlung vu Patienten mat gastric Kriibs. VerfÜgung IFLA- breakpoint VerfÜgung Dës Etude war vun der Ethik Comité vun Xuanwu Spidol, Capital Medical Universitéit zu Peking guttgeheescht. Eng schrëftlech informéiert Zoustëmmung vun der Ethik Comité ofgeseent, fir all Patient virun Otemschwieregkeeten specimen Kollektioun kritt huet. VerfÜgung Zell Kultur, 5-AZA-2'-deoxycytidine (DAC) /trichostatin A (TSA) Prefabrizéierten, an Ray Echantillon VerfÜgung Mënscherechter gastric Kriibs Zell Linnen (AZ521, AGS an MKN28) sech aus China Center fir Type Kultur Collection (Wuhan, China) kritt. Zell Strecken cultured zu Dulbecco d'geännert Eagle d'mëttel- mat 10% An et Bovine serum nà penicillin, an streptomycin bei 37 ° C an engem fiichten incubator mat 5% CO 2. Ze analyséieren Restauratioun vun EMX2 Gentherapie, goufen Zellen mat 4 μM DAC oder 300 nm TSA (Fläch, St. Louis, USA) behandelt fir 4 Deeg, mat Ersatz vun frësch mëttelfristeg d'selwecht Portioun DAC oder TSA Alldag mat. Kontroll Zellen sech cultured mat frëschen mëttelfristeg DMSO mat. Zellen sech doraus fir DNA /RNS Extraktioun recoltéiert. VerfÜgung A Ganzen 20 formalin-fix paraffin-Ënnerbewosstsinn Stoffer Bleck (10 gastric Kriibs Stoffer an 10 bascht normal Stoffer), wéi och total RNS aus 15 gastric dysplasia Echantillon an 20 gastric Kriibs chirurgesch Echantillon waren aus Xuanwu Spidol, Capital Medical Universitéit zu Peking kritt. Total RNS a Frankräich DNA vum Mënsch erwuessener normal gastric Stoffer ofgebaut goufen aus Biochain (Hayward, CA, USA) kaaft. VerfÜgung DNA gesond VerfÜgung Topflash /Fopflash gemellt wouvun wëll Typ an Mann- TCF /LEF verbindlech Siten goufen respektiv Audit vum Dr. Yeguang Chen (Tsinghua University, Peking, China) gëtt. A Mann- CTNNB1 (S45Y) cDNA bauen war och gëtt Audit vum Dr. Yeguang Chen (Tsinghua University, Peking, China). Recombinant adenovirus vectors ausdrécken EMX2 an der Kontroll Vecteure sech aus Vecteure Biolabs kaaft (Vecteure Biolabs, Burlingame, CA, USA). VerfÜgung Methylation-spezifesch Hinnen alleguer (MSP) an Bisulfite Sequencing (BS) VerfÜgung d'bisulfite Konversioun vun Stoffer an Zellen sech ouni d'Viraussetzung fir DNA Offäll benotzt EZ DNA Methylation-Direct Kit (Zymo, Orange, CA, USA) gesuergt. D'FFPE Stoffer goufen éischt de-paraffinized zu xylene (Fläch) an zu graded Ethanol rehydrated, ier bisulfite Traitement pro Fabrikatioun d'Uweisungen. Fir MSP, ass geännert DNA benotzt MSP primers Kick (ënnen opgezielt), déi speziell entweder d'methylated oder unmethylated EMX2 Promoteur Message no bisulfite Behandlung unerkannt. Hinnen alleguer war zu enger definitiver Volume vun 20 μl mat 1 × MSP Reaktioun gefiermt [30] lafen, 0,5 μM vun all primer an 1 U vun Zymo Taq VerfÜgung ™ DNA Polymerase (Zymo). Hinnen alleguer Zoustand war wéi follegt: 10 min bei 95 ° C; 40 Zykle vun 30 Spiller bei 95 ° C, 30 ass bei 50 ° C a 30 op 72 ° C; a 7 min Finale Extensioun bei 72 ° C. Fir BS, amplification vun bisulfite-ëmgerechent DNA war zu enger definitiver Volume vun 50 μl mat 1 μM all BS primer an 2 U vun Zymo Taq VerfÜgung ™ DNA Polymerase gesuergt. Hinnen alleguer Zoustand war wéi follegt: 10 min bei 95 ° C; 40 Zykle vun 30 Spiller bei 95 ° C, 40 ass bei 55 ° C an 1 min bei 72 ° C; a 7 min Finale Extensioun bei 72 ° C. D'Hinnen alleguer Produite goufen gekloonten an Sou as-18T (Takara, Dalian, China). Entweder 5 oder 3 ausgewielt positive clones aus all Grupp sech zu Shanghai Invitrogen (Shanghai, China) Nepgen. Primers sech wéi follegt zesummen: VerfÜgung MSP-M (no): 5'- TAGTTTTTTGTTCGTTTCGCGTTTC-3 "VerfÜgung MSP-M (ëmgedréint): 5'- GAATTAAAATAAACGCCCCTACCGAC-3" VerfÜgung MSP-U (no): 5'-GTTTTTTGTTTGTTTTGTGTTTTGA-3 "VerfÜgung MSP-U (ëmgedréint): 5'-CCAAATTAAAATAAACACCCCTACCAAC-3" VerfÜgung BS-A (no): 5 ' -GTTTGTAAATTTTTTTGGAAGGATTT-3 "VerfÜgung BS-A (ëmgedréint): 5'-AACAAAAAACTATCCTTAACCACCA-3" VerfÜgung BS-B (no): 5'-GGTTAGGGATTTTGTAGGGAT-3 "VerfÜgung BS-B (ëmgedréint): 5'-AAAATCACATAAACAACTTCCTCC-3 "VerfÜgung Immunohistochemistry (IHC) VerfÜgung IHC folgenden Standard Protokoll gesuergt huet. Antibodies an der Etude benotzt abegraff Maus anti-Mënsch Ki67 (1:100; BD, San Jose, CA, USA) a Maus anti-Mënsch EMX2 (1:500; Pierce, Rockford, IL, USA), a Alexa 594-conjugated Geess anti-Maus Secondaire antibody (1:200; Invitrogen, Karlsbad CA, USA). Drënner waren och mat hochest 33342 (Invitrogen) counterstained. König LSM 710 confocal microscope (Oberkochen, Däitschland) benotzt gouf de staining ënnersicht. D'Intensitéit vun Ki67 war mat Image Pro® Plus laachen. EMX2 staining war mat Histostain Plus botzt Kit (breede Spektrum, Invitrogen) visualized no Fabrikatioun d'Uweisungen, counterstained mat hematoxylin (Fläch), an fotografeschen eng Leica SCN400 Rutsch Scanner (Leica, Däitschland) benotzt. VerfÜgung Luciferase Assay BTS op eng Dicht vu 5 × 10 Immunoblotting VerfÜgung zwee total FAQ (20 μg) an Zytoplasma dovu (40 μg) sech ze immunoblotting ënnerworf. Der Primärschoul antibodies abegraff anti-EMX2 (1:500; Pierce), anti-β-Actin (1:5000; Fläch), anti-Cyclin D1 (1:500; BD) an Anti-c-Myc (1:200; Santa Cruz déi, CA, USA). VerfÜgung prolifération Assay VerfÜgung Zell Wuesstem war vun CellTiter 96 meng prolifération Assay Kit (Promega) alles. D'Zell Strecken plated an 96-gutt Kultur Placke mat der Zuel vun 5 × 10 Kolonie Formatioun Assay VerfÜgung BTS (1 × 10 RNS erauszéien a Chemeschen Real-Zäit Réckproduktioun Transkriptioun -PCR (RT-Hinnen alleguer) VerfÜgung RNS erauszéien a real-Zäit RT-Hinnen alleguer gesuergt huet wéi virdru beschriwwen [31]. D'primer Message huet virdru beschriwwen [22]. VerfÜgung Déieren Model an Adenoviral Vecteure Liwwerung VerfÜgung All Mais Experiment ënner bestëmmten pathogen-gratis Konditiounen an Déier Gebei vun Tsinghua University gehaal an duerch den institutionnelle guttgeheescht Déier Care an Benotzt Comité vun Tsinghua Universitéit. Gastric Kriibs xenografts sech etabléiert an 5-Woch-al weiblech BALB /c Sauna Mais. Kuerz, no cultured zu Niewebaach, goufen MKN28 oder AGS Zellen trypisnized an PBS (pH 7.4) an dann gemëscht 1:1 (v /v) resuspended mat matrigel (ustrengend) bei 4 ° C eng Maus an engem total Volume vun ze sprëtzen 150 μl. D'Mëschung war s.c an riets Ofwiersäit vun 16 weiblech Mais heijen mat 10 statistique Analys VerfÜgung All Donnéeën berechent sech esou heescht ± normale Hitparad. Ënnerscheeder tëschent Gruppe waren mat enger zwee-eesäitegen Schüler d'T-Test Verglach. A P VerfÜgung Wäert vun 0,05 oder manner war als bedeitendst gin. VerfÜgung Downregulation vun EMX2 zu Mënscherechter Gastric Cancer VerfÜgung Mir iwwerpréift EMX2 Ausdrock vun néng Mënsch Zell gastric Kriibs Linnen, souwéi entholl a vläit bascht normal Stoffer aus zéng gastric Kriibs Patienten (Dorënner 1). Benotzt real Zäit RT-Hinnen alleguer, hunn mer déi Ausdrock vun EMX2 bedeitend an aacht vun den néng Zell Linnen downregulated war wann iwwerpréift fir dass am Verglach zu normalen gastric Otemschwieregkeeten (P &Si besteet; 0,01, Dorënner 1A). Wéinst dem AZ521 eng Zell Linn zougedréckt ähnlechen Niveau vun EMX2 Ausdrock wéi dat an normale Kontroll (Dorënner 1A). Fir EMX2 FAQ Ausdrock vun Patient Otemschwieregkeeten Echantillon z'entdecken, immunohistochemistry (IHC) war gesuergt an d'Intensitéit vun IHC staining war vun Image Pro® Plus laachen. All zéng Echantillonen analyséiert goufen fonnt Stoffer ze weise entweder opgepasst EMX2 Ausdrock oder ofgeholl Niveau vun EMX2 Ausdrock zu Kriibs wann Verglach zu hire normal garantéieren (P &Si besteet; 0,01, Dorënner 1B). Fir d'méiglech Roll vun EMX2 zu agebousst Werdegang vun mënschlech gastric Kriibs etabléieren, analyséiert mir EMX2 Ausdrock benotzt total RNS datt mir aus fofzéng gastric dysplasia Echantillonen an zwanzeg gastric Kriibs chirurgesch Echantillon kritt. Mir hu fonnt, datt EMX2 Ausdrock vill an dysplasia Echantillon (P &Si besteet; 0,05) downregulated war. A bal zu Kriibs Echantillon am Verglach zu deem zu erwuessener normal Mo. Otemschwieregkeeten (Dorënner 1c) verluer, a proposéiert dass EMX2 downregulation bei Net-invasiv precancerous Etapp geschéie kéint um tëscht EMX2 Expression a seng Status Promoter methylation VerfÜgung Mir methylation Status vun der EMX2 Promoteur gastric Kriibs Zell Linnen an normal gastric Otemschwieregkeeten iwwerpréift an néng. Regioune vun CpG Inselen (CGI) sech mat MethPrimer vun -800 bis -470 an -55 bis 459 relativ zu der erwaart Transkriptiouns Start Siten (+1) vun EMX2 Gentherapie (Dorënner 2A) identifizéiert. Methylation Status huet andems bisulfite sequencing (BS) (Dorënner 2B) an methylation-spezifesch Hinnen alleguer (MSP) (Sauerdall 2C-2D) analyséieren. Eis BS an MSP Resultater gewisen, datt d'EMX2 Promoteur zu normal gastric Otemschwieregkeeten an AZ521 Zellen war unmethylated hierkommen, an déi aner aacht Zell Linnen iwwerpréift et déckst methylated war (Sauerdall 2B-2C). Des Resultater sinn konsequent mat der EMX2 Ausdrock Niveauen an dës Zell Linnen: héich zu normal Otemschwieregkeeten an AZ521, mee niddreg an déi aner aacht Zell Linnen iwwerpréift. Eng Mëschung vun methylated an unmethylated Band war an e puer Zell Linnen dorënner MKN28, N87, an SNU16 besot partiell methylation fonnt. Doriwwer eraus, hunn mir dass methylation Zoustand vun der Patient Otemschwieregkeeten Echantillon vun MSP réischt mat der EMX2 Ausdrock Niveau vun deene Echantillon (Dorënner 2D konsequent ass, véier vun der ten Puer Otemschwieregkeeten Echantillon wéinst der Bestellung fannen aus den anere sechs Puer Frankräich DNA iwwerpréift goufen ). Dës Donnéeë hindeit, datt downregulation vun EMX2 Ausdrock e Resultat vun hirem Promoteur zwéinHyperfeinstrukturniveaue-methylation zu gastric Kriibs kann. VerfÜgung weider Fir d'Korrelatioun tëscht EMX2 Ausdrock an de Promoteur methylation ermëttelen, behandelt mir MKN28 an AGS Zell Linnen mat engem methyltransferase inhibitor DAC an enger inhibitor TSA histone deacetylase. Zell Linn AZ521 benotzt gouf als negativ Kontroll wéi seng Promoteur Regioun unmethylated ass. Mir gesinn, datt den unmethylation spezifesch Band huet vill méi (Dorënner 3A) mat Niveauen EMX2 Ausdrock upregulated Wierder (Dorënner 3B) op DAC Behandlung an zwee AGS an MKN28 Zellen, am Ufank nëmmen déi vun AZ521 Zellen onverännert blouf (Dorënner 3). D'Behandlung vun TSA hat minimal Auswierkungen op béide methylation Status an EMX2 Ausdrock Niveauen. Geholl zesummen, eis Resultater proposéiere betraff der verwandelt-Regulatioun vun EMX2 Ausdrock vill mat der EMX2 Promoteur hypermethylation zu Mënsch gastric Kriibs soll war. VerfÜgung Inhibition vun Zell Wuesstem vun Adenovirus-geliwwert EMX2 kënschtlech VerfÜgung mir iwwerpréift nächst der Roll vun EMX2 op Zell Wuesstem vun gastric Kriibs Zellen. De Wuesstem vun AGS an MKN28 Zellen war vill op Wonn Trupen mat adenovirus ausdrécken EMX2 (Ad-EMX2) am Verglach mat eidelen Vecteure Kontroll (Ad-Ctrl) (P &Si besteet; 0,001, Dorënner 4A), wobäi de Wuesstem vun AZ521 Zellen net war betraff (P > 0,05, Dorënner 4A). Dës Observatioune goufen awer och vun Amphipolis Opstellung assay (Dorënner 4B) confirméiert. Eis Resultater beweisen der anti-Prolifératioun Funktioun vun EMX2 zu gastric Kriibs Zellen VerfÜgung Herzogtum vun Wnt sécher Passerelle vun Adenovirus-geliwwert EMX2 VerfÜgung D'Funktioun vun EMX2 huet zu Wnt sécher Passerelle matenee verbonne ginn. dofir studéiert mir d'Relatioun tëscht EMX2 an Wnt sécher an gastric Kriibs. Mir ginn eng Topflash /Fopflash reporter assay TCF /LEF-ofhängeg Transkriptiouns Aktivitéit vum kanonesche Wnt Passerelle regulariséiert ze moossen. Mir hu fonnt, datt TCF /LEF-ofhängeg Transkriptiouns Aktivitéit vill vun Ad-EMX2 zu AGS an MKN28 Zellen subtil endogenous EMX2 Ausdrock inhibited war (P &Si besteet; 0,05), mee net an AZ521 Zellen ausdrécken endogenous EMX2 (P > 0,05, Dorënner 5A). Konsequent, FAQ Niveau vun cytosolic β-catenin an kanonesche Wnt Passerelle afgerappt Ziler c-myc an cyclin D1 an dës AGS an MKN28 Zellen Krankheet mat Ad-EMX2 opgeléist huet, mä net am AZ521 Zellen (Restauratioun vun EMX2 Ausdrock an dës Zell Reien ad-EMX2 Wonn vun Western bestätegt gouf) (Dorënner 5B). Fir weider ënnersicht d'Relevanz vun Wnt Passerelle verwandelt-Regulatioun an Prolifératioun Ophiewe vum Ad-EMX2, mir transfected an ausdrécke stabiliséiert β-catenin (S45Y stattfannen) zu dësen gastric Kriibs Zellen Krankheet mat Ad-EMX2. Mir gesinn, dass iwwer-ausdrécken β-catenin bedeitend de Wuesstem Ennerdréckung Effet vum Ad-EMX2 zu souwuel AGS an MKN28 Zellen attenuated (P &Si besteet; 0.01), mee net an AZ521 Zellen (Dorënner 5C). Geholl zesummen, ënnerstëtzt dës Resultater eng wichteg Roll vun EMX2 an Ennerdréckung vun Wnt Passerelle an gastric Kriibs. VerfÜgung Herzogtum vun Gastric Cancer Wuesstem vun Adenovirus-geliwwert EMX2 zu VIVO VerfÜgung Mir der MKN28 etabléierten a AGS xenograft Modeller der therapeutesch Potential vun adenovirus-geliwwert EMX2 fir gastric Kriibs zu VIVO VerfÜgung ze entdecken. Eng Woch no inoculation, Mais lokal erhéijen Träger rangéiert vun 50 bis 100 mm Homeobox Genen gewiescht fir hir Bedeitung an Entwécklung fir Joerzéngten bekannt, iwwerdeems d'Etude vum dës Genen während oncogenesis ass nach an hirer Kandheet. Aberrant homeobox Gentherapie Ausstralung goufen zu verschiddenen Cancers [32], [33], beweist den Ännerunge vum hemeobox Ausdrock kéint wichteg fir oncogenesis dokumentéiert. Dëst kann e molekulare Basis fir potentiell Medeziner Uwendungen gëtt. Allerdéngs mussen e puer fundamental Froen nach komplett Adress ginn, déi molekulare Mechanismen dorënner datt d'aberrant Ausdrock, an afgerappt Ziler a sécher Weeër fueren datt oncogenesis förderen. An dëser Etude, déi mir Abléck op dës Froe vun EMX2 mënschlechen gastric Kriibs enquêtéiert. VerfÜgung Eis Etude confirméiert eng drastesch ofgeholl a Verloscht vun EMX2 Ausdrock vun gastric Kriibs Zell Linnen an alleréischter entholl Stoffer, a gewisen, datt d'downregulation huet vill mat zwéinHyperfeinstrukturniveaue-methylation vun der EMX2 Promoteur, proposéiert epigenetic silencing als eng wichteg Mechanismus fir EMX2 dysregulation zu Mënsch gastric Kriibs soll. Tatsächlech huet epigenetic Ännerunge ginn als e Schlëssel Mechanismus responsabel fir homeobox Genen downregulation oder silencing an aner Kriibs Otemschwieregkeeten Zorte wou dës Genen Funktioun vun entholl Ennerdréckung [14], [32] proposéiert. Desweideren, eis Observatioun vun EMX2 dowregulation an Net-invasiv gastric dysplasia ënnerstëtzt eng méiglech wichteg Roll vun EMX2 zu agebousst Werdegang vun mënschlech gastric Kriibs. One begrenzten Dauer vun eiser Etude ass d'Zuel vun Otemschwieregkeeten Echantillonen analyséiert. Eng grouss Zuel vu Patient Echantillon brauchen d'Opklärung vun methylation-silencing vun EMX2 zu gastric Kriibs ze weider validéieren iwwerpréift ginn. Trotzdem, déi eis Resultater engem éischten direkte Beweis dësem Mechanismus zu gastric Kriibs an z'identifizéieren EMX2 als putative Roman entholl suppressor zu gastric Kriibs ze ënnerstëtzen. VerfÜgung Zousätzlech, mir wichteg oncogenic Weeër duerch dat EMX2 funktionéiert an gastric Kriibs propagéieren , fonnt an datt Wnt sécher Passerelle eng Schlësselroll mediating der EMX2 Funktioun spille kann. Mir illustréiert an Prolifératioun assays datt héich Ausdrock vun exogenous EMX2 vill Trupen Wuesstem vun gastric Kriibs Zell Linnen endogenous Gentherapie Ausdrock subtil (AGS an MKN28 Zellen), konsequent mat virdrun Rapporten, déi Differenz zu EMX2 Ausdrock negatif mat Verbreedung vun anere Kriibs Zell Zorte soll ass [ ,,,0],24], [25]. Mir bewisen, och dass Wnt sécher Passerelle Trainer vun EMX2 inhibited war zu VIVO VerfÜgung a kënschtlech VerfÜgung, suergt weider Beweiser datt Wnt sécher Passerelle d'Funktioun vun EMX2 zu Kriibs Mediate kann wéi virdrun proposéiert [22 ]. VerfÜgung Endlech, eis Resultater d'Potential vun benotzt EMX2 Gentherapie fir d'Behandlung vun gastric Kriibs unzeginn. Wonn vun erhéijen mat Ad-EMX2 vill Trupen Prolifératioun a méi wichteg, verbessert globale Iwwerliewensfro. Et ass wichteg, dass d'Liwwerung System mir fir d'Behandlung benotzt recombinant adenovirus serotype 5 (Ad5) war, déi oft benotzt Vecteure an e puer Zorte vu Kriibs Gentherapie [11], [12], [34], [35]. Verglach mat adeno-verbonne Haren (AAV) a Realitéit Liwwerung Systemer, adenoviral vectors, wéi Ad5, hunn haut vill Virdeeler. Zum Beispill, hunn adenoviral vectors breet tropism Délaie efficace op ville Stoffer vun Interessi gezielt, e grousse Rakéite Muecht an héich transduction Effizienz famill ze AAV System [10] an engem och Net-integréiert Charakteristiken, déi soss de Risiko vun zoufälleg mutagenesis vun Nepgen [induce ,,,0],10], [36] [36], [37], [38]. Desweideren, kann adenoviral vectors zu Kriibs-selektiv oncolytic Viren esou ginn [39], [40], [41], déi fir de Medeziner Applikatioun vun Kriibs Gentherapie kritesch sinn. Mä et sinn nach vill Erausfuerderungen vun benotzt adenoviral vectors Gentherapie Therapien an Patienten ze liwweren. Zum Beispill, kann se séier aus Zellen verluer ginn, datt séier no Wonn Gruef. Aner Facteure Medeziner Applikatioun vun adenoviral Liwwerung och Verpackungen Muecht an Provider Gamme vun adenoviral vectors, hir Gene Ausdrock Profil an Tendenz Auswierkungen op immun Äntwerte dran, virun allem wichteg wann widderholl Administratioun waren ass [42], [43]. Trotzdem, eisem zu VIVO VerfÜgung Etude vum Ad-EMX2 Wonn hindeit datt EMX2 Gentherapie Potential hun kann engem Medeziner anti-entholl therapeutesch Strategie fir d'Behandlung vun gastric Kriibs an der Zukunft ze ginn. VerfÜgung
Aféierung VerfÜgung
spontan a Methode VerfÜgung
Resultater VerfÜgung
Diskussioun VerfÜgung
Neit Tool fir den Darmmikrobiom ze entschlësselen
Wëssenschaftler entwéckelen eng Approche fir géint Darmentzündung ze vaccinéieren
Liewerfunktioun ka wichteg sinn am Risiko vun der Alzheimer Krankheet
Fuerscher fannen neie Wee fir géint Krankheet am MS Modell ze schützen
Schlofqualitéit kéint Indikator fir spéider Alzheimer Krankheet fënnt Studie
Kanner sinn immun virbereet op SARS-CoV-2
Leaky Darm a Raumfluch - de Mechanismus opgedeckt
Eng nei Studie iwwer dEffekter vun der simuléierter Mikrogravitatioun, dKonditioun, déi Astronauten am Weltraum stellen, stéiert depithelial Barriär vum Darm, an den Effekt bestoe bleift och nodeems d
Darmmikrobiota kéint d'Gravitéit vum COVID-19 viraussoen
DCOVID-19 Pandemie verbreet sech an all Eck vun der Welt. Awer net jiddereen gëtt mam selwechten Taux krank. Eng nei Studie verëffentlecht um Pre -Print Server medRxiv am Abrëll 2020 seet datt dKomp
Planzbaséiert Diät kéint Är rheumatoide Arthritis heelen
Laut der leschter Bewäertung, eng Planzbaséiert Ernärung unzehuelen kéint déi geschwollen Gelenker a Péng vun der rheumatoider Arthritis (RA) gutt entlaaschten. RA ass autoimmun am Urspronk, eng sch