PLoS ONE: In vitro apibūdinimas Rapid citotoksiškumo priešvėžinis Polipeptidas HPRP-A2 per membraninį naikinimo ir Intraląstelinė mechanizmo prieš Skrandžio vėžio ląstelių Lines

Anotacija

Šiame tyrime HPRP-A2, sintetiniu 15-Mer katijoninių peptidai su visais D-amino rūgščių, veiksmingai slopina skrandžio ląstelių linijų išgyvenimą priklausomai nuo dozės priklausomu būdu. Skrandžio naviko ląstelės žmogžudystė HPRP-A2 apima greitą žlugimą membranos vientisumo ir ląstelėje kelius. Propidiumo jodido (PI) ir laktato dehidrogenazės (LDH) tyrimai parodė, kad vieną valandą gydymo HPRP-A2 lėmė membranos pralaidumo pokyčius BGC-823 ląstelių dozės priklausomu būdu. Be to, HPRP-A2 sukeltos apoptozės į bgc-823 ląstelių apima padidėjimą kartos reaktyviųjų deguonies formų (ROS), kaspazės-3, -8 ir -9 aktyvavimo, iš mitochondrijų membranos potencialo (MMA), ir ląstelės ciklo sulaikymas G1 fazėje. Be to, jos prigimtiniam citotoksiškumo, HPRP-A2 synergized stipriai su doksorubicinu (DOX) didinti žudyti skrandžio naviko ląsteles efektyvumą I N vitro
. Mes tikime, kad HPRP-A2 su visais D-aminorūgščių gali būti stiprus kandidatas vėžio terapijos, ypač kombinuotas gydymas

nurodomoji dalis:. Zhao J Cha x Liu D Huang Y Chen Y (2015 ) in vitro
apibūdinimas greitojo citotoksiškumo priešvėžinis Polipeptidas HPRP-A2 per membraninį naikinimo ir Intraląstelinė mechanizmo su skrandžio vėžio ląstelių linijų. PLoS ONE 10 (9): e0139578. Doi: 10,1371 /journal.pone.0139578

redaktorius: Aamir Ahmadas Wayne State University School of Medicine, JAV

Įstojo: Lie 2, 2015 m Priimta rugsėjo 15, 2015 m Paskelbta rugsėjo 30, 2015

Visos teisės saugomos: © 2015 Zhao et al., Tai atviros prieigos straipsnis platinama pagal Creative Commons Attribution licencija, kuri leidžia nevaržomai naudotis, paskirstymo ir dauginimąsi bet kokioje laikmenoje sąlygomis, su sąlyga, kad pirmasis autorius ir šaltinis įskaitomos

Duomenų Prieinamumas: Visi susiję duomenys yra per popieriaus

finansavimas:. Šis tyrimas parėmė Nacionalinės Gamtos mokslo fondo Kinijos (Nr 81373445, YXC ir Nr 21.442.001, YBH) ir Gamtos mokslų fondas Jilin provincijoje (Nr 20150101189JC , YC ir Nr 20140101042JC, YBH). Į finansuotojai neturėjo vaidmenį studijų dizainas, duomenų rinkimo ir analizės, sprendimų skelbti, ar ruošiant rankraštį

konkuruojančių interesų.. Autoriai pareiškė, kad nėra konkuruojantys interesai egzistuoja

Įvadas

per pastaruosius dešimtmečius, nors atradimų buvo pasiekta vėžio gydymo, atsparumo ir nespecifinio toksinio poveikio įprastinių narkotikų kūrimu vis dar butelio kaklo klausimai potencialiems klinikinės praktikos [1-3]. Vadinasi, ji skubiai reikia kurti naujus vaistus, su skirtingų rūšių veiksmų, kurie gali įveikti daugelio turimų vaistų trūkumus.

Šiuo metu potencialūs paraiškų priešvėžinių peptidų (AKR) kaip gydomieji preparatai, skirti vėžiui gydyti progresavimo pritraukti daugiau dėmesio nei įprastinės chemoterapijos daugiausia dėl šių savybių: (1) aukštos specifika. Į teigiamo krūvio peptidai pasirinktinai nukreipti vėžines ląsteles, turinčias neigiamą mokesčius ir skirtingų membranų komponentai nuo normalių ląstelių [4, 5] (2) Nauji veikimo. Tai gali padėti išvengti įkurta daugiskaitos pasipriešinimo mechanizmus [5-7]; (3) sinergetinis priešvėžinis efektas su chemoterapiniai vaistai. Buvo pranešta, kad tam tikri AKR šalims gali sukelti sinergetinį vėžio veikla, kai kartu naudoti įvairių įprastinių vaistų nuo vėžio [8-10].

bendras mechanizmas peptidų sukelta ląstelių mirtis yra citoplazmos membranos sutrikimus per micellization ar porų susidarymo , nors kai kurie iš AKR pranešama, kad sukelti apoptozę mirties receptorių kelią ir /ar mitochondrijų keliu [8, 11]. Be to, porų formavimas ant ląstelės membranos ir membranų pralaidumas kaitos gali suteikti geresnį kanalą, skirtą kitų priešvėžinių narkotikų patekimo į ląsteles ir padidinti savo priešvėžinių veiklą [8, 12].

Mūsų ankstesnį tyrimą įrodė, kad HPRP-A2 gali sukelti ląstelių mirtį ir kartu sustiprinti DOX /epirubicino (EPI) indukuotų apoptozę HeLa ir HepG2 ląstelių linijų [12]. Be to, dėl to, kad D-amino rūgščių sudėties, HPRP-A2 yra atsparus saitą proteolitinio skaldymo ir išlaiko lygiaverčių priešvėžinių veiklą savo L enantiomerų [6, 12]. Remiantis ankstesniais tyrimais, mes siekiame pasiekti du tikslus šiame tyrime: iki apibrėžti pagrindinės vėžio mechanizmą HPRP-A2 ir ištirti sinergetinį vėžio poveikį BGC-823 ir Tarybos generalinis sekretoriatas-7901 ląstelių, kai ji derinama HPRP-A2 su DOX.

medžiagos ir metodai

Mobilaus ryšio linijų ir ląstelių kultūros

Žmogaus skrandžio vėžio ląstelių linijas BGC-823 ir Tarybos generalinis sekretoriatas-7901 buvo gautos iš Amerikos tipas kultūros rinkinys, kuris įteisina ląstelių linijos pagal trumpas-tandemo pakartoti DNR tyrimai, buvo naudojami per 6 mėnesius nuo reanimacijos ir auginami DMEM su vaisiaus galvijų serumo (FBS; 10% v /v), penicilino v (100 v /ml), ir streptomicino (100 v /ml) drėgnoje atmosferoje 37 ° C temperatūroje su 5% CO _2.

Polipeptidas sintezė ir valymas

peptidas buvo sintetinamas kietosios fazės peptidų sintezei naudojant Fmoc (9-fluorenilas -methoxycar-bonyl) chemija, kaip aprašyta anksčiau [13]. Charakterizuojami buvo aptikta masių spektrometrija ir aminorūgščių analizę. DOX · HCl perkamos iš Meilun biologijos technologijų Co, Ltd (Dalian, Kinija).

Ląstelių gyvybingumas tyrimai

BGC-823 ir Tarybos generalinis sekretoriatas-7901 ląsteles (5 × 10 ^{3) buvo padengtas trimis egzemplioriais 96 duobučių mikrotitravimo plokščių. Pilnas vidutinio buvo pakeistas po 24 h su 100 įxL šviežią terpę, kuriame įvairias koncentracijas narkotikų. Po dar 24 h, ląstelės buvo inkubuojamos su 3- (4,5-dimetil-2-tiazolilas) -2,5-difenil-2H-tetrazolio bromido (MTT), esant 37 ° C temperatūroje iki 4 h. Po dimetil (DMSO) buvo įtraukta į ištirptų formazano kristalai ir prie 492 nm, absorbcija buvo išmatuota mikroplokštelių skaitytuvas (GF-M3000; Gaomi Caihong Analytical Instruments Co, Shandong, Kinija). Jin formulė buvo naudojamas dar kiekybiškai sinergetinį poveikį deriniu gydant HPRP-A2 ir DOX. Formulė yra: q = Ea + B /(EA + Eb-EA × eb), kur Q yra derinys rodyklė; Ea + b atstovauja ląstelių proliferacijos slopinimo koeficientas sujungtojo narkotikų; Ea ir Eb požymiai ląstelių proliferacijos slopinimo norma kiekvieno vaisto. Po apskaičiuoti. Q < 0,85, K > 1,15 ir 0,85 < K < 1,15 rodo, antagonizmas, sinergija, ir adityvus poveikis, atitinkamai [14]}

hemolizė veikla tyrimas

hemolizė veiklos analizė buvo vykdomi, kaip aprašyta anksčiau [13]. Gauti raudonųjų kraujo kūnelių, švieži žmogaus kraujo stabilizuotas EDTAK buvo centrifuguojamas 1000 apsisukimų per minutę 5 min, plaunama du kartus PBS ir skiedžiamas iki galutinė koncentracija būtų 2% PBS. 70 pL 2% žmogaus eritrocitų buvo pridėta į apvaliadugnės 96 šulinėlių plokštelės, po to 70 pL skirtingų koncentracijų HPRP-A2. Po inkubacijos 37 ° C temperatūroje 1 valandą, o, plokštelė buvo tada centrifuguojamas esant 3000 apsisukimų per minutę 10 min ir 90 pL supernatantą buvo perkeltas į plokščiu dugnu 96-šulinėlių plokštelės. Hemoglobino laida buvo nustatomas matuojant supernatanto absorbciją prie 540 nm bangos ilgiui. Eritrocitai PBS ir distiliuotas vanduo (dH _{2O) buvo naudojami kaip Teigiamų ir neigiamų kontrolių, atitinkamai. Hemoliziniu aktyvumu buvo apskaičiuota kaip eksperimentinio grupės ir teigiama kontrole procentais, atėmus neigiamos kontrolės atitinkamai. Duomenys yra vidurkis ± SD trijų nepriklausomų eksperimentų.}

VšĮ tyrimas

BGC-823 ląstelės (1 × 106 ląstelių /gerai), buvo pasėjamos į šešių duobučių lėkštelėse. Po inkubacijos su HPRP-A2 (5, 10, 15 mikromolių) už 1 h, ląstelės buvo surinkti ir po to yra veikiamas su 5 g /ml PI, esant 4 ° C temperatūroje 10 minučių tamsoje. Ląstelės buvo plaunamos PBS tris kartus ir tada nustatyti fluorescencijos intensyvumą PI naudojant tėkmės citometrijos (FACSCalibur, Becton-Dickinson, San Chosė, CA, JAV).

LDH spaudai

LDH spaudai aktyvumas buvo matuojamas LDH bandymo komplektas (Jiancheng Bioinžinerijos, Ltd, Kinija) pagal gamintojo nurodymus. BGC-823 ląstelės buvo pasėtos ne 5 × 10 ^{3 ląstelių /gerai 96 šulinėlių plokštelės. Po inkubacijos su HPRP-A2 (5, 10, 15 mikromolių) už 1 h, LDH spaudai skystyje virš nuosėdų buvo matuojamas mikroplokštelių skaitytojui (GF-M3000; Gaomi Caihong Analizės Instruments Co, Ltd Shandong, Kinija) ne 450 nm bangos ilgiui. Ląstelės, nepasižyminčios gydymo ar lizuoti su Triton X-100 buvo naudojamas kaip Teigiamų ir neigiamų kontrolių, atitinkamai. Visi eksperimentai buvo atlikti trimis egzemplioriais. LDH aktyvumas buvo apskaičiuota kaip eksperimentinės grupės ir teigiamos kontrolės procentą, atėmus neigiamos kontrolės atitinkamai.}

ROS tyrimas

ROS tyrimas komplektas (BestBio, Co Šanchajus, Kinija) buvo naudojamas aptikti ROS kartos. Ląstelės (1 × 106) buvo gydomi HPRP-A2 (5, 10, 15 mikromolių) 1 valandą. Vėlesni procedūros atliekamas pagal gamintojo protokolą. Trumpai tariant, ląstelės suardomas tripsino buvo centrifuguojamas 1500 apsisukimų per minutę 3 min, tris kartus plaunamos PBS ir po to suspenduojamas 500 pL PBS. Po inkubacijos su 2 ', 7'-dichlorofluorescin diacetatas (DCFH-DA) fluorescencinio zondo 20 min 37 ° C temperatūroje, ląstelės buvo plaunamas PBS tris kartus, ir nustatė, žalią fluorescencijos intensyvumas (į GEOMEAN), taikant tėkmės citometrijos metodą. Žalia fluorescencijos intensyvumas buvo teigiamai koreliuoja su ROS lygiu.

Matavimas MMP

MMP lėmė mitochondrijų membranos potencialų bandymo komplektas su 5,5 ', 6,6'-tetrachloro -1,1 ', 3,3'-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine jodido (JC-1), kuris yra mitochondrijų veikla (BestBio, Co, Šanchajus, Kinija) zondas. JC-1 yra visada naudojamas aptikti mitochondrijų depoliarizaciją pasitaikančiam ankstyvosiose stadijose apoptozės. Kai ląstelės su dideliu MMP JC-1 susirinko į mitochondrijų matricos, formuoti J-agregatus ir gaminti raudoną fluorescenciją. Priešingai, elementai, kurių sudėtyje JC-1 monomero monomero monomermonomer turi žemą MMP ir parodyti žalią fluorescenciją. Mitochondrijų depoliarizacija nulėmė raudonoje (590 nm, FL-2 kanalo) /žalia (530 nm, FL-1 kanalas) fluorescencijos intensyvumas santykis sumažėjo. Trumpai, po gydymo su HPRP-A2 (5, 10, 15 mikromolių) 1 valandą, o, BGC-823 ląstelės buvo surinkti ir inkubuojami su 0,5 ml JC-1 darbinis tirpalas 20 min 37 ° C temperatūroje, tada du kartus plaunamas PBS, sustabdytas PBS, ir analizuojami tėkmės citometrijos (FACSCalibur, Becton-Dickinson San Chosė, CA, JAV).

kaspazės veikla tyrimas

Ląstelės buvo gydomi HPRP-A2 (10, 15 mkm) 24 val ir tada lygiai kaspazės veikla buvo matuojamas naudojant atitinkamus kaspazės veiklos aptikimo rinkiniai (BestBio, Co., Šanchajus, Kinija), pagal gamintojo nurodymus. Vidutinis duomenys pateikiami kaip vidurkis ± SD bent trijų nepriklausomų eksperimentų.

Mobilaus ryšio ciklo analizė

BGC-823 ląstelių (1 × 10 ^{6) buvo pasėjamos į 6-gerai plokštės 24 h. Po indukcijos su HPRP-A2 (5, 10, 15 mikromolių) 24 val, ląstelės ciklo paskirstymas lėmė FACScan citometro ir ląstelių Quest Software (FACS Calibur, Becton-Dickinson, San Chosė, CA, JAV). Visi eksperimentai buvo atliekami trimis egzemplioriais.}

Statistinė analizė

duomenys pateikiami kaip reiškia ± SD trijų nepriklausomų analizių. Statistinis reikšmingumas skirtumų tarp grupių buvo analizuojami T
-test, su svarba priimtas P
< 0,005 (*) ir P
< 0,001 (**).

Rezultatai

peptidų ir citotoksiškumo

Kaip parodyta 1 pav, peptidų HPRP-A2 yra 15 išspaudų α-cilindrinių krumpliaračių amfipatinio membrana aktyvus peptidas, sudarytas iš visų d-amino rūgščių. Lyginant selektyvus toksiškumą HPRP-A2 link skrandžio vėžio ląsteles ir normalių ląstelių (žmogaus raudonųjų kraujo ląstelių), mes galime lengvai suprato, kad IC _{50 (iš narkotikų koncentracija, kuriai esant ląstelių gyvybingumas buvo sumažintas 50%, palyginti su negydyta ląstelės) vertės yra gerokai mažesnis nei minimalus hemolizinė koncentracijos (toliau vaisto koncentracijos, kad atsirado 20% ląstelių hemolizės) iš HPRP-A2. Šie rezultatai parodė, kad HPRP-A2 galite pasirinktinai nužudyti skrandžio vėžio ląsteles ir atsarginių normalias ląsteles (Figos 2 ir 3). Panašūs priešvėžinių veikla dviejų ląstelių linijas (BGC-823 ir Tarybos generalinis sekretoriatas-7901) nurodė, kad ten buvo plataus spektro poveikis priešvėžinio veikimo HPRP-A2. Dėl savo membranos aktyvumo charakteristika, HPRP-A2 rodo vėžio gydomąjį potencialą, nes ji yra labiau selektyviai toksiškai į vėžinių ląstelių negu normalios ląstelės.}

HPRP-A2 sukeltas membranos laidumo
stiprinimą

siekiant patikrinti, ar membranos pralaidumo pokytis po inkubacijos su HPRP-A2, ląstelių įsisavinimu PI ir tarpląstelinio išleidimo LDH buvo tiriama su tėkmės citometrijos ir mikroplokštelės skaitytojo link BGC-823 ląstelių. Kaip parodyta Fig 4, kad tėkmės citometrijos grafikų PI palaipsniui judėti prie aukštos fluorescencijos intensyvumas kryptimi nuo koncentracijos priklausomu būdu, ir išskiriamas padidintas LDH taip pat buvo pastebėta, kad ląstelių, inkubuotuose su HPRP-A2. Tai yra, HPRP-A2 gali sukelti ląstelių membranos žalos ir sukelti ląstelių membranų pralaidumui didinti.

HPRP-A2 sukelia mitochondrijų funkcija
nuostolius

ląstelėje reaktyviosios deguonies rūšys (ROS) išleidimas ir mitochondrijų membranos potencialas (MMP) buvo aptikta su FACS atspindėti mitochondrijas funkciją BGC-823 ląstelių in vitro
. Kaip parodyta Fig 5A, srauto citometrijos histograma iš ląstelių, inkubuotuose su aukštesnės koncentracijos HPRP-A2 atskleidė didesnį fluorescencijos intensyvumas po inkubacijos 1 val. Atitinkamą tėkmės citometrijos kiekybinis palyginimas fluorescencijos intensyvumo GEOMEAN šiuose skirtingų koncentracijų parodė panašią tendenciją, ty kad padidėjo spaudai ROS BGC-823 ląstelių į HPRP-A2 akivaizdoje buvo koncentracijos priklausomas. Panašus koncentracijos priklausomas keičiasi tendencija taip pat buvo pastebėtas pav 5B, kad FL2 H /FL1 H santykis gerokai sumažėjo, kas rodo, kad MMP depoliarizaciją.

kaspazės aktyvavimo ir ląstelių ciklo analizė

aktyvinimas kaspaze 3 -8 ir -9 į HPRP-A2-sukeltų ląstelių buvo matuojamas naudojant su mikroplokštelių skaitytuvas 405 nm. Kaip parodyta Fig 5C, kaspazės-3, -8 ir -9 visi buvo padidėja po gydymo su HPRP-A2 24 h BGC-823 ląstelių, kuri rodo, kad apoptozės indukcija pagal HPRP-A2 gali būti kaspazė-priklauso , Kaip parodyta 6 pav, BGC-823 ląstelių gydomi įvairių koncentracijų HPRP-A2 (5, 10, 15 mikromolių) 24 val lėmė į pietus G1 arešto didėja ir G1 arešto. Šie duomenys taip pat sustiprino padidėjusį kaspazės-3 aktyvumą po HPRP-A2 gydymą.

HPRP-A2 sukeltas padidėjimas DOX citotoksiškumo

BGC-823 ir Tarybos generalinis sekretoriatas-7901 ląstelės buvo pasirinktas studijuoti sinergetinį vėžio poveikį HPRP-A2 ir chemoterapinio vaisto DOX. Ląstelės buvo gydomi HPRP-A2 (6 mikronų) ir /arba DOX (1,6 mikrogramų /ml) 4, 24 ir 48 h. MTT tyrimai buvo naudojami įvertinti kombinacyjnych priešvėžinių poveikį ląstelėms. Narkotikų koncentracija pažymėtus šiame tyrime buvo grindžiami IC _{50 vertybių vien kiekvieno vaisto. Nebuvo aišku, citotoksiškumo ar augimo sumažėjimas, kai kiekvienas vaistas buvo naudojamas vienas. Priešingai, kai naudojamas peptidų /narkotikų derinių (HPRP-A2 /DOX) tuo pačiu dozėmis naudojami vieni, derinys eksponuojami didelį toksiškumą (7 pav). Taip pat aišku, kad nuo vėžio veikla HPRP-A2 nebuvo daug įtakos inkubavimo metu; priešingai, su inkubacijos laikas padidinti iki 48 h, DOX rodo daug didesnį vėžio aktyvus, kaip, kad 4 h, nurodant visiškai skirtingi veikimo mechanizmai, tarp AKR ir chemoterapinio vaisto. Pasak Jin formulę, visi Q (derinys puslapis) vertės buvo didesnis nei 1,15, o tai rodo, kad buvo reikšmingi tarpusavio sinergetinis poveikis a-cilindrinių krumpliaračių peptido HPRP-A2 ir paprastųjų priešvėžinio vaisto DOX į BGC-823 ir Tarybos generalinis sekretoriatas-7901 ląstelių .}

Diskusijos

Nuodai peptidai (AKR) neseniai sulaukė didelio mandagumas perspektyviomis chemoterapiniais preparatais, kurie būtų išvengta dabartinių vaistų trūkumus. Daugelis tyrimų patvirtino, kad kai kurie sintetiniai ir natūralūs katijoninės peptidai turi greitą ir platų spektrą nuo vėžio veiklos perkėlimui į auglio ląsteles, o ne normalios ląstelės, kaip antai žmogaus raudonųjų kraujo kūnelių [4, 15]. Be to, AKR šalims taip pat buvo patikrinta turėti galimybę įveikti daugiskaitos atsparumo mechanizmą, ir sinergetinį poveikį kombinuotą gydymą [11].

HPRP-A2 turi greitą ir platų spektrą nuo vėžio veiklos, tačiau, kai skirtumai taip pat pasitaiko atsižvelgiant į HPRP-A2 jautrumo skirtingų ląstelių linijų. Remiantis įvairių IC _{50 vertes HPRP-A2 BGC-823 (8.65 ± 0,38 mkm), Tarybos generalinis sekretoriatas-7901 (10.42 ± 0,30 mkm), PC3 (21,38 ± 0,56 mkm) ir B16 (19.16 ± 0,38 mkm ), mes pasirinkome BGC-823 ir Tarybos generalinis sekretoriatas-7901 ląstelių, mokslinių tyrimų tikslus. Be to, nuo vėžio veikla HPRP-A2 iki kitų vėžio ląstelių linijų, pavyzdžiui, HeLa ir HepG2 buvo paskelbti mūsų ankstesniame dokumente [12]. Abu BGC-823 ir Tarybos generalinis sekretoriatas-7901 ląstelių priklauso skrandžio ląstelių linijų, todėl mes išrinkome bgc-823, kaip pavyzdžiui, ištirti vėžio mechanizmą HPRP-A2 in vitro
.}

šiame tyrime mes parodėme, kad HPRP-A2 yra amfipatinio α-cilindrinių krumpliaračių peptidas su gerokai priešvėžinio aktyvumo į BGC-823 ir Tarybos generalinis sekretoriatas-7901 ląstelių linijų. Mūsų tyrimai parodė, kad HPRP-A2 eksponuojama vėžio-selektyvus toksiškumą, daugiausia dėl to, kad vėžio ląstelės yra sudarytas iš daugiau anijoninių fosfolipidų ir yra O-glikozilintą mucino, kuri padidina neigiamą krūvį dėl vėžio ląstelės paviršiaus [16, 17]. Be to, vis daugiau microvilli vėžio ląstelių galima padidinti privalomo peptido koncentracija plečiant membranos paviršių ir tokiu būdu parodyti didesnį toksiškumą prieš vėžio ląstelių membranas [11, 18].

AKR šalims gali sutrikdyti ląstelių membraną, kuri gali sukelti ląstelių membranos pralaidumo pokyčius. Šiame tyrime iš BGC-823 ląstelių membranos pokyčiai buvo pastebėtas aptikti PI-permeabilization ir LDH spaudai. Palaipsniui didėja PI permeabilization ir LDH išleidimo yra koncentracijos priklausomu manieros po gydymo HPRP-A2. Be to, HPRP-A2 sukelta ląstelių mirtis yra susijusi su reaktyviųjų deguonies formų gamyba, iš MMP, iš kaspazės veiklą įjungimo ir į G1 fazę ląstelės ciklo bloko depoliarizacijos.

Be to, kas citotoksiškumo HPRP-A2, mes įrodė, kad gali padidinti DOX veiksmingumą prieš BGC-823 ir Tarybos generalinis sekretoriatas-7901 ląstelių, kuris yra suderinamas su mūsų ankstesniame tyrime. Mūsų ankstesniame tyrime, turime ištirti kombinacyjnych vėžio gydymas naudojant α-sraigtinis peptidai HPRP-A1 ir HPRP-A2 su cheminių narkotikų DOX ir EPI in HeLa ir HepG2 ląstelių linijų [12]. Sinergija parodyta leidžia sąlyginai nedidelės koncentracijos peptidai ir narkotikų naudojimo pasiekti reikšmingų priešvėžinių poveikį in vitro parsisiųsti ir vivo
. Ši dozė mažinimas sumažina narkotikų šalutinį poveikį normalios ląstelės ir įgalina efektyviai apoptozę tarpininkaujant vėžio poveikį. Mūsų dabartinis tyrimas turi įtakos šioje HPRP-A2 gali tapti perspektyvi vėžio Terapinis agentas su dideliu nuo vėžio atrankos ir tvirtą sinergetinį poveikį deriniu. Mūsų tyrimai daugiausia iliustruoja HPRP-A2 sukelta ląstelių mirties mechanizmą ir gali būti naudinga dizaino chemoterapiniai vaistai nuo skrandžio ląstelių linijų.

Išvados

HPRP-A2 rodo stiprų priešvėžinį aktyvumą BGC- 823 ir Tarybos generalinis sekretoriatas-7901 ląstelių linijas ir mažas toksiškumas prieš žmogaus raudonųjų kraujo kūnelių. HPRP-A2 sukeltas vėžio ląstelės mirtis per tiek tiesiogiai membrana destruktyvus poveikis ir ląstelėje mechanizmus, įskaitant staigiai padidinti kaspazė-3, -8 ir -9 aktyvavimo, iš mitochondrijų membranos potencialų (MMP) mažinimu, ir ROS susidarymo ir ląstelės ciklo sustojimas G1. Be to, HPRP-A2 synergized stipriai su DOX didinti žuvo skrandžio naviko ląsteles efektyvumą in vitro
. Mūsų rezultatai pabrėžti platų vėžio potencialą HPRP-A2 ir išsiaiškinti jo veikimo mechanizmas. Mes tikime, kad aprūpinti AKR su efektyvesnių ir vėžinių nukreipimą savybių atvers naujų būdų kovoti su vėžiu sėkmingai.

• PLoS ONE: Vidiniai navikinės heterogeniškumas HER2, FGFR2, cMet ir ATM skrandžio vėžiu: Optimizavimas Asmeninės Healthcare per Inovatyvios Patologinės ir statistinė analizė
• PLoS ONE: kiekybinis jodo turinys virškinamąjį traktą riebalinio audinio dvejopo energijos CT: romano metodas Priešoperacinės diagnostika T4 stadijos skrandžio vėžys