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PLOS ONE: Deixe-7 MicroRNA Família é seletivamente secretada no Extracelular ambiente através da exossomas em uma linha de células metastático Câncer Gástrico

Abstract

Fundo

Os exossomas desempenhar um papel importante na comunicação de célula para célula, células alvo para transferir moléculas exosomal incluindo proteínas, mRNAs e microRNAs (miRNAs) por um endocytosis- como via. miRNAs são pequenas moléculas de RNA não-codificante em média, 22 nucleótidos de comprimento que regulam vários processos biológicos, incluindo patogênese do câncer e medeiam gene infra-regulação, visando mRNAs para induzir a degradação do RNA e /ou interferir com a tradução. Relatórios recentes implicam que miARN pode ser detectada de forma estável no plasma e soro que circula desde miARNs são embalados por exossomas a ser protegido da degradação de ARN. Assim, de perfil miRNAs exosomal estão em necessidade de esclarecer a sinalização intercelular e descubra um novo marcador doença também.

Metodologia /Principais Achados

Os exossomas foram isolados a partir de linhas celulares de cancro cultivadas e sua qualidade foi validado por análises de microscopia eletrônica de transmissão e transferência de western. Uma das linhas de células testadas, uma linha celular de cancro gástrico metastático, AZ-P7a, mostrou que o rendimento mais elevado de ARN nos exossomas libertados e forma distinta na morfologia. Além disso, os RNAs foram isolados a partir de células e meios de cultura, e os perfis destes três fracções de miARN foram obtidos utilizando análise de microarray. Comparando as intensidades de sinal de dados de microarray e a seguinte validação utilizando análise RT-PCR, verificou-se que a família deixou-7 miARN era abundante em ambas as intracelular e fracções extracelulares de células de AZ-P7a, enquanto a baixa metastático AZ-521, a célula parental linha de AZ-P7a, bem como outras linhas celulares de cancro não mostraram a mesma tendência.

Conclusões /Significado

o enriquecimento de let-7 família miRNA nas fracções extracelulares, em particular, no exossomos de células AZ-P7a podem refletir suas características oncogênicos incluindo tumorigênese e metástase. Desde let-7 miRNAs geralmente desempenham um papel tumor-supressora como alvo oncogenes, tais como RAS Comprar e HMGA2
, nossos resultados sugerem que as células AZ-P7a liberar let-7 miRNAs via exosomes no ambiente extracelular para manter sua oncogênese

Citation:. Ohshima K, Inoue K, Fujiwara a, Hatakeyama K, Kanto K, Watanabe Y, et al. (2010) Deixa-7 MicroRNA Família é selectivamente segregada para o meio ambiente extracelular através exossomas em uma linha de células metastática do cancro gástrico. PLoS ONE 5 (10): e13247. doi: 10.1371 /journal.pone.0013247

Autor: Stefan Wölfl, Universität Heidelberg, Alemanha

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