Ploche ONE: Vplyv NPM, TFF3 a TACC1 na prognózu pacientov s primárnou žalúdočnej Cancer

abstraktné

Pozadie

NPM, TFF3 a TACC1 sú molekulárne markery, ktoré hrajú dôležitú úlohu v bunke diferenciácie. V tomto dokumente, sme skúmali ich prognostický vplyv u pacientov s primárnou rakoviny žalúdka (GC) a zisťuje, či by mohli byť použité ako markery viac agresívne žalúdočné karcinómy detekciou rozsahu expresie vo vzorkách ľudského karcinómu žalúdka.

Metodika /zásadné zistenie

nádorovom tkanive vzorky zo 142 pacientov GC boli spätne získané a imunohistochemicky hodnotená. Korelácia medzi NPM, TFF3 a TACC1 nadmernej expresie a clincopathologic parametrov a ich prognostické hodnoty boli skúmané s modelmi χ ^{2, metóda Kaplan-Meier a Cox uni- a viacrozmerné prežitie. NPM, TFF3 a TACC1 expresie bola významne vyššia u pacientov s GC zle diferencované histologickým typom, ako u pacientov s dobre diferencovaným histologickom typu. NPM výraz bol významne vyšší u pacientov s pečeňovou metastázy alebo opakovaný výskyt ako u pacientov bez metastáz. TFF3 expresia bola významne vyššia u pacientov s pozitívnym lymfatických uzlín, ako u pacientov s negatívnym lymfatických uzlín. Vek, lymfatických uzlín, a TFF3 a TACC1 nadmerné expresie významne koreluje s nízkym prežitia (P menšia ako 0,05, P 0,05, P = 0,005 a p = 0,009, v danom poradí). Multivariačný analýza ukázala, že lymfatických uzlín a TFF3 a TACC1 nadmerné expresie boli nezávislé prognostické faktory.}

Závery

TFF3 a TACC1 over-expresie v epitelové bunky chirurgicky resekcii GC tkanivách bol nezávislý prediktor krátkodobého prežitia u pacientov s GC. Prognóza bola horšia u pacientov s pozitívnym expresie oboch TFF3 a TACC1, ako u pacientov s pozitívnym výrazom TFF3 alebo TACC1 samotné, alebo s negatívnym výrazom TFF3 a TACC1

Citácia :. Ding A, Zhao W, shi X, R Yao, Zhou F, Yue L, et al. (2013) Vplyv NPM, TFF3 a TACC1 na prognózu pacientov s primárnou rakoviny žalúdka. PLoS ONE 8 (12): e82136. doi: 10,1371 /journal.pone.0082136

Strih: Yves St-Pierre, INRS, Kanada

prijatá: 16. augusta 2013; Prijaté: 21.října 2013; Uverejnené: 16 decembra 2013

Copyright: © 2013 Ding et al. Toto je článok o otvorený prístup distribuovaný pod podmienkami Creative Commons Attribution licencie, ktorá umožňuje neobmedzené použitie, distribúciu a reprodukciu v nejakom médiu, za predpokladu, že pôvodný autor a zdroj sú pripísané

Financovanie :. Táto štúdia je podporovaný Shandong Natural Science Foundation (2009HW024); Shandong Vynikajúci Young Scientist Award Research Fund Project (2006BSB14114; BS2010YY013). Shandong Riešiť základné problémy Science and Technology (2010GSF10245; Y2006C23). Platcovia mal žiadnu úlohu v dizajne štúdie, zber a analýzu dát, rozhodnutie publikovať, alebo prípravu rukopisu

Konkurenčné záujmy: .. Autori vyhlásili, že žiadne konkurenčné záujmy neexistujú

Úvod

rakovina žalúdka (GC) je 4 ^{th najčastejším nádorovým ochorením na celom svete (7,8% všetkých prípadov rakoviny) a 2 nd najčastejšou príčinou úmrtí na rakovinu (9,7% všetkých úmrtí na rakovinu) na celom svete [1]. Aj keď chirurgická resekcia je možnou alternatívou pre pacientov v ranej fáze GC, kontrola postupu GC stále ťažké [2], [3]. Patogenéza GC je spojená s niekoľkými faktormi. V poslednej dobe boli identifikované rôzne biologické faktory podieľajúce sa na patogenéze GC, ale ich klinický význam nebol potvrdený. Lepšie pochopenie biologickej báze GC by mohla byť užitočná.}

nukleofosmin (NMP), tiež známy ako numatrin alebo NO38, je členom nucleoplasmin (NPM) rodiny. Je to nukleolární fosfoproteínov neustále pendluje medzi jadierka a cytoplazme [4]. NPM vykonáva mnoho funkcií, vrátane výroby ribozómov, udržiavanie genómovej integrity a transport proteínov do jadra [5]. Z tohto dôvodu sa zdá, že nukleofosmin /B23 génu (B23), ktoré sa zúčastňujú riadenia bunkového rastu, diferenciácie a programované bunkovej smrti [6], [7]. NMP je nadmerne exprimovaný alebo mutované v ľudských nádorových buniek, a je preto kandidát prognostický marker v hrubého čreva, vaječníkov a prostaty [8], [9]. Avšak, pretože väčšina z týchto záverov boli prevažne založené na nepriamych dôkazoch s modelmi in vitro, presný príspevok NPM k tvorbe nádorov nie je ani zďaleka jasné, do značnej miery kvôli nedostatku vhodných klinických štúdií.

trojlístok faktor 3 (TFF3 ) je členom génovej rodiny TFF, ktorý kóduje rad malých mucínu-spojené polypeptidy [10]. TFF3 je prítomný hlavne v gastrointestinálnom trakte a ostatných epiteliálnych tkanív a je známe, že hrajú dôležitú úlohu v udržiavaní integrity sliznice [11]. TFF3 má zvýšiť migráciu buniek pomocou modulačných funkcií E-cadherinu /katenin komplexov [12]. V poslednej dobe boli TFFs boli hlásené byť nadmerne vystavený tak na úrovni génov a proteínov u ľudských novotvarov, vrátane črevných, pankreasu a prostaty

transformuje kyslé stočený -.
Cievka 1 (TACC1) bol pôvodne identifikovaná ako jediná kódovacie sekvencie trvalo nájdená v amplikónu rakoviny 8p11 ľudského prsníka [13]. To je exprimovaný vo vysokých úrovniach v priebehu embryogenézy a down-regulované v diferencovaných tkanív [13] - [15]. TACC1 je zapojený do niekoľkých typov rakoviny, vrátane rakoviny prsníka a rakoviny vaječníkov a leukémie. V nedávnej štúdii [16], bolo zistené, TACC1 byť up-regulované a pôsobí ako onkogén v prsníka a rakoviny vaječníkov. Avšak, nedávne sériovej analýzy génovej expresie (SAGE), naznačujú, že sa TACC1 down-regulované v ovariálnych nádorov a rakoviny vaječníkov bunkové línie [17]. Preto, či už TCAA1 funguje ako onkogén [16], alebo nádorový supresor [18] je vysoko závislé od typu rakoviny [13].

V tejto štúdii sme skúmali hladiny expresie NPM, TFF3 a TACC1 u pacientov GC, a tiež analyzoval ich potenciálnej korelácia s klinickými príznakmi a celkové prežívanie (OS) pacientov GC.

materiály a metódy

Pacienti a klinických vzoriek

v táto štúdia bolo 142 pacientov (93 mužských a 49 ženských), ktorým chirurgickou resekcii primárneho GC na oddelenie všeobecnej chirurgie v našej nemocnici v období od júla 2007 do septembra 2009. protokol štúdia bola schválená etickou komisiou pridruženého nemocnice Qingdao University School of Medicine (Qingdao, Čína). Pacienti, ktorí podpísali informovaný súhlas. Stredný vek bol 59 rokov (27 až 89 rokov). Nádorové vzorky boli fixované v 10% roztoku formaldehydu a vložené do parafínu. Žiadny z pacientov dostávala chemoterapiu alebo rádioterapiu pred operáciou. Patologické diagnózy a klasifikácia bola vykonaná v súlade s japonskou klasifikácie karcinómu žalúdka. Kompletné demografické a klinické údaje boli zhromaždené retrospektívne. "Early rakovina" bola definovaná ako inváziu rakovinových obmedzená na submukóze, a "karcinóm" bola definovaná ako rakoviny invázie do muscularis propria alebo blany. Dátum konca sledovania bola júla 2012, a priemerné sledovanie pre OS bol 47 mesiacov (rozmedzie 3-59 mesiacov) s 3-ročné pooperačné miera prežitia 64,2%.

Imunohistochémia

Array bloky boli nakrájané na 4-um úsekov, deparafinizovány a hydratovanú v etanolové. Antigén vyhľadávania bola vykonaná ponorením sklíčok v citrátovom pufri (pH 6,0) a v mikrovlnnej rúre po dobu 10 minút. Zbavené parafínu a hydratované Tkanivové rezy boli ošetrené 0,3% vodíka peroxidáze v metanole po dobu 15 minút, premyté v PBS a inkubované s primárnymi protilátkami proti NPM, TFF3 a TACC1 cez noc pri teplote 4 ° C (tabuľka 1). Protilátka farbenie bolo detekované pomocou avidín-biotín-peroxidáza komplexu (PV9005, myš precitlivenosti, Peking Jinqiao jedľa, Čína). Diaminobenzidine bol použitý pre vizualizáciu ukladanie peroxidáza v antigénnym mieste, a tieto rezy boli kontrastne hematoxylínom.

Imunohistochemické farbenie bola hodnotená semikvantitatívne meraním ako intenzitu farbenia (0, 1, 2, alebo 3, ) a rozsah farbenie (0, 0%, 1, 0 - 10%, 2, 10 až 50%, 3, 50 až 100%). Skóre pre intenzite a rozsahu farbenie sa násobí, aby vážené skóre pre každý prípad (maximálny možný, 9). Pre štatistické analýzy boli vážené skóre boli rozdelené do dvoch kategórií, kde skóre 0-3 boli považované za negatívne, a 4-9 pozitívne.

Štatistická analýza

Všetky štatistické analýzy boli vykonané pomocou štatistický balík SAS verzie 9.2. Test X2 a Fisherov presný test bol použitý na skúmanie korelácia medzi expresiou molekulárnych markerov a rôznych klinicko parametrov. Jednorozmerné analýza bola vykonaná za použitia metódy Kaplan-Meierovej a štatistická významnosť medzi krivkami prežitia bol hodnotený log rank testu. OS bola stanovená od dátumu operácie do doby úmrtia na rakovinu. Pre posúdenie nezávislej hodnoty rôznych premenných na prežitie, multivariačný analýza bola vykonaná v prítomnosti iných veličín pomocou Coxovho modelu proporcionálneho rizika. Iba premenné významnú hodnotu z jednorozmerné analýzy boli vložené do regresnej analýzy Cox. p menšie ako 0,05 bola považovaná za štatisticky významnú

Výsledky

NPM, TFF3 a TACC1 expresné vzorce v nádorových bunkách

expresie NPM, TFF3 a TACC1 bola meraná pomocou semi-kvantitatívnej. IHC analýzy. NPM bol lokalizovaný v jadierka, jadre a cytoplazme nádorových buniek epitelu (pozitívna 47% vs. 53% negatívne) (obr. 1). TFF3 bol exprimovaný v cytoplazme nádorových buniek epitelu (pozitívna 44% oproti 56%), negatívne, a nie farbenie bol pozorovaný v jadre (obr. 1). TACC1 bol exprimovaný v cytoplazme nádorových buniek epitelu (pozitívne, 49% oproti 51% negatívne) (obr. 1), a žiadne farbenie bol pozorovaný v jadre.

pacientov klinicko Premenné

Priemerný vek pacientov v tejto štúdii bolo 59 rokov (27 až 89 rokov). Medián sledovania celkového prežitia bol 47 mesiacov (rozmedzie 3-59 mesiacov) a 3-ročné pooperačné prežitie bola 64,2%. Stredná veľkosť nádoru bola 35 mm (v rozmedzí 15-130 mm). S ohľadom na nádorové fáze, 14% (20/142) pacientov bolo na počiatku rakoviny a 86% (sto dvadsať dva sto štyridsať dvaina) boli v pokročilej rakoviny. Lymfatických uzlín bola pozorovaná u 55% (78/142) pacientov. Vzdialené metastázy, vrátane pečeňových metastáz, žilovej invázie a peritoneálnej metastázy, došlo u 15 pacientov.

korelácií medzi klinicko-Data a prejavov NPM, TFF3 a TACC1

NPM, TFF3 a TACC1 výrazy boli významne vyššie u pacientov so zlou diferencovaným histologické typu GC, ako tie u pacientov s dobre diferencovaným histologickom typu GC (NPM, 0,88 vs. 0,12; TFF3, 0,90 vs. 0,10; TACC1, 0,90 vs. 0,10, P 0,05). Iba výraz NPM bola významne vyššia u pacientov s cirhózou metastázy (0,88 vs. 0,12; P < 0,05) alebo opakovanie (0,73 vs. 0,27; P < 0,05). TFF3 bola významne vyššia u pacientov s pozitívnym lymfatických uzlín, ako u pacientov s negatívnym lymfatických uzlín (TFF3, 0,61 vs. 0,39, p menšie ako 0,05). TACC1 expresia významne koreluje s žilovej invázie (0,88 vs. 0,12; P < 0,05) a žien (0,69 vs. 0,31; p &0,05). Klinické a histopatologické premenné sú uvedené v tabuľke 2.

Jednorozmerná Analýza

Jednorozmerné analýzy ukázali, že vek, lymfatických uzlín, TFF3 nadmerné expresie a TACC1 nadmerné expresie významne koreluje s krátkou prežitie čas (Tabuľka 3, Obrázok 2). Pre štatistickú analýzu, určený "rizikovú skupinu" mal zmenené expresie 2 alebo 3 proteínov. určený "skupina s nízkym rizikom" mal zmenené expresie 0 alebo 1 proteíny. Prognóza bola horšia u pacientov s pozitívnym súčasnej expresie NPM /TFF3, TFF3 /TACC1, NPM /TACC1 a NPM /TFF3 /TACC1, ako u pacientov s pozitívnym expresie NPM, TFF3 alebo TACC1 samostatne, alebo s negatívnym koexpresí z týchto markerov (tabuľka 3).

viacrozmerné analýza

Viacrozmerná analýza ukázala, že lymfatických uzlín a expresie TFF3 a TACC1 v nádorových buniek epitelu boli nezávislé prognostické faktory pre celkové prežívanie (Tabuľka 4 ), a tým, že pomer rizika (HR) úmrtia súvisiace s nádorom sa zvýšil o 3.409 násobnému FF3 skupine (P 0,001; 95% CI 2,387-8,143). Nárast 3,311-násobné v HR úmrtí súvisiacich s nádorom v lymfatických uzlín skupine bol obviouslyly významný (P 0,001; 95% CI 2,148 až 8,651) (tabuľka 4). 2,278 násobné zvýšenie HR úmrtí súvisiacich s nádorom v skupine TACC1 samozrejme bol tiež významný (P 0,001; 95% CI 1,803-5,959).

Diskusia

V súlade s tým, vyšetrenie expresie špecifických génov v bunkách karcinómu žalúdka by mohli pomôcť pochopiť histopatologické znaky GC.Consequently, že je nevyhnutné študovať rôznych molekulárnych markerov, aby bolo možné porozumieť mechanizmu vzniku nádorov a metastáz. Preto sme hľadali vyskúšaná panel troch molekulárnych markerov spojených s vzniku nádorov.

nukleofosmin /B23 výraz je nukleolární fosfoproteínov neustále pendluje medzi jadierka a cytoplazme [4], a to na úrovni RNA a proteín môže prispievajú k vzniku rakoviny [19], [20], NPM bol predtým navrhnuté ako prognostický faktor pre prežitie zlé a súvisí s progresiou nádoru a odolnosť [21], [22]. Avšak, výsledky získané pri tejto štúdii sa líši v niekoľkých dôležitých ohľadoch líši od týchto skorších štúdií. Zistili sme, horšie výsledky u pacientov s NPM nadmernou expresiou, ale nie je to nezávislá prognóza markeru, možno preto, že biologické odchýlok v expresiu proteínov v rôznych oblastiach nádorovom tkanive. V našej štúdii, NPM nadmerná expresia bola pozorovaná u 73% pacientov s recidívou, čo ukazuje, že NPM nadmerná expresia sa významne spojené s recidívou. Štúdium Tsui et al [23] tiež ukázal, že vysoká hladina NPM /B23 korelovala s recidívy rakoviny močového mechúra. Okrem toho, že je zaujímavé, špekulovať, že NPM môže korelovala s podporiť pečeňovo metastázy tejto rakoviny. Výsledok tejto štúdie ukazuje, že NPM nadmerná expresia sa môže ukázať ako prediktor pre zlú prognózu GC, hoci presný základný mechanizmus zostáva nejasný.

Predchádzajúce štúdie [24], [25] ukázal, že TFF3 bol často nadmerne exprimovaný pri karcinóme prsníka a iných primárnych nádorov. Naše výsledky ukazujú, že 44% karcinómov žalúdka vyjadrená TFF3, a čo je dôležitejšie, že TFF3 nadmerné expresie v GC bol nezávislý negatívnym prognostickým ukazovateľom pre OS. Riziko úmrtia bola významne zvýšená u pacientov s TFF3 over-expresie. Okrem toho TFF3 nadmerná expresia bola druhá najvyššie riziko vedľa lymfatických uzlín na pooperačné prežitie. Významné korelácie medzi TFF3 nadmernou expresiou a zlou prognózou boli už skôr uvedené v cholangiokarcinomem [26] a endometrioid endometriálneho karcinómu [27], čo je v súlade s našimi výsledkami. Naše dáta tiež naznačujú, že TFF3 nadmerná expresia korelovala s agresívnejšími klinicko-parametrov. Napríklad TFF3 nadmerná expresia bola zistená u približne 50% pacientov s pozitívnym lymfatických uzlín vs.
Jednu tretinu u pacientov s negatívnym lymfatických uzlín, čo ukazuje, že nadmerná expresia TFF3 hrá dôležitú úlohu v lymfatických uzlín u pacientov s GC. Je potrebné ďalšie štúdie na molekulárnej mechanizmus, ktorý presnejšie definovať úlohu trefoil peptidu expresie v nádorovej progresie a metastáz.

Predchádzajúce štúdie [28], [29] navrhli možný účinok TACC1 na proliferáciu buniek a jeho karcinogenity vlastnosti. Avšak, na nášho najlepšieho vedomia, neexistujú žiadne iné štúdie podávanie správ o koreláciu medzi TACC1 over-expresie a klinický význam u pacientov GC. Jedným z významných zistení tejto štúdie je veľký vplyv pohlavia súvisiace s TACC1 na nadmernou expresiou, ktorý ukazuje, že 69% pacientok GC vykazovali pozitívne TACC1 výraz. Okrem toho je počet pacientok s TACC1 nadmernej expresie bola dvakrát vyššia ako u mužov s negatívnou TACC1 výrazu. Avšak, TACC1 nadmerná expresia nemala žiadny významný vplyv na prežitie vzhľadom k pohlavia, na rozdiel od významný vplyv na prežitie rôznych vekových skupín, čo naznačuje, že môžu existovať iné mechanizmy majú vplyv na prežitie pacientov GC. Výsledkom našej viacrozmerné analýzy ukázali, že TACC1 nadmerná expresia bol nezávislý prognostický faktor GC, čo je v súlade so skorším zistením o prognostický význam TACC1 pozorovali u nádorov vaječníka [30]. Okrem toho sú naše údaje poskytujú dôkaz, že TACC1 nadmerná expresia je spojená s žilovej invázie, z čoho vyplýva jeho možná úloha pri nádorových metastáz.

Približne polovica nádorových vzoriek bolo zistené, s ko-expresiou týchto dvoch markerov. Univariantní analýza ukazuje, že skupina s vysokým rizikom bola významne spojená s kratším celkovým prežitím pacientov, a táto skupina s vysokým rizikom vykazuje horšiu prognózu než skupine s nízkym rizikom. Či kombinovaná expresia NPM, TFF3 a TACC1 prispieva k rastu výhodou nádoru musí byť ďalej stanovená in vitro a klinické štúdie.

Na záver, TFF3 a TACC1 nadmerné expresie v epiteliálne bunky nádoru chirurgicky resekované gastic adenokarcinóm mohol nezávisle predpovedať kratšie prežitie. NPM nadmerné expresia je významne koreluje s klinickými patologické rysy GC. Tieto pozorovania ukazujú, že nadmerná expresia je veľmi dôležité pre patogenéze a vývoj GC. Medzi ďalšie vyšetrovanie sú potrebné na zabezpečenie lepšej základ pre vývoj účinnejších liečebných postupov pre GC a iných ľudských malignít.

• Ploche ONE: Role of Non-Liečebné chirurgie v nevyliečiteľná, Asymptomatický pokročilej rakoviny žalúdka
• Ploche ONE: Robotické oproti otvorené gastrektómia pre rakoviny žalúdka: metaanalýza