Verschidden Zorte vu histone methylation hunn mat Kriibs Werdegang assoziéiert gouf. Ofhängeg vum methylation Site vun histone Proteinen, hir Auswierkungen op Transkriptiouns sinn verschidden. DPY30 ass eng gemeinsam Member vun SET1 /MLL histone investéiert H3K4 methyltransferase. Allerdéngs goufen hiren Ausdrock an Rollen an gastric Kriibs schlecht charakteriséiert. Fir erauszefannen, ob DPY30 pathophysiological Rollen an gastric Kriibs huet, sech hiren Ausdrock an Rollen iwwerpréift. Immunohistochemistry an Echtzäit Hinnen alleguer opgedaucht-Regulatioun vun DPY30 Ausdrock vun e puer gastric Kriibs Zell Linnen an Patienten Stoffer. Seng knockdown vun siRNA ofgeholl d'Prolifératioun, Migratioun, an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen, am Ufank seng overexpression de Géigendeel Effekter weisen. Dës Resultater weisen, datt DPY30 huet kritescher Rollen an der Prolifératioun, Migratioun, an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen, a proposéiere DPY30 kéint eng therapeutesch Zilscheif vun gastric Kriibs ginn VerfÜgung
Fro:. Lee YJ, Han ME, Baek SJ, Kim Sy, Oh Dofir (2015) Rollen vun DPY30 an der Zouhuelen an Motility vun Gastric Cancer BTS. PLoS NËMMEN 10 (7): e0131863. Doi: 10.1371 /journal.pone.0131863 VerfÜgung
Redakter: Aamir Ahmad, Wayne State University School vun der Medezin, USA VerfÜgung
Arnaque: 3 Mäerz 2015; Akzeptéiert: 8 Juni, 2015; Publizéiert: Juli 6, 2015 VerfÜgung
Copyright: © 2015 Lee et al. Dëst ass eng oppen Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz CC BY verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt si vum original Auteur an d'Quell Kaiser VerfÜgung
Data Disponibilitéit: All Daten sinn bannent de Pabeier VerfÜgung
Funding:. Dës Aarbecht vun der Bio &ënnerstëtzt gouf; Medical Technology Development plangen (É2M3A9C6050213, OSO) an Grondakommes Science Research Foundation (É2R1A1A3010521, HME) vun der National Research Foundation (NRF) finanzéiert duerch d'südkoreanesch Regierung (MEST), an duerch Subventiounen aus der National R & D plangen fir Cancer Control, Ministère fir Gesondheet, Wuel an Family Aussebezéiungen, Republik Korea (\0050, OSO). D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung
Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung
Covalent Modifikatioune vun histone Schwänz, wéi, acetylation, phosphorylation, ubiquitination, an methylation, chromatin Struktur well an dréien Rollen vun der Regulatioun vun Zell-Zyklus Werdegang, Gentherapie Transkriptiouns, DNA Reparatioun, embryonal Entwécklung Leeschtung, an bewosst dat [1, 2]. Iwwerdeems fräi histone acetylation allgemeng mat transcriptional Aktivéierung, déi methylation vun histone ass soll mat transcriptional Aktivéierung a Repressioun verbonnen ass. Zum Beispill, methylation vun histone H3 um lysine 9, 20, oder 27 Reschter (H3K9, H3K20 oder H3K27) ass an transcriptional Gentherapie silencing Équipe, mä op der anerer Hand, methylation um H3K4, H3K36, oder H3K79 ass mat oppen chromatin verbonnen a aktiv Gentherapie Transkriptiouns [3]. VerfÜgung
an Mamendéieren, mono-, Dis-, an Dräilännereck-methylation vun H3K4 (H3K4me1, H3K4me2, an H3K4me3) sinn déi sechs verschidde SET1 /MLL Famill investéiert (SET1A, standing SET1B , MLL1, MLL2, MLL3, an MLL4) [4, 5]. Dës H3K4 methyltransferases (H3K4MT) enthalen verschiddene Katalysator subunits, an d'Aktivitéite vun all sechs Famill investéiert ginn duerch gemeinsam Multi-subunit Kär Komponente kontrolléiert, déi och WDR5, RBBP5, ASH2L, an DPY30, a sinn och fir den WRADs bezeechent. [6-9]. E Verloscht vun all subunit vun WRAD komplex Resultater am reduzéiert H3K4 methylation. WDR5 an RBBP5 entscheedende sinn fir all dräi Arte vun methylation vun H3K4 (H3K4me1, H3K4me2, an H3K4me3), wobäi ASH2L an DPY30 haaptsächlech fir H3K4me3 néideg sinn [6, 8, 10, 11]. VerfÜgung
DPY30 ass eng Member vun all Mënsch SET1 /MLL investéiert, an ass fir all SET1 /MLL methyltransferase Aktivitéit [10, 12] néideg. DPY30 gouf am dat Potential vun embryonal Stammzellen (ESCs) laanscht de neuronal linage [10] an ass wichteg fir d'Zäitmiessung dat an Prolifératioun vu hematopoietic Grënner Zellen [12] agebonne. Ausserdeem, Ausschöpfung vun DPY30 bewierkt Zellen e senescence-wëll Staat ze trieden an p16 (CDKN2A) an p15 (CDKN2B) zu upregulate, deen direkt zu senescence Équipe ginn [13]. VerfÜgung
Gastric Kriibs eng vun den Haaptfiguren ass Dout vu Kriibs-Zesummenhang Doud weltwäit [14]. Obwuel rezent diagnostic an therapeutesch Fortschrëtter mat fréi gastric Kriibs fir Patiente excellent Iwwerliewe bidden, ass d'Krankheet normalerweis bei engem spéiden Etapp festgestallte wann der Iwwregens hätt aarm ass [15]. Gastric carcinogenesis eben d'II accumulations vun verschiddenen genetesch a epigenetic hire Restaurant, deen duerch oncogenes a Verloscht-vun-Funktioun vun entholl suppressor Genen ze gewannen-vun-Funktioun huet. Doriwwer eraus, staark zënter der Gentherapie Transkriptiouns op chromatin Struktur Nordeuropa, verännert oder anormal histone methylation mat entholl Werdegang an hätt am Kriibs ass typesch verbonne [16], an obwuel de Status vun histone methylation huet och zu villen Zorte vu Kriibs beschriwwe ginn, dësen Aspekt bleift kloer an gastric Kriibs [16, 17]. VerfÜgung
an dëser Etude, fir festzestellen, ob DPY30 pathophysiological Rollen an gastric Kriibs huet, sech hiren Ausdrock an Rollen iwwerpréift. VerfÜgung
Zell Kultur an siRNA transfection VerfÜgung
d'gastric Kriibs-ofgeleet Zell Linnen, SNU1, SNU16, SNU216, SNU620, SNU638, an NCI-N87 aus der koreanesch Zell Linn Bank (Seoul) kaaft huet. D'gastric epithelial Zell Linn, HFE145 sech aus Professer Hassan Ashktorab (Howard University) héichbegaabte. D'gastric Kriibs Zell Linnen goufen zu engem humidified 5% CO bei 37 ° C cultured 2/95% Loft Atmosphär an RPMI1640 mat 25 mm HEPES ergänzt, 10% An et Bovine serum (FBS) (GE Gesondheetswiesen Life Science, South Logan , féier, USA) an 100 μg /ml vun penicillin /streptomycin (Fläch-Aldrich, St Louis, MO, USA). DMEM (GE Gesondheetswiesen Life Science) mëttelfristeg mat 10% FBS nà an 100 μg /ml vun penicillin /streptomycin war fir HFE145 Kultur benotzt. Zellen sech mat klengen interfering RNS (siRNA) oder Jacquerie (SCR) siRNA benotzt DhamaFECT reagent 1 oder 3 (Thermo Wëssenschaftlech, sech auswiesselen, CO, USA) transfected laut den Hiersteller d'Uweisungen. siRNA Message sech wéi follegt zesummen: DPY30 siRNA duplex (ORF) (Bioneer, Daejeon, Korea), 5'-CAC UCU Série UAC GGU CUC A (dTdT) -3 ", 5'- CUC UGA nohalteger CGG UCU CAC A (dTdT) -3 ", 5'- CUC ACU UAU UCU AGG UAC U (dTdT) -3 '; DPY30 siRNA duplex (3'-UTR) (Bioneer); 5'- CCG GAC AAC Agées zu Enn UAU UUU näischt A (dTdT) -3 ", 5'- Série GCA GCU UUA AUU GCC AUG AUC A (dTdT) -3 '; WDR5 siRNA duplex (Bioneer), 5'- GUC CUU GUG AAG CUC GUC U (dTdT) -3 ", 5'- GUC GUG AUC Uca ACA GCU U (dTdT) -3", 5'- CAG AUU evakuéiert zu Enn UUC UUG U (dTdT) -3 '; RBBP5 siRNA duplex (Bioneer), 5'- GUG UGA AAA GGG CUC froen A (dTdT) -3 ", 5'- CAG AUU CUC AGG AUC UUG U (dTdT) -3", 5'- GUG GUU Série AUU froen Agées U (dTdT) -3 '; ASH2L siRNA duplex (Bioneer), 5'- nohalteger UGA ACG GGU UUU GUU A (dTdT) -3 ", 5'- CUG Agées ACA CCU GAA AUC A (dTdT) -3", 5'- GUC UAC CUU Uca UGA CCA A (dTdT) -3 '; siRNA (Thermo Wëssenschaftlech) Jacquerie (SCR), 5'- GAU CCG CAA AAG AGC GAA A (dTdT) -3 ". VerfÜgung DPY30 overexpression VerfÜgung D'DPY30 cDNA war an pLenti6.3 gekloonten -V5 /DEST Vecteure (lentiviral Destinatioun Vecteure) andeems der zu VIVO VerfÜgung recombination-baséiert Wuel Klone System (Invitrogen, Karlsbad CA, USA). D'Donateur Vecteure (pDONR221) war vun Ultimate ORF Clones (Invitrogen) kaaft der cDNA Haaptrei vun DPY30 ausser, an recombined mat de Konter selectable ccdB VerfÜgung Gentherapie vun pLenti6.3-V5 /DEST mat LR clonase Aktivitéit Mëschung (Invitrogen). Déi eidel Vecteure pLenti6.3 /V5-DEST war wéi e mierkt Kontroll benotzt. Recombinant lentiviruses sech zu 293FT Zellen produzéiert, a benotzt SNU216 an SNU638 Zellen ze globalen, laut den Hiersteller d'Instruktioune (ViraPower Lentiviral Expression System; Invitrogen). DPY30-overexpressing stabil Zellen sech duerch Auswiel mat blasticidin (7.5 μg /ml) (Invitrogen) gegrënnt. VerfÜgung Fir Rettungsplang assays, mir geännert, duerno e Protokoll 'RNAi Amëschen benotzt Villes Lenti ORF Kollektioun " (http://dharmacon.gelifesciences.com/uploadedFiles/Resources/precision-lentiorfs-rnai-rescue-appnote.pdf). Kuerz, goufen d'Zellen mat recombinant lentiviruses (pLenti6.3-V5 /DEST oder DPY30-iwwer gesond) infizéiert. 24 Stonnen Post-transduction, de Medien Virus goufen ofgegruewen an mat komplett Kultur mëttelfristeg ersat. Den Dag drop, blasticidin war bei enger Konzentratioun vun 7.5 μg /ml notéiert. Zellen sech fir sechs Deeg ënnert Choix haten, mëttelfristeg agefouert oder all 2-3 Deeg passaging als waren. Déi gewielte Populatiounen vun Kontroll Zellen oder Zellen ausdrécken DPY30 sech fir transfection Experimenter benotzt benotzt DPY30 siRNA gezielt oppen liesen Rumm (ORF) oder 3'-untranslated Regioun (UTR). VerfÜgung Real-Zäit Hinnen alleguer VerfÜgung Ray Echantillon sech aus 23 stinn koreanesch Primärschoul gastric Kriibs Patiente kritt datt chirurgesch resection um Pusan National University Hospital an Pusan National University Yangsan Hospital a gëtt schrëftlech informéiert Zoustëmmung mécht. D'Etude gouf vun der Pusan National University Hospital-Finanzpolitiker Kritik Verwaltungsrot (PNUH-IRB) an der Pusan National University Yangsan Hospital-Finanzpolitiker Kritik Verwaltungsrot (PNUYH-IRB) abruecht. Total RNS aus Stoffer an Zellen sech mat Trizol reagent (Invitrogen) oder eng RNeasy Mini Kit (QIAGEN, Valencia, CA, USA) ofgebaut, laut dem Hiersteller 'Instruktiounen. Chemeschen real-Zäit polymerase Kette Reaktioun (real-Zäit Hinnen alleguer) war benotzt DPY30 mRNA Niveauen ze kontrolléieren. cDNAs sech mat MMLV ëmgedréint transcriptase (Promega, Madison, allem, USA), dNTP, an oligo-DT primers Wierderbuch. D'primer Message benotzt sech wéi follegt zesummen: DPY30, 5'- AAC GCA GGT TGC Agées AAA tcc T -3 "an 5'- TCT Gat CCA GGT AGG CAC Série -3 '; WDR5, 5'- TGT TAC TGG TGG GAA GTG GA -3 an 5'- CTG TTG GGT GAC AAG CTG TT -3 '; RBBP5, 5'- Agt GCA CAC ATC CAT CCA GT -3 "an 5'- TCA CAG TCG CCT GAA Agées AC -3 '; ASH2L, 5'- TAC AAG AGC TGC ACG GTT TC -3 "an 5'- CCA GCC CAT GTC ACT CAT AG -3 '; GAPDH, 5'- TGG GCC AGG AAA TCA CAT CC -3 "an 5'- CTC AGC CCG Agt GGA AAT GG -3". Real-Zäit Hinnen alleguer war mat engem LightCycler ™ 96 Real-Zäit Hinnen alleguer System (Roche, Nutley, NJ) an FastStart Néideg DNA Green Master (Roche) gesuergt, no den Hiersteller d'Uweisungen. GAPDH war wéi eng intern Kontroll benotzt. VerfÜgung Immunohistochemistry VerfÜgung Immunohistochemical staining mat Kanéngchen anti-Mënsch DPY30 polyclonal antibody (Fläch-Aldrich) op engem gastric Kriibs Otemschwieregkeeten vill Leeschtung war (n = 59) kaaft aus SUPER BIO Chips (Seoul) oder op 4-μm Rubriken vun paraffin-Ënnerbewosstsinn uplanzen. Kuerz, no deparaffinization an abordablel, sech drënner mat 0.3% Waasserstoff Hem behandelt fir 30 min endogenous peroxidase Aktivitéit, a mat 10% normal Esel serum (NDS) an 1% BSA zu 1 × phosphate gefiermt Salins (PBS) gespaart fir inhibit. Drënner waren dann zu erauszesichen gefiermt Nuecht op 4 ° C incubated enger Kanéngchen anti-Mënsch DPY30 Primärschoul antibody wouvun (1:80, Fläch-Aldrich). 200 an erauszesichen Prellbock fir 2H um RT: Secondaire antibody (HRP-conjugated) bindend war bei engem dilution vun 1 gesuergt. Ze erkennen ass mat HRP (Vecteure Laboratoiren) gesuergt, an drënner waren counterstained vun hinnen fir 1 min mat hematoxylin staining Prellbock (Fläch-Aldrich) bestéet. VerfÜgung Zell Prolifératioun assay VerfÜgung Een Dag no transfecting Zellen mat siRNA, war déi mëttel- mat 1% FBS mëttelfristeg ageholl, a véier Deeg méi spéit, den 10. μl vun Ez-Cytox (ITSBIO, Seoul) ugebaut a fir 0,5 bis 2 Stonnen incubated. Fir d'Wierkung vun DPY30 overexpression op Zell Prolifératioun ze kucken, goufen Zellen zu 10% FBS mëttelfristeg rakommen, an no dräi Deeg vun der Kultur, 10 μl vun Ez-Cytox (ITSBIO) war dat fir 0,5 bis 2 Stonnen notéiert an incubated. Zell viabilities huet sech duerch absorbance bei 450 nm Moosse benotzt VICTOR3 Multiple Lieser (PerkinElmer, MA, USA). VerfÜgung Boyden Chambre assay VerfÜgung A geännert Boyden transwell ëmkomm (Neuro NÄISCHT Gaithersburg, MD, USA) benotzt gouf. Ënnen Chamber huet mat 50 μl RPMI wouvun 10% FBS gefëllt. Ënnersicht Auswierkunge vun DPY30 bekannt-verwandelt, SNU1 an SNU16 (Net-Operstéiungszeen Zellen) sech mat der ORF-gezielt siRNA transfected. Een Dag no transfection, goufen Zellen gewäsch, suspendéiert op eng Dicht vu 5 × 10 Matrigel Invasioun assay VerfÜgung D'invasiv Fähegkeeten vun Kriibs Zellen goufen 8-μm Damp suergt BioCoat Matrigel Chambre Text (BD Bioscience, San Jose, CA, USA) évaluéieren benotzt. Een Dag no transfection mat SCR oder DPY30 siRNA, goufen Zellen trypsinized, an suspendéiert op eng Dicht vu 5 × 10 statistique Analyse VerfÜgung Resultater si wéi den heescht ± normale Hitparad (SDs) vun dräi onofhängeg Experimenter ausgedréckt. D'significances vun Differenzen huet de Student d'sech mat t VerfÜgung Azeton fir unpaired Observatiounen. P VerfÜgung Wäerter vu &Si besteet; 0,05 waren statistesch relevant considéréiert. VerfÜgung Expression vun DPY30 zu gastric Kriibs Stoffer VerfÜgung DPY30 Ausdrock vun mënschlecher gastric Kriibs ze ermëttelen, mir immunohistochemistry standing engem gastric Kriibs Otemschwieregkeeten vill benotzt oder Archivmaterial paraffin-Ënnerbewosstsinn Otemschwieregkeeten Sektiounen. Am normal gastric Stoffer, war DPY30 Ausdrock schwéier (Lalumi 1A) ze entdecken, mä zu Kriibs Stoffer DPY30 FAQ war dicht overexpressed (Lalumi 1B-1D). Gëlt, war zu hypothetesch gastric Kriibs Zellen (Lalumi 1B-1D) DPY30 overexpressed. Ausserdeem, alles mir mRNA Niveau vun DPY30 an een och normal gastric epithelial Zell Linn (HFE145) a sechs gastric Kriibs-ofgeleet Zell Linnen (SNU1, SNU16, SNU216, SNU620, SNU638 an NCI-N87) real-Zäit Hinnen alleguer benotzt. D'mRNA Niveau vun DPY30 war däitlech méi héich (fantastesch änneren > 5) an SNU1 an SNU16 wéi zu HFE145 Zellen, am Ufank dem Wëllen Niveau vun DPY30 zu SNU216, SNU620 an SNU638 ähnlech war zu HFE145 Zellen déi bis an niddreg (fantastesch änneren > 10) an NCI-N87 (Lalumi 1E). Mir kontrolléieren och mRNA Niveau vun DPY30 zu gastric Kriibs Stoffer. DPY30 war héich an 15 Fäll ausgedréckt (15/23, 65%) wéi am Verglach mat normal Stoffer (Lalumi 1F). Dës Resultater weisen, datt DPY30 ass héich an e puer Mënsch gastric Cancers ausgedréckt. VerfÜgung Rollen vun DPY30 zu der Verbreedung vun gastric Kriibs Zellen VerfÜgung Fir méiglech Rollen vun DPY30 zu gastric Kriibs Zellen ze bestëmmen, mir éischt Uewerschenkel-verwandelt DPY30 der ORF-gezielt DPY30 siRNA benotzt an iwwerwaacht seng knockdown Effizienz vun real-Zäit Hinnen alleguer (Lalumi 2A). Den ORF-gezielt DPY30 siRNA (100 nm) ofgeholl der mRNA Niveau vun DPY30 zu HFE145, SNU1, SNU16, SNU216, an SNU638 Zellen als Verglach mat Jacquerie siRNA (SCR) vun 78%, 89%, 79%, 76%, an 88%, respektiv. Fënnef Deeg no transfecting Zellen mat SCR oder den ORF-gezielt siRNA, standing mir Prolifératioun assays. Knockdown vun DPY30 inhibited der proliferations vun HFE145, SNU1 an SNU16 als Verglach mat SCR vun 31%, 69% an 71% respektiv, iwwerdeems de knockdown net de proliferations vun SNU216 an SNU638 (Lalumi 2B) Afloss hat, an deen den Ausdrock Niveau vun DPY30 war niddereg (Lalumi 1E). Next, produzéiert mir DPY30-overexpressing Linnen Zell (DPY30-Regioun) benotzt HFE145, SNU216 an SNU638 Zellen, an dann am Verglach DPY30 mRNA Niveauen an mierkt Zellen (Kontroll) an DPY30-iwwer Zellen. Real-Zäit Hinnen alleguer Resultater weisen, dass den Ausdrock Niveau vun DPY30 4.2 huet, 3,5 an 3,2 fantastesch héich zu DPY30-overexpressing HFE145, SNU216 an SNU638 Zellen wéi mierkt Zellen, bzw. (Lalumi 2A). DPY30 overexpression verstäerkte der proliferations vun HFE145, SNU216 an SNU638 Zellen versus mierkt Zellen vun 1,9, 2,2 an 1,6 fantastesch, bzw. (Lalumi 2B). VerfÜgung d'Spezifizitéit vun DPY30 siRNA Fir ze bestätegen, mir standing de Rettungsdéngschter Experimenter. Fir d'Rettungsequippen Experimenter, déi mir engem DPY30 siRNA 3'-UTR amplaz ORF gezielt well den ORF-gezielt siRNA och de exogenous DPY30 ORF DNA mir agefouert dauert kann. Fir overexpress DPY30, mir transduced SNU1 an SNU16 mat Haren Deelercher, pLenti6.3-V5 /DEST (Kontroll) oder DPY30-ORF-iwwer gesond. DPY30-overexpressing SNU1 oder SNU16 Zellen zougedréckt héich Ausdrock vun DPY30 2.1 oder 2,5 fantastesch héich wéi mierkt Zellen, bzw. (Lalumi 2C). Den ORF-gezielt siRNA Nerve verwandelt-Regulatioun vun DPY30 Ausdrock Niveau vun méi wéi 75% vun mierkt souwéi DPY30-overexpressing Zellen. D'3'-UTR-gezielt siRNA der DPY30 Ausdrock vun grouss wéi 85% vun mierkt Zellen verwandelt-reegelen, hierkommen, an den DPY30-overexpressing Zellen, et der DPY30 Ausdrock fir e Niveau ofgeholl gläicht dofir deem vun SCR siRNA-transfected Zellen ( Figebam 2C). Dëst Resultat beweist dass der exogenous DPY30-ORF DNA op der 3'-UTR-gezielt siRNA resistent ass an ass bei engem ähnlechen Niveau un déi vun endogenous DPY30 mRNA ausgedréckt. Den ORF-gezielt siRNA inhibited Prolifératioun vun Zellen onofhängeg vun der exogenous DPY30 Ausdrock (Lalumi 2D). Prolifération war och vun der 3'UTR-gezielt siRNA zu mierkt Zellen inhibited, awer et deelweis zu DPY30-overexpressing Zellen inhibited war. An DPY30-overexpressing Zellen, ofgeholl der ORF-gezielt siRNA d'Prolifératioun vu SNU1 an SNU16 wéi mat SCR siRNA vun 74% an 66% par Rapport, respektiv, awer d'3'-UTR-gezielt siRNA Verréngerung vun 20% an 8%, respektiv . Dëst Resultat beweist dass exogenous DPY30 d'inhibition vun Zouhuelen vun der 3'-UTR-gezielt siRNA, an der phenotypes déitlech DPY30 spezifesch siRNA sinn net ugefaangen-Zil- Effekter entschlof Marine. VerfÜgung Well DPY30 eng Komponent vun vis ass , mir Ausstralung an Rollen vun aneren Deeler vun vis iwwerpréift. Real-Zäit Hinnen alleguer gewisen datt mRNA Niveau vun WDR5 an RBBP5 zu SNU1, SNU16, SNU216 an SNU638 zu deene vun HFE145 ähnlechen waren. Allerdéngs goufen d'mRNA Niveau vun ASH2L bedeitend méi héich (fantastesch änneren > 3) zu SNU1 an SNU16 wéi zu HFE145 Zellen (Lalumi 3A) als DPY30 zu Lalumi 1E. Fir ze kucken, ob WRAD Komponente mat Prolifératioun vu gastric Kriibs Zellen verbonne sinn, knockdowned mir all WRAD Komponent hir spezifesch siRNA benotzt an iwwerwaacht knockdown efficiencies vun real-Zäit Hinnen alleguer (Lalumi 3B). All siRNA (100 nm) ofgeholl der mRNA Niveauen am SNU1 an SNU16 Zellen wéi mat SCR vun 65% -75% am Verglach. Knockdown vun WDR5 an RBBP5 inhibited d'Prolifératioun vu SNU1 an SNU16 Zellen als Verglach mat SCR vun 30-48% (Lalumi 3C). Allerdéngs, inhibited ASH2L d'Prolifératioun vu SNU1 an SNU16, an deem d'Expressioun Niveau vun ASH2L héich war, wéi am Verglach mat SCR vun 85% an 75%, respektiv. VerfÜgung Rollen vun DPY30 vun der Migratioun an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen VerfÜgung Mir nächst iwwerpréift ob DPY30 der Wanderung vun gastric Kriibs Zellen reguléieren. Knockdown vun DPY30 ofgeholl der FBS-entschlof Migratiounen vun SNU1 an SNU16 Zellen versus SCR vun 35% an 45%, respektiv (Lalumi 4). Am Géigesaz, fräi DPY30 overexpression der FBS-entschlof Migratiounen vun SNU216 an SNU638 Zellen versus mierkt Zellen vun 2,5 an 2,2 fantastesch, bzw. (Lalumi 4). Dës Resultater gefouert eis d'Roll vun DPY30 an der Invasioun vu gastric Kriibs Zellen ze iwwerpréifen. An engem Matrigel Invasioun assay, inhibited DPY30 siRNA der FBS-entschlof Invasioune vun SNU1 an SNU16 Zellen versus SCR siRNA vun 65% an 84%, respektiv (Lalumi 5A an 5C). Doriwwer eraus, fräi DPY30 overexpression de-FBS entschlof Invasioune vun SNU216 an SNU638 Zellen versus mierkt Zellen vun 3,2 an 2,9 fantastesch, bzw. (Lalumi 5B a 5C). Dës Resultater weisen, datt DPY30 der Migratioun an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen ënnerstëtzt. VerfÜgung Rollen vun DPY30 zu Kriibs Biologie muss schlecht obwuel hir Rollen an dat vun ESCs an hematopoietic Grënner Zellen charakteriséiert gewiescht Équipe gemellt ginn [10, 12]. Am Moment studéieren, awer mir Roman Rollen vun DPY30 zu gastric Kriibs. DPY30 ass Kick (Donnéeën net gewisen) an héich ausgedréckt (Lalumi 1) zu puer gastric Kriibs Stoffer. Desweideren, seng knockdown oder overexpression d'Prolifératioun, Migratioun an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen reegelen. Hire Restaurant am Ausdrock, chromosomal translocations an somatic Projet'en vun Genen Zeechesaatz subunits vun SET1 /MLL investéiert goufen an ville Cancers gemellt. Dës Resultater Ënnerstëtzung der kritescher Rollen vun Memberen vun SET1 /MLL komplex an Kriibs Werdegang. VerfÜgung Up-Regulatioun vun DPY30 Ausdrock observéiert war nëmmen zu SNU1 an SNU16 gastric Kriibs Zellen ënner sechs gastric Kriibs Zellen mir iwwerpréift hunn. Ee seng weider-Regulatioun war zu méi ewéi d'Halschent vun gastric Kriibs Stoffer observéiert mir iwwerpréift hunn (Lalumi 1). Et ass schwéier dësen Ënnerscheed ze erklären. Mä, et ass net ze iwwersinn, datt d'Zuel vun gastric Kriibs Stoffer mir iwwerpréift hunn ass net genuch. Also, eng extensiv Ausdrock Etude vill méi Zuel vun Stoffer Hëllef ass néideg de Medeziner Wäert an d'Zukunft ze diskutéieren. VerfÜgung Rollen vun SET1 /MLL H3K4 methyltransferase komplex an Kriibs Biologie ass komplex. Reglementaresche subunits vun SET1 /MLL investéiert, dorënner WRAD, enthalen zwee mächtegst oncoproteins an entholl suppressors. Zum Beispill, encodes der MEN1 Gentherapie Menin, eng integral subunit vun MLL1 an MLL2, an ass zu Patiente mat Multiple endocrine neoplasia Typ 1 (MEN1) [18, 19] mutated. Ausserdeem, reguléieren Menin p18 (CDKN2C) an p27 (CDKN1B) duerch zousätzlech MLL1 komplex [20]. Am Géigesaz, WDR5, eng Komponent vun WRAD komplex, gouf als oncoprotein an Aarbecht Kriibs Rapport ze handelen, an deem et overexpressed ass an indispensabel ass fir de androgen-entschlof Prolifératioun vu entholl Zellen [21]. ASH2L, deen anere Volet vun WRAD komplex ass a ka mat der oncoprotein MYC [22] zesummekomm ass, wichteg fir d'MYC /Ha-RAS-ofhängeg Transformatioun vun Grenzwäerter Embryo Här iwert mech selwer. Ausserdeem, ass et zu vill Arte vun erhéijen overexpressed an ass kritesch fir d'Verbreedung vun entholl Zellen [23]. Am Moment studéieren, awer mir Rollen vun DPY30 als oncoprotein an der gastric Kriibs. VerfÜgung Wat molekulare Mechanismen Rollen vun DPY30 zu gastric Kriibs sinn Basisdaten? Obwuel mer net léist, kann e puer hypotheses baséiert op virdrun Studien proposéiert ginn. Ee vun méiglech hypotheses ass dass DPY30 overexpression zu der overexpressions vun oncogenes via fräi H3K4MT Aktivitéit féiert. Ausschöpfung vun DPY30 oder ASH2L féiert zu enger Ofsenkung vun H3K4me3, iwwerdeems WDR5 an RBBP5 entscheedende sinn fir all dräi Arte vun H3K4 (H3K4me1, H3K4me2, an H3K4me3) [6, 8, 10, 11]. Zousätzlech, eleng d'overexpression vun DPY30 kann H3K4MT Aktivitéit [10] Erhéijung. Zanter H3K4me2 /3 eng aktiv uerg fir Transkriptiouns ass [3, 24], fräi H3K4MT direkt vill Genen, wéi, oncogenes, oder alternativ indirekt verwandelt-regléieren entholl suppressors upregulate kann. Eng leschte Rapport dëser Hypothes Entstoen ass, datt ASH2L, enger kritescher Komponent vun SET1 /MLL komplex, gouf als oncoprotein zu Leeschtung gewisen [25, 26]. Aneren virdrun Rapport ass dass DPY30 direkt den Ausdrock vun ID Proteinen via H3K4 methylation activéiert [13, 27]. ID Proteinen Aktivitéite vun ETS1 an ETS2 inhibited wat ee vun entholl suppressor Gentherapie induce kann, p16. Am Moment studéieren, awer mir dass Deeler vun WRAD (WDR5, RBBP5 an ASH2L) Prolifératioun vu gastric Kriibs Zellen (Lalumi 3) inhibit kann, suggeréiert datt DPY30 Akt duerch d'fräi H3K4MT Aktivitéit. Méi Studien sinn néideg de Mechanismen Basisdaten de Rollen vun DPY30 zu gastric Kriibs Zellen ze lëften. VerfÜgung
Resultater VerfÜgung
Diskussioun VerfÜgung
Rotavirus spillt eng Roll bei der Entwécklung vum Typ 1 Diabetis
Perfectus Biomed fir op der IPS Konferenz zu Liverpool ze weisen
Gas detektéiert elektronesch Pille fir Diagnos vu Magen -Darm -Krankheeten
Wuesstumsprobleemer bei virzäitege Puppelcher verbonne mat verännert Darmbakterien
Studie weist antiviral Effekter vum Curcumin
Gutt Bakterien kënne Risiko vu pulmonarer Hypertonie viraussoen
Féiert Hypertonie ëmmer zu eeschte COVID-19?
Verursacht vum infektiösen Agent, schwéier akut Atmungssyndrom Coronavirus 2 (SARS-CoV-2), dCoronavirus Krankheet 2019 (COVID-19) ass dacks méi schwéier bei deenen mat ënnerierdesche medizinesche Bedé
Mikroplastik identifizéiert am mënschlechen Offall fir d'éischte Kéier
Eng Analyse vu mënschlechen Hockerproben, déi vun de Participanten an aacht Länner geholl goufen, huet festgestallt datt all getest Probe Mikroplast enthält an datt bis zu néng verschidde Plastik präs
Aart vun ieweschte Loftwee Bakterien kéint d'Asthma Schwieregkeet beaflossen
Eng nei Studie erhéicht dMéiglechkeet fir Asthma Symptomer iwwer dBakterien ze moduléieren déi allgemeng an der ieweschter Loftwee liewen. DAarbecht, déi de 16. Dezember verëffentlecht gouf, 2019, am