Interleukin 17a (IL-17a), als Profi-demagogesch cytokine, ass an wirklech vun demagogesch Krankheeten an entholl microenvironment Équipe. D'Zil vun dëser Etude ass den Effet vun IL-17a op der invasiveness vun gastric Kriibs (GC) ze ermëttelen. An der Etude, fonnt mir dass IL-17a der Migratioun an Invasioun vun GC Zellen Promotioun konnt. Ausserdeem, no mat IL-17a, déi Ausstralung an Aktivitéite vun Matrixentgasung metalloproteinase 2 (MMP-2) an MMP-9 behandelt goufen upregulated, iwwerdeems den Ausdrock vun TIMP-1 an TIMP-2 downregulated goufen. Desweideren, goufen d'nuklear /globale ufale vun p65 an p50 Trainer vun IL-17a erhuewen. Pretreatment mat helenalin, engem nuklearen Faktor-κB (NF-κB) inhibitor, huet bewisen d'Fördere Effet vun IL-17a op der Invasioun Fähegkeet vun GC Zellen an upregulation vun MMP-2 an MMP-9 bis ofschafen. Zu der Konklusioun, illustréiert eis Conclusiounen datt IL-17a der Invasioun vum GC Zellen vun activating NF-κB Passerelle Promotioun hätt, an upregulating dono dem Wëllen vun MMP-2 an MMP-9. Dës Resultater kënnen zu der Identifikatioun vun nei diagnostic lues an therapeutesch Ziler vun GC Féierung VerfÜgung
Fro:. Wang Y, Wu H, Wu X, Bian Z, Gao Q (2014) Interleukin 17a förderen Gastric Cancer Invasiveness via NF -κB Mediated MATRIX Metalloproteinases 2 an 9 Expression. PLoS NËMMEN 9 (6): e96678. Doi: 10.1371 /journal.pone.0096678 VerfÜgung
Redakter: Nikos K. Karamanos, Universitéit vun Pătraş, Griicheland VerfÜgung
Arnaque: 26. November 2013; Akzeptéiert: 11. Abrëll 2014; Publizéiert: 6. Juni 2014 zu
Copyright: © 2014 Wang et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung
Funding:. De Projet war déi National Natural Science Foundation of China (Nr 81070536) an Youth wëssenschaftlech Funds vun der Zentralbank Hospital vun Taian (2011ZRQNO35) ënnerstëtzt. D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung
Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung
Als ee vun den Top Ursaachen vun Kriibs-Zesummenhang Doud weltwäit, GC fir iwwer 700.000 Doudesfäll pro Joer responsabel ass [1]. Et ass déi zweet Équipe gemeinsam Kriibs an der drëtter Virwaat Doudesursaach ënnert Kriibs Patienten an China [2]. Déi mächtegst Invasioun an Metastasen Fähegkeet vun GC ass ee vun de Facteuren, déi aarmséileg hätt nodeems [3]. Dofir ass et wichteg d'Basisdaten Mechanismen getrueden, Roman molekulare therapeutesch Ziler ze identifizéieren déi Invasioun Fähegkeeten vun GC Zell regléieren, an domat fir GC Zäit geholl Behandlungen ze entwéckelen. VerfÜgung
IL-17a de Grënnungsmembere vun der IL ass -17 Famill déi aus IL-17a zu IL-17F laut [4] - [8]. IL-17 Familljememberen Leeschtung eng aktiv Roll am verschidde Krankheete wéi autoimmune Krankheeten, demagogesch Krankheeten, an malignant Krankheeten. Bestänneg inflammation huet Betruecht mat méi Risiko vun GC soll ginn [9]. Fréi Schrëtt an gastric carcinogenesis Debate Helicobacter pylori VerfÜgung (H. pylori) Wonn flénke chronescher aktiv an atrophic gastritis mat Produktioun vun proinflammatory mediators [10] - [13], esou wéi IL-1b, TNFα, IFNγ, IL-6, an IL-8. Allerdéngs war d'Roll vun IL-17a zu Kriibs onkompatibel laut virdrun Rapporten. Verschidde Reproche Teamchef IL-17a kéint entholl Wuesstem förderen duerch angiogenesis an invasiv Kapazitéit vun entholl Zellen Spannend [14]. Am Géigesaz, proposéiert aner Studien dass IL-17a vun Spur immun System-mediated entholl Ofleenung [15] eng Schutz- Effekt géint chronescher Rezepter Leukämie Entwécklung gewisen. Ausserdeem, verstäerkte IL-17a der cytotoxic Auswierkunge vun NK Zellen géint entholl Zellen vun den Ausdrock vun cytotoxic Molekülle augmenting [16]. Bis elo un, ass et manner Rapport iwwert d'Roll vun IL-17a an der Invasioun vu GC. VerfÜgung Am Moment studéieren, hunn mir dass IL-17a GC Zell motility Erhéijung konnt duerch upregulating MMP-2 an MMP NF-κB ët Faktoren -9 via activating. VerfÜgung Zell Kultur VerfÜgung Mënscherechter GC Zell Linn AGS aus ATCC (American Type Kultur Collection, Manassas kaaft huet, VA) an haten an DMEM ergänzt mat 10% an et Bovine serum (FBS; Hyclone, Logan, ol), 100 U /L penicillin an 100 mg /L streptomycin. Mënsch GC Zell Linnen BGC-823 an SGC-7901 goufen aus Chinese Akademie vun de Wëssenschaften (Shanghai, China) kritt, an cultured zu RPMI-1640 mëttelfristeg wouvun 10% Bovine serum, penicillin (100 U /ml) an streptomycin (100 μg /mL). All Zellen sech cultured bei 37 ° C, 5% CO 2 Loft Atmosphär. VerfÜgung Meter Chrëschtdagszäite Assay VerfÜgung GC Zellen sech cultured wéi Spuenien wär monolayers zu enger 6-gutt zappen an sech blesséiert vun engem 1 mm Sträif ganze och mat enger Pipette Tipp Stoppen, wou se zu der Plack Uewerfläch Directioun respektéiert. D'blesséiert monolayers sech dann zweemol mat PBS Katakombe Net-Operstéiungszeen Zellen mat oder ouni IL-17a (50 Dummeldéng /ml) (R & D System är ganz Famill, Punktzuel) virun 1 ml mëttelfristeg ze läschen bäigebaut. No 12 h incubation, sech verschidden Konzentratioun Gruppe vun Inverted micrographs fotografeschen. VerfÜgung An kënschtlech VerfÜgung Missiounen Assay VerfÜgung Den kënschtlech VerfÜgung Invasioun assay Leeschtung war mat de Bio-Flag Matrigel Invasioun assay System (Becton Dickinson, Franklin sin, NJ) wéi virdru beschriwwen [17]. No behandelt mat oder ouni IL-17a (50 Dummeldéng /ml), GC Zellen sech zu 200 μl serum-gratis mëttelfristeg rakommen an an der ieweschter CHAMBERS Faarwe bei 2 × 10 Western Blotting Analys VerfÜgung Lait Zell lysates aus GC Zellen sech mat Zell lysis gefiermt recoltéiert. Nuclear lysates aus cultured Zellen sech mat NucBusterTM Protein Extraktioun Kit (Novagen, Däitschland) recoltéiert laut Hiersteller d'Uweisungen. Western blotting analyséiert goufen mat der Norm Protokoll standing antibodies géint MMP-2, MMP-9, TIMP-1, TIMP-2, p52 an β-actin (Zell sécher Technology, Beverly, MA), NF-κB-p50, p65 benotzt /RelA, c-Rel, RelB, an Histone H1 (Santa Cruz déi, Santa Cruz, CA). VerfÜgung Zymography VerfÜgung BTS sech op 37 ° C, mat verschiddene Konzentratioune vun IL-17a behandelt fir 24 h, an Echantillon vun bedingt mëttelfristeg sech gesammelt. Entspriechend Bänn vun der Echantillon (Ännerung vum kruzial Zell Nummer) huet vun 0,1% gelatin-8% SDS-PAGE electrophoresis getrennt. No electrophoresis, goufen d'gels zweemol zu 2,5% Triton X-100 bei Raumtemperatur fir 30 min an dann incubated zu Reaktioun gefiermt zou (10 mm CaCl 2, 40 mm Tris-HCl an 0,01% Nan 3, pH 8.0) bei 37 ° C fir 12 h. Coomassie schéi blo R-250 gelies stain war da benotzt de gelies ze stain. D'intensities vun Bands op der gels sech mat engem Bild Analyse System (Bio-Rad Laboratoiren, Richmond, CA) berechent. VerfÜgung statistique Analys VerfÜgung All Donnéeën goufen als Mëttel ± Fils ausgedréckt. Statistesch Analyse gouf mat der 16,0 Software SPSS duerchgefouert (SPSS Galaxy Chicago, Illinois, USA) statistesch Differenzen ze diskutéieren. Student d' t VerfÜgung Azeton war fir Vergläicher tëschent zwou Gruppen benotzt an een-Manéier oder zwee-Manéier Analyse vun Varianz benotzt gouf statistesch Differenzen tëscht Gruppen ënnert verschiddene Konditiounen ze analyséieren. A p VerfÜgung Wäert manner wéi 0,05 war als statistesch relevant ze ginn. All Statistik Tester goufen zwee eesäitegen. VerfÜgung IL-17a Erhéijung Zell Motility am GC BTS VerfÜgung E Null-Meter assay Leeschtung war den Effet vun IL-17a ze bestëmmen op der Wanderung vun AGS, BGC-823, an SGC-7901 Zellen. D'Extensioun vun der Zell Wanderung war no 24 h duerch estimating de Prozentsaz vun recolonization vun der Wonn Uewerfläch zum laachen. An der Kontroll haten, war d'Bewegung net ze iwwersinn. An der Presenz vun IL-17a, war dës Bewegung däitlech no 12 h vu incubation (Dorënner 1A) steigen. Quantification Analyse uginn, datt d'Differenz war bedeitendst (Dorënner 1B). Ausserdem, huet d'Invasioun assay datt d'invasiv Fähegkeet vun IL-17a behandelt Zellen war wesentlech méi staark wéi Elteren Zellen Kontroll vun all dräi getest Zell Linnen (Dorënner 1c an 1D). Dës Donnéeë weisen datt IL-17a konnt GC Zell Wanderung an invasiveness verbesseren. Ausserdeem, mir gesinn och, dass IL-17a op d'Prolifératioun vu BGC-823, SGC-7901 an AGS Zellen (Dorënner S1) kee groussen Effet huet, proposéiert, datt d'Fördere Effet vun IL-17a op Wanderung an invasiveness net duerch Zell gestéiert ginn Prolifératioun. VerfÜgung Effekt vun IL-17a op Upregulation vun MMP-2 an MMP-9 an Downregulation vun TIMP-1 an TIMP-2 zu GC BTS VerfÜgung Well overexpression vun MMPs kann Kriibs Metastasen Promotioun [18], [19], mir propagéieren nächst den Effet vun IL-17a op MMPs Ausdrock am GC Zell Linnen. Hëllef Western blotting tëscht IL-17a behandelt an onbehandelt Zellen wéi zu Dorënner 2 an Dorënner S2 gewisen, huet d'Ausstralung vun MMP-2 an MMP-9 Verglach. D'Resultat huet opgedeckt, datt MMP-2 an MMP-9 zu IL-17a behandelt Zellen upregulated waren (AGS an BGC-823) (Dorënner 2A an 2B). An der selwechter Zäit, d'Ausstralung vun TIMP-1 an TIMP-2 waren downregulated (Dorënner 2A an 2B). Gelatin zymography war och d'Aktivitéit vun MMP-2 an MMP-9 am GC Zellen mat oder ouni IL-17a behandelt ze bewäerten gesuergt. D'Resultater weisen, datt IL-17a der Aktivitéit vun MMP-2 an MMP-9 am GC Zellen (AGS an BGC-823) (Dorënner 2C an 2D) verstäerkt. Ähnlech Resultater goufen am SGC-7901 Zellen (Dorënner S2) observéiert. Dës Resultater ugeholl, datt de pro-Metastasen Effet vun IL-17a op GC gin kéint duerch MMP /TIMP Gläichgewiicht Regulatioun an hunn eis op weider seng Mechanismus vun Aktioun entdecken. VerfÜgung IL-17a Upregulates MMP-2 an MMP- 9 läschten Beitrag via Activating NF-κB Passerelle VerfÜgung NF-κB huet als afgerappt Zilscheif vun IL-17a sécher Passerelle an villen Zellen [17], gemellt ginn [20], [21], déi gebass ass zu upregulate MMP-2 an MMP-9 Ausstralung [14], [17]. An IL-17a war och via activating NF-κB Passerelle an villen Zellen [14], [17] den Ausdrock vun MMPs Rapport ze erhéijen. Dofir, mir als nächst ob IL-17a upregulated MMP-2 an MMP-9 Ausstralung an GC Zellen duerch NF-κB activating. Als zu Dorënner 3 gewisen, huet den Ausdrock an br vun NF-κB subunits zu Keimzell vun Western blotting analyséiert. Mir gesinn, datt den Niveau vun p65 an p50 zu Käre dramatesch an AGS Zellen der IL-17a Behandlung nik war, iwwerdeems den Niveau vun globale p65 an p50 kee änneren (Dorënner 3A-D) huet. Ausserdeem war d'nuklear /globale Ëmwandlung vun dësen Molekülle op IL-17a Behandlung (Dorënner 3) fräi. Ähnlech Resultater goufen am BGC-823 Zell Linn (Dorënner S3A-E) observéiert, wat beweist, datt IL-17a NF-κB am GC Zell Linnen ausgeléist. VerfÜgung Ausserdeem, wann helenalin (5 μM) (Fläch-Aldrich, St. Louis, MO), eng NF-κB inhibitor, war dobäi ze AGS oder BGC-823 Zellen mëttelfristeg virun IL-17a Behandlung, déi Ausdrock Niveau vun MMP-2 an MMP-9 sech vill rofgaang (Dorënner 4C-d, Dorënner S4C-D). D'Resultat bewisen, dass IL-17a MMP-2 an MMP-9 Ausdrock am GC Zell via NF-κB Aktivéierung entschlof. An anere Wierder, konnt IL-17a entschlof GC Zell invasiveness och vun helenalin kënschtlech VerfÜgung (Dorënner 4A-B, Dorënner S4A-B) gespaart. Dofir, géif virschloen dëse Conclusiounen datt IL-17a NF-κB Passerelle activéiert, reguléieren dono dem Wëllen vun MMPs, an doduerch hänken Wanderung an invasiveness vun GC Zellen. VerfÜgung GC ass eent vun de meeschte fatale malignant Krankheeten an der Welt wéinst hirem héijen Terrain Taux der curative Therapien [3], [22]. GC ass enk mat chronescher demagogesch Krankheeten soll, an déi vill vun demagogesch cytokines infiltrate. IL-17a ass eent vun de wichtegste demagogesch cytokines an der Entwécklung vun de ville demagogesch Krankheeten an och dacks an entholl microenvironment fonnt [23] - [26]. Virdrun Etude ugeholl datt den Ausdrock Niveau vun IL-17 an d'entholl kéint eng onofhängeg prognostic Luucht an gastric adenocarcinoma Patienten [27] ginn. Verglach vun Iwwerliewe Tariffer tëscht Patienten mat héijen a nidderegen Niveau vun IL-17 fonnt dass Patienten mat héijen Niveau vun IL-17 hat e 5-Joer Iwwerliewe Taux vun 47% am Verglach mat 84% vun de Patiente mat nidderegen Niveau [28]. Allerdéngs, d'molekulare Mechanismen fir esou Korrelatioun, déi hëllefe kënnen eis besser d'Roll vun IL-17 an d'Entwécklung an de Fortschrëtt vun GC verstoen, bleiwen opgekläert ze ginn. VerfÜgung Am Moment studéieren, mir fonnt, datt IL- 17a gefördert der Invasioun vum GC Zellen. Metastasen ass eent vun de bedeitendste Ursaachen vun Kriibs-Zesummenhang Doud ënnert GC Patienten. Ofgeschnidden vun der ECM vu Blutt oder lymph Offshore ass kritesch ze Metastasen, well Verloscht vun der ECM Kriibs Zellen erlaabt d'Blutt oder lymphatic System ze violéieren a verbreet fir aner Stoffer an Organer [29]. MMPs, besonnesch MMP-2 an MMP-9, si responsabel fir onwiirdeg der ECM [19], [29]. IL-17a gouf confirméiert via upregulating den Ausdrock vun MMP-2 an MMP-9 [17], [26] der Invasioun vu Kriibs Zellen ze förderen. Et ass allgemeng ugeholl, datt MMP Aktivitéite vun TIMPs inhibited si extensiv ECM ofgeschnidden [29] ze verhënneren. Fir de Mechanismus vun Aktioun vun IL-17a klären, ze propagéieren mir ob d'Fördere Effet vun IL-17a op Zell Invasioun duerch Regulatioun vun der Ausstralung vun MMP-2 ass, MMP-9, TIMP-1 an TIMP-2. Eis Resultater weisen, datt IL-17a déi Ausstralung an Aktivitéite vun MMP-2 an MMP-9, Bistum a downregulated der Ausstralung vun TIMP-1 an TIMP-2, déi weider erklärt dass d'IL-17a Zell Wanderung an der Null Meter verkënnegt gefördert assay. Dofir, kéint de pro-Metastasen Effet vun IL-17a op GC ginn duerch Gläichgewiicht MMP /TIMP Regulatioun. VerfÜgung NF-κB huet als afgerappt Zilscheif vun IL-17a sécher Passerelle an villen Zellen gemellt ginn [17] [20], [21], déi MMP-2 an MMP-9 Ausstralung [14], [17] ass kapabel upregulate. An IL-17a war och via activating NF-κB Passerelle an villen Zellen [14], [17] den Ausdrock vun MMPs Rapport ze erhéijen. Also propagéieren mir ob der upregulation vun MMP-2 an MMP-9 entschlof vun IL-17a ass duerch NF-κB Passerelle activating. D'Resultater zougedréckt IL-17a nuklear br vun der p65 an p50 subunits vun GC Zellen an dono upregulated den Ausdrock vun MMP-2 an MMP-9 gefördert. Dësen Effekt kéint effektiv duerch NF-κB inhibitor gespaart ginn, proposéiert, datt d'Aktivéierung vun NF-κB d'Potential Mechanismus ass MMP-2 an MMP-9 vun IL-17a zu upregulate. VerfÜgung An Conclusioun, eis Conclusiounen ugeholl datt IL-17a konnt d'Wanderung an invasiveness vun GC Zellen vun activating NF-κB Passerelle, déi duerno der Ausstralung vun MMP-2 an MMP-9 an domat upregulated ze förderen Wanderung an invasiveness vun GC Zelle betraff. Weider characterization vun den Effet vun IL-17a op GC Invasioun an Metastasen vläicht zu der Identifikatioun vun nei diagnostic lues an therapeutesch Ziler Féierung. VerfÜgung spontan a Methode VerfÜgung
Resultater VerfÜgung
Diskussioun VerfÜgung
Ennerstëtzung Informatiounen VerfÜgung S1 Dorënner. VerfÜgung Den Effet vun IL-17a op d'Prolifératioun vu BGC-823, SGC-7901 an AGS Zellen VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0096678.s001 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung Dorënner S2. VerfÜgung IL-17a ënnerstëtzt der Ausstralung vun MMP-2 an MMP-9 an Hien der Ausstralung vun TIMP-1 an TIMP-2 zu SGC-7901 Zellen. (A) läschten Beitrag vun MMPs zu SGC-7901 Zellen sech duerch westlech blotting tëscht Zellen Verglach behandelt mat an ouni IL-17a (50 Dummeldéng /ml) fir 24 h. (B) Quantification vun der FAQ Niveau vun MMP-2 an MMP-9. Wäerter vertrieden heescht ± Fils vun dräi onofhängeg Experimenter zu triplicate gesuergt. . * p VerfÜgung &Si besteet; 0,05, am Verglach mat der Kontroll Grupp VerfÜgung Doi: 10,1371 /journal.pone.0096678.s002 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung Dorënner S3. VerfÜgung IL-17a activéiert NF-κB zu BGC-823 Zellen. (A) Western blotting Analyse benotzt gouf allgemeng p50, p65, p52, c-Rel an RelB Ausdrock vun BGC-823 Zellen mat IL-17a (50 Dummeldéng /ml) op uginn Zäit Punkten behandelt ze entdecken. (B) Quantification vun der FAQ Niveau vun globale p50, p65, p52, c-Rel an RelB. (C) Western blotting Analyse gouf benotzt fir nuklear p50, p65, p52, c-Rel an RelB Ausdrock vun BGC-823 Zellen behandelt mat IL-17a (50 Dummeldéng /ml) op uginn Zäit Punkten z'entdecken. (D) Quantification vun der FAQ Niveau vun nuklearem p50, p65, p52, c-Rel an RelB. (E) D'famill Verhältnis vun Nuklearenergie ze beurtelen Ëmwandlung vun p50, p65, p52, c-Rel an RelB. Wäerter vertrieden heescht ± Fils vun dräi onofhängeg Experimenter zu triplicate gesuergt. . * p VerfÜgung &Si besteet; 0,05, am Verglach mat der Kontroll Grupp VerfÜgung Doi: 10,1371 /journal.pone.0096678.s003 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung Dorënner S4. VerfÜgung Effects vun helenalin an IL-17a op Zell Invasioun an der Ausstralung vun MMP-2 an MMP-9 zu BGC-823 Zellen. (A) 1 × 10
Probiotika kënnen therapeutesch Virdeeler fir biopolare Patienten ubidden
Thiopurine kéinte hëllefen eng viral Replikatioun a mënschleche Coronavirus ze stoppen
Nei Studie kéint hëllefen fatale Infektiounen bei Puppelcher ze vermeiden
D'Kompositioun an d'Struktur vum nasopharyngealen Mikrobiom bezéien sech op d'Gravitéit vun der COVID-19 Krankheet
Gutt-Boost Iessen kann en Enn vun der Kandheet Ënnerernährung weltwäit enden
Mënschlech Koronavirus brauch organesch Material fir effizient tëscht Uewerflächen ze transferéieren
Verdauungsmanifestatiounen heefeg awer mëll ënner hospitaliséierten COVID-19 Patienten
Eng Equipe vun 121 Fuerscher aus den USA a Kanada bericht datt wärend Verdauungsmanifestatiounen üblech sinn ënner Leit hospitaliséiert mat Coronavirus Krankheet 2019 (COVID-19), dMajoritéit schéngt m
Ass C-Sektioun gutt fir d'Kandgesondheet?
Eng rezent Studie verëffentlecht vum VATT Institut fir Wirtschaftlech Fuerschung seet datt en ongeplangte CS gemaach huet fir eng Indikatioun déi vläicht vermeit ka ginn, huet nëmmen eng Ursaach-Effek
Genetesch Tweaking Darmbakterien reduzéiert de Risiko vu Kolorektalkriibs bei Mais fënnt Studie
Fuerscher hunn erausfonnt datt dVeraarbechtung vun de Genen vun de Bakterien, déi an den Darm vun de Mais präsent sinn, hëllefe kënnen dEntzündung an de verbonne Risiko vu kolorektalen Kriibs ze reduz