PLOS ONE: significado clínico e prognóstico da HIF-1α, PTEN, CD44v6 e Survivin para o cancro gástrico: A Meta-Analysis

Abstract

Purpose

Este estudo foi quantitativamente resumem publicada de dados para avaliar o significado clínico e prognóstico de quatro proteínas envolvidos no factor-1 (HIF-1α) regulação hipoxia-inducible da cascata de metástase.

Métodos

as buscas foram realizadas usando o MEDLINE, EMBASE, Biblioteca Cochrane, e Biomedicina chinesa bancos de dados sem quaisquer restrições de linguagem. Os estudos foram reunidas e foi calculada quer a razão de riscos (RR) ou odds ratio (OR). Potenciais fontes de heterogeneidade foram procuradas via
subgrupo e análises de sensibilidade e viés de publicação também foi realizada.

Resultados

Dezessete estudos avaliaram HIF-1α, fosfatase 20 estudos avaliaram e homólogo angiotensina (PTEN), 20 estudos avaliados Survivin, e 16 estudos avaliaram CD44v6. Os nossos resultados mostraram que o aumento da expressão de HIF-1α foi ligada a uma baixa sobrevivência de 5 anos geral (RR = 1,508; 95% de intervalo de confiança (IC) 1,318-1,725; P < 0,001). Diminuição da sobrevida foi fortemente influenciada pela invasão avançada tumor (OR = 3,050; IC95% 2,067-4,501; P < 0,001), metástases em linfonodos (1415 pacientes; OR = 3,486, IC 95% 2,737-4,440; P < 0,001), distante metástase (OR = 6,635; 95% CI 1,855-23,738; P = 0,004), invasão vascular (OR = 2,368; 95% CI 1,725-3,252; P < 0,001), desdiferenciação (OR = 2,112; IC95% 1,410-3,163; tamanho de 0,001), o tumor (OR = 1,921;; P <IC 95% 1,395-2,647; P < 0,001), e uma fase superior de TNM (OR = 2,762, IC de 95% 1,941-3,942; P < 0,001). Do mesmo modo, a expressão aberrante de PTEN, CD44v6, e Survivina também foram observados em tumores que se correlacionaram com pobre SO. As RUP mais elevados de morte em 5 anos foram 1.637 (95% CI = 1,452-1,845; P < 0,001), 1.901 (95% CI = 1,432-2,525; P < 0,001), e 1.627 (95% CI = 1,384-1,913; P < 0,001), respectivamente, com um OR >. 2 para os principais estratificadas meta-análises de fatores clínicos

conclusões

Nossas descobertas indicam que HIF-1α /PTEN /CD44v6 /Survivin, tal como medida por imuno-histoquímica, pode ser utilizado para prever o prognóstico e o potencial para a invasão e metástases em doentes asiáticos com cancro gástrico. O desenvolvimento de estratégias contra este subconjunto de proteínas pode levar a novas abordagens terapêuticas

Citation:. Chen J, Li T, Liu Q, Jiao H, Yang W, Liu X, et al. (2014) Significado clínico e prognóstico da HIF-1α, PTEN, CD44v6 e Survivin para o cancro gástrico: uma meta-análise. PLoS ONE 9 (3): e91842. doi: 10.1371 /journal.pone.0091842

editor: Hiromu Suzuki, Sapporo Medical University, Japão

Recebido: 17 Setembro, 2013; Aceito: 16 de fevereiro de 2014; Publicação: 19 de março de 2014

Direitos de autor: © 2014 Chen et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Este trabalho é suportado pelos subsídios da National Science Foundation Natural da China (81260339 e 81301886) e Fundos de pesquisa fundamental para o University Medical Ningxia (XT2012009 e XQ2012014). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

o câncer gástrico é um dos tumores mais agressivos e tende a ser associada a disseminação peritoneal, metástase linfonodal, e metástase hematogênica. Apesar de avanços recentes em seu diagnóstico e tratamento têm oferecido aumento da sobrevida a longo prazo para os pacientes diagnosticados em estágios iniciais de câncer gástrico, o prognóstico do câncer avançado permanece sombrio, com uma taxa de sobrevida em 5 anos de apenas 10-15% [1], [2]. A maioria dos pacientes com doença avançada morrem devido a complicações induzidas por metástase, mas não do tumor primário [3]. Recentemente, uma série de passos limitantes da velocidade têm sido propostas para as células tumorais se tornam metastáticos [4]. Os processos de várias etapas consistem de perda de adesão celular, invasão local, motilidade, angiogênese, intravasation, circulação, extravasamento, homing e o nicho premetastatic, e colonização organotrópica em órgãos específicos [5]. Portanto, a identificação de novos marcadores nas etapas chave da metástase vai ajudar a prever a recorrência e sobrevivência de pacientes em estágios iniciais de câncer gástrico.

A hipoxia tem sido relatada a contribuir directamente para muitos aspectos críticos da biologia do câncer, incluindo angiogénese, a transição epitelial-mesenquimal, invasão, metástase, haste de manutenção celular, metabolismo de energia, a sinalização do factor de crescimento autócrino, e refractário para terapias específicas [6], [7]. A melhor via de resposta a hipoxia, é caracterizado principalmente mediada através de um factor de transcrição denominado hipoxia-inducible factor-1 (HIF-1α) [8]. Actualmente, o número de genes alvo, que são controladas por HIF-1α, é maior do que 1000 e pode ser dividido nas seguintes cinco categorias: factores de transcrição e modificadores de histonas; enzimas de degradação da matriz; receptor, cinases associadas ao receptor, e transportadores; alvos de microRNA; e moléculas de adesão celular e proteínas de membrana [9], [10]. Além disso, a rotina de fase 1 e fase 4 ensaios clínicos que se destinam a função de HIF-1α ou expressão ter sido concluída, incluindo um ensaio piloto de topotecano oral para o tratamento de neoplasmas sólidos avançados refractários que expressam HIF-1α e os efeitos da dutasterida sobre HIF- 1α e factor de crescimento endotelial vascular (VEGF) na próstata (Ensaio clínico: NCT00117013, NCT00880672; http://clinicaltrials.gov/). Os resultados positivos destes ensaios clínicos reforçaram ainda mais o interesse no desenvolvimento de medicamentos alvo de sinalização HIF-1α
.

Apesar do desenvolvimento clínico de terapias anti-HIF 1α, o valor prognóstico e clínica da superexpressão HIF-1α em células cancerosas gástricas permanece obscuro. É essencial para explorar se os tumores em que o HIF-1α é sobre-expresso estão associados com a sobrevivência reduzida. Como a taxa de incidência e mortalidade por câncer gástrico são extremamente mais elevada no Leste da Ásia, especialmente China, Japão e Coreia, apresentamos uma meta-análise que avalia o impacto prognóstico da um subconjunto de proteínas na sinalização HIF-1α em pacientes com câncer gástrico no subgrupo de diferente continentes. Esperamos que os nossos meta-análises irá fornecer um quadro para a regulação hipóxia da cascata de metástase e ainda descobrir o papel dos genes-alvo chave hipóxia /HIF-regulado 1a no prognóstico baseado em várias etapas de metástase. Mais importante ainda, as análises de perfis de expressão de gene sobre o prognóstico pode levar ao desenvolvimento de métodos clínicos que podem ser usadas para prever o resultado de pacientes individuais num ambiente clínico.

Métodos

A estratégia de pesquisa e critérios de selecção

A meta-análise foi realizada por meio de itens de relatórios preferidos para meta-análises declaração [11], [12]. O PubMed, EMBASE, Cochrane Library, e bases de dados de infra-estrutura chinesa Knowledge Nacional (CNKI) foram pesquisados ​​(até junho de 2013), sem restrições de linguagem. Várias combinações dos seguintes termos foram utilizados para pesquisar para estudos potencialmente relacionadas com:. "Prognóstico" e "sobrevivência" e "gástrica" ​​ou "estômago", bem como "cancro" ou "carcinoma" ou "tumor"

os estudos foram incluídos na meta-análise, se eles se encontraram os seguintes critérios: (1) diagnosticado câncer gástrico e mucosa epitelial gástrica normal em seres humanos; (2) avaliaram proteínas usando métodos imuno-histoquímica (IHQ); (3) usado coortes asiáticos de centros médicos, e (4) tiveram um período de acompanhamento superior a 5 anos. A selecção de estudo foi baseada na associação de proteínas relacionadas com a sinalização de metástase de tumor mediada por HIF-1α e prognóstico. As referências dos artigos recuperados foram cross-procurou identificar quaisquer estudos não atendidas pela busca computadorizada literatura. Os autores de estudos elegíveis foram contatados para dados adicionais relevantes para a meta-análise. No entanto, nem todos os autores responderam.

Extração de dados e avaliação metodológica

Os dados recuperados de todas as publicações completos incluídos autor, ano de publicação, país, anticorpo utilizado para avaliação, e de corte para o diagnóstico com base na expressão de proteínas anormais. Além disso, os dados foram coletados no número de leitores, leituras cegas, número de controles e casos, profundidade de invasão, status do linfonodo, metástases à distância, estágio TNM, invasão vascular, histo-diferenciação, o tamanho do tumor, sexo e idade de pacientes com câncer gástrico. A sobrevivência global é definida como o tempo decorrido desde a cirurgia à morte dos doentes com cancro gástrico. Em todos os casos, os dados de interesse para as taxas de sobrevida em 5 anos foram extraídos de curvas de Kaplan-Meier.

Nós tentamos evitar cuidadosamente a duplicação de dados, examinando cada publicação, os nomes de todos os autores, eo diferentes centros médicos envolvidos. Quando um autor individual publicado vários artigos obtidos a partir do mesmo ou de sobreposição da população, apenas o artigo mais recente ou mais completo foi incluído na análise; caso contrário, foram analisados ​​dados independentes. Todos os dados foram extraídos independentemente por três investigadores (Chen J, Li T, e Liu XX), e quaisquer disparidades foram resolvidas por discussão.

A análise estatística

No presente estudo, foram analisados ​​três Categorias de modelos estratificada. O primeiro modelo multivariado estratificado foi realizada para confirmar se cada proteína foi expressa de forma anormal no cancro gástrico em comparação com a mucosa gástrica normal. O segundo resultado da meta-análise foi para medir o impacto da expressão da proteína aberrante na sobrevida global em 5 anos. O terceiro modelo foi usado para examinar o valor prognóstico da expressão da proteína que foi corrigido por variáveis ​​clínicas, incluindo sexo, idade, histo-diferenciação, tamanho do tumor, profundidade de invasão, invasão vascular, estado linfonodal, metástases à distância, e estágio TNM.

com base em características clínicas, as seguintes variáveis ​​foram comparados: T _{1 e T 2 vs. T 3 e T 4; Fase I e Fase II, vs. estágio III e estágio IV; bem e diferenciação moderada vs. pobres e indiferenciação; tumores maiores que 5 cm de tamanho vs. tumores menos de 5 cm; e pacientes com mais de 60 anos vs. pacientes com menos de 60 anos.}

Os dados foram combinados para realizar meta-análise usando STATA versão 9.0, e um valor de p bicaudal menor que 0,05 foi considerado estatisticamente significativo. As estimativas de razões de risco (RR) ou odds ratio (OR) foram pesados ​​e combinados usando diferentes modelos baseados em sua extensão de heterogeneidade. A heterogeneidade entre os estudos foi quantificada usando a estatística I ^{2, que é geralmente considerado significativo para valores ≥50%. No caso de heterogeneidade, meta-análise foi realizada utilizando o modelo de efeitos aleatórios, depois de explorar as causas de heterogeneidade. Caso contrário, foi aplicado o modelo de efeitos fixos. Além disso, a análise de sensibilidade de uma via foi realizada para avaliar a estabilidade dos resultados, a saber, um estudo único na meta-análise foi suprimido um de cada vez para verificar a influência dos dados individuais definidos na RR reunidas (ou OR ) [13], [14]. gráfico de funil tanto de Begg e teste de Egger foram utilizados para determinar qualquer viés de publicação para cada um dos grupos de estudo em pool.}

Resultados

selecção Estudo e características

Depois do rastreio de uma coleção de publicações sobre proteínas associadas com a regulação hipóxia da cascata de metástase e prognóstico, foram identificados 73 estudos que utilizaram técnicas de IHC para avaliar a expressão de quatro proteínas em nossos critérios anteriores na estratégia de procura e selecção estudo. Destes, 17 estudos avaliaram HIF-1α (a partir de Liu et ai., 2004, para Hoon Hur, et al., 2013), 20 estudos avaliaram fosfatase e tensina homólogo (PTEN) (a partir de Li et al., 2003 para Hye Seung Lee et al., 2003), 20 estudos avaliaram Survivina (a partir de Yu et al., 2002 a min a Kim et al., 2011), e 16 estudos avaliaram CD44v6 (a partir de Xin et al., 2001 a Dae-Woon Eom et ai ., 2011) (Fig. 1, Tabela 1). A idade média dos pacientes foi de 57,7 anos de idade. As principais características dos estudos incluídos são apresentados na Tabela 1 e Tabela S1, e as publicações usado para executar meta-análises estão listados nas referências S1.

Avaliação e expressão de quatro proteínas específicas

vários anticorpos foram utilizados para avaliar /CD44v6 expressão de HIF-1α /PTEN /Survivina. Entre o grupo determinado como anticorpo de HIF-1α overexpressed, cinco estudos utilizaram NB-100-105 (Novus Biologicals; CA) e três estudos utilizaram o anticorpo H-206 (Santa Cruz Biotechnologies; CA) (Tabela 1). Os pontos de corte para a sobre-expressão de HIF-1α seleccionado na maioria dos estudos foi de 10% em termos de diluição do anticorpo variando de 1:50 a 1:100 (Tabela 1). A frequência mediana para o subconjunto de proteínas expressas em cancro gástrico foi de 54,1% (gama de 38,9-80,2%) de HIF-1α, 61,2% (intervalo de 40,7-3,9%) para CD44v6, 55,6% (gama de 34,5-76,3% ) para Survivina, e 43,3% (gama de 20,0-70,2%) de PTEN. A descrição dos anticorpos utilizados nos estudos incluídos é mostrada na Tabela 1.
resultados

Meta-análise

Correlação de expressão HIF-1α entre câncer gástrico e mucosa gástrica normal.

as nossas análises, combinando 8 estudos independentes, que incluiu 923 pacientes e 898 controles, revelou que a superexpressão HIF-1α foi frequentemente observada em pacientes com câncer gástrico em comparação com o tecido normal homólogo. A OR foi 272,194 (95% de intervalo de confiança (IC) 99,702-743,112, P < 0,001)., Sem qualquer heterogeneidade entre os estudos (I ^{2 = 0,00%, diferença subgrupo P = 0,920) (Tabela 2)}

Correlação de expressão HIF-1α com a sobrevida global em 5 anos.

Meta-análise sobre o valor prognóstico da expressão HIF-1α mostrou que a taxa de sobrevida global em 5 anos após o tratamento inicial foi significativamente menor nos casos de sobre-expressa o HIF-1α em 10 estudos (1333 pacientes). O RR combinada foi 1,508 (Cl 95% = 1,318-1,725; P < 0,001), com baixo heterogeneidade nos dados (I ^{2 = 35,3%, diferença subgrupo P = 0,126) (Figura 2, Tabela 2.). Na estratificação por etnia, os resultados foram semelhantes entre os pacientes provenientes da China, Japão e Coreia (Fig. 2, Tabela 2).}

Correlação de expressão HIF-1α com variáveis ​​clínicas.

Na estratificação variáveis ​​clinicopatológicas por a profundidade de invasão do cancro gástrico, foi observada significância estatística. Pacientes com T _{3 e T 4 câncer gástrico teve maior expressão HIF-1α em 9 estudos (1188 pacientes; OR = 3,050, IC 95% = 2.067-4.501, P < 0,001) do que aqueles com T 1 e 2 câncer gástrico T, com moderada heterogeneidade entre os estudos (I ^{2 = 53,8%, diferença subgrupo P = 0,027) (Tabela 2). Na estratificação para o status de linfonodo de câncer gástrico, os resultados mostraram que overexpressed HIF-1α foi significativamente associada com metástases em linfonodos em 11 estudos (1415 pacientes; OR = 3,486, IC 95% = 2,737 -4,440, P < 0,001), com baixa heterogeneidade entre os estudos (I 2 = 31,4%, diferença subgrupo P = 0,148) (Tabela 2). Na estratificação para o status de invasão vascular, a sobre-expressão de HIF-1α mostrou uma associação significativa com a presença de invasão vascular em 6 estudos (798 pacientes; OR = 2,368, IC 95% = 1,725-3,252, P < 0,001), com baixa entre heterogeneidade -Estudo (I 2 = 43,5%, diferença subgrupo P = 0,115) (Tabela 2). Ao estratificar a metástase do câncer gástrico, expressão HIF-1α foi significativamente associada com metástases à distância em 5 estudos (469 pacientes; OR = 6,635, IC 95% = 1,855-23,738, P = 0,004), embora, com evidente entre-estudo heterogeneidade (I 2 = 73,3%, diferença subgrupo P = 0,005) (Tabela 2). Na estratificação ainda mais o estágio TNM expressão, HIF-1α de pacientes com estágios III e IV câncer gástrico foi muito maior do que aqueles com a fase I e II câncer gástrico em 10 estudos (1274 pacientes; OR = 2,762, IC 95% = 1,941-3,942 , P < 0,001), sem significativa heterogeneidade entre os estudos (I 2 = 48,4%, diferença subgrupo P = 0,042) (Tabela 2)}}

também observamos uma correlação entre overexpressed HIF-1α com. pobre diferenciação histológica em 10 estudos (1324 pacientes), porque as RUP em pool (IC 95%) eram 2.112 (1,410-3,163, P < 0,001) e o tamanho do tumor foi 1,921 (1,395-2,647, P < 0,001), mas não para o sexo (0,905; 0,679-1,205, P = 0,495) e idade (0,846; 0,667-1,072, P = 0,166), entre todos os pacientes asiáticos (Tabela 2)

Correlação de expressão de PTEN com o prognóstico
..

Os resultados combinados mostraram que a expressão de PTEN em pacientes asiáticos com câncer gástrico foi significativamente menor do que os controles entre 11 estudos (1498 pacientes e 1164 controles, ou = 16.930, 95% CI = 8.613-33.280, P < 0,001) (Tabela 2 ). expressão de PTEN reduzida correlacionada com sobrevida global pobre em 9 estudos (1551 pacientes; RR = 1,637, IC 95% = 1,452-1,845, P < 0,001) (Fig. 3 e Tabela 2). análise de subgrupo mostraram uma tendência que reduziu os níveis de PTEN foram associados com os seguintes fatores: profundidade da invasão (12 estudos, 1599 pacientes; OR = 2,604, IC 95% = 1,554-4,366, P < 0,001); metástases em linfonodos (18 estudos, 2258 pacientes; OR = 2.484, 95% CI = 1.836-3.360, P < 0,001); metástases à distância (9 estudos, 1393 pacientes; OR = 2,528, IC 95% = 1,703-3,751, P < 0,001); estágio TNM; 12 estudos, 1513 pacientes; OR = 2,345, IC 95% = 1,601-3,435, P < 0,001); diferenciação histológica (13 estudos, 1564 pacientes; OR = 1,715, IC 95% = 1,371-2,145, P < 0,001); o tamanho do tumor (4 estudos, 501 pacientes, ou = 2,188, IC 95% = 1,468-3,259, P < 0,001); sexo (12 estudos, 1610 pacientes, ou = 1.431, IC 95% = 1,126-1,818, P = 0,003); e idade (10 estudos, 1141 pacientes, ou = 1.494, IC 95% = 1,148-1,944, p = 0,003).. (Tabela 2)

Correlação de expressão CD44v6 com o prognóstico

A resultado semelhante foi observado para CD44v6. As análises agrupadas de 9 estudos mostraram que a expressão CD44v6 no câncer gástrico (758 pacientes e 621 controles) foi significativamente maior em comparação com os controles (OR = 82,673, 95% CI = 44,980-151,953, P < 0,001) (Tabela 3). CD44v6 superexpressão foi associada a um maior risco de morte em 5 anos em 5 estudos (767 pacientes; RR = 1,901, IC 95% = 1.432-2.525, P < 0,001) (Fig. 4, Tabela 3). Dos fatores relacionados ao tumor, o aumento da profundidade da invasão (10 estudos, 932 pacientes; OR = 2.251, IC 95% = 1,415-3,582, P = 0,001), metástases em linfonodos (12 estudos, 1149 pacientes; OR = 3.027, 95 % IC = 2,313-3,962, p < 0,001), metástases à distância (5 estudos, 578 pacientes; OR = 3.431; IC95% = 2.157-5.456, p < 0,001), invasão vascular (6 estudos, 753 pacientes; OR = 1.926 , IC 95% = 1,170-3,171, P = 0,01), diferenciação histológica (8 estudos, 573 pacientes; OR = 1,704, IC 95% = 1,193 2,434, P = 0,003), e estágio TNM (7 estudos, 589 pacientes; OR = 3,918, IC 95% = 2,658-5,777, P <.. 0.001) forneceu informações prognóstico notável (Tabela 3)

Correlação de expressão Survivina com o prognóstico

em comparação com controles normais, a superexpressão de Survivin foi associada a pior evolução no câncer gástrico entre os 11 estudos (863 pacientes e 839 controles, ou = 83.622, 95% CI = 46.476-150.455, P < 0,001) (Tabela 3). Este resultado da estimativa reunida foi estatisticamente significativa durante 5 anos de sobrevivência global prejudicial em 6 estudos (634 pacientes; RR = 1,627, IC de 95% = 1,384-1,913, P < 0,001) (Figura 5, Quadro 3.). sobrevida reduzida foi fortemente influenciado pelo tamanho do tumor (6 estudos, 701 pacientes; OR = 1,508, IC 95% = 1,110-2,048, P = 0,009), metástases à distância (4 estudos, 423 pacientes; OR = 1,901, IC 95% = 1.101 -3,280, P = 0,021), e estágio TNM (6 estudos, 520 pacientes;. OR = 3,215, IC 95% = 1,624-6,364, P = 0,001) (Tabela 3)

análise de sensibilidade e viés de publicação

no presente estudo, análise de sensibilidade indicou que a RR agrupada (ou OR) não foi significativamente influenciada pela omissão de qualquer estudo único em um determinado momento. Além disso, os resultados mostraram que não havia evidência de viés de publicação para a maioria das análises de subgrupos (Tabela 2 e 3). No entanto, os preconceitos potenciais observada para profundidade de invasão para o grupo de HIF-1α (P _{viés = 0,017), o estudo de caso-controle (P viés = 0,034) e sobrevida global (P viés = 0,006 ) para o grupo PTEN e estudo de caso-controle (P viés = 0,011), profundidade da invasão (P viés = 0,027) e sobrevida global (P viés = 0,008) para o grupo Survivin poderia ser descartada por Begg do e testes de Egger (Tabela 2 e 3).}

Discussão

Quase dois terços dos casos de câncer gástrico do mundo ocorrem na Ásia (China, Japão e Coreia) [15]. A mortalidade de pacientes com câncer é em grande parte causada por metástases ao invés de seus tumores primários no momento do diagnóstico. Portanto, identificar o risco de recorrência da doença e mortalidade em pacientes com câncer gástrico é crítico para monitorar os pacientes e selecione terapias farmacológicas adequadas na prática clínica [16], [17]. No entanto, os biomarcadores úteis para predizer o prognóstico de pacientes com câncer gástrico ainda não foram bem estudados. Aqui, apresentamos um subconjunto de potenciais biomarcadores clinicamente úteis, HIF-1a /PTEN /CD44v6 /Survivin, e precisamente estimado o seu prognóstico e significado clínico-patológico.

Evidências crescentes sugerem que microambientes tumorais hipóxicas, especialmente a sobre-expressão de HIF -1, estão fortemente implicados como a marca de uma grande variedade de tumores malignos humanos [18], [19]. Quando activado pelo gene supressor de tumor novela PTEN [5], [20], HIF-1α pode transcricionalmente regular uma série de moléculas de hipoxia-responsivo que contribuem para a resistência às drogas, a transição epitelial-mesenquimal, sobrevivência, angiogénese e metástase [9] , [10], [21], [22], [23], incluindo indutores de angiogénese (por exemplo, VEGF), a proliferação de proteínas reguladoras (por exemplo, survivina), e os mediadores de metástases (por exemplo, CD44v6, MMP, E- caderina). Neste estudo, descobrimos que a sobre-expressão de HIF-1α ocorreu com uma frequência média de 54,1% no câncer gástrico. Os pacientes que expressavam níveis elevados de inibidores de HIF-1α foram associados com um pior resultado, com um risco partilhado pela sobrevivência global (RR = 1,508), que era semelhante ao obtido em um estudo publicado recentemente sobre o carcinoma hepatocelular (HR = 1,65) [24] . Além disso, a expressão aberrante de PTEN, CD44v6 e Survivin também foram observados em tumores que correlacionam com a sobrevivência geral pobre, com risco de morte aos 5 anos de 1.637, 1.901 e 1.627, respectivamente (Tabela 2 e 3). análise de subgrupo confirmou que a sobrevivência reduzida foi significativamente correlacionada com o aumento da desdiferenciação, tamanho do tumor, invasão tumoral avançada, linfonodos spread, metástases à distância, invasão vascular, e mais alto estágio TNM, indicando aumento da agressividade biológica e uma maior possibilidade de difusão sistêmica.

tumores gástricos pode desencadear o desenvolvimento substancial de novos vasos sanguíneos para o crescimento tumoral, a manutenção, e metástase [25], [26]. A elevada proliferação de células tumorais pode induzir hipóxia local, que é um forte estímulo para a HIF-1α. A perda de PTEN em cancro gástrico promove a angiogénese e invasão do tumor, aumentando a expressão de VEGF por meio do aumento do nível de proteína HIF-1α, que é um processo activo que necessita da degradação da matriz extracelular, o aumento da permeabilidade microvascular, tanto no sangue e vasos linfáticos, e a pressão do fluido intersticial (IFP) [27], que favorece a progressão do intravasamento e extravasamento de células tumorais. Isto pode oferecer uma possível explicação para a forte associação estatística observada da superexpressão HIF-1α com invasão avançado do tumor, linfonodo disseminação, invasão vascular, e metástases à distância. Estudos recentes têm demonstrado que a percentagem de células positivas para CD44 que expressam variantes exões v6 (CD44v6) em células tumorais pode ser significativamente aumentada através de transcrição HIF-1α mediada sob condições hipóxicas [28]. CD44v6, uma molécula de adesão celular, tem sido proposta a funcionar no homing de linfócitos, de ligação extracelular da matriz, a migração celular e invasão. Por conseguinte, um elevado nível de expressão do CD44v6 também pode contribuir para o fenótipo agressivo. Além disso, a regulação positiva de Survivina por HIF-1α e PTEN contribuiu para cisplatina (CDDP) resistência, indicando que a inibição destas vias pode ser uma estratégia potencial para superar a resistência a CDDP no tratamento do cancro gástrico [29].

Estas análises têm várias implicações importantes. Em primeiro lugar, mostra-se que a expressão anormal de HIF-1α /PTEN /CD44v6 /Survivina está associada a um pior resultado, o que sugere que cada uma das proteínas pode ser um alvo terapêutico útil para o desenvolvimento de drogas. Actualmente, alguns ensaios clínicos de segmentação HIF-1α /PTEN /Survivina em diferentes fases estão a ser desenvolvidas, o que provavelmente irá beneficiar populações com determinadas condições (http://www.clinicaltrials.gov) (Tabela 4). Em segundo lugar, as análises destacam a importância do desenvolvimento de vários biomarcadores para resposta ao tratamento monitoramento, usos clínicos de inibidores de HIF-1α, e na avaliação do prognóstico. Também notamos várias meta análises nova-ly-já publicado de estimar o valor prognóstico de qualquer HIF-1α ou Survivin em paciente com câncer gástrico [30], [31], [32], [33]. Entre eles, três quartos das bases de dados eletrônicas foram usadas para identificar estudos publicados antes de dezembro de 2012, com o HR <combinados; 2. Uma vez que a hipoxia é susceptível de ter complexo, e mesmo oposta, efeitos durante diferentes fases de desenvolvimento do tumor [5], [8], qualquer molécula única pode não ser utilizado para prever o prognóstico independentemente cheio de pacientes. Combinações de proteínas envolvidas na regulação do HIF-1α da cascata de metástase deve fornecer maior poder prognóstico sobre si mesmos marcadores individuais. Além disso, avaliar sistematicamente os principais fatores prognósticos em câncer gástrico, tanto tumor-e relacionada ao paciente, também podem ter impactos significativos no momento do diagnóstico ou tratamento cirúrgico, incluindo a profundidade de invasão do tumor, linfonodo disseminação, invasão venosa, estádio TNM , a diferenciação, o tamanho do tumor, bem como a idade e sexo. No presente estudo, os resultados mais importantes da meta-análise de variáveis ​​clínicas entre os pacientes asiáticos mostrou uma magnitude de tamanho de efeito de OR > 2, e em alguns casos > 3. Como regra do polegar, um fator prognóstico com RR (ou OR) > 2 é considerado de valor prático útil [34]. Portanto, acreditamos que nossos resultados vão fornecer informações mais úteis e precisas para a tomada de decisão clínica sobre câncer gástrico. Em terceiro lugar, como mostrado pelos nossos relatórios anteriores, VEGF parece ser um fator prognóstico significativo para a metástase hematogênica de câncer gástrico (RR = 2,45, P = 0,000) [34], [35]. Além disso, propusemos três outros genes, E-caderina, STAT3, e MMP-9, como biomarcadores de prognóstico de metástase de tumor. Portanto, as análises combinando resultados anteriores podem apresentar um possível eixo de acção pelo HIF-1α e sua via de sinalização oncogénica (Fig. 6), o que poderia contribuir para melhorias na avaliação do prognóstico, análise funcional e terapia-alvo de drogas na prevenção e tratamento de câncer gástrico. A partir desta perspectiva, acreditamos que a nossa meta-análise faz efectivamente presente significado positivo e novidade.

Existem também limitações que devem ser observadas com base na presente análise. Em primeiro lugar, porque esta é uma análise baseada em literatura a partir da qual os resultados predominantemente positivos foram publicados, a nossa estimativa para a associação entre o HIF-1α /PTEN /CD44v6 /Survivin e mau resultado pode ser inflado. Portanto, as discrepâncias nas conclusões de vários estudos incentivou pesquisadores a publicar seus dados, independentemente do significado dos seus resultados, o que pode limitar o viés de publicação. No presente estudo, colocamos ênfase na avaliação dos preconceitos entre os estudos e identificar potenciais fontes de heterogeneidade. Análises de subgrupos por etnia e variáveis ​​clínicas também foram realizadas. Nós exaustivamente avaliou os vieses de publicação usando testes de Begg e Egger das e não detectou qualquer desvio significativo entre a maioria dos estudos, com exceção dos vários fatores mencionados na seção "Resultados". Em vista disso, estamos confiantes de que os resultados de nossa meta-análise são confiáveis. Além disso, não foi possível reunir as taxas de risco de morte por causa de uma falta de dados em tempo-a-morte. Nós só descobri a razão de risco de morte em pontos de tempo fixos. Embora esta medida é menos robusta, pois não considera a duração da sobrevivência até a morte, este é o único método viável dos dados disponíveis [36].

Em conclusão, nossas análises mostram que a expressão aberrante de HIF -1α, PTEN, CD44v6, e a survivina, tal como medido por IHC, pode prever o risco de sobrevivência em 5 anos e possibilidade de invasão e metástase em doentes com cancro gástrico, particularmente em doentes asiáticos. Estes dados sugerem que o desenvolvimento de estratégias contra este subconjunto de proteínas pode levar a um programa de tratamento terapêutico para o cancro gástrico razoável. No entanto, mais grande amostra e estudos populacionais não-asiáticos são obrigatórios.

Informações de Apoio
Tabela S1.
principais características da expressão de proteínas de factores de prognóstico
DOI: 10.1371. /journal.pone.0091842.s001
(DOC)
Referência S1.
Referências complementares inscritos no Metanálises
doi:. 10.1371 /journal.pone.0091842.s002
(DOC)
Checklist S1.
PRISMA 2009 Lista de verificação para os meta-análises
doi:. 10.1371 /journal.pone.0091842.s003
(DOC)
Diagrama de Fluxo S1.
PRISMA 2009 Diagrama de Fluxo de meta-análises
doi:. 10.1371 /journal.pone.0091842.s004
(DOC)

• PLOS ONE: A Novel Funcional TagSNP Rs7560488 na DNMT3A1 promotor é associadas à susceptibilidade ao cancro gástrico, modulando a atividade do promotor
• PLOS ONE: ALDH2 e ADH1 polimorfismos genéticos podem contribuir para o risco de câncer gástrico: A-Análise Meta