Plos ONE: Zakonsko predpisani B Cell Funkcija zavirajo kajenje in debelost pri H. pylori preiskovancih, okuženih in je povezano s povečano tveganje za Rak želodca

Povzetek

Helicobacter pylori
okužba pojavlja pri več kot polovici svetovnega prebivalstva in je glavni vzrok za raka želodca. Niz načinom življenja in prehranskih dejavnikov, kot so kajenje tobaka in debelosti, je bilo ugotovljeno, da dvignemo tveganje za razvoj raka. V tej študiji smo skušali ugotoviti imunološko vidike med H
. pylori
okužbe in razvoj raka želodca. Ugotovili smo, da so B celice iz H
. pylori
okuženimi bolniki predstavila spremenjeno sestavo in delovanje v primerjavi z neokuženih bolnikov. IL-10-izražanje CD24 ^{+ CD38 + B celice so povečana pri H
. pylori
okuženimi bolniki, vsebuje močno regulativno dejavnost pri zaviranju T celic vnetno izločanje citokinov, in odgovorila neposredno na H
. pylori
stimulacija antigen. Zanimivo je, da v H
. pylori-
okuženih predmetov za nekadilce in debele osebe, število IL-10 + B celice in CD24 + CD38 + B celice so se zmanjšali v primerjavi z H
. pylori
okuženimi asimptomatski predmete. Regulativne funkcije, ki jo posreduje CD24 + CD38 bila oslabljena tudi + B celice. Poleg tega je rak želodca pozitivnih bolnikih zmanjša IL-10, ki proizvajajo B celičnih frekvenc po H
. pylori
-stimulation. Skupaj, ti podatki kažejo, da v H
. pylori
-infection, CD24 + CD38 + B celica molekul in igra pomembno vlogo pri zatiranju pro-vnetne odzive, po možnosti z IL-10, proizvodnje, funkcijo, ki ne bi bil upoštevan pri kajenju in debeli bolniki}

Navedba. Li G, Wulan H, Song Z, Paik PA, Tsao ML, Goodman GM, et al. (2015) Predpisani B Cell Funkcija zavirajo kajenje in debelost v H
. pylori
okuženimi predmeti in je povezano s povečano tveganje za želodca raka. PLoS ONE 10 (7): e0134591. doi: 10,1371 /journal.pone.0134591

Urednik: Masaru Katoh, National Cancer Center, JAPONSKA

Prejeto: 3. februar 2015; Sprejeto: 13. julij 2015; Objavljeno: 30. julij 2015

Copyright: © 2015 Li et al. To je prost dostop članek razširja pod pogoji Creative Commons Attribution License, ki omogoča neomejeno uporabo, distribucijo in razmnoževanje v katerem koli mediju, pod pogojem, da prvotni avtor in vir knjižijo

Razpoložljivost podatkov: Vsi pomembni podatki so v prispevku

financiranje:.. avtorji nimajo podpore ali sredstva za sporočanje

nasprotujočimi si interesi. avtorji so izjavili, da ne obstajajo konkurenčni interesi

Uvod

Helicobacter pylori (H
. pylori)
je neke vrste Gram-negativne patogene bakterije najdemo v več kot polovico svetovnega prebivalstva in prednostno zavira zgornja prebavila, vključno z želodčno epitela in dvanajstnika trakta [1,2]. Čeprav je velika večina (> 80%), so okužb asimptomatska, bo 10-20% okužene predmete razvoj peptične razjede, medtem ko bo 1-2% pridobili raka na želodcu [3]. Natančen mehanizem razvoja raka kot posledica H
. pylori
okužba ni dobro opredeljen, vendar kronična zdravimo vnetje v zgornjem delu gastrointestinalnega trakta je mislil, da prispeva k nadaljnjemu poškodbe želodčne epitela [4,5]. Natančneje, vnetje, povezano signalne molekule, kot so tumorske nekroze alfa faktorja (TNF-a), so ugotovili, da spodbujajo želodčne tumorigeneze, ki je povečana pri H
. pylori
okužba [6]. Drugi pro-vnetnih citokinov T celice izločajo, vključno z IL-2, IL-17, in interferon gama (IFN-g), ki navzgor regulirana tudi v H
. pylori
okužbe in so povezane s povečanim tveganjem za želodčne tumorigeneze [7-10]. Številni drugi dejavniki, kot so neprekinjeno izpostavljenostjo kajenju tobaka in debelost, so v pozitivni korelaciji s povečanim tveganjem za raka želodca, čeprav je osnovni mehanizem nejasno [3,11].

Pred kratkim je vlogo tolerance- induciranje celice B je označena v seriji infekcijskih bolezni in avtoimunske bolezni [12]. Pri miših, CD1d ^{hiCD5 + B celic je bilo ugotovljeno, da se vzpostavi tolerogenih okolje, v tkivih in imajo vlogo pri preprečevanju avtoimune indukcijo [13]. Pri ljudeh, CD19 + CD24 hiCD38 hi B celice, podobne tolerance indukcijo vlogo pri zdravih kot tudi-HBV okužene osebe [14]; nastop avtoimunska bolezen, povezana z izgubo regulativne funkcije v tem B celični podskupini [15]. IL-10 je pleiotropen imunoregulacijsko citokin, ki je sposobna inhibirati vrsto pro-vnetnih citokinov, vključno z IL-2, IL-17, IFN-g in TNF-a, ki je prikazan na močno zaviranje zmožnosti antigen predstavitvi v antigen predstavljajočih celic [16]. Osrednji vse tolerance induciranje podskupine B celic, IL-10 proizvodnja je ključnega pomena, da B regulacijo celično posredovanega pri zatiranju T-celično posredovanega vnetje [12,17]. Vloga-celično posredovano ureditve B v H
. pylori
okužba in kasnejše indukcijo raka želodca, pa je niso obravnavali.}

V tej študiji smo analizirali B celic sestavo in citokinov izraz profil v H
. pylori
okuženimi predmeti. Povečane odstotki CD24 ^{+ CD38 + B celice in nižje odstotkih naivnih celic B in mirujoče celice spominske B so bile ugotovljene v H
. pylor
i-okuženih predmetov. CD24 + CD38 + B celice v H
. -pylori okuženih predmetov je
povečal delež IL-10, proizvodnje, in je zatreti pro-vnetnih citokinov izražanje pri sočasni gojili z avtologne T celic. H
. pylori-ov
timulated CD24 + CD38 + B celice H
. pylori-
okuženih predmetov močno izločajo IL-10. Zanimivo je, H
. -pylori okuženih kajenje
so predmeti in debeli subects znižala raven CD24 + CD38 + B celic. Poleg tega je CD24 + CD38 + regulatorni B celice v kajenju in debelih osebah je bilo ugotovljeno, da pokažejo izgube omejevalno funkcijo, ko so spodbudili sodelovanje gojili z avtolognih celic T in zniža raven IL-10 po neposredni H
. pylori
stimulacija. Poleg tega so v kajenje in debelih bolnikih, ki so kasneje razvili raka na želodcu, je bilo še dodatno zmanjšati frekvence IL-10, ki izločajo celice B, v primerjavi s temami, ki niso imeli raka na želodcu. Skupaj ti podatki pokazali, da so CD24 + CD38 + B celice povečana pri H
. pylori
okuženimi in je funkcionalno zatreti T celično tvorbo vnetnih citokinov. CD24 + CD38 + B celice pri kadilcih in debelih osebah, vendar pa so bile odporne na H
. pylori
-stimulation, proizvaja manj IL-10, in manjkalo omejevalno zmogljivosti.}

Materiali in metode

Študijski predmeti

smo pridobili primarne periferne krvne vzorce od 55 H
. pylori
okuženimi bolniki razjeda brez, od katerih jih je 15 primarni porabniki tobačnega dima in 15 so razred I debelih (30kg /m ^{2 < BMI < 35 kg /m 2 ) predmeti, kot tudi 15 zdravih H
. pylori
-uninfected razjeda brez posamezniki. Posamezniki, ki imajo kronične izpostavljenosti pasivnega kajenja so bili izključeni iz študije. niso bile ugotovljene nobene pomembne razlike glede na starost, spol in dotedanje okužb med študijske skupine. so bili upoštevani vsi predmeti za 5 let za stanje razvoja raka. Vsi predmeti so bili nepovezani posamezniki iz province Henan in okoliško regijo. Bolniki so bili zaposleni od januarja 2008 do december 2013, iz 155. Central Hospital PLA na Kitajskem. Kontrole so rak brez posamezniki, naključno izbranih iz raka presejalnega programa Skupnosti za zgodnje odkrivanje raka izvedena v istih območjih, v istem obdobju bolniki so bili zaposleni. Stopnja odgovora za obe nadzora in primerih je bila 95%. Merila za izbor zdravih kontrol, vključenih posameznikov rakavih brez in frekvenčno ujemanje na primere, po spolu in starosti (± 5 let). Pri zaposlovanju, je bilo napisano privolitev pridobljena iz vsakega predmeta in osebnih podatkov, kot so spol, starost, težo, višino in kajenje tobaka so bili zbrani s pomočjo vprašalnika. Niso bili uporabljeni vzorci vseh predmetih "v vseh poskusih zaradi nepopolnega izpolnjevanja bolnikov in nezadostnih celic pri nekaterih bolnikih. Ta študija je bila odobrena s Institutional Review Board of The 155. centralne bolnišnici PLA.}

Priprava vzorcev

perifernih krvnih enojedrnih celicah (PBMC) smo izolirali iz perifernih krvnih vzorcev s standardnim postopkom Ficoll-Hypaque in takoj zamrzniti na -150 ° C do uporabe, ali se uporabljajo v poskusih takoj, če opozoriti. Redno Gojišče je RPMI-1640, dopolnjenem z 10% fetalnega govejega seruma, 5mL od 100U penicilina /0,1 mg /ml streptomicina, ter 5mL od 2mM L-glutamina. Celice smo kultivirali v 5% CO _{2 pri 37 ° C v določenem časovnem obdobju.}

celice celice izolacijo

T in B so bili izolirani z uporabo Human T celici ali B celice negativno Izbira Kit (Stemcell, Vancouver, Kanada), po protokolih, ki jih je proizvajalec. Je čistost od T in B celičnih izolacij bila večja od 94%, s pretočno citometrijo. Za izčrpavanje CD24 ^{+ CD38 + B celic v nekaterih poskusih, so prečiščena B celice obarvamo z PE CD24 anti-ljudi in APC anti-človeški CD38 za 30 minut. Celice so nato poslani v živo celico sortiranje in so bile izčrpane CD24 + CD38 + celice. Pri določanju celotnega B celic, so bile skupne celice B pošlje živi celici sortiranja brez protiteles}

Pretočna citometrija

smo uporabili naslednje anti-človeški monoklonska protitelesa. IL-10, TNF a (eBioscience, San Diego, CA, ZDA); CD3, CD4, CD19, CD20, CD21, CD24, CD27, CD38 (Biolegend, San Diego, CA, ZDA); IFN-g (BD Biosciences, San Jose, CA, ZDA); CD8 (Invitrogen, Grand Island, NY, ZDA). Očiščen humanega IgG (Biolegend, San Diego, CA, ZDA) je bila uporabljena za blokiranje Fc receptorje, ko obarvanje populacije, ki vsebujejo celice B. Za nekatere poskuse, phorbol-12-miristat-13-acetat (PMA, Sigma), ionomicin (Sigma, München, Nemčija), ali toplotno ubil H
. pylori
(Sigma, München, Nemčija) smo uporabili za spodbujanje celic. GolgiStop in GolgiPlug dodamo 6h pred žetvijo celice za znotrajcelične obarvanju IL-2, IL-17, IFN-g, TNF-a, in IL-10. FlowJo bila uporabljena za pretočna citometrija analizo.

Luminex vsebnosti

IL-2, IL-17, IFN-g, TNF-a in IL-10 iz celic T in B celic smo kvantitativno izmeri s multipleks Luminex testom po protokolih, ki jih je proizvajalec s spremembami (EMD Millipore, Etobicoke, Kanada). Skupno 2x10 ^{5 T celic in /ali B celice zasadimo v vsako vdolbino 96 vdolbinicami (Corning, Tewksbury, MA, ZDA). Za stimulacijo B celice, toplotno ubil H
. pylori
dodamo celicam B, ki so prevlečene na dnu 96-dobro transwell ploščo (Corning, Tewksbury, MA). Za stimulacijo T celic, je bil spodnji del transwell plošče predhodno inkubirana z anti-humani CD3 (klon OKT3) preko noči in speremo, nakar očistimo celice T smo prenesli v ploščo. Človekovih kroglice protiteles zajetje citokin dodamo k zgornji komoro 96-dobro transwell ploščo. Dvanajst ur pozneje, so bile pridelane kroglice, opran in berejo v skladu s protokolom proizvajalca.}

Statistična analiza

D'Agostino in Pearson testu, vse normalnost je bila uporabljena preveriti, ali so bili podatki normalno porazdeljeni. Enosmerne analize variance (ANOVA) smo uporabili za primerjavo med več skupinami, čemur sledi Dunn testu. Test t študenta smo uporabili za primerjavo med obema skupinama. Če nabori podatkov bistveno odstopale od normalne porazdelitve, smo uporabili neparametrični testi. Vse statistične analize smo opravili s pomočjo Prism (GraphPad Software). P &0.05 smo imeli za signifikanten. Rezultati so prikazani kot povprečje ± S.E.M.

Rezultati

H
. pylori
okuženimi predmeti so spremenili v obtoku sestava B celic

Za analizo možnih sprememb v vlogi odzivov celic B v H
. pylori
okužbe in kako bi to vplivalo na kajenje in debelost, 15 zdrav H
. pylori
-uninfected ( H
. pylori
-uninfected) prostovoljcev, 20 H
. pylori
okuženimi asimptomatski nekadilske brez debelih (asimptomatski) predmetov, 15 H
. pylori
okuženimi kajenja niso debeli (za nekadilce) predmetov in 15 H
. pylori
okuženimi nekadilske debeli (debeli) predmeti so bili zaposleni v tej študiji. Demografski in klinični podatki so povzeti v tabeli 1.

Krožno celic B v periferni krvi zdravih oseb sestavljajo predvsem IGD ^{+ CD27 - naivnih B celice in CD21 + CD27 + počiva spomin celic B, medtem ko pri kroničnih okužbah, je pogosto zmanjšanje naivni celicah B in počiva celice pomnilnika B, in povečanje CD21 lo aktivira celice B in CD24 + CD38 + B celice [15,18]. najprej smo preučili sestavo B v obtoku celic v H
. pylori
okuženimi predmeti. Periferne krvne mononuklearne celice (PBMC) smo obarvali za površinski marker ekspresijo neposredno ex vivo
(slika 1A). Ugotovili smo, da v primerjavi z H
. pylori
-uninfected zdravih osebah, vse H
. pylori
okuženimi skupin so nižje odstotke od IgD + CD27 - naivnih B celice (P < 0,001 za vse, slika 1B in 1C). Odstotki CD21 + CD27 + mirujoče celice spominske B so bile v H
zmanjša. pylori
okuženimi predmeti za nekadilce in debelih ljudeh v primerjavi z zdravimi osebami (P < 0,001 za oba) in odstotek CD21 + CD27 + B celice v debelih osebah se je zmanjšalo v primerjavi z H
. pylori
okuženimi asimptomatski predmetov (P < 0,01). Zanimivo je, da so odstotki CD24 + CD38 + B celice so bili različni med različnimi skupinami H
. pylori
okuženimi predmeti. H
. pylori
okuženimi asimptomatski predmeti vsebujejo veliko večje odstotke CD24 + CD38 + B celice od zdravih kontrol (P < 0,001). Odstotek CD24 + CD38 + B celic smo reducirali pri kadilcih v primerjavi s tisto pri asimptomatičnih predmetov (P &0.05), vendar še vedno višja od tiste pri zdravih osebah (P < 0,001). Pri debelih osebah, odstotek CD24 + CD38 + B celice ni bila bistveno drugačna od tiste pri zdravih osebah, vendar pa se je zmanjšal od pri asimptomatskih osebah (P < 0,001)}

H
. pylori
okuženimi predmeti so spremenili B celic citokinov izraz profil

Prej so B celice ugotovljeno, da povečujejo ali zaviranje imunskega odziva s proizvodnjo serije citokinov z različnimi funkcijami, vključno s pro- vnetnih citokinov, kot so IL-2, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-g in TNF-a, kot tudi IL-10 in preoblikovanje rastnega faktorja beta (TGF-b) regulatornih citokinov [19] . Tukaj smo opisali izražanje citokinov celic B v študijskih predmetov. Ugotovili smo, da je ex vivo
ekspresijo IL-2, smo IFN-g in TNF-a celic B v H
povečala. pylori
okuženimi predmeti za nekadilce in debele osebe, kot je pri zdravih osebah (slika 2A). Ni bilo bistvenih razlik v TGF-b izražanja.

CD24 ^{+ CD38 + B celice imajo regulativne funkcije v drugih študij in so zanimive ravni izražanja v različnih H
. pylori
okuženimi skupine (slika 1C). Proučili smo znotrajcelično citokinov izražanje CD24 + CD38 celic + B. Kot je prikazano na sliki 2B, za izražanje citokinov CD24 + CD38 + B celice so bile drugačne od ne-CD24 + CD38 + B celice (skupna B celice minus CD24 + CD38 + B celic) v, da ne proizvedejo visoke nivoje IFN-g in TNF-a ko zazna s PMA /, vendar je izrazil zelo visoke ravni IL-10, tako v nestimuliranih in stimuliranih pogoji. Primerjali smo proizvodnjo IL-10 iz različnih podskupin B celic in ugotovila, da CD24 + CD38 + B celice v vseh študijskih skupin izloča veliko višje IL-10 kot ne-CD24 + CD38 + B celic, tako v nestimuliranih pogoji kakor tudi PMA /stimuliranih pogoji (slika 2C). Tako menimo, da je CD24 + CD38 + del kot glavni IL-10, ki proizvaja celice B skupine. V H
. pylori
okuženimi skupina je imela asimptomatsko višji odstotek IL--10 izražanje celic CD24 + CD38 + B celic kot pri zdravih osebah, medtem ko H
. pylori
okuženimi debeli bolniki so imeli nižje IL-10, ki izražajo celic CD24 + CD38 + B celic kot asimptomatskih bolnikih (slika 2C). Nato smo se pomnoži frekvenco-10 IL + celic v CD24 + CD38 + celic B z odstotkom CD24 + CD38 + celic v skupni celici B, da dobimo "številka" IL-10-ekspresirajočih celic v celicah B in ugotovili, da sta H
. pylori
okuženimi asimptomatski predmete in predmete za nekadilce so imeli višje ravni IL-10 + B celic kot pri zdravih osebah (P < 0,001 in P < 0,01, v tem zaporedju). V H
. pylori
okuženimi skupina, kajenje in debelost znatno znižati frekvence-10 IL + celic B (P < 0,001 za oba). iz asimptomatsko}

Vse skupaj, se ti podatki pokazale, da je regulativni citokinov IL-10 proizvaja predvsem CD24 ^{+ CD38 + B celic in H
se poveča. pylori
okuženimi asimptomatski predmete. Kajenje in debelost zmanjša IL-10 izraz v CD24 + CD38 + B celice.}

H
. pylori
okuženimi asimptomatski preiskovanci so imeli več tolerogenih dejavnost, ki jo posreduje CD24 + CD38 + B celic kot kajenje in debelih osebah

Regulatorne celice B je bilo znano, da zavirajo odgovorov T celic pri kroničnih okužb, kot so okužbe z virusom hepatitisa B in okužbe z virusom humane imunske pomanjkljivosti [14,20], z vzpostavitvijo tolerogenskih okolja z IL-10 pred indukcijo vnetja [15,21]. preučila smo, ali je CD24 proizvodnjo IL-10 ^{+ CD38 + B celice podobne regulativne učinke H
. pylori
-infection. CD4 + T celice sočasno kultivirane z avtologno CD24 + CD38 + - osiromašen B celice so bistveno povišane produkcijo IL-2, IL-17, IFN-g in TNF-a, kot CD4 + T celice cocultured s celimi celicami B, v H
. pylori
okuženimi asimptomatski bolniki (slika 3a). Pri kadilcih in debelih predmetov, niso opazili tak učinek. Podobno, CD8 + T celice H
. pylori
okuženimi asimptomatski predmete co-gojili z avtologno CD24 + CD38 + - izčrpanih celic B znatno povečala IFN-g in TNF-a izločanje razen tistih co-gojili z celih celic B ( fig 3B). Še enkrat, ti učinki niso opazili pri kadilcih in debelih osebah. Zdi se, da zatiranje T celic izražanje citokinov, ki posreduje CD24 + CD38 + B celic, saj je bila najnižja proizvodnja citokinov opazili CD4 + in CD8 + T celic co-kultivirani z CD24 sam + CD38 + B celice. Skupaj je pokazala, ti podatki, da je CD24 + CD38 + B celice v H
. pylori
okuženimi predmeti zatreti CD4 + in CD8 + T celic pro-vnetnih proizvodnjo citokinov v H
. pylori
okuženimi asimptomatski predmete. Kajenje in debelost zaviral regulativne ukrepe CD24 + CD38 + B celic.}

IL-10 izločanje celice CD24 + CD38 + B ob H
. pylori
stimulacija različnih predmetov

zraven zahteva, da preuči mehanizem IL-10 uravnavanjem v celicah B H
. pylori
okuženimi predmeti. produkcija IL-10 je ključna za delovanje regulatornega B celic [12,13]. signaliziranja receptorja cestnina, kot je glavni IL-10 Povecanje mehanizem v celicah B, je pokazala, da modulira izražanje citokinov v H
. pylori
okužba [22,23]. Preizkusili smo, ali prisotnosti H
. pylori
lahko neposredno upregulate IL-10 izločanje v CD24 ^{+ CD38 + B celic. Očiščene celice B iz PBMC smo kultivirali v prisotnosti ali odsotnosti toplotno ubitih H
. pylori
bakterija. Po 72 h inkubacije, je izločanje IL-10 v supernatantu merimo s Luminex. B celice požanjemo tudi intracelularnega IL-10 obarvanjem. Kot je prikazano na sliki 4A, ki je IL-10 izločanje v supernatantu tako H
povečala. pylori
-uninfected zdravimi osebami in H
. pylori
okuženimi nekadilce niso debeli asimptomatski predmeti po H
. pylori
-stimulation (P < 0,01 in P < 0,05 oz). Slika 4B kaže, da je odstotek IL-10, ki izločajo celice B povečana pri CD24 + CD38 + B celice po H
. pylori
stimulacija pri zdravih in asimptomatskih osebah (P < 0,001 in P < 0,05, v tem zaporedju). V nasprotju s tem, da je koncentracija IL-10 v supernatantu in odstotek IL-10, ki proizvajajo CD24 + CD38 + B celic iz H
. pylori
okuženimi predmeti za nekadilce in debele osebe niso bili znatno povečal po H
. pylori
-infection. Ti podatki kažejo, da je kajenje in debelost oslabljeno indukcijo IL-10 iz celic B po H
. pylori
stimulacija, in predlagal, da je bila v delu, izguba regulativne funkcije CD24 + CD38 + B celice iz kadilcih in debelih osebah morda zaradi nezmožnosti upregulate IL-10 izločanje odziv na stimulacijo bakterijskih antigenov (glej razpravo).}

želodca pri bolnikih z rakom, pozitiven v H
. pylori
okuženimi kajenje in H
. pylori
okuženimi debeli skupini sta imeli nižje frekvence IL-10 ^{+ B celice}

kajenje in debelost bilo znano, da povečuje tveganje za razvoj raka želodca v H
. pylori
okuženimi predmeti. Ker kajenje in debelost zatreti tudi običajne regulativne funkcije celic B, smo pregledali, ali so bili ti dva pojava povezana. Ugotovili smo, da pri kadilcih in debelih osebah, tisti, ki je postal pozitiven statusa raka želodca imela znatno nižje frekvence-10 IL + celic ^{v CD24 + CD38 + B celice po H
. pylori
stimulacija od tistih, ki so ostali negativni razvoj želodčnega raka (slika 5A P. ≪ 0,05 za oboje). Po drugi strani pa nismo ugotovili, da rak pozitivne in rakom negativni bolniki so bili bistveno drugačni v smislu njihovih frekvenc CD24 + CD38 celic + B v vseh celicah B (slika 5b). Ne H
. pylori-
okuženi asimptomatski bolniki v tej študiji je postal rak želodca pozitivna.}

Pogovor

H
. pylori
okužba je glavni vzrok za razvoj raka želodca. Čeprav je bila večina okužb brez simptomov in ozdravljiva, podmnožica predmetov ne zdravljenja in napredek rakom želodca. Poleg tega, kajenje in debelost poveča tveganje za razvoj raka, medtem ko so mehanizmi niso povsem jasni. V tej raziskavi smo najprej opazili spremembo v obtoku sestavo B celic v H
. pylori
okuženimi asimptomatski predmetov v primerjavi z neokuženih zdravih osebah, z zmanjšanjem IgD ^{+ CD27 - naivna B celice in uravnavanjem CD24 + CD38 + celic B . CD24 + CD38 + B celice so bile tudi ugotovljeno, da je glavni IL-10, ki izločajo B celic podmnožica. Nato smo izvedli T celic B celic coculture poskuse in ugotovil, da T celice CD24 + CD38 + B-celic osiromašeni co-kulture izločajo višje ravni vnetnih citokinov kot celice T co-kultiviranih s celimi celicami B, medtem ko celice T cocultured s CD24 + CD38 imel samo + B celice najnižjo proizvodnjo pro-vnetnih citokinov. Poleg tega smo ugotovili, da je prisotnost H
. pylori
lahko neposredno povečanje IL-10-izraz iz CD24 + CD38 + B celice. Skupaj ti podatki pokazali, da je H
. pylori
okuženimi predmeti so molekul frekvence krožečega CD24 + CD38 + B celic, ki je izražena visoko raven IL-10 in razstavljal regulatorno funkcijo. Zanimivo je, da v H
. pylori
okuženimi predmeti za nekadilce in debele osebe, obratna CD24 + CD38 + B celice so se zmanjšali v pogostnosti v primerjavi z H
. pylori
okuženimi asimptomatsko, niso mogli zatreti T celic pro-vnetnih proizvodnjo citokinov v poskusih co-kulture, in se ni bistveno upregulate IL-10 izraz po H
. pylori
stimulacija. Poleg tega smo sledili teme za pet let, nato pa ugotovili, da v primerjavi z bolniki z rakom pozitivni želodca so bolniki z rakom negativne želodca več IL-10 proizvodnja po H
. pylori
stimulacija. Kronični uničenje celične in tkivne poškodbe dolgotrajno H
. pylori
okužbe so glavni dejavniki, ki prispevajo k razvoju želodčnega raka [24]. Iz rezultatov, predstavljenih v tem dokumentu, je možno, da povečana IL-10-izražanje celic B se lahko zaščiti H
. pylori
okuženimi predmeti z zmanjšanjem vnetja T-celično posredovana in omejevanje tkiv poškodbe, vendar pri kadilcih in debelih osebah, B celičnega zaščita tkivo ni bil prisoten. Več študij je potrebno v prihodnosti, da preveri, ali je prisotnost IL-10 + celic B v korelaciji z zmanjšanimi poškodb tkiva v H
. pylori
okužbe. To pa ni bilo izvedljivo v tej študiji, saj potrebuje vzorcev želodčne tkiva.}

je poročal, da je tobak za kajenje povezano s povečanim oksidativnim stresom in pro-vnetne sproščanje citokinov, verjetno zaradi kajenju povzroča tkiva škoda [25,26]. Debelost je povezana tudi s povečanim nizko stopnjo, kronična vnetja [27]. V tej raziskavi smo ugotovili, da je H
. pylori
okuženimi predmeti za nekadilce in debele osebe so imeli manj celic IL-10 ^{+ B kot H
. pylori
okuženimi asimptomatski predmete. Kasneje, nasprotno kot pri asimptomatskih osebah, prisotnost CD24 + CD38 + B celice iz kadilcih in debelih ljudeh v T celic B celični sodelovanja kulture ni zmanjšal T celic vnetno produkcijo citokinov. Zmanjšanje IL-10, proizvodnje in pomanjkanje regulativne funkcije v celicah B so lahko posledica celotnega povečano vnetno stanje v kajenje in debelost. Dejansko, naši podatki so pokazali, da so celice B iz H
. pylori
okuženimi kajenje in debele osebe, ne pa tudi tistih iz asimptomatsko, je bilo višje IL-2, IFN-g in TNF-a proizvodnja od celic B iz neokuženih zdravih osebah, kar kaže na nesimetričnosti v smeri bolj vnetnih fenotip. Hkrati so znani izpostavljenost kronično kajenje in debelost povezati s povečanim tveganjem za raka želodca. Skupaj, ti podatki kažejo, da se lahko bolj pro-vnetne imunski profil kajenja in debelih prispeva k razvoju raka želodca.}

Zaradi pomanjkanja regulativni B celični specifični transkripcijski faktorji in površinske molekule, različne ne- posebni sklopi površinskih označevalcev, vključno CD1d ^{hiCD5 +, CD19 + CD24 hiCD38 hi, in CD19 + TIM-1 +, je bila uporabljena v prejšnje študije za označevanje celic B z regulativnimi dejavnostmi [15,22,28,29]. V tej študiji smo se osredotočili na CD24 + CD38 + - izražanje celice B, ker smo ugotovili, da IL-10, ključno citokinov v funkciji regulativnim B celic, ki je obogatena V tej podskupini, in slika 3 je pokazala, da ta podskupina je imela zakonodajno dejavnost zatiranje T proizvodnje celic citokinov. Ta izbira površinskih označevalcev, vendar pa imel svarila, ker CD19 + CD24 hiCD38 hi bile prej opisali kot nezrele /prehodnih celic B [30,31]. B celice lahko delujejo kot pomembna-antigen predstavljajočih celic in ugotovljeno je bilo, da podprejo T celično diferenciacijo podpopulaciji in vzdrževanja [32]. Na tej točki, ni znano, ali so bili CD24 + CD38 + B celice v naši raziskavi potencialno nezrele /prehodni B celice, ki so lahko manj učinkovit pri predstavitvi antigena. Da bi preprečili ta problem, smo primerjali cele B celic z CD24 + CD38 + - izčrpanih B celice (obe skupini z zrelih celic B sposoben za "normalno" predstavitev antigena), in nato ponovno spodbudi-T celice z anti -CD3 za neposredno celičnega receptorja T (TCR) aktivacijo. Čeprav smo vključili tudi CD24 + CD38 + B mobilnega samo skupino v poskusu na co-kulture, in ugotovila, da so celice T v teh sodelavcev kultur bistveno zmanjša vnetnih proizvodnjo citokinov kot T celic CD24 + CD38 + B cocultures celic osiromašeni, ne moremo izključiti možnosti, da so bili to zmanjšanje posledica potencialno napako predstavitev antigena v času sodelovanja kulture, pred neposredno aktivacijo TCR.}

vloga regulativni celice v imunskem sistemu je pogosto videti kot dvorezen meč pri kroničnih okužb. Na eni strani, lahko zatiranje vnetja z regulatornimi celice T in B celic preprečuje prekomerno poškodbe tkiva, posredovane z imunskim sistemom. Po drugi strani pa so mislili regulatorni T celice in B-celično posredovano zaviranje imunskega aktivacije prispevati k patogen vztrajnost, efektorsko izčrpanost T celic, in spuščeno sposobnost za brisanje okužb. Pred tem je bilo ugotovljeno, IL-10, izločanje v celicah B prispevati k Salmonella typhimurium
in miška dojke virus tumor vztrajanje pri miših in vztrajnost HIV pri ljudeh [20,33,34]. V tej študiji smo ugotovili, da dodajanje H
. pylori
lahko neposredno aktivirajo B celic IL-10 proizvodnje, vendar ni jasno, kako je Povecanje za CD24 ^{+ CD38 + B celice in IL-10 izločanje more vplivati ​​ H
. pylori
okužbe. Ali regulatorne celice B prispevajo k bakterij obstojnost H
. pylori
okužba zahteva več študij.}

• Plos ONE: HIF-1α inducira rezistenco v želodcu raka celic, ki jih indukcijo MIR-27a
• Plos ONE: Zic1 Promotor Hypermethylation v plazmi DNK je potencialni Biomarker za Rak želodca in intraepitelijski Neoplasia