PLOS ONE: Helicobacter pylori-infektion synergistiskt med tre inflammationsrelaterade genvarianter i GWASs att öka risken för magcancer i en kinesiska befolkningen

Abstrakt

Bakgrund

Tre senaste genomtäckande associationsstudier (GWASs) har rapporterat att tre SNP (rs4072037, rs13361707 och rs2274223) ligger på gener relaterade till värd inflammatoriskt svar är betydligt associerade med känslighet för magcancer (GC) i kinesiska populationer. Helicobacter pylori
infektion är också en viktig riskfaktor för GC genom att orsaka inflammatorisk reaktion i magslemhinnan. Emellertid har ingen studie undersökas om det finns potentiella interaktioner gen-miljö mellan dessa genetiska varianter och H. pylori
infektion risken för GC.

Metoder

Vi genotypas tre polymorfismer (rs4072037 vid 1q22, rs13361707 vid 5p13 och rs2274223 vid 10q23) i 335 kinesiska magsäckscancerpatienter och 334 kontroller. H. pylori
serologi undersöktes genom enzymkopplad immunabsorberande analys. Multivariabla logistiska regressionsmodeller användes för att utvärdera sambandet mellan variablerna och GC risk.

Resultat

Vi bekräftade att de tre SNP (rs4072037, rs13361707 och rs2274223) var signifikant associerade med GC känslighet. H. pylori
infektion också ökat markant risken för GC. Vidare fanns det gemensamma effekter mellan H. pylori
infektion och tre SNP på risken för GC. Den mest ökad risk för GC konstaterades hos patienter med H. pylori
andelen seropositiva och AA-genotyper för rs4072037 [oddskvot (OR), 3,95; 95% konfidensintervall (CI), 2,29-6,79], H. pylori
seropositiva och CT /CC genotyper för rs13361707 (OR, 2,68; 95% CI, 1,62-4,43), H. pylori
seropositiva och AG /GG genotyper för rs2274223 (OR, 2,45; 95% CI, 1,55-3,88) jämfört med dem med H. pylori
seronegativitet och andra genotyper av varje SNP. Signifikanta interaktioner observerades mellan H. pylori
seropositivitet och tre SNP (alla P
_{G × E < 0,05). risken för GC}

Slutsats

Dessa fynd tyder att de tre SNP (rs4072037, rs13361707 och rs2274223) identifierades i GWASs kan interagera med H. pylori
infektion för att öka risken för GC

Citation. Li M, Huang L, Qiu H, Fu Q, Li W, Yu Q, et al. (2013) Helicobacter pylori
Infektion synergistiskt med tre inflammationsrelaterade genvarianter i GWASs att öka risken för magcancer i en kinesiska befolkningen. PLoS ONE 8 (9): e74976. doi: 10.1371 /journal.pone.0074976

Redaktör: Qing-Yi Wei, University of Texas MD Anderson Cancer Center, USA

emottagen: 28 januari 2013; Accepteras: 12 augusti 2013; Publicerad: 19 september 2013

Copyright: © 2013 Li et al. Detta är en öppen tillgång artikel distribueras enligt villkoren i Creative Commons Attribution License, som tillåter obegränsad användning, distribution och reproduktion i alla medier, förutsatt den ursprungliga författaren och källan kredit

Finansiering:. Detta arbete stöddes av National Natural Science Foundation i Kina (N0. 81.071.832, N0. 81.272.492). Finansiärerna hade ingen roll i studiedesign, datainsamling och analys, beslut att publicera, eller beredning av manuskriptet

Konkurrerande intressen:.. Författarna har förklarat att inga konkurrerande intressen finns

Introduktion

Gastric cancer (GC) är en världsomfattande sjukdom och den näst vanligaste orsaken till cancerrelaterade dödsfall [1]. Förekomsten av GC varierar geografiskt och 70% av nya fall och dödsfall inträffar i utvecklingsländerna. I Kina har 0,4 miljoner nya fall och 0,3 miljoner dödsfall beräknas för GC 2005 [2]; därför att förebygga och kontrollera denna malignitet förblir en viktig folkhälsofråga. Det är allmänt accepterat att gastric cancer är en multifaktoriell process som är relaterad till livsstil (t ex rökning, låg grönsaker /fruktförbrukning och hög salt /nitratintag), socioekonomisk status, perniciös anemi, Helicobacter pylori
infektion, och värd genetisk polymorfism [3,4].

H. pylori
infektion är en väletablerad riskfaktor för gastric cancer och är klassificerad som en klass I humancarcinogena av Världshälsoorganisationen (WHO) baserat på epidemiologiska bevis [5]. Förekomsten av H. pylori
är högre i utvecklings än de utvecklade länderna [6]. H. pylori
kan vidhäfta till värd magslemhinnan och orsaka övergång från normal slemhinna till kronisk ytlig gastrit, som sedan ökar risken för atrofisk gastrit och intestinal metaplasi, och så småningom leder till utvecklingen av GC i vissa av de infekterade individer under många år [4]. Även GC förknippas med H. pylori
infektion i magsäcken, endast en liten andel av exponerade individer utvecklar denna gemensamma malignitet under sin livstid, vilket indikerar viktiga roller värd genetiska faktorer i etiologin för GC.

Nyligen tre genome- breda associationsstudier (GWASs) i samband med GC i den kinesiska befolkningen har publicerats [7-9]. Dessa studier identifierade några nya genetiska känslighet loci för GC i ett stort urval av den kinesiska befolkningen. Dessa känslighet loci har därefter blivit en ny inriktning för forskning och viktiga för att förstå patogenesen och prognos av GC [10,11]. I den aktuella studien, var vi speciellt intresserade av de tre GWAS-identifierade single nucleotide polymorphisms (SNP) som är placerade på gener relaterade till värd inflammatoriska responser. Bland dem är rs4072037 vid 1q22 ett synonymt SNP i den andra exonen av mucin1 (MUC1), som är associerad med dämpning av intracellulära nivåer av reaktiva syreradikaler (ROS), såväl som den epiteliala smittsamma och inflammatoriska sjukdomar [12]. Rs13361707 är index SNP bland flera över 5p13.1 region som är förknippade med GC känslighet i GWAS [9], och det ligger nära till genen för prostaglandin E receptor 4 (PTGER4). PTGER4 är en prostaglandin (PG) E2-receptom som är den huvudsakliga produkten av cyklooxygenas (COX) -2, som spelar en viktig roll i immunsvaret. Dessutom är rs2274223 lokaliserad till 26. Exon av fosfolipas C ε1 (PLCE1), en medlem av den PLC-proteinfamiljen, som är relaterad till uttryck av inflammationsfaktorer i tumörassocierad inflammation [13].

Den har alltmer accepterat att etiologin och mekanismen för GC innebär inte bara genetik eller ensam miljöfaktorer, men också samspelet mellan dem [14]. Många studier har visat att H. pylori
infektion är associerad med polymorfismer vissa inflammatoriska faktorer som påverkar risken för GC [15,16]. Men det bästa av vår kunskap, har inga studier undersökt potentiell gen-miljö interaktioner mellan H. pylori
infektion och ovanstående genetiska lokus för risken för GC. Den nuvarande oberoende fall-kontrollstudie med 335 GC fall och 334 kontroller i en kinesisk befolkning genomfördes för att undersöka möjliga interaktioner mellan de tre SNP (rs4072037, rs13361707 och rs2274223) och H. pylori
infektion risken för GC.

Material och metoder

Studiepopulation och datainsamling

Alla studiedeltagare lämnade skriftliga informerade samtycke innan blodprov togs. Studien godkändes av den etiska kommittén i Tongji Medical College. Totalt 335 GC patienter följd inskrivna från Tongji Hospital of Huazhong universitet för vetenskap och teknik från februari 2011 till augusti 2012. fallen nydiagnostiserade och histopatologiskt bekräftad magcancer, utan en tidigare elakartad tumör i något annat organ eller någon antitumörterapi innan blodprovinsamlings. De tumör nod-metastas (TNM) stadier utvärderades enligt den amerikanska kommittén för cancer Cancer Staging Manual, 6: e utgåvan. Dessutom var patienter som hade fått någon blodtransfusion under de senaste 6 månaderna eller som fick immunosuppressiv behandling uteslutas. Trehundra trettiofyra cancerfria kontroller valdes slumpmässigt från individer som genomgick hälsoundersökning vid samma sjukhus samtidigt. inklusionskriterierna för kontroller var avsaknaden av historia av cancer och frekvensmatchning de fall efter ålder (± 5 år) och kön. Alla fall och kontroller var genetiskt orelaterade och begränsad till Han kinesiska etnicitet. Demografisk och epidemiologisk information inklusive ålder, kön, etnicitet, kroppsmasseindex (BMI, beräknat på kroppsvikten i kilo och längd i meter enligt formeln: kg /m ^{2), rökning och alkohol status, sjukdomshistoria och familjehistoria av cancer registrerades på en enkät genom ansikte mot ansikte intervjuer av en utbildad läkare eller medicinare. Efter rekrytering, var 5 ml perifert venöst blod erhållet från varje deltagare}

Val av SNP och Genotypning

Vi använde National Center for Biotechnology Information (NCBI) s Pubmed databas (http:. //www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/). Det finns många nyligen identifierade känslighet loci i nyligen publicerade GWASs av GC i Kina [7-9]. Vi endast utvalda SNP ligger på gener relaterade till värd inflammatoriska svar. Som fem SNP på genen PLCE1 vid 10q23 hade stark parvis kopplingsojämvikt (LD) i GWAS [7], valde vi de viktigaste nonsynonymous varianter. Därför har tre sådana SNP, rs4072037 vid 1q22, rs13361707 vid 5p13 och rs2274223 vid 10q23 inkluderade i denna studie. Genomiskt DNA extraherades från perifert blod med användning av en Fuji helblod DNA kit (Fujifilm Corporation, Tokyo, Japan) genom att följa tillverkarens instruktioner och lagrades vid -80 ° C fram till användning. Tre SNP (rs4072037, rs13361707 och rs2274223) var alla genotypas genom att använda TaqMan-analys med ABI 7900HT realtids-PCR System (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) såsom tidigare beskrivits [17]. Samtalsfrekvens för varje SNP var > 95%. De genotypning Resultaten analyserades med hjälp av SDS 2,3 Allelisk Diskriminering Software (Applied Biosystems). Tio procent av proverna slumpvis utvalda för upprepad genotypning och resultaten var 100% överensstämmande.

H. pylori
serologiska tester

Vi testade för H. pylori
infektion med hjälp av en H. pylori
IgG enzymkopplad immunosorbentanalys (ELISA) kit (Shenzhen Yahuilong Biotech Company, Shenzhen, Kina) enligt tillverkarens anvisningar. Prover med optisk densitet (OD) avläsningar högre än tröskelvärdet för 10AU /ml ansågs ha H. pylori
seropositivitet. Vi valde slumpmässigt också 10% av proverna och fick 95,5% överensstämmelse på upprepade analyser.

Statistisk analys

Ett χ ^{2 test användes för att undersöka fördelningen av demografiska egenskaper hos GC och kontrollgrupperna när det gäller kön, ålder, BMI, rökning, alkoholkonsumtion, och H. pylori
infektion. Hardy-Weinberg jämvikt för varje SNP bedömdes med hjälp av godhet-of-fit χ 2 provning av kontrollerna. Logistisk regression användes för att analysera justerade oddskvoter (ORS) och 95% konfidensintervall (CI) av de studerade SNP, enskilt eller i kombination, för risken för GC. Gene × miljöinteraktion beräknades genom att genomföra en 1-grad frihets Wald test av en enda interaktionsparameter (gen x H. Pylori
infektion) i logistisk regression med ålder, kön, BMI, rökning och dricka status som kovariater såsom tidigare beskrivits på annat håll [18]. Associationsanalys av H. pylori
serologi och genotyper ytterligare stratifierat av TNM tumörstadium. Benja och Hoch metod användes för att justera P
värden i flera tester för att minimera risken för typ 1 fel. Alla data analyser utfördes med SPSS för Windows version 17.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Alla statistiska test var tvåsidiga och P Hotel <. 0,05 accepterades som statistiskt signifikant}

Resultat

Kännetecken för försökspersoner

Frekvensen fördelning av kön, ålder, BMI, rökning, alkoholkonsumtion, H. pylori
infektion och kliniska funktioner mellan GC fall och kontroller sammanfattas i Tabell 1. Två egenskaper, rökning och H. pylori
infektion, var betydligt vanligare i fall med GC än i kontroller ( P
= 0,002 för rökning och P
= 0,0003 för H. pylori
infektion). Det fanns inga signifikanta skillnader i fördelningen av ålder, kön, BMI, och dricka status mellan fall och kontroller. Av de 335 GC fall har 78 (23,3%) klassificeras som magmunnen GC och 257 (76,7%) som icke-magmunnen GC. Dessutom 96 fall (28,7%) presenteras med stadium I /II och 239 (71,3%) med stadium III /IV sjukdom.
Variabler
Cases ( n
= 335)

Kontroller ( n
= 334) katalog P
värde <sup>en
N

%
n
%
Ålder (years)0.575<404212.53410.240–6020460.920461.1>608926.69628.7Sex0.660Male23068.722467.1Female10531.311032.9Body mass index (kg /m 2) 0,806 < 18.5144.2113.318.5-23.916649.617552.4≥2415546.314844.3Smoking status0.002Never18755.822667.7Ever14844.210832.3Drinking status0.450Never21463.922366.8Ever12136.111133.2 H. pylori
infection0.0003Never13239.417853.3Ever20360.615647.7Tumor positionCardia7823.3Non-cardia25776.7TNM stageI eller II9628.7III eller IV23971.3Table 1. Fördelning av utvalda variabler i patienter med GC och cancerfria kontroller.
aχ 2 test för fördelning mellan fall och kontroller. CSV Ladda ner CSV</sup>

Association of rs4072037, rs13361707 och rs2274223 med risk för GC

genotypen fördelningar dessa varianter bland kontrollerna var alla i överensstämmelse med Hardy-Weinberg jämvikt ( P
= 0,242 för rs4072037, P
= 0,985 för rs13361707 och P
= 0,184 för rs2274223). Genotypen och allel-frekvenser av de tre SNP bland fallen och kontrollerna och associationen med risk för GC visas i tabell 2. Personer med varje variant allel av de tre SNP var signifikant associerade med förändrad risk för GC efter justering för kön, ålder , BMI, rökning och dricka status, och H. pylori
serologi på alleliska nivåer (justerat OR = 0,51, 95% CI: 0,37-0,69 för rs4072037, justerat OR = 1,46, 95% CI: 1,17-1,82 för r13361707 och justerat OR = 1,31, 95% CI: 1,00 -1,71 för rs2274223). Men enligt de dominerande modeller där genotyper med en eller två variant alleler antogs för att ge samma sjukdomsrisk som bred typ genotyper, ingen signifikant association observerades mellan rs2274223 och risken för GC (justerat OR = 1,33, 95% CI : 0,97-1,84; P
= 0,079). Vidare har subgruppsanalys stratifierat av tumörstället inrättats för att utvärdera sammanslutning av genetiska varianter av de tre SNP med risk för subtyp GC (tabell S1). Under de dominerande modeller, var G bärare av rs4072037 genomgående i samband med signifikant minskad risk för GC bland båda två undergrupper, medan rs13361707-C bärarna endast i samband med en signifikant ökad risk för icke-cardia GC (justerat OR = 1,74, 95% CI: 1,17-2,57; P
= 0,006) och rs2274223-G bärarna endast i samband med en signifikant ökad risk för cardia GC (justerat OR = 2,28, 95% CI: 1,38-3,80; P
= 0,001).
SNP
Genotyper
kontroller ( n
= 334) Fodral ( n
= 335)
P
värde ^{en
justeras eller a (95% CI) Review Rs4072037AA220 (65,9) 266 (79,4) 1,00 (ref.) AG98 (29,3) 64 (19,1 ) 0.0010.53 (0,37-0,77) GG16 (4,8) 5 (1,5) 0.0170.28 (0.10-0.80) AG + GG114 (34,1) 69 (20,6) 1,3 x 10 -4 b0.50 (0,35-0,71 ) AlleleA538 (80,5) 596 (89,0) 1,00 (ref.) G130 (19,5) 74 (11,0) 2,0 x 10 -5 c0.51 (0,37-0,69) Rs13361707TT102 (30,5) 71 (21,2) 1,00 (ref. ) CT165 (49,4) 167 (49,9) 0.0531.46 (0.99-2.12) CC67 (20,1) 97 (29,0) 0.0012.10 (1.34-3.26) CT + CC232 (69,5) 264 (78,8) 0,007 b1.64 (1,14-2,34) AlleleT369 (55,2) 309 (46,1) 1,00 (ref.) C299 (44,8) 361 (53,9) 0.001 c1.46 (1,17-1,82) Rs2274223AA217 (65,0) 197 (58,8) 1,00 (ref. ) AG109 (32,6) 122 (36,4) 0.1701.26 (0.91-1.75) GG8 (2,4) 16 (4,8) 0.0622.33 (0.96-5.65) AG + GG117 (35,0) 138 (41,2) 0,079 b1.33 (0,97-1,84) AlleleA543 (81,3) 516 (77,0) 1,00 (ref.) G125 (18,7) 154 (23,0) 0,047 c1.31 (1,00-1,71) Tabell 2. Fördelning av genotyper och alleler av de tre SNP (rs4072037, rs13361707 och rs2274223) och deras samband med GC risk.
aAdjusted för ålder, kön, BMI, rökning och dricka status, och H. pylori
serologi i logistisk regression model.bfor dominerande genetisk models.cat alleliska nivåer. CSV Ladda ner CSV}

Gemensamma effekter av H. pylori
seropositivitet och varianter av rs4072037, rs13361707 och rs2274223 om risken för GC

Vi syftar till att klargöra effekterna av de potentiella interaktioner mellan varianter av de tre SNP och H. pylori
seropositivitet på risken för GC (tabell 3). Risken för GC var signifikant ökad hos patienter med H. pylori
infektion (OR, 1,75; 95% CI: 1,28-2,40) justerat för kön, ålder, BMI, rökning och dricka status (data visas ej). Jämfört med personer med rs4072037 AG /GG genotyper och H. pylori
seronegativitet, de med AA genotyper och H. pylori
seronegativitet befanns ha en OR 2,46 (95% CI, 1,42-4,27) för GC risk, de med AG /GG genotyper och H. pylori
seropositivitet associerades med en OR på 2,30 (95% CI, 1,23-4,31) och de med AA genotyper och H. pylori
seropositivitet associerades med en OR 3,95 (95% CI, 2,29-6,79). På samma sätt, jämfört med personer med rs13361707 TT genotyper och H. bland dem med TC /CC genotyper och H pylori
seronegativitet, ökade risken för GC. pylori
seronegativitet (OR, 1,50; 95% CI, 0,90-2,50), och TT genotyper och H. pylori
seropositivitet (OR, 1,51; 95% CI, 0,81-2,80). Risken var endast signifikant förhöjt i gruppen med TC /CC genotyper och H. pylori
seropositivitet (OR, 2,68; 95% CI, 1,62-4,43). Dessutom, jämfört med personer med rs2274223 AA genotyper och H. pylori
seronegativitet individer med AG /GG genotyper och H. pylori
seronegativitet hade en nästan oförändrad risk för GC (OR, 1,01; 95% CI, 0,63-1,62), medan risken för GC ökat bland dem med AA genotyper och H. pylori
seropositivitet (OR, 1,44; 95% CI, 0,97-2,14), och AG /GG genotyper och H. pylori
seropositivitet (OR, 2,45; 95% CI, 1,55-3,88). Tabell 3 visar att de ökad risk för GC konstaterades hos individer med H. pylori
seropositiva och risk genotyper för vart och ett av de tre SNP.
H. pylori
status
genotyper
Kontroller (n = 334)
Cases (n = 335) Review justeras eller (95% CI) <sup>en
P
<sub>c
värde en
n
%
n

%
Rs4072037-AG /GG6318.9236.91.00 (ref.) - AA11534.410932.52.46 (1,42-4,27) 0,003 + AG /GG5115.34613.72.30 (1,23 -4,31) 0,017 + AA10531.415746.93.95 (2,29-6,79) 6,5 x 10 -6G × E1.95 (1,41-2,69) 4,9 x 10 -5 bRs13361707-TT5717.1329.61.00 (ref. ) -CT /CC12136.210029.91.50 (0,90-2,50) 0,157 + TT4513.53911.61.51 (0,81-2,80) 0,218 + CT /CC11133.216449.02.68 (1,62-4,43) 5,4 x 10 -4G × E1 0,95 (1,42-2,69) 3,9 x 10 -5 bRs2274223-AA11032.98224.51.00 (ref.) - AG /GG6820.45014.91.01 (0,63-1,62) 0,964 + AA10732.011534.31.44 (0,97-2,14 ) 0,105 + AG /GG4914.78826.32.45 (1,55-3,88) 3,7 x 10 -4G × E2.09 (1,41-3,10) 2,5 x 10 -4 bTable 3. gemensamma effekter av H . pylori
seropositivitet och varianter av de tre SNP om risk för GC.
en P
värden korrigerade av Benja och Hochberg metod och justerat för ålder, kön, BMI, rökning och dricka status i logistisk regression model.b P
värden för interaktioner mellan genotyper av de tre polymorfismer och H. pylori
serologi i logistisk regressionsmodell justerad för ålder, kön, BMI, rökning och dricka status. G × E: gen × miljö. CSV Ladda ner CSV</sub></sup>

Ändringen effekt indikerar betydligt multiplikativa interaktion mellan H. pylori
seropositivitet och varianter av de tre SNP (OR = 1,95, 95% CI, 1,41-2,69 för rs4072037 ELLER = 1,95, 95% CI, 1,42-2,69 för rs13361707 och OR = 2.09,95% CI: 1,41 -3,10 för rs2274223). Dessutom förblev testning för interaktioner signifikant (alla P
_{G × E < 0,05) för de tre SNP och H. pylori
serologi.}

Gemensam effekt av H. pylori
seropositivitet och kombinerade varianter av tre SNP om risk för GC

Med tanke på att de tre SNP var alla relaterade till värd immunsvar undersökte vi ytterligare gemensamma effekten av de kombinerade genotyper av de tre SNP och H. pylori
infektion om risken för GC. Alla individer ytterligare grupperade på grundval av antalet risk genotyper, enligt följande: (a) lågriskgrupp (0 eller 1 risk genotyp); (B) medelriskgruppen (två risk genotyper); och (c) högriskgrupp (tre risk genotyper), som visas i tabell 4. De risk genotyper för GC i denna studie var AA av rs4072037, CT /CC av rs13361707 och AG /GG av rs2274223. Jämfört med de i lågriskgrupp med H. pylori
seronegativitet individer i andra grupper alla hade en ökad risk för GC, men en betydande GC risk befanns endast för de i högriskgruppen med H. pylori
seronegativitet (OR = 2,40; 95% CI, 1,26-4,63), medelriskgruppen med H. pylori
seropositivitet (OR = 2,91; 95% CI, 1,75-4,84) och högriskgrupp med H. pylori
seropositivitet (OR = 4,70; 95% CI, 2,49-8,86).
H. pylori
status
Kombinerade tre SNP ^{A
Controls ( n
= 334)
Cases ( n
= 335)
P
_{c
värde b
justeras eller (95% cI) b
n
%
n
%
-Låg risk group7221.63510.41.00 (ref.) - Medium risk group7723.16419.10.0861.63 (0,96-2,77) -Hög riskvikt group298.7339.90.0132.40 (1,26-4,63) + Låg risk group60184513.40.1941.46 (0,83-2,57) + medel risk group7221.610330.71.0 × 10 -42,91 (1,75-4,84) + High- risk group247.25516.49.0 × 10 -64,70 (2,49-8,86) Tabell 4. gemensam effekt av H. pylori
seropositivitet och kombinerade varianter av tre SNP om risken för GC
alow riskgruppen (0 eller 1 risk genotyp). medelriskgruppen (2 risk genotyper); högriskgrupp (3 risk genotyper); risk genotyperna var AA av rs4072037, CT /CC av rs13361707, och AG /GG av rs2274223.b P
värden korrigerade av Benja och Hochberg metod och justerat för ålder, kön, BMI, rökning och dricka status i logistisk regressionsmodell. CSV Ladda ner CSV}}

Effekt av interaktioner av H. pylori
seropositivitet och varianter av tre SNP på GC risk stratifierade av TNM stadium

Vi utförde en subgruppsanalys stratifierat av TNM tumörstadium för att utvärdera de modifierande effekter varianter av de tre polymorfismer om associering mellan H. pylori
serologi och risk för GC (tabell 5). Signifikanta interaktioner observerades mellan H. pylori
seropositivitet och de tre SNP både till tidigt (I eller II) och sen (III eller IV) stadium GC (alla P
_{G × E < 0,05). De modifierande effekterna av varianter av rs4072037 och rs2274223 på riskerna med H. pylori
seropositivitet var mer uttalad för steg I eller II jämfört med stadium III eller IV GC. Men för rs13361707, den modifierande effekten inte markant förändrats mellan tidigt och sent skede GC.
H. pylori
status
Genotyp
I eller II stadium
III eller IV skede
Ca /Co (96/334) katalog P
c
värde ^{en
justerat OR (95% cI) en
Ca /Co (239/334) katalog P
c
värde en
justerat OR (95% cI) en
rs4072037-AG /GG4 /631,00 (ref.) 19 /631.00 (ref.) - AA31 /1150.0373.83 (1.28-11.44) 78 /1150.0242.17 (1.20-3.92) + AG /GG14 /510.0543.70 (1.13-12.10) 32 /510.0991.95 (0.98-3.86) + AA47 /1050.0046.75 (2.31-19.76) 110 /1055,1 x 10 -43,32 (1,85-5,94) G × E b0.0012.22 (1.38-3.57) 0.0011.85 (1.30-2.62) rs13361707- TT6 /571,00 (ref.) 26 /571,00 (ref.) - CT /CC29 /1210.1042.31 (0.90-5.93) 71 /1210.4341.31 (0.75-2.28) + TT15 /450.0553.02 (1,07-8,51) 24 /450.8051.14 (0,57-2,26) + CT /CC46 /1110.0084.06 (1.62-10.15) 118 /1110.0102.32 (1.36-3.97) G × E b0.0071.91 (1,19-3,06) 1,7 x 10 -41,94 (1,38-2,74) rs2274223-AA22 /1101,00 (ref.) 60 /1101,00 (ref.) - AG /GG13 /680,986 1,01 (0.47-2.15) 37 /680.9651.01 (0.60-1.69) + AA32 /1070,2441 .48 (0.79-2.75) 83 /1070.1881.40 (0.91-2.16) + AG /GG29 /490.0023.27 (1.67-6.39) 59 /490.0072.16 (1.32-3.56) G × E b3.2 × 10 -42,75 (1.59-4.78) 0.0041.87 (1.22-2.87) Tabell 5. gemensamma effekter av H. pylori
seropositivitet och varianter av tre SNP på GC risk stratifierat av TNM stadium.
en P
värden korrigerade av Benja och Hochberg metod och justerat för ålder, kön, BMI, rökning och dricka status, och H. pylori
serologi i logistisk regressionsmodell. Ca: fall; Co: controls.bInteractions mellan genotyper av de tre polymorfismer och H. pylori
serologi i logistisk regressionsmodell justerad för ålder, kön, BMI, rökning och dricka status. G × E: gen × miljö. CSV Ladda ner CSV}}

Diskussion

Vi bekräftade associationen av tre GWAS identifierade SNP (rs4072037, rs13361707 och rs2274223) med GC känslighet efter justering för kön, ålder, BMI, rökning och dricka status, och H. pylori
serologi i en oberoende fall-kontrollstudie av 335 GC fall och 334 kontroller i en kinesisk befolkning. Resultaten överensstämde med föreningen i tre GWASs [7-9] och andra nyligen publicerade oberoende replikering studier i Kina [19-21]. Men dessa studier alla saknade uppgifter om H. pylori
infektion, och kunde inte justera för potentiella inverkan av H. pylori
infektion. Dessutom är vår studie tros vara den första oberoende replikation för att bekräfta associationen mellan rs13361707 och risken för GC. Dessutom skiktning analys av tumör plats visade genetiska varianter av rs13361707 var endast i samband med en signifikant ökad risk för icke-kardia GC, medan genetiska varianter av rs2274223 specifikt associerad med en signifikant ökad risk för övre magmunnen GC i den aktuella studien.

En annan ny upptäckt i vår studie var att identifiera betydligt multiplikativa interaktion mellan de tre SNP och H. pylori
infektion av risken för GC. Så vitt vi vet är detta den första associationsstudie av GWAS identifierade genetiska loci för GC risk med hänsyn till H. pylori
infektion. Vi fann att de tre inflammationsrelaterade SNP (rs4072037, rs13361707 och rs2274223) i GWAS synergistiskt med H. pylori
seropositivitet tenderar mot utvecklingen av GC. Demonstrationen av växelverkan mellan de tre genetiska varianter och H. pylori
infektion leder oss till slutsatsen att risken för GC kommer att vara större för dem med hög risk genotyper och H. pylori
seropositivitet. Individer med hög risk genotyper bör vara mer alert för att undvika och utrota H. pylori
infektion. Ytterligare stratifiering genomfördes för varje polymorfism av TNM tumörstadium och vi fann att de gemensamma effekterna av H. pylori
seropositivitet och varianter av de tre SNPs på risken för GC visade sig vara mer tydlig i tidigt stadium GC för rs4072037 och rs2274223 än sent skede GC, men inte märkbart annorlunda för rs13361707. Detta tyder på att personer med risk genotyper av de två SNP (rs4072037 och rs2274223) och H. pylori
infektion kan vara mer benägna att utveckla tidig GC.

I denna population i Hubei-provinsen, Kina, H. pylori
infektionsfrekvensen var 60,6% bland fallen och 47,7% bland kontrollerna, och ett positivt samband identifierades mellan H. pylori
infektion och GC risk. H. pylori
skulle kunna påverka tumörbildning genom många vägar, inklusive gastrisk epitelial cellproliferation och apoptos, och det inflammatoriska svaret. I det inflammatoriska svaret, H. pylori
är inte bara möjlighet att aktivera proinflammatoriska COX enzymer, särskilt COX-2, som katalyserar de viktigaste stegen i bildandet av inflammatoriska prostaglandiner [22], men också för att aktivera fosfolipas A2, ett enzym som katalyserar bildningen av prostaglandin prekursor arakidonsyra [23,24]. Det inflammatoriska svaret som induceras av H. pylori
leder till produktion av mutagena substanser, såsom inducerbar kväveoxidsyntas, som inducerar ROS eller reaktiva kväve arter som orsakar DNA-skada i magsäckens epitelceller [25,26]. Det har visat sig att genen polymorfismer av flera inflammatoriska faktorer, såsom interleukin (IL) -1β [15], tumörnekrosfaktor (TNF) -α och IL-10 [16], påverkar nivåer av proteinuttryck och är associerade med en ökad risk för att utveckla hypochlorhydria, gastric atrofi och magcancer i samband med H. pylori
. Dessutom har många studier rapporterat att genen polymorfismer, inklusive cytokin eller kemokin-gener (t.ex., IL-1β, TNF-α, IL-10 och IL-8) och det medfödda immunresponsgener (t.ex. Toll-like receptor och mannose- bindande lectin2) svarade på H. pylori
infektion, är förknippade med GC känslighet [27-30].

Gene-miljö interaktioner är komplexa, därför, den exakta mekanismen som reglerar samspelet mellan de tre genetiska varianter och H. pylori
infektion är fortfarande oklart. Vissa studier har visat att de tre GWAS identifierade polymorfismer vid 1q22, 5p13 och 10q23 alla är relaterade till gener som är viktiga i värdimmunsvar. För det första är rs4072037 i MUC1 känt att bestämma en splitsningsacceptor-ställe i signalpeptidregionen [31], och har en effekt på MUC1 promotoraktivitet i det gastriska epitelet [10]. Dessutom är MUC1 en receptor för H. pylori
[32,33] och ger en skyddande barriär, vilket begränsar både akuta och kroniska koloniseringen av H. pylori
, samt begränsa inflammation inducerad av H. pylori
infektion [33]. Andra resultat har visat att MUC1 allelen längd är associerad med känslighet för H. pylori
gastrit och GC [34,35], och möss med brist på MUC1 är mer mottagliga för H. pylori
gastrit [33]. För det andra är SNP rs13361707 belägen i den första intronen av PRKAA1 (som kodar för proteinkinas, AMP-aktiverat, a en katalytisk underenhet) vid 5p13.1. Flera SNP i hela 5p13.1 regionen är förknippade med GC susceptibilitet och toppsignaler inträffade i rs13361707 Index SNP i GWAS [9]. Libioulle et al.

• PLOS ONE: nedreglering av Claudin-18 är associerad med proliferativ och invasiv potential av gastric cancer vid Invasive Front
• PLoS ONE: CCR7 Expression och Intratumoral foxp3 + regulatoriska T-celler är korrelerade med total överlevnad och Lymph Node Metastaser i Gastric Cancer