PLoS ONE: Laskua galektiini-9 ja Lisääntynyt Tim-3 Expression liittyvät huonoon ennusteeseen mahasyövän

tiivistelmä

Johdanto

galektiini-9 (Gal-9) indusoi tarttumista ja kasautumista tiettyjen solutyyppien ja estää etäpesäkkeiden syöpäsoluja. T-solu immunoglobuliini-ja musiinialue-3-sisältävä molekyyli 3 (TIM-3) on keskeinen rooli immuuni sääntelyä. Tutkimuksen tavoitteena on selvittää Gal-9 ja TIM-3 muutoksia mahasyövän ja niiden ennustetekijöiden arvoja.

Methods

Gal-9 ja Tim-3 ilmentyminen arvioitiin käyttämällä kudosta microarray immunohistokemia menetelmä 305 syöpien, joista 84 oli yhdistetty viereiseen normaaliin näytteitä. Solulinjat SGC-7901, BGC-823, MGC-803, MKN45 ja GES-1 värjättiin myös. Korrelaatiot analysoitiin välillä ekspressiotasot Gal-9 ja Tim-3-proteiinin ja kasvaimen parametrit tai kliinisiä tuloksia.

Tulokset

Gal-9 ja Tim-3 värjättyä positiivisia kasvainsoluihin 86,2% (263/305), ja 60,0% (183/305) potilaista, joilla mahalaukun syövän, vastaavasti. Gal-9 ilmentyminen oli merkitsevästi suurempi syöpään kuin normaalissa limakalvo ( P
< 0,001). Alennettu Gal-9 ilmentyminen liittyi imusolmukkeiden-verisuoni- invaasiota, imusolmuke etäpesäke, etäinen etäpesäke ja huonompi TNM lavastus ( P
= 0,034, P
= 0,009, P
= 0,002 ja P
= 0,043, tässä järjestyksessä). Sen sijaan Tim-3 ilmentyminen oli merkitsevästi pienempi syövän kuin verrokeilla limakalvo ( P
< 0,001). Potilaat, joilla imusolmukkeiden-verisuoni- invaasiota oli korkeammat ekspressiotasot Tim-3 ( P
< 0,001). Lisäksi monimuuttuja-analyysi osoittaa, että sekä korkea Gal-9 ilmaisun ja matalan Tim-3 ilmentyminen oli merkitsevästi yhteydessä pitkä kokonaiselinaikaa ( P
= 0,002, P
= 0.010, vastaavasti); yhdistelmä Gal-9 ja Tim-3 ilmentyminen oli itsenäinen ennustetekijöitä ennustaja potilailla, joilla mahalaukun syövän (RR: 0,43; 95% CI: +0,20-+0,93). H.pylori
infektiotilanteesta ei liittynyt Gal-9 ja Tim-3 lauseke ( P
= 0,102, P
= 0,565).

Johtopäätös

tulokset viittaavat siihen, että ilmentyminen Gal-9 ja Tim-3 kasvainsoluissa voi olla mahdollinen, itsenäinen ennustetekijä potilaille, joilla on mahalaukun syöpä. Gal-9 ja TIM-3 voi olla tärkeä osa mahasyövän.

Citation: Jiang J, Jin M-S, Kong F, Cao D, Ma H-X, Jia Z, et al. (2013) Vähentynyt galektiini-9 ja Lisääntynyt Tim-3 Expression liittyvät huonoon ennusteeseen mahasyövän. PLoS ONE 8 (12): e81799. doi: 10,1371 /journal.pone.0081799

Editor: Pierre Busson, Institute of syöpäoppi Gustave Roussy, Ranska

vastaanotettu: 06 tammikuu 2013; Hyväksytty: 26 lokakuu 2013; Julkaistu: 10 joulukuu 2013

Copyright: © 2013 Jiang et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä tutkimus on tukenut National Natural Science Foundation of China (81072369 ja 81273065). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Mahasyöpää jää neljänneksi yleisimmin diagnosoitu syöpä ja on toiseksi suurin syy syöpään liittyvien kuolemien maailmanlaajuisesti [1]. Galectins ovat ryhmä proteiineja, jotka sitoutuvat β-galaktosidit kautta evolutiivisesti konservoituneita sekvenssin osia hiilihydraatin (CRD) [2], [3]. Galektiini perhe osallistuu neoplastisen transformaation, tuumorisolun eloonjäämistä, kudosten ja metastaasit useiden syöpätyyppien, kuten mahasyövän [4]. Aiemmat tutkimukset osoittivat, että ilmentymistaso galektiini-3 oli merkitsevästi suurempi mahakarsinoomat verrattuna viereiseen normaaliin kudokseen. Galektiini-3 ja galektiini-4 voi olla käyttökelpoinen kasvain merkkiaineita syöpien suhteen kasvaimen etenemiseen ja räjähdykseen imusolmuke etäpesäke erityisesti joissakin histologisia tyyppejä mahasyövän [5], [6]. Galektiini-9 (Gal-9) on uusi jäsen galektiini proteiinin perhe [7]. Viime vuosina, on tärkeä rooli on tullut, että Gal-9 terveyden ja sairauden [8]. Normaali fysiologia, Gal-9 näyttää olevan keskeinen modulaattori T-solu-immuniteetin indusoimalla apoptoosi-spesifisiä T-solualipopulaatioissa. Koska nämä T-solupopulaatioiden liittyvät autoimmuniteetin tulehdussairaus, ja siirteen hylkiminen, oletettiin, että sovellus eksogeenisen Gal-9 voi rajoittaa patogeenisten T-solujen aktiivisuutta [9], [10]. Lisäksi Gal-9 on lokalisoitu sytoplasmaan ja solun pinnalla solujen ja näyttää vapautuu kasvainsoluissa [11]. Vuonna kiinteitä kasvaimia, käytettävissä olevat tutkimukset ehdotti, että Gal-9 on kasvain-vaimennin toiminto, jossa menetys Gal-9 tiiviisti liittyy lisääntynyt etäpesäkkeitä ja korkea toistuminen [12], [13], [14], [15]. Kadowaki et al osoitti myös, että Gal-9 signalointi voi pidentää elinaikaa indusoimalla makrofagien erilaistua plasmasolumaisiin dendriittisolujen kaltaisia ​​makrofagien hiiren keuhkojen syövän malli [16]. Nämä Datas esitti, että Gal-9 voi olla mahdollista ennustetekijä anti-metastaattinen potentiaali. Kuitenkin, ekspressio Gal-9 ei ole vielä tutkittu mahasyövän.

T-solujen immunoglobulin- ja musiinialue-3-sisältävä molekyyli 3 (Tim-3) on auttaja-T-1 (Th1) erityisiä solupinnan molekyyli, joka näyttää säännellä Th1 vastauksia ja induktio perifeerisen toleranssin [17], [18]. Äskettäin poikkeava Tim-3: n ekspressio on raportoitu melanoomasoluissa, edistää heikko pito kyky kasvainsolujen ja edistää selviytymistä kasvaimen [19]. Zhuang et al osoitti myös merkittävä rooli Tim-3 ilmentyminen kasvainsoluissa itsenäisenä ennustetekijä potilaille, joilla on ei-pienisoluinen keuhkosyövässä [20]. Zhu C et al osoitti, että Gal-9 on Tim-3-ligandi, ja ehdotti, että Tim-3-Gal-9 reitti voi ovat kehittyneet tehokkaan päättymiseen efek- Th1-solut [21]. Tutkia suhdetta Tim-3-Gal-9 reitin ja etenemisestä mahasyövän, Gal-9 ja Tim-3-proteiinin ilmentymistä tutkittiin 305 potilasta, joilla mahalaukun syövän, joista 84 tapausta olivat parin viereiseen normaaliin kudosnäytteitä. Associations proteiinin ilmentymisen potilaan kliinisiä piirteitä ja ennuste tutki myös tässä tutkimuksessa.

Methods

Tutkimus populaatiot

Kolmesataa ja viisi potilasta lukien 231 miestä ja 74 naista mahalaukun syöpä, joka leikattiin välillä elokuussa 2000 joulukuuta 2010 First sairaalan Jilin University otettiin tässä tutkimuksessa. Potilaat eivät saaneet mitään hoitoa ennen kirurgisen toimenpiteen. Diagnoosi mahasyöpä tehtiin pohjalta morfologisia ja immunohistokemiallisella havainnot arvioi kaksi riippumatonta patologia (MSJ ja YPW). Mahasyövistä poistettiin kirurginen poistaminen; viereiseen normaaliin mahalaukun epiteelin näytteitä kerättiin myös 84 potilaalla vertailuun. Potilaan ikä vaihteli 32-87 vuotta, iän mediaani 64 vuotta. Kirjallinen suostumus saatiin kaikki potilaat ja tutkimussuunnitelman hyväksyi eettinen komitea ensimmäisen sairaalan Jilin University.

Soluviljely

Ihmisen mahalaukun syövän solulinjat SGC-7901 , BGC823, MGC803, MKN45 hankittiin laitos Mahalaukun ja peräsuolen Surgery, First sairaalan Jilin University. Ihmisen immortalisoitu mahalaukun limakalvon solulinjaa GES-1 antamat Cancer sairaalan Pekingin yliopiston. Soluja viljeltiin RPMI-1640-väliaineessa, joka sisälsi 10% lämpöinaktivoitua naudan sikiön seerumia (FBS) ja 100 ng /ml sekä penisilliiniä streptomysiiniä inkubaattorissa (50 ml /l CO2) 37 ° C: ssa. Medium soluille vaihdettiin joka 2-3 päivä. Solut logaritmisessa kasvuvaiheessa kerättiin lisäkokeita varten.

immunohistokemia

Lyhyesti osioista (4 um leveys) kudoksesta microarry (TMA) lohkot poistettiin parafiini ja kuivattu, lämpö- epitooppisup- haku suoritettiin upottamalla objektilasit 10 mmol sitraattipuskurissa (pH 6,0) ja keittämällä puskuri 10 mi painekattilassa. Sen jälkeen kun esto 3% H _{2O 2, kaikki osat inkuboitiin yön yli 4 ° C: ssa anti ihmisen galektiini-9 polyklonaalista vasta-ainetta (1:250 laimennettu, ab69630, Abcam, UK) ja anti ihmisen Tim-3 polyklonaalinen vasta-aine (8 ug /ml, AF2365, R &D Systems, Minneapolis, USA), 3,3-diaminobentsidiini (DAB), käytettiin, kuten kromogeenia, ja leikkeet vastavärjättiin hematoksyliinillä. Negatiivisia kontrolleja kasvain diat käsiteltiin IgG isotyyppien kanin (normaali kanin IgG, sc-2027, Santacruz, USA) ja vuohi (normaali vuohen IgG, sc-2342, Santacruz, USA) korvaaminen ensisijaisen vasta-aineen kaikki negatiiviset tarkastukset osoittivat vähäinen tausta tahra. Solulinjat (SGC-7901, BGC-823, MGC-803, MKN45 ja GES-1) viljeltiin rutiininomaisesti, mahasyöpä solupelletit upotettiin parafiiniin ja prosessoida kudos dioja. Mahasyöpä solulinjat värjättiin samalla menetelmällä.}

Värjätyt objektilasit arvioitiin kaksi riippumatonta patologia (MSJ ja YPW), joka oli sokaissut kliinisiä tietoja ja tuloksia, Laajalti hyväksytty puolikvantitatiivinen analyysi (HSCORE järjestelmä) käytettiin arvioimaan värjäytymisen intensiteettiä ja prosenttiosuudet solut värjättiin tietyn suuruuden intensiteettiä. HSCORE laskettiin käyttäen seuraavaa yhtälöä: HSCORE = ΣPi (i) (i = 0,1,2,3, Pi = 0~100%). i tarkoittaa värjäytymisen intensiteetti, eli mitään värjäytymistä = 0, heikkoa värjäytymistä = 1, kohtalainen värjäytyminen = 2 ja vahva värjäytyminen = 3. Pi edustaa prosenttiosuudet värjäytyneiden solujen intensiteetit vaihtelevat välillä 0 100. Näin ollen HSCORE välillä 0 300, HSCORE > 0 pidetään positiivista värjäytymistä ja HSCORE = 0 pidetään täysin negatiivinen värjäys. Poikkeava tulokset värjäytymisen intensiteetti kahdesta patologeja ratkaistiin tapausten tarkastelu yhdessä ja sovitaan tulokset, ja poikkeava tulokset prosenttiosuuksien värjättyjen solujen ratkaistiin laskemalla avulla pisteiden.

Western blotting

vahvista tarkkuuden semi-pitoisuuden määrittäminen immuuni-histologia, Länsi-blottaus ylläpitäjä mahalaukun syöpäsoluja linjat. Solut lyysattiin kylmään hajotuspuskuria ja sentrifugoitiin 12000 g: ssä 10 minuutin ajan, latauspuskuria sekoitettiin solulysaateista ja keitettiin 5 minuutin ajan 95 ° C: ssa. 10 ug kokonaisproteiinia laitettiin 10% epäjatkuva SDS-polyakryyliamidigeelillä elektroforeesia ja sitten siirretään polyvinylideenifluoridilla kalvoja. Membraanit blokattiin 5% naudan seerumin albumiinia ja inkuboitiin primaarisilla vasta-aineilla (anti Gal-9 ja anti Tim-3) yön yli 4 ° C: ssa Tris-puskuroitu suolaliuos, jossa 0,1% Tween 20: tä. Pesun jälkeen kalvoja inkuboitiin piparjuuriperoksidaasi-konjugoidun vasta-aineita 1 tunti huoneen lämpötilassa. Sitten kalvot inkuboitiin ja western blotting kuvia otettiin ja analysoitiin. β-aktiini käytettiin sisäisen valvonnan ja kaikki densitometristen arvot normalisoitiin vastaan ​​suhteellinen β-aktiini-arvo.

määritys H.pylor
i infektio

Niistä 305 mahalaukun syöpätapausta, verinäytteet kerättiin 104 potilasta tutkimisesta H.pylor
i infektio ennen kirurgisen toimenpiteen. 4 ml paastoverensokeriarvon Näytteet jätettiin huoneen lämpötilassa 30 minuuttia ja sitten sentrifugoitiin. Seerumi vedettiin ja säilytettiin -80 ° C: ssa. Seerumin immunoglobuliini (Ig) G vasta H.pylori
havaittiin H.pylor
i-IgG entsyymi immunosorbenttimääritys (ELISA) Kit (Biohit, Helsink, Suomi). Vasta-ainetiitterit määritettiin optisella tiheydellä (OD) arvot mukaan valmistajan protokollaa ja titres suurempi kuin raja-arvo on 30EIU katsottiin positiivisiksi H.pylori
infektio. Kitti laadunvalvonnan näytteet osoittivat variaatiokerroin 4,5% H
. pylori
infektio tutkimus.

Tilastot analyysi

HSCORE of Gal- 9 ja Tim-3 lauseke esitetään mediaani (neljännespisteiden). Wilcoxonin parittaista allekirjoitettu-rank testi ja U-testi tai Kruskal-Wallisin H testiä käytettiin verrattaessa pariksi ryhmät ja kaksi riippumatonta ryhmää vastaavasti. Kaplan-Meier-menetelmää käytettiin arvioitaessa yleistä eloonjäämisaste, ja selviytyminen erot analysoitiin käyttäen log-rank-testi. Coxin suhteellisten riskien mallia käytettiin laskemiseen suhteelliset riskit (RRS) ja vastaavat 95%: n luottamusväli (95% CI) säätämisen jälkeen iän (asteikko muuttuja), sukupuoli (nimellinen muuttuja), imusolmukkeiden-verisuoni- invaasiota (nimellinen muuttuja) ja TNM lavastus (asteikko muuttuja). Kaikki tilastolliset testit olivat kaksisuuntaisia ​​ja P
-arvot alle 0,05 pidettiin tilastollisesti merkitsevä. Kaikki analyysit suoritettiin SPSS ohjelmistopakettia 18,0 (SPSS Inc. USA).

Tulokset

Expression of Gal-9 ja Tim-3 mahasyövän ja mahasyövän solulinjoissa

immunohistokemiallinen analyysi osoitti, että Gal-9 ja Tim-3 värjättiin positiivisia kasvainsoluihin 86,2% (263/305), 60,0% (183/305), potilailla, joilla on mahalaukun syövän, vastaavasti. Useimmat syöpäsolujen mahasyövän kudoksessa osoittivat voimakkaita sytoplasminen Gal-9 immunovärjäystä, mutta pieni määrä mahalaukun syövän solut osoittivat negatiivista immuunivärjäykseen Gal-9 (kuvio. 1A, 1B, 1C). Mahakasvaimen solut osoittivat selvästi soluliman ja ydinvoiman positiivisuus Tim-3 immunovärjäyksellä (Kuva. 1D, 1E, 1F, 1G).

Niistä 84 pariksi näytteitä, Gal-9 positiivista värjäytymistä havaittiin 68/84 ( 81,0%) mahasyövän ja tyvisolut 51/84 (60,7%) normaali limakalvo, vastaavasti ( P
= 0,004). Toisaalta Tim-3 positiivista värjäytymistä havaittiin 55/84 (65,5%) mahasyövän ja 72/84 (82,7%) normaalissa limakalvo, vastaavasti ( P
= 0,002). Lisäksi solulinjoissa SGC-7901, BGC-823and MGC-803 ja GES-1 osoittivat heikkoa sytoplasminen Gal-9 immunovärjäyksellä (Kuva. 1 H), mutta MKN45 osoitti negatiivista immuunivärjäykseen Gal-9 (kuva. 1I). Neljä mahasyövän solulinjoja osoitti myös vahvaa soluliman ja ydinvoiman positiivisuus Tim-3 värjäys (Kuva. 1 J). Kuitenkin GES-1-solut osoittivat negatiivista värjäystä Tim-3 (Figure.1K).

havaitseminen Gal-9 ja Tim-3-aktivaatio validoitu samasta solujen Western-blottauksella, joka on esitetty Kuva 2.

Gal-9 ilmentyminen syövän esiintyvyys oli merkittävästi suurempi kuin normaalissa limakalvo (mediaani HSCORE: 140 vs 20; P
< 0,001. Kuva 3A). Tim-3 HSCORE syövän esiintyvyys oli merkittävästi pienempi kuin normaalissa limakalvo (mediaani HSCORE: 40 vs 170; P
< 0,001. Kuvio 3B).

Gal-9 ja Tim- 3 ekspressiotasot ja H.pylor
i infektio

104 mahasyöpäpotilaista testataan H.pylor
i vasta, yhteensä positiivisten määrä on H. pylor
i infektio oli 65,4%. Kun ikä Alaryhmäanalyysissä havaittiin, että H.pylor
i infektio oli korkeampi 45-65 vuotta ryhmä, verrattuna alle 45 vuotias ryhmiä, tai yli 65-vuotias ryhmiä. Tulokset eivät korrelaatiota H.pylor
i infektio ja Gal-9 ja Tim-3 lauseke ( P
= 0,102, P
= 0,565). (Kuvio 3C, 3D).

Korrelaatio Gal-9 ja Tim-3 ilmaisutapoja ennusteeseen viittaavia parametreja

Kuten taulukosta 1, HSCORE Tim-3 oli merkitsevästi suurempi miehillä kuin naispotilaiden ( P
= 0.010). Tim-3 ilmentymistasot korreloi positiivisesti iän ( P
= 0,004), mutta Gal-9 ilmentymistasot korreloivat negatiivisesti iän ( P
= 0,049). Siellä oli merkittäviä eroja Gal-9 ja Tim-3 ekspressiotasot keskuudessa alaryhmien laskimoiden tunkeutuminen, jos potilaalla on laskimoiden tunkeutumisen mediaani HSCORE Gal-9 oli merkitsevästi vähemmän ( P
= 0,034) ja Tim- 3 oli merkitsevästi parempi ( P
< 0,001). Mukaan TNM vaiheisiin, korkeampi HSCORE potilailla havaittiin vaiheen I kasvainten verrata muihin vaiheisiin ( P
= 0,043). Huomattavasti korkeampi HSCORE Gal-9 todettiin potilailla, joilla ei imusolmuke etäpesäke ( P
= 0,009), ja potilailla, joilla ei etäpesäkkeiden ( P
= 0.022). Olemme myös analysoineet Gal-9 ja Tim-3 ilmaisun mukaan kasvaimen erilaistumiseen (Korkea, ja Low) ja syvyys invaasio (T1-T4), ei havaittu merkittäviä eroja. Kliininen ominaisuudet aiheista on koottu taulukkoon 1 yksityiskohtaisesti.

Korkean Gal-9 ilmaisun ja negatiivinen Tim-3 ilmentyminen oli merkitsevästi yhteydessä pitkä eloonjäämiseen

Seuranta oli saatavilla kaikki 305 potilasta, jotka kattavat kaudet vaihtelevat 3-135 kuukautta (mediaani 40 kuukautta). Ei potilas kuoli leikkauksen jälkeisiä komplikaatioita 30 päivän kuluessa alussa tutkimuksen ajan, ja 120 (39,3%) potilaista kuoli seuranta. Kaplan-Meier selviytymisen käyrät piirrettiin mukaisesti HSCORE (Negative, HSCORE≤100, HSCORE≤200 ja HSCORE > 200). Yleinen eloonjäämisaste oli merkitsevästi korkeampi Gal-9 HSCORE > 200 ryhmässä kuin muut ryhmät (Log-rank-testi, P
= 0,011). Koska eloonjäämiskäyristä negatiivinen ryhmä, HSCORE≤100 ryhmä ja HSCORE≤200 ryhmä olivat samanlaisia, yhdistimme ne tarkempaa analysointia, ja Kaplan-Meierin eloonjäämisen käyrä näytettiin Figure.4A ( P
= 0,002). Potilaat, joilla Tim-3-syöpäkasvain oli pidempi kokonaiselinaika. Samat tulokset saatiin, kun kaikki positiiviset ilmaisu potilaat yhdistettiin (Figure.4B, log-rank testi, P
= 0,01). Kaplan-Meier-eloonjäämiskäyrät myös piirretty mukaan Gal-9 ja Tim-3 co-ilmaisu, eloonjäämismäärä kaiken potilailla, jotka olivat Gal-9 HSCORE > 200 ja Tim-3 negatiivinen oli huomattavasti korkeampi, ja potilailla, jotka olivat Gal -9 HSCORE≤200 ja Tim-3 positiivista oli merkittävästi pienempi (Figure.4C, log-rank testi, P
< 0,001).

Yhdistelmä Gal-9 ja Tim-3 ilme oli riippumaton prognostinen markkeri

Taulukko 2 osoitti monimuuttuja analyysit liittyvien tekijöiden potilaan ennustetta. Yksiulotteista analyysi osoitti, että seuraavat tekijät olivat merkitsevästi yhteydessä leikkauksen jälkeisen selviytymisen: TNM, laskimoiden soluttautuminen ja yhdistelmä Gal-9 ja Tim-3 lauseke ( P
< 0,001, P
= 0,001, P
< 0,001 vastaavasti). Sen jälkeen tarkistetaan iän ja sukupuolen mukaan, monimuuttuja regressio analyysi osoitti, että Gal-9 ja Tim-3 koekspressoimalla ja TNM olivat riippumattomia ennustetekijät, mutta Imuneste-verisuoni- invaasiota ei ollut itsenäinen ennustetekijä.

Keskustelu

tässä tutkimuksessa korkeampi ilmauksia Gal-9 havaittiin potilailla, joilla ei lymph-verisuoni- invaasiota, imusolmuke etäpesäke ja etäinen etäpesäke. Lisäksi korkeampi ilmauksia Gal-9 liittyy läheisesti paremmin hengissä. Nämä havainnot ovat yhdenmukaisia ​​aiemman raportin rintasyövän, maksasyövän, kohdunkaulan syöpä ja pahanlaatuinen melanooma [12], [13], [14], [15], [22]. Gal-9 ilmentymisen mahasyövän esiintyvyys oli merkittävästi suurempi kuin pariksi viereiseen normaaliin mahalaukun epiteeli- kudoksissa, tämä tulos johti meidät oletuksen, että Gal-9 osoittavat anti-kasvain aktiivisuuden kasvain kudosten kautta incresed yhdistäminen kasvainsolun [23] . Tämä havainto eroaa Liang huomautuksista. He havaitsivat, että Gal-9 ilmentyminen syövän kudoksissa 38 invasiivisen kohdunkaulan levyepiteelisyöpä (SCC) potilasta oli merkittävästi pienempi kuin normaalissa kohdunkaulan levyepiteelillä 23 tervettä verrokkia. Mutta Gal-9 ilmaisuja hyvin eriytetty SCC olivat merkitsevästi paremmat verrattuna korkean asteen levyepiteelikarsinooma intrapiehelial vaurioiden [14]. Valitettavasti he eivät verrata Gal-9 ilmaisun syövän kudoksissa pariksi viereisen normaaleissa kudoksissa. Ero Eri tutkimukset voivat johtua yksilöllinen vaihtelu immuunijärjestelmän tila, aiheuttaa tulehduksen ja kudosten spesifisyys Gal-9 ilmaisun. Lisäksi monet sairaudet ovat herkkiä apoptoottisia poistamista yhdistelmä-Gal-9. Tämän mukaisesti havainto viittaa siihen, että gal-9 voi olla houkutteleva ehdokas syövän hoitoon. Hoito yhdistelmä-Gal-9 voi estää metastaattinen leviäminen syövän [16], [24], [25].

Tim-3 on pinnan molekyyli, joka voi spesifisesti tunnistaa Th1 soluja Th2-solut niin hiirillä ja ihmisille [26]. On myös havaittu, on sytotoksinen CD8 + T-solujen, Th17, Treg, monosyytit, dendriittisolut, syöttösolut, luonnollisten tappajasolujen (NK-solut), melanooma, SCC: n ja keuhkosyövän soluja [19], [20], [27], [ ,,,0],28], [29], [30]. Tässä ensimmäistä kertaa osoitimme, Tim-3: n ekspressio mahalaukun syövän soluissa ja solulinjoissa. Lisäksi löysimme merkittävä korrelaatio Tim-3 ilmentymistä syöpäsoluissa ja kliinisten-patologinen parametrit lymph-verisuoni- invaasiota. Lisäksi olemme havainneet, että eloonjäämisaste potilaiden positiivisia Tim-3 ilmentyminen kasvaimissa oli merkittävästi alhaisempi kuin negatiivisin Tim-3 ilme. Yksiulotteista ja monimuuttuja analyysit paljasti myös, että Tim-3 yli-ilmentyminen kasvainsoluissa liittyy huonoon ennusteeseen mahasyövän.

Tim-3 on tehokas immunoinhibitorisen molekyylin mukana immuuni suvaitsevaisuutta, ja autoimmuunisairauksien vastauksia. Mekanismit säätelemiseksi Tim-3 ilmentyminen kasvainsoluissa ei ole vielä täysin ymmärretty. Wiener et ai raportoi, että TGF-β1 kohonnut Tim-3 ilmaisua, mikä johti paikallisen immunosuppression [19]. Samaan aikaan korkea kasvain TGF-β1 tasot olivat merkitsevästi yhteydessä vähentynyt selviytymisen mahalaukun syöpäpotilailla. Aiemmat tutkimukset ovat tunnistaneet Tim-3 negatiivisena säätelijänä T auttaja 1-solujen vasteita [26]. Viime aikoina on kuitenkin uusi tutkimukset osoittavat, että Tim-3 voi myös edistää tulehdusta vaste, mikä osoittaa, että Tim-3 on kaksoisrooli immuniteetti [31], [32]. Siten ekspressiotasot Tim-3 syöpäsoluissa voi liittyä sytokiinien tuottamiseksi prosessin aikana mahasyövän. Lisäksi viimeaikaiset tutkimukset ovat havainneet, että Tim-3 yliekspressio liittyi lyhyempi eloonjäämisaste epiteelisyövissä kuten keuhkosyövän ja kohdunkaulan syöpä [20], [30], meidän havainnot ovat yhdenmukaisia ​​näiden raporttien. Vielä tärkeämpää kuin kaikki nämä havainnot, Cao et al vahvistivat, että alas ekspressiota sääteleviä Tim-3 HeLa-soluissa merkittävästi estämällä sekä muuttoliike ja hyökkäys Hela-solujen [30]. Nämä tulokset viittaavat siihen, Tim-3 paitsi tukahduttaa kasvaimen vastaisen immuniteetin, mutta myös suoraan edistää syövän kehitystä.

tunnistaminen Gal-9 ligandina Tim-3 on nyt vakiinnuttaneet Tim-3-Gal -9 reitti on tärkeä säätelijä Th1 immuniteetin, joka johtaa apoptoosin Th1-solujen [21], [33]. Tässä tutkimuksessa havaitsimme, että molemmat suurempia Gal-9 ilmaisun ja negatiivinen Tim-3 ilmentyminen oli merkitsevästi yhteydessä hyvään yleiseen eloonjäämiseen ( P
= 0,002, P
= 0.010, vastaavasti); yhdistelmä Gal-9 ja Tim-3 ilmentyminen oli itsenäinen ennustetekijöiden markkeri mahasyövän. Nämä tulokset osoittavat, että Tim-3-Gal-9 reitti voi olla tärkeä rooli mahasyövän.

Lisäksi H.pylori
on ryhmä 1 karsinogeeniksi perustuu Maailman terveysjärjestön (WHO) ja International Agency for Research Cancer (IARC) [34]. On yleisesti hyväksytty, että mahasyöpä on monivaiheinen prosessi, johon liittyy useita tapahtumia, kuten atrofinen gastriitti, suoliston metaplasiaa, dysplasia ja syöpä. Aiemmat raportit ovat todenneet, että Tim-3-Gal-9 vuorovaikutus voi olla huomattava vaikutus tulehduksellisten [26], [35], [36], [37]. Myös tutki H.pylori
infektio voi vaikuttaa ekspressiotasot Gal-9 ja Tim-3. Kuitenkin nykyisessä tutkimuksessa, Gal-9 ja Tim-3 ekspressiotasot eivät olleet tilastollisesti merkitsevää eroa H.pylori
(+) ryhmä ja H.pylori
(-) ryhmä mahasyövän ( P
= 0,101, P
= 0,565). Lisätutkimukset kanssa additionalsamples tarvitaan luomaan rooleja Gal-9 ja Tim-3 H.pylori
infektiosta.

Yhteenvetona tämä tutkimus on osoittanut ilmaus Gal-9 ja Tim-3 mahasyövän. Tärkeää on, että monimuuttuja analyysit paljastivat merkittävää roolia Gal-9 ja Tim-3 itsenäisenä ennustetekijä potilaille, joilla on mahalaukun syöpä. Siten aseman Gal-9 ja Tim-3 voitiin määrittää kliininen tutkimus ja ne voivat olla hoito arvo tulevaisuudessa [38], [39].

Kiitokset

Tekijät haluavat kiittää tohtori Jennifer S. Davis, herra Chang-Song Guo ja Ms Ying Song heidän teknistä tukea.

• PLoS ONE: Economic Evaluation of ensilinjan Adjuvantti kemoterapioita varten kokoisen mahasyöpäpotilaista in China
• PLoS ONE: Incidence, Ennakoiva tekijät, ja kliiniset tulokset akuutti Munuaisvaurioita jälkeen Mahalaukun Leikkaus Mahalaukun Cancer