PLoS ONE: verminderde Galectine-9 en Verhoogde Tim-3 Expression gerelateerd zijn aan een slechte prognose in Gastric Cancer

De abstracte

Introductie

Galectine-9 (Gal-9) induceert adhesie en aggregatie van bepaalde celtypes remt en de metastase van tumorcellen. T-cel-immunoglobuline-domein en mucine-3-bevattend molecuul 3 (TIM-3) speelt een centrale rol in immuunregulatie. Het doel van dit onderzoek is het onderzoeken Gal-9 en TIM-3 veranderingen bij maagkanker en hun prognostische waarde.

Methods

Gal-9 en Tim-3 expressie werd geëvalueerd met een tissue microarray immunohistochemie werkwijze 305 maagkanker, waarvan 84 aangrenzend normaal gepaarde monsters waren. Cellijnen SGC-7901, BGC-823, MGC-803, MKN45 en GES-1 werden ook gekleurd. De correlaties werden geanalyseerd tussen de expressie van Gal-9 en Tim-3-eiwit en tumor parameters of klinische uitkomsten.

Resultaten

Gal-9 en Tim-3 gekleurd positief op tumorcellen in 86,2% (263/305) en 60,0% (183/305) van de patiënten met maagkanker, respectievelijk. Gal-9 expressie in kankercellen significant hoger dan bij normale mucosa ( P
< 0,001). Verminderde Gal-9 expressie werd geassocieerd met lymfe-vasculaire invasie, lymfeklieren metastase, metastasen op afstand en erger TNM staging ( P
= 0,034, P
= 0,009, P
= 0,002 en P
= 0,043, respectievelijk). In tegenstelling, was bij kanker significant lager dan in de controle slijmvlies Tim-3 expressie ( P Restaurant < 0,001). Patiënten met lymfe-vasculaire invasie hadden hogere expressie niveaus van Tim-3 ( P Restaurant < 0,001). Bovendien, multivariate analyse blijkt dat zowel hoge Gal-9 expressie en lage Tim-3 expressie significant geassocieerd waren met lange algehele overleving ( P
= 0.002, P
= 0,010, respectievelijk); de combinatie van Gal-9 en Tim-3 expressie was een onafhankelijke prognostische predictor voor patiënten met maagkanker (RR: 0,43; 95% CI: 0,20-0,93). H. pylori
infectie status werd niet geassocieerd met Gal-9 en Tim-3 expressie ( P
= 0.102, P
= 0,565).

Conclusie

De resultaten suggereren dat expressie van Gal-9 en Tim-3 in tumorcellen potentieel onafhankelijke prognostische factor voor patiënten met maagkanker kan zijn. Gal-9 en TIM-3 kan een belangrijke rol spelen in de maag carcinogenese

Visum:. Jiang J, Jin M-S, Kong F, Cao D, Ma H-X, Jia Z, et al. (2013) Verminderde Galectine-9 en Verhoogde Tim-3 Expression gerelateerd zijn aan een slechte prognose bij maagkanker. PLoS ONE 8 (12): e81799. doi: 10.1371 /journal.pone.0081799

Uitgever: Pierre Busson, Instituut voor Carcinologie Gustave Roussy, Frankrijk

Ontvangen: 6 januari 2013; Aanvaard: 26 oktober 2013; Gepubliceerd: 10 december 2013 |

Copyright: © 2013 Jiang et al. Dit is een open-access artikel gedistribueerd onder de voorwaarden van de Creative Commons Attribution License, die onbeperkt gebruik, distributie en reproductie maakt in elk medium, op voorwaarde dat de oorspronkelijke auteur en de bron worden gecrediteerd

Financiering:. Deze studie werd ondersteund door de National Natural Science Foundation of China (81072369 en 81273065). De financiers hadden geen rol in de studie design, het verzamelen van gegevens en analyse, besluit te publiceren, of de voorbereiding van het manuscript

Competing belangen:.. De auteurs hebben verklaard dat er geen tegenstrijdige belangen bestaan ​​

Introductie

Maagkanker blijft de vierde meest voorkomende kanker gediagnosticeerd en is de tweede belangrijkste oorzaak van kanker gerelateerde sterfgevallen wereldwijd [1]. Galectines zijn een groep van eiwitten die binden β-galactosiden met evolutionair geconserveerde sequentie-elementen van de herkenning van koolhydraten domein (CRD) [2], [3]. Het galectine familie draagt ​​neoplastische transformatie tumorcel overleving weefselinvasie en metastase van verschillende soorten kanker, met inbegrip van maagkanker [4]. Eerdere studies toonden aan dat de expressie van galectine-3 was significant hoger in de gastrische carcinomen opzichte van aangrenzend normaal weefsel. Galectine-3 en galectine-4 kunnen nuttige tumormarkers voor maagkanker met betrekking tot tumorprogressie en potentie van lymfeknoop metastasen vooral voor bepaalde histologische soorten maagkanker [5], [6]. Galectine-9 (Gal-9) is een nieuw lid van de galectine eiwitfamilie [7]. De afgelopen jaren een belangrijke rol ontstaan ​​voor de Gal-9 in gezondheid en ziekte [8]. In normale fysiologie, Gal-9 lijkt een cruciale modulator van T-cel immuniteit door het induceren van apoptose in specifieke T-cel subpopulaties. Omdat deze T-celpopulaties zijn geassocieerd met autoimmuniteit, ontstekingsziekten en transplantaatafstoting, werd gepostuleerd dat de toepassing van exogeen Gal-9 pathogene T-celactiviteit kan beperken [9], [10]. Bovendien wordt Gal-9 gelokaliseerd in het cytoplasma en op het celoppervlak van cellen en lijkt worden vrijgegeven uit tumorcellen [11]. In vaste tumoren, de beschikbare studies gesuggereerd dat Gal-9 heeft een tumor-suppressor functie, met verlies van Gal-9 nauw geassocieerd met verhoogde metastase en hoge herhaling [12], [13], [14], [15]. Kadowaki et al toonden ook aan dat Gal-9 signalering overleving kan verlengen door macrofagen induceren te differentiëren tot plasmacytoïde dendritische cel-achtige macrofagen in een muis longkanker model [16]. Deze details voorgesteld dat Gal-9 mogelijke prognostische factor met anti-metastatisch potentieel kan zijn. Expressie van Gal-9 nog niet onderzocht bij maagkanker.

T-cel immunoglobulin- en mucine domein 3-bevattend molecuul 3 (Tim-3) is een T helper type 1 (Th1) -specifieke celoppervlak molecuul dat lijkt Th1 reacties en inductie van perifere tolerantie [17] reguleren [18]. Onlangs werd afwijkende Tim-3 expressie gerapporteerd in melanoomcellen, bijdraagt ​​aan de lage wrijvingscoëfficiënt vermogen van tumorcellen en het bevorderen van de overleving van de tumor [19]. Zhuang e.a. ook aangetoond dat de belangrijke rol van Tim-3 expressie in tumorcellen als onafhankelijke prognostische factor voor patiënten met niet-kleincellige longkanker [20]. Zhu C et al gebleken dat Gal-9 is het Tim-3 ligand, en suggereerde dat de Tim-3-Gal-9 enzym kan geëvolueerd effectieve beëindiging van effector Th1-cellen [21] waarborgen. Om het verband tussen Tim-3-Gal-9 route en voortgang van maagkanker te onderzoeken, werd de Gal-9 en Tim-3 eiwitexpressie onderzocht bij 305 patiënten met maagkanker, waarvan 84 gevallen aangrenzend normaal weefsel monsters waren gekoppeld. Verenigingen van het eiwit expressie met de patiënt klinische kenmerken en de prognose werden ook onderzocht in deze studie.

Methods

Study Populaties

Drie honderd en vijf patiënten, waaronder 231 mannen en 74 vrouwen met maagkanker die een operatie tussen augustus 2000 en december 2010 onderging ten eerste ziekenhuis van Jilin University werden geïncludeerd in deze studie. De patiënten hadden geen behandeling voor de chirurgische ingreep niet ontvangen. De diagnose van maagkanker is op basis van morfologische en immunohistochemische bevindingen beoordeeld door twee onafhankelijke pathologen (MSJ en YPW). Maagkanker werden verwijderd door chirurgische excisie; aangrenzend normaal maagepitheel monsters werden verzameld van 84 patiënten ter vergelijking. Patiënt leeftijd varieerde van 32 tot 87 jaar, met een mediane leeftijd van 64 jaar. Schriftelijke toestemming werd verkregen van alle patiënten en het studieprotocol werd goedgekeurd door de ethische commissie van het eerste ziekenhuis van Jilin University.

Cell cultuur

Human maagkanker cellijnen SGC-7901 , werden BGC823, MGC803, MKN45 van de afdeling maag- en colorectale chirurgie, eerste ziekenhuis van Jilin University verworven. De vereeuwigd menselijke maagslijmvlies cellijn GES-1 die door het ziekenhuis Cancer van Beijing University. Cellen werden gekweekt in RPMI-1640 medium dat 10% hitte-geïnactiveerd foetaal runderserum (FBS) en 100 ng /ml van zowel penicilline en streptomycine in een incubator (50 ml /l CO2) bij 37 ° C. Medium op de cellen werd elke 2-3 dagen vervangen. Cellen in logaritmische groeifase werden verzameld voor verdere experimenten.

Immunohistochemie

Kortom, de secties (4 urn breed) uit het weefsel microarray (TMA) blokken werden gedeparaffiniseerd en gedehydrateerd, warmte- geïnduceerd herstel van de epitoop werd uitgevoerd door onderdompeling van dia's in 10 mmol citraatbuffer (pH 6,0) en het koken van de buffer voor 10 mi in een snelkookpan. Na het blokkeren met 3% H _{2O 2, Alle secties werden overnacht geïncubeerd bij 4 ° C met anti humaan galectine-9 polyklonaal antilichaam (1:250 verdund ab69630, Abcam, UK) en antihumaan Tim-3 polyklonaal antilichaam (8 ug /ml, AF2365, R &D Systems, Minneapolis, USA), 3,3-diaminobenzidine (DAB) werd gebruikt als chromogeen, en de secties werden tegengekleurd met hematoxyline. Voor negatieve controles, werden tumor glaasjes behandeld met de IgG isotypen van konijn (normaal konijnenserum IgG, sc-2027, Santacruz, USA) en geiten (normaal geit IgG, sc-2342, Santacruz, USA) de vervanging van primair antilichaam, allemaal negatief controles blijkt verwaarloosbaar achtergrond vlek. Cellijnen (SGC-7901, BGC-823, MGC-803, MKN45 en GES-1) werden routinematig gekweekt werden maagkanker cel pellets ingebed in paraffine en verwerkt zoals weefsel dia's. Maagkanker cellijnen werden gekleurd met dezelfde methode.}

De gebrandschilderde dia's werden beoordeeld door twee onafhankelijke pathologen (MSJ en YPW), die waren blind voor de klinische gegevens en het resultaat, de algemeen aanvaarde semi-kwantitatieve analyse (HSCORE systeem) gebruikt voor kleurintensiteit en percentages van de cellen gekleurd met een specifieke omvang van kan worden beoordeeld. De HSCORE werd berekend met behulp van de volgende vergelijking: HSCORE = ΣPi (i) (i = 0,1,2,3, Pi = 0~100%). i: de intensiteit van kleuring, dwz geen kleuring = 0, 1 = zwakke kleuring, matige kleuring = 2 en sterke kleuring = 3. Pi representeert percentage gekleurde cellen met intensiteiten die variëren van 0 tot 100. Derhalve is de HSCORE varieert van 0 tot 300, HSCORE > 0 wordt beschouwd als positief kleuring en HSCORE = 0 wordt beschouwd als een volledige negatieve kleuring. De afwijkende resultaten van de kleurintensiteit van twee pathologen werden opgelost door de herziening van de gevallen samen en overeenstemming te bereiken over de scores, en de afwijkende resultaten van de percentages van gekleurde cellen werden opgelost door het berekenen van de gemiddelden van de scores.

Western blotting

Om de nauwkeurigheid van semi-kwantificering door immuun-histologie te bevestigen, werden de Western blotting toegediend in maagkanker cellijnen. De cellen werden gelyseerd met koude lysisbuffer en gecentrifugeerd bij 12.000 g gedurende 10 minuten loading buffer werden gemengd met cellysaten en gekookt gedurende 5 minuten bij 95 ° C. 10 ug totaal eiwit werd geladen in 10% discontinue SDS polyacrylamidegel voor elektroforese en overgebracht op polyvinylideenfluoride membranen. Membranen werden geblokkeerd in 5% runderserumalbumine en geïncubeerd met primaire antilichamen (anti-Gal 9 en anti Tim-3) overnacht bij 4 ° C in Tris gebufferde zoutoplossing met 0,1% Tween20. Na wassen werden de membranen geïncubeerd in mierikswortelperoxidase-geconjugeerde antilichamen gedurende 1 uur bij kamertemperatuur geroerd. Membranen werden vervolgens geïncubeerd en Western blotting beelden werden genomen en geanalyseerd. β-actine werd gebruikt als interne controle en alle densitometrische waarden werden genormaliseerd tegen de relatieve β-actine waarde.

Determination of H.pylor
i infectie

Onder 305 maagkanker gevallen werden bloedmonsters verzameld van 104 patiënten die voor het onderzoek van de H.pylor
i infectie vóór de chirurgische ingreep. 4 ml nuchtere bloedmonsters werden bij kamertemperatuur gedurende 30 minuten en daarna gecentrifugeerd. Het serum werd getrokken en bewaard bij -80 ° C. Serum immunoglobuline (Ig) G antilichamen aan H. pylori
door werden gedetecteerd H.pylor
i-IgG enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kit (Biohit, Helsink, Finland). De antilichaamtiters werden bepaald door optische dichtheid (OD) waarden volgens het protocol van de fabrikant en titers hoger dan de afgesneden waarde van 30EIU werden beschouwd als positief voor H. pylori infectie
. De kit kwaliteitscontrole toonden variatiecoëfficiënt van 4,5% voor de H
. pylori
infectie onderzoek.

Statistieken analyse

De HSCORE van Gal- 9 en Tim-3 expressie worden gepresenteerd als mediaan (interquartile). De Wilcoxon matched-pairs ondertekend-rank test en Mann-Whitney U test of Kruskal-Wallis H-test werden gebruikt bij respectievelijk het vergelijken van gepaarde groepen en twee onafhankelijke groepen. De Kaplan-Meier-methode werd gebruikt om de totale overleving schatten en overleving verschillen werden geanalyseerd met de log-rank test. Cox proportional hazards model werd gebruikt om het relatieve risico (RR) en bijbehorende 95% betrouwbaarheidsintervallen (95% CI) na het aanpassen leeftijd (schaalvariabele), geslacht (nominale variabele), lymfe-vasculaire invasie (nominale variabele) berekenen en TNM staging (schaal variabel). Alle statistische toetsen waren tweezijdig en P
-waarden van minder dan 0,05 werden als statistisch significant beschouwd. Alle analyses werden uitgevoerd met behulp van SPSS softwarepakket 18.0 (SPSS Inc. USA).

Resultaten

De expressie van Gal-9 en Tim-3 bij maagkanker en maagkanker cellijnen

Immunohistochemische analyse toonde aan dat Gal-9 en Tim-3 positieve gekleurd op tumorcellen in 86,2% (263/305), 60,0% (183/305) van de patiënten met maagkanker, respectievelijk. Meeste kankercellen bij maagkanker weefsel vertoonde krachtige cytoplasmatische Gal-9 immunokleuring, maar een klein aantal maagkanker cellen vertoonden negatieve immunokleuring voor Gal-9 (fig. 1A, 1B, 1C). Gastric tumorcellen vertoonden een duidelijke cytoplasmatische en nucleaire positiviteit voor Tim-3 immunokleuring (figuur. 1D, 1E, 1F, 1G).

Onder de 84 gepaarde monsters, Gal-9 positieve kleuring werd gevonden in 68/84 ( 81,0%) maagkanker en in basale cellen van 51/84 (60,7%) normale slijmvlies, respectievelijk ( P
= 0,004). Omgekeerd, werd Tim-3 positieve kleuring gevonden 55/84 (65,5%) bij maagkanker en 72/84 (82,7%) in de normale slijmvlies, respectievelijk ( P
= 0,002). Daarnaast cellijnen SGC-7901, BGC-823and MGC-803 en GES-1 toonde zwakke cytoplasmatische Gal-9 immunokleuring (figuur. 1H), maar MKN45 toonde negatief immunokleuring voor Gal-9 (figuur. 1I). Vier maagkanker cellijnen toonde ook een sterke cytoplasmatische en nucleaire positiviteit voor Tim-3 kleuring (fig. 1J). Echter GES-1 cellen vertoonden negatieve kleuring voor Tim-3 (Figure.1K).

De detectie van Gal-9 en Tim-3 activering werd bevestigd door dezelfde cellen door Western blotting, die wordt getoond in Figuur 2.

Gal-9 expressie in kanker laesies was significant hoger dan die bij gezonde slijmvliezen (Median HSCORE: 140 versus 20; P Restaurant < 0,001 figuur 3A.). Tim-3 HSCORE bij kanker laesies was significant lager dan die in de normale slijmvlies (Median HSCORE: 40 versus 170; P Restaurant < 0,001 figuur 3B.)

Gal-9 en Timmermans. 3 expressie niveaus en H.pylor
i infectie

van 104 maagkanker patiënten getest op H.pylor
i antilichamen, de totale positieve tarief van H. pylor
i infectie was 65,4%. In de leeftijd subgroepanalyse, de H.pylor
i-infectie was hoger in de jaren 45-65 groep, in vergelijking met de jonger dan 45 jaar oud groepen of ouder dan 65 jaar oud groepen. De resultaten toonden geen correlatie tussen de H.pylor
i-infectie en de Gal-9 en Tim-3 expressie ( P
= 0.102, P
= 0,565). (Figuur 3C, 3D).

Correlatie van Gal-9 en Tim-3 expressie met clinicopathologic parameters

Zoals getoond in tabel 1, HSCORE van Tim-3 was significant hoger bij mannelijke patiënten dan vrouwelijke patiënten ( P
= 0,010). Tim-3 expressie niveaus waren positief gecorreleerd met de leeftijd ( P
= 0,004), maar Gal-9 expressie niveaus werden negatief gecorreleerd met de leeftijd ( P
= 0,049). Er waren significante verschillen in Gal-9 en Tim-3 expressieniveaus tussen subgroepen van veneuze infiltratie bij patiënten met veneuze infiltratie, de mediaan HSCORE van Gal-9 was significant lager ( P
= 0,034) en Timmermans 3 was significant hoger ( P Restaurant < 0,001). Volgens de TNM stadia, werd een hogere HSCORE waargenomen bij patiënten van stadium I tumoren te vergelijken met andere stadia ( P
= 0,043). De aanzienlijk hogere HSCORE van Gal-9 werd gevonden bij patiënten zonder lymfeklier ( P
= 0,009) en bij patiënten zonder metastasen ( P
= 0,022). We analyseerden ook de Gal-9 en Tim-3 expressie volgens tumor differentiatie (hoog, midden en lage) en de diepte van de invasie (T1-T4), werden geen significante verschillen gevonden. De klinische kenmerken van de onderwerpen zijn samengevat in tabel 1 in detail.

High Gal-9 expressie en negatieve Tim-3 expressie waren significant geassocieerd met langere algemene overleving

Follow-up informatie beschikbaar was voor alle 305 patiënten, voor perioden variërend 3-135 maanden (mediaan 40 maanden). Geen van de patiënten overleed aan postoperatieve complicaties binnen 30 dagen na het begin van de onderzoeksperiode, en 120 (39,3%) patiënten overleden tijdens de follow up. Kaplan-Meier survival curves werden uitgezet volgens de HSCORE (Negatief, HSCORE≤100, HSCORE≤200 en HSCORE > 200). De totale overleving was significant hoger in Gal-9 HSCORE > 200-groep dan andere groepen (Log-rank test, P
= 0,011). Als survival curves van negatieve groep, HSCORE≤100 groep en HSCORE≤200 groep waren vergelijkbaar, combineerden we ze voor verdere analyse en Kaplan-Meier survival curve werden getoond in Figure.4A ( P
= 0,002). Patiënten met Tim-3-negatieve tumoren hadden langere algemene overleving. Dezelfde resultaten werden verkregen wanneer alle positieve uitdrukking patiënten werden gecombineerd (Figure.4B, Log-rank test, P
= 0,01). Kaplan-Meier survival curves werden uitgezet volgens de Gal-9 en Tim-3 co-expressie, de algehele overleving van patiënten die Gal-9 HSCORE >waren; 200 en Tim-3 negatief was significant hoger, en patiënten die Gal waren -9 HSCORE≤200 en Tim-3 positief was significant lager (Figure.4C, Log-rank test, P Restaurant < 0,001).

Combinatie van Gal-9 en Tim-3 expressie was onafhankelijk prognostische marker

Tabel 2 toonde de multivariate analyses van factoren met betrekking tot prognose voor de patiënt. De univariate analyse toonde aan dat de volgende factoren waren significant gerelateerd aan postoperatieve overleving: TNM stadium, veneuze infiltratie en combinatie van Gal-9 en Tim-3 expressie ( P Restaurant < 0,001, P
= 0.001, P Restaurant < 0,001 respectievelijk). Na gecorrigeerd naar leeftijd en geslacht, multivariate regressie-analyse gaf aan dat Gal-9 en Tim-3 co-expressie en TNM stadium waren onafhankelijke prognostische factoren, maar de lymfe-vasculaire invasie was geen onafhankelijke prognostische factor.

Discussie

in deze studie hogere uitingen van Gal-9 werden gevonden bij patiënten zonder lymfe-vasculaire invasie, lymfeklier en metastases. Bovendien wordt een hogere uitingen van Gal-9 nauw geassocieerd met een betere overleving. Deze bevindingen zijn consistent met een eerder verslag bij borstkanker, hepatocellulair carcinoom, cervicaal carcinoom en kwaadaardig melanoom [12], [13], [14], [15], [22]. Gal-9 expressie bij maagkanker lesies was significant hoger dan in gepaarde aangrenzende normale gastrische epitheelweefsels Dit resultaat leidde ons tot de hypothese dat Gal-9 vertonen antitumoractiviteit in tumordragende weefsels tot incresed aggregatie van tumorcellen [23] . Echter, deze bevinding is verschillend van de opmerkingen van de Liang's. Zij vonden dat Gal-9 expressie in kankerweefsel van 38 invasieve baarmoederhalskanker plaveiselcelcarcinoom (SCC) patiënten significant lager dan die in normale cervicale plaveiselepitheel van 23 gezonde controles. Maar Gal-9 uitdrukkingen goed gedifferentieerd SCC waren significant hoger in vergelijking met die in hooggradige squameuze intrapiehelial laesies [14]. Helaas hebben ze niet vergelijken met de Gal-9 expressie in kanker weefsels gepaarde aangrenzende normale weefsels. De discrepantie van verschillende studies kan het gevolg zijn van variatie immuuntoestand, oorzaken van ontsteking en weefselspecificiteit van Gal-9 expressie. Daarnaast zijn verschillende ziekten gevoelig apoptotische verwijdering door recombinant Gal-9. In overeenstemming met deze waarneming suggereert dat kan gal-9 een aantrekkelijke kandidaat voor de behandeling van kanker. Behandeling met recombinant Gal-9 kunnen metastatische verspreiding van kanker te voorkomen [16], [24], [25].

Tim-3 is het oppervlak molecule die specifiek Th1 cellen kunnen identificeren Th2-cellen bij muizen en mens [26]. Ook is gevonden cytotoxische CD8 + T-cellen, Th17, Treg, monocyten, dendritische cellen, mast cellen, natuurlijke killer (NK) cellen, melanoma, SCC en longkankercellen [19], [20], [27], [ ,,,0],28], [29], [30]. Hier, voor de eerste keer, we aangetoond Tim-3 expressie in maagkanker cellen en cellijnen. Daarnaast vonden we een significante correlatie tussen Tim-3-expressie in kankercellen en de klinisch-pathologische parameters van lymfe-vasculaire invasie. Verder vonden we dat de overlevingskans van patiënten met een positieve Tim-3 expressie tumoren was significant lager dan die met negatieve Tim-3 expressie. De univariate en multivariate analyses bleek ook dat Tim-3 overexpressie in tumorcellen geassocieerd met een slechte prognose voor maagkanker.

Tim-3 is een krachtige immuunsuppressieve eiwit betrokken bij immuuntolerantie en autoimmuunresponsen. De mechanismen voor het regelen Tim-3 expressie in tumorcellen worden nog niet volledig begrepen. Wiener et al gemeld dat TGF-β1 verhoogde Tim-3 expressie, waardoor lokale immunosuppressie [19]. Intussen werden hoge tumor TGF-β1 levels significant geassocieerd met een verminderde overleving van de maag-kankerpatiënten. Eerdere studies hebben Tim-3 geïdentificeerd als een negatieve regulator van T-helper 1-cel responsen [26]. Onlangs zijn echter nieuwe onderzoeken tonen aan dat Tim-3 kan ook een pro-inflammatoire reactie te bevorderen, wat aangeeft dat Tim-3 heeft een tweeledige functie immuniteit [31], [32]. Aldus kan de expressieniveaus van Tim-3 in kankercellen koppelen cytokineproducerende tijdens het proces van maagkanker. Bovendien hebben recente studies vastgesteld Tim-3 overexpressie was geassocieerd met een kortere overleving van epitheliale kankers waaronder longkanker en baarmoederhalskanker [20], [30] Onze resultaten zijn consistent met deze rapporten. Belangrijker dan al deze bevindingen Cao e.a. bevestigd die naar beneden reguleren van de expressie van Tim-3 in HeLa cellen remde zowel de migratie en invasie van Hela cellen [30]. Deze resultaten suggereren dat Tim-3 niet alleen onderdrukken anti-tumor immuniteit, maar ook rechtstreeks te bevorderen kanker vooruitgang.

Identificatie van Gal-9 als een ligand voor Tim-3 is nu stevig gevestigd de Tim-3-Gal -9 route als een belangrijke regulator van Th1 immuniteit, waardoor apoptose van Th1-cellen [21], [33]. In deze studie hebben we vastgesteld dat zowel het hoger Gal-9 expressie en negatieve Tim-3 expressie waren significant geassocieerd met een betere totale overleving ( P
= 0.002, P
= 0,010, respectievelijk); de combinatie van Gal-9 en Tim-3 expressie was onafhankelijk prognostische marker bij maagkanker. Deze resultaten geven aan dat de Tim-3-Gal-9 pathway een belangrijke rol bij maagkanker kunnen spelen.

Daarnaast H. pylori
een groep 1 carcinogeen gebaseerd op Wereldgezondheidsorganisatie (WHO) en het Internationaal Agentschap voor kankeronderzoek (IARC) [34]. Het is algemeen aanvaard dat maagkanker een meerstaps proces waarbij een reeks gebeurtenissen zoals atrofische gastritis, intestinale metaplasie, dysplasie en carcinoom. Eerdere rapporten hebben opgemerkt dat de Tim-3-Gal-9 interactie een aanzienlijk effect kan hebben op inflammatoire [26], [35], [36], [37]. We onderzochten ook of H. pylori
infectie kan expressie van Gal-9 en Tim-3 te bewerkstelligen. Echter, in de huidige studie, Gal-9 en Tim-3 expressie niveaus waren niet statistisch verschillend tussen de H. pylori
(+) groep en de H. pylori
(-) groep bij maagkanker ( P
= 0,101, P
= 0,565). Verder onderzoek met additionalsamples zijn nodig om de rol van Gal-9 en Tim-3 te vestigen in H. pylori
-infection.

Tot slot, dit onderzoek heeft de expressie van Gal-9 aangetoond en Tim-3 bij maagkanker. Belangrijk is dat de multivariate analyse onthulde de belangrijke rol van Gal-9 en Tim-3 als een onafhankelijke prognostische factor voor patiënten met maagkanker. Zo zou de status van Gal-9 en Tim-3 worden bepaald op klinisch onderzoek en kan de behandeling waarde hebben in de toekomst [38], [39].

Dankwoord

De auteurs willen met dank aan Dr. Jennifer S. Davis, de heer Chang-Song Guo en mevrouw Ying Song voor hun technische ondersteuning.

• PLoS ONE: economische evaluatie van First-Line Adjuvant Chemotherapieën voor resectable maagkankerpatiënten in China
• PLoS ONE: Incidentie, Predictive Factors, en Klinische resultaten van acuut nierfalen na maag operatie van maagkanker