PLOS ONE: Niveaux urinaires de composés N-nitroso par rapport au risque de cancer gastrique: Résultats de l'étude de cohorte Shanghai

Résumé

Contexte

composés N
nitroso sont pensés pour jouer un rôle important dans le développement du cancer gastrique. Les données épidémiologiques, cependant, sont rares dans l'examen des associations entre des biomarqueurs d'exposition à N
nitroso composés et le risque de cancer de l'estomac.

Méthodes

A imbriquée Case- étude de contrôle au sein d'une cohorte prospective de 18,244 hommes d'âge moyen et plus âgés à Shanghai, en Chine, a été menée pour examiner l'association entre le niveau urinaire de N
nitroso composés et le risque de cancer de l'estomac. Information sur la démographie, l'apport alimentaire habituel, et l'utilisation de l'alcool et du tabac ont été recueillies au moyen d'entrevues en personne à l'inscription. Les taux urinaires de nitrate, nitrite, N
nitroso-2-méthylthiazolidine-4-carboxylique (NMTCA), N -nitrosoproline (NPRO)
, N
- nitrososarcosine (NSAR), N
acide -nitrosothiazolidine-4-carboxylique (NTCA), ainsi que du sérum H. Les anticorps pylori ont été quantifiés de dans 191 cas de cancer gastrique et 569 témoins appariés individuellement. méthode de régression logistique a été utilisée pour évaluer l'association entre les niveaux urinaires de composés nitroso
N et le risque de cancer de l'estomac.

Résultats

Comparativement aux témoins, les patients atteints de cancer gastrique ont l'ensemble des niveaux comparables de nitrate urinaire, nitrite, et les composés nitroso
N. Parmi les personnes séronégatives pour les anticorps H. pylori
, des niveaux élevés de nitrate urinaire ont été associés à un risque accru de cancer de l'estomac. Les odds ratios multivariés ajustés pour les deuxième et troisième tertiles de nitrate étaient 3,27 (intervalle de 95% de confiance = 0,76 à 14,04) et (intervalle de confiance à 95% = 1,05 à 22,17) 4,82, respectivement, par rapport au tertile le plus bas ( P
pour la tendance = 0,042). Il n'y avait pas d'association statistiquement significative entre les taux urinaires de nitrite ou composés nitroso
N et le risque de cancer de l'estomac. niveau de NMTCA urinaire était significativement associée à la consommation d'alcool et de conserves de viande et de poisson produits alimentaires.

Conclusion

La présente étude démontre que l'exposition au nitrate, un précurseur de N
les composés nitroso, peuvent augmenter le risque de cancer de l'estomac chez les personnes sans antécédents de H. pylori de l'infection

Citation:. Xu L, Qu Y-H, Chu X-D, Wang R, Nelson HH, Gao Y-T, et al. (2015) Les niveaux urinaires de nitroso composés
N par rapport au risque de cancer gastrique: Résultats de l'étude de cohorte Shanghai. PLoS ONE 10 (2): e0117326. doi: 10.1371 /journal.pone.0117326

Academic Editor: Jeffrey S. Chang, National Instituts de recherche en santé, TAIWAN

Reçu 30 Juillet 2014; Accepté le 21 Décembre 2014; Publié 6 Février, 2015

Droit d'auteur: © 2015 Xu et al. Ceci est un article en accès libre distribué sous les termes de la licence Creative Commons Attribution, qui permet une utilisation sans restriction, la distribution et la reproduction sur tout support, pourvu que l'auteur et la source originelle sont crédités

Disponibilité des données: Toutes les données pertinentes sont dans le papier

financement:. la recherche publiée dans la présente publication a été soutenue par le national Cancer Institute des national Institutes of Health, sous les numéros d'attribution R01CA043092, R01CA129534 et R01CA144034. Le contenu est uniquement la responsabilité des auteurs et ne représentent pas nécessairement les vues officielles des National Institutes of Health. Les bailleurs de fonds ont joué aucun rôle dans la conception de l'étude, la collecte et l'analyse des données, la décision de publier, ou de la préparation du manuscrit

Intérêts concurrents:.. Les auteurs ont déclaré aucun conflit d'intérêts existent

Introduction

Malgré la diminution de l'incidence et de mortalité du cancer de l'estomac à travers le monde au cours des trois dernières décennies, le cancer gastrique est le quatrième cancer le plus souvent diagnostiqué et la troisième cause la plus fréquente de décès par cancer [1]. Même si la tendance actuelle à la baisse de taux continue, cette malignité restera comme l'un des cancers les plus fréquents dans le monde entier en raison du vieillissement des populations actuelles dans les régions à haut risque [2]. Une caractéristique distinctive du cancer gastrique est la variation géographique remarquable incidence et de mortalité à travers le monde. Asie de l'Est a le plus haut taux d'incidence du cancer gastrique avec plus de 60 pour 100.000 personnes-années, nettement plus élevé que les taux en Amérique du Nord et de l'Afrique qui sont en dessous de 9 pour 100 000 [3]. La diminution considérable des taux de cancer de l'estomac chez les migrants japonais aux États-Unis par rapport à leurs homologues au Japon au cours des dernières décennies d'incidence donnent à penser que les facteurs environnementaux jouent un rôle important dans le développement du cancer gastrique [4]. Par conséquent, l'identification des facteurs de risque environnementaux pour le cancer gastrique pourrait éclairer les stratégies de prévention primaire contre cette tumeur maligne.

N
nitroso composés (CNO) ont montré des effets cancérigènes dans des études expérimentales. Environ 300 CNO ont été testés pour la cancérogénicité dans des expériences de laboratoire, avec 90% d'entre eux montrant des effets cancérigènes sur différentes espèces animales, y compris les primates supérieurs [5, 6]. Certains CNO ont été classés comme «probablement cancérogène pour l'homme" par le Centre international de recherche sur le cancer (CIRC) [7]. Selon le rapport 2010 du CIRC, le nitrate ingéré ou nitrite dans des conditions qui donnent lieu à nitrosation endogène est probablement cancérogène pour l'homme [8]. Les humains sont exposés aux CNO de sources exogènes et de la synthèse endogène. CNO exogènes sont directement dérivés de certains types d'aliments, comme la viande transformée, les poissons salés ou fumés, et marinés et légumes secs [9]. Les données disponibles suggèrent que les CNO dans les aliments se trouvent plus fréquemment, et à plus forte concentration, en Asie que dans les pays occidentaux [10]. CNO endogènes sont formés à partir nitrosation d'amines secondaires ou des amides de N _{2 O 3 et (H 2 NO 2) ^{+, qui sont tous deux des agents de nitrosation nitrite dérivé. Nitrite pourrait tirer directement de la nourriture, ou indirectement de la réduction du nitrate par les bactéries buccales et entériques [11-14]. La formation endogène des CNO est probablement catalysé par le fer hémique présent dans la viande rouge [15, 16]. Chez l'homme, nitrosation se déroule dans un environnement plus acide tels que l'estomac, en particulier lorsque le niveau antioxydant de la vitamine C est faible, que dans un environnement neutre [17]. Les réactions de nitrosation peut être améliorée par certaines bactéries, ainsi que dans certaines conditions inflammatoires telles que l'explosion oxydative [18]. Environ 45% -75% CNO que les humains sont exposés proviennent de la synthèse endogène [19]. Les personnes ayant une forte exposition aux CNO sont émis l'hypothèse d'un risque accru de développer un cancer gastrique.}}

Les études épidémiologiques portant sur le lien entre les CNO ou des résultats incohérents des aliments contenant de la CNP et le risque de cancer gastrique ont produit [20]. Ces incohérences sont probablement dues à une erreur de mesure dans l'évaluation de l'exposition aux CNO dans la plupart, sinon la totalité, des études épidémiologiques ainsi que le manque d'information sur les cofacteurs qui ont un impact sur la nitrosation endogène [8]. Une approche de biomarqueurs qui évalue les CNO au total (à savoir la somme de deux exogènes et endogènes sources) permettrait de surmonter certaines de ces limitations et d'augmenter la validité des résultats. Dans la présente étude, nous avons quantifié les niveaux urinaires de nitrates et de nitrites, deux précurseurs de CNO, ainsi que N
nitroso 2-méthylthiazolidine-4-carboxylique (NMTCA), N
-nitrosoproline (NPRO), N -nitrososarcosine (NSAR), et
acide -nitrosothiazolidine-4-carboxylique de N (NTCA) 4 grands CNO non volatils présents dans l'urine humaine [19 ]. La demi-vie de CNO individuels varie de quelques heures à plusieurs jours. Le NPRO et NSAR sont excrétés dans l'urine presque inchangée, et proportionnelle à la dose administrée par voie orale dans le modèle de rat [21]. Le in vivo
administration de nitrate et précurseurs -nitrosamine de N a montré une grande efficacité dans la production de NMTCA, NTCA et NPRO [22, 23]. Ainsi, le suivi NPRO ou d'autres CNO excrétés dans l'urine semblaient être une procédure appropriée pour l'estimation de l'exposition quotidienne humaine aux deux CNO endogènes et exogènes [21, 22, 24]. Cette étude a été imbriqué dans l'étude de cohorte Shanghai, une cohorte prospective de 18,244 hommes d'âge moyen et plus âgés, à Shanghai, en Chine. L'objectif principal de la présente étude était d'évaluer l'association entre les niveaux urinaires de CNO et de leurs précurseurs et le risque de cancer de l'estomac. L'objectif secondaire de cette étude était d'étudier l'effet modificateur potentiel d'infection avec H
. pylori
bactéries, la consommation d'alcool, le tabagisme, et le sérum /mesure antioxydant urinaire sur l'association du cancer CNP-gastrique. [25]

Population Étude Matériels et méthodes

la conception de l'étude de cohorte Shanghai a été décrite en détail par ailleurs [26, 27]. En bref, quatre petites collectivités définies géographiquement sur une vaste zone de la ville de Shanghai ont été sélectionnés pour un cancer cohorte épidémiologique prospective pour l'étude de l'exposition environnementale et le cancer. listes complètes de tous les résidents de ces communautés sélectionnées pour l'identification des personnes admissibles ont été obtenus à partir de postes de police locaux. Les critères d'admissibilité étaient des hommes âgés de 45 à 64 ans qui ont eu aucun antécédent de cancer. Entre Janvier 1986 et Septembre 1989, 18,244 hommes (-80% des sujets admissibles) ont participé à l'étude. Chaque participant a été interrogé en personne à l'aide d'un questionnaire structuré obtenir des informations sur la démographie, la consommation d'alcool et de tabac, régime alimentaire habituel des adultes, et les antécédents médicaux. À la fin de l'entrevue, un échantillon de sang non à jeun de 10 ml et un seul vide (à savoir, spot) échantillon d'urine ont été prélevés de chaque participant. Des échantillons de sang et d'urine ont été prélevés habituellement 17 heures-21 heures et placés dans une glacière (~4 ° C) immédiatement après le prélèvement. des aliquotes multiples de sérum et l'urine de chaque sujet ont été effectuées et stockées à -70 ° C. Chaque sujet une fiole de 25 ml d'urine ont été mélangés avec 100 mg d'hydroxyde de sodium (NaOH) avant d'être conservé à -70 ° C pour une conservation à long terme. Tous les participants ont donné leur consentement écrit pour la participation de cette étude à l'inscription. Le formulaire de consentement pour une entrevue et à la collecte d'échantillons biologiques de référence a été approuvé par le Conseil de l'Institut du cancer de Shanghai, Shanghai Chine Institutional Review. Tous les participants de la cohorte survivants ont également fourni leur consentement écrit à continuer à participer à l'étude de cohorte au cours du suivi annuel des entrevues en personne. Le formulaire de consentement à la participation continue de cette étude a été approuvée par les Institutional Review Board de l'Institut du cancer de Shanghai et l'Université de Pittsburgh. Cette étude a été approuvée par les Institutional Review Boards de l'Institut de Shanghai Cancer, l'Université du Minnesota, et l'Université de Pittsburgh.

régime actuel a été évaluée au moyen d'un questionnaire de fréquence alimentaire qui comprenait 45 produits alimentaires représentant couramment consommés aliments locaux à Shanghai, en Chine, en début des années 1980. suivi annuel pour les cancers d'incidents et de décès a été effectué depuis 1986. Tous les participants survivants ont été contactés en personne chaque année pour le statut vital et le diagnostic du cancer. Nous avons également effectué une analyse de couplage d'enregistrements avec des bases de données des Shanghai Registre du cancer et de Shanghai municipales de l'état civil. À la fin de 2012, seulement 609 (3,3%), les participants de la cohorte d'origine ont été perdus à notre entretien annuel de suivi. En outre, 573 (3,1%) sujets ont refusé notre demande d'entretiens annuels de suivi, bien que leur cancer et le statut vital ont été constatés et mis à jour par la liaison annuelle record des analyses. Ainsi, le suivi de l'incidence du cancer et de décès chez les participants de la cohorte était presque complète. La présente étude a porté sur 197 patients atteints de cancer gastrique incident dont le diagnostic initial a été fait entre la date d'inscription et Mars 1998. Les diagnostics de 179 (91%) des cancers ont été fondées sur des preuves histopathologique. Les 18 (9%) cas ont été diagnostiqués sur la base imagos radiographiques avec preuve cohérente clinique (n = 14) ou certificat de décès seulement (n = 4). Il y avait 45 patients atteints de cancer au cardia gastrique et 146 au non-cardia.

Pour chaque cas, nous avons choisi trois sujets témoins au hasard parmi tous les participants admissibles de l'étude de cohorte qui répondaient aux critères correspondants. Tous les trois contrôles choisis ont été appariés individuellement cas index par âge (± 2 ans), le mois et l'année de la collecte d'échantillons biologiques, et le quartier de résidence au moment du recrutement.

Les aliquotes de laboratoire Essais d'urine des échantillons des sujets ont été tirés depuis le dépôt de biospecimen puis triées dans les ensembles cas-témoins appariés. Tous les 4 échantillons d'urine dans un ensemble donné appariés cas-témoins (à savoir, 1 cas et 3 contrôles) ont été disposés dans un ordre aléatoire et testés dans le même lot pour toutes les mesures de laboratoire. Le statut cas /contrôle des échantillons d'urine d'essai était aveugle au personnel de laboratoire.

NSAR, NPRO, NTCA et NMTCA ont été analysés par chromatographie en phase gazeuse couplée à l'analyseur d'énergie thermique (GC-TEA) selon la méthode décrite précédemment [22]. Brièvement une aliquote d'urine ml de NaOH 7,5 a été traitée extraite 3 fois avec 20 ml de methanol et de dichlorométhane (1: 9, v /v), après addition de 75 ng -nitrosopipecolic acide de N (NPIC) en tant interne standard, 2,0 g de chlorure de sodium (NaCl), et ml de solution d'ammonium sulfamate 1,5 20% dans 1,8 M
H _{2SO4. Les extraits combinés ont été séchés sur du sulfate de sodium anhydre et on concentre à sec par un évaporateur rotatif à 30 ° C et transformés en dérivés dans 2 ml d'éther avec un excès de diazométhane (préparé avec 2 g N -méthyl-
N
nitroso-p-toluènesulfonamide, 60 ml d'éther, 12 ml de 60% d'hydroxyde de potassium et 12 ml de methanol) .Le ester méthylique de cinq N
-nitrosamino acides dans la solution éthérée a été concentrée à 0,1 ml et quantifiée avec une aliquote de 10 pi par GC-TEA. Pour la chromatographie en phase gazeuse, d'une colonne de verre (2 m x 3 mm de diamètre intérieur) garnie de 5% sur Chromosorb FFAP PVT (80-100 mesh) a été utilisé à une température de 180 ° C. La température de l'orifice d'injection de la Chromatographie en phase gazeuse était de 200 ° C et le débit du gaz d'azote porteur d'écoulement est de 50 ml /min. Pour l'analyse de l'énergie thermique, la température de la pyrolyse est de 500 ° C, l'interface a été de 200 ° C et sous vide à 0,9 mm de Hg. Les recouvrements de NSAR, NPRO, NMTCA et NTCA ajoutés à 30 ug /L chacun étaient de 75%, 79%, 91% et 96%, respectivement. Les limites de détection variaient de 0,1 à 0,5 g /L, en fonction du composé.}

Le nitrate et le nitrite ont été analysés selon la méthode précédemment décrite avec quelques modifications [25]. Le cadmium a été préparé par la réaction du zinc avec 20% de sulfate de cadmium. La solution tampon de chlorure d'ammonium a été ajusté à un pH de 9,6 à 9,7. Les échantillons d'urine ont été deproteined avant la mesure de nitrite et de nitrate a été effectuée. l'échantillon d'urine a été ajusté à pH 8-9, on incube le mélange à 50-60 ° C pendant 10 min, puis 2 ml de 12% de ZnSO <sub>4 solution a été ajoutée et mise à incuber à 50-60 ° C pendant encore 10 min, et 1 ml supplémentaire de 0,5 N
NaOH a été ajouté avant que le contenu refroidi à la température ambiante. Après avoir ajouté 17,6 ml d'eau, l'échantillon a été passé à travers un papier filtre et le filtrat est recueilli après avoir éliminé les 10 premiers ml du filtrat. Pour la mesure de nitrite, 5 ml de 0,5% de sulfanilamide et 2 ml 0,5% N
- (1-naphtyl) éthylènediamine a été ajouté à 10 ml d'aliquote du filtrat décrit ci-dessus avant l'absorbance de la solution finale a été lu à 540 nm. Pour la détermination de nitrate, de 5 ml de NH 4OH solution tampon et 18 ml d'eau a été ajouté à 2 ml de filtrat avant son passage à travers une colonne de Cd à 3-5 ml /min. La colonne a été lavée avec 15 ml d'eau et l'effluent combiné recueilli. Après avoir ajouté 5 ml de 0,5% de sulfanilamide et 2 ml de 0,5% de N- (1-naphtyl) éthylènediamine, l'absorbance de la solution finale a été lue à 540 nm après repos pendant 20 min. Les concentrations finales de nitrites et de nitrates ont été calculées en utilisant la courbe standard. Pour des raisons de contrôle de la qualité, deux lots d'échantillons d'urine avec trois doubles chacun, qui étaient aveugles au personnel de laboratoire ont été dispersés parmi les échantillons d'essai. Les coefficients intra- et inter-essai de variation pour tous les CNO et leurs précurseurs mesurés étaient 4-15% et 12-33 %% respectivement.</sub>

Une histoire de l'infection par H
. pylori
a été déterminée par la détection d'immunoglobuline sérique G (IgG) à H
. pylori
en utilisant une immuno-enzymatique (ELISA) décrit précédemment [28]. Ce test ELISA a été développé et validé en utilisant H
. pylori
souches qui ont été répandues dans la population étudiée [28]. Les méthodes de quantification des antioxydants comprenant des caroténoïdes sériques (c.-à-α-carotène, β-carotène, le β-cryptoxanthine, le lycopène, la lutéine /zéaxanthine, le rétinol, α-tocophérol, le γ-tocophérol, et de la vitamine C) et de catéchines urinaires y compris epigallocatchin ( EGC) ont été décrits dans les rapports précédents de cette population d'étude [29, 30].

Analyse statistique

197 cas et 591 contrôles, des échantillons d'urine de 6 cas (et 18 leurs témoins appariés) et 4 autres contrôles avaient des valeurs manquantes d'une ou plusieurs mesures urinaires. Par conséquent, la présente étude a porté sur 191 cas et 569 sujets témoins appariés après l'exclusion de ces sujets avec les valeurs manquantes dans les analyses primaires. De plus, nous avons ajouté essai de nitrite urinaire en retard sur les échantillons d'étude et avaient des valeurs de nitrite sur 104 cas et 308 témoins appariés seulement, sur lesquels se fonde toute analyse statistique impliquant nitrite urinaire.

Les concentrations de nitrate urinaire, nitrites et 4 CNO mesurées ont été exprimées en pg /g de créatinine à prendre en compte la teneur en eau variant dans l'urine à travers différents individus. La distribution des concentrations de ces analytes urinaires ont été fortement biaisé avec peu de sujets présentant des valeurs élevées, qui sont normalisées, dans une large mesure, par leur transformation logarithmique. Par conséquent, les tests statistiques formelles sur des valeurs continues de CNO, nitrate et nitrite ont été effectuées sur des valeurs logarithmiquement transformées. Spearman analyse de corrélation de rang a été réalisée pour évaluer les relations entre les CNO urinaires individuels, des antioxydants sériques et EGC urinaire. Le χ ^{essai 2 a été utilisé pour comparer les distributions de données démographiques sélectionnées, le tabagisme, la consommation d'alcool et des anticorps IgG à H
. pylori
entre les cas et les témoins. L'analyse de la méthode de covariance a été utilisé pour examiner les différences dans la moyenne géométrique de nitrate urinaire, nitrite et les CNO à travers différents niveaux de tabagisme, la consommation d'alcool, ou le statut sérologique de H
. pylori
infection, l'apport de nouveaux légumes vert foncé, consommation de légumes salés /marinés ou consommation de conserves de viande, de poisson ou d'oeufs chez les sujets de contrôle seulement. Le méthode statistique de Wilcoxon a été utilisé pour évaluer la différence dans les distributions des CNO urinaires ou leurs précurseurs entre les cas et les témoins.}

méthode de régression logistique conditionnelle a été utilisée pour évaluer les associations entre les niveaux de urinaires CNO, les nitrates et les nitrites et le risque de cancer gastrique [31]. Les associations ont été mesurés par des rapports de cotes (RUP) et leur intervalle de 95% de confiance (IC) et de P pour les tendances correspondantes. Les sujets ont été regroupés en trois niveaux (bas, intermédiaire et élevé) sur la base du tertile ou élevé de faibles distributions /des CNO urinaires détectables chez tous les sujets de contrôle. Le test de tendance linéaire pour les associations de risque d'exposition à la maladie a été fondée sur des valeurs ordinales (0-2) pour les trois niveaux d'exposition. Nous avons également examiné l'association du risque de cancer CNP-gastrique dans les sous-groupes stratifiés par la cigarette (ou jamais), la consommation d'alcool (ou jamais), le statut sérologique de H
. pylori
(positif ou négatif), les niveaux d'antioxydants sériques (ci-dessous et égal ou supérieur à la médiane), ou le niveau de EGC urinaire (ci-dessous et égale ou supérieure à la médiane), ainsi que par subsite du cancer gastrique (cardia et non-cardia). Pour les analyses du sous-groupe, des ensembles appariés ont été brisées et la régression logistique inconditionnelle a été utilisé pour maximiser la taille de l'échantillon disponible pour l'analyse statistique stratifiée. Les facteurs correspondants (âge, année de la collecte d'échantillons biologiques, et de quartier de résidence au moment du recrutement) ont été inclus dans tous les modèles de régression logistique inconditionnelle comme covariables. La présence de H
. risque pylori
anticorps dans le sérum, le tabagisme, la consommation excessive d'alcool, les niveaux de β-carotène et de la vitamine C, et le niveau urinaire de EGC sériques ont été identifiés facteurs /protecteurs pour le cancer gastrique dans cette population d'étude [28-30 , 32]. Ces facteurs ont été inclus dans les modèles de régression logistique multivariée lors de l'examen de l'effet indépendant des CNO sur le risque de cancer de l'estomac
.

calcul statistique a été réalisée en utilisant le logiciel SAS version 9.2 (SAS Institute Inc., Cary, NC). Tous P 's
déclarés sont des deux côtés, et ceux qui étaient inférieures à 0,05 ont été considérées comme statistiquement significatives.

Résultats

L'âge moyen (écart-type) des patients de cas au moment du diagnostic de cancer était de 63,4 (5,6) ans. L'intervalle de temps moyen entre la collecte d'échantillons biologiques et le diagnostic de cancer était de 5,1 (3,0) ans (allant de 1 mois à 12 ans). Il n'y avait pas de différence significative dans l'indice de masse (kg /m ^{2) ou le niveau d'éducation entre les cas et les témoins. Les personnes qui ont développé un cancer gastrique ont consommé plus de cigarettes et de l'alcool, et étaient plus susceptibles d'être séropositifs pour les anticorps IgG à H
. pylori
que leurs témoins appariés (tableau 1).}

Les coefficients de corrélation entre les nitrates, les nitrites et les quatre CNO variaient de 0,03 à 0,70 (tableau 2). Le coefficient de corrélation la plus élevée était avec pour NPRO NTCA (r = 0,70), suivie par NPRO avec du nitrate (r = 0,50) et NTCA avec NMTCA (r = 0,48). Il n'y avait pas ou faible corrélation entre les CNO urinaires ou leurs précurseurs et les mesures anti-oxydants, y compris EGC urinaire et sérique caroténoïdes, le rétinol, les tocophérols et la vitamine C (tous les coefficients de corrélation < 0,25) (données non présentées)

Tableau 3. montre des moyens géométriques des CNO urinaires, nitrite, nitrate et chez les sujets témoins. buveurs d'alcool réguliers ont doublé leurs niveaux de urinaires NMTCA par rapport à abstinents. L'association était dose-dépendante; les moyennes géométriques de NMTCA étaient 1,70 (pg /g de créatinine) pour les non-buveurs, 3,75 pour < 2 boissons /jour et 4,21 pour ≥2 boissons /jour ( P
pour la tendance < 0,0001). Les fumeurs ou ceux positifs pour les anticorps à H
. pylori
ont été associés à la limite statistiquement élévation significative de nitrite urinaire. Il n'y avait pas de relation significative pour les autres CNO urinaires ou leurs précurseurs avec la consommation d'alcool, le tabagisme ou l'histoire de H
. infection pylori
(tableau 3). Nous avons également examiné l'association entre les fréquences d'admission de nouveaux légumes vert foncé ou les conserves et les niveaux urinaires de CNO ou de leurs précurseurs chez les sujets témoins. Haute fréquence de consommation du total conserves de viande, le poisson et les œufs combinée a été associée à des niveaux élevés de NMTCA urinaire ( P
pour la tendance = 0,032). Il n'y avait aucune association statistiquement significative entre les apports alimentaires de légumes frais /conservés, ou conserves de viande /poisson /oeufs et les niveaux urinaires de nitrite ou d'autres CNO (tableau 3).

Une forte consommation de légumes salés /marinés était inversement associée avec le niveau de nitrate urinaire d'une manière dose-dépendante ( P
pour la tendance = 0,002), alors que la consommation élevée de a été associé à une augmentation statistiquement non significative du niveau global (nitrate frais légumes vert foncé P
pour la tendance = 0,248), bien qu'il n'y avait pas de corrélation entre les fréquences de consommation de légumes frais et en conserve (r = 0,02, P
= 0,58). Nous avons examiné l'effet modificateur de légumes salés /marinés sur l'association entre la consommation de sombres vertes fraîches niveaux urinaires de nitrate et de légumes. Parmi les contrôles qui ne consomment pas salés /légumes marinés, les moyennes géométriques (IC à 95%) de nitrate urinaire pour les individus consomment < 1, 1, et 2 ou plusieurs fois /jour de frais légumes vert foncé étaient 206,0 (151,5 à 280,0) , 201,3 (144,4 à 280,5) et 523,0 (274 à 995,8) mg /g de créatinine, respectivement ( P
pour la tendance = 0,069). Parmi les contrôles qui ont consommé une ou plusieurs fois de légumes salés ou marinés par semaine, les chiffres correspondants étaient de 141,9 (110 à 181,7), 154,8 (117,9 à 203,1) et 120,0 (70,9 à 202,6) mg /g de créatinine, respectivement ( P
pour la tendance = 0,84). Il y avait une interaction statistiquement significative entre les apports de sombres légumes verts frais salés /marinés au niveau urinaire de nitrate (P pour l'interaction = 0,037) et de légumes.

Dans la population étudiée, les niveaux médians de nitrate urinaire (170 -190 mg /g de créatinine) étaient plus de 20 fois supérieurs à ceux de nitrite (7-8 mg /g de créatinine) dans les deux cas et les témoins. Parmi quatre CNO mesurés, NTCA était au plus haut niveau, suivie par NPRO et NMTCA alors NSAR était au plus bas; plus de 60% des sujets de l'étude étaient indétectables pour NSAR dans l'urine. Dans l'ensemble il n'y avait pas de différence significative dans les concentrations urinaires de nitrate, de nitrite ou d'CNO mesurées entre les patients atteints de cancer gastrique et les sujets témoins (tableau 4). Par rapport à de faibles niveaux (à savoir, indétectable ou plus bas tertile), plus haut niveau de CNO individuels ou leurs précurseurs ne sont pas associés à un risque accru de cancer gastrique chez tous les sujets après ajustement pour la consommation d'alcool, le tabagisme, H
. pylori
statut sérologique, les mesures anti-oxydantes qui comprenait EGC urinaire et sérique β-carotène et de la vitamine C (tableau 5).

Étant donné que l'infection par H
. pylori
est une cause sous-jacente du cancer gastrique, nous avons également examiné les associations entre les niveaux urinaires de nitrate, nitrite et CNO individuels et le risque de cancer gastrique séparément chez les individus positifs ou négatifs pour H
. pylori
anticorps (tableau 6). Parmi les personnes négatives à H
. pylori
, nitrate urinaire élevée était associée à un risque accru statistiquement significatif de cancer de l'estomac; les RUP multivariés ajustés (IC à 95%) pour les deuxième et troisième tertiles de nitrate étaient 3,27 (0,76 à 14,03) et 4,82 (1,05 à 22,17), respectivement, par rapport au tertile le plus bas ( P
pour la tendance = 0,042). Il n'y avait aucune preuve de modification de l'effet de H
. pylori
statut sérologique sur l'association entre le nitrite ou tout CNO et le risque de cancer de l'estomac (tableau 6). Nous avons également examiné et trouvé aucun effet modificateur du tabagisme, la consommation d'alcool, les niveaux de sérum β-carotène et de la vitamine C, et EGC urinaire sur l'association entre les CNO ou leurs précurseurs et le risque de cancer de l'estomac (données non présentées).

L'association entre les niveaux urinaires de nitrate, nitrite ou CNO et risque de cardia ou non-cardia cancer a été examiné. Dans l'ensemble aucune association statistiquement significative n'a été observée pour les CNO urinaires ou leurs précurseurs avec risque soit cardia ou d'un cancer non-cardia (données non présentées).

Discussion

Au meilleur de notre connaissance, les présente étude a été la première en utilisant une approche de biomarqueurs pour étudier l'association entre les CNO et leurs précurseurs ainsi que le risque de développer un cancer gastrique dans une étude de cohorte prospective. Nous avons observé une association positive statistiquement significative entre le nitrate urinaire et le risque de cancer de l'estomac chez les individus négatifs pour les anticorps IgG à H
. pylori
(à savoir, pas d'antécédents d'infection par H
. pylori
). En outre, des niveaux élevés de nitrites urinaires ont été associés à la séropositivité à H
. pylori
, suggérant que l'infection par H
. pylori
peut améliorer la réduction du nitrate en nitrite in vivo
. En outre, la présente étude a démontré une relation dose-dépendante roman entre la consommation d'alcool et les niveaux urinaires de NMTCA, suggérant que la consommation d'alcool pourrait jouer un rôle dans la formation des CNO in vivo
.

Infection avec H
. pylori
est un important facteur de risque pour le cancer gastrique [33]. La présence de H
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dans l'estomac provoque des dommages inflammatoires de la muqueuse de l'estomac, ce qui peut améliorer la formation endogène des CNO dans l'estomac [18, 34, 35]. Un niveau élevé de nitrite urinaire chez les individus séropositifs pour les anticorps H
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soutient cette hypothèse que H
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peut contribuer à processus de nitrosation dans l'estomac. Le rôle interactif de H
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et composés nitroso de N dans le développement du cancer gastrique nécessite une enquête plus approfondie.

Parmi les individus séronégatifs pour les anticorps IgG à H
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, les niveaux urinaires de nitrate, un précurseur de composés nitroso
N, ont été positivement associée au risque de cancer de l'estomac. L'infection chronique par H
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est un facteur de risque établi pour le cancer gastrique. Il est donc pas surprenant que l'association entre le nitrate et le risque de cancer de l'estomac était plus apparent chez les individus sans H
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infection, une population relativement faible risque. Les résultats de la présente étude suggèrent que l'effet du nitrate par la voie de nitrosation peut être masquée par H
. infection pylori
, en particulier dans la population étudiée présente où H
. infection pylori
est très répandue. Compte tenu de la petite taille de l'échantillon et de multiples problèmes de comparaison, l'interprétation des résultats de l'étude présentent une association positive entre le nitrate urinaire et le risque de cancer de l'estomac chez les personnes négatives H
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doit être faite avec prudence en raison d'une éventuelle constatation de la chance. Les futures études avec un plus grand échantillon sont nécessaires pour confirmer ces résultats.

Cette étude montre que des niveaux plus élevés de NMTCA dans l'urine des buveurs d'alcool par rapport aux non-buveurs. Des études ont montré que la co-administration de l'acétaldéhyde (un métabolite de l'éthanol), la L-cystéine et de nitrite ont augmenté significativement l'excrétion urinaire de NMTCA chez l'homme [24]. La présente étude a démontré pour la première fois chez les individus vivant en liberté que la consommation d'alcool a entraîné un accroissement considérable du NMTCA urinaire. Une forte consommation de conserves de viande (y compris le porc salé, charcuterie, saucisse et jambon), poisson salé et les oeufs conservés également été associée à des niveaux élevés de NMTCA ( P
pour la tendance = 0,03). Nos résultats sont compatibles avec le résultat d'une étude récente montrant que NMTCA ont souvent été détectés dans des produits de viande transformés [36, 37].

• PLOS ONE: Survival Abaque pour curatif réséqué coréens gastriques patients atteints de cancer: Multicenter Analyse rétrospective avec Validation
• PLOS ONE: surexpression de E2F ARNm associés à la progression du cancer gastrique identifié par le facteur de transcription et miRNA corégulation Réseau Analysis