PLOS ONE: Urinnivåer N-nitrosoföreningar i förhållande till risk för magcancer: Resultaten från Shanghai Cohort Study

Abstrakt

Bakgrund

N
-Nitroso föreningar tros spela en betydande roll i utvecklingen av magcancer. Epidemiologiska data, dock är gles i att undersöka sambandet mellan biomarkörer för exponering för N
-nitroso föreningar och risken för magcancer.

Metoder

En kapslad rätts- kontrollstudie inom en prospektiv kohort av 18,244 medelålders och äldre män i Shanghai, Kina, genomfördes för att undersöka sambandet mellan urin nivå N
-nitroso föreningar och risken för magcancer. Information om demografi, vanliga kostintag och användning av alkohol och tobak samlades in genom personliga intervjuer vid rekryteringen. Urinnivåer av nitrat, nitrit, N
-nitroso-2-methylthiazolidine-4-karboxylsyra (NMTCA), N
-nitrosoproline (NPRO), N
- nitrososarcosine (NSAR), N
-nitrosothiazolidine-4-karboxylsyra (NTCA), liksom serum H. pylori
antikroppar kvantifieras i 191 mag cancerfall och 569 individuellt matchade kontroller. Logistisk regression metod användes för att utvärdera sambandet mellan urinnivåer N
-nitroso föreningar och risken för magcancer.

Resultat

Jämfört med kontroller, hade gastric cancerpatienter övergripande jämförbara nivåer av urin nitrat, nitrit, och N
-nitroso föreningar. Bland individer seronegativa för antikroppar mot H. pylori
, förhöjda nivåer av urinnitrat var associerade med ökad risk för magcancer. De multivariata justerade oddskvoter för den andra och tredje tertiles av nitrat var 3,27 (95% konfidensintervall = 0,76 till 14,04) och 4,82 (95% konfidensintervall = 1,05 till 22,17), jämfört med den lägsta tertilen ( P Idéer för trend = 0,042). Det fanns ingen statistiskt signifikant samband mellan urinnivåer av nitrit eller N
-nitroso föreningar och risken för magcancer. Urin NMTCA nivå var signifikant samband med konsumtion av alkohol och konserverat kött och fisk livsmedel.

Slutsats

Denna studie visar att exponering för nitrat, en föregångare till N
-nitroso föreningar, kan öka risken för magcancer bland personer utan en historia av H. pylori
infektion

Citation:. Xu L, Qu Y-H, Chu X-D, Wang R, Nelson HH, Gao Y-T, et al. (2015) Urinnivåer N
-Nitroso föreningar i förhållande till risk för magcancer: Resultaten från Shanghai Cohort Study. PLoS ONE 10 (2): e0117326. doi: 10.1371 /journal.pone.0117326

Academic Redaktör: Jeffrey S. Chang, National Health Research Institutes, TAIWAN

Mottagna: 30 juli, 2014. Accepteras: 21 december 2014. Publicerad: 6 februari 2015

Copyright: © 2015 Xu et al. Detta är en öppen tillgång artikel distribueras enligt villkoren i Creative Commons Attribution License, som tillåter obegränsad användning, distribution och reproduktion i alla medier, förutsatt den ursprungliga författaren och källan kredit

datatillgänglighet: Alla relevanta uppgifter är inom pappers-

Finansiering:. Research rapporterade i denna publikation stöddes av National Cancer Institute of National Institutes of Health i tilldelningsnummer R01CA043092, R01CA129534 och R01CA144034. Innehållet är ensamt ansvarig för författare och inte nödvändigtvis representerar officiella ståndpunkter National Institutes of Health. Finansiärerna hade ingen roll i studiedesign, datainsamling och analys, beslut att publicera, eller beredning av manuskriptet

Konkurrerande intressen:.. Författarna har förklarat att inga konkurrerande intressen finns

Introduktion

Trots minskningen i förekomst och dödlighet av magcancer över hela världen under de senaste tre decennierna, är magcancer den fjärde vanligaste diagnosen cancer och den tredje vanligaste orsaken till cancerdöd [1]. Även om den nuvarande trenden i takt nedgången fortsätter kommer denna malignitet förbli en av de vanligaste cancer världen på grund av den nuvarande åldrande befolkning i områden med hög risk [2]. Utmärkande för magcancer är den anmärkningsvärda geografiska variationen i förekomst och dödlighet i hela världen. Östasien har den högsta incidensen av magsäckscancer med mer än 60 per 100.000 årsverken, betydligt högre än priserna i Nordamerika och Afrika som ligger under nio per 100.000 [3]. Den stora minskningen i incidens av magcancer bland japanska invandrare till USA i förhållande till sina motsvarigheter i Japan under de senaste decennierna tyder på att miljöfaktorer spelar en viktig roll i utvecklingen av magcancer [4]. Följaktligen skulle identifieringen av risk miljöfaktorer för magcancer informera strategier för primärprevention mot denna malignitet.

N
-Nitroso föreningar (NOCs) har visat cancerframkallande effekter i experimentella studier. Cirka 300 NOCs har testats för cancerframkallande i laboratorieförsök, med 90% av dem visar cancerframkallande effekter på olika djurarter, inklusive högre primater [5, 6]. Vissa NOCs har klassificerats som "troligen cancerframkallande för människor" av International Agency for Research on Cancer (IARC) [7]. Enligt 2010 IARC rapporten intagna nitrat eller nitrit under förhållanden som resulterar i endogen nitrosering är förmodligen cancerframkallande för människor [8]. Människor utsätts för NOCs från exogena källor och av endogen syntes. Exogena NOCs är direkt härrör från vissa typer av livsmedel, såsom bearbetat kött, saltad eller rökt fisk, och inlagd och torkade grönsaker [9]. Tillgängliga data tyder på att NOCs i livsmedel finns oftare, och vid högre koncentration, i Asien än västländer [10]. Endogena NOCs bildas från nitrosering av sekundära aminer eller amider genom N _{2O 3 och (H 2NO 2) ^{+, vilka båda är nitrit härledd nitrosering medel. Nitrit kan härleda antingen direkt från livsmedel, eller indirekt från reduktion av nitrat genom muntliga och tarmbakterier [11-14]. Endogen bildning av NOCs förmodligen katalyseras av heme järn som finns i rött kött [15, 16]. Hos människor, tar nitrosering plats i surare miljö såsom magen, särskilt när antioxidant C-vitamin är låg, än i neutral miljö [17]. Nitrosering reaktioner kan förbättras genom vissa bakterier samt under vissa inflammatoriska tillstånd, såsom oxidativ burst [18]. Cirka 45% -75% NOCs att människor utsätts för härstammar från endogen syntes [19]. Personer med hög exponering mot NOCs är en hypotes att ha en ökad risk att utveckla magcancer.}}

Epidemiologiska studier som undersökt sambandet mellan NOCs eller NOC-innehållande mat och gastric cancerrisken har gett motstridiga resultat [20]. Dessa inkonsekvenser sannolikt på grund av mätfel vid bedömningen av exponering för NOCs i de flesta, om inte alla, epidemiologiska studier samt bristen på information om kofaktorer som har inverkan på den endogena nitrosering [8]. En biomarkör metod som bedömer totala NOCs (dvs summan av både exogena och endogena källor) skulle övervinna några av dessa begränsningar och öka resultatens giltighet. I den aktuella studien, kvantifieras vi urin nivåer av nitrat och nitrit, två prekursorer av NOCs, samt N
-nitroso-2-methylthiazolidine-4-karboxylsyra (NMTCA), N
-nitrosoproline (NPRO), N
-nitrososarcosine (NSAR), och N
-nitrosothiazolidine-4-karboxylsyra (NTCA) 4 stora icke-flyktiga NOCs närvarande i humant urin [19 ]. Halveringstiden av individuella NOCs varierar från flera timmar till flera dagar. Den NPRO och NSAR utsöndras i urinen nästan oförändrad, och i proportion till den oralt administrerade dosen i råttmodell [21]. In vivo
administrering av nitrat och N
-nitrosamine prekursorer har visat hög effektivitet i produktionen av NMTCA, NTCA och NPRO [22, 23]. Således övervakning NPRO eller andra NOCs utsöndras i urinen visade sig vara ett lämpligt förfarande för att uppskatta mänsklig daglig exponering för både endogena och exogena NOCs [21, 22, 24]. Denna studie kapslade i Shanghai Cohort Study, en prospektiv kohort av 18,244 medelålders och äldre män, i Shanghai, Kina. Det primära syftet med studien var att utvärdera sambandet mellan urinnivåer NOCs och deras prekursorer och risken för magcancer. Det sekundära syftet med studien var att undersöka potentialen modifierande effekten av infektion med H
. pylori
bakterier, alkoholkonsumtion, rökning, och serum /urin antioxidant mätning på NOC-magsäckscancer förening. [25]

Material och metoder

studiepopulation

utformningen av Shanghai kohortstudie har beskrivits i detalj på annat håll [26, 27]. Kortfattat, fyra små, geografiskt avgränsade samhällen över ett stort område i staden Shanghai ut för en prospektiv, cancer epidemiologisk kohort för studium av exponering och cancer miljön. Kompletta förteckningar över alla invånare i dessa utvalda samhällen för att identifiera lämpliga testpersoner erhölls från lokala polisstationer. Urvalskriterierna var män mellan 45 och 64 år som inte hade någon historia av cancer. Mellan januari 1986 och september 1989 18,244 män (~ 80% av lämpliga testpersoner) deltog i studien. Varje deltagare intervjuades i person som använder en strukturerad enkät framkalla information om demografi, användning av alkohol och tobak, vanliga vuxen diet, och sjukdomshistoria. Vid slutförandet av intervjun, en 10-ml nonfasting blodprov och en enda void (dvs, spot) ades urinprov från varje deltagare. Blod- och urinprover togs vanligen från 5:00 till 9:00 och placeras i ett isskåp (~ 4 ° C) omedelbart efter provtagningen. Flera alikvoter av serum och urin från varje patient gjordes och lagrades vid -70 ° C. Från varje patient en 25 ml flaska av urin blandades med 100 mg natriumhydroxid (NaOH) innan den förvarades vid -70 ° C för långtidsförvaring. Alla deltagare, förutsatt att deras skriftliga samtycke till deltagande i denna studie vid inskrivning. Det medgivande till intervju och insamling av biospecimens vid baslinjen godkändes av Institutional Review Board i Shanghai Cancer Institute, Shanghai. Alla överlevande kohort deltagarna gav också sitt skriftliga medgivande att fortsätta att delta i kohortstudien under den årliga uppföljning personliga intervjuer. Samtyckesformuläret för fortsatt deltagande i denna studie godkändes av Institutional Review Boards i Shanghai Cancer Institute och University of Pittsburgh. Denna studie har godkänts av Institutional Review Boards i Shanghai Cancer Institute, University of Minnesota, och University of Pittsburgh.

Aktuell diet bedömdes genom en livsmedelsfrekvens frågeformulär som ingår 45 matvaror som representerar vanligen konsumeras lokala livsmedel i Shanghai, Kina, i början av 1980-talet. Årlig uppföljning för incident cancer och dödsfall har genomförts sedan 1986. Samtliga överlevande deltagare kontaktades personer årligen för vital status och cancerdiagnos. Vi gjorde också spela in kopplingsanalys med databaser i Shanghai Cancer Registry och Shanghai Municipal Vital Statistics. Vid utgången av 2012 var bara 609 (3,3%) ursprungliga kohort deltagarna förlorade mot vår årliga uppföljningen intervju. Dessutom, 573 (3,1%) patienter vägrade vår begäran om en årlig uppföljande intervjuer, även om deras cancer och vitalstatus har fastställts och uppdaterats genom den årliga rekord koppling analyser. var således uppföljningen för förekomsten av cancer och död bland kohort deltagarna nästan komplett. Den aktuella studien ingick 197 patienter med infallande magcancer vars initiala diagnosen gjordes mellan dagen för registrering och mars 1998. Diagnoser av 179 (91%) cancer baserades på histopatologiska bevis. De återstående 18 (9%) fall diagnostiserades baserat på röntgenföreställer med konsekvent kliniska bevis (n = 14) eller dödsattest endast (n = 4). Det fanns 45 patienter med cancer i magsäcken magmunnen och 146 vid icke-magmunnen.

För varje fall, valde vi tre kontrollpersoner slumpmässigt bland alla berättigade deltagare i kohortstudie som uppfyllde matchningskriterier. Alla tre utvalda kontroller individuellt anpassade till indexfall efter ålder (± 2 år), månad och år för biospecimen insamling, och stadsdel bosatt vid rekrytering.

laboratorieanalyser

alikvoter av urin prov av försökspersonerna dras från biospecimen förvaret och sedan sorteras in i de matchade fall-kontrolluppsättningar. Alla 4 urinprov inom ett givet matchad fall-kontroll set (dvs ett fall och 3 kontroller) arrangerades i en slumpmässig ordning och testades på samma parti för alla laboratoriemätningar. Fallet /Kontrollstatus för prov urinprov var blind för laboratoriepersonal.

NSAR, NPRO, NTCA och NMTCA analyserades med en gaskromatografi i kombination med värmeenergi analysator (GC-TEA) enligt den metod som beskrivs tidigare [22]. Kortfattat en 7,5 ml alikvot av NaOH-behandlad urin extraherades 3 gånger med 20 ml metanol-diklormetan (1: 9, volym /volym) efter tillsats av 75 ng N
-nitrosopipecolic syra (NPIC) som intern standard, 2,0 g natriumklorid (NaCl) och 1,5 ml 20% ammonium-sulfamat lösning i 1,8 M
H _{2SO4. De kombinerade extrakten torkades över vattenfritt natriumsulfat och koncentrerades till torrhet genom rotationsindunstare vid 30 ° C, och derivatiseras i 2 ml eter med överskott av diazometan (framställd med 2 g N
-Metyl- N
-Nitroso-p-toluensulfonamid, 60 ml eter, 12 ml 60% kaliumhydroxid och 12 ml metanol) .Den metylestern av fem N
-nitrosamino syror i eterlösningen koncentrerades till 0,1 ml och kvantifieras med en 10 ul alikvot av GC-TEA. För gaskromatografi, en glaskolonn (2 m x 3 mm i.d.) packad med 5% FFAP på Chromosorb WHP (80-100 mesh) användes vid en temperatur av 180 ° C. Temperaturen hos injektionsöppningen av gaskromatografi var 200 ° C, och flödeshastigheten för kvävet som bär gasen var 50 ml /min. För värmeenergianalys, temperaturen hos den pyrolysatorn var 500 ° C, gränssnittet var 200 ° C och vakuum till 0,9 mm Hg. Utbytena av NSAR, NPRO, NMTCA och NTCA sattes vid 30 ug /L vardera var 75%, 79%, 91% och 96%, respektive. Detektionsgränserna varierade från 0,1 till 0,5 | j, g /L, beroende på föreningen.}

Nitrat och nitrit analyserades i enlighet med metoden som beskrivits tidigare med viss modifikation [25]. Kadmium framställdes genom reaktion av zink med 20% kadmiumsulfat. Den ammoniumkloridbuffert lösningen justerades till pH 9,6 till 9,7. Urinprover deproteined före mätning av nitrit och nitrat utfördes. Urinprovet justerades till pH 8-9, varefter blandningen inkuberades vid 50-60 ° C under 10 min, varefter 2 ml 12% ZnSO <sub>4-lösning tillsattes och inkuberades vid 50-60 ° C under ytterligare 10 min, och ytterligare en ml 0,5 N
NaOH tillsattes innan innehållet kyldes till rumstemperatur. Efter tillsats av 17,6 ml vatten, provet passera genom filterpapper och filtratet uppsamlades efter kasta den första 10 ml filtrat. För mätning av nitrit, 5 ml 0,5% sulfanilamid och 2 ml 0,5% N
- (1-naftyl) etylendiamin-dihydroklorid tillsattes till 10 ml alikvot av filtrat som beskrivits ovan innan absorbansen för den slutliga lösningen avlästes vid 540 nm. För bestämning av nitrat, 5 ml NH 4OH-buffertlösning och 18 ml vatten tillsattes till 2 ml filtrat innan den passerade genom en Cd-kolonn vid 3-5 ml /min. Kolonnen tvättades med 15 ml vatten och den kombinerade utflöde som samlats. Efter tillsats av 5 ml 0,5% sulfanilamid och 2 ml 0,5% N- (1-naftyl) etylendiamin-dihydroklorid, absorbansen för den slutliga lösningen avlästes vid 540 nm efter att ha stått under 20 min. De slutliga koncentrationerna av nitrit och nitrat beräknades med användning av standardkurvan. För kvalitetskontroll ändamål, två partier av urinprov med tre dubbletter varje som var blinda för laboratoriepersonal skingrades bland testproverna. De inom och mellan analys variationskoefficienter för alla NOCs och deras föregångare som mättes var 4-15% och 12-33 %%, respektive.</sub>

En historia av infektion med H
. pylori
bestämdes genom detektion av serum immunglobulin G (IgG) antikroppar mot H
. pylori
användning av en enzymkopplad immunsorbentanalys (ELISA) som beskrivits tidigare [28]. Denna ELISA har utvecklats och validerats med H
. pylori
stammar som var förhärskande i studiepopulationen [28]. Metoderna för kvantifiering av antioxidanter inkluderande serum karotenoider (dvs., α-karoten, β-karoten, β-kryptoxantin, lykopen, lutein /zeaxantin, retinol, α-tokoferol, γ-tokoferol och vitamin C) och urin katekiner inklusive epigallocatchin ( EGC) beskrevs i tidigare rapporter om denna studiepopulation [29, 30].

Statistisk analys

197 fall och 591 kontroller, urinprover från 6 fall (och 18 deras matchade kontroller) och ytterligare 4 kontroller hade saknade värden på en eller flera urin mätningar. Därför ingår 191 fall och 569 matchade kontrollpersoner efter exklusive dessa patienter med saknade värden i de primära analyserna den aktuella studien. Dessutom har vi lagt till urin nitrit analys sent på studieproverna och hade värden av nitrit på 104 fall och 308 matchade endast kontroller, som alla statistiska analyser som involverar urin nitrit baserades.

Koncentrationerna av urinnitrat, nitrit och 4 NOCs uppmätta uttrycktes som ug /g kreatinin för att ta hänsyn till varierande vatteninnehåll i urin över olika individer. Fördelningarna av de koncentrationer av dessa urin analyter var markant sned med få individer som har höga värden, som var normaliserat, till stor del på grund av sin logaritmisk transformation. Därför formella statistiska tester på kontinuerliga värden av NOCs, var nitrat och nitrit som utförs på logaritmiskt transformerade värden. Spearman rank korrelationsanalys utfördes för att bedöma förhållandet mellan enskilda urin NOCs, serumantioxidanter och urin EGC. Den χ ^{2 testet användes för att jämföra fördelningarna av utvalda demografi, rökning, alkoholkonsumtion och IgG-antikroppar mot H
. pylori
mellan fall och kontroller. Analysen av kovarians metod användes för att undersöka skillnader i det geometriska medelvärdet av urin nitrat, nitrit och NOCs mellan olika nivåer av rökning, alkoholintag, eller serologiskt status hos H
. pylori
infektion, intag av färska mörkgröna grönsaker, intag av saltade /picklade grönsaker, eller intag av köttkonserver, fisk eller ägg bland endast kontrollpersoner. Wilcoxons
statistik metod användes för att bedöma skillnaden i fördelningen av urin NOCs eller deras föregångare mellan fall och kontroller.}

Villkorlig logistisk regression metod användes för att bedöma de associationer mellan nivåerna av urin NOCs, nitrat och nitrit och magcancer risk [31]. Associationerna mättes med oddskvoten (ORS) och deras motsvarande 95% konfidensintervall (KI) och P: s Idéer för trender. Försökspersoner delades in i tre nivåer (låg, mellanliggande och hög) baserat på tertilen eller hög /låg fördelningar av detekterbara urin NOCs bland alla kontrollpersoner. Den linjära trendtest för riskföreningar exponering-sjukdom baserades på ordning värden (0-2) för de tre exponeringsnivåer. Vi undersökte också NOC-gastric cancerrisk förening i undergrupper stratifierade efter cigarettrökning (eller aldrig), alkoholkonsumtion (eller aldrig), serologiskt status hos H
. pylori
(negativ eller positiv), nivåer av serumantioxidanter (nedan och lika med eller högre än medianen), eller nivå av urin EGC (nedan och lika med eller högre än median), liksom genom webbplats av magcancer (övre magmunnen och icke-magmunnen). För subgruppsanalyser var matchade uppsättningar brutna och ovillkorlig logistisk regression användes för att maximera provstorleken för stratifierat statistisk analys. Matchnings faktorer (ålder, år av biospecimen insamling, och grannskapssort vid rekrytering) inkluderades i alla ovillkorliga logistiska regressionsmodeller som variablerna. Förekomsten av H
. pylori
antikroppar i serum, rökning, tung alkoholkonsumtion, serumnivåerna av β-karoten och vitamin C, och urinnivån EGC identifierades risk /skyddsfaktorer för magcancer i denna studiepopulation [28-30 , 32]. Dessa faktorer ingick i multivariabla logistiska regressionsmodeller när man undersöker oberoende effekten av NOCs på gastric cancerrisken.

statistiska beräkningar genomfördes med hjälp av SAS version 9.2 (SAS Institute Inc., Cary, NC). Alla P '
redovisade är dubbelsidiga, och de som var mindre än 0,05 ansågs vara statistiskt signifikant.

Resultat

Den genomsnittliga åldern (standardavvikelse) av när patienter som cancerdiagnos var 63,4 (5,6) år. Den genomsnittliga tidsintervallet mellan biospecimen insamling och cancerdiagnos var 5,1 (3,0) år (från 1 månad till 12 år). Det fanns ingen signifikant skillnad i BMI (kg /m ^{2) eller utbildningsnivå mellan fall och kontroller. Individer som utvecklade magcancer konsumerade mer cigaretter och alkohol, och var mer benägna att vara seropositiva för IgG-antikroppar mot H
. pylori
än deras matchade kontroller (tabell 1).}

korrelationskoefficienter bland nitrat, nitrit och fyra NOCs varierade från 0,03 till 0,70 (tabell 2). Den högsta korrelationskoefficienten var för NPRO med NTCA (r = 0,70), följt av NPRO med nitrat (r = 0,50) och genom NTCA med NMTCA (r = 0,48). Det fanns ingen eller svag korrelation mellan urin NOCs eller deras prekursorer och antioxidant mätningar inklusive urin EGC och serum karotenoider, retinol, tokoferoler och vitamin C (alla korrelationskoefficienter < 0,25) (data visas ej) katalog

Tabell 3. visar geometriska medelvärdet av urin NOCs, nitrit och nitrat bland kontrollpersoner. Regelbundna alkoholkonsumenter fördubblade deras nivåer av urin NMTCA relativt drack. Föreningen var dosberoende; det geometriska medelvärdet av NMTCA var 1,70 (ig /g kreatinin) för icke-alkoholkonsumenter, 3,75 för < 2 drinkar /dag och 4,21 för ≥2 drycker /dag ( P
för trend < 0,0001). Rökare eller de positiva för antikroppar mot H
. pylori
associerades med statist borderline signifikant förhöjning av urin nitrit. Det fanns ingen signifikant relation för andra urin NOCs eller deras föregångare med alkoholintag, rökning eller tidigare H
. pylori
infektion (tabell 3). Vi undersökte också sambandet mellan intag frekvenser av färska mörkgröna grönsaker eller konserver och urinnivåer NOCs eller deras föregångare bland kontrollpersoner. Högt intag frekvens av den totala konserverat kött, fisk och ägg kombinerade förknippades med höga nivåer av urin NMTCA ( P
för trend = 0,032). Det fanns ingen statistiskt signifikant samband mellan intaget av färska /konserverade grönsaker, eller konserverat kött /fisk /ägg och urinnivåer av nitrit eller andra NOCs (tabell 3).

Högt intag av saltade /inlagda grönsaker var omvänt i samband med urinnitrathalten i ett dosberoende sätt ( P
för trend = 0,002), medan högt intag av färska mörkgröna grönsaker var förknippade med en statistiskt icke-signifikant ökning av nitrathalten övergripande ( P Idéer för trend = 0,248), även om det fanns något samband mellan intag frekvenser av färska och konserverade grönsaker (r = 0,02, P
= 0,58). Vi undersökte den modifierande effekten av saltade /inlagda grönsaker på sambandet mellan intag av färska mörkgröna grönsaker och urinnitrathalterna. Bland kontroller som inte konsumerar saltade /picklade grönsaker, de geometriska medel (95% CI) av urinnitrat för individer konsumerar < 1, 1, och 2 eller flera gånger /dag färska mörkgröna grönsaker var 206,0 (151,5-280,0) , 201,3 (144,4-280,5) och 523,0 (274-995,8) mg /g kreatinin, respektive ( P
för trend = 0,069). Bland kontroller som konsumerade en eller flera gånger av saltade eller inlagda grönsaker per vecka, var motsvarande siffror 141,9 (110-181,7), 154,8 (117,9-203,1) och 120,0 (70,9-202,6) mg /g kreatinin, respektive ( P Idéer för trend = 0,84). Det fanns en statistiskt signifikant interaktion mellan intag av färska mörkgröna grönsaker och saltade /picklade grönsaker på urin nivå av nitrat (P för interaktion = 0,037).

I studiepopulationen, mediannivåer urinnitrat (170 -190 mg /g kreatinin) var mer än 20 gånger större än nitrit (7-8 mg /g kreatinin) i båda fallen och kontrollerna. Bland fyra NOCs mäts NTCA var på högsta nivå, följt av NPRO och NMTCA medan NSAR var på den lägsta; mer än 60% av försökspersoner var odetekterbara för NSAR i urin. Totalt fanns det ingen signifikant skillnad i urin koncentrationer av nitrat, nitrit eller någon NOCs uppmätts mellan gastric cancerpatienter och kontrollindivider (tabell 4). Jämfört med låga nivåer (dvs. omätbara eller lägsta tertilen), högsta nivåerna av enskilda NOCs eller deras föregångare inte förknippas med ökad risk för magcancer i alla ämnen efter justering för alkoholkonsumtion, rökning, H
. pylori
serologiskt status, antioxidant mätningar som ingår urin EGC och serum β-karoten och vitamin C (Tabell 5).

Med tanke på att infektion med H
. pylori
är en bakomliggande orsak till magcancer, också undersökte vi de associationer mellan urinnivåer nitrat, nitrit och enskilda NOCs och risken för magcancer separat hos individer positiva eller negativa för H
. pylori
antikroppar (Tabell 6). Bland individer negativa till H
. pylori
antikroppar, förhöjd urinnitrat förknippades med en statistiskt signifikant ökad risk för magcancer; de multivariata justerade yttersta randområdena (95% CI) för det andra och tredje tertiles av nitrat var 3,27 (0,76 till 14,03) och 4,82 (1,05 till 22,17), jämfört med den lägsta tertilen ( P
för trend = 0,042). Det fanns inga bevis för effekt modifiering av H
. pylori
serologiska status på sambandet mellan nitrit eller någon NOCs och risken för magcancer (Tabell 6). Vi undersökte också och fann ingen modifierande effekten av cigarettrökning, alkoholkonsumtion, nivåer av serum β-karoten och vitamin C, och urin EGC om associering mellan NOCs eller deras prekursorer och risk magcancer (data visas ej).

Sambandet mellan urinnivåer av nitrat, nitrit eller NOCs och risk för magmunnen eller icke-cardia cancer undersöktes. Totalt ingen statistiskt signifikant samband sågs för urin NOCs eller deras föregångare med risk för antingen magmunnen eller icke-cardia cancer (data visas ej).

Diskussion

Så vitt vi vet är aktuella studien var den första att använda en biomarkör strategi för att undersöka sambandet mellan NOCs och deras föregångare och risken för att utveckla magcancer i en prospektiv kohortstudie. Vi observerade en statistiskt signifikant positivt samband mellan urinnitrat och magcancer risken bland individer som är negativa för IgG-antikroppar mot H
. pylori
(dvs ingen historia av infektion med H
. pylori
). Dessutom har förhöjda halter av urin nitrit i samband med seropositivitet till H
. pylori
, vilket tyder på att infektion med H
. pylori
kan öka reduktionen av nitrat till nitrit In vivo
. Vidare föreliggande studie visade en roman dosberoende förhållandet mellan alkoholkonsumtion och urinnivåer av NMTCA, vilket tyder på att alkoholintag skulle kunna spela en roll i bildandet av NOCs in vivo
.

Infektion med H
. pylori
är en stark riskfaktor för magcancer [33]. Förekomsten av H
. pylori
i magen förorsakar inflammatorisk skada på slemhinnan i magen, vilket kan öka den endogena bildningen av NOCs i magen [18, 34, 35]. En förhöjd nivå av urin nitrit i individer seropositiva för antikroppar mot H
. pylori
stöder denna hypotes som H
. pylori
kan bidra till nitrosering process i magen. Den interaktiva roll H
. pylori Mössor och N
-nitroso föreningar i utvecklingen av magcancer kräver ytterligare utredning.

Bland individer seronegativa för IgG-antikroppar mot H
. pylori
, urinnivåer nitrat, en föregångare till N
-nitroso föreningar, positivt i samband med risk för magcancer. Kronisk infektion med H
. pylori
är en etablerad riskfaktor för magcancer. Det är inte förvånande att sambandet mellan nitrat och gastric cancerrisken var tydligare bland personer utan H
. pylori
infektion, en relativt låg risk befolkning. Resultaten av denna studie tyder på att effekten av nitrat genom nitrosering vägen kan maskeras av H
. pylori
infektion, särskilt i den aktuella studien befolkning där H
. pylori
infektion är mycket utbrett. Med tanke på den lilla provstorleken och flera jämförelsefrågor, tolkning av denna studie resultaten med ett positivt samband mellan urinnitrat och magcancer risken bland personer med negativa H
. pylori
bör göras med försiktighet på grund av möjliga chans att hitta. De framtida studier med större provstorleken är motiverade att bekräfta dessa resultat.

Denna studie visar att högre nivåer av NMTCA i urinen av alkohol dricker jämfört med icke-alkoholkonsumenter. Studier har visat att samtidig administrering av acetaldehyd (en metabolit av etanol), L-cystein och nitrit signifikant ökad urinutsöndring av NMTCA hos människa [24]. Den aktuella studien visade för första gången i fritt levande individer som alkoholkonsumtionen resulterade i en signifikant ökad nivå av urin NMTCA. Högt intag av köttkonserver (inklusive saltade fläsk, chark, korv och skinka), saltad fisk och konserverade ägg var också förenad med förhöjda nivåer av NMTCA ( P
för trend = 0,03). Våra resultat var i överensstämmelse med resultatet från en nyligen genomförd studie visar att NMTCA ofta detekteras i beredda köttprodukter [36, 37].

• PLOS ONE: Survival Nomogram för kurativt opererande koreanska magcancer patienter: Multi retrospektiv analys med extern validering
• PLOS ONE: Överuttryck av E2F mRNA associerade med Gastric Cancer Progression identifierad av transkriptionsfaktor och miRNA samreglering Network Analysis