Stomach Health > Mo. Gesondheet >  > Gastric Cancer > Gastric Cancer

PLOS NËMMEN: Proteomics-Opgrond Umeldung an Analys vu Proteinen Associéierten mat Helicobacter pylori zu Gastric Cancer

Wat VerfÜgung

Helicobacter pylori VerfÜgung ( H VerfÜgung. pylori VerfÜgung) ass eng Spiralgalaxis-gebuerene Gramm-negativ Bakterie datt déi gemeinsam chronescher Ursaachen Krankheet an de Mënsch Moo. Ronn 1% -3% vun Krankheet Persounen entwéckelen gastric Kriibs. Allerdéngs, d'Mechanisme vun deenen H VerfÜgung. pylori VerfÜgung induces gastric Kriibs net komplett verstanen. Déi sinn Beweiser engem staarke Lien tëscht de virulence Faktor vun H VerfÜgung. pylori VerfÜgung, cytotoxin-verbonne Gentherapie A (CagA), an gastric Kriibs. Fir weider Markenzeeche H VerfÜgung. pylori VerfÜgung virulence, gegrënnt mir dräi Zell Linnen vun der gastric Kriibs Zell Linnen SGC-7901 an AGS Droberoderin mat cagA VerfÜgung + VerfÜgung H
. pylori VerfÜgung an transfecting SGC-7901 mat engem Vecteure der voller-Längt cagA VerfÜgung Gentherapie Droen. Mir fonnt 135 anescht ausgedréckt Proteinen vun den dräi Zell Linnen proteome Technik benotzt, an 10 Ënnerscheed Proteinen gemeinsam un den dräi Zell Strecken erausgesicht a bestëmmt LC-MS /MS souwéi duerch westlech blot ubelaangt: β-actin, L-lactate dehydrogenase (LDH), dihydrolipoamide dehydrogenase (DLD), Pré-mRNA-Veraarbechtung Faktor 19 homolog (PRPF19), ATP synthase, calmodulin (CAM), p64 CLCP, Ran-spezifesch GTPase-activating FAQ (RanGAP), P43 an calreticulin. Detektioun vum Ausdrock vun dësen Proteinen an Genen Zeechesaatz dës Proteinen am mënschleche gastric Kriibs Stoffer déi real-Zäit Hinnen alleguer (RT-qPCR) a westlech blot verroden, datt de Begrëff vun β-ACTIN VerfÜgung, LDH
, DLD VerfÜgung, PRPF19 VerfÜgung a CAM VerfÜgung Genen sech weider-reglementéiert an RanGAP VerfÜgung war verwandelt-reglementéiert gastric Kriibs Stoffer an /oder metastatic lymph Wirbelen Verglach zu Peri-kriibserreegend Stoffer. Héich Gentherapie Ausdrock war fir H VerfÜgung observéiert. pylori VerfÜgung Wonn am gastric Kriibs Stoffer. Ausserdeem, um LDH VerfÜgung, DLD VerfÜgung a CAM VerfÜgung Genen um Promoteur -2325, -1885 an -276 Siten demethylated waren, respektiv, an den RanGAP VerfÜgung Gentherapie war absolut um Promoteur methylated -570 an -170 Siten zu H VerfÜgung. pylori VerfÜgung -infected a cagA VerfÜgung -overexpressing Zellen. Dës Resultater déi nei Abléck an der molekulare pathogenesis a Behandlung Ziler fir gastric Kriibs mat H VerfÜgung. pylori VerfÜgung Wonn VerfÜgung

Fro:. Zhou J, Wang W, Xie Y, Zhao Y, Chen X, Xu W, et al. (2016) Proteomics-Opgrond Umeldung an Analys vu Proteinen Associéierten mat Helicobacter pylori VerfÜgung zu Gastric Cancer. PLoS NËMMEN 11 (1): e0146521. Doi: 10.1371 /journal.pone.0146521 VerfÜgung

Redakter: Hiromu Suzuki, Sapporo Medical University, Japan VerfÜgung

Arnaque: 15. September 2015; Akzeptéiert: 19. Dezember 2015; Publizéiert: Januar 8, 2016 VerfÜgung

Copyright: © 2016 Zhou et al. Dëst ass eng oppen Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung

Data Disponibilitéit:. All relevant Date sinn bannent de Pabeier VerfÜgung

Funding:. d'Aarbecht vun National Natural Science Foundation of China (81260303, 31560326), Guizhou Provënz Fëllement (QianJiaoHe [2014] 06) an Key Project vu Wëssenschaft an Technologie vun Guizhou ënnerstëtzt gouf Provënz (QianKeHe Sy [2011] 3067, QianKeHe J [2012] 2039). An der Originalversioun, war d'Aarbecht vun National Natural Science Foundation of China (81260303, 31560326) an Key Project vu Wëssenschaft an Technologie vun Guizhou Province (QianKeHe Sy (2011) 3067) ënnerstëtzt VerfÜgung

Wettsträit Interessen:. D' Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren. VerfÜgung

Aféierung VerfÜgung

Helicobacter pylori VerfÜgung ( H VerfÜgung. pylori VerfÜgung) Ursaachen déi gemeinsam Wonn chronescher Mo. Mënschen weltwäit. Ongeféier d'Halschent vun der Bevëlkerung an d'Welt ass mat H VerfÜgung infizéiert. pylori VerfÜgung, an der Majoritéit vun koloniséiert Persounen entwéckelen asymptomatic gastritis. Dorënner Krankheet Individuen, ongeféier 10% -20% vun Individuen entwéckelen peptic oppent Krankheeten an 1% -3% entwéckelen gastric Kriibs [1,2]. An 1994, H VerfÜgung. pylori VerfÜgung war wéi enger Zort ech fir gastric Kriibs vun der Weltgesondheetsorganisatioun an d'International Agence fir Fuerschung op Cancer carcinogen klassifizéiert. VerfÜgung

Gastric Kriibs eng vun den heefegen Zorte vun Cancers ass, a méi wéi 70% vun neie Fäll an Doudesfäll geschéien an Entwécklungslänner [3]. Obwuel d'global Heefegkeet Taux fir e puer Joerzéngten zréckgeet gouf, bleift gastric Kriibs verwandelt an deene meeschten Entwécklungslänner, dorënner Japan, Korea an China [4-6]. Am Joer 2012, uginn Chinesesch Cancer wäerten Joresrapport datt gastric Kriibs morbidity a veruerteelt ginn zweet an drëtt ënnert all malignant erhéijen, respektiv. VerfÜgung

D'Majoritéit vun H VerfÜgung. pylori VerfÜgung analyséieren droen d' cag VerfÜgung pathogenicity Insel ( cag VerfÜgung PAI), déi 27 bis 31 Genen enthält déi eng bakteriell Typ 4 secretion System (T4SS) [7] gerannt . D'cytotoxin-verbonne Gentherapie A Gentherapie ( cagA VerfÜgung), déi op der 3 "Enn vun etabléiert ass cag VerfÜgung PAI, encodes déi eenzeg bekannt bakteriell oncoprotein, CagA, déi an Provider Zellen translocated ass vun T4SS der bakteriell Uschloss un de Moo. Eemol am Provider Zellen, ass CagA tyrosine duerch Membere vun der ABL an Src kinase Famillen phosphorylated an openee mat villen intracellular effectors, Spëtzekandidat bei der Aktivatioun vun afgerappt sécher Molekülle [8]. An Medeziner Studien, cagA VerfÜgung -positive analyséieren gewiescht fir méi schwéieren gastric inflammation an ulcers konsequent Hausnummeren, an enger Ëmwandlung vun Individuen entwéckelen gastric Kriibs [9]. Allerdéngs hunn d'Mechanisme vun der Associatioun vun CagA mat Kriibs Basisdaten net opgekläert ginn. VerfÜgung

Proteomics huet wéi eng villverspriechend technologesch Plattform fir dem rationalen Identifikatioun vun biomarkers an Roman therapeutesch Ziler fir Krankheeten an d'Determinatioun vun de Basisdaten Mechanismen Gedenkminutt vun carcinogenesis [10]. Allerdéngs, hunn déi meescht vun de wichteg Proteinen vun proteomics kënschtlech nogewise net zu VIVO zu Medeziner Echantillon bestätegt gouf. VerfÜgung

DNA methylation an demethylation spillt eng wichteg Roll an der Entwécklung an Werdegang vun Cancers vun der bindend vun Transkriptiouns Faktoren Spären zu DNA an ass geschitt bal ausschliisslech an der Gentherapie Promoteur CpG Inselen [11-13]. Dorënner Organer, geet de Mo. passéieren vun Manque CpG Insel methylation, méiglecherweis H VerfÜgung. pylori VerfÜgung -mediated [14-16]. Obwuel Studie vun DNA methylation si waarden, der Gentherapie methylation Staaten vun H VerfÜgung entschlof. pylori VerfÜgung sinn nach net kloer. VerfÜgung

An dësem Wierk, mir spezifesch Proteinen ze identifizéieren anzeschätzen Zesummenhang mat H VerfÜgung. pylori VerfÜgung Wonn benotzt Komparativ proteomics an Markenzeeche vun der Gentherapie Ausdrock an CpG Insel methylation vun dësen Proteinen am gastric Kriibs Stoffer an Zellen. VerfÜgung

spontan a Methode VerfÜgung

Mënscherechter Stoffer VerfÜgung

Mënscherechter Stoffer sech aus Chirurgie uplanzen aus 30 gastric Kriibs Patiente kritt an bascht Kriibs Stoffer an metastatic lymph Wirbelen um Guiyang Medical Spidol, Guiyang China reagéiert, tëscht Januar 2009 a Juni 2010. D'Diagnosen vun zwee pathologists bestätegt goufen. Ënnert de Patienten, 23 goufen männlech, an 7 waren weiblech. D'Patienten gounge am Alter vun 38 bis 77 Joer. Twenty-zwee Patienten intestinal-Typ adenocarcinoma haten, an 8 an diffusen-Typ adenocarcinoma. D'Etude Protokoll vun der Ethik Comité vun Guiyang Medical Hospital ofgeseent gouf, an all déi Sujeten Zoustëmmung informéiert geschriwwen. VerfÜgung

Zell Kultur VerfÜgung

De Mënsch gastric carcinoma Zell Linn AGS (ATCC loosen-1739TM) an SGC-7901 Zellen sech direkt aus American Type Kultur Collection (ATCC) an Zell Bank vun Type Kultur Collection vun der chinesescher Akademie vun de Wëssenschaften (Shanghai, China) kaaft, respektiv, a fir manner wéi 3 Méint an eiser Labo der Rezeptioun passaged. Zellen sech cultured zu Roswell Park Memorial Institut (RPMI) 1640 mëttelfristeg mat 10% Hëtzt-inactivated An et Bovine serum nà 100 U /ml penicillin an 100 μg /ml streptomycin (Gibco, Grand Island, NY, USA) op 37 ° C an engem humidified incubator mat 5% CO 2. VerfÜgung

H VerfÜgung. pylori VerfÜgung Kultur VerfÜgung

H VerfÜgung. pylori VerfÜgung Deformatioun NCTC11637 (ATCC 43504, e Cadeau vun der chinesescher Center vun Helicobacter pylori VerfÜgung Deformatioun Management an erhalen, Peking, China), deen ass cagA VerfÜgung positiv, war an ausgewielte mëttelfristeg op engem Columbia Agar Plack mat 10% an et Kallef serum a H VerfÜgung ugebaut. pylori VerfÜgung Zortéiere Zousaz (Oxoid Ltd, England) bei 37 ° C ënner microaerobic Konditiounen. VerfÜgung

Zell Wonn mat H VerfÜgung. pylori

AGS an SGC-7901 Zellen (5 × 10 5) huet sech fir 24 h am 6-gutt Placke rakommen an Personal mat H VerfÜgung. pylori VerfÜgung fir 6 h an 12 h op enger multiplicities vun Wonn (mois) vun 1: 100, 1: 500 oder 1: 1000, bzw.. Zellen sech fir 12 h op enger MOI Personal vun 1: 1000 mat H VerfÜgung. pylori VerfÜgung fir 15 min den Kontrollen gekacht. VerfÜgung

Bau vun der Ausdrock Vecteure pcDNA3.1 / cagA

war DNA Quecksëlwer vun H VerfÜgung. pylori VerfÜgung, an der voller-Längt cagA VerfÜgung Haaptrei war vun Hinnen alleguer Wierderbuch a gekloonten an pMD18-T plasmids pMD18-T / cagA VerfÜgung ze bauen. D' cagA VerfÜgung Gentherapie war vun sequencing (GQ161098) identifizéiert. pMD18-T / cagA VerfÜgung war mat der Restriktioun Enzymen verdaut Pompey VerfÜgung ech an Bam VerfÜgung Salut, an cagA VerfÜgung war an pcDNA3.1 Jonglenster /Zeo (-) (Invitrogen, USA) d'eukaryotic Ausdrock Vecteure pcDNA3.1 / cagA VerfÜgung ze bauen. De Message vun der primers zu Table gëtt si 1. VerfÜgung

Zell transfection mat pcDNA3.1 / cagA

SGC-7901 Zellen fir 12 h incubated sech zu 6-gutt Placke 80% a Spuenien wär Zellen ze kréien. D'Zellen sech dann transfected laut den Hiersteller d'Uweisungen. No 48 h, goufen d'Zellen 1:10 nees nei 6-och Telleren an incubated fir eng zousätzlech 24 h ënnerdeelt an dann am selektiv zeocin-haltege (250 μg /ml) Standard mëttelfristeg fir 2 Wochen bis Klon Formatioun haten. Zellen mat eidelen Vecteure pcDNA3.1 transfected /Zeo (-) huet als Kontrollen benotzt VerfÜgung

Protein erauszéien a westlech blot VerfÜgung

Protein dovu vun resuspending Zell Pellets zu engem Ripa bereet waren gefiermt oder 200 homogenizing. mg Stoffer an enger Ripa gefiermt. Eng total vun 30-50 μg vun FAQ Extrait war bis SDS-PAGE gelies electrophoresis ënnerworf, iwwerginn zu engem polyvinylidene difluoride (PVDF) Membran (Millipore, Billerica, MA, USA) an Nuecht mat Maus monoclonal anti-CagA antibody (1 blotted: 800, sc-28368), Maus monoclonal anti-phosphotyrosine antibody (PY99, 1: 300, sc-7020), Kanéngchen polyclonal anti-Beta actin antibody (1: 500, ab189073), Kanéngchen polyclonal anti-LDH antibody (1: 350 , ab125683), Maus monoclonal anti-DLD (1: 800, sc-376890), Kanéngchen polyclonal anti-PRPF19 (1: 400, ab27692), Maus monoclonal anti-ATP synthase antibody (1: 300, ab54880), Kanéngchen polyclonal anti -calmodulin anbody (1: 250, ab208911), Kanéngchen polyclonal anti-RanGAP antibody (1: 200, ab92360), Kanéngchen polyclonal anti-p64CLCP antibody (1: 300, ab28722), Kanéngchen polyclonal anti-calreticulin antibody (1: 350, ab4) a Maus monoclonal anti-glyceraldehyde-3-phosphate -dehydrogenase antibody (GAPDH, 1: 8.000) vu Santa Cruz (CA, USA), Abcam (Cambridge, UK) an CangChen (Shanghai, China), respektiv, vun 5% BSA zu Tris-gefiermt Salins a 0,01% Tween-20. Peroxidase-conjugated Secondaire antibodies (1: 5000, SC-2371, Santa Cruz, CA, USA) sech agesat a mat der chemiluminescence reagent ECL entwéckelt Plus hyperfilm benotzt (Amersham Biosciences, Buckinghamshire, UK). Quantification vun der westlecher blots war benotzen ech sinn One Software gesuergt. All Experimenter war 3 mol gesuergt, an engem Vertrieder Resultat gewise gëtt. VerfÜgung

Protein erauszéien an zwee-Dimensiounen gelies electrophoresis VerfÜgung

Zell Pellets sech zu Zell lysis gefiermt opgeléist Nuecht op 4 ° C, an FAQ war mat dräi Bänn vun fir 2 h duerch incubating bei 4 ° C Äis-kal acetone Preisen. D'Echantillon waren duerno fir 30 min bei 20.000 Ziichter centrifuged, an d'Pellets sech zu Zell lysis gefiermt an gespäichert bei 4 ° C Iwwernuechtung resuspended. VerfÜgung

Eng total vun 800 μg vun FAQ fir e Volume vun 250 μL ugepasst gouf mat abordablel Léisung, an isoelectric Fredi (IEF) war mat engem Ettan IPGphor II isoelectric donieft System (Amersham Biosciences) standing no der Taktik vum Produzent. De Protokoll fir IEF war 300 V for1 h, 500 V fir 2,5 h, 1.000 V fir 2 h; 8.000 V fir 8 h, 60 kVh (total). VerfÜgung

No IEF färdeg, déi IPG Strips (Amersham Biosciences) ware fir 15 min an equilibration gefiermt equilibrated a fir Two op enger 12% SDS-PAGE gelies gesat Dimensiounen electrophoresis um 30 MA /gelies. Déi doraus resultéierend SDS-PAGE gelies war fir 30 min an 20% TCA fix an duerno mat colloidal Coomassie G-250 Kierchefënster [5]. VerfÜgung

d'FAQ Flecken op der gelies huet automatesch gescannt an analyséiert. Differentially ausgedréckt FAQ Flecken sech mat Imaging Master 2D 5.0 ​​analytesch Software (Amersham Biosciences) confirméiert. Student an d'T-Test ass fir d'grouss Analyse vun der 2D gels gesuergt. Ënnerscheed Ausdrock vun enger bestëmmter FAQ war als ≥2-fantastesch Verännerung Plaz optesch Dicht tëschent den zwou reagéiert baut zu Retard definéiert. Den Ënnerscheed Flecken sech dann aus der SDS-PAGE gels fir weider Identifikatioun vum LC-MS /MS excised. VerfÜgung

RNS erauszéien a grouss RT-Hinnen alleguer VerfÜgung

Total RNS war aus 50 mg vun Otemschwieregkeeten ofgebaut a mat DNase ech (RNase-gratis) traitéiert. D'Genen huet mat SYBR Green (Obwuel Biosystems, Australien) Kick. Hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase ( HPRT VerfÜgung) war als normalization Kontroll, a relativ mRNA Niveauen sech berechent vun engem Komparativ C t Method benotzt Step-een Software (Obwuel Biosystems, Australien) [8] benotzt. All Prouf war zu triplicate assayed, an d'Resultater sinn, wéi d'mengen ± Fils ausgedréckt. D'primers benotzt ginn awer zu Table 1. VerfÜgung

DNA erauszéien a methylation Analyse vun CpG Inselen VerfÜgung

DNA war vun Zellen isoléiert a modifizéiert mat Natrium bisulfite mat engem EZ DNA Methylation-Gold Kit ™ (Zymo Fuerschung, CA, USA) laut den Hiersteller d'Uweisungen. Promoter CpG Insele mat Duerch Primer Express Software virausgesot an Implikatioune vun bisulfite-geännert DNA vun Hinnen alleguer de folgenden Prozeduren benotzt: denaturing bei 96 ° C fir 10 min, gefollegt vun 40 Zykle vun den 40 sec op 94 ° C denaturing, annealing um 60 ° C fir 40 sec, an elongation bei 72 ° C fir 40 sec, mat engem Finale Extensioun bei 72 ° C fir 10 min. Implikatioune Hinnen alleguer Produite sech an pMD19-T vectors gekloonten an Nepgen. Ausserdeem war DNA aus entholl Stoffer isoléiert benotzt z'entdecken H VerfÜgung. pylori VerfÜgung 16S rRNA VerfÜgung Gentherapie a cagA VerfÜgung Gentherapie. D'primer Message sinn an Table opgezielt 2. VerfÜgung

statistique Analyse VerfÜgung

Resultater sinn als Mëttel ± Fils ausgedréckt. Statistique analyséiert goufen benotzt SPSS 15,0 Software gesuergt. One-Manéier Analyse vun Varianz (ANOVA) an Student d'T-Test huet benotzt den Daten ze analyséieren. P VerfÜgung &Si besteet;. 0,05 (two-eesäitegen) huet däitlech als VerfÜgung

Resultater VerfÜgung

Aféierung vun CagA an gastric Kriibs Zellen VerfÜgung

Well CagA vun H VerfÜgung. pylori VerfÜgung enger kritescher virulence Faktor vun der Entwécklung an Werdegang vun gastric Kriibs ass, war CagA zu gastric Kriibs Zell Linnen vun RT-Hinnen alleguer a westlech blot an der Wonn vun SGC-7901 an AGS Zellen mat H fonnt VerfÜgung. pylori VerfÜgung an transfection vun SGC-7901 Zellen mat cagA VerfÜgung -vector. D'CagA FAQ ugefaang bei engem Verhältnis vun Zellen ze Bakterien vun 1 bis dohinner: 500 zu cultured Zellen op 6 h, an den Inhalt war héchste bei engem Verhältnis vun 1: 1000 um 6 Auer (Lalumi 1A an 1B). 500 No culturing fir 12 h, an der héchster stong an Zellen bei engem Verhältnis vun 1 observéiert:: Ee, phosphorylated CagA war vun Zellen bei engem Verhältnis vun 1 observéiert 1000 no 6 h vu Kultur. CagA mRNA an FAQ goufen observéiert och zu stably cagA VerfÜgung -overexpressing SGC-7901 Zellen (Lalumi 1c an 1D). Dës Donnéeë hindeit, datt CagA erfollegräich an der dräi agefouert gouf Zell Linnen an phosphorylated. VerfÜgung

Umeldung vun Ënnerscheed Proteinen am gastric Kriibs Zellen VerfÜgung

No Zellen infizéierte mat H VerfÜgung. pylori VerfÜgung fir 6 h op enger MOI vun 1: 1000 oder transfected mat cagA VerfÜgung -vector, engem proteomic gehaen war sechs zwee-Dimensiounen electrophoresis (2-dE) zu Kaarten aus den dräi Zell Linnen an hir jeeweileg Kontrollen (Lalumi 2), an 135 Ënnerscheed Flecken goufen erwëscht, vun deenen 73 waren an-reglementéiert an 62 goufen verwandelt-reegelen. Zéng Ënnerscheed Flecken gemeinsam un all dräi Zell Linnen waren bestëmmt LC- MS /MS an déi westlech blot ubelaangt, dorënner 6 weider-reegelen Proteinen: β-actin, LDH, DLD, PRPF19, ATP synthase an calmodulin (CAM), a 4 verwandelt-reegelen Proteinen wéi RanGAP, p64 CLCP, P43 an calreticulin (Table 3 an Lalumi 3A). VerfÜgung

H VerfÜgung. pylori VerfÜgung Wonn ënnerstëtzt d'Expressioun vun Ënnerscheed Proteinen am gastric Kriibs Stoffer VerfÜgung

Well H VerfÜgung. pylori VerfÜgung selektiv de Mënsch Mo. bewunnt engem Set vu agebousst Prozesser, der Gentherapie Ausdrock vun 10 Ënnerscheed Proteinen zu 30 Mënsch gastric Kriibs Echantillon gouf duerch grouss RT-Hinnen alleguer bewäert ze aktivéieren. Vun der 10 Genen, den Ausdrock vun β-ACTIN VerfÜgung, LDH VerfÜgung, DLD VerfÜgung, PRP19 VerfÜgung a CAM VerfÜgung zu gastric Cancers an /oder metastatic lymph Wirbelen sech weider-reegelen Verglach zu Peri-kriibserreegend Stoffer, wobäi d'Expressioun vun RanGAP VerfÜgung war verwandelt-reegelen. Similarily, waren der 6 Proteinen och abnormal an der selwechter Stoffer (Lalumi 3B an 3C) ausgedréckt. Keng Differenze vun der Expressioun vun der aner Genen goufen observéiert. VerfÜgung

H VerfÜgung. pylori VerfÜgung Kolonisatioun am Stoffer gastric Kriibs gemooss gouf vun der 16S fonnt rRNA VerfÜgung Gentherapie a cagA VerfÜgung Gentherapie vun H VerfÜgung. pylori VerfÜgung vun Hinnen alleguer. H VerfÜgung. pylori VerfÜgung war präsent an 20 vun den 30 Echantillonen (positiven Taux 67%), an all vun H VerfÜgung. pylori VerfÜgung analyséieren sinn cagA VerfÜgung positiv. D'mRNA Niveau vun β-ACTIN VerfÜgung, LDH VerfÜgung, DLD VerfÜgung, PRP19 an CAM VerfÜgung zu héich waren H VerfÜgung. pylori VerfÜgung -positive Stoffer wéi an der negativer Echantillon (Lalumi 3D). VerfÜgung

H VerfÜgung. pylori VerfÜgung induces aberrant DNA methylation zu gastric Kriibs Zellen VerfÜgung

An dräi Zell Linnen, Hinnen alleguer Produite vun der CpG Inselen vun der uewen Genen huet folgend bisulfite Behandlung an Nepgen erfollegräich chrétienne. An dës Genen, LDH VerfÜgung, DLD VerfÜgung a zu CAM Genen sech um Promoteur demethylated -2325, -1885 an -276 Siten, respektiv, an den RanGAP VerfÜgung Gentherapie war absolut um Promoteur methylated -570 an -170 Siten (Lalumi 4). VerfÜgung

Diskussioun VerfÜgung

Accumulative Beweiser datt H VerfÜgung. pylori VerfÜgung Wonn ass e wichtege Faktor fir H VerfÜgung. pylori VerfÜgung -associated gastric Krankheeten an datt CagA ass eng Promotioun Faktor fir gastric Kriibs [17,18]. Mir gebaut dräi experimentell Zell Linnen, dorënner zwee gastric Kriibs Zell Linnen Krankheet mat H VerfÜgung. pylori VerfÜgung ( cagA VerfÜgung +) an engem gastric Kriibs Zell Linn overexpressing cagA VerfÜgung, an alles dat CagA vun Zellen 6 h der Wonn ze erschéngen ugefaangen a fir bis 12 h. Duerno, ugefaang phosphorylated CagA ze erschéngen, konsequent mat der Sprëtz a Kierzunge phosphorylation vun CagA an gastric epithelial Zellen vun der T4SS vun H VerfÜgung. pylori VerfÜgung der Wonn vun der mënschlecher gastric mucosa. Phosphorylated CagA activéiert afgerappt sécher Weeër a spillt eng agebousst Roll. Mir gesinn och CagA vun Zellen stably transfected mat der cagA VerfÜgung -vector. Dës Donnéeë confirméiert de Succès Bau vun der dräi experimentell Zell Linnen. VerfÜgung

Proteomics benotzt gouf d'Relatioun tëschent H VerfÜgung ze studéieren. pylori VerfÜgung Wonn an gastric Krankheeten, a vill differentially ausdrécklëch Proteinen identifizéiert [19-22]. Allerdéngs bleiwen d'Associatioun vun dësen Proteinen mat CagA an hiren Ausdrock vun mënschlecher gastric Kriibs Stoffer onkloer. Mir kréien am Ganzen 135 Ënnerscheed Flecken aus der dräi Zell Zeilen, vun deenen 73 waren an-reglementéiert an 62 goufen verwandelt-reegelen. Zéng Ënnerscheed Flecken sech gemeinsam fir all dräi Zell Linnen, dorënner 6 weider-reegelen Proteinen (β-actin, LDH, DLD, PRP19, ATP synthase, an CAM) an 4 verwandelt-reegelen Proteinen (p64 CLCP, RanGAP, P43 an calreticulin) , an den Ausdrock "10 Proteinen sech duerch westlech blot an dës Zell Linnen ubelaangt. Dës Proteinen sinn an Energie ukuerbelt, Skelett Emplazéiren Équipe, Pré-mRNA Veraarbechtung, Signal transduction, an anere Proteinen enk mat der Entwécklung an Werdegang vun villen Mënsch Cancers verbonne [23,24]. Mir fonnt quantitativ den Ausdrock vun de Genen dës 10 Proteinen am mënschleche gastric Kriibs Stoffer Zeechesaatz, déi Teamchef β-ACTIN VerfÜgung, LDH VerfÜgung, DLD VerfÜgung, PRP19 VerfÜgung a CAM VerfÜgung sech konsequent héich ausgedréckt an RanGAP VerfÜgung war schlecht an zwee Kriibs Stoffer an /oder metastatic lymph Wirbelen Verglach zu Peri-kriibserreegend Otemschwieregkeeten ausgedréckt. D'aberrant Ausdrock vun dësen Proteinen war och déi westlech blot an gastric Kriibs an metastatic lymph Wirbelen ubelaangt. Next, fonnt mir dass cagA VerfÜgung + H VerfÜgung. pylori VerfÜgung an 20 vun 30 gastric Kriibs Stoffer koloniséiert a gefördert oder inhibited den Ausdrock vun dësen Genen vun VIVO. VerfÜgung

LDH an DLD suivéiere mat Energie ukuerbelt soll. Stéierungen vun Energie ukuerbelt ass e wichtege Facteur fir d'Entwécklung an de Werdegang vun Kriibs considéréiert. Am Géigesaz zum normalen Zellen, fräi Kriibs Zellen Collectioun Ofhängegkeet op der glycolytic Passerelle mat genuch Sauerstoff, Limburg aerobic glycolysis. Eng grouss Quantitéit vun pyruvic Seier, eng final Produit vun der Passerelle, ass zu lactic Seier vun LDH Euroen, déi glycolytic Passerelle an Energie ukuerbelt Desequiliber Spur [25]. Lactic Seier kann och de pH vun der Zell microenvironment erofgoen, also neovascular Äntwert ze angiogenesis Faktoren waarden ze entholl Zell Metastasen [26,27] förderen. Konsequent mat eis Resultater, LDH VerfÜgung héich war zu Kriibs Stoffer an 61,8% vun de Patienten mat gastric Kriibs ausgedréckt; Patienten mat LDH overexpression hat kuerz Iwwerliewe Verglach zu Patiente mat niddereg Ausdrock [28]. Kim et al VerfÜgung. [29] observéiert dass DLD VerfÜgung Ausdrock mat entholl Werdegang Majoratiounen, also méi Energie fir entholl Zell Wuesstem ëmzesetzen. Dofir, héich Ausdrock vun LDH an DLD ass e wichtege Facteur fir d'Entwécklung an de Werdegang vun gastric Kriibs, a H VerfÜgung. pylori VerfÜgung Wonn ënnerstëtzt d'Expressioun vun dësen zwou Genen vun gastric Kriibs Stoffer. VerfÜgung

Beta-actin, e Schlësselelement vun der cytoskeleton, ënnerhält d'Struktur, Eegebewegung an der Divisioun vun Zellen ënner normalen Zoustand. β-ACTIN VerfÜgung ass abnormal zu vill Krankheeten ausgedréckt [30]. D'PRPF19 FAQ ass am Précoce-mRNA splicing zu Funktioun gegleeft. Ubiquitination vun PRPF19 kéint zu DNA Schued nodeems an Manque DNA gefléckt ass eng wichteg Ursaach vun tumorigenesis [31]. Calmodulin ass eng Kalzium-verbindlech FAQ datt vill sécher Weeër an domat participéiert Zell Prolifératioun, mitosis an der Gentherapie Transkriptiouns reguléieren. Calmodulin ënnerstëtzt Zell Verbreedung zu Liewer carcinomas a Kombinatioun mat PI3K an den Iwwergank vum G1 bis S Phase an Kombinatioun mat cyclin E [32]. An inhibitor vun calmodulin Verhaftungen Zellen an G1 Phase Zell Divisioun ze inhibit [33]. Konsequent mat deene Resultater, alles mir dass H VerfÜgung. pylori VerfÜgung kann duerch Pinguin déi héich Ausdrock vun dësen dräi Proteinen. VerfÜgung

Zousätzlech, mir observéiert verwandelt-Regulatioun vun de RanGAP VerfÜgung Gentherapie zu Kriibs Entwécklung vun gastric Stoffer Bedeelegung Kriibs Stoffer mat H VerfÜgung. pylori VerfÜgung Wonn. RanGAP ass eng GTPase-activating FAQ. No hydrolysis vun GTP zu PIB vun engem GTPase, lo aktiv RanGTP Aarbechtslosegkeet RanGDP, fir d'Blockade vun Zell Virwaat sécher Kriibs Werdegang [34] zu inhibit. Den Zerfall, Verréngerung vun ubiquitination entschlof RanGAP Aktivitéit Kriibs Entwécklung ënnerstëtzt [35]. VerfÜgung

DNA methylation Manque Gentherapie Ausdrock induce kann. H VerfÜgung. pylori VerfÜgung Wonn erhéigt de methylation Niveau vun e puer Genen an Resultater am carcinogenesis vun der gastric mucosa [36,37]. DNA methylation schéngt normalerweis an der CpG Inselen vun der Gentherapie Promoteuren. Mir fonnt der methylation Status vun der CpG Inselen vun dësen Genen vun der Plangsprooch Zell Linnen a sech, datt déi LDH VerfÜgung, DLD VerfÜgung a CAM VerfÜgung Genen um Promoteur demethylated sech -2325, -1885 an -276 Siten, respektiv, an den war RanGAP VerfÜgung Gentherapie um Promoteur -570 an -170 Siten, konsequent mat der héich Ausdrock vun der LDH VerfÜgung héich methylated, DLD VerfÜgung a CAM VerfÜgung Genen an der niddereg Ausdrock vun der RanGAP VerfÜgung Gentherapie zu gastric Kriibs Stoffer mat cagA VerfÜgung + H VerfÜgung. pylori VerfÜgung Wonn. VerfÜgung

An Conclusioun, proposéiere dës Resultater dass H VerfÜgung. pylori VerfÜgung Wonn, via CagA br, kann de aberrant methylation vun dësen Genen induce bis geschwënn Gentherapie Ausdrock vun gastric Kriibs Stoffer an Zellen ze féieren. Eis Resultater bidden engem neie Versteesdemech vun der molekulare pathogenesis vun gastric Kriibs mat H VerfÜgung. pylori VerfÜgung Wonn. Zukunft Studie wäert d'Auswierkunge vun dëse verännert methylation Musteren op der pathogenesis vun gastric Kriibs zu Medeziner Echantillon entdecken. VerfÜgung

Arbeschterlidder VerfÜgung

Mir soen der chinesescher Center vun Helicobacter pylori VerfÜgung Deformatioun Management an Erhalen fir déi H VerfÜgung. pylori VerfÜgung NCTC11637 an Dr Yang Wenxiu an Wu Jiahong fir technesch Assistenz. VerfÜgung

Other Languages