Aféierung VerfÜgung
LDH-A, d'Aktivitéit responsabel fir pyruvate an lactate transforméiert, gouf zu vill Zorte vu Kriibs up-reegelen Gewise ginn an d'Lut ginn, fir méi aggressiv Behuele vun Prolifératioun an Anti-apoptosis Regulatioun. Allerdéngs huet säin Ausdrock vun gastric Kriibs (GC) net grëndlech charakteriséiert ginn. Den Zweck vun dëser Etude war den Ausdrock an potentiellen Impakt vun LDH-A am GC ze klären. VerfÜgung
Method VerfÜgung
Mir LDH-A Ausdrock vun immunohistochemistry op GC Otemschwieregkeeten microarray (TMA) iwwerpréift a mat Western blot op frësch GC Stoffer an Zell Linnen. Prognostic Wäert an Korrelatioun mat anere clinicopathologic Facteure sech bewäert. Mir transfected siRNA an GC Zellen géint LDH-E. LDH-E gouf vum Western blotting an real-Zäit RT-Hinnen alleguer analyséiert. Zell Wuesstem war kënschtlech an VIVO bewäert. Lactate a ATP Produktioun vun Zellen huet alles. VerfÜgung
Resultater VerfÜgung
Et war vill méi héich LDH-A Ausdrock vun carcinoma wéi an Net-neoplastic mucosa (NNM). Et war e positive Korrelatioun vun LDH-A Ausdrock mam Alter, histological Typ an Lymph Node Investitiounen. Survival Analyse bewisen, datt héich Ausdrock vun LDH-A am GC war mat manner globale Iwwerliewe (OS) assoziéiert. Wann déi Lauren Schouljoer an histological Klassifikatioun stratified, wossten Bedeitung vun diffusen Typ an Strenz Typ GC. An multivariate Analyse, d'LDH-A Ausdrock am GC war eng onofhängeg prognostic Risk Faktor fir OS (iwwerschloen Verhältnis = 1,829, 95% CI 1.375-2.433, P &Si besteet; 0.0001). Spezifësch siRNA géint LDH-A am GC Zell Linn gutt Zell Wuesstem souwuel eng kënschtlech an Maus Modeller. LDH-A knockdown och lactate a ATP Produktioun vun GC Zellen reduzéiert. VerfÜgung
Konklusiounen VerfÜgung
Eis studéieren der oncogenic Roll vun LDH-A am GC uginn. LDH-A Ausdrock ass eng onofhängeg prognostic Risk Faktor am GC Patienten a weider-reegelen Ausdrock vun LDH-A kéint an diffusen Typ an Strenz Typ GC predictive vun aarme Resultater ginn. Eis Resultater ugeholl datt LDH-A vläicht e Potential therapeutesch Zilscheif vun gastric Kriibs ginn VerfÜgung
Fro:. Sun X, Sonn Z, Zhu Z, Guan H, Zhang J, Zhang Y, et al. (2014) Clinicopathological Grousses an Prognostic Wäertbestännegkeet vun Lactate Dehydrogenase A Expression zu Gastric Cancer kennen. PLoS NËMMEN 9 (3): e91068. Doi: 10.1371 /journal.pone.0091068 VerfÜgung
Redakter: Anthony W.I. Lo, D'Chinese Universitéit vun Hong Kong, Hong Kong VerfÜgung
Arnaque: 12 August, 2013; Akzeptéiert: 7 Februar 2014; Publizéiert: Mäerz 7, 2014 VerfÜgung
Copyright: © 2014 Sonn et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung
Funding:. Dës Etude war déi Subventioune vun der Fuerschung Projeten an Liaoning Province Wëssenschaft an Technologie Pompjeeën (Nr 2007225017, Nr 2009225011-2 an Nr 2011415052) a Wëssenschaft an Technologie Projeten an Shenyang City (Nr F11-264-1-19) ënnerstëtzt. D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung
Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung
d'metabolic Eegeschafte vun Kriibs Zellen Aufsatz vill vun deene vun normalen Zellen, Kriips Zellen zéien glycolysis amplaz Kënschtlech oxidative phosphorylation kritiséiert och an der Präsenz vun Sauerstoff; dëst Phänomen ass och d'Warburg Effekt [1], [2], [3] bekannt. Der verwonnerlech héich Taux vun Zocker an lactate Produktioun an erhéijen an der Präsenz vun Sauerstoff gefouert Warburg ophëlt ze spekuléieren, datt aberrant ukuerbelt Erhalt vun villen Cancers ginn [2]. de Virdeel vun der metabolic Transformatioun jidferengem zu Kriibs Zellen Allerdéngs bleift ongeklärten [4], [5]. Viru Kuerzem, huet zu enger domat vun Interessi gefouert der Entdeckung vun der Verbindung tëscht oncogenes an metabolic Prozesser an Warburg d'Aarbecht. Et gëtt ëmmer méi evident, dass d'adaption vun aerobic glycolysis duerch Kriibs Zellen kéint Kriibs Prolifératioun [5] vereinfachen. Cancer ukuerbelt huet an der Hoffnung vun entdecken nei efficace Therapien fir Kriibs ënner extensiv Weltraum ginn. VerfÜgung
LDH-A, ass eng wichteg Aktivitéit déi eng wichteg Roll an der Finale vun der Warburg Effekt spillt vun pyruvate Ëmrechnung zu lactate . An verschidden Zorte vu mënschlechen Cancers, war den Ausdrock vun LDH-A weider-reegelen [6], [7]. An esophageal squamous Zell carcinoma, war LDH-A zu Kriibs Stoffer-up reglementéiert an ënnerstëtzt d'Iwwerliewe vun entholl Zellen [8]. Ausserdeem, LDH-E gouf confirméiert de Wuesstem a Migratioun vun gastric Kriibs Zellen [9] ze verbesseren. Allerdéngs bleiwen d'Ausdrock Status an d'Funktioun vun LDH-A am gastric Kriibs (GC) nach onbekannt. VerfÜgung
An dëser Etude, mir den Ausdrock vun LDH-A vun enger grousser Kohort vun GC uplanzen iwwerpréift a soll seng Ausdrock mat Medeziner agebousst Parameteren a Punkto Iwwerliewe (OS). Eis Resultater weisen, dass den Ausdrock vun LDH-E gouf an de Medeziner gastric Kriibs Echantillon weider-reegelen, an FAQ Ausdrock war bis Alter an histological Klassifikatioun soll. Ausserdeem hunn mir déi héich LDH-A Ausdrock mat verschlechtert hätt am GC Patienten verbonne war. Geholl zesummen, eiser Etude réischt de oncogenic Funktioun vun LDH-A am gastric Kriibs a proposéiert LDH-A wéi engem neien potentiellen prognostic Faktor an e Potential therapeutesch viséieren. VerfÜgung
kennen
déi heiteg Etude och 264 Patienten mat GC déi curative Agrëff vu Januar 2006 bis Mee 2007 an der éischt laizistesch Spidol vu China Medical University gefollegt. De Grupp huet sech zesummegesat aus 194 Männercher an 70 Weibercher mat engem mëttleren Alter vun 59 (Rei, 29-81) Joer. Keen vun de Patienten mécht Chimiotherapie oder radiotherapy virum Agrëff. Follow-up Informatiounen schonn aus all Patienten gesammelt. VerfÜgung
IFLA- breakpoint VerfÜgung
ethneschen Accord fir dës Fuerschung war vun der Fuerschung IFLA- Comité vun China Medical University, China kritt. All Patienten entholl Otemschwieregkeeten souwéi normal gastric Otemschwieregkeeten Echantillonen, déi ënnerschriwwen enger Erlaabnes Form virun chirurgesch Entfernung vun der gastric carcinoma ze erlaben fir dës Fuerschung land ze ginn. All vum Déier Etude Prozedure goufen am Aklang mat der National Instituter Gesondheetsminister Guide fir d'Fleeg an Uwendung vun schafft Déieren a goufen no der institutioneller ethesch Normen gesuergt. (: SCXK [Hu] 2003-0003 och als Shanghai Frankräich, Zertifikat Zuel bekannt) Dës Labo Déieren sech vu Shanghai Branch Center, Institut vun schafft Déieren Science, Chinese Academy vun Medical Science kaaft. All experimentell Prozedure goufen an Konformitéit mat institutionell Richtlinne fir d'Betreiung a Gebrauch vun Labo Déieren gehaal, an Ëmwelt- vun de Finanzpolitiker Déieren Care an Benotzt Comité an China Medical University, Shenyang, China guttgeheescht huet. All Effort'en gemaach Leed ze minimiséieren. VerfÜgung
Ray Echantillonen an wirklech VerfÜgung
All Patient-ofgeleet paraffin Gastric Kriibs uplanzen Ënnerbewosstsinn (n = 264) an hir gepasst NNM uplanzen (2 cm ewech vun der carcinoma n = 209) waren aus chirurgesch resection gesammelt an archivéiert ënner vun de Finanzpolitiker Kritik Vizepresident vun der éischt laizistesch Hospital China Medical University guttgeheescht Ëmwelt-. Frësch gastric carcinoma an bascht NNM sech zu -80 ° C bis FAQ Reduktioun vun homogenization zu Ripa lysis gefiermt gesammelt an gefruer. D'histologic Diagnos an aner microscopic Charakteristiken huet fir all gastric carcinoma vun pathologists an der TNM Stadium bestätegt gouf no der Unioun International neier le Cancer (UICC) System fir d'Ausmooss vun entholl verbreet bewäert. Histologic Architektur vun gastric carcinoma war zu Lauren d'Klassifikatioun an der Weltgesondheetsorganisatioun (DÉI) Klassifikatioun ausgedréckt. Ausserdeem, entholl Gréisst, Déift vun Invasioun, an lymphatic huet alles. VerfÜgung
Zell zesummeféieren a Kultur VerfÜgung
De Mënsch Zell gastric Kriibs Linnen MKN28 (och ënnerscheet), AGS, SGC-7901 (mëttelméisseg ënnerscheet ), MGC803 (schlecht ënnerscheet) an de Mënsch normal gastric Zell Linn GES-1 aus der Zell Bank vun Chinese Akademie vun de Wëssenschaften kaaft. Fënnef Zell Strecken haten an RPMI 1640 (Hyclone, Logan Stad, USA) ergänzt mat 10% An et Bovine serum (FBS). All d'Zell Linnen goufen zu enger 5% CO 2 humidified Ambiance bei 37 ° C. VerfÜgung Ray Microarray (TMA) an Immunohistochemistry VerfÜgung Vertriederin Beräicher staark erhéijen an bascht NNM identifizéiert sech an hIEN-Kierchefënster Rubriken vun der gewielter Fäll an enger 1,5-mm-Duerchmiesser Otemschwieregkeeten Kär pro Donateur Spär gouf ausgepöppelt a mat engem Maximum vun 200 un engem dru Spär transferéiert (10 × 20) Placken eng 1,5-mm Duerchmiesser léiren Instrument benotzt. Nodeems du-einfach, Rubriken (4 μm-décke) aus all Otemschwieregkeeten microarray Spär Géigewier noeneen huet, staining hien op TMA fir Confirmatioun vun entholl an mucosa Otemschwieregkeeten gesuergt. Immunohistochemical Analyse op TMA Rubriken gesuergt huet, Pressure Buschtawenzopp mediated antigen retrieval war zu citrate Prellbock (pH 6.0) fir 10 min gesuergt. Sektiounen sech mat 1:300 dilution vun LDH-A (Fleesch subunit) Kanengchen Monoclonal Antibody (epitomics) Iwwernuechtung bei 4 ° C, incubated an duerno mat Geess anti-Maus oder anti-Kanéngchen Stellt System Plus-HRP (Dako Cytomation) incubated fir 30 min bei Raumtemperatur. No falsch dräi Mol am PBS fir 10 min all, huet de Rubriken mat botzt incubated fir 1 min, counterstained mat Mayer hematoxylin, léif, geraumt an Descher. Ënnerlooss vun der Primärschoul antibody war als negativ Kontroll benotzt. VerfÜgung Western Blot Analys VerfÜgung Proteinen Konzentratioune vun Echantillon vun Otemschwieregkeeten uplanzen ofgebaut a Zell Linnen mat radioimmune Nidderschlag assay lysis gefiermt benotzt Bradford reagent alles ( Fläch) no der Taktik vum Produzent. Denatured FAQ war op en Natrium dodecyl sulfate (SDS) -polyacrylamide gelies (10% acrylamide) an transferéiert ze polyvinylidene fluoride Schläimhait (Millipore, Bedford, MA) getrennt, wat dann zu 5% Fett-Mëllech gratis an Tris-gefiermt Salins gespaart gouf (pH 7.5). Fir immunoblotting, war d'Membran Iwwernuechtung mat LDH-A (Fleesch subunit) Kanengchen Monoclonal Antibody (1:1500) (epitomics) bei 4 ° C incubated. Dunn, war et vun TBST rinsed a mat Première antibodies fir 15 Minutten incubated. Signaler sech duerch verstäerkte chemiluminescence fonnt (Pierce, Rockford, IL). VerfÜgung Follow-up der befënnt VerfÜgung Den 264 Patienten déi gastroctomy mécht waren Medeziner Observatioun ze enk, dorënner Këscht /postwendend misse /RNT berechnen tomographic (Kosovo) Imaging, CEA Niveau, a Blutt Fahrt op 2 bis 3 Méint gebotzt an eng jährlech gastroscopy. Follow-up war am Accord mat National Aneneegräifend Cancer Network (NCCN) herno ageschafft an gastric Kriibs. Allgemeng Survival (OS) Taux war wéi déi Kriminell vun der initialen Agrëff zu Doud definéiert. D'Enn Datum vum Suivi Etude fir Dirigent vun der Analyse war 29. Juni 2012 VerfÜgung Evaluatioun vun Immunohistochemical Staining VerfÜgung Immunoreactivity war vun zwee Fuerscher onofhängeg bewäert deen zu Patient Resultat blinded goufen. D'Evaluatioun ass op der staining Intensitéit baséiert. Staining Intensitéit fir LDH-E gouf als 0 (negativ) Faarwen; 1 (schwaach); 2 (moderéiert); an 3 (staark). D'uplanzen goufen an zwou Gruppen ënnerdeelt no hir Fändelen: 0 an 1 sinn niddereg Ausdrock Grupp; 2 an 3 sin héich Ausdrock Grupp. Am Fall vun engem Ënnerscheed am ukomm, waren der drënner, déi souwuel pathologists ënnert engem microscope du-iwwerpréift. VerfÜgung Generation vun enger klenger Interfering (si) RNS Knockdown gëllt Zell zesummeféieren VerfÜgung Baséierend op d'LDH 5'-ATCCAGTGGATATCTTGACCTACG TGGCT-3 "war de Nukleotid Haaptrei vun der gesaat ShLDH-A: lount Iech leien, war shRNA benotzt siRNA Target Mali (Ambion) entworf. D'Zell Linn entsteet duerch Zellen mat Jacquerie plasmid Droberoderin war wéi enger Kontroll benotzt. 10 μg shRNA an 25 μl Lipofectamine 2000 (Invitrogen Life Technologies, Karlsbad CA, USA) sech gemëscht zesummen mat 1350 μl RPMI-1640 mëttelfristeg (ouni FBS), an dann ass d'Mëschung an MGC-803 gastric Kriibs Zellen transfected. D'Mëschung war dobäi an engem 25-cm RNS erauszéien a Real-Zäit Chemeschen RT-Hinnen alleguer Analys VerfÜgung Total RNS vun Zellen isoléiert war mat TRIzol reagent no der Taktik vum Fabrikant (Invitrogen), an 1 μg vun RNS war direkt un cDNA Filteren mat enger ëmgedréint Transkriptiouns Kit (Promega, Madison, Wisconsin), no der Taktik vum Produzent. Amplification Reaktioune goufen zu engem 20-μl Volumen mat 0,2 μl vun SYBR Green (Bio-Rad, Hercules, California) gesuergt. Dës Reaktioune waren am triplicate mat engem BioRad iCycler (Bio-Rad) gesuergt. β-Actin war wéi eng intern Kontroll benotzt. D'primers benotzt sech wéi follegt zesummen: LDH-A, 5'-CTCCTGTGCAAAATGGCAAC-3 "(no) an 5'-CCTAGAGCTCACTAGTCACAG-5" (ëmgedréint); andβ-Actin, 5'-GATCATTGCTCCTCCTGAGC-3 "(no) an 5'-ACTCCTGCTTGCTGATCCAC-3" (ëmgedréint). D'Spezifizitéit vun real-Zäit grouss Hinnen alleguer war vun vermëschen rop Analyse an agarose gelies electrophoresis ubelaangt. VerfÜgung MTT a Kolonie Formatioun Assay VerfÜgung Fir Zell Wuesstem Analyse, eng gläichgrouss Zuel vun Zellen zu 48 géint sech -well Placken. Den Total vun Zellen war no all Dag duerch d'MTT assay gemooss un de Produzent vum Protokoll (Roche Obwuel Science). Fir Kolonie Opstellung Analyse, sech an triplicate rakommen an 60 mm Kultur Plat gläichgrouss Zuel vu Kontroll Zellen an Zellen den Ausdrock vun LDH-A silencing. Zellen fir 7 Deeg cultured waren, Zell Wuesstem war no 7 Deeg an der Kultur gestoppt vun der mëttel- Stoppen an 0,5% glaskloer mauve Léisung vun 20% methanol Schan. No staining fir 5 min, huet den fixen Zellen mat phosphate-gefiermt Salins (PBS) fotografeschen, an opgeléist mat 1% SDS gewäsch. D'Zuel vun de Kolonien vun all Grupp gezielt gouf. VerfÜgung Tumorigenicity Assay VerfÜgung D'MGC-803 GC Zellen xenografts op 6-Woch-al weiblech athymic Sauna Mais (Vital River Laboratoiren, Peking produzéiert goufen, China) vun Sprëtz vun 5 × 10 Moosse vun Lactate Konzentratioun an ATP Production VerfÜgung No 48 Stonnen vun incubation, lactate, an ATP Niveau vun der Kultur Medien gemooss goufen kommerziell sinn assay Trikoten benotzt (kaaft aus BioVision [Mountain View, California], an Roche Obwuel Science bzw.). Resultater ware fir d'Finale Zell Grof Zuel korrigéiert. VerfÜgung statistique Analys VerfÜgung All statistesch Analyse andems der SPSS 17.0 (SPSS INC, Chicago, IL) gesuergt huet. Allgemeng Survival Tariffer sech mat der Kaplan-Meier estimator sech, en Evenement, wéi Doud fir Kriibs-Zesummenhang Ursaach definéiert ginn. D'Logbuch-Platz Test war benotzt Differenzen tëscht Iwwerliewe Kéieren ze identifizéieren. An univariate Analyse, zwee-tailed χ LDH-A Expression zu Mënscherechter Gastric Cancer Ray VerfÜgung Mir Kierchefënster Rubriken vun TMAs vun GC graded an NNM Otemschwieregkeeten Placken fir hir cytoplasmic immunohistochemical staining Intensitéit géint LDH-A FAQ. D'liesbar Echantillon abegraff 264 gastric carcinoma an 209 reagéiert NNM. Déi typesch diffusen cytoplasmic staining vun d'FAQ kann zu vill gastric carcinoma an normal gastric Stoffer fonnt gin, wéi an Dorënner 1, Kriibs Otemschwieregkeeten dës zougedréckt positive cytoplasmic staining fir 201 Fäll (76.14%), iwwerdeems ënner 209 Fäll vu NNM, 131 Fäll ( 62,68%) haten LDH-A positiven Ausdrock (Table 1). Fir den Ausdrock Quantitéit vun LDH-A am GC Echantillonen, déi Ausdrock vun LDH-A ermëttelen war déi westlech blot Analyse vun siwen ausgewielt erhéijen an der vläit normal Stoffer iwwerpréift. Up-Regulatioun vun LDH-E gouf am GC Echantillon am Verglach mat der vläit normal Stoffer (Figebam. 2a) observéiert. Dës Studien uginn dass LDH-A vill vun kriibserreegend uplanzen upregulated war am Verglach zu bascht Net-kriibserreegend Stoffer (Table 1. p = 0.002). VerfÜgung Expression Analys vun LDH-A am Gastric Zell zesummeféieren VerfÜgung Western blotting Analyse gouf zu gastric Zell Linnen gesuergt. Déi westlech blot zougedréckt datt Ausdrock vun der LDH-A an schlecht ënnerscheet MGC803 vill staark war an mëttelméisseg AGS ënnerscheet; mëttelméisseg ënnerscheet SGC-7901 schwaach an och MKN28 ënnerscheet; a veréiert zu Mënsch normal gastric Zell Linn GES-1 (Figebam. 2 b). VerfÜgung Clinicopathological Variablen zu 264 Cases vun Gastric Carcinoma VerfÜgung Als zesummegefaasst Table 2, fonnt Mir datt fräi Ausdrock vun LDH-a war vill mat Alter vu Patienten (P = 0.004) an histological Typ (P = 0.02), lymph Node Metastasen (P = 0.043) verbonnen, awer net mat Geschlecht (P = 0.072), entholl Gréisst (P = 0.086) , Déift vun Invasioun (P = 0.328), lymphatic Invasioun (P = 0.738), Lauren Schouljoër (P = 0.152) oder TNM Etapp (P = 0.417). VerfÜgung traureg Analys VerfÜgung Den 5 Järeger OS Taux vun der 264 Patienten mat der Primärschoul gastric Kriibs 46% (122/264), mat 142 Doudesfäll am Suivi Period observéiert. D'Steiren Dauer vun Suivi war 50 Méint (Rei, 9-78 Méint). Survival Analyse vun Kaplan-Meier Iwwerliewe rop an umellen-Platz Test bewisen, dass Patienten mat héije Ausdrock vun LDH-A am entholl Otemschwieregkeeten no engem groussen Ensembel Iwwerliewe wéi Patienten mat entholl niddereg LDH-A Ausdrock (P &Si besteet; 0,001;. Lalumi 3) . Mat den Zweck vun der Potential Relatioun tëscht dem Wëllen vun LDH-A Jorzéngten an der Iwwregens hätt an verschidden Zorte vun GC, évaluéieren mir d'Iwwerliewe vu Patienten zu verschiddene subgroups: Wann statistesch Analyse Leeschtung war vun Lauren Schouljoer stratified an histological Klassifikatioun, wossten Bedeitung vun diffusen Typ GC an Strenz Typ GC (P &Si besteet; 0,001 bzw.), mee net an intestinal (P = 0.179) oder ënnerscheet (P = 0.104) erklären. Multivariate Analyse gouf mat de Cox proportional Risikoe Modell fir all vun de wesentleche Verännerlechen an der univariate Analyse gesuergt. Table 3 weist d'Bedeitung: ugepasst fir aner covariates, d'Resultater vun der multivariate Analyse gewisen, datt LDH-A Ausdrock (P &Si besteet; 0.001), lymphatic Invasioun (P = 0.046) an Lauren Schouljoër (P = 0.001), TNM Etapp (P = 0.006), mee net Alter (P = 0.053), entholl Gréisst (P = 0.111), Déift vun Invasioun (P = 0.598), lymph Node Metastasen (P = 0.089), oder histological Typ (P = 0.674), waren prognostic onofhängeg Risiko Facteure fir OS (Table 3). VerfÜgung Knockdown vun LDH-a vun siRNA verklengert sech den Ausdrock vun LDH-a am MGC-803 VerfÜgung Laut dem Südweste blot Resultater an real-Zäit RT -PCR, den Ausdrock vun LDH-a ofgeholl ginn vun der LDH-a-siRNA MGC-803 Zellen ausdrécken. Als zu Dorënner 4 gewisen, Ausdrock vun LDH-A FAQ duerch westlech blot assayed war kaum Magnéitfeld, an der PKM2 mRNA Niveau war an der LDH-A-siRNA ausdrécken MGC-803 Zellen vun 74% reduzéiert. LDH-A Ausdrock bleift onverännert zu souwuel GC Zell Linnen an der Zell Linnen eng Kontroll ausdrécken siRNA. VerfÜgung Knockdown vun LDH-A Inhibited de Wuesstem vun GC Zell zesummeféieren MGC-803 VerfÜgung entholl ze bewäerten Zell Wuesstem, déi mir MTT a Kolonie Opstellung assays. An der MTT assay, den Ausdrock vun LDH-A silencing der Verbreedung vun MGC-803 Zellen inhibited (Figebam. 5a, b). De Wuesstem vun MGC-803 Zellen ausdrécken LDH-A siRNA Verréngerung vun 64%, no 168 Stonnen vun incubation Verglach mat deem vun der Kontroll Zellen (P &Si besteet; 0,05). Konsequent, attenuated den Ausdrock vun LDH-A silencing Hafen-onofhängeg Wuesstem vun MGC-803 Zellen (Figebam. 5c, d). LDH-A knockdown vun deenen Zellen Kolonie Équipe huet verhënnert, wat beweist, datt Hafen-ofhängeg Wuesstem restauréiert gouf. Dës Resultater proposéiert weider der oncogenic Roll vun LDH-A am GC Kriibs. VerfÜgung Knockdown vun LDHA Inhibited der Tumorigenicity zu Xenograft Mouse Models VerfÜgung An dëser Etude, mir der tumorigenic Kapazitéit vun LDH-A iwwerpréift zu VIVO. D'tumorigenicity zu VIVO vun MGC-803 siLDH-A Zellen a Kontroll Zellen war vun sc Sprëtz vun Zellen zu athymic Sauna Mais évaluéieren. Konsequent mat der kënschtlech Studien, attenuated den Ausdrock vun LDH-A silencing Trainer d'tumorigenicity vun LDH-A Zellen zu entholl Gréisst. Fir all reagéiert xenografts, goufen siLDH-A erhéijen däitlech méi kleng wéi déi vun de Kontrollen (Figebam. 5e, f). VerfÜgung Knockdown vun LDH-A vun siRNA verklengert Lactate a ATP Production zu Mënscherechter GC Zell zesummeféieren MGC- 803 VerfÜgung Well LDH-E de Schlëssel Aktivitéit ass pyruvate an lactate fir transforméiert, Verfall vun hiren Ausdrock an GC Zellen soll lactate Produktioun an Energie ukuerbelt betreffen. Fir dëst Hypothes Test, mir Verglach lactate a ATP Produktioun tëscht LDH-A siRNA knockdown Zellen a Kontroll Zellen no engem 48-Stonne incubation. Wann LDH-A war vun siRNA, d'Fäegkeet vun der Zell lactate ze produzéieren Uewerschenkel a war ATP vun 61,5% a 63,3% op 48 Stonnen dramatesch ofgeholl, respektiv (Figebam. 6a, b). VerfÜgung an den 1920er Joren, bewisen Warburg éischt datt Kriibs Zellen Geleeenheet méi Zocker Tariffer wéi normal Zellen an produzéiere Energie bal vun aerobic glycolysis fir hir Energie Noutwendegkeete Ëmwelt- Contrainten adaptéieren wéi liichte hypoxia [10], [11]. Allerdéngs ass dat metabolic änneren net einfach eng Adaptatioun un engem hypoxic Ëmwelt mee ass eng aktiv bewosst Strategie, datt e groussen Avantage fir Prolifératioun an malignancy jidferengem. Elo Vegran et al VerfÜgung. [12] hu bericht, dass lactate direkt d'phenotype vun endothelial Zellen well kann, eventuell eng wichteg Mechanismus representéiert duerch déi erhéijen hiren eegene Blutt Fourniture via wiere morphogenesis Kontroll. Well reaktiv Sauerstoff Aarten (Ros) duerch-Produite vun Kënschtlech sin natierlech sinn, huet et schonn proposéiert, datt d'Konversioun vum Zocker ze lactate Kriibs Zellen aus oxidative Stress schützen kéint [13]. Kuerzem, Conclusiounen virschloen, datt vun Kriibs Zellen normal oxidative phosphorylation reinstating kann net nëmmen Zell Wuesstem an Prolifératioun inhibit mee och d'metastatic Kapazitéit vun malignant Zellen leider [14]. Dofir, huet d'Wichtegkeet vun constitutively up-reegelen aerobic glycolysis kuerzem zu entholl Werdegang unerkannt gouf, mä de molekulare Mechanismen fir dës phenotype Haaptfiguren an hir Contributiounen zu Kriibs Entwécklung sinn net gutt verstanen hunn. VerfÜgung LDH-A, d'Aktivitéit responsabel fir pyruvate an lactate transforméiert, spillt eng wichteg Roll am Prozess vun glycolysis. Puer Fuerschung hunn confirméiert, dass de Begrëff vun LDH-A vun enger Zuel vun oncogenes [15] entschlof ginn hätt. Dëse Rapporten ënnerstëtzen d'Iddi dass LDH-A Aféierungs- fir d'oncogenic Aktivitéit vun dësen oncogenes zu Kriibs Zellen kritesch ass. VerfÜgung D'oncogenic Aktivitéit vun LDH-A huet am esophageal carcinoma, pancreatic Kriibs an gastric Kriibs Zellen gemellt ginn [ ,,,0],8], [9], [16]. Yongjie Zhang et al VerfÜgung. confirméiert datt LDH-A Reduktioun der tumorigenicity vun gastric Kriibs (ITGC) Zellen intestinal-Typ vun downregulating Oct4 [17] oofgesinn kann. An ZhiYu Wang et al VerfÜgung. confirméiert datt LDH-A silencing Broscht Kriibs tumorigenicity duerch Aféierungs- vun oxidative Stress mediated Kënschtlech Passerelle apoptosis [18] Hien. Hei, mir iwwerpréift formalin-fix, paraffin-Ënnerbewosstsinn entholl Otemschwieregkeeten vu 264 Patienten fir den Ausdrock vun LDH-A an Untersuchungshaft der characterization vun LDH-A Ausdrock vun mënschlecher GC, a presentéieren hir Korrelatioun mat clinicopathological Parameteren an Patienten hätt. Éischt, fonnt mir dass den Ausdrock vun LDH-A am GC Echantillon am Verglach mat der stemmt normal Stoffer gefördert gouf. Dëst Resultat ka mat leschter Etude konsequent sinn, datt an verschiddenen Zorte vu mënschlechen Cancers, war den Ausdrock vun LDH-A weider-reegelen [4], [5]. An entholl Otemschwieregkeeten, eiser Etude gewisen, datt LDH-A Ausdrock staark mam GC clinicopathologic Charakteristiken soll war: Alter, lymph Node Metastasen an histologic klasséieren. Also proposéieren mir dass de weider-reegelen LDH-A Ausdrock ze Prolifératioun an der Entwécklung vun GCs bäidroen kënnen. Zweet, analyséiert mir weider de prognostic Roll vun LDH-A op Punkto Iwwerliewe vu Patienten mat GC. Kaplan-Meier Analyse huet e groussen Veräin tëscht LDH-A Ausdrock a Punkto Iwwerliewe vu Patienten, an Patienten mat staark LDH-A staining no engem nidderegen Iwwerliewe Tarif. Wann statistesch Analyse stratified Leeschtung war vun Lauren Schouljoer an histological Klassifikatioun, wossten Bedeitung vun diffusen Typ GC an Strenz Typ GC, mä net zu intestinal oder ënnerscheet gelackelt. Spezifësch siRNA géint LDH-A war zu MGC803 Zellen a gutt Zell Wuesstem souwuel eng kënschtlech an Maus Modeller gesuergt. LDH-A knockdown och lactate a ATP Produktioun vun GC Zellen reduzéiert. Dofir, proposéiere eis Resultater, déi Ausdrock vun LDH-A eng onofhängeg prognostic Faktor vun OS war, an annoncéiert, datt LDH-A kéint een oncogenic Roll an entholl Entwécklung hunn, virun allem an diffusen Typ GC oder Strenz Typ GC Patienten. Konsequent mat eis ze studéieren, ass et gemellt ginn, datt de Begrëff vun LDH-A am mënschleche hepatocellular carcinoma Zellen Sax rof apoptosis [8], a downregulation vun LDH-A induce kéint d'Produktioun vun Ros an cytosolic Ca2 + sécher erhéijen, wat d'Verréngerung zentrale Kënschtlech Membran Potential an hepatocellular carcinoma Zellen zu der Verëffentlechung vun cytochrome C gefouert. VerfÜgung zesummen deelgeholl, eiser Etude beweist dass Ausdrock vun LDH-a weider-reegelen gastric Kriibs Zellen mat Wuesstem Virdeeler bitt. An der selwechter Zäit, eis Etude seet LDH-A wéi eng potentiell therapeutesch viséieren. VerfÜgung
Resultater VerfÜgung
Diskussioun
Mënschlech Koronavirus brauch organesch Material fir effizient tëscht Uewerflächen ze transferéieren
Wuesstumsprobleemer bei virzäitege Puppelcher verbonne mat verännert Darmbakterien
Patienten op Immuntherapie solle méi Faser konsuméieren,
Wasserstoff Otem ass net vum Bikini Atoll
Mathematesche Modell weist de Risiko vun der SARS-CoV-2 Infektioun no fecaler Mikrobiota Transplantatioun op
Nei computational Modellermethod virausgesäit wéi Darmmikroben sech mat der Zäit veränneren
Verschidde Bakterien kënnen den HIV Risiko bei Fraen erhéijen,
fënnt nei Studie Eng rezent Studie verëffentlecht am DLancet Infektiiv Krankheeten, beschreift siwen Aarte vu vaginale Bakterien, déi de Risiko vun enger HIV -Infektioun bei Fraen däitlech erhéijen
Kanner sinn immun virbereet op SARS-CoV-2
Op dmannst 30 nei Krankheeten sinn an de leschten 20 Joer opgetaucht a bedrohen elo zesummen dGesondheet vun Honnerte vu Millioune Leit. Fir vill vun dëse Krankheeten, et gëtt keng Behandlung, geheelt
Ulzerativ Kolitis
Ulzerativ Kolitis ass eng Krankheet déi de Colon an de Rektum beaflosst. Et verursaacht Reizung an Entzündung a féiert schlussendlech zu Geschwüren, déi sech an der Fusioun vum Colon entwéckelen. Ulze