PLoS ONE: kliničkopatološkim Značaj i Prognostička vrijednost laktat dehidrogenaze izraza u rak želuca bolesnika

Sažetak pregled

Uvod pregled

LDH-A, enzim odgovoran za pretvaranje piruvata u laktat, dokazano je da se regulira prema gore u mnogim vrstama raka i dovesti do agresivnije ponašanje regulira proliferaciju i anti-apoptozu. Međutim, njegova ekspresija u raka želuca (GC) još nije u potpunosti karakterizirani. Svrha ovog istraživanja bila je pojasniti izraz i potencijalni utjecaj LDH-A u GC. Pregled

Metode

Ispitali smo LDH-A izraz imunohistokemijski na microarray GC tkiva (TMA), uz upotrebu Western blot na svježe GC tkiva i staničnih linija. Procijenjeni su prognostičku vrijednost i korelacija s drugim kliničko čimbenika. Mi transfektirane siRNA u GC stanice protiv LDH-A. LDH-A analiziran je Western blot i u realnom vremenu RT-PCR. Rast stanica je procijenjen in vitro i in vivo. Laktata i ATP proizvodnju stanice su određene. Pregled

Rezultati

Bilo je značajno viša LDH-A izraz u karcinoma nego u ne-neoplastičnim sluznice (NNM). Tu je pozitivna korelacija LDH-A izražavanja s dobi, histološki tip i metastaze u limfne čvorove. Preživljavanje analiza pokazala je da visoka ekspresija LDH-A u GC je bio povezan s nižom ukupnom preživljavanju (OS). Kad stratificiran prema Lauren razreda i histološke klasifikacije, značaj pojavila u difuznom tipu i nediferencirane tipa GC. U multivarijatne analize, LDH-A izraz u GC je neovisan prognostički čimbenik rizika za OS (omjer rizika = 1,829; 95% CI 1,375-2,433, P < 0.0001). Specifični siRNA prema LDH-A u GC stanične linije rasta stanica zaostao i in vitro i in mišjim modelima. LDH-A obaranje smanjio laktata i ATP proizvodnju u GC stanicama. Pregled

Zaključci pregled

Naša studija pokazala onkogeni ulogu LDH-A u GC. LDH-A izraz je samostalna prognostički čimbenik rizika u GC bolesnika i up-regulaciji ekspresije LDH-A može biti prediktivni loših rezultata u difuzni tip i nediferencirane tipa GC. Naši rezultati sugeriraju da LDH-A može biti potencijalni terapijski cilj u karcinomu želuca pregled

Izvor. Sun X, Sun Z, Zhu Z, Guan H, Zhang J., Zhang Y, et al. (2014) kliničkopatološkim Značaj i Prognostička vrijednost laktat dehidrogenaze izraza u rak želuca bolesnika. PLoS ONE 9 (3): e91068. doi: 10,1371 /journal.pone.0091068 pregled

Urednik: Anthony W.I. Eto, Kineskog sveučilišta u Hong Kongu, Hong Kong pregled

Primljeno: 12. kolovoz 2013; Prihvaćeno: 7. veljača 2014; Objavljeno: 7. ožujka 2014 pregled

Copyright: © 2014 Sun et al. Ovo je otvorenog pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan

financiranja. Ova studija bio podržan od dotacija iz istraživačkih projekata u provinciji Liaoning znanosti i tehnologije Zavod (br 2007225017, br 2009225011-2 i br 2011415052) i znanstvenih i tehnologijskih projekata u gradu Shenyang (br F11-264-1-19). U financijeri nisu imali ulogu u studiju dizajna, prikupljanja i analize podataka, Odluka o objavi, ili pripremu rukopisa pregled

U konkurenciji interese.. Autori su izjavili da ne postoje suprotstavljeni interesi pregled

Uvod pregled

metabolička svojstva tumorskih stanica značajno odstupati od onih normalnih stanica, kao što su stanice raka poželjno koristiti umjesto glikolizu mitohondrijske oksidativne fosforilacije i u prisustvu kisika; Ovaj fenomen je poznat kao Warburg učinak [1], [2], [3]. Iznenađujuće visok postotak zauzima glukoze i laktata proizvodnju u tumorima u prisutnosti kisika na čelu Warburg nagađati da je nenormalna metabolizam može biti uzrok mnogih vrsta raka. [2] Međutim, prednost metaboličke transformacije prenosi na stanice raka ostaje nejasno [4], [5]. Nedavno je otkriće veze između onkogena i metaboličkim procesima dovela je do oživljavanja interesa u Warburg rada. Sve je više dokaza da je Prilagodba aerobna glikoliza stanicama raka mogla bi se olakšalo proliferacije raka [5]. Metabolizam Rak je pod opsežna istraživanja u nadi otkrivanja novih učinkovitih terapija za rak. pregled

LDH-A, je ključni enzim koji igra važnu ulogu u konačnom koraku Warburg efekt pretvaranjem piruvata u laktat , U različitim vrstama raka u čovjeka, izraz LDH-A je se regulira prema [6], [7]. U jednjaka karcinom pločastih stanica, LDH-A bila je viša u tkivu raka i promovirao preživljenja tumorskih stanica [8]. Dodatno, LDH-A, da povećavaju rast i migraciju stanica raka želuca [9]. Međutim, izraz status i funkcija LDH-A kod raka želuca (GC) i dalje ostaju nepoznati. Pregled

U ovom istraživanju ispitali smo ekspresiju LDH-A u velikoj skupini GC uzoraka i korelaciji njegova izraz s kliničkim patološkim parametrima i ukupno preživljenje (OS). Naši rezultati pokazuju da je ekspresija LDH-A bila je viša u kliničkim uzorcima raka želuca, a ekspresija proteina je povezana s dobi i histološkom klasifikaciji. Osim toga, otkrili smo da je visoka LDH-A ekspresija je povezana s lošijim prognozama u GC pacijenata. Uzeti zajedno, naša studija otkrila je onkogeni funkciju LDH-A na rak želuca i predložio LDH-A kao novi potencijalni prognostički faktor i potencijalnog terapijskog cilja. Pregled

Materijali i metode

Pacijenti

Ovaj istraživanju je sudjelovalo 264 bolesnika s GC, koji su pratili ljekovito operaciju od siječnja 2006. do svibnja 2007. godine na Prvom povezanih bolnici kineskog medicinskog sveučilišta. Skupina je sastavljena od 194 muškaraca i 70 žena prosječne dobi od 59 (raspon 29-81) godina. Niti jedan od pacijenata je podvrgnut kemoterapiji ili radioterapiju prije operacije. Praćenje informacije su prikupljeni iz svih bolesnika. Pregled

Etika Izjava pregled

Etičko odobrenje za ovo istraživanje je dobiven od etičkog povjerenstva za istraživanje kineskog medicinskog sveučilišta, Kina. Svi pacijenti koji pružaju tumorskog tkiva, kao i normalne uzoraka želučane tkiva potpisali pristanak prije kirurškog uklanjanja želuca karcinom kako bi se omogućilo ovo istraživanje koje treba poduzeti. Sve procedure studija na životinjama bili su u skladu s National Institutes of Health Vodič za skrb i korištenje laboratorijskih životinja te su provedeni u skladu s institucionalnim etičkim smjernicama. Ove laboratorijske životinje su kupljeni od Šangaj Ispostava Centar, Institut za laboratorijskih životinja znanosti, Kineske akademije medicinskih znanosti (također poznat kao Šangaj CAS, broj certifikata: SCXK [hu] 2003-0003). Svi eksperimentalni postupci su provedeni u skladu s institucionalnim smjernicama za njegu i korištenje laboratorijskih životinja, a protokoli su odobreni od strane njega i uporaba odbora institucionalna životinja u Kini Medical University, Shenyang, Kina. učinjeni su napori kako bi se smanjili patnju. pregled

uzorci tkiva i patologiju pregled

Svi pacijent-izvedeni uklopljeni u parafin Želučani primjerci raka (n = 264), a njihove podudaraju NNM primjerci (udaljen 2 cm od karcinoma n = 209) prikupljeni su od kirurške resekcije i arhiviran pod protokolima koji su odobreni od Institutional Review odbora Prvo povezanih bolnice China Medical University. Svježe karcinom želuca i uz NNM su sakupljene i smrznute u -80 ° C do ekstrakcije proteina homogenizacijom u RIPA pufera za lizu. Histološkim dijagnoza i druge mikroskopske karakteristike su potvrđene od strane patologa i TNM za svaki želučani karcinom procijenjena je prema sustavu Union International Contre le Cancer (UICC) za opseg tumora širenja. Histološki arhitektura želučanog karcinoma je izražen u Laurenov klasifikaciji i Svjetska zdravstvena organizacija (WHO) klasifikacije. Osim toga, veličina tumora, dubina invazije, i limfnog su određene. Pregled

staničnih linija i kultura pregled

ljudski rak želuca stanične linije MKN28 (dobro diferencirani), AGS, SGC-7901 (umjereno diferencirani ), MGC803 (slabo diferencirane) i humani normalni želuca stanične linije GES-1 kupio od banke stanica kineske akademije znanosti. Pet stanične linije su održavane u RPMI 1640 (Hyclone, Logan mjesta, USA) uz dodatak 10% fetalnog goveđeg seruma (FBS). Sve stanične linije su u CO s 5% _{2 vlažnoj atmosferi na 37 ° C. Pregled}

tkiva Microarray (TMA) i imunohistokemija pregled

identificirano Reprezentativni područja solidnih tumora i susjedni NNM u HE umrljan dijelove odabranih slučajeva i jezgra 1,5 mm promjera tkivo po donatora bloku izrezan i prebačen u bloku primatelja s maksimalno 200 (10 × 20) jezgara pomoću 1,5-mm promjer trna instrument. Nakon re-otopi, sekcije (4 um-debela) uzastopno su izrezani iz svake microarray tkiva bloku, HE bojenjem je provedeno na TMA za potvrdu tumora i tkiva sluzi. Imunohistokemijska analiza je provedena na TMA sekcija lonac posredovana dohvat antigen je provedena u citratnom puferu (pH 6.0) tijekom 10 minuta. Sekcije su inkubirane s 1:300 razrjeđenje LDH-A (podjedinica mišića) zec monoklonsko antitijelo (epitomics) preko noći na 4 ° C, a zatim su inkubirane s kozjim anti-mišjim ili protu-zečjim Predvidjeti sustav Plus-HRP (Dako Cytomation) za 30 min na sobnoj temperaturi. Nakon ispiranja tri puta u PBS-u tijekom 10 minuta svaki, rezovi su inkubirani s DAB 1 min, obojena Mayerovim hematoksilinom, dehidrirana, očišćena i montiran. Izostavljanje primarnog antitijela korištena je kao negativna kontrola. Pregled

Western blot analiza pregled

Proteini koncentracije uzoraka izvađen iz uzorcima tkiva i staničnim linijama uz korištenje radioimmune precipitacije test pufera za lizu su određena pomoću Bradford reagens ( sigma) u skladu s uputama proizvođača. Denaturirani protein se odvoji na natrij dodecil sulfata (SDS) -polyacrylamide gela (10% akrilamid), prenesen u polivinilidenfluorid membrane (Millipore, Bedford, MA), koji je zatim blokirane u 5% nemasnog mlijeka u Tris-puferiranoj slanoj otopini (pH 7,5). Za imunoblot, membrana se inkubira preko noći s LDH-A (podjedinica mišića) zec monoklonalnih (1:1500) (epitomics) pri 4 ° C. Zatim se isperu TBST i inkubirane sa sekundarnim antitijelima tijekom 15 minuta. Signali su detektirane pojačanom kemiluminescencijom (Pierce, Rockford, IL). Pregled

Praćenje nakon operacije

264 pacijenata koji su bili podvrgnuti gastroctomy podvrgnuti su zatvorili klinički promatranja, uključujući grudi /abdomena /prsni kompjutorska Tomografska (CT) slike, HUP razini, i testiranje krvi na 2 do 3 mjeseca intervalima i godišnji gastroskopija. Follow-up je bio u skladu s National Comprehensive Cancer Network smjernicama (NCCN) praksa u raka želuca. Ukupno preživljenje (OS) stopa definirana je kao interval od početne operacije do smrti. Krajnji datum follow-up studija za provođenje analize bio je 29. lipnja, 2012. pregled

Procjena Imunohistokemijsko bojanje pregled

Imunoreaktivnost ocjenjuje samostalno dva istraživača koji su bili zaslijepljeni na ishod bolesnika. Procjena je na temelju intenziteta za bojenje. Bojenje intenzitet na LDH-A je postigao što je 0 (negativan); 1 (slabo); 2 (umjerena); i 3 (jaka). Uzorci su podijeljeni u dvije skupine prema njihovim bodovima: 0 i 1 su niske izraz grupa; 2 i 3 su visoke ekspresije skupina. U slučaju nesuglasja u bodovanje, slajdovi su preispitani i od strane patologa pod mikroskopom. Pregled

generaciju malih uplitanja (SI) RNA obaranje stabilne stanične linije

Na temelju LDH -A slijed, shRNA je dizajniran pomoću siRNA Target tražilo (Ambion): nukleotidna sekvenca umetnutog ShLDH-A bio je 5'-ATCCAGTGGATATCTTGACCTACG TGGCT-3 '. Stanična linija nastaje infekcijom stanica sa kodiranim plazmid je korišten kao kontrola. 10 ug shRNA i 25 ul lipofektamin 2000 (Invitrogen Life Technologies, Carlsbad, CA, USA) su pomiješani zajedno s 1350 ul RPMI-1640 mediju (bez FBS), a zatim je smjesa transfektirani u MGC-803 stanica raka želuca. U smjesu se doda u 25-cm ^{2 kulture tikvicu koja je prethodno stavljene sa 1 × 10 6 MGC-803 stanica raka želuca. Medij za kulturu je zamijenjen s potpunom RPMI-1640 6 sati nakon inokulacije i na 28 sata nakon transfekcije, stabilnih staničnih klonova je odabrano za 2 tjedna s neomicin i analizirani pomoću imunoblotinga. Pregled}

RNA ekstrakcija i stvarnom vremenu Kvantitativna RT-PCR analiza pregled

Ukupna RNA je izolirana iz stanica pomoću Trizol reagensa u skladu s uputama proizvođača (Invitrogen) i 1 ug RNA je obrađen izravno cDNA pomoću reverzne transkripcije kit (Promega, Madison, Wisconsin), u skladu s uputama proizvođača. Amplifikacije reakcije su provedene u volumenu od 20 ul sa 0.2 ul SYBR Green (Bio-Rad, Hercules, Kalifornija). Ove reakcije se izvode u triplikatu upotrebom Biorad iCycler (Bio-Rad). p-aktin korištena je kao interna kontrola. Primeri korišteni su kako slijedi: LDH-A, 5'-CTCCTGTGCAAAATGGCAAC-3 '(naprijed) i 5'-CCTAGAGCTCACTAGTCACAG-5' (reverse); andβ-aktin, 5'-GATCATTGCTCCTCCTGAGC-3 '(prema naprijed) i 5-ACTCCTGCTTGCTGATCCAC-3' (natrag). Specifičnost realnom vremenu kvantitativnog PCR je provjereno topljenjem analize krivulje i elektroforezu u agaroznom gelu. Pregled

MTT i kolonija Formiranje Test pregled

Za analizu staničnog rasta, jednak broj stanica su posađene na 48 Pa ploče. Ukupni broj stanica je mjerena svaki dan MTT pokusom prema protokolu proizvođača (Roche Applied Science). Za analizu formiranja kolonija, jednak broj kontrolnih stanica i stanica utišavanje ekspresije LDH-A su posađene u posudu za kulturu 60 mm u tri primjerka. Stanice su kultivirane 7 dana, rast stanica je zaustavljen nakon 7 dana u kulturi uklanjanjem medija i dodatkom 0,5% otopine kristal violet u 20% metanola. Nakon bojenja 5 min, Fiksirane stanice oprane su s fosfatnim puferom u fiziološkoj otopini (PBS), fotografiranja i otopi s 1% SDS-a. Broj kolonija u svakoj grupi je broje. Pregled

torn smjeru Test pregled

MGC-803 GC stanicama stranih tijela su proizvedene na šest tjedana stare ženke nude miševima bez timusa (Vital River Laboratories, Peking, Kina) injektiranjem 5 x 10 ^{6 stanica u 0,2 ml PBS-a u bok svakog miša (6 miš /skupina). Stvaranje tumora je ocijenjena svaki tjedan. volumen tumora izračunat je prema formuli:. V (mm 3) = a × b 2/2 (gdje je najveći površna promjer i b je najmanji površno promjer) pregled}

Mjerenje laktata koncentracije i ATP proizvodnje Netlogu

Nakon 48 sata inkubacije, laktata i razine ATP-a u medijima za kulturu mjerene su pomoću komercijalno dostupnih pribore za analizu (kupljen od BioVision [Mountain View, California] i Roche Applied Science , redom). Rezultati su korigirani za konačni broj broja stanica. Pregled

Statistička analiza pregled

Sve statističke analize provedene su pomoću SPSS 17.0 (SPSS Inc, Chicago, IL). Sveopću stopu preživljavanja određene su pomoću Kaplan-Meierovim procjenitelja, događaj je definiran kao za smrt povezanih s rakom uzrok. Test log-rank se koristi za prepoznavanje razlike između krivulja preživljavanja. U univarijatne analize, dvosmjerni χ ^{korištene su 2 testovi ili dvosmjerni t test za statističke usporedbe. I model proporcionalnog opasnost Cox je bio korišten u univarijantne analize i multivarijatne analize, kako bi utvrdili značajne čimbenike u korelaciji s prognozom. Za sve analize, samo P vrijednosti. ≪ 0,05 smatrana značajnom pregled}

Rezultati

LDH-A ekspresije u ljudskim rak želuca tkiva pregled

ocjenjuju Mi obojenih presjeka od TMAs GC i NNM jezgre tkiva za njihovo citoplazmatske imunohistokemijsku intenzitet bojenja od LDH-proteina. Čitljive Uzorci uključeni 264 karcinom želuca i 209 podudaraju NNM. Tipična difuzni citoplazmatski bojenje proteina mogu se naći u mnogim želučanog karcinoma i normalnih želučanog tkiva, kao što je prikazano na slici 1, rak tkiva pokazalo pozitivno citoplazmatski bojanje 201 slučajeva (76,14%), dok je u 209 slučajeva NNM, 131 slučajeva ( 62.68%) je imalo LDH-A pozitivan izraz (Tablica 1). Istražiti količina ekspresije LDH-A u uzorcima GC, ekspresija LDH-A se ispituje Western blot analizom sedam slučajno odabranih tumora i upareni normalnog tkiva. Doreguliranje LDH-A opažena u uzorku GC usporedbi s uparenim normalnim tkivima (Sl. 2a). Ove studije pokazuju da LDH-A značajno je reguliran u kancerogenih uzoraka u odnosu na susjedne ne-kancerogen tkiva (Tablica 1. p = 0,002). Pregled

Izražavanje Analiza LDH-A u želučanom staničnim linijama

Western blot analiza je provedena na stanicama želuca. Western blot je pokazala da je ekspresija LDH-A bila je značajno jak u slabo diferenciranim MGC803 i umjereno diferencirani AGS; slabi u umjereno diferencirani SGC-7901 i dobro diferencirani MKN28; i nema u ljudskom normalne želuca stanične linije GES-1 (sl. 2 b). pregled

kliničkopatološkim varijable u 264 slučaju karcinom želuca pregled

Kao što je sažeto u tablici 2, otkrili smo da povećana ekspresija LDH-a značajno je povezana s dobi bolesnika (P = 0,004) i histološkom tipu (P = 0,02), limfnih čvorova metastaza (P = 0,043), ali ne i spola (P = 0,072), veličine tumora (P = 0,086) , dubina invazije (p = 0,328), limfna invazija (p = 0,738), Lauren ocjena (p = 0,152) ili TNM stadij (p = 0,417). pregled

Opstanak Analiza pregled

5 -godiĹnje OS stopa od 264 bolesnika s primarnim karcinomom želuca bila je 46% (122/264), sa 142 smrtnih slučajeva opaženih tijekom perioda praćenja. Medijan trajanja praćenja bio je 50 mjeseci (raspon 9-78 mjeseci). Preživljavanje analiza Kaplan-Meier krivulje preživljavanja i log-rank testa pokazali su da su pacijenti s visokom ekspresijom LDH-A u tumorskom tkivu imali značajno gore ukupno preživljenje od pacijenata sa tumorom niskim LDH-A ekspresiju (p-0,001, Sl. 3) , S ciljem upoznavanje potencijalnih odnosa između ekspresije LDH-A i prognozu u različitim vrstama GC, procjenjuje preživljavanje pacijenata u različitim podskupinama: Kada je provedena statistička analiza stratificiran prema Lauren razreda i histološke klasifikacije, značaj pojavila u difuzni tip GC i nediferencirane tipa GC (P < 0,001), ali ne u crijeva (P = 0,179), ili se razlikuju (p = 0,104) one. Multivarijantna analiza je provedena pomoću Cox proporcionalnih rizika modela za sve značajne varijable u univarijatne analize. Tablica 3 prikazuje značenje: prilagođen za druge kovarijanata, rezultati multivarijatne analize pokazali su da LDH-A izraz (P < 0,001), limfna invazija (P = 0,046) i Lauren ocjena (P = 0,001), TNM stadij (P = 0.006), ali ne i dob (P = 0,053), veličina tumora (P = 0,111), dubina invazije (P = 0,598), limfni čvor metastaza (P = 0,089), ili histološki tip tumora (P = 0,674), bili su neovisni prognostički čimbenici rizika za OS (tablica 3). pregled

obaranje LDH-a po siRNA smanjuje ekspresiju LDH-a u MGC-803 Netlogu

Prema Western blot rezultata i real-time RT -PCR, izraz LDH-A efektivno smanjena u LDH-A-siRNA izražavanje MGC-803 stanica. Kao što je prikazano na slici 4, ekspresija LDH-A protein analiziran je 'western blot' jedva može detektirati, a razina PKM2 mRNA je smanjen za 74% u LDH-A-siRNA eksprimira MGC-803 stanica. LDH-A izraz ostao nepromijenjen u obje stanične linije GC i staničnih linija koje eksprimiraju kontrolu siRNA. Pregled

obaranje LDH-A inhibira rast GC staničnim linijama MGC-803 Netlogu

Za procjenu tumor stanični rast, koristili smo testove formacije MTT i kolonija. MTT pokusom, utišavanje ekspresije LDH-A inhibira proliferaciju MGC-803 stanicama (Sl. 5a, b). Rast MGC-803 stanice koje eksprimiraju LDH-A siRNA smanjen za 64% nakon 168 sati inkubacije u usporedbi s onim kod kontrolnih stanica (P 0,05). Dosljedno utišavanje ekspresije LDH-A prigušuje učvršćenja neovisno rast MGC-803 stanicama (Sl. 5c, d). LDH-A obaranje u tim stanicama spriječiti nastajanje kolonija, što znači da učvršćenja ovisan rast je obnovljena. Ovi rezultati predložio onkogeni ulogu LDH-A u rak GC. Pregled

obaranje LDHA inhibiran torn smjeru u ksenografta mišjim modelima pregled

U ovoj studiji, ispitali smo tumore kapaciteta LDH-A in vivo. Tumorogenosti in vivo MGC-803-A siLDH stanica i kontrolnim stanicama je procijenjena sc injekcije stanica u atimičnih golih miševa. U skladu s in vitro, utišavanje ekspresije LDH-A značajno prigušuje tumorogenosti LDH-A stanica veličine tumora. Za sve podudaraju ksenografta, siLDH-A tumori bili su znatno manji od onih u kontrolnoj skupini (Sl. 5e, f). Pregled

obaranje LDH-A by siRNA Smanjuje laktata i ATP proizvedenih u ljudskim GC staničnim linijama MGC- 803 pregled

zbog LDH-a je ključni enzim za pretvaranje piruvata u laktat, promjeni u svom izrazu u GC stanicama trebalo utjecati laktata proizvodnju i energetski metabolizam. Da bi testirali tu hipotezu, usporedili smo laktata i ATP proizvodnju između LDH-siRNA obaranje stanice i kontrolnih stanica nakon inkubacije od 48 sata. Kada LDH-A srušen siRNA, sposobnost stanica za proizvodnju laktat i ATP značajno je smanjena za 61,5% i 63,3%, na 48 sati, odnosno (Sl. 6a, b). Pregled

U 1920, Warburg prvi pokazali su da stanice raka zauzimaju više stope glukoze od normalnih stanica i proizvodnju energije gotovo aerobne glikolize za njihova energija uvjet da se prilagodi ograničenja okoliša kao što je povremeni hipoksije [10], [11]. Međutim, ova metabolička promjena nije samo adaptacija na okoliš uslijed nedostatka kisika, ali je aktivan stanični strategija koja prenosi značajnu prednost za proliferaciju i malignosti. Sada Vegran i sur pregled. [12] su izvijestili da laktat može izravno modulirati fenotip endotelnih stanica, što može predstavlja važan mehanizam kojim tumori kontroliraju svoju vlastitu opskrbu krvlju preko vaskularnog morfogeneze. Zbog reaktivni kisikovi spojevi (ROS) su prirodni nusproizvodi mitohondrijske disanja, predloženo je da se pretvaranje glukoze u laktata mogu zaštititi stanice raka od oksidativnog stresa [13]. Nedavno, rezultati sugeriraju da vraćanje normalnog oksidativnog fosforilacija u stanicama raka ne samo da može inhibirati rast stanica i proliferacije, ali i narušiti metastatskog kapacitet malignih stanica [14]. Dakle, važnost konstitutivno up-reguliranog aerobna glikoliza je nedavno priznat u progresiji tumora, ali su molekularni mehanizmi koji dovode do tog fenotipa i njihov doprinos razvoju raka nisu dobro razumjeli. Pregled

LDH-A, enzim odgovoran za transformiranje piruvata u laktat, igra važnu ulogu u procesu glikolize. Nekoliko istraživanja su izvijestili da je izraz LDH-A može biti izazvana brojnim onkogena [15]. Ovi izvještaji podržavaju ideju da LDH-A indukcija je presudno za onkogenim aktivnost ovih onkogena u stanicama raka. Pregled

onkogeni aktivnost LDH-A je prijavljen u jednjaka karcinom, rak gušterače i želuca stanica raka [ ,,,0],8], [9], [16]. Yongjie Zhang i sur pregled. izvijestio da LDH-Smanjenje može suzbiti torn smjeru od raka želuca (ITGC) stanica crijevne tipa po snižavanje Oct4 [17]. I ZhiYu Wang i sur pregled. izvijestio da LDH-A utišavanje suzbija rak dojke torn smjeru kroz indukciju oksidativnog stresa posredovan mitohondrijske slijeda apoptoze [18]. Ovdje, ispitali smo formalinom fixed, paraffin-embedded tumorskog tkiva od 264 pacijenata u ekspresiji LDH-A i prijavio karakterizaciju LDH-A ekspresije u ljudsku GC i predstaviti u korelaciji sa klinikopatološkim parametara i prognozu pacijenata. Prvo, otkrili smo da je ekspresija LDH-A je povišena u uzorcima GC usporedbi s podudarnim normalnog tkiva. Ovaj rezultat može biti u skladu s prethodnom istraživanju koje je u različitim vrstama raka u čovjeka, izraz LDH-A je se regulira prema [4], [5]. U tumorskom tkivu, naša studija pokazala je da LDH-A izraz snažno je povezana s GC kliničko karakteristika: dob, limfnih čvorova metastaza i histološka klasifikacija. Dakle, predlažemo da se regulira prema gore LDH-A ekspresija može pridonijeti širenju i razvoju GCS. Drugo, dodatno analizirati prognostičku ulogu LDH-A na ukupno preživljenje pacijenata s GC. Kaplan-Meier analiza je pokazala značajnu povezanost između LDH-A izražavanja i ukupno preživljenje bolesnika i bolesnika s jačim LDH-A bojanjem imali nižu stopu preživljavanja. Kada je statistička analiza provedena je stratificiran po Lauren razreda i histološke klasifikacije, značaj pojavila u difuznom tipa GC i nediferencirane tipa GC, ali ne u crijevnim ili diferenciranim one. Specifični siRNA prema LDH-A je provedena u MGC803 stanice i rast usporenog stanica in vitro i u mišjim modelima. LDH-A obaranje smanjio laktata i ATP proizvodnju u GC stanicama. Dakle, naši rezultati pokazuju da je ekspresija LDH-A bio je nezavisno prognostički čimbenik OS, kao i to da LDH-A može imati onkogeni ulogu u razvoju tumora, posebno u difuznom tipa GC ili tipa GC pacijenata nediferenciranih. U skladu s našim studija, to je izvijestio da je srušio ekspresiju LDH-A u ljudskim stanicama hepatocelularnog karcinoma može izazvati apoptozu [8], i downregulation LDH-A mogao povećati proizvodnju ROS i citosolu Ca2 + signalizacijom, koja je smanjila unutarnji mitohondrijske membrane potencijal i dovelo do otpuštanja citokroma C u hepatocelularnih stanica karcinoma. pregled

Sve u svemu, naša studija ukazuje na to da se regulira prema izraz LDH-a daje želučane stanice raka s prednostima rasta. Istovremeno, naša studija sugerira LDH-A kao potencijalni terapijski cilj. Pregled

• PLoS ONE: Povećana mikrornk-630 izražavanja u rak želuca je povezana s lošim Ukupna Survival
• PLoS ONE: Utjecaj individualnih i četvrti socioekonomskog statusa na rak želuca Survival