PLoS One: Klinikopatológiai jelentősége és prognosztikus Laktát-dehidrogenáz A Expression olyan gyomorrákos betegek

absztrakt katalógusa

Bevezetés katalógusa

LDH-A, az enzim felelős átalakítására piruvát tejsavvá, kimutatták, hogy akár szabályozott számos ráktípus, és ad okot agresszívabb viselkedés szabályozásával proliferáció és az anti-apoptózis. Azonban a kifejezés a gyomorrák (GC) még nem vizsgálták meg alaposan. A tanulmány célja az volt, hogy tisztázzuk a kifejezés és potenciális hatásának LDH-A GC. Katalógusa

Módszerek katalógusa

Megvizsgáltuk LDH-A expresszió immunhisztokémiai GC tissue microarray (TMA), valamint a Western blot friss GC szövetekben és sejtvonalakban. Prognosztikai értékét és korreláció más klinikopatológiai faktorokkal értékeltük. Mi transzfektált siRNS be GC-sejtek ellen LDH-A. LDH-A-t analizáltuk Western-blot és a valós idejű RT-PCR-rel. A sejtnövekedés értékeltük in vitro és in vivo. A laktát és az ATP termelés sejtek esetében. Katalógusa

Eredmények katalógusa

szignifikánsan magasabb volt az LDH-A expresszió karcinóma, mint a nem daganatos nyálkahártya (NNM). Volt egy pozitív korreláció LDH-A kifejezés az életkor, a szövettani típus és nyirokcsomó-metasztázisok. Túlélési analízis igazolta, hogy a magas expressziója LDH-A GC-ben jár alacsonyabb a teljes túlélés (OS). Amikor rétegzett Lauren minőségű és szövettani osztályozás, jelentősége megjelent diffúz típusú és differenciálatlan típusú GC. A többváltozós elemzés a LDH-A expresszió GC volt független prognosztikai kockázati tényezője OS (kockázati arány = 1,829, 95% CI 1,375-2,433, p < 0,0001). Specifikus siRNS ellen LDH-A GC sejtvonal retardált sejtnövekedés mind in vitro és egér modellekben. LDH-A kiütés is csökkent laktát és ATP termelését GC sejtekben. Katalógusa

Következtetések katalógusa

A vizsgálat azt mutatta, onkogén szerepére LDH-A GC. LDH-A kifejezés független prognosztikai kockázati tényező GC betegek és akár szabályozott kifejeződését LDH-A lehet prediktív rossz eredmények diffúz típusú és differenciálatlan típusú GC. Eredményeink azt javasolta, hogy az LDH-A lehet egy potenciális terápiás célpont a gyomorrák.

bevezető hivatkozás: Sun X, a Sun Z, Zhu Z, Guan, H Zhang J., Zhang Y, et al. (2014) Klinikopatológiai jelentősége és prognosztikus Laktát-dehidrogenáz A Expression gyomorrákban szenvedő betegek. PLoS ONE 9 (3): e91068. doi: 10,1371 /journal.pone.0091068 katalógusa

Vágó: Anthony W. I. Lo, a kínai University of Hong Kong, Hong Kong katalógusa

Beérkezett: augusztus 12, 2013; Elfogadva: február 7, 2014; Megjelent: március 7, 2014 katalógusa

Copyright: © 2014 Sun et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Forrás: Ez a tanulmány ben támogatták a kutatási projektek Liaoning tartomány Tudományos és Technológiai Minisztérium (No. 2007225017, No. 2009225011-2 és No. 2011415052), valamint tudományos és technológiai projektek Shenyang város (sz F11-264-1-19). A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa

Bevezető

a metabolikus tulajdonságai rákos sejtek jelentősen eltérnek azoktól a normális sejtek, például rákos sejtek preferenciálisan hasznosítani glikolízis helyett mitokondriális oxidatív foszforiláció még oxigén jelenlétében; ez a jelenség ismert, mint a Warburg hatás [1], [2], [3]. A meglepően magas aránya megkezdésére glükóz és a laktát termelést daganatok oxigén jelenlétében vezetett Warburg a feltételezés, hogy az aberráns metabolizmus lehet az oka a sok rák [2]. Azonban az az előnye a metabolikus átalakulás ruházza a rákos sejtek nem tisztázott [4], [5]. A közelmúltban, a felfedezés a kapcsolatot onkogének és a metabolikus folyamatok vezetett újjáéledése érdeklődés Warburg munkája. Egyre több bizonyíték van arra utal, hogy az adaptáció aerob glikolízis ráksejtek elősegítheti a rákos szaporodását [5]. Rák anyagcsere alatt volt kiterjedt kutatás a reményben, felfedezni az új hatékony terápiák a rák. Katalógusa

LDH-A, egy kulcsfontosságú enzim, amely fontos szerepet játszik az utolsó lépésben a Warburg hatás átalakításával piruvát laktáttá . A különféle típusú humán rákok, a kifejezés a LDH-A-t felülszabályozott [6], [7]. Ebben nyelőcső laphámrák, LDH-A volt, akár szabályozott rákos szövetek és elősegítette a túlélés a tumorsejtek [8]. Továbbá, az LDH-A jelentették, hogy fokozza a növekedést és a migráció a gyomorrák-sejtek [9]. Mindazonáltal, az állapot és a funkció LDH-A gyomorrák (GC) még mindig ismeretlen. Katalógusa

Ebben a tanulmányban megvizsgáltuk expresszióját LDH-A nagy csoportjában a GC példányok és korrelál a expresszió klinikai patológiai paraméterek és a teljes túlélés (OS). Eredményeink azt mutatják, hogy ez a kifejezés LDH-A volt, akár szabályozott klinikai gyomorrák mintákat, és a fehérje expresszió korrelált az életkorral és szövettani osztályozása. Ezen túlmenően azt találtuk, hogy a magas LDH-A manifesztáció társult rosszabb prognózist GC betegeknél. Mindezzel együtt, tanulmány kimutatta az onkogén funkció LDH-A gyomorrák és azt javasolta, LDH-A, mint egy új, potenciális prognosztikai faktor és potenciális terápiás célpont. Katalógusa

Anyagok és módszerek katalógusa

A betegek

a jelen vizsgálatban 264 beteg GC aki követte kuratív műtét 2006 januárjától 2007. május első kapcsolt kórház kínai Orvostudományi Egyetem. A csoport tagjai a 194 férfi és 70 nő, átlagéletkoruk 59 (tartomány 29-81) év volt. Egyik betegnél a kemoterápia vagy a sugárkezelés a műtét előtt. Nyomon követési információ gyűlt össze az összes betegnél. Katalógusa

Etikai Nyilatkozat katalógusa

Az etikai jóváhagyást ez a kutatás nyert Kutatásetikai Bizottság a Kínai Orvostudományi Egyetem, Kína. Minden beteg nyújtó daganatos szövet, valamint a normál gyomor szövetminta aláírt egy beleegyező nyilatkozatot megelőző műtéti eltávolítása a gyomorrák, hogy e kutatás elvégzésére. Minden állat vizsgálati eljárások összhangban voltak a National Institutes of Health Guide a Care and Use of Laboratory Animals and szerint végeztük az intézményi etikai irányelvek. Ezeket a laboratóriumi állatokat vásárolt Shanghai Branch Center, Institute of Laboratory Animal Science, Kínai Orvostudományi Akadémia Science (más néven Shanghai CAS, bizonyítvány száma: SCXK [Hu] 2003-0003). Minden vizsgálati eljárást összhangban végzik az intézményi előírásoknak a gondozás és a laboratóriumi állatok felhasználását, és a protokollok által jóváhagyott intézményi Animal Care and Use Committee Kínában Orvostudományi Egyetem, Shenyang, Kína. Minden erőfeszítést tettek arra, hogy minimálisra csökkentsék a szenvedést. Katalógusa

A szövetminták és Pathológiai katalógusa

Minden pácienseredetű paraffinba ágyazott Gyomorrák minták (n = 264) és illesztett NNM példányok (2 cm-re a carcinoma n = 209) gyűjtöttünk sebészi eltávolítás és archivált alatt protokollok által jóváhagyott az etikai bizottság az első kapcsolt kórház kínai Orvostudományi Egyetem. Friss gyomor karcinóma és a szomszédos NNM összegyűjtöttük és lefagyasztottuk -80 ° C-ig fehérje extrakciót homogenizálás RIPA lízis pufferben. A szövettani diagnózis és egyéb mikroszkopikus jellemzők is megerősítette patológusok és a TNM stádium minden gyomorrák szerint értékeltük az Unió nemzetközi rákkontroll (UICC) rendszerrel mértékét tumor terjedését. Szövettani struktúrát gyomorrák fejeztük Lauren osztályozás és az Egészségügyi Világszervezet (WHO) osztályozása. Továbbá, a tumor mérete, mélysége invázió, és nyirokrendszeri meghatároztuk. Katalógusa

Sejtvonalak és tenyésztési katalógusa

Az emberi gyomor rákos sejtvonalak MKN28 (jól differenciált), AGS, SGC-7901 (közepesen differenciált ), MGC803 (gyengén differenciált), valamint a humán normál gyomor sejtvonal GES-1 vásárolt a sejtbank kínai Tudományos Akadémia. Öt sejtvonalakat RPMI 1640-ben (Hyclone, Logan City, USA), kiegészítve 10% magzati borjúszérummal (FBS). Minden A sejtvonalakat 5% CO _{2 párásított atmoszférában 37 ° C-on.}

Tissue Microarray (TMA) és immunhisztokémiai

reprezentatív területek szilárd tumorok és a szomszédos NNM azonosítottunk a HE festett metszeteken a kiválasztott esetek és egy 1,5 mm átmérőjű szövet core per donor blokkot vágtunk ki, és át a címzett blokk maximum 200 (10 × 20) pálcák segítségével egy 1,5 mm átmérőjű lyukasztó eszköz. Miután újra megolvad szakaszok (4 mm vastag) kerültek egymás vágni minden szövet microarray blokk, HE festéssel végeztünk TMA megerősítését tumor és a nyálkahártya szöveti. Immunhisztokémiai elemzést végeztünk TMA szakaszok, kukta közvetített antigén-visszanyerés végeztünk citrát-pufferrel (pH = 6,0) 10 percig. Metszeteket 1:300 hígításával LDH-A (izom alegység) Rabbit monoklonális antitest (epitomics) egy éjszakán át 4 ° C-on, majd inkubáljuk kecske anti-egér vagy anti-nyúl Envision rendszer plusz-HRP-t (Dako Cytomation) számára 30 percen át szobahőmérsékleten keverjük. Öblítés után háromszor PBS-ben 10 percig minden egyes, a metszeteket DAB 1 percig, ellenfestjük Mayer hematoxilinnel, dehidráltuk, tisztítottuk és szerelve. Kihagyása a primer ellenanyagot használtunk negatív kontrollként.

Western-blot analízis

A fehérjék koncentrációját a mintákban kivont szöveti minták és a sejt-vonalak segítségével radioimmun kicsapással assay lízispufferben alkalmazásával határoztuk meg Bradford-reagenssel ( Sigma) alkalmazásával a gyártó utasításai szerint. A denaturált proteint elválasztjuk egy nátrium-dodecil-szulfát (SDS) -poliakrilamid gél gél (10% akril-amid), és polivinilidén-fluorid membránok (Millipore, Bedford, MA), amelyet ezután blokkoltuk 5% zsírmentes tej Tris-pufferolt sóoldattal (pH = 7,5). Az immunoblot a membránt inkubáltuk egy éjszakán át LDH-A (izom alegység) Rabbit monoklonális antitest (1:1500) (epitomics), 4 ° C-on. Aztán, hogy öblítjük által TBST és inkubáljuk szekunder antitesteket 15 percig. Jelek detektálására kemilumineszcenciás (Pierce, Rockford, IL). Katalógusa

A nyomon követés után Surgery katalógusa

A 264 beteg átesett gastroctomy vetettük alá, hogy lezárja a klinikai megfigyelés, például a mellkasi /hasi /medencei Komputertomográfiás (CT) képalkotás, CEA szint, és a vérvizsgálat a 2-3 hónapos időközönként és évente gasztroszkópia. A nyomon követés összhangban volt National Comprehensive Cancer Network (NCCN) Practice Útmutató a gyomorrák. A teljes túlélés (OS) aránya definiáltuk az intervallum a kezdeti műtét halálra. A befejezési időpont a követéses vizsgálat lefolytatására az elemzés volt június 29, 2012. katalógusa

értékelése immunhisztokémiai festéssel katalógusa

immunreakciót függetlenül értékeljük a két kutató, akik nem ismerték a betegek gyógyulását. Az értékelés alapja a festés intenzitása. A festési intenzitás LDH-A pontozni 0 (negatív); 1 (gyenge); 2 (közepes); és 3. (erős). A mintákat két csoportra oszthatók aszerint, hogy azok pontszámok: 0 és 1 alacsony expressziós csoport; 2 és 3 magas expressziós csoport. Abban az esetben, ha eltérést pontozás, a lemezeket újra megvizsgálta mind patológusok a mikroszkóp alatt. Katalógusa

Generation kis interferáló (si) RNS Knockdown Stabil sejtvonalak

Ennek alapján az LDH -A szekvencia, shRNS volt a célja a siRNS Cél Finder (Ambion): a nukleotid-szekvenciáját a behelyezett ShLDH-a volt 5'-ATCCAGTGGATATCTTGACCTACG TGGCT-3 '. A sejtvonal által termelt fertőztek sejtek kódolt plazmidot használtuk kontrollként. 10 ug shRNS és 25 ul Lipofectamine 2000 (Invitrogen Life Technologies, Carlsbad, CA, USA) kevertünk össze 1350 ul RPMI-1640 közegben (FBS nélküli), majd az elegyet transzfektáljuk MGC-803 gyomor rákos sejteket. Az elegyet hozzáadjuk egy 25-cm-es ^{2-es tenyésztő lombikban, amelyet előzőleg bevont 1 × 10 6 MGC-803 gyomor rákos sejteket. A tenyésztő tápközeget helyettesítettük komplett RPMI-1640 közegben 6 órán beoltás és 28 órával a transzfekció után, stabil sejt klónt választottunk 2 hétig neomicinnel és analizáltuk immunoblot.}

RNS-extraháló és valós idejű kvantitatív RT-PCR analízis

Teljes RNS-t izoláltunk a sejtekből TRIzol reagens utasításai szerint a gyártó (Invitrogen), és 1 ng RNS-t feldolgozott közvetlenül cDNS felhasználásával reverz transzkripciós készlet (Promega, Madison, Wisconsin), a gyártó utasításai szerint. Amplifikációs reakciók végeztük egy 20 ul térfogatban 0,2 ul SYBR Green (Bio-Rad, Hercules, Kalifornia). Ezeket a reakciókat hajtottunk végre három párhuzamossal egy BioRad iCycler (Bio-Rad). p-aktin használtunk belső kontrollként. A használt primerek a következők voltak: LDH-A, 5'-CTCCTGTGCAAAATGGCAAC-3 '(forward) és 5'-CCTAGAGCTCACTAGTCACAG-5' (reverz); andβ-aktin, 5'-GATCATTGCTCCTCCTGAGC-3 '(forward) és 5'-ACTCCTGCTTGCTGATCCAC-3' (reverz). A specificitás a valós idejű kvantitatív PCR-t ellenőriztük olvadási görbe analízisen, és agaróz gél elektroforézissel.

MTT és telepképző assay

sejtnövekedés elemzés, azonos számú sejtet oltottunk le 48 nos lemezek. A teljes sejtek számát mértük minden nap az MTT assay alkalmazásával a gyártó protokollja (Roche Applied Science). A telepképzési analízisben, azonos számú kontroll sejtek és sejtek silencing expresszióját LDH-A beoltunk 60 mm-es tenyésztő edénybe három példányban. A sejteket 7 napig tenyésztjük, Cell, növekedés leállt, 7 nap után a tenyészetben eltávolításával a közepes és hozzáadtunk 0,5% kristályibolya oldatot 20% -os metanolban. Festés után 5 percig, a rögzített sejteket mostuk foszfáttal pufferolt sóoldattal (PBS), fényképezett, és az oldott 1% -os SDS-t. A telepek számát minden csoportban megszámoljuk. Katalógusa

tumorgenézisre Analitika katalógusa

Az MGC-803 GC sejteket xenograftjait termelt 6-hetes nőstény csecsemőmirigy nélküli csupasz egerekben (Vital River Laboratories, Peking, Kína) befecskendezése után 5 × 10 ^{6 sejt 0,2 ml PBS-t a szárnyon minden egér (6 egér /csoport). A tumorképződés értékelték minden héten. A tumor térfogatát kiszámítottuk a következő képlet szerint: V (mm 3) = a × b 2/2 (ahol A a legnagyobb felületi átmérő és b a legkisebb felületi átmérő).}

mérése tejsav koncentrációját és az ATP termelés

48 óra eltelte után az inkubálás, laktát, és ATP-szinteket a tenyészközegben mértük a kereskedelemben kapható assay kit (vásárolt BioVision [Mountain View, California], és a Roche Applied Science -kal). Eredmények korrigáltuk a végső sejtszám számát. Katalógusa

Statisztikai elemzés katalógusa

Minden statisztikai analízist az SPSS 17.0 (SPSS Inc., Chicago, IL). A teljes túlélés sebesség meghatározásához a Kaplan-Meier, egy esemény van definiálva, mint a halál a rákkal kapcsolatos oka. A log-rank teszttel azonosítani közötti különbségek túlélési görbék. Az egyváltozós elemzés szerint két farkú χ ^{2 teszt vagy kétmintás t tesztet használtunk a statisztikai összehasonlításokat. És Cox-féle arányos-kockázat modellt alkalmaztunk, egyváltozós analízis és többváltozós elemzés azonosítani jelentős tényezőket korrelált prognózist. Minden elemzés, csak a P értékek < 0,05 értéket tekintettük szignifikánsnak. Katalógusa}

Eredmények katalógusa

LDH-A expressziója humán gyomorkarcinóma Tissue katalógusa

osztályozni festett metszeteken a TMA GC és NNM szövet magok azok citoplazmatikus immunhisztokémiai festés intenzitása ellen LDH-fehérje. Az olvasható minták 264 gyomorrákos és 209 illesztett NNM. A tipikus diffúz citoplazmatikus festődés a fehérje megtalálható sok gyomor karcinóma és a normál gyomor szövetek, amint az 1. ábrán látható, a rák szövetben mutatott pozitív citoplazmatikus festés 201 esetben (76,14%), míg között 209 esetben NNM, 131 esetben ( 62,68%) volt az LDH-A pozitív expresszió (1. táblázat). Annak vizsgálatára, az expressziós mennyiséget LDH-A GC mintát a kifejezés a LDH-A-t vizsgáltuk Western-blot analízissel, hét véletlenszerűen kiválasztott tumorok és a párosított normális szövetekben. Up-regulációját LDH-A volt megfigyelhető a GC mintákban képest a párosított normál szövetekben (ábra. 2A). Ezek a vizsgálatok azt mutatták, hogy az LDH-A szignifikánsan emelkedett a rákos minták képest szomszédos, nem rákos szövetekben (1. táblázat p = 0,002).

expressziós analízise LDH-A gyomor Sejtvonalak

Western blot analízist végeztünk a gyomor sejtvonalakban. A western blot kimutatta, hogy kifejeződése LDH-A szignifikánsan erős rosszul differenciált MGC803 és mérsékelten differenciált AGS; gyenge közepesen differenciált SGC-7901 és a jól differenciált MKN28; és hiányzik a normál humán gyomor sejtvonal GES-1 (ábra. 2 b). katalógusa

Klinikopatológiai változók 264 esetei gyomorrák katalógusa

Mivel a 2. táblázatban összefoglaltuk, azt találtuk, hogy fokozott expresszióját LDH-a szignifikánsan összefüggött az életkorral betegek (p = 0,004), és a szövettani típus (p = 0,02), nyirokcsomó-metasztázis (P = 0,043), de nem a nemek (P = 0,072), a daganat mérete (P = 0,086) , mélysége invázió (P = 0,328), nyirokér invázió (P = 0,738), lauren fokozat (P = 0,152), illetve TNM (P = 0,417). katalógusa

Survival Analysis katalógusa

Az 5 -ÉV OS arány a 264 beteg primer gyomorrák 46% (122/264), 142 haláleset során megfigyelt követési időszak. A medián követési idő 50 hónap (9-78 hónap). Túlélési analízis Kaplan-Meier túlélési görbe és a log-rank teszt bizonyította, hogy a betegek nagy expressziós LDH-A tumor szövetben szignifikánsan rosszabb teljes túlélés, mint betegek tumor alacsony LDH-A expresszió (P < 0,001 ábra. 3) . Azzal a céllal, hogy felfedezzük a lehetséges kapcsolatát kifejezése LDH-A és a prognózis között különböző típusú GC, megvizsgáltuk a betegek túlélése a különböző alcsoportokban: a statisztikai elemzést végeztünk rétegzett Lauren minőségű és szövettani osztályozás, jelentősége megjelent diffúz típusú GC és differenciálatlan típusú GC (P < 0,001), de nem a bél (P = 0,179), illetve differenciált (P = 0,104) is. A többváltozós analízist a Cox-féle arányos kockázati modell minden a szignifikáns változók az egyváltozós elemzésben. A 3. táblázat mutatja a jelentőségét: Korrigált az egyéb változót, az eredményeket a többváltozós elemzés azt mutatta, hogy az LDH-A expresszió (P < 0,001), nyirok- invázió (P = 0,046), és Lauren állapot (p = 0,001), TNM-beosztása (P = 0,006), de nem kor (p = 0,053), a daganat mérete (P = 0,111), mélysége invázió (P = 0,598), nyirokcsomó-metasztázis (P = 0,089) vagy szövettani típusa (P = 0,674), függetlenek voltak prognosztikai kockázati tényezők OS (3. táblázat). katalógusa

kiütése LDH-a siRNS Csökkenti az Expression LDH-a MGC-803 katalógusa

a western blot eredmények és a valós idejű RT -PCR, a kifejezés a LDH-a csökkent hatékonyan a LDH-a-siRNS expresszáló MGC-803 sejtekben. Amint a 4. ábrán látható, kifejezése LDH-A fehérje vizsgáltuk Western-blot-alig volt kimutatható, és a PKM2 mRNS-szint csökkent 74% -kal a LDH-A-siRNS expresszáló MGC-803 sejtekben. LDH-A expresszió változatlan maradt mind GC sejtvonalak és a sejtvonalak egy kontroll siRNS. Katalógusa

kiütése LDH-A gátolta a GC sejtvonalak MGC-803 katalógusa

Annak megállapítására, tumor sejtnövekedés, használtuk az MTT és telepképződést vizsgálatokban. Az MTT assay, hangtompító expresszióját LDH-A gátolja az elterjedése MGC-803 sejtek (ábra. 5a, B). A növekedés a MGC-803-t expresszáló sejtek LDH-A siRNS -kal csökkent 64%, 168 óra után inkubálás képest, hogy a kontroll sejtek (P < 0,05). Következetesen, hangtompító expresszióját LDH-A gyengített a rögzítéstől független növekedését MGC-803 sejtek (ábra. 5c, d). LDH-A knockdown ezekben a sejtekben megakadályozta kolónia képződését, vagyis, lehorgonyzástól függő növekedés állt vissza. Ezek az eredmények tovább azt az onkogén szerepét LDH-A GC rák. Katalógusa

kiütése ldhA gátolta a tumorgenézisre xenograft egérmodellben katalógusa

Ebben a tanulmányban megvizsgáltuk a tumorigenikus kapacitása LDH-A in vivo. A tumorképző in vivo MGC-803 siLDH-A sejtek és a kontroll sejtek értékelték SC injekcióval sejtek athymiás csupasz egerekben. Összhangban az in vitro vizsgálatok, hangtompító expresszióját LDH-A drámaian csökkentette a tumorképző LDH-A sejtek tumor méretét. Minden egyező tumorsejteket siLDH-A tumorok szignifikánsan kisebb, mint a kontrollok (ábra. 5e, f). Katalógusa

kiütése LDH-A siRNS Csökkenti laktát és ATP termelés Humán GC sejtvonalak MGC- 803 katalógusa

Mivel az LDH-a kulcsenzimének átalakításának piruvát a laktát, megváltoztatását expresszióját GC sejtekben sem érinti laktát termelés és az energia anyagcserét. A teszt ezt a hipotézist, míg a laktát és az ATP termelés közötti LDH-A siRNS knockdown sejtek és kontroll sejteken 48 órás inkubáció. Amikor az LDH-A-t leütött által siRNS, a képesség, a sejt termelje a laktát és az ATP-t, drasztikusan csökkent 61,5% és 63,3% 48 óra, illetve (6a., B).

Megbeszélés

1920-Warburg első kimutatták, hogy a rákos sejtek felveszik magasabb glükózt, mint a normális sejtek és energiát szinte aerob glikolízis az energiájuk követelmény, hogy alkalmazkodjanak a környezeti korlátok, mint a szakaszos hipoxia [10], [11]. Azonban ez a metabolikus változás nem egyszerűen egy alkalmazkodás a hipoxiás környezetben, de aktív mobil stratégia jelentős előnyt proliferációs és rosszindulatú. Most Vegran és munkatársai katalógusa. [12] arról számoltak be, hogy a laktát közvetlenül módosítják a fenotípus endothel sejtek, esetleg egyben fontos mechanizmus, amellyel a daganatok irányítani a saját vérellátását keresztül érrendszeri formaképződés. Mivel a reaktív oxigéngyökök (ROS) természetes melléktermékek mitokondriális légzés, azt javasolták, hogy az átalakítás a glükóznak laktáttá lehetne megvédeni a rákos sejteket az oxidatív stressz [13]. A közelmúltban, az eredmények arra utalnak, hogy a visszaállító normális oxidatív foszforiláció a rákos sejtek nem csak gátolja a sejtek növekedését és szaporodását, hanem rontja a metasztatikus képességét rosszindulatú sejtek [14]. Ezért fontos a konstitutív ki-szabályozott aerob glikolízis nemrég ismerte a progresszió, de a molekuláris mechanizmusok, ami ezt a fenotípus és járulékok rák kialakulásához nem ismertek. Katalógusa

LDH-A, az enzim felelős átalakítja piruvát be laktát, fontos szerepet játszik a folyamatban a glikolízis. Számos kutatási arról számoltak be, hogy a kifejezés a LDH-A lehetne által indukált számos onkogének [15]. Ezek a jelentések alátámasztják azt az elképzelést, hogy az LDH-A indukció kritikus a onkogén aktivitás ezen onkogének a rákos sejtekben.

Az onkogén aktivitását LDH-A számoltak be nyelőcső-karcinóma, hasnyálmirigy-rák és gyomorrák-sejtek [ ,,,0],8], [9], [16]. Yongjie Zhang és munkatársai katalógusa. számolt be, hogy az LDH-A csökkentés elnyomja a tumorképző intesztinális típusú gyomorrák (ITGC) sejtek által mTOR gátlása miatt csökken Oct4 [17]. És Zhiyu Wang és munkatársai katalógusa. számolt be, hogy az LDH-hangtompító elnyomja mellrák tumorképző indukálása útján oxidatív stressz által közvetített mitokondriális út apoptózist [18]. Itt megvizsgáltuk formalin-fixált, paraffinba ágyazott tumorszövet 264 beteg expressziójának LDH-A és jelenteni a jellemzése LDH-A expresszió emberi GC, és bemutatja az összefüggést klinikopatológiai paraméterekkel és a betegek prognózisát. Először azt találtuk, hogy a kifejezés a LDH-A emelkedett volt GC mintát összehasonlítva az egyező normális szövetekben. Ez az eredmény összhangban van korábbi tanulmány hogy különböző típusú humán rákok, a kifejezés a LDH-A-t felülszabályozott [4], [5]. A tumor szövetben, a tanulmány kimutatta, hogy az LDH-A kifejezés erősen korrelál a GC klinikopatológiai jellemzők: életkor, nyirokcsomó áttétek és szövettani osztályozása. Tehát azt javaslom, hogy a fel-szabályozott LDH-A expresszió hozzájárulhat elterjedése és fejlesztése GC. Másodszor, tovább elemezzük prognosztikai szerepét LDH-A teljes túlélését betegek GC. Kaplan-Meier analízis szignifikáns összefüggést a LDH-A expresszió és betegek teljes túlélése, valamint azokat, akiknek erősebb LDH-A festés alacsonyabb volt a túlélési arány. Ha a statisztikai elemzést végeztünk rétegzett Lauren minőségű és szövettani osztályozás, jelentősége megjelent diffúz típusú GC és differenciálatlan típusú GC, de nem bél vagy differenciált is. Specifikus siRNS ellen LDH-A végeztünk MGC803 sejtekben és retardált sejtnövekedést in vitro és egér modellekben. LDH-A kiütés is csökkent laktát és ATP termelését GC sejtekben. Ezért, az eredmények arra alapul, hogy az LDH-A volt független prognosztikai faktora OS, és jelezte, hogy az LDH-A talán egy onkogén szerepe a daganat kialakulásában, különösen a diffúz típusú GC vagy differenciálatlan típusú GC betegeknél. Összhangban a tanulmány azt jelentette, hogy bontani a kifejezés a LDH-A a humán hepatocelluláris karcinóma sejtek apoptózist indukálnak [8], és alulszabályozása LDH-A növelheti a ROS-termelés és a citoszol Ca2 + jelzést, amely csökkentette a belső mitokondriális membránpotenciál és vezetett a megjelenése citokróm C hepatocelluláris karcinóma sejtek. katalógusa

Mindezzel együtt, tanulmány azt mutatja, hogy akár szabályozott kifejeződését LDH-a nyújt gyomorrák sejtek növekedését előnye. Ugyanakkor, a mi tanulmány arra utal, LDH-A, mint potenciális terápiás célpont.

• PLoS One: Fokozott mikroRNS-630 expressziója gyomorrákban társul rossz általános Survival
• PLoS One: a hatás az egyéni és környéke társadalmi-gazdasági helyzet a gyomorkarcinóma Survival