PLOS NËMMEN: β, β-Dimethylacrylshikonin Induces Mitochondrie ofhängeg Apoptosis duerch Erk Passerelle an Human Gastric Cancer SGC-7901 Cells

Wat VerfÜgung

β, β-Dimethylacrylshikonin, ee vun den aktive Komponente vun der Wuerzel dovu vun Lithospermum erythrorhizon, posses antitumor Aktivitéit. An dëser Etude, diskutéiert mir de molekulare Mechanisme vun β, β-dimethylacrylshikonin am apoptosis vun SGC-7901 Zellen. β, β-Dimethylacrylshikonin reduzéiert der Zell Nuetsvolen vun SGC-7901 Zellen zu engem dose- an Zäit-ofhängeg Art a entschlof Zell apoptosis. β, β-Dimethylacrylshikonin Behandlung an SGC-7901 Zellen verwandelt-reglementéiert d'Expressioun vun XIAP, cIAP-2, an BCL-2 a weider-reglementéiert d'Expressioun vun BAK an Bax an ëmmer de Verloscht vun Kënschtlech Membran Potential an release vun cytochrome c . Ausserdeem, β, β-dimethylacrylshikonin Behandlung Nerve Aktivatioun vun caspases-9, 8 an 3, an Rëss vun puer dovun (Kréien-ribose) polymerase (PARP), déi duerch pretreatment mat der Pan-caspase inhibitor Z-VAD-FMK ofgeschaf gouf . β, β-Dimethylacrylshikonin phosphorylation vun extracellular Signal-reegelen kinase (Erk) zu SGC-7901 Zellen entschlof. U0126, eng spezifesch MEK inhibitor, konnt de Erk Aktivatioun vun β, β-dimethylacrylshikonin an abrogated β, β-dimethylacrylshikonin -induced apoptosis. Eis Resultater bewisen, dass β, β-dimethylacrylshikonin inhibited Wuesstem vun gastric Kriibs SGC-7901 Zellen vun Erk sécher Passerelle Pinguin, a gëtt en Hiweis fir preclinical a Krankheete Evaluatioun vun β, β-dimethylacrylshikonin fir gastric Kriibs Therapie. VerfÜgung

Fro: Shen XJ, Wang HB, Ma XQ, Chen JH (2012) β, β-Dimethylacrylshikonin Induces Mitochondrie ofhängeg Apoptosis duerch Erk Passerelle an Human Gastric Cancer SGC-7901 BTS. PLoS NËMMEN 7 (7): e41773. Doi: 10.1371 /journal.pone.0041773 VerfÜgung

Redakter: Salvatore V. Pizzo, Herzog University Medical Center, Vereenegt Staate vun Amerika VerfÜgung

Arnaque: Mäerz 1, 2012; Akzeptéiert: 25 Juni, 2012; Publizéiert: 27. Juli 2012 zu

Copyright: © Shen et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung

Funding:. Dës Aarbecht war déi Subventioune vun Zhejiang Provincial Natural Science Foundation vun China bis X-QM (LY12H28005), an der Wëssenschaft Grënnung vun Zhejiang Chinese Medical University zu H-kéint (2011ZY05) ënnerstëtzt. D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung

Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung

Aféierung VerfÜgung

Gastric Kriibs ass eent vun de aggressiv malignant erhéijen, obwuel mat der Entwécklung vun radiotherapy, Chimiotherapie an biotherapy, staarkt Säit Effekter forcéierten sinn [1], also, méi effikass antitumor Drogen mat manner Säit Effekter fir d'Behandlung si vun gastric Kriibs waren. VerfÜgung

Lithospermum erythrorhizon ass eng wichteg Chinese Kraiderbestëmmung. Et huet e puer aktiv Komponenten: Deoxyshikonin, Isobutyrylshikonin, Acetylshikonin, Isovalerylshikonin, β, β-Dimethylaerylshikonin (. Lalumi 1A) an shikonin [2]. An traditionell chinesesch Medezin, geet et méi biologesche Funktiounen och anti-microbial, anti-demagogesch, anti-entholl, immun Regulatioun an Anti-HIV Eegeschafte [3] - [6]. D'Anti-entholl Effet vun shikonin a sengem Projet goufen éischt duerch hir Aktivitéiten géint entholl Wuesstem zu murine Sarcoma-180 [7] bewisen. Shikonin geet Effekt net just duerch entholl Zellen direkt Märder, mä och duerch entholl angiogenesis inhibiting [8]. Studien Teamchef shikonin entschlof apoptosis zu Mënsch malignant melanoma, BBC Kriibs, cervical Kriibs, haett Kriibs a Liewer Kriibs, an sou op [9] - [13]. Mä, huet et manner Säit Effekter a méi Schutzpatrounin Auswierkungen op Mënsch normal Zellen [14], [15]. Hsu PC et al zougedréckt datt shikonin gefouert apoptosis duerch up-Regulatioun vun p27, p53, Bax an Ugrëff-Regulatioun vun BCL-2 an BCL-XL zu Mënsch colorectal carcinoma COLO 205 Zellen [16] zu Zell. D'entholl Invasioun vun shikonin zu puer Kriibs Zellen inhibited kann duerch d'verwandelt-Regulatioun vun NF-κB-mediated MMP-9 Ausdrock [17]. Shikonin induces och apoptosis via Ros Produktioun vun hepatocellular carcinoma [12]. Singh F et al fonnt och dass Shikonin phosphorylated Niveau vun EGFR, Erk an FAQ tyrosine kinases a fräi intracellular Niveau vun apoptosis-Zesummenhang Proteinen erofgaangen, déi epidermoid carcinoma Zellen ëmmer apoptosis ze forméieren [18]. VerfÜgung

rezenten Beweiser zougedréckt datt β, β-dimethylacrylshikonin hat groussen Effet anti-entholl op hepatocellular carcinoma vun caspase-3 activating [19]. Mä, wéi den Effet vun β, β-dimethylacrylshikonin op mënschlech Zellen gastric Kriibs huet net schonn gemellt an de molekulare Mechanismen sinn nach net gutt verstanen hunn. Sou, an de Moment studéieren, gëtt Mir Effet vun β, β-dimethylacrylshikonin op mënschlech gastric Kriibs Zell SGC-7901 a seng wëssenschaftlech sécher diskutéieren fir besser de Mechanismus vun β verstoen, β-dimethylacrylshikonin op gastric Kriibs. VerfÜgung

Material a Methoden VerfÜgung

Material an Reagents VerfÜgung

SGC-7901 Zellen sech aus Chinese Akademie vun de Wëssenschaften Zell Bank vun Type Kultur Collection (Shanghai, China) kaaft. β, β-Dimethylacrylshikonin war vun Tokyo chemesche Industrie (Tokyo, Japan) kaaft. MTT an DAPI sech aus Calbiochem (San Diego, CA, USA) kaaft. U0126 war vun Zell sécher (Boston, MA, USA) kaaft. Damme-caspase inhibitor (Z-VAD-FMK) war vun Beyotime Institut Déi (Shanghai, China) kaaft. Antibody fir cytochrome c war vun Santa Cruz Déi (Santa Cruz, CA, USA) kaaft. Antibodies géint Erk, phospho-Erk, BCL-2, BCL-XL, XIAP, cIAP-2, survivn, Bax, BAK, eenalecn caspase-9, eenalecn caspase-3, eenalecn PARP an β-actin sech aus Zell sécher kaaft ( Boston, MA, USA). FITC-Annexin V Apoptosis Detektioun Kit war vun Becton Dickinson (San Diego, CA, USA) kaaft. VerfÜgung

Zell Kultur a Zell Prolifératioun assay VerfÜgung

SGC-7901 Zellen zu RPMI 1640 mëttelfristeg cultured sech mat 10% an et Bovine serum (Hyclone, ol), a bei 37 ° C an enger humidified Atmosphär vu 5% CO _{2 haten. Dann zu engem 96-Meter Plat zu enger definitiver Usammlung vun Zellen sech 5 géint × 10 3 Zellen /gutt an incubated zu RPMI 1640 mëttelfristeg 10% FCS fir 24 h wouvun, nodeems datt, goufen Zellen mat der uginn Konzentratioun behandelt vun β, β-dimethylacrylshikonin fir 24 h an 48 h. Mëttel- gouf geläscht a frësch mëttelfristeg gouf zesumme mat 20 μl vun MTT Léisung (5 mg /ml) fir all gutt dobäi. No 4 h incubation, war 150 μl vun DMSO fir all gutt dobäi. D'Placke waren um Wellelängt vun 570 nm benotzt Varioskan Flash Multimode Reader (Thermo Wëssenschaftlech, USA) liesen. Véier reduplicate Wells sech fir all Behandlung benotzt, an Experiment dräi Mol widderholl. VerfÜgung}

Morphological Ännerungen VerfÜgung

SGC-7901 Zellen an d'Wuel vun enger sechs-gutt zappen plazéiert goufen. No 24 h Zell Kultur, waren se mat β, β-dimethylacrylshikonin fir d'uginn Zäit Perioden behandelt. D'bewosst Wirklechkeet huet mat enger Faarf microscopy observéiert. (Modell IX70; Olympus, Tokyo, Japan) VerfÜgung

DAPI (4 ", 6-diamidino-2-phenylindole) staining VerfÜgung

SGC-7901 Zellen sech an der och vun enger sechs-gutt Schossel geluecht. No 24 h Zell Kultur, waren se mat β, β-dimethylacrylshikonin fir d'uginn Zäit Perioden behandelt, waren duerno Zellen fir 30 min an kal acetone fix, an mat DAPI (1 mg /ml) fir 30 min incubated. D'apoptotic Käre zeechent intensiv Kierchefënster benotzt unisse microscopy fonnt. (Modell IX71; Olympus, Tokyo, Japan) VerfÜgung

Annexin V /PI assays fir apoptosis VerfÜgung

Fir Annexin V /PI assays, Zellen no de Protokoll d'mannufacturer (BD PharMingen, San Diego, CA, USA) sech mat AnnexinV-FITC an PI geschriwwen, a fir apoptosis duerch onkontrolléiert cytometry bewäert. Kuerz, 1 × 10 5 Zellen sech zweemol mat PBS gewäsch, an mat 5 μl vun AnnexinV-FITC a 5 μl vum PI zu 500 μl bindend Prellbock fir 15 min bei Raumtemperatur am däischteren Kierchefënster. D'apoptotic Zellen sech mat BD FACS Schwësterchen Software (BD Biosciences, Franklin sin, NJ) alles. Annexin V staining déngt als eng Moossnam vun phosphatidylserine externalization an Zellen datt si Annexin V + /PI -. Vertrieden fréi apoptotic Zellen VerfÜgung

Kilometréierung vun Kënschtlech Membran Potential VerfÜgung

BTS ( 5 × 10 5 Zellen /ml) mat oder ouni β, β-dimethylacrylshikonin (10 μmol /L) fir fir 24 h an Kierchefënster mam JC-1 (BD MitoScreen JC-1 Kit, Becton Dickinson, USA) behandelt goufen 15 min bei 37 ° C. Kënschtlech Membran Potential war vun Flux cytometry (FACSCanto II, Becton Dickinson, USA) fonnt. VerfÜgung

Western Bloting Analyse VerfÜgung

BTS sech mat der uginn Konzentratioun vun β, β-dimethylacrylshikonin fir d'uginn Zäit behandelt zu RPMI 1640 mëttelfristeg mat 10% FCS. D'Zellen sech am Äis-kal PBS, an der Zell dovu ware bereet zu Ripa gefiermt mat proteinase inhibitor Cocktail aus Calbiochem (San Diego, CA) gesammelt. D'FAQ Konzentratioune vun der Zell lysates sech mat gelies-Luede Prellbock fir 10 min bei 100 ° C alles a gekacht. Echantillon 30 μg vun insgesamt FAQ wouvun waren op 10% SDS-polyacrylamide gels an transferéiert ze PVDF Membran (Millipore, Temecula, CA) electrophoresed. Nom Transfert, goufen d'Membran an TBST gespaart (TBS 0,1% Tween 20 wouvun) mat 5% UHT Mëllech fir 2 h, gefollegt vun incubation Nuecht op 4 ° C mat passenden Primärschoul antibodies. Nom Wäschen dräi Mol am TBST, goufen d'Schläimhait fir 2 h bei 37 ° C mat 1:5000 horseradish peroxidase-conjugated passenden Secondaire antibodies incubated. Endlech, goufen d'Schläimhait mat der verstäerkter chemiluminescence erkennen System (Immun-Star WesternC Kit, Bio-Rad, USA) visualized. VerfÜgung

Immunofluorescence staining VerfÜgung

Immunofluorescene staining war benotzt der subcellular Verdeelung vun analyséieren cytochrome c zu SGC-7901 duerch β, β-dimethylacrylshikonin entschlof Zellen. Zellen cultured op steril Glas coverlips sech zu kal acetone fir 10 min fest. No permeabilized mat 0.3% Triton X-100 fir 20 min bei Raumtemperatur, Zellen sech fir 30 min op 3% Bovine serum albumin blockéiert an Nuecht op 4 ° C mat anti-cytochrome c antibody (1:30) incubated. No wäschen waren dräi Mol am PBS, SGC-7901 Zellen mat Alexa Fluor 488-conjugated Secondaire antibody ausgezeechent. DAPI gouf fir nuklear staining notéiert. Microscopic Analyse huet mat enger unisse microscopy (Modell IX71; Olympus, Tokyo, Japan) gesuergt. VerfÜgung

statistique Analyse VerfÜgung

Rapport Data sinn déi mengen ± normale deviation (Fils) vun dräi onofhängeg Experimenter. Si waren duerch eng-Manéier Analyse vun Varianz (ANOVA) bewäert. Differenze waren um p &Si besteet gegrënnt;. 0,05 VerfÜgung

Resultater VerfÜgung

β, β-Dimethylacrylshikonin bremst Nuetsvolen vun SGC-7901 Zellen VerfÜgung

Fir d'cytotoxic Effet vun β ze bestëmmen, β-dimethylacrylshikonin op gastric Kriibs Zellen. SGC-7901 Zellen huet mat 2,5, behandelt 5, 7.5, 10 μmol /L vun β, β-dimethylacrylshikonin fir 24 h an 48 h, déi reduzéiert Nuetsvolen vun behandelt Zellen mat β, β-dimethylacrylshikonin war 92,41 ± 6,06%, 76,49 ± 3,18%, 67,19 ± 1,82%, an 61,76 ± 0,18% respektiv um 24 h am Verglach mat der Auto-behandelt Zellen (Figebam. 1B). Fir d'48 h Behandlung, war Zell Nuetsvolen 52,03 ± 9,45%, 38,99 ± 1,43%, 30,70 ± 1,58%, an 27,4 ± 0,31% (Figebam. 1B). D'Halschent Bäschten inhibitory Konzentratioun (IC _{50) vun β, β-dimethylacrylshikonin fir SGC-7901 Zellen war 11,04 μM an 2,89 μM um 24 h an 48 h bzw.. VerfÜgung}

β, β-Dimethylacrylshikonin induces SGC -7901 Zellen apoptosis VerfÜgung

SGC-7901 Zellen éischt mat β, β-dimethylacrylshikonin behandelt goufen, huet Resultater d'Zellen morphological Ännerungen op Behandlung mat 10 μmol /L β, β-dimethylacrylshikonin Verglach mat der onbehandelt Kontroll markéiert mécht fir 24 h. An der Presenz vun β, β-dimethylacrylshikonin, SGC-7901 Zell Zuel reduzéiert an d'Zellen gouf Ronn weider a kleng an Form, an aus der Plack detaching Verglach mat den negativen Kontroll Grupp (Figebam. 2A). β, β-dimethylacrylshikonin och nuklear Kondensatioun mat intensiver DAPI staining Verglach zu der Nuklearenergie vun Kontroll SGC-7901 Zellen fir 24 h (Figebam. 2B). VerfÜgung

Fir erauszefannen, ob cytotoxity vun β, β-dimethylacrylshikonin Équipe apoptosis entschlof mir der apoptotic Effet vun β, β-dimethylacrylshikonin zu SGC-7901 Zellen vun Flux cytometry fir Annexin V an propidium Kaliumiodid (PI) staining bewäert. De Prozentsaz vun fréi apoptotic Zellen (Annexin V + /PI -) war 1,6%, 7,2%, 18,1%, 24,3%, an 24,4% an Äntwert op den Auto, 2,5, 5, 7.5, an 10 μmol /L β, β-dimethylacrylshikonin bzw. fir 24 h (Figebam. 2C). Spannen, De spéiden apoptotic Zellen (Annexin V + /PI +) waren an SGC-7901 Zellen (29.7% mat 7.5 μmol /L an 33,6% mat 10 μmol /L β, β-dimethylacrylshikonin Behandlung vill fräi () Figebam. 2C). VerfÜgung

β, β-dimethylacrylshikonin Kënschtlech Evenementer induces mat apoptosis verbonne zu SGC-7901 Zellen VerfÜgung

BCL-2 Famill Proteinen och pro-apoptotic Proteinen (Bax, BAK an Offer) an Anti-apoptotic Proteinen (BCL-2, BCL-XL, cIAP-2, XIAP an survivin). Si kënnen d'Verëffentlechung vun afgerappt Faktoren aktivéieren oder inhibit déi zu der Aktivatioun vun caspase-3 an an PARP an der Ausféierung vun apoptosis [20]. Fir d'apoptosis-Zesummenhang Proteinen, pro-apoptotic Proteinen (Bax, BAK) an Anti-apoptotic Proteinen (XIAP, cIAP-2, BCL-2, BCL-XL, survivin) waren déi Western blotting der SGC-7901 z'entdecken fonnt Zellen sech mat verschiddene Konzentratioun vun β, β-dimethylacrylshikonin behandelt (0, 2,5, 5, 7.5, an 10 μmol /L) fir 24 h. D'Resultater uginn dass β, β-dimethylacrylshikonin den Ausdrock vun XIAP, cIAP-2, BCL-2 (Figebam. 3A) erofgoen. Allerdéngs huet den Ugrëff-Regulatioun vun XIAP an BCL-2 manner ausgeschwat während der verwandelt-Regulatioun vun cIAP-2 war zimlech dramatesch an Portioun-ofhängeg. Et war kee groussen Ännerung vun BCL-XL an survivn zu SGC-7901 Zellen. Ob β, kann β-dimethylacrylshikonin well den Ausdrock vun der pro-apoptotic Proteinen (Bax, BAK) war och iwwerpréift. Mir hu fonnt, datt β, β-dimethylacrylshikonin den Ausdrock vun BAK zu enger Portioun-ofhängeg Manéier fräi mee hu wéineg Effet op Bax (Figebam. 3B). VerfÜgung

Caspase Famill Proteinen si kritesch Enzymen apoptosis ze exekutéieren. Dorënner caspase Familljememberen, caspase-3 ass e Schlëssel executioner fir apoptosis zu mammalian Zellen [21]. Et kann duerch Doud receptor-mediated extrinsic caspase-8 Passerelle an der Mitochondrie ofhängeg-caspase-9 Ausriichtung Passerelle [22], [23] ageschalt ginn. Fir sech d'molekulare Mechanismus vun der apoptosis, SGC-7901 Zellen mat β, β-dimethylacrylshikonin a Réckstänn vun Western blotting Analyse fir den Ausdrock Ännerung vun caspase-3, caspase-8 an caspase-9, Resultater weisen eng behandelt ze weider verstoen Morphium-ofhängeg Héicht vun eenalecn caspase-3, eenalecn caspase-8 an caspase-9 an β eenalecn, β-dimethylacrylshikonin Zellen behandelt. PARP Rëss, aner bekannt Charakteristik vun apoptosis, gouf och zu β, β-dimethylacrylshikonin behandelt Zellen (Figebam. 3C) fonnt. Kënschtlech Viagra entschlof apoptosis déi oft d'Konsequenz vun enger Diminutioun vun Kënschtlech Membran Potential ass. Et ass un der apoptotic Passerelle gin Mëtt gewisen. D'SGC-7901 Zellen mat oder ouni β, β-dimethylacrylshikonin (10 μmol /L) fir 24 h behandelt goufen, huet Resultater Mitochondrie Membran Potential vun 98,6% op 56,9% erofgaangen ass no β, β-dimethylacrylshikonin dem SGC- behandelt gouf 7901 Zellen (Figebam. 3D). Mir iwwerpréift nächst der Verdeelung a subcellular Lokalisatioun vun cytochrome c ze fannen, ob d'Mitochondrie Passerelle an β, β-dimethylacrylshikonin entschlof apoptosis Équipe ass. No SGC-7901 Zellen mat β, β-dimethylacrylshikonin (10 μmol /L) fir 24 h behandelt goufen, war d'Verdeelung vun cytochrome c mat engem confocal Laser microscope visualized, huet de β, β-dimethylacrylshikonin behandelt Zellen blurred Wirklechkeet (Figebam. 3) am Géigesaz zu der selbstverständlech kloer Optrëtt an der Kontroll Zellen, beweist de br vun cytochrome c aus der Mitochondrie an der Zytoplasma an β, β-dimethylacrylshikonin Zellen behandelt. VerfÜgung

weider fir d'Roll vun caspase Aktivéierung festzestellen zu β, β-dimethylacrylshikonin- entschlof apoptosis, behandelt mir SGC-7901 Zellen mat Pan-caspase inhibitor Z-VAD-FMK (10 μmol /L) ier β, β-dimethylacrylshikonin Behandlung. D'Pan-caspase inhibitor Z-VAD-FMK pretreatment ofgeholl den Ausdrock vun eenalecn caspase-3, eenalecn PARP a reduzéiert β, β-dimethylacrylshikonin-entschlof apoptosis (Lalumi 3F &. G). Dës Donnéeë weisen datt Kënschtlech-mediated caspase CASCADE Passerelle eng ganz wichteg Roll an β spillt, β-dimethylacrylshikonin-entschlof apoptosis. VerfÜgung

β, β-Dimethylacrylshikonin induces nohalteg Erk Aktivatioun vun SGC-7901 Zellen VerfÜgung

Et war dës déi MAPK zu puer Evenementer vun bewosst Stress an stimuli Zell apoptosis [24] entschlof Équipe sécher, [25]. Mir iwwerpréift also den Aktivéierungscode vu Erk, JNK an p38 der β, β-dimethylacrylshikonin Behandlung. Als zu Lalumi gewisen. 4A & B, de phosphorylation Niveau vun Erk an JNK sech anscheinend fir 2 h an Äntwert op d'β, β-dimethylacrylshikonin Behandlung fräi, an der phosphorylation Niveauen Schatzkummer enger Portioun-ofhängeg täteg. Nieft, déi phosphorylation Niveau vun Erk leschten zwanzeg-véier Stonnen. Allerdéngs goufen no der β, β-dimethylacrylshikonin Behandlung (Figebam. 4C) kee groussen Ännerunge vun phosphorylation Niveau vun p38 observéiert. Dës Resultater ugeholl, datt eng nohalteg Aktivatioun vun der Erk Équipe ass an β, β-dimethylacrylshikonin-entschlof apoptosis zu SGC-7901 Zellen. VerfÜgung

D'Erk sécher Passerelle ass am β, β-dimethylacrylshikonin entschlof apoptosis zu SGC-7901 Équipe Zellen VerfÜgung

Mir iwwerpréift dann ob der β, β-dimethylacrylshikonin-entschlof nohalteg Aktivatioun vun der Erk sécher Passerelle eng Roll an apoptosis spillt. Als zu Lalumi gewisen. 5A & B, Western blot assay Teamchef U0126 (eng spezifesch MEK inhibitor) inhibited nohalteg Erk Aktivéierung an Rëss vun caspase-3, PARP an β, β-dimethylacrylshikonin Behandlung während der Pan-caspase inhibitor Z-VAD-FMK keen Effekt op β hat, β-dimethylacrylshikonin-entschlof Aktivatioun vun Erk (Figebam. 5D). Zousätzlech, reduzéiert U0126 β, β-dimethylacrylshikonin-entschlof apoptosis zu SGC-7901 Zellen (Figebam. 5C). Dës Resultater weisen, datt β, β-dimethylacrylshikonin-entschlof apoptosis zu SGC-7901 Zellen vun der nohalteger Aktivatioun vun der Erk sécher Passerelle mediated sinn. VerfÜgung

Diskussioun VerfÜgung

Shikonin dësem Projet ginn d'aktiv Komponenten vom Chinesesch herbal Lithospermum erythrorhizon [5]. Dës awer verspriecht Drogenofhängeger Kandidate wéi se Multiple anticancer Auswierkunge vun VIVO an kënschtlech [5], [26] an hunn gemellt goufen. Ënnert der Komponente vun Lithospermum erythrorhizon, β, β-Dimethylaerylshikonin ass wichteg anti-entholl Effekter Verglach mat aneren aktive Ingredienten [27]. Wat fir Aktivitéiten Anti-Kriibs, war shikonin-sprachlos Zell apoptosis duerch Aktivatioun vun caspase-ofhängeg Passerelle an vill malignant erhéijen fonnt. An dëser Etude, ze propagéieren mir den Effet vun β, β-dimethylacrylshikonin op mënschlech gastric Kriibs SGC-7901 Zellen. Eis Resultater uginn dass Behandlung vun SGC-7901 Zellen mat β, β-dimethylacrylshikonin e wesentleche cytotoxic Effekt géint SGC-7901 Zellen an enger Portioun an Zäit ofhängeg Manéier gewisen, an β, β-dimethylacrylshikonin entschlof apoptosis zu SGC-7901 Zellen war Siicht vun eng fräi fréi apoptotic Zellen (Annexin V + /PI -). an spéiden apoptotic Zellen (Annexin V + /PI +) VerfÜgung

D'Verhältnis vun anti- an pro-apoptotic FAQ Ausdrock, wéi BCL-2 /Bax, ass wichteg fir d'Aféierungs- vun apoptosis, an et decidéiert de waat Zellen apoptosis [28] zu forméieren. Mitochondrie spillen eng wichteg Roll an der Signal transduction vun apoptosis [29]. D'translocalization vun apoptotic Proteinen aus dem Zytosol, fir d'Mitochondrie féiert zu der Verëffentlechung vun cytochrome c an zweeter Mitochondrie-ofgeleet activator vun caspases duerch eng Ofsenkung vun Kënschtlech Membran Potential [30], [31]. Shikonin gouf apoptosis via Mitochondrie Passerelle an HepG2 Zellen ze induce gemellt [32]. Am Moment studéieren, awer mir dass β, β-dimethylacrylshikonin verwandelt-reglementéiert d'Expressioun vun XIAP, cIAP-2 an BCL-2 a weider-reglementéiert d'Expressioun vun BAK an Bax, an ëmmer de Verloscht vun Kënschtlech Membran Potential an Verëffentlechung vun cytochrome c zu SGC-7901 Zellen, konsequent mat Mitochondrie ofhängeg apoptosis. D'Observatioun vu β, β-dimethylacrylshikonin mediated Aktivatioun vun caspase-9, caspase-3, an nächster Rëss vun PARP, wéi och d'Resultat, datt d'Pan-caspase inhibitor Z-VAD-FMK reduzéiert β, β-dimethylacrylshikonin-entschlof apoptosis zu SGC-7901 Zellen, suggeréiert datt Kënschtlech-mediated caspase CASCADE Passerelle spillt eng wichteg Roll an β, β-dimethylacrylshikonin-entschlof apoptosis. Geholl zesummen, uginn eis Resultater datt β, β-dimethylacrylshikonin reguléieren Ausdrock Niveau vun apoptosis-Zesummenhang Proteinen, bewierkt cytochrome c release an trigs caspase-ofhängeg apoptotic Doud Zell. VerfÜgung

Mitogen-ageschalt FAQ kinases (MAPK) regléieren verschiddenste bewosst Programmer dorënner embryogenesis, Prolifératioun, dat a apoptosis [33]. D'MAPK Famill Proteinen sinn aus dräi FAQ kinases: ERK1 /2 (extracellular Signal-reegelen kinases 1 an 2), JNK (c-Jun N-Uschloss kinase) an p38 [34], [35]. Am Allgemengen, féiert flüchteg Erk Aktivéierung zu Zell Prolifératioun, mä nohalteg Aktivatioun vun Erk ass assoctiated mat dat [36]. Beweiser derbäi seet, datt d'Aktivéierung vun Erk zu apoptosis dréit. Jeong et al. gewisen, datt apoptosis duerch eng Erk-ofhängeg Passerelle [21], [37], [38] kaempferol Kriibs Zell ëmmer ze forméieren. Viru Kuerzem, huet et schonn erwähnt, datt icaritin Wuesstem inhibition an apoptosis zu Mënsch PSMCs via Erk sécher Passerelle induces [39]. Li et al. bewisen, datt Aktivatioun vun RAF /MEK /Erk sécher Passerelle enger kritescher Roll an Kalzium-entschlof apoptosis vun Lëns epithelial Zellen [40] spillt. Hei hu mir fonnt, datt d'nohalteg Aktivatioun vun Erk Équipe ass an β, β-dimethylacrylshikonin-entschlof Wuesstem inhibition an apoptosis zu SGC-7901 Zellen. U0126, eng spezifesch inhibitor vun MEK (de MAPK /Erk kinase), effektiv blockéiert β, β-dimethylacrylshikonin-entschlof Erk Aktivéierung an attenuated β, β-dimethylacrylshikonin-entschlof apoptosis, proposéiert de pro-apoptotic Auswierkunge vun β, β-dimethylacrylshikonin zu SGC-7901 Zelle vun der nohalteger Aktivatioun vun der ERK1 /2 sécher Passerelle mediated. VerfÜgung

an Conclusioun, fonnt mir dass β, β-dimethylacrylshikonin Zell Wuesstem inhibited an entschlof apoptosis zu SGC-7901 Zellen. Mir studéiert och d'Équipe Basisdaten Mechanismen β, β-dimethylacrylshikonin-entschlof apoptosis. Eis Resultater uginn dass β, β-dimethylacrylshikonin-entschlof apoptosis implizéiert an d'Reduktioun vun XIAP, cIAP-2, an BCL-2 FAQ Ausdrock an Aféierungs- vum BAK an Bax FAQ Ausdrock, an ëmmer de Verloscht vun Kënschtlech Membran Potential an release vun cytochrome c zu SGC-7901 Zellen. Eis Resultater bewisen, och dass β, β-dimethylacrylshikonin entschlof apoptosis der Aktivatioun vun caspase-3 bënnt, caspase-8 an caspase-9 an der Rëss vun PARP. Nieft, deelgeholl Erk sécher Passerelle och an β, β-dimethylacrylshikonin-entschlof apoptosis. Eis Resultater uginn dass β, β-dimethylacrylshikonin als potentiell anticancer Agent géint Mënscherechter gastric Kriibs entwéckelt ginn hätt. VerfÜgung

Arbeschterlidder VerfÜgung

Mir géifen fir hir technesch Assistenz H-kéint Merci a mir soen och X -QM a J-HC fir hëllefräich Kommentarer op dëser Manifestatioun. VerfÜgung

• PLOS NËMMEN: Plasma microRNAs, Mir-223, Mir-21 an Mir-218, den Buch vun der Woch D'Biomarkers fir Gastric Cancer Detection
• PLOS NËMMEN: D'Association tëscht Individuell SNPs oder Haplotypes vun MATRIX Metalloproteinase 1 an Gastric Cancer waat, zerstéiert an hätt