Ploche ONE: obehové mikroRNA-26a v plazme a jeho potenciálny diagnostickú hodnotu v rakoviny žalúdka

abstraktné

Pozadie

V posledných desaťročiach veľa štúdií poskytla možnosť cirkulujúcich mikroRNA (miRNA) sú neinvazívnych biomarkerov pre diagnostiku rakoviny. Cieľom našej štúdie bolo zistiť hladiny cirkulujúcich miRNA v tkanivách a plazmy rakoviny žalúdka (GC) pacientmi a vyhodnocovať ich diagnostickú hodnotu.

metódami

Tkanivové vzorky boli odobraté od 85 GC pacientov. Vzorky plazmy boli odobraté z 285 pacientov, GC a 285 spárovaných kontrol. Rozdielne exprimované miRNA boli filtrované pomocou Agilent Human miRNA microarray a TaqMan pole s nízkou hustotou (TLDA) sa súhrnné vzorky, nasleduje overenie kvantitatívne reverznej transkripcie PCR (QRT-PCR). Predoperačné parametre (ROC) krivky boli štruktúrované tak, aby vyhodnotenie diagnostickej presnosti miRNA. Plazmatická hladina Mir-26a v GC pacientov z rôznych štádiách bol porovnávaný.

Výsledky

Štyri miRNA (MIR-26a, MIR-142-3p, MIR-148a, a spätných 195) ukázala, že zhodou okolností došlo k poklesu hladiny v tkanivách a plazme pacientov GC v porovnaní s kontrolami, a ROC krivky boli konštruované tak, aby preukázať, že mier-26a mal najvyššiu oblasť pod ROC krivkou (AUC) 0,882. Okrem toho, mier-26a bola stabilne detekovaný v plazme pacientov GC s rôznymi klinickými charakteristikami.

Záver

Plasma MIR-26a, môže poskytnúť nový a stabilný marker karcinómu žalúdka.

Citácia: Qiu X, Zhang J, Shi W, Liu S, M Kang, Chu H, et al. (2016) obehové mikroRNA-26a v plazme a jej potenciál diagnostickú hodnotu v rakoviny žalúdka. PLoS ONE 11 (3): e0151345. doi: 10,1371 /journal.pone.0151345

Editor: Zheng Li, Union Medical College Hospital Peking, Čína

Prijaté: 29. októbra 2015; Prijaté: 08.02.2016; Uverejnené: 24. marca 2016

Copyright: © 2016 Qiu et al. Toto je článok o otvorenej distribuovaný pod podmienkami Creative Commons Attribution licencie, ktorá umožňuje neobmedzené použitie, distribúciu a reprodukciu v nejakom médiu, za predpokladu, že pôvodný autor a zdroj sú pripísané

Dáta Availability :. Všetky relevantné údaje sú v papiera a jeho podporné informácie súbory

Financovanie :. Táto štúdia bola čiastočne podporovaná Národná prírodná Science Foundation Číny (81230068, 81373091, 81302502, 81302490 a 81473049), Natural Science Foundation v provincii Jiangsu (BK2012842 a BK20130641), kľúč program pre základný výskum Jiangsu provinčného ministerstva školstva (12KJA330002), Špecializovaná Výskumný fond doktorandské štúdium vysokého školstva Číny (20130092120063), Jiangsu provinčné vzdelávacie programy inovácie a podnikanie pre študentov vysokých škôl (201412682004Y ), Jiangsu Provinčný Science and Technology Innovation Team, a Priority akademický program rozvoja Jiangsu vysokých škôl (verejné zdravie a preventívne lekárstvo)

konkurenčné záujmy: .. autori vyhlásili, že žiadne konkurenčné záujmy neexistujú

Úvod

rakovina žalúdka (GC) je jedným z najčastejších nádorových ochorení na svete. Aj keď sa celkový výskyt klesla v posledných rokoch, je štvrtou najčastejšou zhubný nádor (989,000 prípadov) a druhou najčastejšou príčinou úmrtí na nádorové ochorenia (738,000 smrťou) po celom svete [1]. Viac ako 70% prípadov sa vyskytuje v rozvojových krajinách [2]. Najmä u pacientov v pokročilom štádiu stále demonštrujú extrémne chudobné miera prežitia [3] dátum .to, diagnóza GC je založený na klinických symptómov, a tam sú niektoré testy použiť techniky, ako je endoskopia a vyšetrenie prehĺtací akt. Avšak, všetky tieto prístupy ukázali niektoré chyby na detekciu GC. Okrem toho sú niektoré nádorové markery v sére Napríklad karcinoembryonálneho antigénu (CEA), sacharidy antigén 19-9 (CA19-9) a sacharidov antigénu 72-4 (CA72-4), a existujú určité obmedzenia citlivosti a špecifickosti pre GC screening [4]. Z tohto dôvodu budeme venovať viac pozornosti na objavovanie román, spoľahlivých a neinvazívne biomarkery GC.

mikroRNA (miRNA) sú triedu krátkych (20 ~ 25 nukleotidov), nekódovacích jednovláknové RNA [5]. To je široko veril, že miRNA môžu podieľať na regulácii génovej expresie, čo vedie k mRNA pre tlmenie hluku, ako sú cieľové štiepenie, translačný inhibícia, a mRNA rozklad [6]. Hromadia sa dôkazy uviedla, že miRNA boli zapojení do niekoľkých patofyziologických procesoch a viesť k zásadným zmenám v rôznych ochorení. Zhang et al
. zistené, že mier-26a indukovanú apoptózu endotelových a uvedené terapeutický potenciál MIR-26a pre aterosklerózu spojenú s apoptotické bunkovej smrti [7]. Leonov et al
. popísané inhibícia MIR-132 vyústil v high AGO2
výraz, ktorý bol zapojený do angiogenézy a zápalu v priebehu aktivácie primárnej endotelových buniek [8]. Početné štúdie ukázali, že miRNA hrajú nepostrádateľné role na vzniku nádorov, či už v úlohe onkogény alebo tumor supresorových génov [9]. Niekoľko miRNA uvádzajú, že súvisí s rakovinou pomocou miRNA profily expresie [10-12]. Bohužiaľ, vzorky tkaniva je ťažké získať. Detekcia miRNA v tkanivách nie je realistické v klinickej aplikácii.

Navyše, stále viac dôkazov, ukázali, že cirkulujúca miRNA sú odolné voči štiepenie RNázou a stabilne zistiteľný v plazme a sére jednoduchosť merania [13-14]. Predchádzajúce štúdie potvrdili, že existencia miRNA v krvi a expresie spojené s rakovinou, vrátane veľkého B-bunkového lymfómu, rakoviny hrubého čreva, rakoviny močového mechúra a prsníka [15-18]. Tieto štúdie spoločne poskytujú základ pre cirkulujúce miRNA fungujú ako nových biomarkerov pre skríning rakoviny.

Mnoho štúdií ukazujú, hladina expresie miRNA v plazme nie je úplne v súlade s údajmi v nádoru. MIR-378 výrazne poklesli GC tkanive a niekoľkých bunkových líniách [19], ale MIR-378 boli významne up-regulované v sére GC pacientov [20]. Vzhľadom k tomu, rovnako ako MIR-486, MIR-486 môže fungovať ako tlmiacich nádory miRNA v žalúdku nádoru [21], ktoré boli nadmerne vystavený v sére GC pacientov [22]. V súčasnej dobe niekoľko sérum /plazma miRNA môže odlíšiť od pacientov GC s ovládacími prvkami, však toto nemôže predstavovať expresiu miRNA v tkanive. Ak sa nám podarí zistiť miRNA a to ako rozdielne vyjadrené v žalúdočnej tkanive rakoviny a plazmy, mal by mať väčší klinický význam.

Ak chcete zistiť, či miRNA rozdielne exprimované ako v tkanivách a plazme, sme použili dve mikročipov na obrazovku miRNA , V dvoch fázach overovacích, štyri kandidátske miRNA boli významne down-regulovaná v nádorových tkanivách a vzorky plazmy QRT-PCR. Naša štúdia ukázala, že mier-26a sa významne znížila stabilne v plazme pacientov s karcinómom žalúdka a môže rozlíšiť pacientov s rakovinou žalúdka z ovládacích prvkov, s dobrou citlivosťou a špecifickosťou. To bol predpovedaný byť sľubnou cirkulujúcej biomarker rakoviny žalúdka v bežnej klinickej diagnózy.

materiáloch a metódach

Štúdium dizajn a predmety

Táto štúdia bola schválená ústavná preskúmanie board of Nanjing lekárskej univerzity, a každý účastník za predpokladu, že podpísaný písomný informovaný súhlas. Všetky subjekty boli prijatí na Yixin nemocnice rakoviny, nádorového nemocnice Nantong, Huai-An Prvá ľudová nemocnice a druhý Pridružené nemocnice Nanjing lekárskej univerzity od marca 2006 do mája 2013 v provincii Jiangsu, Čína.

nádoru tkanív a normálneho tkaniva (umiestnený > 5 cm od nádoru) bola získaná z 55 pacientov, ktorí podstúpili chirurgický zákrok a GC snap-zmrazí v kvapalnom dusíku. Vzorky plazmy boli odobraté od 285 pacientov s GC, a 285 pohlavné a plasma zodpovedajúceho veku od zdravých jedincov boli odobraté ako ovládacie prvky. Všetci pacienti boli preukázali diagnózu histologicky GC pri počiatočnej diagnóze, a žiadny z nich dostali liečebné postupy, napríklad chemoterapiu alebo rádioterapiu. klasifikovaný sme štádium nádoru v súlade s tumor-node-metastázy (TNM) staging systému Únie pre medzinárodný boj proti rakovine (UICC). Klinické charakteristiky účastníkov štúdie sú uvedené v tabuľke 1.

Štúdia Viacstupňový bol navrhnutý tak, aby identifikovať plazmatické miRNA ako biomarkerov pre pacientov GC (obr.1). Vo fáze zisťovaní, rozdielne exprimované miRNA boli hodnotené v párových vzoriek tkaniva z 5 GC pacientov (S1 tabuľka) Agilent Human miRNA microarray (v12.0, Agilent Technology, CA, USA). Vzorky plazmy od 5 GC pacientov (tabuľka S2), ktorých pohlavie, vek klinické stavy priradí sa vzorky tkanív a 5 zdravých kontrol boli podrobené TLDA (V2.0; Applied Biosystems, Foster mesto, CA, USA) na identifikáciu odlišne exprimovaných miRNA , V tréningovej fáze sa významne zmenené miRNA boli najprv hodnotené QRT-PCR v 50 párových vzoriek tkanív a 80 vzoriek GC séra a 80 spárovaných kontrol. Následne sa rozdielne exprimované miRNA medzi tkanív a séra boli ďalej skúmané v ďalších 400 účastníkov, ktorý zahŕňal 200 GC pacientov a 200 kontrol.

izolácie RNA z plazmy a tkanív

Vzorky krvi v oddelené vákuové kocky boli stočené v 3000 rpm počas 10 minút pri teplote 4 ° C. Získali sme supernatant a uloží ich na -80 ° C. Pred začatím izolačné postup, sme pridali do konečnej koncentrácie 10 ^{-4 pmol /ul syntetického C
. elegans
MIR-39 (ciel-MIR-39) (Takara, Japonsko) pre každú vzorku, aby sa konanie biologickú variabilitu. RNA bola extrahovaná z 100 ul plazmy za použitia QIAGEN miRNeasy Mini Kit (Qiagen, Valencia, CA, USA). Celková RNA z tkanív bola izolovaná pomocou TRIzolu Reagent (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA).}

čipy a QRT-PCR

profilovanie sa vykonáva za použitia Agilent Human miRNA microarray (v12.0 , Agilent Technology, CA, USA) a TaqMan nízkej hustote array (V2.0, Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). Pre celkové RNA izolačné z tkanív, QRT-PCR bola vykonaná s použitím SYBR (R) PrimeScript ™ RT-PCR Kit (Takara Bio). Podrobný popis experimentálnych protokolov je uložený v S1 dát.

štatistickej analýzy

Párové vzorky tkaniva sa porovnávali za použitia rank sum Wilcoxonova testu. Neparametrické Mann-Whitney U test bol vykonaný na stanovenie význam v plazmatické hladiny miRNA medzi skupinou rakoviny a zdravú skupinou. Prijímač-operátor charakteristické (ROC) krivky a plochy pod ROC krivkami (AUC) boli získané posúdiť detekcie GC potenciál miRNA. Štatistické analýzy boli obojstranný test, a P Hotel < 0,05 bola považovaná za štatisticky významnú. Všetky štatistické analýzy boli vykonané s SPSS softvér verzie 16.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).

Výsledky

Discovery kandidátnych biomarkerov podľa mikročipov

Použili sme dva microarray platformy pre miRNA analyzovať a porovnať miRNA expresie vzory z dvoch rôznych podmienok. TLDA analýza bola dokončená potvrdiť kandidátskym miRNA úrovne expresie. bolo zistené celkovo 142 miRNA v plazme. 65 z celkového počtu miRNA boli zvýšené a 77 boli u pacientov GC v porovnaní s kontrolami sa znížil

Pre identifikáciu kandidátov miRNA expresie miRNA medzi pacientmi a kontrolnou skupinou boli potrebné, aby zodpovedali dve kritériá :. (1) výraz deregulácia v nádorovom tkanive je v súlade s výsledkami TLDA [23]; a (2) sú plazmatické hladiny Mirna preukázanie ≥ 2-násobný rozdiel medzi pacientmi a kontrolnou skupinou. Nakoniec, štyri down-regulované v plazme miRNA (tj MIR-26a, MIR-142-3p, mier-148a a mier-195) boli vybrané ako kandidáti pre validáciu päsť stupňa (tabuľka 2).

Potvrdenie miRNA pomocou QRT-PCR

za prvé, výsledky analýz mikročipy boli potvrdené s použitím párovaných tkaniva, GC plazmy a zodpovedajúce ovládacie prvky pre tieto štyri miRNA pomocou QRT-PCR. Naše výsledky ukazujú, že tendencia výsledkov QRT-PCR bol podobný mikročipov analýzy, a to buď v tkanivách alebo v plazme. Dej preukázané, že hladiny expresie štyroch miRNA boli štatisticky významné v GC tkanivách ( P
= 0,001, P
= 0,002, P Hotel &0,001 a P
= 0,003 pre mier-26a, MIR-142-3p, mier-148a a mier-195, v tomto poradí, obr 2A-2D). Do tej doby, sme vykonali QRT-PCR pre overenie výrazy miRNA boli down-regulované iným nezávislým súborom 80 vzoriek plazmy GC a 80 zdravých kontrol. Vyjadrenie štyroch miRNA v GC plazme sa významne znížili v porovnaní s tými, u kontroly (všetci P Hotel < 0,001, obr 2E-2H). Hladiny vyjadrenie štyroch miRNA v plazme boli konzistentne nižšie, v porovnaní s tkanivových vzoriek.

validácia Veľkoplošné plazmatických mikroRNA v GC pacienti

Na overenie stability plazmy výrazov miRNA, sme vykonali QRT-PCR vo veľkom meradle 200 GC plazmy a 200 spárovaných s rakovinou bez kontroly. Súhlasný s výsledkami tréningové fázy, úrovne expresie štyroch miRNA ukázali významné down-reguláciu v plazme pacientov GC (všetci P Hotel < 0,001, obr 3), čo naznačuje, že tieto štyri miRNA v plazme môže slúžiť ako kandidát biomarkerov pre diagnostiku GC.

Vyhodnotenie diagnostické potenciálu miRNA pre GC

Aby bolo možné posúdiť účinnosť vyššie štyroch miRNA ako diagnostické markery pre detekciu GC, ktoré sme vykonali ROC krivku analýza na každej miRNA. Obrázok 4 ukázala, že ROC krivky štyroch kandidátskych miRNA preukázané plazmatické miRNA boli hodnoty rozlišovať pacientov GC od normálnych kontrol. Hodnota cut-off o 0,651 rovnala citlivosti + špecifickosti-1, ktorý bol maximálny pre mier-26a (relatívna expresie normalizovaného bunka-39). Pre mier-26a bola senzitivita 83,6% a špecificita bola 81,5% s AUC 0,882 (95% interval spoľahlivosti = 0.847-0.916) (obr 4A). V hodnote 0.585 cut-off pre mier-142-3p bola senzitivita 74,4% a špecificita bola 84,1% s AUC 0,839 (95% interval spoľahlivosti = 0.800-0.879) (obr 4B). Tieto hodnoty AUC boli 0,842 (95% CI = 0,803 - 0,882) a 0,765 (95% CI = 0,717 až 0,812) pre mier-148a a mier-195, resp. Citlivosť a špecifickosť boli 75,4% a 83,1% pre mier-148a, 69,2% a 75,4% pre mier-195, v danom poradí (obr 4C a 4D). Kombinácia ROC analýza krivka sa získa AUC hodnotu 0,872 (95% interval spoľahlivosti = 0,836 až 0,908) (obr 4E).

Ak chcete overiť hodnotu diagnózy hostiteľa miRNA pre GC, sme kombinovali niektorý z plazmy miRNA a vykonáva krivky ROC ako je znázornené na S1 a S2 na obr. Tieto údaje naznačujú, že mier-26a, ktorý ukázal najväčšiu schopnosť pre rozlišovanie pacientov GC z kontrol, by mohol pôsobiť ako vhodný biomarker pre detekciu GC.

Diskusia

Napriek výraznému zníženiu úmrtnosti GC v uplynulom desaťročí, úmrtnosť je stále vyššia ako mnoho iných bežných malignít [24]. V posledných rokoch sa nádorové biomarkery Napríklad CEA, CA19-9, CA74-2 s obmedzenou citlivosťou a špecifickosťou boli široko používané pre diagnostiku, monitorovanie a prognóze GC [4]. Celkovo vzaté, je tu veľký význam pre diagnostiku GC hľadať konkrétnejšie a citlivých biomarkerov.

Tkanivové miRNA ako na biomarkery diagnózu a prognózu boli najprv navrhoval. Bandres et al
. bolo zistené, že mier-451 sa down-regulované v primárnom žalúdku a kolorektálneho karcinómu, a down-regulácia MIR-451 bolo spojené s nízkou DFS a nízke celkové prežívanie [25]. Xiao et al
. identifikované MIR-106a ako dramaticky up-regulované miRNA v GC [26]. Tiež zistili, že expresia MIR-106a bol významne súvisí s štádiom nádoru, lymfatické, vzdialených metastáz a invázie. Avšak, mnoho typov pacientov s rakovinou neboli schopní podstúpiť operáciu v klinickej praxi, kedy sú diagnostikované. Spoliehanie sa na chirurgické časti a invazívne postup pre odber vzoriek tkaniva silne obmedzila použitie miRNA v tkanive diagnostike rakoviny [27]. Diagnostická Kvalita týchto metód je neuspokojivá.

stále evidentnejšie, tiež znamená, že cirkulujúca miRNA sú spojené s rakovinou [28-30]. Nedávna štúdia uvádza, že miRNA boli detekovateľné v plazme a stabilné pri izbovej teplote a /alebo viac zmrazenie-rozmrazenie procesov [31]. Početné správy sa rozsvieti, že užitočnosť cirkulujúce miRNA ako nové neinvazívne biomarkerov rakoviny, ako je kolorektálny karcinóm [32], rakoviny prsníka [33-34] a renálny karcinóm [35].

V našej štúdii sme metodicky premietaný profilu miRNA v párových tkanivách a v plazme u pacientov GC a zdravých kontrol. Plazmy, získané z 5 prípadoch a 5 kontroly boli zmiešané dohromady, aby vytvorili dva súhrnné vzorky a boli použité pre TLDA. Tento spôsob zlučovania vzoriek je široko používaný postup, ktorý bolo preukázané, že sú spoľahlivé pre profilovanie [36-38]. Porovnávanie TLDA analýzu a výsledok mikroskopické sústavy tkanív, boli vybrané štyri miRNA (MIR-26a, MIR-142-3p, mier-148a a mier-195) znížená GC.

Potom sme identifikovali štyri kandidátske miRNA podľa QRT-PCR v dvoch etapách, a zistilo sa, že hladiny expresie štyroch miRNA klesol v plazme pacientov GC, ktoré boli v súlade s výrazmi v tkanivách. ROC krivka, tiež známy ako krivka citlivosti, je široko uznávaný ako spôsobu vyhodnotenia diagnostického testu. To je tiež integrovaný ukazovateľ odráža citlivosť a špecifickosť kontinuálne premenné. V tejto štúdii, ROC analýza ukázala, že kombinácia štyroch miRNA nebol účinnejší ako MIR-26a jednotlivo. sám MIR-26a by mohol dosiahnuť dobrý diagnostického účinnosť u pacientov, ktorí rozlišovacích GC od zdravých kontrol s AUC 0,882 (citlivosť = 83,6% a špecifickosťou = 81,5%). Predchádzajúce štúdie Schneider et al
. zobrazí sa sérové ​​hladiny CEA, CA19-9 a CA72-4 v GC objasnený citlivosť 45,5% pre CA19-9, 23,8% pre CEA a 60,7% pre CA72-4 [39]. Jednalo sa o oveľa menej, než je citlivosť MIR-26a. Okrem toho, úroveň expresie Mir-26a v plazme bola významne nižšia u pacientov GC, a nepreukázal žiadny význam s progresiou GC (S3) Obr. Z tohto dôvodu, MIR-26a mal veľký potenciál ako diagnostický plazmové biomarker GC.

V posledných desaťročiach, predchádzajúce štúdie nepreukázali overiť, či či miRNA expresie plazma alebo sérum môže predstavovať hladinu tkaniva. V porovnaní s týmito štúdiami, naša štúdia mala vlastné funkciu z dôvodu nasledujúcich dôvodov. Najprv sme vybrali miRNA, ktoré vyjadrené odlišne a to ako v tkanivách a plazme, porovnaním výsledkov dvoch čipov. To malo za následok lepšie možnosti na identifikáciu uskutočniteľná diagnostické markery. Ďalej sme zistili, že expresia MIR-26a významne znížená u pacientov s GC a udržiava stabilné v plazme (S3 Obr).

Výsledky ukázali, že v plazme expresie Mir-26a bola významne nižšia u pacientov GC v porovnaní so zdravými kontrolami ( P Hotel &0,05), ktorý ukázal, stabilitu u pacientov s rôznymi GC klinického stavu. Nadol regulácia plazmy MIR-26a expresie môže znamenať pravdepodobnosť diagnostiky GC. Preto MIR-26a môže byť najlepšou voľbou slúžiť ako potenciálny biomarker pre GC. Deng et al
. ukázali, že hladiny Mir-26a v GC tkanivách boli viac výrazne poklesla, než sú v nenádorových tkanív QRT-PCR [40]. Oni tiež preukázané, že mier-26a inhibuje rast nádoru a metastáz čiastočne zacielenia FGF9
in vivo. Jednalo sa s našimi výsledkami. Tieto zistenia potvrdila, že miRNA-26a v plazme by mohla byť potenciálny diagnostický marker pre GC.

Avšak, obmedzenie našej štúdie je to, že vzorky pre mikroskopické sústavy tkanív a pre TLDA neboli z týchto pacientov a naše veľkosti vzorky pre mikročipov boli relatívne malé. Ďalšia analýza čipov na rovnakých pacientov a potvrdenie zväčšenej vzorke musí byť použitá ako nový skríningový nástroj pre GC v bežnej klinickej využitie. Okrem toho sme si nevybrali up-regulované miRNA kvôli tomu, že tam neboli up-regulované miRNA, ktorých násobné zmeny boli ≥ 2. Vybrali sme kandidátske miRNA, ktoré boli hojne vyjadrené v plazme, aby sa ubezpečil o pravdepodobnosti vyšetrenie v klinickej praxi.

Závery

Stručne povedané, naša štúdia ukázala, štyri down-regulované miRNA, MIR-148a, MIR-142-3p, mier-26a a mier-195, v GC pacientov. Dôležitejšie je, že plazma expresie MIR-26a bola významne znížená a stabilné u pacientov s rakovinou žalúdka. Výsledkom je, že mier-26a môže poskytnúť neinvazívne a stabilné biomarker žalúdočné diagnostiky a skríningu rakoviny.

Podporné informácie
S1 dáta. Experimentálne protokoly microarrays a QRT-PCR
doi: 10,1371. /Journal.pone.0151345.s001
(DOC)
S1 Obr. ROC krivka analýza kombinácia dvoch miRNA medzi štyrmi kandidátskymi miRNA.
Kombinácia Mir-26a a mier-142-3p (A), kombinácia MIR-26a a mier-148a (B), kombinácia mir-26a a mier-195 (C) a kombinácie Mir-142-3p a mier-148a (d), kombinácia MIR-142-3p a mier-195 (E) a kombinácia vonkajších spätných 148a a mier-195 (F) poskytla najväčší AUC
doi :. 10,1371 /journal.pone.0151345.s002
(DOC)
S2 obr. ROC krivka analýza kombinácia troch miRNA medzi štyrmi kandidátskymi miRNA.
Kombinácia MIR-26a, mier-142-3p a mier-148a (A), kombinácia MIR-26a, MIR-142-3p a mier-195 (B), kombinácia MIR-26a, mier-148a a mier-195 (C) a kombinácie MIR-142-3p, mier-148a a mier-195 (D) sa získa najväčší AUC.
doi: 10,1371 /journal.pone.0151345.s003
(DOCX)
S3 obr. . Plazmatická hladina MIR-26a u pacientov s karcinómom žalúdka rozdelených podľa klinického stavu
Krabicové grafy ukázal plazmatické hladiny MIR-26a v 200 zdravých kontrol a 200 pacientov s karcinómom žalúdka u iného klinického stavu
doi :. 10,1371 /journal.pone.0151345.s004
(DOCX)
S1 Tab. Klinické charakteristiky skríningu tkaniva subjekty podľa Agilent Human miRNA microarray
doi: 10,1371. /Journal.pone.0151345.s005
(DOC)
S2 Tab. Klinické charakteristiky skríningu v plazme subjekty podľa TLDA
doi: 10,1371. /Journal.pone.0151345.s006
(DOC)

Poďakovanie

Sme hlboko vďační za účasti všetky subjekty, ktoré prispievajú k tomuto výskumu.

• Ploche ONE: Zvýšená expresia a biologickú funkciu ubikvitin-špecifické proteázy 42 v žalúdočnej Cancer
• Ploche ONE: Súvislosť medzi Tooth Loss a rakoviny žalúdka: Meta-Analysis of pozorovacích štúdií