PLOS ONE: Circulating microARN-26a dans le plasma et sa valeur diagnostique potentielle dans le cancer gastrique

Résumé

Contexte

Au cours des dernières décennies, une bonne partie des études a fourni la possibilité de les microARN circulants (miARN) comme biomarqueurs non invasifs pour le diagnostic du cancer. Le but de notre étude était de détecter les niveaux de miARN dans les tissus et plasmas de cancer gastrique (GC) patients en circulation et d'évaluer leur valeur diagnostique.

Les échantillons de tissus de

Méthodes ont été recueillies à partir de 85 GC les patients. Les échantillons de plasma ont été recueillies auprès de 285 patients du GC et 285 témoins appariés. miARN différentiellement exprimés ont été filtrés avec par Agilent humain miRNA biopuces et TaqMan réseau basse densité (TLDA) avec des échantillons groupés, suivie par la validation transcription inverse quantitative réaction en chaîne par polymérase (qRT-PCR). Récepteur d'exploitation (ROC) courbes caractéristiques ont été structurées pour évaluer la précision diagnostique des miARN. Le niveau de miR-26a chez les patients du GC de différents stades cliniques du plasma a été comparée.

Quatre miARN (miR-26a, miR-142-3p, miR-148a, et Mir-

Résultats 195) a révélé par hasard une baisse des niveaux dans les tissus et le plasma des patients du GC par rapport aux témoins, et les courbes ROC ont été construites pour démontrer que miR-26a avait une zone plus élevée sous la courbe ROC (AUC) de 0,882. En outre, miR-26a a été détecté de façon stable dans le plasma des patients du GC avec différentes caractéristiques cliniques.

Conclusion

Plasma miR-26a peut fournir un nouveau marqueur stable du cancer gastrique.

Citation: Qiu X, Zhang J, Shi W, Liu S, Kang M, Chu H, et al. (2016) Circulant microARN-26a dans le plasma et sa valeur diagnostique potentielle dans le cancer gastrique. PLoS ONE 11 (3): e0151345. doi: 10.1371 /journal.pone.0151345

Editeur: Zheng Li, Peking Union Medical College Hospital, CHINE

Reçu: Octobre 29, 2015; Accepté 8 Février 2016; Publié le 24 Mars, 2016

Droit d'auteur: © 2016 Qiu et al. Ceci est un article en accès libre distribué sous les termes de la licence Creative Commons Attribution, qui permet une utilisation sans restriction, la distribution et la reproduction sur tout support, à condition que l'auteur et la source originelle sont crédités

Disponibilité des données:. Tous pertinents les données sont dans le ses fichiers de renseignements à l'appui du papier et

financement:. Cette étude a été en partie soutenue par la national Natural science Foundation de Chine (81230068, 81373091, 81302502, 81302490 et 81473049), Natural science Foundation de la province du Jiangsu (BK2012842 et BK20130641), le Programme clé pour la recherche fondamentale du Jiangsu ministère provincial de l'éducation (12KJA330002), le Fonds de recherche spécialisée pour le programme de doctorat de l'enseignement supérieur de la Chine (20130092120063), les programmes de formation provinciaux du Jiangsu de l'innovation et de l'entrepreneuriat pour les étudiants (201412682004Y ), Jiangsu provincial des sciences et de l'équipe de l'innovation technologique, et la priorité académique Programme de développement du Jiangsu établissements d'enseignement supérieur (santé publique et médecine préventive)

intérêts concurrents:.. les auteurs ont déclaré aucun conflit d'intérêts existent

introduction

le cancer gastrique (GC) est l'une des tumeurs malignes les plus courantes dans le monde. Bien que l'incidence globale a diminué au cours des dernières années, il est le quatrième cancer le plus fréquent (989,000 cas) et la deuxième principale cause de décès lié au cancer (738.000 décès) dans le monde [1]. Plus de 70% des cas surviennent dans les pays en développement [2]. En particulier, les patients à un stade avancé démontrent encore les taux de survie extrêmement pauvres [3] Date .Pour, le diagnostic de GC est basée sur les symptômes cliniques, et il y a des techniques d'essai appliquées, telles que l'endoscopie et l'examen repas baryté. Cependant, toutes ces approches ont montré quelques défauts à la détection de GC. En outre, il y a des marqueurs tumoraux sériques par exemple l'antigène carcinoembryonnaire (CEA), hydrate de carbone antigène 19-9 (CA19-9) et d'hydrate de carbone antigène 72-4 (CA72-4), et il y a des limites de la sensibilité et de spécificité pour dépistage du GC [4]. Par conséquent, nous payons plus d'attention sur la découverte de nouveaux biomarqueurs fiables et non invasifs de GC.

microARN (miARN) sont une classe de courte durée (20 ~ 25 nucléotides), non codantes ARN simple brin [5]. Il est largement admis que les miARN peuvent participer à la régulation de l'expression des gènes, donnant lieu à l'ARNm de faire taire tels que le clivage de la cible, l'inhibition de la traduction, et la dégradation des ARNm [6]. L'accumulation des données a indiqué que miARN ont été impliqués dans plusieurs processus physiopathologiques et conduisent à des changements fondamentaux dans plusieurs maladies. Zhang et al
. a constaté que miR-26a a induit l'apoptose endotheliale et a indiqué un potentiel thérapeutique de miR-26a de l'athérosclérose associée à la mort cellulaire apoptotique [7]. Leonov et al
. inhibition de miR-132 décrit conduit à haute Ago2 de l'expression, qui a été impliqué dans l'angiogenèse et l'inflammation lors de l'activation des cellules endothéliales primaires [8]. De nombreuses études ont indiqué que les miARN jouent un rôle indispensable sur la tumorigenèse, agissant soit comme oncogènes ou de gènes suppresseurs de tumeur [9]. Plusieurs miARN ont rapporté être lié au cancer par les profils d'expression de miARN [10-12]. Malheureusement, les échantillons de tissus sont difficiles à obtenir. Détecter miARN dans les tissus ne sont pas réalistes dans les applications cliniques
.

De plus, la preuve a démontré que l'augmentation miARN circulants sont résistants à la RNase digestion et stable détectable dans le plasma et le sérum avec la facilité de mesures [13-14]. Des études antérieures ont confirmé que l'existence de miARN dans le sang et l'expression associée au cancer, y compris lymphome à grandes cellules B, le cancer colorectal, le cancer de la vessie et le cancer du sein [15-18]. Ces études fournissent collectivement une base de miARN agissant en tant que nouveaux biomarqueurs pour le dépistage du cancer de circulation.

De nombreuses études démontrent le niveau d'expression des miARN dans le plasma est pas complètement compatible avec celle dans la tumeur. miR-378 a diminué de manière significative dans les tissus GC et plusieurs lignées cellulaires [19], mais miR-378 étaient significativement régulés à la hausse dans le sérum de patients atteints de GC [20]. Comme le même que miR-486, miR-486 peut fonctionner comme un suppresseur de tumeur dans miARN tumeur gastrique [21], qui sont surexprimés dans le sérum de patients atteints de GC [22]. À l'heure actuelle, plusieurs miARN sérum /plasma peuvent distinguer des patients du GC avec les contrôles, néanmoins cela ne peut pas représenter l'expression des miARN dans les tissus. Si nous pouvons trouver les miARN deux différentiellement exprimés dans les tissus du cancer gastrique et le plasma, il devrait avoir plus d'importance clinique.

Pour vérifier si les miARN différentiellement exprimés à la fois dans les tissus et le plasma, nous avons utilisé deux microréseaux à miARN d'écran . Dans les deux étapes de validation, quatre miARN candidats étaient significativement régulés à la baisse dans les tissus tumoraux et des échantillons de plasma par qRT-PCR. Notre étude a montré que miR-26a a été significativement diminuée de manière stable dans le plasma des patients atteints de cancer de l'estomac et pourrait distinguer les patients atteints de cancer gastrique des contrôles, avec une bonne sensibilité et de spécificité. Il a été prévu pour être un biomarqueur circulant prometteur du cancer gastrique dans le diagnostic clinique de routine.

Matériel et méthodes

conception et sujets:

Cette étude a été autorisée par la révision institutionnelle Étude conseil d'administration de l'Université médicale de Nanjing, et chaque participant à condition que le consentement éclairé signé. Tous les sujets ont été recrutés à l'hôpital du cancer Yixin, Hôpital de la tumeur Nantong, Huai-Un premier hôpital populaire et le second hôpital affilié de l'Université médicale de Nanjing à partir de Mars 2006 à mai 2013 à la province du Jiangsu, en Chine.

La tumeur les tissus et les tissus normaux (situé > 5 cm de la tumeur) ont été obtenus à partir de 55 patients subissant une intervention chirurgicale GC et enclenchez-congelé dans l'azote liquide. Les échantillons de plasma ont été prélevés sur 285 patients GC et 285 le sexe et le plasma appariés selon l'âge des individus en bonne santé ont été recueillies dans les contrôles. Tous les patients ont été prouvés le diagnostic histologique du GC lors du diagnostic initial, et aucun d'entre eux avaient reçu des procédures thérapeutiques, pour la chimiothérapie ou la radiothérapie par exemple. Nous avons classé le stade de la tumeur en fonction de la tumeur-node-métastases (TNM) système de mise en scène de l'Union internationale contre le cancer (UICC). Les caractéristiques cliniques des participants à l'étude sont présentés dans le tableau 1.

Une étude multi-étape a été conçue pour identifier les miARN de plasma que les biomarqueurs pour les patients du GC (figure 1). Dans le stade de la découverte, miARN différentiellement exprimés ont été évalués dans les échantillons de tissus appariés de 5 patients du GC (S1 Tableau) par Agilent humain miRNA Microarray (V12.0, Agilent Technologie, CA, USA). Les échantillons de plasma à partir de 5 patients du GC (S2 Tableau) dont le sexe, les états cliniques d'âge appariés avec les échantillons de tissus et 5 témoins sains ont été soumis à TLDA (V2.0; Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) pour identifier les miARN exprimés de manière différentielle . Dans la phase de formation, les miARN significativement modifiées ont d'abord été évalués par qRT-PCR dans 50 tissus appariés échantillons et 80 échantillons de sérum de GC et 80 témoins appariés. Par la suite, les miARN exprimés de manière différentielle entre le tissu et le sérum ont été examinées plus en 400 participants supplémentaires, qui comprenait 200 patients du GC et 200 contrôles.

isolement d'ARN du plasma et des tissus

Des échantillons de sang dans le cubes de vide séparées ont été centrifugés à 3000 tpm pendant 10 min à 4 ° C. Nous avons recueilli le surnageant et les a stockés à -80 ° C. Avant de commencer la procédure d'isolement, nous avons ajouté une concentration finale de 10 ^{-4 pmol /ul synthétique C
. elegans
miR-39 (cel-miR-39) (Takara, Japon) à chaque échantillon, afin de contrôler la variabilité biologique. L'ARN a été extrait de 100 pi de plasma en utilisant QIAGEN miRNeasy Mini Kit (Qiagen, Valencia, CA, USA). L'ARN total des tissus a été isolé en utilisant le réactif de TRIZOL (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA).}

Microarrays et qRT-PCR

Le profilage a été réalisée à l'aide Agilent Human miRNA Microarray (V12.0 , Agilent technologie, CA, USA) et TaqMan tableau basse densité (V2.0; Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). Pour l'isolement de l'ARN total à partir de tissus, qRT-PCR a été réalisée en utilisant le kit de SYBR (R) PrimeScript ™ RT-PCR (Takara Bio). Une description détaillée des protocoles expérimentaux est déposé dans les données S1.

Analyses statistiques

Les échantillons de tissu appariés ont été comparés en utilisant un test de Wilcoxon. test de Mann-Whitney U non paramétrique a été effectuée pour déterminer l'importance dans les taux plasmatiques de miRNA entre le groupe de cancer et le groupe sain. Récepteur-opérateur (ROC) courbes et les surfaces sous les courbes ROC (AUCs) ont été obtenues pour évaluer le potentiel de détection de GC de miARN. Les analyses statistiques ont été test bilatéral, et P
< 0,05 a été considérée comme statistiquement significative. Toutes les analyses statistiques ont été réalisées avec la version du logiciel SPSS 16.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).

Discovery

Résultats de biomarqueurs candidats par microarrays

Nous avons utilisé deux plates-formes de biopuces pour les miARN d'analyser et de comparer les profils d'expression des miARN de deux conditions différentes. analyse TLDA a été effectuée pour confirmer miARN candidats niveaux d'expression. Un total de 142 miARN ont été détectés dans le plasma. 65 du total des miARN ont été augmentés et 77 ont été réduites chez les patients du GC par rapport aux témoins

Pour identifier les miARN candidats, l'expression des miARN entre les patients et les contrôles ont été nécessaires pour correspondre à deux critères:. (1) l'expression dérégulation dans le tissu tumoral était cohérent avec les résultats TLDA [23]; et (2) les taux plasmatiques de miARN prouver différence ≥ 2 fois entre les patients et les contrôles. En fin de compte, quatre miARN plasmatiques down-régulés (ie, miR-26a, miR-142-3p, miR-148a et miR-195) ont été choisis comme candidats pour la validation fist-étape (tableau 2).

Confirmation de miARN par qRT-PCR

Tout d'abord, les résultats des analyses microarrays ont été confirmées en utilisant les tissus appariés, le plasma GC et les témoins appariés pour ces quatre miARN par qRT-PCR. Nos résultats ont montré que la tendance des résultats de la qRT-PCR était similaire aux analyses microréseaux, que ce soit dans les tissus ou dans le plasma. Le terrain a montré que les niveaux de quatre miARN d'expression étaient statistiquement significatives dans les tissus du GC ( P
= 0,001, P
= 0,002, P
< 0,001 et P
= 0,003 pour miR-26a, miR-142-3p, miR-148a et miR-195, respectivement, les figures 2A-2D). En attendant, nous avons effectué qRT-PCR pour vérifier les expressions de miARN ont été régulés à la baisse dans un autre ensemble indépendant de 80 échantillons de plasma de GC et 80 témoins sains. Les expressions de quatre miARN dans GC plasma ont été significativement diminué par rapport à ceux des contrôles (tous P
< 0,001, figures 2E-2H). Les expressions niveaux des quatre miARN dans le plasma étaient constamment diminué, la comparaison avec des échantillons de tissus.

validation à grande échelle des microARN plasmatiques chez les patients
GC

Afin de valider la stabilité des expressions de plasma des miARN, nous avons effectué qRT-PCR à grande échelle de 200 échantillons de plasma GC et 200 témoins sans cancer-appariés. Accordant avec les résultats de la phase de formation, les niveaux de quatre miARN d'expression a montré une régulation significative dans le plasma des patients du GC (tous P
< 0,001, figure 3), ce qui suggère que ces quatre miARN dans le plasma peut servir les biomarqueurs candidats pour le diagnostic de la GC.

évaluation du potentiel diagnostique de miARN pour GC

pour évaluer l'efficacité des quatre ci-dessus miARN comme marqueurs de diagnostic pour la détection de GC, nous avons effectué la courbe ROC l'analyse de chaque miARN. Fig 4 a révélé que les courbes ROC de quatre miARN candidats ont démontré les miARN plasmatiques étaient de valeur pour distinguer les patients du GC des contrôles normaux. La valeur de coupure de 0,651 était égale à la sensibilité + spécificité-1 qui était maximale pour miR-26a (expression relative normalisée par la cellule-39). Pour miR-26a, la sensibilité était de 83,6% et la spécificité était de 81,5% avec une ASC de 0,882 (IC à 95% = 0,847 à 0,916) (figure 4A). A la valeur de 0,585 cut-off pour miR-142-3p, la sensibilité était de 74,4% et la spécificité était de 84,1% avec une ASC de 0,839 (IC à 95% = 0,800 à 0,879) (figure 4B). Les AUC étaient 0,842 (IC à 95% = de 0,803 à 0,882) et 0,765 (IC à 95% = 0,717 à 0,812) pour miR-148a et miR-195, respectivement. La sensibilité et la spécificité étaient de 75,4% et 83,1% pour miR-148a, 69,2% et 75,4% pour miR-195, respectivement (figure 4C et 4D). La combinaison ROC analyse de la courbe a donné la valeur AUC de 0,872 (IC à 95% = 0,836 à 0,908) (Fig 4E).

Pour vérifier la valeur de diagnostic de l'hôte miRNA pour GC, nous avons combiné l'un des miARN de plasma et exécuté les courbes ROC comme indiqué dans S1 et S2 figures. Ces données indiquent que le miR-26a qui a montré la plus grande capacité pour différencier les patients du GC de contrôle, pourrait agir comme un biomarqueur approprié pour détecter GC.

Discussion

Malgré une baisse significative de la mortalité par GC dans la dernière décennie, le taux de mortalité est encore plus élevé que beaucoup d'autres tumeurs malignes [24]. Ces dernières années, les biomarqueurs tumoraux, par exemple le CEA, CA19-9, CA74-2 avec la sensibilité et la spécificité limitée ont été largement utilisés pour le diagnostic, le suivi et le pronostic de GC [4]. Dans l'ensemble, il est d'une grande importance pour le diagnostic de GC à rechercher des biomarqueurs plus spécifiques et sensibles.

miARN de tissus comme les biomarqueurs de diagnostic et le pronostic ont d'abord été proposés. Bandrés et al
. a révélé que miR-451 a été régulée à la baisse dans l'estomac primaire et les tumeurs colorectales, et la régulation négative de miR-451 a été associé à une faible DFS et une faible survie globale [25]. Xiao et al
. identifié miR-106a comme un miARN considérablement régulés à la hausse dans la GC [26]. Ils ont également constaté que l'expression de miR-106a était significativement liée à l'étape de la tumeur, lymphatique, métastases à distance et de l'invasion. Néanmoins, de nombreux types de patients atteints de cancer ont été incapables de subir une intervention chirurgicale dans la pratique clinique quand ils sont diagnostiqués. Le recours à la section chirurgicale et procédure invasive pour le prélèvement d'échantillons de tissus fortement limité l'application des miARN dans les tissus du diagnostic du cancer [27]. La qualité diagnostique de ces méthodes est insatisfaisante.

également des preuves émergentes implique que miARN circulants sont liés au cancer [28-30]. L'étude récente a révélé que les miARN sont détectables dans le plasma et stable à température ambiante et /ou à de multiples processus de congélation-décongélation [31]. De nombreux rapports ont éclairé que l'utilité des miARN en tant que nouveaux biomarqueurs non invasifs pour les cancers, comme le cancer colorectal [32], le cancer du sein [33-34] et le carcinome à cellules rénales [35] en circulation.

Dans notre étude, nous avons méthodiquement projeté le profil miRNA dans les tissus appariés et dans le plasma de patients du GC et des contrôles sains. Plasma obtenu à partir de 5 cas et 5 témoins ont été mélangés ensemble pour former deux échantillons groupés et ont été utilisés pour TLDA. Cette méthode de mise en commun des échantillons est une technique largement utilisée qui a été montré pour être fiable pour le profilage [36-38]. En comparant l'analyse TLDA et le résultat du tissu microarray, quatre miARN (miR-26a, miR-142-3p, miR-148a et miR-195) réduit en GC ont été sélectionnés.

Par la suite, nous avons identifié quatre miARN candidats par qRT-PCR en deux étapes, et ont trouvé les niveaux de quatre miARN d'expression se sont effondrés dans le plasma des patients du GC qui étaient en accord avec les expressions dans les tissus. courbe ROC, également connu sous la courbe de sensibilité, est largement reconnue comme un moyen du test d'évaluation. Il est également un indicateur intégré qui reflète la sensibilité et la spécificité des variables continues. Dans la présente étude, l'analyse ROC a indiqué que la combinaison de quatre miARN n'a pas été plus efficace que le miR-26a individuellement. MiR-26a seul pouvait obtenir une bonne efficacité de diagnostic chez les patients du GC distinguer des contrôles sains avec une AUC de 0,882 (sensibilité = 83,6% et une spécificité = 81,5%). Une étude précédente par Schneider et al
. affichent les niveaux de CEA, CA19-9 et CA72-4 dans GC sérum élucidé une sensibilité de 45,5% pour CA19-9, 23,8% pour le CEA et 60,7% pour CA72-4 [39]. Ceux-ci étaient beaucoup moins que la sensibilité de miR-26a. En outre, le niveau de miR-26a dans le plasma était plus faible expression significative chez les patients atteints de GC, et ne montre aucune importance avec la progression de la CG (S3 figure). Par conséquent, miR-26a avait un grand potentiel en tant que biomarqueur de plasma de diagnostic pour GC.

Dans les dernières décennies, les études précédentes ne vérifient que si l'expression miRNA du plasma ou du sérum pourrait représenter les niveaux de tissu. Par rapport à ces études, notre étude avait propre fonction pour des raisons comme suit. Tout d'abord, nous avons sélectionné les miARN qui exprimaient à la fois de manière différentielle dans les tissus et le plasma, en comparant les résultats de deux microréseaux. Cela a abouti à une meilleure occasion d'identifier des marqueurs diagnostiques réalisables. En outre, nous avons constaté que l'expression de miR-26a significativement réduite chez les patients du GC et maintenu stable dans le plasma (S3 Fig).

Les résultats ont révélé que l'expression plasmatique de miR-26a était significativement plus faible chez les patients du GC par rapport aux témoins sains ( P
< 0,05), ce qui montre la stabilité chez les patients ayant un état clinique GC différent. La régulation à la baisse du plasma miR-26a expression peut indiquer la probabilité de diagnostiquer GC. Par conséquent, miR-26a peut être un meilleur choix pour servir biomarqueur tant que potentiel pour GC. Deng et al
. ont montré que les niveaux de miR-26a dans les tissus du GC ont remarquablement diminué plus que dans les tissus non tumoraux par qRT-PCR [40]. Ils ont également démontré que miR-26a a inhibé la croissance tumorale et les métastases en partie par le ciblage FGF9
in vivo. Ceux-ci consistaient à nos résultats. Ces résultats ont confirmé que miRNA-26a dans le plasma pourrait être un marqueur de diagnostic potentiel de GC.

Toutefois, les limites de notre étude sont que les échantillons pour le microréseau tissulaire et pour l'TLDA ne sont pas les mêmes patients, et nos tailles d'échantillon pour les microarrays étaient relativement petites. Une analyse plus poussée des microarrays pour les mêmes patients et la confirmation-échantillon élargi sont nécessaires pour être appliqué comme un outil de criblage pour GC dans l'utilisation clinique de routine. De plus, on n'a pas choisi les miARN régulés à la hausse en raison du fait qu'il n'y avait pas les miARN régulés à la hausse dont les changements pli étaient ≥ 2. Nous avons choisi miARN candidats qui ont été abondamment exprimées dans le plasma pour vous assurer de la probabilité d'un examen dans la pratique clinique.

Conclusions

en résumé, notre étude a révélé quatre miARN régulés vers le bas, miR-148a, miR-142-3p, miR-26a et miR-195, en GC les patients. Plus important encore, l'expression du plasma de miR-26a était significativement réduite et stable chez les patients atteints d'un cancer gastrique. En conséquence, miR-26a peut fournir un biomarqueur non invasif et stable du diagnostic du cancer gastrique et le dépistage.

Informations complémentaires
S1 données. Protocoles expérimentaux de microréseaux et qRT-PCR
doi: 10.1371. /Journal.pone.0151345.s001
(DOC)
S1 Fig. Analyse de la courbe ROC de la combinaison de deux miARN miRNA entre les quatre candidats.
La combinaison de miR-26a et miR-142-3p (A), la combinaison de miR-26a et miR-148a (B), la combinaison de miR-26a et miR-195 (C), et la combinaison de miR-142-3p et miR-148a (D), la combinaison de miR-142-3p et miR-195 (E) et la combinaison de Mir- 148a et miR-195 (F) ont donné les plus grandes AUCs
doi:. 10.1371 /journal.pone.0151345.s002
(DOC)
S2 Fig. Analyse de la courbe ROC de la combinaison de trois miARN miRNA entre les quatre candidats.
La combinaison de miR-26a, miR-142-3p et miR-148a (A), la combinaison de miR-26a, miR-142-3p et miR-195 (B), la combinaison de miR-26a, miR-148a et miR-195 (C) et la combinaison de miR-142-3p, miR-148a et miR-195 (D) a produit le plus grand AUC.
doi: 10.1371 /journal.pone.0151345.s003
(DOCX)
S3 Fig. . niveau de miR-26a chez les patients atteints de cancer gastrique stratifiées par l'état clinique Plasma parcelles de boîte de montre les taux plasmatiques de miR-26a dans 200 contrôles sains et 200 patients atteints de cancer gastrique à l'état clinique différent
doi:. 10.1371 /journal.pone.0151345.s004
(DOCX)
S1 Table. Les caractéristiques cliniques de dépistage des sujets de tissus par Agilent humain miRNA Microarray
doi: 10.1371. /journal.pone.0151345.s005
(DOC)
S2 Table. Les caractéristiques cliniques de dépistage des sujets de plasma par TLDA
doi: 10.1371. /journal.pone.0151345.s006
(DOC)

Remerciements

Nous sommes profondément reconnaissants pour la participation de tous les sujets qui contribuent à cette recherche.

• PLOS ONE: surexpression et la fonction biologique de la Protease Ubiquitin-Specific 42 gastrique Cancer
• PLOS ONE: Association entre la perte des dents et le cancer gastrique: une méta-analyse de observationnelle Studies