Plos ONE: Visoke vrednosti aromatskih aminokislin v želodčnega soka v zgodnjih fazah želodčnega raka napredovanje

Povzetek

Ozadje

Zgodnje faze raka želodca je večinoma brez simptomov in da se lahko z lahkoto pogrešali z običajnim gastroskopijo. Trenutno ni nobenih uporabnih biomarkerjev za zgodnje odkrivanje raka želodca, in je nujno potrebna njihova identifikacija biomarkerjev.

Metode

želodca sok je pridobljen iz 185 predmetov, ki so bili razdeljeni v tri skupine : ne-neoplastične bolezni želodca (NGD), napredovalega raka želodca in zgodnjega raka želodca (EGC). Ravni aromatskih aminokislin v želodčnem soku so kvantificiramo s tekočinsko kromatografijo visoke ločljivosti.

Rezultati

srednje vrednosti (25. do 75. percentil) v tirozin, fenilalanin in triptofan v želodcu sta sok 3,8 (1,7-7,5) mg /ml, 5,3 (2,3-9,9) mg /ml in 1,0 (0,4-2,8) mg /ml v NGD; 19,4 (5,8-72,4) mg /ml, 24,6 (11,5-73,7) mg /ml in 8,3 (2,1-28,0) mg /ml v EGC. pri osebah z EGC skupin so opazili višje ravni tirozin, fenilalanin in triptofan v želodčnega soka v primerjavi s tistimi iz skupine NGD (NGD vs. EGC, P
< 0,0001). Za odkrivanje EGC so bile površine pod sprejemnika delujejo značilne krivulje (AUC) za vsako biomarker takole: tirozin, 0.790 [95% interval zaupanja (CI), 0,703-0,877]; fenilalanin, 0,831 (95% CI, 0,750-0,911); in triptofan, 0,819 (95% CI, 0,739-0,900). Občutljivost in specifičnost fenilalanina je bilo 75,5% in 81,4%, v tem zaporedju, za odkrivanje EGC. Večkratni logistična regresijska analiza je pokazala, da so visoke ravni aromatskih aminokislin v želodčnem soku, povezanih z rakom želodca (nastavljiv beta koeficienti v razponu od 1,801 do 4.414, P
< 0,001).

Zaključek

zvišane ravni tirozin, fenilalanin in triptofan v želodcu vzorcih sok bili odkriti v zgodnji fazi želodca rakotvornost. Tako lahko tirozin, fenilalanin in triptofan v želodčnem soku je treba uporabiti kot biomarkerjev za zgodnje odkrivanje raka želodca. Želodčne analiza sok je učinkovit, gospodaren in priročen način za pregledovanje zgodnji razvoj raka želodca v splošni populaciji

Navedba. Deng K, Lin S, Zhou L, Li Y, Chen M, Wang Y, et al. (2012) Visoke vrednosti aromatskih aminokislin v želodčnega soka v zgodnjih fazah želodčnega raka napredovanje. PLoS ONE 7 (11): e49434. doi: 10,1371 /journal.pone.0049434

Urednik: Alejandro H. Corvalan, Katoliška univerza Catolica de Chile, Medicinska fakulteta, Čile

Prejeto: 27. april 2012; Sprejeto: 7. oktober 2012; Objavljeno: 13. november 2012

Copyright: © 2012 Deng et al. To je odprtega dostopa članek razširja pod pogoji Creative Commons Attribution License, ki omogoča neomejeno uporabo, distribucijo in razmnoževanje v katerem koli mediju, pod pogojem, da prvotni avtor in vir knjižijo

Financiranje:. Ta raziskave je podprl Nacionalni Natural Science Foundation Kitajske [številka Grant: 3097415] (URL: http://www.nsfc.gov.cn/e_nsfc/desktop/zn/0101.htm~~HEAD=pobj). Med financerji imel nobene vloge pri oblikovanju študije, zbiranje in analizo podatkov, sklep, da se objavi, ali pripravi rokopisa

nasprotujočimi si interesi.. Avtorji so izjavili, da ne obstajajo konkurenčni interesi

Uvod

rak želodca je druga najpogostejša vrsta raka v vzhodni Aziji, in prognoza bolnikov z rakom želodca je slaba zaradi poznega odkrivanja [1], [2], [3]. Do danes, preživetja raka želodca in kakovosti življenja bolnikov le znatno izboljšala, če je rak diagnosticiran zgodaj [4]. Na žalost, manj kot 5% od zgodnjih primerov raka želodca se odkrijejo in takoj diagnosticirali [5].

endoskopija sledi patološkega biopsijo je zdaj prednostna metoda za odkrivanje zgodnjega raka želodca (EGC). Vendar pa je EGC med gastroskopijo pogosto zamudil, ker se manjša poškodba lahko zlahka spregledamo, biopsijo, neustrezno ali napačno razlagala patologov [6], [7]. EGC je večinoma asimptomatska pred nastopom hudimi simptomi, in endoskopske preiskave, ki temelji na hudimi simptomi vedno zakasni odkrivanje raka na želodcu. pregled, ki temelji na prebivalstvo lahko lažje zgodnje odkrivanje in diagnosticiranje raka želodca. Vendar pa sta pomanjkanje izkušenih endoscopists in nelagodje bolnika, povezana s postopkom zmanjšajo uporabo te metode kot presejalnega orodja za EGC.

Potrebne so manj invazivne in bolj učinkovito biomarkerjev za odkrivanje EGC masnih presejanje. Sedanji biomarkerjev pepsinogen, karcinoembrionski antigen (CEA), in antigen ogljikovih hidratov 19-9 (CA19-9), ne zadostujejo za natančno napovedovanje raka želodca v zgodnji fazi [8], [9], [10].

dobro je znano, da motnje presnove pride pred pomembnih morfoloških sprememb v malignega tkiva [11]. Precejšen obseg informacij v zvezi s presnovno stanje želodca epitela je v želodčnem soku. Zato se lahko želodčni sok treba uporabiti za vzpostavitev diagnostični test in opredeliti pomembne in učinkovite biomarkerjev za EGC pregleda. V prejšnjih raziskavah smo ugotovili, analize fluorescence spektra želodčnega soka [12], [13], [14] in so ugotovljeni trije fluorescence biomarkerjev (aromatske aminokisline v želodčnega soka) [15], ki se lahko uporablja za razlikovanje napredno želodca rak (AGC) od benignih bolezni. Vendar pa je še vedno negotovo, ali lahko te biomarkerjev razlikovati med EGC in benigne bolezni. Ta študija je bila izvedena za testiranje hipoteze, da imajo želodčne biomarkerjev sok diagnostične presejalne vrednost pri odkrivanju EGC.

metod
Etika Statement

etični odbor Peking University zdravje Science Centre odobri to raziskovalno študijo. Pisna privolitev je bila pridobljena iz vseh udeležencev, in je bila izvedena celotna klinične preiskave v skladu z načeli, izraženimi v Helsinški deklaraciji.

Zbirka vzorcev

Vzorci so bili zbrani na endoskopijo prostorih Pekingu Univerza tretji Hospital. Vsi vzorci pacientov, pridobljeni v tej študiji so jih sluznice biopsijo in /ali pooperativne patologije histološko potrjeni od decembra 2008 do julija 2012. Po tešče, bolniki doživel gastroskopija. Vzorci želodčnega soka, ki so bili brez bruto ostankov hrane, so žolč in kri zbirali. Vzorce smo razdelili v 2 ml alikvote in takoj shranimo pri -80 ° C za kasnejšo analizo. Warthin-Starry (WS) obarvanje je bila uporabljena za odkrivanje Helicobacter pylori
stanje okužbe v vseh vzorcih (Na antruma želodca je bil eden od biopsijo spletnih strani in skupno število biopsijo straneh je bilo več kot dva).

udeležencev

želodcu vzorcev sokov so bili pridobljeni od 49 bolnikov z EGC (6 primerov so bile vključene v prejšnji objavi [15]). Je bilo 26 primerov osrednja karcinomom in 23 primerih je bilo hudo displazijo, ki bi jih lahko opredelili kot EGC [16]. Poleg želodca vzorcev sokov, izoliranih iz bolnikov z EGC, so bili vzorci iz 70 bolnikov z ne-neoplastične želodčne bolezni (NGD), ki so opravili postopek za ambulantno endoskopija v istem obdobju uporablja kot kontrolno skupino za primerjavo. Kontrolna skupina je vsebovala 47 bolnikov s kronično površno gastritis, 18 bolnikov s kronično atrofični gastritis in 5 bolnikov z peptične razjede. Poleg tega so bili vzorci želodčni sok naključno zbrani od 66 bolnikov z AGC (tabela 1). Ni bilo večjih nepravilnosti opazili v pre-endoskopske ledvic in jetrne funkcije testov na zaposlijo predmetov. Večina vključenih bolnikov želodca z rakom niso bili v preteklosti ugotovili, in nobeden od bolnikov, je pokazala pomembno podhranjenosti (stanje zmogljivosti Kamofsky, KPS > 90).

Sample Zdravljenje

Zamrznjene vzorce smo odtajali pri sobni temperaturi in centrifugiramo pri 14000 obratih na minuto za 20 minut pri 4 ° C. Oborino odstranili in zgornja plast izločilo in začasno shranijo pri 4 ° C v naslednjem poskusu. Vzorci so bili oštevilčeni naključno. Preizkuševalec je bil zaslepljen z diagnozo bolnikov vpoklica v študiji.

Količinska skupnih beljakovin v želodčnem soku

Za določitev vsebnosti beljakovin, 100 xl želodca supernatanta soka je predelan in takoj razredčimo z 900 ul v 0,15 M fosfatnega pufra (pH 7,3) za uravnavanje pH. Skupna vsebnost beljakovin v želodčnem soku je bila izmerjena z uporabo BCA (bicinchoninic kislina), beljakovin analiznega kompleta (Peking COWIN Biotech Co Ltd, Peking, Kitajska), v skladu s protokolom proizvajalca. Če je koncentracija proteina iz delovnega območja testa (20-2000 ug /ml), je bil vzorec nadalje razredčili in reanalyzed.

količinskih sistemu

aromatskih aminokislin v želodca vzorce sok so kvantitativno detektor fluorescence v povezavi s HPLC [17], [18], in je bil uporabljen že določena količinska sistem [15] v tej študiji. HPLC Inlet Filter, A Diamonsil (2) C18 (3 um, 250 x 4,6 mm) Analitska kolona (Dikma Technologies, Peking, Kitajska) in Agilent 1100 series tekočinsko kromatografijo sistem (Agilent Technologies, Waldbronn, Nemčija), so bili uporabljeni v tem študija. Sistem sestavljen iz vakuumske topila odplinjevanja enote, štiri gradient črpalke topil, avtomatski vzorca injektorjem temperature urejeno, kolone termostatom in detektorjem 3D fluorescence (FLD). Chemstation programska oprema je bila uporabljena za količinsko opredeliti zneska aromatskih aminokislin v želodcu vzorcih soka. Pred reverzno fazo HPLC analizo smo želodčni sok Supernatant filtriramo skozi 0,45 pm HPLC filtra. Aromatske aminokisline v želodčnem soku ločimo med HPLC na analitski koloni C18 z uporabo 0,05% (v /v) trifluoroocetne kisline /vode (HPLC; Dikma Technologies) kot topilo A in čist acetonitril (HPLC; Merck, Darmstadt, Nemčija) kot topilo B mobilni fazni modifikator v linearnem sistemu gradient elucijski. Po pranju igle so bili vzorci injicirali na volumen 20-100 ul volumen injiciranja. Postopek HPLC in eksperimentalni pogoji za vsak vzorec, so navedene v tabeli 2.

Aromatic Amino Acid Količinska

Standardni in kontrolo kakovosti rešitve, ki jih vsebuje enakovredne koncentracije L-tirozin, L-fenilalanina in L -tryptophan (99% Alfa Aesar, Ward Hill, MA, ZDA) smo pripravili v koncentraciji 0,5, 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0, 18,0 in 20,0 ug /ml za vzpostavitev kalibracijske krivulje. Standarde smo hranili pri -80 ° C. Twenty-mikrolitrov alikvoti DDH _{2O (slepe raztopine nadzor) in vzorcev standardnih in nadzora kakovosti so bili uporabljeni za določitev in preverjanje kalibracijske krivulje pred testiranjem tri aromatskih aminokislin v želodcu vzorcih soka. Če bi bili ravni tirozin, fenilalanin in /ali triptofana iz izmerjene območju so bili vzorci reanalyzed po zamenjavi volumen injiciranja (20-100 ul). Če je bila koncentracija vzorca neopazna, po nekaj poskusih analize je bilo dodeljeno rezultat nič.}

Statistične metode

Ko je bila sprejemljiva normalna porazdelitev doseči, podatki so bili izraženi kot sredstvo ± SD (standardna deviacija) ter primerjave med skupinami so bile narejene z uporabo ANOVA test enosmerno. Ko sprejemljiva normalna porazdelitev ni bil dosežen, so bili podatki, izražene kot mediana (25. do 75. percentil). Kruskal-Wallis testov sledi več primerjava pošte testi hoc (Bonferroni-popravljena stopnji značilnosti 0,05 /3 = 0,017) Dunn je bila uporabljena za določitev razlike med tremi skupinami. Kruskal-Wallis in testi Dunn je bila izvedena s pomočjo Minitab (različica 16, Minitab Company, State College, PA) s KrusMC.MAC makro (pridobljen s spletne strani Minitab). Test Mann-Whitneyev U je bila uporabljena le za primerjavo med obema skupinama. Chi-kvadrat preizkus smo ocenili povezavo med dvema binarnih spremenljivk. Pearson korelacija je bila izbrana za analizo povezavo med spremenljivkami. Delna korelacija je bil uporabljen za ugotavljanje povezave med stopnjami aromatskih amino kislin in klinično diagnozo, kar je povzročilo odstranitev niz nadzornih spremenljivk. so bili uporabljeni sprejemnik deluje značilne (ROC) krivulje in površine pod krivuljo (AUC) za ROC za oceno veljavnosti biomarkerjev in ugotoviti optimizirane vrednosti cut-off. Vsi drugi statistični testi so bili dvostranski, z P
< 0,05 opredeljen kot statistično značilne. Logistični regresijski modeli so bili uporabljeni za izračun beta koeficiente in P
vrednosti za vsak faktor /sospremenljivko. Vsi izračuni so bili izvedeni z Excel 2003 (Microsoft Corporation, Seattle, WA, ZDA), in statistični testi so bili izračunani s pomočjo SPSS verzija 15.0 (SPSS, Chicago, IL, ZDA), SAS 8.1 software (SAS Institute Inc., Cary, NC) in PASS 2008 programski paket (NCSS, Kaysville, UT)

Rezultati

Klinične značilnosti bolnikov

Ta študija je vsebovala 185 bolnike razdelili v 3 skupine:. 70 bolnikov NGD 66 AGC bolniki in 49 bolnikov EGC. Ni bilo pomembnih razlik v pojavljanju Helicobacter pylori
okužbe (6 primerov zgrešil) med tri podskupine. Starost in spol razlikovala med tremi podskupin ( P
= 0,049 in P
= 0,023) (tabela 1).

Skupaj beljakovin v želodčnega soka
mediana (25. do 75. percentila) iz skupne vsebnosti beljakovin v želodcu vzorcev sokov, so bili naslednji: NGD, 1.5 (0.9-2.4) mg /ml; AGC, 3,3 (2,3-5,1) mg /ml; in EGC, 2,8 (1,6-3,7) mg /ml (tabela 3). Povečanje skupne vsebnosti beljakovin opazili v želodcu vzorcih sok iz skupine AGC in EGC relativno tisti skupini NGD (Dunn je test, AGC vs. NGD, P
< 0,0001; EGC vs. NGD, P
< 0,0001) (tabela 1). Ni bilo nobene razlike v skupne vsebnosti beljakovin med skupine AGC in skupine EGC (Dunn je teste, P
= 0,044, ki je večja od stopnje pomembnosti 0,017) (tabela 3).

Kvantitativna sistem

Kot je prikazano v fluorescenčno kromatogramu (slika 1), tri aromatske aminokisline so bile popolnoma ločeni. Časi retencijski za vsako od treh aminokislin so bili naslednji: tirozin, 8 min; fenilalanin, 12 min; in triptofan, 16 min. Kalibracijska krivulja, so bili naslednji linearnost in delovna območja: tirozin, Y = 0.32X + 1.30, R ^{2 = 0,9999, 0,5-20,0 mg /ml; fenilalanin, Y = 7.15X + 1,03, R 2 = 0,9999, 0,5-20,0 mg /ml; in triptofan, Y = 0.25X + 3.01, R 2 = 0,9999, 0,5-20,0 mg /ml. Izkoristki tirozin, fenilalanin in triptofan bila 100,5 ± 2,7%, 101,3 ± 3,4% in 99,6 ± 1,6%, v tem zaporedju. Pri natančnosti v tirozin, fenilalanin in triptofan bilo 100.1 ± 0,5%, 100,0 ± 1,8% in 98,7 ± 1,5%, v tem zaporedju. Ta eksperimentalni sistem je stabilen in zanesljiv za kvantifikacijo aromatskih aminokislin v želodčnem soku.}

aromatskih aminokislin Vsebnost

Mediana (25. do 75. percentil) vrednosti tirozin, fenilalanin in triptofan bilo 3,8 (1,7-7,5) mg /ml, 5,3 (2,3-9,9) mg /ml in 1,0 (0,4-2,8) mg /ml v vzorcu NGD; 18,3 (6,4-52,3) ug /ml, 25,7 (11,1-76,1) mg /ml in 4,7 (2,5-20,3) ug /ml v vzorcu AGC; in 19,4 (5,8-72,4) ug /ml, 24,6 (11,5-73,7) mg /ml in 8,3 (2,1-28,0) ug /ml v vzorcih EGC (tabela 3). Ravni aromatskih aminokislin v želodčnem soku so bile precej drugače med skupinami NGD, AGC in EGC (test Kruskal-Wallis, tirozin χ ^{2 = 49,847, fenilalanin χ 2 = 62,397, triptofan χ 2 = 52,846, vse P
< 0,0001). Ravni tirozin, fenilalanin in triptofan so v želodčni sok, pridobljen iz obeh skupin AGC in EGC v primerjavi s tistimi iz skupine NGD (Dunn je test, AGC vs. NGD, vse P
<znatno povečalo; 0,0001; EGC vs. NGD, vse P
< 0,0001) (tabela 3 in slika 2). Po prilagoditvi za učinek vseh ravneh beljakovin v želodčnem soku, pomembne zveze še vedno obstaja med stopnjami aromatskih amino kislin in klinično diagnozo (delna korelacija, AGC vs NGD: tirozin, R = 0.334, P
< 0,001 fenilalanin, R = 0,257, P
< 0,001 in triptofan, R = 0,312, P
< 0,001; EGC vs. NGD: tirozin, R = 0,378 P
< 0,001 fenilalanin, R = 0.392, P
< 0,001 in triptofan, R = 0,380, P
< 0,001). Ni bilo pomembnih razlik v ravneh tirozin, fenilalanin in triptofan med vzorci želodčni sok AGC in EGC (Dunn je test, P
= 0,811, P
= 0,781 in P
= 0,691 oz) (tabela 3). Ta rezultat je v skladu s prejšnjimi ugotovitvami [15], ki je pokazala, da obstajajo zveze med Helicobacter pylori
okužba in ravni aromatskih aminokislin v želodčnega soka (test Mann-Whitney U, tirozin, P
= 0,871 fenilalanin, P
= 0,742;. triptofan, P
= 0,913)}

Veljavnost aromatskih aminokislin za odkrivanje AGC in EGC

v analizi ROC krivuljo za razlikovanje med AGC in NGD, na območjih pod krivuljami (AUC) za tirozin, fenilalanin, triptofan in skupnih beljakovin je bila 0,824 [95% interval zaupanja (CI), 0,753-0,895, P
< 0,001], 0,858 (95% CI, 0,794-0,922, P
< 0,001) 0,818 (95% CI, 0,747-0,889, P
<0,001) in 0,803 (95% CI, 0,728-0,878, P
< 0,001), v tem zaporedju (slika 3A in preglednica 4). Glede na analizo ROC krivuljo za razlikovanje med EGC in NGD, se AUC za tirozin, fenilalanin, triptofan in skupnih beljakovin je bilo 0.790 (95% CI, 0,703-0,877, P
< 0,001) 0,831 (95 % CI, 0,750-0,911, P
< 0,001) 0,819 (95% CI, 0,739-0,900, P
< 0,001) in 0,719 (95% CI, 0,623-0,814 P
< 0,001), v tem zaporedju (slika 3B in Tabela 4). Optimizirana cut-off vrednosti, ki so prepoznavni AGC ali EGC od NGD so bili izbrani z določitvijo maksimalne vsote občutljivosti in specifičnosti iz krivulj ROC (tabela 4). Po izbiri optimizirane vrednosti, občutljivost, specifičnost in natančnost je potrebno razlikovati med AGC in NGD, so bili naslednji: tirozin, 83,3%, 68,6% in 75,7%; fenilalanin, 81,8%, 75,7% in 78,7%; triptofan, 84,8%, 68,6% in 76,5%; in skupno beljakovin, 75,8%, 74,3% in 75,0%. Po izbiri optimizirane vrednosti, občutljivost, specifičnost in natančnost je potrebno razlikovati med EGC in NGD, so bili naslednji: tirozin, 75,5%, 71,4% in 73,1%; fenilalanin, 75,5%, 81,4% in 79,0%; triptofan, 61,2%, 97,1% in 82,4%; in skupne beljakovine, 59,2%, 81,4% in 72,3% (Tabela 4). Po izbiri optimizirane vrednosti, o katerih so poročali v naši prejšnji raziskavi [12], [15], so občutljivost, specifičnost in natančnost za odkrivanje EGC takole: tirozin, 51,0%, 94,3% in 76,5%; fenilalanin, 79,6%, 74,3% in 76,5%; triptofan, 61,2%, 94,3% in 80,7%; in skupno beljakovin, 83,7%, 62,9% in 71,4%. Z drugačnim optimizirano vrednosti, smo dobili podobne rezultate. S kombinacijo tirozin, fenilalanin in triptofanom ni bistveno izboljša odkrivanje AGC ali EGC, ker so bile koncentracije treh aromatskih aminokislin v želodcu vzorcih sok tesno povezana z vsako drugo (tirozin-fenilalanina, R = 0,871; tyrosine- triptofan, R = 0,941, fenilalanin, triptofan, R = 0,840, P
. < 0,001 za vsako)

Logistična regresija Analiza

v logistično regresijsko analizo je povezava med stopnjami aromatskih aminokislin v želodčnem soku in EGC je bila ovrednotena. Univariatne logistične regresijskih analiz so bile izvedene, da oceni napovedne vrednosti biomarkerjev kandidatk za odkrivanje EGC. V teh univariatne analize so beta koeficienti (SE) o starosti, spolu, Helicobacter pylori
stanje, beljakovin in povišani so bili izračunani aromatske aminokislinske ravni v želodčnega soka. Štiri spremenljivke (starost in povišana tirozin, fenilalanin in triptofan stopnje v želodčnega soka) imeli P
< 0,05 in so bile ugotovljene z uporabo multiple logistične regresijske analize (tabela 5). Ker je bilo collinearities med tirozin, fenilalanin in triptofan (vse R > 0,8), smo ocenili odnos med stopnjami tirozin, fenilalanin in triptofan in EGC v treh različnih modelih in ocenjena prilagojene koeficientov v posamezen model. Povišani nivoji teh aromatskih aminokislin v želodčnem soku so bile povezane z EGC (tirozin: prilagojen beta koeficient 1,801, SE 0,527 fenilalanin: prilagojen β koeficient 2,555, SE 0,586; triptofan: prilagojen β koeficient 4,414, SE 0,945) (tabela 5 ). Tako lahko povišane ravni aromatskih aminokislin v želodčnem soku neodvisni označevalcev za odkrivanje EGC.

Pogovor

V naših predhodnih študijah smo opazili povečano fluorescence želodčnega soka v AGC in ugotovila tri fluorescence biomarkerjev za presejalne napredovalega raka želodca [12], [15]. Ali so ti potencialni biomarkerji koristne za zgodnje odkrivanje raka želodca, je negotova. V naši trenutni preiskavi, smo testirali veljavnost uporabo aromatskih aminokislin v želodčnem soku za diagnozo EGC. Naši rezultati kažejo, da so prisotne v želodčnem soku iz bolnikov z EGC primerjavi z bolniki NGD visoke stopnje aromatskih aminokislin. Tako lahko visoka stopnja aromatskih aminokislin v želodčnem soku je izredno pomembno za zgodnje odkrivanje EGC.

Zaradi velikosti je thesmall vzorca, smo izvedli analizo moči za preskus Kruskal-Wallis in AUC ROC. Za naše znanje, formule ali postopke za določanje velikosti vzorca, potrebne za testiranje razlik v večkratnih vzorčnih lokacijah uporabljajo neparametrični metode so veliko bolj zapletena [19], in nobena metoda izračuna moč ali velikost vzorca je trenutno na voljo v zvezi z generičnim alternativne hipoteze za preskus Kruskal-Wallis [20]. Lachenbruch in Clements je predlagal, da bi morali test Kruskal-Wallis večjo moč, kot je F-testa, ko so izplačila prebivalstva ni normalno. Trdili so, da je bil v primerjavi z F-test test Kruskal-Wallis bolj robustna odhodov iz predpostavke o enakosti varianc [21]. Tako, z uporabo moči F-testa približati moč testa Kruskal-Wallis lahko zagotovijo slaba spodnjo mejo za normalne porazdelitve. Po preoblikovanju ranga, bližji pristojnosti - so bili izračunani (1 β napake) z F-test (ANOVA), kot se izvaja v SRS 8.1. Vsi sosednima pooblastil več kot 0,99. Tako smo lahko zanesljivo sklepamo, da so ravni skupnih beljakovin in aromatskih aminokislin v želodčnem soku bistveno razlikujejo med NGD, AGC in EGC. Moč analiz so ROC krivulje izvajajo z uporabo točno programske opreme 2008. Nobena od sil je bilo manj kot 0,99. Zato je sprejemljivo, da sklepati, da visoka raven aromatskih aminokislin v želodčnem soku lahko dragocene napovednika AGC ali EGC.

Izboljšana proizvodnja aromatskih aminokislin v EGC ustreza rezultate za prejšnje študije [15] in je v skladu s prvih poročil v drugih malignih bolezni (krvne [22], pljuč [23] [24] [25], prsi [23], [24], mehurja [26], itd.) Predvidevamo, da se lahko iz naslednjih razlogov račun za ta pojav. Prvič, tumorske celice zahtevajo dovolj aromatičen aminokislin, da se kopičijo v žarišč raka za izpolnitev močno povečane potrebe za sintezo beljakovin v podporo hitro rast. Visoko izraz aminokisline transporterjev (na primer L-tipa amino kisline transporter 1) v različnih tumorjih [27], [28], [29], [30], [31], [32], [33] [34], [35] so poročali v številnih študijah. transporterji aminokislinskih lahko poveča prevoz aminokislin in nabirajo aromatske aminokisline blizu raka žarišča. Infiltracija prekomernih aromatskih aminokislin lahko znatno poveča želodčnega soka v EGC primerjavi z NGD. Drugič, zmotna presnova v rakave celice pred vidne spremembe v želodcu rakotvornost [11]. Znano je, da se pojavijo nepravilnosti prevoza amino kisline in presnovo v rakasto regiji pogosto v zgodnji fazi raka želodca. Želodčni sok, ki ga generira želodčni epitela, vsebuje velike količine informacij o metabolno stanje epitela. Zato se lahko informacije, pridobljene iz analize želodčni sok koristni pri ločevanju biomarkerjev za zgodnje odkrivanje raka želodca. Končno, matrične metaloproteinaze (MMP), ki so encime, ki razgradijo v zunajcelični matriks in bazalne membrane, igrajo vlogo v zgodnji fazi tumourigenesis [36] [37] [38] [39] [40]. Prekomerno ekspresijo in aktivnost MMP pospešuje degradacijo ekstracelularnega matriksa in bazalne membrane. Degradacija matriksa ustvarja aromatskih aminokislin v želodčnem soku, ki obdaja tumorske celice. Poleg tega lahko v krvi aromatske aminokisline zlahka prodrejo oslabljeno kleti membrano in epitelijskih karcinoma žarišč in povečati raven aminokislin v želodčnega soka. Ti razlogi bi lahko pojasnilo pomembno povečanje aromatskih aminokislin v želodčnega soka pri bolnikih EGC.

zgodnji fazi raka želodca je nekaj simptomov in da se lahko zamudil z običajno endoskopijo [6], [41]. Te težave zmanjšati stopnjo zgodnjega odkrivanja in učinkovitega zdravljenja raka želodca. Nenormalne vrednosti aromatskih aminokislin v želodčnem soku, se lahko uporabljajo za spremljanje pojava motnjami v presnovi aminokislin in razkrivajo zgodnje maligne transformacije, ki se pojavljajo v želodcu. Predvsem naši rezultati kažejo, da so lahko nivoji aromatskih aminokislin v želodčnem soku razlikovati EGC od gastritis. Ta ugotovitev uvaja možnost, da se te biomarkerjev lahko uporablja za množično presejanje raka želodca v zgodnji fazi. Merjenje ravni aromatskih amino kislin v vzorcih želodčnih sokov je lahko učinkovit, ekonomičen, hiter in priročen način za odkrivanje AGC ali EGC v populaciji.

Čeprav se aromatske aminokisline lahko obeta biomarkerjev za EGC, tam še vedno pomanjkljivosti, povezane s tem pristopom. Uporaba manj invazivne postopke, bi bilo koristno za namene spremljanja. Pri želodčnih sokov v naši raziskavi so med endoskopijo posrka ki bi močno omejujejo uporabo ocenjevanje želodca biomarkerjev sok za odkrivanje EGC. Povečati potencialno uporabo te ugotovitve je mogoče uvesti brez endoskopske sredstva za vzorčenje želodčni sok. Endogastric kapsula [42], [43], [44] je 45-50 cm, dolžina najlona nit povezana s kapsulo vsebuje vpojno papir. Kapsula lahko želodčni vzorčenje sok bolj sprejemljiva, neboleča in primerna za bolnike v primerjavi z želodčno zbiranje soka, ki ga endoskopijo. Nivoje aromatskih aminokislin v želodčnem soku je mogoče vplivati ​​s tekočino in živil, ki jih pacient zaužije. Zato, polno tešče pri bolnikih s slabim želodca gibljivost je bistvenega pomena za izboljšanje točnosti biomarkerja testih in odkrivanja raka želodca. Ker je velikost vzorca v tej študiji je majhen, so potrebne večje študije, da se ugotovi, ali lahko aromatske aminokisline v želodčnega soka pomaga pri zgodnjem odkrivanju raka želodca v zgodnji fazi. Poleg tega bodo nadaljnje študije ugotoviti optimizirane mejne vrednosti za vsako oznako. Ko se ugotovi, da so diagnostične vrednosti presejalni bi lahko nove metode (kot masne spektrometrije) omogočajo enostavne, hitre in visoko pretočno detekcijo aromatskih aminokislin v želodčnem soku.

Na koncu je bistveno povečana raven od aromatski aminokisline so našli v želodčnega soka pri bolnikih s pozno fazo ali raka želodca v zgodnji fazi v primerjavi s skupino NGD. Analiza aromatskih aminokislin lahko učinkovita metoda za zgodnje odkrivanje raka želodca. Če potrjene v študiji obsežno, bi aromatske aminokisline v želodčnega soka je uporabna kot biomarkerjev za presejalne EGC v splošni populaciji.

Priznanja

Avtorji bi se rad zahvalil, da Qiuming Geng , Shigang Ding Qinqin Tao, Jingjing Lu Yan Deng in vsi kolegi v endoskopijo prostorih Peking University tretjega bolnišnici za njihovo pomoč pri pobiranju želodčnega soka.

• Plos ONE: Funkcionalna Promotor -308G > varianta v faktor tumorske nekroze a sklepati Gene je povezana s tveganjem in napredovanja želodčnega raka v kitajski Population
• Plos ONE: MUC4 and MUC1 Izražanje v adenokarcinom želodca povezana s plovil invazijo in bezgavk metastaz: An imunohistokemičnim proučevanje zgodnjega želodca Cancer