PLoS ONE: didelis aromatiniai amino rūgščių skrandžio sulčių ankstyvajame skrandžio vėžio progresavimo

Anotacija

Fonas

Jaunesniųjų skrandžio vėžys yra dažniausiai besimptomė ir gali būti lengvai praleistų lengvai įprastinių gastroskopijos. Šiuo metu nėra jokių naudingų biologiniai žymenys, dėl ankstyvam skrandžio vėžiu, o skubiai reikia jų identifikavimas biologinius žymenis.

Metodai

Skrandžio sultys buvo gauta iš 185 tiriamųjų, kurie buvo suskirstyti į tris grupes : ne neoplazminė skrandžio liga (NGD), pažangių skrandžio vėžys ir ankstyvas skrandžio vėžys (EGC). Aromatinių amino rūgščių lygius skrandžio sulčių buvo kiekybiškai naudojant efektyviosios skysčių chromatografijos metodu.

Rezultatai

mediana vertės (25-75-procentilio) tirozino, fenilalanino ir triptofano skrandžio sultys buvo 3,8 (1,7-7,5) mikrogramai /ml, 5,3 (2,3-9,9) mikrogramai /ml ir 1,0 (0,4-2,8) g /ml NGD; 19,4 (5,8-72,4) mikrogramai /ml, 24,6 (11,5-73,7) mikrogramai /ml ir 8,3 (2,1-28,0) mikrogramų /ml EGC. buvo pastebėtas aukštesnio lygio tirozino, fenilalanino ir triptofano skrandžio sulčių individų EGC grupių palyginti tų NGD grupės (NGD vs EGC P
< 0,0001). Dėl EGC aptikimu, pagal ROC kreivė kreivės (AUC) kiekvieno biologinis žymuo sritys buvo taip: tirozino, 0,790 [95% pasikliautinasis intervalas (PI), 0,703-0,877]; fenilalaninas, 0,831 (95% PI, 0,750-0,911); ir triptofano, 0,819 (95% PI, 0,739-0,900). Jautrumas ir specifiškumas fenilalanino buvo 75,5% ir 81,4%, atitinkamai, aptikti EGC. Kelis logistinės regresijos analizė parodė, kad didelis aromatinių amino rūgščių skrandžio sulčių buvo susijęs su skrandžio vėžiu (Pritaikytas beta koeficientai svyravo nuo 1.801 iki 4.414 P
< 0,001).

Išvada

Padidėjęs tirozino, fenilalanino ir triptofano skrandžio sulčių mėginių aptikta anksti etape skrandžio kancerogenezėje. Tokiu būdu, tirozino, fenilalanino ir triptofano skrandžio sulčių gali būti naudojamas kaip biomarkeriai, skirtais ankstyvajam skrandžio vėžio. Skrandžio sulčių analizė yra efektyvus, ekonomiškas ir patogus būdas ankstyvajame skrandžio vėžio vystymąsi bendroje populiacijoje

nurodomoji dalis:. Dan K Lin S Zhou L Li Y Chen, M, Wang Y et Al. (2012) didelis aromatiniai amino rūgščių skrandžio sulčių ankstyvajame skrandžio vėžio progresavimą. PLoS vieną iš 7 (11): e49434. Doi: 10,1371 /journal.pone.0049434

redaktorius: Alejandro H. Corvalán, Pontificia Universidad Catolica de Chile, Medicinos fakultetas, Čilė

Įstojo: balandžio 27, 2012 m Priėmė: Balandis 7, 2012 m Paskelbta: Lapkričio 13, 2012

Visos teisės saugomos: © 2012 Dan et al., Tai atviros prieigos straipsnis platinama pagal Creative Commons Attribution licencija, kuri leidžia nevaržomai naudotis, paskirstymo ir dauginimąsi bet kokioje laikmenoje sąlygomis, su sąlyga, kad pirmasis autorius ir šaltinis įskaitomos

Finansavimas:. Šis tyrimas parėmė Nacionalinės Gamtos mokslo fondo Kinijos [dotacijos numeris: 3097415] (URL: http://www.nsfc.gov.cn/e_nsfc/desktop/zn/0101.htm~~HEAD=pobj). Į finansuotojai neturėjo vaidmenį studijų dizainas, duomenų rinkimo ir analizės, sprendimų skelbti, ar ruošiant rankraštį

konkuruojančių interesų.. Autoriai pareiškė, kad nėra konkuruojantys interesai egzistuoja

Įvadas

skrandžio vėžys yra antra labiausiai paplitusi rūšis vėžio Rytų Azijoje, ir skrandžio vėžiu sergančių pacientų prognozė yra prasta kaip vėlai aptikimo rezultatas [1], [2], [3]. Iki šiol, skrandžio vėžio išgyvenimo ir paciento gyvenimo kokybė yra tik labai pagerėjo, jei vėžys diagnozuojamas anksti [4]. Deja, mažiau nei 5% pradžioje skrandžio vėžio atvejų aptinkami ir diagnozuojama greitai [5].

Endoskopija po patologinio biopsijos dabar priimtiniausias būdas anksti aptikti skrandžio vėžys (EGC). Tačiau EGC praleidžiama dažnai gastroskopijos metu, nes nepilnametis pažeidimas gali būti lengvai pamiršta, biopsiją netinkamai, arba aiškinama neteisingai, patologai [6], [7]. EGC daugiausia simptomų iki sunkių simptomų atsiradimo, ir endoskopinės tyrimas remiasi sunkių simptomų visada atitolina skrandžio vėžio aptikimą. Gyventojų pagrindu patikrinimas gali palengvinti ankstyvą nustatymą ir diagnozuoti skrandžio vėžį. Tačiau ir patyrę endoscopists stoka ir pacientas diskomfortas susijęs su procedūra sumažinti šį metodą kaip atrankos priemonę EGC taikymą.

Mažiau invazinės ir efektyvesnių biologiniai žymenys yra reikalingi EGC aptikimo masės atranka. Dabartinė biologiniai žymenys pepsinogen, karcinoembrioninį antigenas (CEA) ir angliavandenių antigenas 19-9 (CA19-9), nepakanka tiksliai prognozuoti skrandžio vėžį ankstyvoje stadijoje [8], [9], [10].

Jis yra gerai nustatyta, kad medžiagų apykaitos pakitimai atsiranda prieš morfologinius pokyčius piktybinio audinio [11]. Nemaža informacijos apie medžiagų apykaitos būklę skrandžio epitelio yra pateiktas skrandžio sulčių. Todėl, skrandžio sultys gali būti naudojamas nustatyti diagnostinį testą ir nustatyti vertingų ir veiksmingų biologinių žymeklių už EGC atrankos. Į ankstesnių tyrimų, mes sukūrėme fluorescencija spektro analizę skrandžio sulčių [12], [13], [14] ir nustatė tris fluorescencijos biomarkeriai (aromatinis amino rūgštys skrandžio sulčių) [15], kad gali būti naudojamas atskirti taip pat progresavusio skrandžio vėžys (AGC) nuo gerybinių ligų. Tačiau ji vis dar neaišku, ar šie biologiniai žymenys gali atskirti EGC ir gerybinių ligų. Šis tyrimas buvo atliktas siekiant patikrinti hipotezę, kad skrandžio sulčių biologiniai žymenys turi diagnostinius tyrimus vertę į EGC aptikti.

metodų

Etika pareiškimas

etika komitetas Pekino universitetas Sveikata Mokslas centras patvirtino šią mokslinių tyrimų studiją. Parašė informuotas sutikimas buvo gautas iš visų dalyvių, o visas klinikinis tyrimas buvo atliktas pagal išreikštoms Helsinkio deklaracijos principais.

Mėginio paėmimas

Mėginiai buvo surinkta endoskopija kambarių Pekine universiteto Trečia ligoninė. Visos pacientų mėginiai, gauti šiame tyrime buvo histologiškai patvirtinta gleivinės biopsija ir /ar pooperacinio patologijos nuo 2008 gruodžio iki 2012 metų liepą, kai nevalgius nakties metu, pacientai patyrė gastroskopija. Mėginiai skrandžio sulčių, kurios buvo be didelio maisto likučių, tulžies ir kraujo buvo surinkti. Mėginiai buvo atskirtos į 2 ml ir iš karto prie -80 ° C iki paskesnio analizės. Warthin-Žvaigždėtas (WS) dažymo buvo naudojamas siekiant aptikti Helicobacter pylori
infekciją visų egzempliorių (Skrandžio Ertmė buvo vienas iš biopsijos svetaines ir iš viso biopsijos svetainių buvo daugiau nei du).

dalyviai

skrandžio sulčių mėginiai buvo paimti iš 49 pacientų su EGC (6 atvejai buvo įtraukta į ankstesnių paskelbimo [15]). Buvo 26 atvejai židinio karcinoma ir 23 atvejai sunkia displazija, kuri galėtų būti klasifikuojami kaip EGC [16]. Be skrandžio sulčių mėginių išskirti iš pacientų, sergančių EGC, mėginiai iš 70 pacientų, sergančių ne neoplastiniu skrandžio ligos (NGD), kuris patyrė ambulatoriškai endoskopinis tyrimas procedūrą per tą patį laikotarpį buvo naudojami kaip kontrolinės grupės palyginimui. Kontrolinė grupė esančius 47 pacientams, sergantiems lėtiniu paviršutiniškai gastritas, 18 pacientams, sergantiems lėtiniu gastritu atrofinį ir 5 pacientams pepsinės opos. Be to, skrandžio sulčių mėginiai buvo atsitiktinai surinkti iš 66 pacientų su AGC (1 lentelė). Yra pastebėta pasirengimo endoskopinių inkstų ir kepenų funkcijos testų tyrime dalyvavusių subjektų jokių reikšmingų anomalijų. Dauguma tyrime dalyvavusių skrandžio vėžiu sergančių pacientų anksčiau nebuvo diagnozuota, ir nė vienas iš pacientų parodė didelę mitybos (Kamofsky veiklos statusas, KPS > 90).

bandinio apdorojimo

šaldytų mėginiai buvo atšildytas kambario temperatūroje ir centrifuguojamas 14000 rpm 20 minučių, esant 4 ° C temperatūroje. Nuosėdos buvo pašalintas, ir viršutinis sluoksnis buvo surinktas ir laikinai saugomi 4 ° C temperatūroje dėl šios eksperimento metu. Mėginiai buvo sunumeruoti atsitiktinės atrankos būdu. Bandytojas buvo apakinti į pacientų diagnozės nustatymo tarnybą, į tyrimą.

kiekybinis bendras baltymų skrandžio sulčių

Jei kiekybiškai baltymų kiekis, 100 mikrol skrandžio sulčių virš nuosėdų buvo išieškota ir iš karto skiedžiamas 900 pL 0,15 M fosfato buferio (pH 7.3) pH koreguoti. Bendras baltymų kiekis skrandžio sulčių buvo matuojamas naudojant PAST (bicinchoninic rūgštis) baltymų Bandymo rinkinys (Beijing Cowin Biotech Co Ltd, Pekinas, Kinija) pagal gamintojo protokolą. Jei baltymo koncentracija buvo iš darbo diapazone tyrimo (20-2000 mikrogramų /ml), mėginys buvo papildomai praskiesti ir ištirti pakartotinai.

Kiekybiniai System

Aromatiniai amino rūgščių skrandžio sulčių mėginiai buvo kiekybiškai naudojant fluorescencijos detektorių kartu su HPLC [17], [18], ir anksčiau nustatytos kiekybinės sistema [15] buvo taikomas šiame tyrime. HPLC Įleidimo filtras, Diamonsil (2) C18 (3 mkm, 250 × 4,6 mm), Analizinė kolonėlė (Dikma technologijos, Pekinas, Kinija) ir "Agilent 1100 serijos skysčių chromatografijos sistema (Agilent Technologies, Waldbronn, Vokietija) buvo naudojamas šis tyrimas. Sistema sudaryta iš vakuumo tirpiklis degazavimo įrenginio, keturių tirpiklių gradiento siurbliai, reguliuojamos temperatūros automatinis mėginių purkštuko, kolonėlės termostatas, ir 3D fluorescencijos detektoriumi (FLD). Chemstation programinė įranga buvo naudojama, kad kiekybiškai įvertintų aromatinių amino rūgščių kiekį skrandžio sulčių mėginių. Prieš atvirkštinių fazių HPLC analizės, skrandžio sulčių supernatantas buvo filtruojamas per 0,45 mkm HPLC filtrą. Aromatinių amino rūgščių, esančių skrandžio sulčių buvo atskirtos HPLC metu, atsižvelgiant į C18 analizės kolonėlę, naudojant 0.05% (v /v) trifluoracto rūgšties /vandens (HPLC tinkantis; Dikma technologijos) ir tirpiklio, A ir grynas acetonitrilo (HPLC tinkantis; Merck, Darmstadt, Vokietija), nes tirpiklio B judančiosios fazės modifikatorius gradiento eliuavimo sistema. Po to, kai adatos plovimo, mėginiai buvo suleistas esant 20-100 mikrol, injekcijos tūrio tūrio. HPLC tvarka ir eksperimentines sąlygas kiekvienam mėginiui yra išvardyti 2 lentelėje

aromatinės aminorūgšties kiekybinis

Standartiniai ir kokybės kontrolės sprendimai, kuriuose buvo lygiavertes koncentracijos L-tirozino, L-fenilalaninas ir L -triptofanas (99%, "Alfa Aesar Ward Hill, MA, JAV) buvo parengta koncentracija 0,5, 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0, 18,0 ir 20,0 mikrogramai /ml nustatyti kalibravimo kreives. Standartai buvo laikomi -80 ° C temperatūroje. Dvidešimt mikrolitrų mėginiai DDH _{2O (tuščias kontrolinio tirpalo) ir standartinių ir kokybės kontrolės mėginių buvo nustatyti ir patikrinti kalibravimo kreives prieš tiriant tris aromatinių amino rūgščių skrandžio sulčių mėginių. Jei tirozino, fenilalanino ir /ar triptofanu lygiai buvo iš išmatuotos diapazone, mėginiai buvo ištirti pakartotinai po to, kai keičiant injekcijos tūris (20-100 pl). Jei mėginio koncentracija buvo neaptinkamas po kelių mėginimų analizę, buvo priskiriamas balas nulio.}

Statistiniai metodai

buvo pasiekta priimtina normaliojo pasiskirstymo atveju duomenys buvo išreikštas priemonėmis ± SD (standartinis nuokrypis), o tarp grupių buvo lyginama naudojant ANOVA testą. Kai priimtina normalusis skirstinys nebuvo pasiektas, duomenys buvo išreikšti kaip medianos (25-75-procentilio). Kruskal-Wallis išbando po Dunn anketa keli palyginimas post hoc tyrimai (Bonferroni koreguoto reikšmingumo lygmeniu 0,05 /3 = 0,017) buvo naudojamos siekiant nustatyti skirtumus tarp trijų grupių skirtumus. Kruskal-Wallis ir Dunn anketa bandymai buvo atliekami naudojant Minitab (versija 16, Minitab Company, State College, PA) su KrusMC.MAC makro (gautą iš Minitab tinklalapyje). Mann-Whitney U testas buvo naudojamas tik palyginimams tarp dviejų grupių. Chi-kvadrato testas buvo naudojamas įvertinti tarp dviejų dviejų komponentų kintamųjų asociaciją. Pearson koreliacijos buvo pasirinkta analizuoti ryšį tarp kintamųjų asociacija. Dalinis koreliacija buvo įvertinti tarp aromatinių aminorūgščių lygį ir klinikine diagnoze, po kurio buvo priimtas dėl kontroliuojančių kintamųjų šalinimas asociacija. Imtuvas veikia savybę (ROC) kreivės ir sritis po kreive (AUC) ROC buvo taikomi įvertinti biologinių žymenų galiojimą ir nustatyti optimalų ribinės vertės. Visi kiti statistiniai tyrimai buvo dvipusiai, su, P
< 0,05 apibrėžiamas kaip statistiškai reikšmingas. Logistinės regresijos modeliai buvo naudojami apskaičiuoti beta koeficientus ir P
vertes kiekvieno faktoriaus /kovariantiniu. Visi skaičiavimai buvo atliekami su 2003 Excel (Microsoft Corporation, Seattle, WA, USA) ir statistiniai tyrimai buvo apskaičiuotas naudojant SPSS versija 15.0 (SPSS, Čikaga, IL, JAV) SAS 8.1 programinė įranga (SAS Institute Inc, Cary, NC) , ir perduoti 2008 programinės įrangos paketas (NCSS, Kaysville UT)

rezultatai

Klinikiniai Charakteristikos pacientai

Šis tyrimas numatė 185 pacientai suskirstyti į 3 grupes:. 70 NGD pacientų 66 AGC pacientų ir 49 EGC pacientai. Nebuvo jokių reikšmingų skirtumų Helicobacter pylori
infekcijos (6 atvejai praleidau) atsiradimo tarp trijų pogrupių. Amžius ir lytis svyravo tarp trijų pogrupių ( P
= 0,049 ir ​​ P
= 0,023) (1 lentelė).

Iš viso baltymų skrandžio sulčių

mediana (25. 75-procentilio) vertės bendro baltymų kiekio skrandžio sulčių mėginių buvo taip: NGD, 1.5 (0.9-2.4) mg /ml; AGC, 3,3 (2,3-5,1) mg /ml; ir EGC, 2,8 (1,6-3,7) mg /ml (3 lentelė). In bendro baltymų kiekio padidėjimas buvo pastebėtas, palyginti su ta NGD grupės (Dunn testas, AGC vs NGD P
<skrandžio sulčių mėginių iš AGC ir EGC grupėse; 0,0001; EGC vs NGD P
< 0,0001) (1 lentelė). Nebuvo skirtumo bendro baltymų kiekio tarp AGC grupės ir EGC grupės (Dunn testų, P
= 0,044, kuris yra didesnis nei reikšmingumo lygmeniu 0,017) (3 lentelė).

Kiekybiniai sistema

Kaip parodyta fluorescencijos chromatogramos (1 paveikslas), trys aromatinių amino rūgštys buvo visiškai atskirtos. Sulaikymo kartus su kiekvienu iš trijų amino rūgščių buvo taip: tirozino, 8 minutės; fenilalaninas, 12 min; ir triptofanas, 16 min. Kalibravimo kreivė, tiesiškumas ir darbo diapazonai buvo taip: tirozino, Y = 0.32X + 1,30, r ^{2 = 0,9999, 0,5-20,0 g /ml; fenilalaninas, Y = 7.15X + 1,03, r 2 = 0,9999, 0,5-20,0 g /ml; ir triptofano Y = 0.25X + 3,01, r 2 = 0,9999, 0,5-20,0 mikrogramai /ml. Tirozino, fenilalanino ir triptofano atgautos buvo 100,5 ± 2,7%, 101,3 ± 3,4% ir 99,6 ± 1,6%, atitinkamai. Tirozino, fenilalanino ir triptofano preciziškumui buvo 100.1 ± 0,5%, 100.0 ± 1,8% ir 98,7 ± 1,5%, atitinkamai. Ši eksperimentinė sistema buvo stabilus ir patikimas dėl aromatinių amino rūgščių kiekybinio skrandžio sulčių.}

Aromatiniai Amino rūgštys Analizės

mediana (25. 75-procentilio) vertės tirozino, fenilalanino ir triptofano buvo 3,8 (1,7-7,5) mikrogramai /ml, 5,3 (2,3-9,9) mikrogramai /ml ir 1,0 (0,4-2,8) g /ml, NGD mėginius; 18,3 (6,4-52,3) mikrogramai /ml, 25,7 (11,1-76,1) mikrogramai /ml ir 4,7 (2,5-20,3) mikrogramų /ml, AGC mėginius; ir 19,4 (5,8-72,4) mikrogramai /ml, 24,6 (11,5-73,7) mikrogramai /ml ir 8,3 (2,1-28,0) mikrogramų /ml EGC mėginių (3 lentelė). Aromatinių amino rūgščių lygius skrandžio sulčių buvo žymiai skirtingai tarp NGD, AGC ir EGC grupių (Kruskal-Wallis testas, tirozino χ ^{2 = 49,847, fenilalaninas χ 2 = 62,397, triptofanas χ 2 = 52,846, visi P
< 0,0001). Tirozino, fenilalanino ir triptofano lygis žymiai padidėjo skrandžio sultis, gautas iš abiejų AGC ir EGC grupes, palyginti su tais, iš NGD grupės (Dunn testas, AGC vs NGD, visi P
< 0,0001; EGC vs NGD, visi P
< 0,0001) (3 lentelė ir 2 pav.) Pakoregavus už bendro baltymų lygių skrandžio sulčių poveikio, reikšmingų asociacijos dar egzistavo tarp aromatinių aminorūgščių lygį ir klinikinės diagnozės (dalinė koreliacija, AGC vs NGD: tirozino, r = 0,334 p
< 0,001; fenilalaninas, R = 0,257 P
< 0,001; ir triptofano, R = 0,312 P
< 0,001; EGC vs NGD: tirozino, R = 0,378 P
< 0,001; fenilalaninas, R = 0,392 P
< 0,001; ir triptofano, R = 0,380 P
< 0,001). Nebuvo jokių reikšmingų skirtumų tarp tirozino, fenilalanino ir triptofano tarp AGC ir EGC skrandžio sulčių mėginių lygių (Dunn testas P
= 0,811 P
= 0,781 ir P
= 0,691, atitinkamai) (3 lentelė). Šis rezultatas atitiko ankstesnių tyrimų išvadas [15] nurodyta, kad nėra jokių asociacijų tarp Helicobacter pylori
infekcija ir aromatinių amino rūgščių lygius skrandžio sulčių (Mann-Whitney U testas, tirozino, p
= 0,871; fenilalanino P
= 0,742;. triptofanas P
= 0,913)}

galiojimas aromatiniai amino rūgštys už AGC ir EGC

ROC kreive analizės atskirti AGC ir NGD, srityse pagal kreives (AUC) tirozino, fenilalanino, triptofano ir bendro baltymo buvo 0,824 [95% pasikliautinasis intervalas (PI), 0,753-0,895, P
< 0,001] 0,858 (95% PI, 0,794-0,922 P
< 0,001), 0,818 (95% PI, 0,747-0,889 P
< 0,001) 0,803 (95% PI, 0,728-0,878 P
< 0,001), atitinkamai (3A pav ir 4 lentelę). Pagal ROC kreive analizės atskirti EGC ir NGD, kad AUC už tirozino, fenilalanino, triptofano ir bendro baltymo buvo 0,790 (95% PI, 0,703-0,877 P
< 0,001), 0,831 (95 % PI 0,750-0,911 P
< 0,001), 0,819 (95% PI, 0,739-0,900 P
< 0,001) 0,719 (95% PI, 0,623-0,814 P
< 0,001), atitinkamai (Fig.3B ir 4 lentelė). Optimizuotos ribinės vertės atskirti AGC arba EGC iš NGD buvo pasirinkta nustatant maksimalias sumas jautrumo ir specifiškumo nuo ROC kreivėmis (4 lentelė). Pasirinkę optimizuotas vertybes, jautrumas, specifiškumas ir tikslumas reikia atskirti AGC ir NGD buvo taip: tirozino, 83,3%, 68,6% ir 75,7%; fenilalaninas, 81,8%, 75,7% ir 78,7%; triptofanas, 84,8%, 68,6% ir 76,5%; ir bendro baltymo, 75,8%, 74,3% ir 75,0%. Pasirinkę optimizuotas vertybes, jautrumas, specifiškumas ir tikslumas reikia atskirti EGC ir NGD buvo taip: tirozino, 75,5%, 71,4% ir 73,1%; fenilalaninas, 75,5%, 81,4% ir 79,0%; triptofanas, 61,2%, 97,1% ir 82,4%; ir bendro baltymo, 59,2%, 81,4% ir 72,3% (4 lentelė). Pasirinkę optimizuotas vertybes pateiktoms mūsų ankstesniame tyrime [12], [15], jautrumas, specifiškumas ir tikslumas už EGC aptikti buvo taip: tirozino, 51,0%, 94,3% ir 76,5%; fenilalaninas, 79,6%, 74,3% ir 76,5%; triptofanas, 61,2%, 94,3% ir 80,7%; ir bendro baltymo, 83,7%, 62,9% ir 71,4%. Naudojant kitą optimizuotą vertę, gavome panašius rezultatus. Naudojant tirozino, fenilalanino ir triptofano derinys nebuvo žymiai pagerinti AGC ar EGC aptikimo nes trijų aromatinių amino rūgščių skrandžio sulčių mėginių koncentracija buvo glaudžiai susijusi su kiekvieno kito (tirozino-fenilalaninas, R = 0,871; tyrosine- triptofanas, R = 0,941; fenilalanino-triptofanas, R = 0,840 p
. < 0,001 už kiekvieną)

logistinė regresinė analizė

logistinės regresijos analizę, buvo įvertintas ryšys tarp aromatinio amino rūgščių, esančių skrandžio sulčių ir EGC lygių. Vienmatės logistinės regresijos analizė buvo atliekama siekiant įvertinti prognozavimo vertybes kandidačių biologinių žymenų už EGC aptikti. Šiais Vienaveiksnės analizių, beta koeficientai (SE) amžių, lytį, Helicobacter pylori
statusas, baltymų ir padidėjęs aromatinės aminorūgšties lygiai skrandžio sulčių buvo apskaičiuotas. Keturi kintamieji (Amžius ir Padidėjęs tirozino, fenilalanino ir triptofanu lygių skrandžio sulčių) buvo P
< 0,05 ir buvo nustatyti naudojant keletą logistinė regresinė analizė (5 lentelė). Nes ten buvo collinearities tarp tirozino, fenilalanino ir triptofano (visi R > 0,8), mes įvertino tarp tirozino, fenilalanino ar triptofano ir EGC lygius santykius trijų atskirų modelių ir įvertintas pakoreguotas koeficientus kiekvienam modeliui. Į padidėjęs šių aromatinių amino rūgščių skrandžio sulčių buvo susiję su EGC (tirozino: reguliuojamas beta koeficiento 1.801, VĮ 0,527; fenilalanino:;: reguliuojamas β koeficientas 4,414, VĮ 0.945 triptofanas reguliuoti β koeficientas 2,555, VĮ 0,586) 5 (lentelė ). Taigi, Padidėjęs aromatinių amino rūgščių skrandžio sulčių gali būti nepriklausomi žymenys už EGC aptikti.

Diskusijos

mūsų ankstesnių tyrimų, pastebėjome padidėjusį fluorescenciją skrandžio sulčių AGC ir nustatė tris fluorescencijos biologinius žymenis dėl atrankinės patikros išplitusiu skrandžio vėžiu [12], [15]. Ar šie potencialūs biologiniai žymenys yra naudinga ankstyvam skrandžio vėžys yra neaiški. Mūsų dabartiniame tyrime, mes buvo patikrintas naudojant aromatinių amino rūgščių į skrandžio sulčių produktams, EGC diagnozės galiojimo laiką. Mūsų rezultatai rodo, kad aukšto lygio aromatinių amino rūgščių yra pateikti į skrandžio sulčių pacientų, kuriems yra EGC, palyginti su NGD pacientams. Taigi, didelis aromatinių amino rūgščių skrandžio sulčių gali būti vertinga ankstyvam EGC.

Dėl thesmall imties dydis, buvo atliekami elektros analizė Kruskal-Wallis testas ir ROC AUC. Mūsų žiniomis, formulės ar procedūras nustatant imties dydį būtina patikrinti skirtumus daugelio mėginių vietose naudojant neparametrinius metodus yra daug sudėtingesnis [19], ir jokios galios ar imties dydis skaičiavimo metodas šiuo metu yra apie generinio alternatyvios hipotezės už Kruskal-Wallis testas [20]. Lachenbruch ir Clements pasiūlė, kad Kruskal-Wallis testas gali turėti didesnę galią nei F-testo kai gyventojų pasiskirstymas nėra normalu. Jie teigė, kad, palyginti su F-bandymas, Kruskal-Wallis testas buvo daugiau atsparus išvykimai iš dispersinė [21] lygybės prielaida. Taigi, naudojant F kriterijaus galia suderinti Kruskal-Wallis testas galią gali numatyti prastas apačios normaliųjų skirstinių. Po rangas transformacijos, artimiausius įgaliojimai (1 - β paklaida) buvo apskaičiuotas naudojant F kriterijaus (ANOVA), kaip įgyvendinami SAS 8.1. Visi artimiausius įgaliojimų yra daugiau nei 0.99. Taigi, mes galime patikimai išvadą, kad bendras baltymas ir aromatinių amino rūgščių lygius skrandžio sulčių labai skiriasi tarp NGD, AGC ir EGC. Maitinimo analizes ROC kreivės buvo atliekamas naudojant perdavimo 2008 programinę įrangą. Nė vienas iš valdžių buvo mažesnis nei 0,99. Todėl, ji yra priimtina daryti išvadą, kad aukšto lygio aromatinių amino rūgščių skrandžio sulčių gali būti vertingi prognozei AGC arba EGC.

sustiprintas gamyba aromatinių amino rūgščių EGC atitinka rezultatų dėl ankstesniame tyrime [15], ir yra suderinamas su ankstyvaisiais ataskaitų kitų piktybinių ligų (kraujo [22], plaučių [23], [24], [25], krūties [23], [24], šlapimo pūslės [26], ir tt). Mes spėlioti, kad šios priežastys gali sudaryti šio reiškinio. Pirma, naviko ląstelės reikalauja pakankamai aromatingas amino rūgštys kauptis vėžio židinių patenkinti smarkiai padidėjo poreikius baltymų sintezei palaikyti spartų augimą. Didelis išraiška amino rūgščių transporterių (pavyzdžiui, L-tipo amino-rūgšties transporterio 1) įvairiose navikų [27], [28], [29], [30], [31], [32], [33], [34], [35] buvo pranešta daugelyje tyrimų. Amino rūgšties transporteriai gali padidinti amino rūgščių transporto ir kaupti aromatinių amino rūgščių šalia vėžio židinių. Perviršinio aromatinių amino rūgščių infiltracija gali žymiai padidėti skrandžio sulčių EGC, palyginti su NGD. Antra, netipinė metabolizmas vėžinių ląstelių būtų prieš matomus pokyčius skrandžio kancerogenezėje [11]. Ji yra žinoma, kad susidaręs aminorūgščių transporto ir metabolizmo sutrikimai vėžinių regione dažnai ankstyvos stadijos skrandžio vėžio. Skrandžio sulčių, kuris yra generuojamas skrandžio epitelio, yra didelį kiekį informacijos apie medžiagų apykaitos būklės epitelio. Todėl gaunama iš Analizuojant skrandžio sulčių informacija gali būti naudinga atskirti biologinius žymenis už ankstyvam skrandžio vėžio. Galiausiai, matricos metaloproteinazės (MMPs), kurios yra fermentų, kurie degraduoja tarpląsteliniame ir pamatinės membranos, žaisti vaidmenų pradžioje etapo tumorogenezės [36], [37], [38], [39], [40]. Virš išraiška ir veikla MMP pagreitina tarpląsteliniame ir pamatinės membranos degradaciją. Matricos degradacija generuoja aromatinių amino rūgščių skrandžio sulčių supančios auglio ląsteles. Be to, kraujo aromatinių amino rūgštys gali lengvai prasiskverbti nuvertėjusių pamatinės membranos ir epitelyje karcinomos židiniai ir padidinti aminorūgščių kiekį skrandžio sultyse. Šios priežastys gali paaiškinti žymiai padidina aromatinių amino rūgščių skrandžio sulčių iš EGC pacientams.

anksti etapas skrandžio vėžiu turi nedaug simptomų ir gali būti lengvai praleistų paprastųjų endoskopija [6], [41]. Šios problemos sumažinti ankstyvam ir veiksmingam gydymui skrandžio vėžio dažnį. Nenormalios lygiai aromatinių amino rūgščių, esančių skrandžio sulčių gali būti naudojami stebėti aminorūgščių apykaitos sutrikimų atsiradimo ir atskleisti ankstyvo piktybinius transformacijas, kurios atsiranda skrandžio. Pažymėtina, kad mūsų rezultatai rodo, kad aromatinių amino rūgščių lygius skrandžio sulčių gali išsiskirti EGC gastritu. Ši išvada yra numatyta galimybė, kad šie biomarkeriai gali būti naudojama masės patikrinimo skrandžio vėžio ankstyvoje stadijoje. Aromatinių aminorūgščių lygių skrandžio sulčių mėginių matavimas gali būti efektyvus, ekonomiškas, greitas ir patogus būdas aptikti AGC arba EGC populiacijoje.

Nors aromatinių amino rūgštys gali būti perspektyvus biologinius žymenis už EGC, ten vis dar yra trūkumų, susijusių su šiuo požiūriu. Iš mažiau invazinės procedūros naudojimas būtų naudingas atrankos tikslais. Skrandžio sultys mūsų tyrimo buvo įsiurbiamas endoskopijos metu, o tai labai apriboja įvertinti skrandžio sulčių biologinius žymenis už EGC aptikimo taikymą. Norėdami padidinti galimą taikymą šios išvados, ne endoskopinės priemonės gali būti nustatytos mėginių ėmimo skrandžio sulčių. Endogastric kapsulė [42], [43], [44] yra 45-50 cm ilgio iš nailono siūlų prijungtas prie kapsulės pateikta sugeriamuoju popieriumi. Kapsulė gali padaryti skrandžio sulčių mėginių ėmimo labiau priimtinas, neskausmingas ir patogus pacientams, palyginti su skrandžio sulčių surinkimo endoskopija. Aromatinių amino rūgščių, esančių skrandžio sulčių lygiai gali turėti įtakos skysčio ir suvartojamo maisto pacientas. Todėl visiškai nevalgius pacientams su prasta skrandžio motorikos yra būtinas stiprinant biologinis tyrimų ir skrandžio vėžio nustatymo tikslumą. Kadangi imties dydis šiame tyrime yra nedidelis, didesni tyrimai turi nustatyti, ar aromatinių amino rūgščių skrandžio sulčių gali padėti ankstyvajame pakopų skrandžio vėžiu. Be to, tolesni tyrimai bus nustatyti optimalų krašto vertybes kiekvieno persekiotoją. Kai diagnostinius tyrimus vertės nustatė, nauji metodai (pavyzdžiui, masių spektrometrijos) galėtų leisti, dėl tos paprastos, greitos ir didelio našumo nustatymo aromatinių amino rūgščių skrandžio sulčių.

Taigi, žymiai padidėjęs aromatinių amino rūgštys buvo rasta skrandžio sulčių iš pacientams, sergantiems vėlyvos stadijos arba ankstyvos stadijos skrandžio vėžio, palyginti su NGD grupės. Aromatiniai amino rūgščių analizė gali būti efektyvus metodas, skirtais ankstyvajam skrandžio vėžio. Jei patvirtintas didelio masto tyrimą, aromatiniai amino rūgščių skrandžio sulčių būtų naudinga, kaip biologinių žymenų ir patikros EGC bendroje populiacijoje.

Padėka

autoriai norėtų padėkoti Qiuming geng , Shigang Ding Qinqin Tao Jingjing Lu Yan Dan ir visi kolegos endoskopija kambarių Pekino universiteto trečiojo ligoninės už jų pagalbą skrandžio sulčių surinkimo.

• PLoS ONE: Funkcinis Rėmėjas -308G > variantas naviko nekrozės faktoriaus alfa genas, susijusio su rizikos ir progresavimo skrandžio vėžio Kinijos Population
• PLoS ONE: MUC4 and MUC1 raiška adenokarcinoma skrandžio koreliuoja su laivo invazija ir limfmazgiuose metastazių: An Imunohistocheminiais studija ankstyvosios Skrandžio Cancer