PLoS One: a magas szintű aromás aminosavak gyomornedv korai szakaszában gyomorrák Progression

absztrakt katalógusa

Háttér katalógusa

A korai stádiumú gyomorrák többnyire tünetmentes, és könnyen lehet kihagyni könnyen hagyományos gasztroszkópia. Jelenleg nincsenek hasznos biomarkerek a korai felismerés a gyomorrák, és azonosításuk biomarkerek sürgősen szükség van. Katalógusa

Módszerek katalógusa

A gyomornedv kapunk 185 alanyok, melyek három csoportra oszthatók : nem-daganatos gyomor betegség (NGD), az előrehaladott gyomorrák és a korai gyomorrák (EGC). A szintek az aromás aminosavak a gyomornedvben arra alkalmazásával mennyiségileg meghatároztuk HPLC.

Eredmények

mediánértékek (25. és 75. percentilis) a tirozin, fenil-alanin és a triptofán, a gyomor lé voltak 3,8 (1,7-7,5) mg /ml, 5,3 (2,3-9,9) ug /ml és 1,0 (0,4-2,8) ng /ml NGD; 19,4 (5,8-72,4) ug /ml, 24,6 (11,5-73,7) mg /ml és 8,3 (2,1-28,0) ng /ml EGC. A magasabb szintű tirozin, fenil-alanin és a triptofán a gyomornedvben észleltek egyének EGC csoportban, mint azok a NGD csoport (NGD vs. EGC, P
< 0,0001). Kimutatására EGC, alatti területek a vevő működési karakterisztika görbék (AUC) minden egyes biomarker a következők voltak: a tirozin, 0,790 [95% -os konfidencia intervallum (Cl), 0,703-0,877]; fenil-alanin, 0,831 (95% CI, 0,750-0,911); és a triptofán, 0,819 (95% CI, 0,739-0,900). Az érzékenység és specificitás fenilalanin volt 75,5%, illetve 81,4% -kal, az észlelése EGC. A logisztikus regressziós analízis megmutatta, hogy a magas szintű aromás aminosavak a gyomornedvben jártak gyomorrák (korrigált β együtthatók között mozgott 1,801-4,414, P
< 0,001).

Következtetés

Emelkedett tirozin, fenil-alanin és a triptofán a gyomornedvben mintákat kimutatható a korai szakaszában a gyomor carcinogenesis. Így, tirozin, fenil-alanin és a triptofán a gyomornedvben lehetne használni biomarkerek a korai felismerés a gyomorrák. A gyomornedv elemzés egy hatékony, gazdaságos és kényelmes szűrővizsgálati módszere korai gyomorrák fejlesztés a lakosság. Katalógusa

Citation: Deng K, Lin S, Zhou L, Li Y, Chen M, Wang Y, et al. (2012) magas szintje az aromás aminosavak gyomornedv korai szakaszában gyomorrák Progression. PLoS ONE 7 (11): e49434. doi: 10,1371 /journal.pone.0049434 katalógusa

Szerkesztő: Alejandro H. Corvalan, Pontificia Katolikus Egyetem Chile, Általános Orvostudományi Kar, Chile katalógusa

Beérkezett: április 27, 2012; Elfogadva: október 7, 2012; Megjelent: november 13, 2012 katalógusa

Copyright: © 2012 Deng és mtsai. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Forrás: A kutatás támogatta a Nemzeti Természettudományi Alapítvány Kína [Grant szám: 3097415] (URL: http://www.nsfc.gov.cn/e_nsfc/desktop/zn/0101.htm). A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa

Bevezető

a gyomorrák a második leggyakoribb rákos Kelet-Ázsiában, és a gyomorrák prognózisa betegek rossz eredményeként késői felismerés [1], [2], [3]. A mai napig, gyomorrák túlélési és a beteg életminőségét csak jelentősen javult, ha a rák korai diagnózis [4]. Sajnos, kevesebb mint 5% -a korai gyomorrák észlelnek diagnosztizáltak azonnal [5]. Katalógusa

endoszkópos majd kóros szövettani most a legjobb módszer, hogy idejekorán kimutathatók gyomorrák (EGC). Azonban EGC kimaradt során gyakran gasztroszkópia, mert egy kisebb elváltozás könnyen figyelmen kívül hagyni, a biopszia nem megfelelően vagy hibásan értelmezett a patológusok [6], [7]. EGC nagyrészt tünetmentes kezdete előtt a súlyos tünetek, és egy endoszkópos vizsgálat alapján súlyos tünetek mindig késlelteti a kimutatására gyomorrák. A népesség-alapú szűrés megkönnyítheti a korai felismerés és diagnózis a gyomorrák. Azonban mind a hiánya tapasztalt endoszkópos és a beteg rossz közérzet az eljárással együtt járó csökkentése E módszer alkalmazása a szűrési eszköz EGC.

kevésbé invazív és hatékonyabb biomarkerek van szükség a kimutatására EGC tömegszázalékban szűrés. A jelenlegi biomarkerek pepszinogén karcinoembrionális antigén (CEA) és szénhidrát antigén 19-9 (CA19-9), nem elegendőek a pontosan előre gyomorrák korai szakaszában [8], [9], [10]. Katalógusa

Ez jól, hogy a metabolikus rendellenességek fordultak elő előtt jelentős morfológiai változásokat a malignus szövetben [11]. A jelentős mennyiségű vonatkozó információk metabolikus állapota a gyomornyálkahártya tartalmazza a gyomornedvben. Ezért gyomornedv lehet használni, hogy létrehoz egy diagnosztikai teszt, és meghatározza az értékes és hatékony biomarkerek EGC szűrés. A korábbi vizsgálatok, hoztunk létre a fluoreszcencia spektrum analízis a gyomornedv [12], [13], [14] és az azonosított három fluoreszcencia biomarkerek (aromás aminosavak gyomornedvben) [15], hogy lehet használni, hogy megkülönböztessék az előrehaladott gyomorrák rák (AGC) jóindulatú betegségek. Ez azonban még mindig bizonytalan, hogy ezek a biomarkerek tudja különböztetni EGC és jóindulatú betegségek. Ez vizsgálatot végeztünk, hogy teszteljék a hipotézist, hogy a gyomorsav biomarkerek diagnosztikus szűrés érték kimutatására EGC. Katalógusa

Módszerek katalógusa

Etikai Nyilatkozat katalógusa

Az etikai bizottság a pekingi egyetem egészségügyi Tudományos Központ jóváhagyta a kutatási tanulmány. Írásos beleegyezését adta az összes résztvevő, és a teljes klinikai vizsgálat szerint végeztük kifejtett elveket a Helsinki Nyilatkozatban. Katalógusa

Mintavétel katalógusa

A mintákat gyűjtöttünk az endoszkópia szoba a pekingi Egyetem harmadik Kórház. Minden beteg kapott minták ebben a vizsgálatban is szövettanilag igazolt nyálkahártya biopsziával és /vagy műtét utáni patológia, 2008 decemberétől 2012. július után egy éjszakai éhezés, a betegnél gasztroszkópia. A mintákat a gyomornedv, hogy mentes volt a bruttó ételmaradékok, epe és vért vettünk. A mintákat elválasztottuk a 2 ml-es alikvot, és azonnal -80 ° C-on későbbi elemzéshez. Warthin-Starry (WS) festést alkalmaztunk detektálására Helicobacter pylori fertőzés katalógusa állapotát Minden mintát (a gyomor antrum egyike volt a biopszia helyszínek és az összes biopszia helyek több mint kettő).

a résztvevők katalógusa

gyomomedvet nyert 49 beteg EGC (6 esetben vontak be egy korábbi publikáció [15]). Voltak 26 esetben a fokális karcinóma és 23 esetben súlyos diszplázia, hogy lehet minősíteni EGC [16]. Amellett, hogy a gyomornedv mintákat izoláljuk a betegek EGC származó mintákat 70 beteg nem neoplasztikus gyomor betegség (NGD) átesett egy járóbeteg endoszkópos eljárással ugyanazon időszak alatt használták fel a kontrollcsoport. A kontroll csoport tartalmazott 47 krónikus felületes gyomorhurut, 18 beteg krónikus atrófiás gyomorhurut, és 5 páciens peptikus fekélyek. Továbbá, gyomornedv mintákat véletlenszerűen gyűjtött 66 beteg AGC (1. táblázat). Nem volt jelentős eltérések figyelhetők meg a pre-endoszkópos vese és májfunkciós teszteket a felvett tárgyak. A legtöbb felvett gyomorrákos betegek korábban nem diagnosztizált, és sem a betegekben jelentős alultápláltság (Kamofsky performance status, KPS > 90). Katalógusa

A minta kezelése katalógusa

A fagyasztott mintákat felengedjük szobahőmérsékleten, és centrifugáltuk 14000 rpm fordulatszámon 20 percen át 4 ° C-on. A csapadékot eltávolítjuk, és a felső fázist kinyerjük, és átmenetileg tárolja 4 ° C hőmérsékleten a következő kísérletben. A mintákat véletlenszerűen számozott. A kísérletvezető nem ismerte a betegek diagnózis toborzott a tanulmány.

számszerűsítése összfehérje gyomornedvben

számszerűsíteni a fehérjetartalom, a 100 ul gyomornedv felülúszót kinyerjük, és azonnal hígítjuk, 900 ul 0,15 M foszfát-puffer (pH 7,3), hogy a pH beállításához. A teljes fehérjetartalmat a gyomornedvben mértük BCA (bicinchoninsav-) protein assay kit (Peking Cowin Biotech Co. Ltd., Peking, Kína), a gyártó protokollja szerint. Ha a protein koncentráció volt, ki a működési tartománya a vizsgálati eljárás (20-2000 ng /ml), a mintát tovább hígítottuk, és ismételni.

kvantitatív rendszer

aromás aminosavak a gyomor lé mintákat alkalmazásával mennyiségileg meghatároztuk fluoreszcens detektor együtt HPLC [17], [18], és a korábban megállapított mennyiségi rendszer [15] alkalmazták ebben a vizsgálatban. HPLC bemeneti szűrő, egy Diamonsil (2) C18 (3 um, 250 × 4,6 mm) analitikai oszlop (Dikma Technologies, Beijing, China), és egy Agilent 1100 sorozatú folyadékkromatográfiás rendszer (Agilent Technologies, Waldbronn, Németország) használtuk ebben tanulmány. A rendszer egy vákuum oldószer gáztalanító egység, négy oldószer gradiens szivattyú, egy hőmérséklet-szabályozott automatikus minta injektor, egy oszlop termosztáttal és egy 3D fluoreszcens detektor (FLD). Chemstation szoftver használtuk mennyiségének meghatározására aromás aminosavak a gyomornedvben mintákban. Mielőtt a fordított fázisú HPLC-elemzése, a gyomornedv felülúszót átszűrjük egy 0,45 um-es HPLC-szűrőt. Az aromás aminosavak a gyomornedvben elválasztjuk közben HPLC-vel C18 analitikai oszlop alkalmazásával 0,05% (v /v) trifluor-ecetsav /víz (HPLC minőségű; Dikma Technologies), miközben oldószerként és tiszta acetonitril (HPLC minőségű; Merck, Darmstadt, Németország), mint a B oldószer mozgófázissal módosítók egy lineáris gradiens elúciós rendszert. Miután egy tű mosás, a mintákat injektáltuk térfogatban 20-100 | il injekciós térfogatban. A HPLC eljárás és kísérleti körülmények minden egyes mintából a 2. táblázatban felsorolt ​​

aromás aminosav számszerűsítése

Standard és a minőség-ellenőrzési megoldásokat tartalmazó ekvivalens koncentrációjú L-tirozin, L-fenil-alanin és az L -tryptophan (99%, az Alfa Aesar, Ward Hill, MA, USA) állítottuk elő koncentrációban 0,5, 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0, 18,0 és 20,0 ug /ml létrehozni kalibrációs görbéket. A standardokat -80 ° C-on. Húsz-mikroliter alikvotjait DDH _{2O (üres kontroll oldat), és a standard és minőség-ellenőrzési mintákat megállapítására használt, és ellenőrzi a kalibrációs görbék vizsgálata előtt a három aromás aminosavak a gyomornedvben mintákban. Ha a szint a tirozin, fenil-alanin és /vagy triptofán voltak ki a mérési tartományban, a mintákat újraelemezték megváltoztatása után az injektált térfogat (20-100 ul). Ha a minta koncentrációja nem volt kimutatható, miután több kísérlet elemzés azt pontot rendelünk nulla.}

Statisztikai módszerek

Amikor egy elfogadható normális eloszlás sikerült elérni, az adatokat fejeztük az eszközöket ± SD (standard deviáció), és az összehasonlításokat a csoportok között végeztük az egyirányú ANOVA teszt. Ha elfogadható normális eloszlás nem érte el, az adatok fejeztük felező (25. és 75. percentilis). Kruskal-Wallis teszteket, majd Dunn-féle többszörös összehasonlító post hoc teszteket (Bonferroni-korrigált szignifikancia szint 0,05 /3 = 0,017) arra használták, hogy meghatározzák a különbségeket a három csoport között. A Kruskal-Wallis és Dunn teszteket végeztük Minitab (version 16, Minitab Company, State College, PA) a KrusMC.MAC makró (melyet a Minitab honlapján). A Mann-Whitney U-tesztet csak használják közötti összehasonlítást két csoportban. A Chi-négyzet-tesztet használtuk megbecsülni az egyesület két bináris változókat. A Pearson-féle korrelációs választották, hogy elemezze a szövetség között változó. A parciális korrelációs azt vizsgáltuk, hogy az egyesület között, az aromás aminosavak szintjét és a klinikai diagnózis, ami eltávolítását egy sor szabályozóváltozók. A vevő működési karakterisztika (ROC) görbék, és a görbe alatti területek (AUC) a ROC alkalmazták érvényességének vizsgálatára a biomarkerek és azonosítani az optimalizált vágási értékek. Minden más statisztikai tesztek kétoldalas, a P katalógusa < 0,05 meghatározott statisztikailag szignifikánsnak. Logisztikus regressziós modellt alkalmaztunk, hogy kiszámolja β együtthatók és P katalógusa értékeket minden tényezőt /kovariáns. Minden számítást végeztünk Excel 2003 (Microsoft Corporation, Seattle, WA, USA), és a statisztikai tesztek alkalmazásával számoltuk SPSS 15.0 verzióját (SPSS, Chicago, IL, USA), a SAS 8.1 szoftver (SAS Institute Inc., Cary, NC) és PASS 2008 szoftvercsomag (NCSS, Kaysville, UT). katalógusa

Eredmények katalógusa

betegek klinikai jellemzőit katalógusa

Ez a tanulmány tartalmazott 185 beteg külön 3 csoport: 70 beteg NGD 66 AGC betegek és 49 EGC betegeknél. Nem volt szignifikáns különbség a előfordulása Helicobacter pylori fertőzés katalógusa (6 eset kimaradt) között három alcsoportra. Az életkor és a nemek eltérő volt a három alcsoportra ( P katalógusa = 0,049 és P katalógusa = 0,023) (1. táblázat). Katalógusa

Total Protein gyomornedv katalógusa

a medián (25. és 75. percentilis) az értékek a teljes fehérjetartalom a gyomornedvben minták a következők voltak: NGD, 1,5 (0,9-2,4) mg /ml; AGC, 3,3 (2,3-5,1) mg /ml; és EGC, 2,8 (1,6-3,7) mg /ml (3. táblázat). A növekedés a teljes fehérjetartalom volt megfigyelhető a gyomornedvben mintákat az AGC és EGC csoportok viszonyított a NGD csoport (Dunn-teszt, az AGC vs. NGD, P
< 0,0001; EGC vs. NGD, P katalógusa < 0,0001) (1. táblázat). Nem volt különbség a teljes fehérjetartalom között az AGC-csoport és az EGC csoport (Dunn teszteket, P katalógusa = 0,044, ami nagyobb, mint a szignifikancia szintje 0,017) (3. táblázat). Katalógusa

kvantitatív rendszer

Amint azt a fluoreszcencia kromatogram (1. ábra), a három aromás aminosavak teljesen elválasztjuk. A retenciós idők az egyes a három aminosav a következők voltak: tirozin, 8 perc; fenil-alanin, 12 perc; és a triptofán, 16 min. A kalibrációs görbe, a linearitás és a munka tartományok a következők voltak: a tirozin, Y = 0.32X + 1,30, r ^{2 = 0,9999, 0,5-20,0 ng /ml; fenil-alanin, Y = 7.15X + 1,03, r 2 = 0,9999, 0,5-20,0 ng /ml; és a triptofán, Y = 0,25x + 3,01, R 2 = 0,9999, 0,5-20,0 ng /ml. A behajtások tirozin, fenilalanin és triptofán voltak 100,5 ± 2,7%, 101,3 ± 3,4% és 99,6 ± 1,6% volt. A pontosságok tirozin, fenil-alanin és a triptofán voltak 100,1 ± 0,5%, 100,0 ± 1,8%, illetve 98,7 ± 1,5% volt. Ez a kísérleti rendszer stabil és megbízható számszerűsítésére aromás aminosavak gyomornedv. Katalógusa}

aromás aminosavak Analitika katalógusa

A medián (25. és 75. percentilis) értékei tirozin, fenilalanin és triptofán voltak 3,8 (1,7-7,5) mg /ml, 5,3 (2,3-9,9) ug /ml és 1,0 (0,4-2,8) ug /ml, a NGD mintákban; 18,3 (6,4-52,3) ug /ml, 25,7 (11,1-76,1) mg /ml és 4,7 (2,5-20,3) mg /ml az AGC mintákban; és 19,4 (5,8-72,4) ug /ml, 24,6 (11,5-73,7) mg /ml és 8,3 (2,1-28,0) mg /ml a EGC mintákban (3. táblázat). A szintek az aromás aminosavak a gyomornedvben szignifikánsan eltérően között NGD, AGC és EGC csoportok (Kruskal-Wallis tesztet, tirozin χ ^{2 = 49,847, fenilalanin χ 2 = 62,397, triptofán χ 2 = 52,846, minden P katalógusa < 0,0001). A szinteket a tirozin, fenil-alanin és a triptofán szignifikánsan növelte a gyomornedvben nyert mind az AGC és EGC csoportokban, összehasonlítva azokkal a NGD csoport (Dunn-teszt, az AGC vs. NGD, mind p
< 0,0001; EGC vs. NGD, mind p
< 0,0001) (3. táblázat és 2. ábra). Beállítása után a hatás az összes fehérje szintje a gyomornedv, szignifikáns összefüggést még létezett az aromás aminosav szintjét, és a klinikai diagnózis (parciális korrelációs, AGC vs. NGD: tirozin, R = 0,334, P
< 0,001 fenilalanin, R = 0,257, P &katalógusa 0,001; és a triptofán, R = 0,312, P &katalógusa 0,001; EGC vs. NGD: tirozin, R = 0,378 P &katalógusa 0,001; fenilalanin, R = 0,392, P &katalógusa 0,001; és a triptofán, R = 0,380, P katalógusa < 0,001). Nem volt szignifikáns különbség a szintek tirozin, fenilalanin és triptofán között az AGC és EGC gyomornedv minták (Dunn-teszt, P katalógusa = 0,811, P katalógusa = 0,781 és P
= 0,691, sorrendben) (3. táblázat). Ez az eredmény összhangban van korábbi eredményekkel [15], hogy jelzett, hogy nem társulásai között léteznek Helicobacter pylori
fertőzés és a szintek aromás aminosavak a gyomornedvben (Mann-Whitney U teszt alkalmazásával, a tirozin, a P
= 0,871; fenilalanin, P katalógusa = 0,742; triptofán, P katalógusa = 0,913). katalógusa}

érvényessége aromás aminosavak kimutatására AGC és EGC

a ROC görbe analízis megkülönböztetni AGC és NGD, a görbe alatti területeket (AUC) tirozin, fenil-alanin, triptofán és a teljes fehérje voltak 0,824 [95% -os konfidencia intervallum (Cl), 0,753-0,895, P katalógusa < 0,001], 0,858 (95% CI, 0,794-0,922, P katalógusa < 0,001), 0,818 (95% CI, 0,747-0,889, P <katalógusa 0,001) és 0,803 (95% CI, 0,728-0,878, P katalógusa < 0,001), illetve (3A és 4. táblázat). Szerint a ROC görbe analízis különbséget tenni a EGC és NGD, az AUC-értékek a tirozin, fenil-alanin, triptofán és a teljes fehérje voltak 0,790 (95% CI, 0,703-0,877, P
< 0,001), 0,831 (95 % CI, 0,750-0,911, P katalógusa < 0,001), 0,819 (95% CI, 0,739-0,900, P katalógusa < 0,001) és 0,719 (95% CI, 0,623-0,814 P katalógusa < 0,001), illetve (3B és 4. táblázat). Az optimalizált cut-off értékek megkülönböztetésére AGC vagy EGC honnan NGD választottunk, hogy meghatározzuk a maximális összegeket érzékenysége és specificitása a ROC görbék (4. táblázat). Kiválasztása után az optimalizált értékeket, az érzékenység, a specificitás és pontosság szükséges megkülönböztetni AGC és NGD a következők voltak: tirozin, 83,3%, 68,6%, illetve 75,7%; fenil-alanin, 81,8%, 75,7%, illetve 78,7%; triptofánt, 84,8%, 68,6%, illetve 76,5%; és a teljes fehérje, 75,8%, 74,3% és 75,0%. Kiválasztása után az optimalizált értékeket, az érzékenység, a specificitás és pontosság szükséges megkülönböztetni EGC és NGD a következők voltak: tirozin, 75,5%, 71,4% és 73,1%; fenil-alanin, 75,5%, 81,4% és 79,0%; triptofán, 61,2%, 97,1%, illetve 82,4%; és a teljes fehérje, 59,2%, 81,4% és 72,3% (4. táblázat). Kiválasztása után az optimalizált értékeket jelentettek a korábbi tanulmány [12], [15], az érzékenység, a specificitás és pontosság kimutatására EGC a következők voltak: a tirozin, 51,0%, 94,3% és 76,5%; fenil-alanin, 79,6%, 74,3% és 76,5%; triptofán, 61,2%, 94,3% és 80,7%; és teljes fehérje, 83,7%, 62,9% és 71,4%. Egy másik optimalizált érték, hasonló eredményeket kaptunk. Kombinációját használva tirozin, fenil-alanin és a triptofán nem jelentősen javítja az észlelési AGC vagy EGC mert a koncentrációt az három aromás aminosavak a gyomornedvben mintákat szorosan kapcsolódik egymáshoz (tirozin-fenil-alanin, R = 0,871; tirozin triptofán, R = 0,941; fenilalanin-triptofán, R = 0,840, P katalógusa < 0,001 mindkét esetben). katalógusa

a logisztikus regressziós analízis katalógusa

a logisztikus regressziós elemzés Association szintje közötti aromás aminosavak a gyomornedvben és EGC értékeltük. Az egyváltozós logisztikus regressziós analízist végeztünk, hogy értékelje a prediktív értéke jelölt biomarkerek kimutatására EGC. Ezekben egyváltozós elemzések, a β együtthatók (SE) életkor, nem, Helicobacter pylori
állapot, fehérje és emelkedett aromás aminosavak szintjét a gyomornedvben számoltunk. Négy változók (életkor és emelkedett tirozin, fenil-alanin és a triptofán szintek gyomornedvben) volt egy P
< 0,05 és azonosítottunk alkalmazásával többszörös logisztikus regressziós analízis (5. táblázat). Mert voltak collinearities között tirozin, fenil-alanin és a triptofán (összes R > 0,8), megvizsgáltuk a kapcsolat a szintek a tirozin, fenil-alanin vagy triptofán és EGC három különböző modellek és becsült a korrigált együtthatókat minden egyes modell. Az emelkedett ezek aromás aminosavak a gyomornedvben jártak EGC (tirozin: korrigált β koefficiens 1,801, SE 0,527; fenil-alanin: korrigált β koefficiens 2,555, SE 0,586; triptofán: korrigált β koefficiens 4,414, SE 0,945) (5. táblázat ). Így emelkedett aromás aminosavak a gyomornedvben független lehet markerek kimutatására EGC.

Discussion

A mi korábbi vizsgálatok már megfigyelhető megnövekedett fluoreszcencia gyomornedv AGC és három olyan fluoreszcens biomarkerek szűrésére előrehaladott gyomorrák [12], [15]. Hogy ezeket a potenciális biomarkerek hasznosak a korai felismerés a gyomorrák bizonytalan. A mi jelenlegi vizsgálatban teszteltük a érvényességét felhasználásával aromás aminosavak a gyomornedvben diagnosztizálására EGC. Eredményeink azt mutatják, hogy a magas szintű aromás aminosavak vannak jelen a gyomornedvben betegekből származó EGC képest NGD betegeknél. Így a magas aromás aminosavak a gyomornedv lehet értékes korai felismerése EGC. Katalógusa

Mivel a thesmall minta mérete, hálózati analízis Kruskal-Wallis tesztet és ROC AUC végeztünk. Tudomásunk szerint a képleteket, vagy eljárásokat mintanagyság meghatározásához szükséges tesztelni különbségek több mintával helyekről paraméteres eljárások sokkal bonyolultabb [19], és nem kapcsol be és mintanagyság számítási módszer jelenleg rendelkezésre arra vonatkozó általános alternatív hipotézis a Kruskal-Wallis teszt [20]. Lachenbruch és Clements azt javasolta, hogy a Kruskal-Wallis tesztet lehet nagyobb erővel bírnak, mint az F-próba, amikor a lakosság eloszlás nem normális. Azt állították, hogy míg az F-teszt, a Kruskal-Wallis-teszt volt erőteljesebb ellen eltérések a feltételezés az egyenlőség variancia [21]. Így, a hatalom az F-próba, hogy közelítse a hatalom a Kruskal-Wallis tesztet egy silány alsó korlátját normális eloszlás. Következő rangot átalakulás, a közeli hatalmak (1 - β hiba) számították ki az F-próba (ANOVA) megvalósított SAS 8.1. Minden közeli hatáskörét több mint 0,99. Így tudjuk megbízhatóan következtetni, hogy a szintek a teljes fehérje és aromás aminosavak a gyomornedvben jelentősen eltér között NGD, AGC és EGC. Teljesítmény elemzi a ROC görbék végeztük PASS 2008 szoftver. Egyik hatáskörök kisebb volt, mint 0,99. Ezért elfogadható arra következtetni, hogy a magas szintű aromás aminosavak a gyomornedvben lehet értékes prediktív AGC vagy EGC.

A fokozott termelésére aromás aminosavak EGC megfelel az eredményeket egy korábbi tanulmány [15], és összhangban van a korai beszámolók más rosszindulatú betegségek (a vér [22], a tüdőben [23], [24], [25], mell [23], [24], hólyag [26], stb.) Úgy gondoljuk, hogy a következő okok miatt lehet felelős ezért a jelenségért. Először is, a tumorsejtek igényelnek elegendő aromás aminosavak felhalmozódni a daganatos góc, hogy megfeleljen a meredeken emelkedett igényeket fehérjeszintézist, hogy támogassa a gyors növekedés. A magas kifejezése aminosavak transzporterek (például L-típusú amino-sav-transzporter 1) különböző tumor [27], [28], [29], [30], [31], [32], [33], [34], [35] számoltak be számos tanulmány. Aminosav transzportereket fokozhatja a közlekedési aminosavak és felhalmozódnak aromás aminosavak mellett rák gócok. A beszivárgás túlzott aromás aminosavak jelentősen növelheti a gyomornedv EGC képest NGD. Másodszor, aberráns anyagcsere rákos sejtekben megelőzik a látható változásokat gyomor karcinogenezis [11]. Ismeretes, hogy a rendellenességek aminosav transzport és metabolizmusát, egy rákos régióban fordulnak elő gyakran a korai szakaszában a gyomorrák. Gyomornedv, amelyet által generált gyomornyálkahártya, tartalmaz jelentős mennyiségű információt a metabolikus állapotot az epithelium. Ezért a kapott információk elemzésekor gyomornedv hasznos lehet elválasztó biomarkerek a korai kimutatására gyomorrák. Végül, a mátrix metalloproteinázok (MMP-k), amelyek enzimeket, amelyek degradálják az extracelluláris mátrix és a bazális membrán, szerepet játszanak a korai szakaszában tumorgenesisben [36], [37], [38], [39], [40]. A túlzott expressziója és aktivitása az MMP-k gyorsítja a lebomlást az extracelluláris mátrix és a bazális membrán. A lebomlási mátrix generál aromás aminosavak a gyomornedvben környező tumorsejtekre. Továbbá, a vér aromás aminosavak könnyen behatolnak a károsodott alapmembrán és epitélium carcinoma gócok és fokozza aminosavak szintjét a gyomornedvben. Ezek az okok is magyarázzák a jelentősen javul aromás aminosavak gyomornedv-re EGC betegeknél. Katalógusa

A korai szakaszában gyomorrák kevés tünet, és könnyen kimaradt hagyományos endoszkópia [6], [41]. Ezek a problémák csökkentik a korai felismerés és hatékony kezelés gyomorrák. Abnormális szintű aromás aminosavak a gyomornedvben lehet használni, hogy figyelemmel kíséri a bekövetkezése aminosav-anyagcsere rendellenességek, és felfedi a korai malignus transzformáció, hogy előfordulnak a gyomorban. Nevezetesen, eredményeink azt mutatják, hogy a szintek aromás aminosavak a gyomornedvben tudja különböztetni EGC gyomorhurut. Ez a megállapítás bevezeti azt a lehetőséget, hogy ezek a biomarkerek lehet használni a tömeges szűrővizsgálatra gyomorrák korai szakaszában. A mérés az aromás aminosavak szintjét a gyomornedvben minták lehetnek egy hatékony, gazdaságos, gyors és kényelmes módszer kimutatására AGC vagy EGC egy populációban.

Bár aromás aminosavak ígéretes biomarkerek EGC, ott még mindig kapcsolódó hátrányok ezt a megközelítést. A kevésbé invazív eljárások előnyös lenne szűrési célokra. A gyomornedvek vizsgálatunkban szívjuk, endoszkópia során, ami súlyosan korlátozza alkalmazhatóságát értékeli gyomornedv biomarkerek kimutatása céljából EGC. Potenciáljának növelése alkalmazása ezt a megállapítást, nem endoszkópos eszközökkel lehet bevezetni a mintavétel gyomornedv. Egy endogastric kapszula [42], [43], [44] egy 45-50 cm hosszúságú nylon szál csatlakozik egy kapszulát tartalmaz nedvszívó papírra. A kapszula lehet, hogy a gyomornedv mintavétel elfogadhatóbb, fájdalommentes és a beteg számára kényelmesebb, mint a gyomorsav gyűjtemény endoszkópia. A szintek az aromás aminosavak a gyomornedvben lehet befolyásolni a folyadék és az élelmiszer által fogyasztott a beteg számára. Ezért teljes böjtölés olyan betegeknél, akiknek a gyomor motilitás elengedhetetlen fokozására pontosságának biomarker vizsgálatokban és gyomorrák detektálás. Mivel a minta mérete ebben a tanulmányban kicsi, a nagyobb vizsgálatok szükségesek annak eldöntésére, hogy az aromás aminosavak a gyomornedvben segíthet szűrés korai stádiumú gyomorrák. Emellett további vizsgálatok azonosítására optimalizált határ értékeket minden marker. Miután a diagnosztikai szűrés értékek azonosított, új módszerek (mint például a tömegspektrometria) lehetővé tenné az egyszerű, gyors és nagy áteresztőképességű kimutatására aromás aminosavak a gyomornedvben.

Összefoglalva, jelentősen megnövekedett szintje aromás aminosavakat találtak a gyomornedvben betegekből származó késői szakaszában vagy korai stádiumú gyomorrák képest NGD csoport. Az elemzés aromás aminosavak lehetnek egy hatékony módszer a korai felismerés a gyomorrák. Ha validált egy nagyszabású tanulmány, aromás aminosavak gyomornedv lenne hasznos biomarkerek szűrésére EGC az általános népesség körében. Katalógusa

Köszönetnyilvánítás katalógusa

A szerzők ezúton szeretnének köszönetet mondani Qiuming Geng , Shigang Ding Qinqin Tao, Jingjing Lu Yan Deng és minden kollégának az endoszkóp szobában a pekingi egyetem harmadik Kórház a segítséget gyomornedv gyűjtemény. katalógusa

• PLoS One: Funkcionális Promoter -308G > A Variant a tumor nekrózis faktor alfa gén asszociált Kockázat és progresszió a gyomorrák a kínai népesség
• PLoS One: MUC4 és MUC1 expressziója a Adenocarcinoma A gyomor korrelál Hajó Invasion és nyirokcsomómetastasis: immunhisztokémiai vizsgálata Korai gyomorrák