PLoS ONE: Visoka razina aromatske aminokiseline u želučanom soku, tijekom ranih stadija raka želuca Progression

Sažetak pregled

Pozadina pregled

Rani stadij raka želuca je uglavnom asimptomatski i mogu se lako propustili lako konvencionalnim gastroskopija. Trenutno ne postoje korisni biomarkera za rano otkrivanje raka želuca, te je hitno potrebna njihova identifikacija biomarkera. Pregled

Metode

želučanog soka koji je dobiven od 185 ispitanika koji su bili podijeljeni u tri skupine : ne-neoplastični želuca bolesti (NGD), uznapredovali rak želuca i rana rak želuca (EGC). Razine aromatskih aminokiselina na želučani sok se kvantificiraju pomoću visokodjelotvorne tekućinske kromatografije. Pregled

Rezultati

Vrijednosti medijana (25. do 75. percentile) tirozin, fenilalanin i triptofan u želučanoj sok su 3,8 (7/1-5/7) ig /ml, 5,3 (3.2.-9.9.) ig /ml i 1,0 (0,4-2,8) ig /ml u NGD; 19,4 (5,8-72,4) ig /ml, 24,6 (11,5-73,7) ig /ml i 8,3 (2,1-28,0) lg /ml u EGC. Više razine tirozin, fenilalanin i triptofan na želučani sok su kod pojedinaca EGC skupina u usporedbi s onima iz grupe NGD (NGD vs. EGC P pregled i 0.0001). Za otkrivanje EGC, područja pod prijemnik karakteristične krivulje (AUC) svakog biomarkera su kako slijedi: tirozin, 0.790 [95% interval pouzdanosti (CI), 0,703-0,877]; fenilalanin, 0.831 (95% Cl, 0,750-0,911); i triptofan, 0.819 (95% Cl, 0,739-0,900). Osjetljivost i specifičnost fenilalanina su 75,5% i 81,4%, odnosno za otkrivanje IOB. Višekratnik Logistička regresijska analiza pokazala je da visoke razine aromatskih amino kiselina u želučanom soku su povezani s karcinomom želuca (podešene koeficijenti beta u rasponu od 1.801 do 4.414, P pregled < 0,001). Pregled

zaključak pregled

Povećane razine tirozin, fenilalanin i triptofan u uzorcima želučani sok nađene su u ranoj fazi želučanog karcinogeneze. Tako, tirozin, fenilalanin i triptofan u želučanom soku, mogu se koristiti kao biomarkera za rano otkrivanje raka želuca. Želučani analiza sok je učinkovit, ekonomičan i praktičan postupak za razlučivanje rani razvoj karcinoma želuca u općoj populaciji pregled

Izvor:. Deng K, Lin S, Zhou L, Li Y, Chen M, Wang Y, et al. (2012) Visoka razina aromatske aminokiseline u želučanom soku, tijekom ranih stadija raka želuca progresiju. PLoS ONE 7 (11): e49434. doi: 10,1371 /journal.pone.0049434 pregled

Urednik: Alejandro H. Corvalan, Pontificia Universidad Catolica de Chile, Medicinski fakultet, Čile pregled

Primljeno: 27. travnja 2012; Prihvaćeno: 7. listopada 2012. godine; Objavljeno: 13. studenog 2012 pregled

Copyright: © 2012 Deng i sur. Ovo je otvorenog pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan

financiranja. Ovo istraživanje je podržan od strane Nacionalne zaklade prirodoslovni Kine [Grant broj: 3097415] (URL: http://www.nsfc.gov.cn/e_nsfc/desktop/zn/0101.htm~~HEAD=pobj). U financijeri nisu imali ulogu u studiju dizajna, prikupljanja i analize podataka, Odluka o objavi, ili pripremu rukopisa pregled

U konkurenciji interese.. Autori su izjavili da ne postoje suprotstavljeni interesi pregled

Uvod pregled

rak želuca je drugi najčešći tip raka u istočnoj Aziji, te je prognoza bolesnika s rakom želuca je slab kao posljedica kasnog otkrivanja [1], [2], [3]. Do danas, preživljavanje raka želuca i kvalitete života pacijenta samo da je dramatično poboljšana ako se rak dijagnosticira rano [4]. Nažalost, manje od 5% od ranih slučajeva raka želuca su otkriti i dijagnosticirati odmah [5]. Pregled

Endoskopija slijedi patološkog biopsija je sada najbolja metoda za rano otkrivanje raka želuca (EGC). Međutim, EGC je često propustili tijekom gastroskopija jer je maloljetan lezija može lako previdjeti, biopsije nedovoljno ili pogrešno protumačena od strane patologa [6], [7]. EGC je uglavnom bez simptoma prije početka teškim simptomima, i endoskopska istraživanje na osnovi teških simptoma uvijek odgađa otkrivanje raka želuca. screening Stanovništvo bazi može olakšati rano otkrivanje i dijagnozu raka želuca. Međutim, kako je nedostatak iskusnih endoscopists i nelagoda pacijenta povezane s postupkom smanjiti primjenu ove metode kao sredstvo probira za IOB. Pregled

manje invazivne i učinkovitijih biomarkeri su potrebni za otkrivanje EGC u masi screening. Sadašnja biomarkeri pepsinogen, karcinoembrijski antigen (CEA), a ugljikohidratni antigen 19-9 (CA19-9), nisu dovoljna za točno predviđanje raka želuca u ranoj fazi [8], [9], [10]. Pregled

dobro je poznato da metaboličke abnormalnosti javljaju prije značajnih morfoloških promjena u malignom tkivu [11]. Znatan količina informacija koja se odnosi na metabolički stanje želuca epitel se nalazi u želučanom soku. Dakle, želučani sok može se koristiti za uspostavljanje dijagnostički test i identificirati vrijedne i učinkovite biomarkera za EGC screening. U prethodnim istraživanjima, uspostavili smo fluorescencije spektralna analiza želučanog soka [12], [13], [14] i identificirane tri fluorescencije biomarkera (aromatski aminokiselina želučani sok) [15] koje se mogu koristiti za razlikovanje napredne želuca rak (AGC) iz benignih bolesti. Međutim, još uvijek je neizvjesno hoće li ovi biomarkeri mogu razlikovati EGC i dobroćudnih bolesti. Ovo istraživanje je provedeno testiranje hipoteze da želučani sok biomarkeri imati dijagnostičku vrijednost probira u otkrivanju IOB. Pregled

Metode

Izjava Etika pregled

Etičko povjerenstvo Peking University Health Znanost centar odobren ovom istraživanju. Pismeni informirani pristanak dobiven je od svih sudionika, a cjelokupni Kliničko istraživanje je provedeno u skladu s načelima izraženim u Deklaraciji Helsinkija. Pregled

Prikupljanje pregled

Uzorci su prikupljeni na endoskopiju sobama Pekinga Sveučilište Treća bolnica. Svi pacijent uzorci dobiveni u ovom istraživanju su histološki potvrđena sluznice biopsija i /ili postoperativne patologije od prosinca 2008. do srpnja 2012. Nakon posta preko noći, pacijenti su podvrgnuti gastroskopija. Uzorci želučanog soka koji su bili slobodni od bruto ostataka hrane, žuč i krv su prikupljeni. Uzorci su odijeljeni u 2 ml alikvota i odmah pohraniti na -80 ° C za kasniju analizu. Warthin-Zvjezdano (WS) bojanje se koristi za otkrivanje Helicobacter pylori pregled statusa infekcije u svim uzorcima (želučanog antruma je bio jedan od biopsije web stranice i ukupan broj biopsija mjesta bio je više od dva).

sudionika

Primjerci želučanog soka dobiveni su od 49 bolesnika s EGC (6 slučajeva bili uključeni u prethodnom objavom [15]). Bilo je 26 slučajeva žarišna karcinoma i 23 slučajeva teškog displazija koja bi mogla biti klasificirana kao EGC [16]. Osim želučanog soka izoliranih iz pacijenata s EGC, uzorci od 70 bolesnika s ne-neoplastičnom bolesti želuca (NGD) podvrgnutih ambulantni postupak Endoskopija u istom razdoblju korišteni su kao kontrolna skupina za usporedbu. Kontrolna skupina sadržavala je 47 bolesnika s kroničnim gastritisom površno, 18 bolesnika s kroničnim atrofični gastritis i 5 bolesnika s čirom na želucu. Osim toga, uzorci želučani sok su nasumce prikupljeni od 66 ispitanika s AGC (tablica 1). Nije bilo značajnih nepravilnosti uočene u pre-endoskopske bubrega i funkcije jetre ispitivanja su regrutirani subjekata. Većina regrutira pacijenata oboljelih od raka želuca nisu bili prethodno dijagnosticiran, a niti jedan od pacijenata pokazali značajan pothranjenosti (status performanse Kamofsky, KPS > 90). Pregled

Primjer Liječenje pregled

smrznuti uzorci se odmrznu na sobnoj temperaturi i centrifugirana na 14000 rpm tijekom 20 minuta na 4 ° C. Talog se ukloni, a gornji sloj je izoliran i privremeno pohrani na 4 ° C tijekom slijedećeg eksperimenta. Uzorci su numerirani nasumce. Eksperimentator je oslijepio na dijagnozi pacijenata regrutiraju se u studiji. Pregled

Utvrđivanje ukupne količine proteina u želučanog soka Netlogu

Za kvantificiranje sadržaj proteina, 100 ul želučanog soka supernatant i odmah razrijedi s 900 ul 0.15 M fosfatnog pufera (pH 7.3) kako bi se podesio pH. Ukupni sadržaj proteina u želučanom soku je mjerena pomoću BCA (bicinkroniničnoj kiselina) komplet za određivanje proteina (Beijing Cowin Biotech Co Ltd, Peking, Kina) u skladu s uputama proizvođača. Ako je koncentracija proteina bila izvan radnog područja analize (20-2000 ug /ml), uzorak se dalje razrijedi i reanalyzed. Pregled

kvantifikacijskog sustava za pregled

aromatskih amino kiselina u želučanoj uzorci sok se kvantificiraju pomoću detektora fluorescencije u kombinaciji s HPLC [17], [18], a prethodno utvrđen kvantitativno sustav [15] primijenjena je u ovoj studiji. HPLC dotoka filter, Diamonsil (2) C18 (3 um, 250 x 4.6 mm) analitički stupac (Dikma Technologies, Beijing, Kina) i Agilent 1100 sustav za kromatografiju serije tekućine (Agilent Technologies, Waldbronn, Njemačka) su korištene u ovom studija. Sustav se sastojao od vakuum otapala za otplinjavanje jedinice četiri gradijent otapala crpke, temperature regulira automatskim mjenjačem uzoraka injektora, termostat na stupcu, te detektorom fluorescencije 3d (FLD). ChemStation software je upotrijebljen za određivanje količine aromatskih amino kiselina u uzorcima na želučani sok. Prije HPLC analize reverzne faze, želučani sok supernatant je filtriran kroz 0,45 um filter HPLC. Aromatske amino kiseline na želučani sok se razdvoji u HPLC na C18 analitičkoj koloni uz 0,05% (v /v) trifluoroctena kiselina /voda (HPLC stupnja, Dikma Technologies) kao otapalo A i čisti acetonitril (HPLC čistoća, Merck, Darmstadt, Njemačka) kao otapala B za modifikaciju mobilna faza u linearni gradijent ispiranja sustava. Nakon ispiranja igle, uzorci su injektirani u volumenu od 20-100 ul volumena ubrizgavanja. Postupak HPLC i eksperimentalni uvjeti za svaki uzorak su prikazani u Tablici 2. pregled

aromatična aminokiselina Kvantifikacija pregled

Standardni i kontrole kvalitete otopine koje su sadržavale ekvivalent koncentracija L-tirozin, L-fenilalanin i L triptofan (99%, Alfa Aesar, Ward Hill, MA, USA) su pripravljeni u koncentraciji od 0.5, 1.0, 2.0, 5.0, 10.0, 15.0, 18.0 i 20.0 ug /ml za uspostavljanje kalibracijske krivulje. Standardi su pohranjeni na -80 ° C. Dvadeset mikrolitarski alikvota RPK _{2O (slijepa kontrola otopine) i uzoraka standardnim i kontrole kvalitete kako bi se odredio i provjerite kalibracijske krivulje prije ispitivanja tri aromatske aminokiseline u uzorcima želučanog soka. Ako su razine tirozin, fenilalanin i /ili triptofana su izvan raspona mjerenog, uzorci su nakon promjene reanalyzed volumen ubrizgavanja (20-100 mL). Ako je koncentracija uzorka bila je nemjerljiva, nakon nekoliko pokušaja analize, to je dodijeljen rezultat od nule. Pregled}

Statističke metode

Kada je postignuta zadovoljavajuća normalna razdioba, podaci su izraženi kao sredstvo ± SD (standardna devijacija), a usporedbe među skupinama koje su koristili jedan ANOVA test. Kada je prihvatljivo normalna distribucija nije postignut, podaci su izraženi kao medijani (25. do 75. percentila). Kruskal-Wallis testova slijedi Dunn višestruke usporedbe Post hoc testovi (Bonferronijev-ispravljen razini značajnosti od 0,05 /3 = 0,017) korišteni su za određivanje razlike između tri skupine. Kruskal-Wallis i Dunn je Ispitivanja su provedena pomoću Minitab (verzija 16, Minitab Company, State College, PA) s KrusMC.MAC makro (saznati na web stranici Minitab). Mann-Whitney U test korišten je isključivo za usporedbe između dvije skupine. Chi-kvadrat test je korišten za procjenu povezanosti između dviju binarnih varijabli. Pearson korelacija je izabran analizirati povezanost između varijabli. Djelomični korelacija je korišten za procjenu povezanosti između nivoa aromatskih amino kiselina i kliničkom, što je rezultiralo u uklanjanju skupa kontrolnih varijabli. Prijamnik operativni karakteristične (RH) krivulje i površine ispod krivulje (AUC) RH se primjenjuje za procjenu valjanosti biomarkera i identificirati optimizirane cut-off vrijednosti. Svi ostali statistički testovi su dvostrano, s P izvoznici < 0,05 definirana kao statistički značajna. Logistički modeli regresije su korištene za izračun beta koeficijenti i P
vrijednosti za svaki faktor /kovarijata. Svi izračuni su provedeni s Excel 2003 (Microsoft Corporation, Seattle, WA, USA), a statistički testovi su izračunate pomoću SPSS verzija 15.0 (SPSS, Chicago, IL, USA), SAS 8.1 software (SAS Institute Inc., Cary, NC) i PASS 2008 programski paket (NCSS, kaysville, UT) pregled

Rezultati

Klinička obilježja bolesnika

Ovaj studiji sadrži 185 pacijenata odvojen u 3 skupine:. 70 NGD pacijente 66 AGC pacijenti i 49 EGC pacijenata. Nije bilo značajne razlike u učestalosti Helicobacter pylori pregled infekcije (6 slučajeva propustili) između tri podskupine. Dob i spol varirala između tri podskupine ( P pregled = 0,049 i P pregled = 0,023) (Tablica 1). Pregled

ukupnih proteina u želučanom soku, pregled

medijan (25 do 75. percentile) vrijednosti ukupnog sadržaja proteina u uzorku želučani sok su kako slijedi: NGD, 1.5 (0.9-2.4) mg /ml; AGC, 3,3 (3.2.-1.5.) mg /ml; i EGC, 2,8 (6.1.-7.3.) mg /ml (tablica 3). Povećanje ukupnog sadržaja proteina je u uzorcima želučani sok iz AGC i EGC skupine u odnosu na onaj NGD skupine (Dunnov test, AGC vs. NGD P pregled i 0,0001, EGC vs. NGD P pregled < 0,0001) (tablica 1). Nije bilo razlike u ukupnom sadržaj bjelančevina je između AGC skupine i skupine EGC (Dunn testovima, P pregled = 0.044, što je više od razine značajnosti od 0,017) (Tablica 3). Pregled

kvantitativni sustav pregled

Kao što je prikazano u fluorescentnom kromatogramu (slika 1), tri aromatske aminokiseline potpuno odvojeni. Vremena zadržavanja za svaku od tri amino kiseline su sljedeći: tirozin, 8 min; fenilalanin, 12 min; i triptofan, 16 min. Kalibracijska krivulja, linearnost i radni rasponi su kako slijedi: tirozin, Y = 0.32X + 1.30, R ^{2 = 0,9999, 0,5 do 20,0 ug /ml; fenilalanin, Y = 7.15X + 1.03, R 2 = 0,9999, 0,5-20,0 ug /ml; i triptofan, Y = 0,25x + 3.01, R 2 = 0,9999, 0,5-20,0 ug /ml. U naplate tirozin, fenilalanin i triptofan su 100,5 ± 2,7%, 101,3 ± 3,4% i 99,6 ± 1,6%, respektivno. A preciznost tirozin, fenilalanin i triptofan bili 100.1 ± 0.5%, 100,0 ± 1,8% i 98.7 ± 1.5%, redom. Ovaj eksperimentalni sustav je stabilan i pouzdan za kvantifikaciju aromatskih aminokiselina u želučanom soku. Pregled}

Aromatična Amino Kiseline Test pregled

Medijan (25. do 75. percentila) vrijednosti tirozin, fenilalanin i triptofan su 3,8 (7/1-5/7) ig /ml, 5,3 (3.2.-9.9.) ig /ml i 1,0 (0,4-2,8) ig /ml u uzorcima NGD; 18,3 (6,4-52,3) ig /ml, 25,7 (11,1-76,1) ig /ml i 4,7 (2,5-20,3) ig /ml u uzorcima AGC; i 19,4 (5,8-72,4) ig /ml, 24,6 (11,5-73,7) ig /ml i 8,3 (2,1-28,0) ig /ml u uzorcima EGC (tablica 3). Razine aromatskih amino kiselina u želučanom soku bili značajno različito među NGD, AGC i EGC grupa (Kruskal-Wallis test, tirozin χ ^{2 = 49,847, fenilalanin χ 2 = 62,397, triptofan χ 2 = 52,846, sve P izvoznici < 0.0001). Razine tirozin, fenilalanin i triptofan su bile značajno povišene u želučanom soku dobivene iz oba AGC i EGC skupina u usporedbi s onima iz grupe NGD (Dunnov test, AGC vs. NGD sve P pregled i 0,0001; EGC vs NGD, sve P izvoznici &0.0001) (Tablica 3 i Slika 2). Nakon prilagodbe za učinak ukupnih razina proteina u želučanom soku, značajne udruge još uvijek postoji između aromatskih razina aminokiselina i kliničke dijagnoze (parcijalna korelacija, AGC vs NGD: tirozin, r = 0,334, P
< 0.001; fenilalanin, R = 0,257, P pregled i 0,001; i triptofan, R = 0.312 P pregled i 0,001; EGC vs. NGD: tirozin, R = 0,378 P pregled i 0,001; fenilalanin, R = 0,392, P pregled i 0,001; i triptofan, R = 0,380, P pregled < 0,001). Nije bilo značajne razlike u razinama tirozin, fenilalanin i triptofan između uzoraka AGC i EGC želučani sok (Dunn test, P pregled = 0,811, P pregled = 0,781 i P pregled = 0,691, pojedinačno) (tablica 3). Ovaj rezultat je u skladu s ranijim nalazima [15] koji pokazuju da nema udruge postoje između Helicobacter pylori pregled infekcije i razine aromatskih aminokiselina u želučanom soku (Mann-Whitney U testa, tirozina, P
= 0.871; fenilalanin, P pregled = 0,742;. triptofan, P pregled = 0,913) pregled}

Valjanost aromatske aminokiseline za otkrivanje AGC i EGC

u analizi ROC krivulje za razlikovanje AGC i NGD, područja ispod krivulja (AUC) za tirozin, fenilalanin, triptofan i ukupnih proteina su 0,824 [95% interval pouzdanosti (CI), 0,753 do 0,895, P izvoznici < 0,001], 0.858 (95% CI, 0,794 do 0,922, P izvoznici < 0,001), 0.818 (95% CI, 0,747 - 0,889, P izvoznici <0.001) i 0,803 (95% Cl, 0,728 - 0,878, P pregled i 0,001), odnosno (slika 3A i Tablicu 4). Prema analizi ROC krivulje za razlikovanje EGC i NGD, a AUC za tirozin, fenilalanin, triptofan i ukupnih proteina su 0.790 (95% CI, 0,703 do 0,877, P izvoznici < 0,001), 0.831 (95 % CI, 0,750-0,911, P izvoznici < 0,001), 0,819 (95% CI, 0,739 - 0,900, P izvoznici < 0,001) 0,719 (95% CI, 0,623 do 0,814 P pregled i 0,001), odnosno (Slika 3B i Tablicu 4). Optimizirani cut-off vrijednosti koje odlikuju AGC ili EGC od NGD su izabrani određivanjem maksimalne sume osjetljivosti i specifičnosti iz krivulje ROC (Tablica 4). Nakon odabira optimizirane vrijednosti, osjetljivost, specifičnost i točnost potrebna za razlikovanje AGC i NGD su kako slijedi: tirozin, 83,3%, 68,6% i 75,7%; fenilalanin, 81,8%, 75,7% i 78,7%; triptofan, 84,8%, 68,6% i 76,5%; i ukupna količina bjelančevina, 75,8%, 74,3% i 75,0%. Nakon odabira optimizirane vrijednosti, osjetljivost, specifičnost i točnost potrebna za razlikovanje EGC i NGD su kako slijedi: tirozin, 75,5%, 71,4% i 73,1%; fenilalanin, 75,5%, 81,4% i 79,0%; triptofan, 61,2%, 97,1% i 82,4%; i ukupnog proteina, 59,2%, 81,4% i 72,3% (Tablica 4). Nakon odabira optimizirane vrijednosti iskazane u našem prethodnom istraživanju [12], [15], osjetljivost, specifičnost i točnost u otkrivanju EGC su kako slijedi: tirozin, 51,0%, 94,3% i 76,5%; fenilalanin, 79,6%, 74,3% i 76,5%; triptofan, 61,2%, 94,3% i 80,7%; i ukupni proteini, 83,7%, 62,9% i 71,4%. Korištenje različite optimiziran vrijednost, dobili smo slične rezultate. Pomoću kombinacije tirozin, fenilalanin i triptofan nije značajno poboljšati detekciju AGC ili EGC zbog koncentracije tri aromatskih amino kiselina u uzorcima želučani sok usko povezani međusobno (tirozin-fenilalanin, R = 0.871; tyrosine- triptofan, R = 0,941; fenilalanin-triptofan, R = 0,840, p pregled. < 0.001 za svaki) pregled

Logistička regresijska analiza pregled

u logističke regresijske analize je procijenjen je povezanost između razine aromatskih aminokiselina u želučanog soka i IOB. Jednosmjerna logističke regresijske analize su izvedene za procjenu prediktivne vrijednosti biomarkera kandidata za otkrivanje IOB. U tim univarijatne analize, koeficijenti beta (SE) dobi, spola, Helicobacter pylori pregled statusa, proteina i povišene razine aromatskih aminokiselina u želučanom soku su izračunati. Četiri varijable (dob i povišeni tirozin, fenilalanin i triptofan razine u želučanom soku) imali su P izvoznici < 0,05 i identificirani su pomoću regresijske analize (Tablica 5). Budući da su collinearities između tirozin, fenilalanin i triptofan (sve R > 0,8), procjenjuje odnos između razine tirozin, fenilalanin i triptofan i EGC u tri odvojena modela i procjenjuje podešene koeficijenata u svakom modelu. Povišene razine ovih aromatičnih amino kiselina u želučanom soku su povezani s EGC (tirozin: podesi P koeficijent 1.801, SE 0.527, fenilalanin: podesi β koeficijent 2,555, SE 0.586, triptofan: podesi β koeficijent 4,414, SE 0,945) (Tablica 5 ). Tako, povišene razine aromatskih amino kiselina u želučanom soku može biti neovisni markeri za detekciju EGC. Pregled

Rasprava pregled

U našim prethodnim istraživanjima, promatrali smo povećanje fluorescencije želučanog soka u AGC i utvrđena su tri fluorescentne biomarkera za probir napredne rak želuca [12], [15]. Da li ti potencijalni biomarkeri su korisni za rano otkrivanje raka želuca je neizvjesna. U našem ovom istraživanju, mi smo testirali na valjanost pomoću aromatske aminokiseline na želučani sok za dijagnozu EGC. Naši rezultati pokazuju da su prisutni u želučanom soku od bolesnika s EGC usporedbi s pacijentima NGD visoke razine aromatičnih amino kiselina. Dakle, visoki nivo aromatskih aminokiselina u želučanom soku može biti vrijedan za rano otkrivanje EGC. Pregled

Zbog veličine thesmall uzorka analiza napajanja Kruskal-Wallis i ROC AUC su izvedene. Prema našim saznanjima, formule i postupci za određivanje veličine uzorka potrebnog za testiranje razlika u višestrukim uzoraka mjestima koriste neparametrijski metode su mnogo složeniji [19], a nema snage ili uzorak veličine metoda izračuna je trenutno dostupan u vezi s generičkim alternativne hipoteze za Kruskal-Wallis test [20]. Lachenbruch i Clements sugerirao da je Kruskal-Wallis test može imati veću moć od F-testa kada su distribucija stanovništva nisu normalne. Tvrdili su da je, u usporedbi s F-testa, Kruskal-Wallis test je bio više robustan protiv odstupanja od pretpostavke o jednakosti varijanci [21]. Dakle, koristeći moć F-testa na razini približno moć Kruskal-Wallis testa može se predvidjeti slaba donja granica za normalne distribucije. Nakon transformacije rang, Neposredni ovlasti (1 - β pogreškama) izračunate su pomoću F-test (ANOVA) i primijenjena u SAS 8.1. Sve neposrednim ovlasti su više od 0,99. Dakle, pouzdano se može zaključiti da su razine ukupnog proteina i aromatske amino kiseline u želučanom soku znatno razlikuju među NGD, AGC i EGC. Snaga analize za krivulje ROC su provedena pomoću pass 2008 softver. Niti jedna od sila bila manja od 0,99. Dakle, to je prihvatljivo da zaključiti da visoke razine aromatskih aminokiselina u želučanom soku mogu biti vrijedni prediktori za AGC ili IOB. Pregled

pojačana proizvodnja aromatskih aminokiselina u EGC odgovara rezultatima za prethodnu studiju [15] te je u skladu s prvim izvješćima u drugih vrsta zloćudnih bolesti (krvi [22], pluća [23], [24], [25], dojke [23], [24], mokraćnog mjehura [26], i sl). Mi nagađaju da sljedeći razlozi mogu objasniti ovaj fenomen. Prvo, tumorske stanice zahtijevaju dovoljne aromatske aminokiseline akumulirati u žarištima raka zadovoljiti naglo povećane potrebe za sintezu proteina kako bi podržao brzi rast. Visoka ekspresija aminokiseline transportera (kao što su L-tipa aminokiselinskom transportera 1) u različitih tumora [27], [28], [29], [30], [31], [32], [33] [34], [35] je prijavljen u mnogim studijama. Aminokiselinski nosači mogu poboljšati transport aminokiselina i akumuliraju aromatske aminokiseline blizini žarišta raka. Infiltracija prekomjerne aromatskih aminokiselina može značajno povećati u želučanom soku u EGC u odnosu na NGD. Drugo, nenormalna metabolizam u stanicama raka će prethoditi vidljive promjene u želucu karcinogeneze [11]. Poznato je da su poremećaji transporta amino kiseline i metabolizma u zloćudnim regije često pojavljuju u ranom stadiju karcinoma želuca. Želučani sok, koja se stvara pomoću želučani epitel sadrži znatnu količinu informacije o metaboličkom stanju epitela. Dakle, podaci dobiveni u analizi želučanog soka može biti koristan za odvajanje biomarkera za rano otkrivanje raka želuca. Konačno, metaloproteinaza matriksa (MMP), koji su enzime koji razgrađuju ekstracelularni matriks i membranu, igraju ulogu u početnoj fazi tumourigenesis [36], [37], [38], [39], [40]. Prekomjerna ekspresija i aktivnost MMP ubrzava degradaciju ekstracelularnog matriksa i membranu. Razgradnja matriksa stvara aromatske aminokiseline na želučani sok okružuje tumorske stanice. Osim toga, krv aromatske aminokiseline lako mogu dospjeti oslabljenu bazalnu membranu i epitela žarišta karcinoma i podizanje razine aminokiseline u želučanog soka. Ti uzroci mogu objasniti značajno poboljšanje aromatskih aminokiselina u želučanom soku od EGC pacijenata. Pregled

Rana faza karcinoma želuca ima malo simptoma, a može se lako propustiti konvencionalne endoskopije [6], [41]. Ti problemi smanjiti stopu ranog otkrivanja i učinkovit tretman za rak želuca. Nenormalne razine aromatskih amino kiselina u želučanom soku može se koristiti za praćenje pojava poremećaja metabolizma aminokiselina i otkrivaju rane maligne transformacije koje se pojavljuju u želucu. Osobito, naši rezultati pokazuju da su razine aromatskih aminokiselina na želučani sok se može razlikovati EGC od gastritisa. Ovo otkriće uvodi mogućnost da se ti biomarkera može koristiti za masovno screening karcinoma želuca u ranoj fazi. Mjerenje aromatičnog razine aminokiselina u uzorcima želučani sok može biti učinkovit, ekonomičan, brz i zgodan način za otkrivanje AGC ili EGC u populaciji. Pregled

Iako aromatske aminokiseline mogu biti obećavajući biomarkera za EGC, postoji još uvijek su nedostaci povezani s ovim pristupom. Upotreba manje invazivne postupke biti koristan za ispitivanje svrhovitosti. Želučanih sokova u našem istraživanju su ispražnjene tijekom endoskopije, što bi ozbiljno ograničiti primjenjivost procjenu želučanog soka biomarkera za detekciju IOB. Kako bi se povećala potencijal primjene ovog nalaza, non-endoskopska sredstva mogu se uvesti za uzorkovanje želučanog soka. Endogastric kapsula [42], [43], [44] je dužina 45-50 cm od flaks spojen na kapsulu sadržane upijajući papir. Kapsula može napraviti želučanog soka uzorkovanja prihvatljiviji, bezbolno i prikladan za pacijente u odnosu na želučanu prikupljanje soka od strane endoskopije. Razine aromatskih amino kiselina u želučanom soku može biti pod utjecajem tekućine i hrane konzumira od strane pacijenta. Stoga, puna posta u bolesnika s lošim želučanu pokretljivost je neophodna za poboljšanje točnosti biomarkera testovima i želuca otkrivanje raka. Budući da je veličina uzorka u ovoj studiji je mala, veće studije su potrebne kako bi se utvrdilo je li aromatske aminokiseline u želučanom soku može pomoći u screening u ranoj fazi raka želuca. Osim toga, daljnja istraživanja će identificirati optimizirane granične vrijednosti za svaki marker. Nakon što su dijagnostičke vrijednosti screening identificirati, nove metode (kao što su masenom spektrometrijom) mogao bi se omogućilo jednostavno, brzo i visoko protočnim detekciju aromatskih aminokiselina u želučanom soku. Pregled

Na kraju, značajno povećanje razine od aromatskih aminokiseline su pronađeni u želučanom soku od bolesnika s kasnim fazi ili ranom stadiju raka želuca u odnosu na NGD grupi. Analiza aromatskih amino kiselina može biti učinkovita metoda za rano otkrivanje raka želuca. Ako potvrđene u studiji velikih razmjera, aromatske aminokiseline u želučanom soku bi biti koristan kao biomarkera za screening EGC u općoj populaciji. Pregled

Izvori pregled

Autori zahvaljuje na Qiuming Genga , Shigang Ding Qinqin Tao, Jingjing Lu, Yan Deng i sve kolege u endoskopije prostorijama sveučilišne Peking Trećeg bolnice za njihovu pomoć u želučanom soku kolekciju. pregled