PLoS ONE: mehanizmi GOLPH3 povezana s razvitkom želučane Rak: Preliminarna studija

Sažetak pregled

Dizajn studije pregled

Kako istražiti specifične mehanizme kojima Golgijev fosfoprotein 3 (GOLPH3) utječe na progresiju raka želuca i istraživati ​​njihovo kliničko značenje. Pregled

metode

Imunohistokemijska analiza korištena je za procjenu povezanosti između GOLPH3, fosforilirani mTOR (p-mTOR), fosforilirani Akt (p-Akt), fosforilirani p70S6 (p-p70S6) fosforilirani 4E-BP1 (p-4E -BP1) i kliničkopatološka obilježja karcinoma želuca. Razina ekspresije mRNA GOLPH3, mTOR, Akt, p70S6 i 4E-BP1 u raka želuca, karcinom susjedni i upareni normalnog tkiva su analizirani pomoću RT-PCR. Western blot je korištena za određivanje ekspresije proteina GOLPH3, p-mTOR, p-Akt, p-p70S6 i p-4E-BP1 u tkivima. Pregled

Rezultati

Visoka razina ekspresije proteina od GOLPH3, p-AKT, p-mTOR, p70S6, p-4E-BP1 su pozitivno povezane s histološkog stupnja ( p pregled i 0.05), dubina invazije ( p pregled i 0.05 ), udaljena metastaza ( p izvoznici < 0,05), a zahvaćeni limfni čvorovi ( p izvoznici < 0,05). U usporedbi s karcinomom-susjedni i uparenih normalnim tkivima, razina ekspresije mRNA GOLPH3, AKT, mTOR, p70S6 i 4EBP1 u želučanom tkivu raka bili su značajno veći. Razina ekspresije proteina od GOLPH3, p-AKT, p-mTOR, p-p70S6 i p-4E-BP1 u želučanom tkivu raka bili su značajno veći nego u karcinomu-susjedne i upareni normalnog tkiva. Jaka pozitivna korelacija između GOLPH3, p-mTOR, p-p70S6 i p-4EBP1 izraz ( r pregled = 0,410, 0,303 i 0,276, odnosno, p izvoznici < 0,05), ali ne i statistički značajna korelacija između ekspresije GOLPH3 i p-Akt je promatrao. pregled

Zaključci pregled

razina ekspresije GOPLH3 uskoj je vezi s Akt /mTOR signalizaciju u ljudskim uzorcima s rakom želuca. GOLPH3 kombinaciji s Akt /mTOR signalizacijom aktivacije može igrati važnu ulogu u razvoju, diferencijacije, invazije i metastaziranja karcinoma želuca pregled

Izvor:. Peng J, Fang Y, Tao Y, Li K, Su T, Nong Y, et al. (2014) Mehanizmi GOLPH3 povezana s razvitkom želučane Rak: Preliminarna studija. PLoS ONE 9 (10): e107362. doi: 10,1371 /journal.pone.0107362 pregled

Urednik: Yuan-Uskoro Ho, Taipei Medical University, Tajvan pregled

Primljeno: 13. lipnja 2014.; Prihvaćeno: 7. kolovoz 2014; Objavljeno: 6. listopada 2014 pregled

Copyright: © 2014 Peng i sur. Ovo je otvorenog pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan pregled

Data Dostupnost:. The autori potvrđuju da su svi podaci na kojima se temelji nalaze u potpunosti na raspolaganju bez ograničenja. Svi podaci su dostupni od rukopisa i brojkama pregled

Financiranje:. Ova studija je podržan od strane Research Foundation u Guangxi zdravstvene odgovarajuće tehnologije i razvoja projekta (Grant broj: S201415-01). U financijeri nisu imali ulogu u studiju dizajna, prikupljanja i analize podataka, Odluka o objavi, ili pripremu rukopisa pregled

U konkurenciji interese.. Autori su izjavili da ne postoje suprotstavljeni interesi pregled

Uvod pregled

Iako je globalna statistike pokazuju da je rak želuca (GC) je četvrti najčešći rak kod muškaraca i peti najčešći rak u žena, smrtnost od raka želuca redovima samo da bi raka pluća drugi [1]. Globalna incidencija karcinoma želuca je u padu od Drugog svjetskog rata. [2] Međutim, u zemljama u razvoju, uključujući Kinu, pobola i smrtnosti od raka želuca su ostali visoki. Želučani liječenje raka je poboljšana u posljednjih nekoliko godina, ali većina pacijenata još uvijek s uznapredovalim rakom želuca dijagnosticiran, često uključujući invaziju i udaljenim metastazama, što dovodi do nezadovoljavajućeg stopi učinak liječenja. Budući da rak želuca predstavlja značajnu opasnost za ljudsko zdravlje i život, bitno je razumjeti patogenezu karcinoma želuca u procesu tumorigenezi, invazije i metastaziranja voditi ranu dijagnozu i liječenje. Pregled

To je uobičajeno prihvaćeno da Stvaranje tumora uključuje Pogrešna brojnih onkogeni, gena za suzbijanje tumora i geni metastaza povezanih Golgijev fosfoprotein 3 (GOLPH3), koji je također poznat kao GPP34, GMx33 ili MIDAS je 34 kD membrane protein koji najprije je identificirana kod miša Golgijev aparat po proteomskog analizu. [3] GOLPH3 pripada Golgijev matriksa obitelji proteina koji se jako očuvan od kvasca do čovjeka. [4] Nakon GOLPH3 je translacijski modificirane, to dinamički povezan s negativnim matricu Golgi, brzo transportira putem trans-Golgi mreže (tgn) u citoplazmi, i distribuira u plazma membrana vezikule i endokrinih stanica [4]. Nekoliko istraživanja je pokazalo da je GOLPH3 uključen u anterogradno i ljudima retrogradno Golgi, recikliranje receptora i glikozilaciju od Golgi aparata za plazma membranu; GOLPH3 također igra ulogu u citoskeletnih interakcija i održavanje Golgi strukture [4] - [7]. Scott et al. prvi identificirao onkogeni ulogu GOLPH3 otkrivajući svoju važnu ulogu u diferencijaciji tumorskih stanica i proliferacije i njegova prisutnost u mnogim čvrstih tumora [8]. Zanimljivo je da su neke studije pokazale su da GOLPH3 regulira stanice raka poboljšavajući sisavaca cilj rapamicina aktivnosti (mTOR). mTOR je protein kinaza serin /treonin i ključni integrator fosfatidil-inozitol 3-kinaze (RTK-PI3K) puteva poznato da reguliraju rast, stanična proliferacija, i preživljavanje stanica raka [9] - [10]. Mnoge studije su trenutno istražuju odnos između GOLPH3 i nekoliko čvrstih tumora Međutim, ne postoji dovoljno dokaza koji podupiru hipotezu da izraz GOLPH3 je povezana s ljudskom napredovanju želučanog raka i prognoze, te mehaničkom osnova po kojoj GOLPH3 utječe na tumorigenezi, invazije i metastaze karcinoma želuca ostaje nejasno. U ovoj studiji ispitivali smo kliničke značajnosti GOLPH3 i Akt /mTOR signalizacije kod raka želuca. U međuvremenu, otkrili smo odnos GOPLPH3 i Akt /mTOR signalizacije kod raka želuca otkriti potencijalnu ulogu u regulaciji GOLPH3 mTOR posredovane raka želuca tumorigenezi, invaziju i metastaziranje. Pregled

Materijali i metode pregled

Etički izjava pregled

Svi postupci studije su pregledani i odobreni od strane institucionalnog Etičko pregled odbor Prvog SRODNE bolnici Guangxi medicinskog sveučilišta i provoditi u skladu s načelima izraženim u Deklaraciji iz Helsinkija. Informirani pristanak je izuzeta od strane odbora zbog svježih uzoraka su korišteni i anonimne u skladu s etičkim i zakonskim standardima. Pregled

uzorci tkiva i klinički podaci za odabir pregled

Uzorci svježeg tkiva prikupljeni su od osamdeset pacijenata rak želuca koji su bili podvrgnuti kirurškom liječenju na prvoj poslovnoj vezi bolnici Guangxi Medicinskom fakultetu Sveučilišta u razdoblju od siječnja 2012. do siječnja 2013. kancerozne i karcinoma susjednih tkiva (3 cm udaljenosti od raka) i upareni normalnog tkiva dobiveni su iz svakog pacijenta , a pacijent je dijagnosticiran samostalno dva iskusna patologa u skladu sa Zajedničkom odboru američkog o kriterijima raka [11]. Kompletan izvorni klinički podaci su dostupni za bolesnika s rakom želuca dijagnosticiran. Skupina uključuje 36 žena i 44 muškaraca, s prosječnom dobi od 55,4 ± 13,1 godina (raspon 27-75 godina). Dodatne Karakteristike bolesnika prikazani su u tablici 1. Tablica 2 i Tablica 3. Bolesnici koji primaju kemoterapiju ili radioterapiju prije operacije ili koja je imala povijest drugih tumora su isključeni. U sljedećim studijama dio uzorka uzeti tijekom operacije su odmah momentalno smrznuti u tekućem dušiku i pohranjeni na -80 ° C, a dio je fiksirana na 10% puferiranom formalinu, 24 sata, te uronjeni u parafin.

Imunohistokemija pregled

paraffin-embedded uzorci su razdvojeni na 3 um debljine sekcije raka, karcinoma susjednih i uparena uzorka normalnog tkiva i stavljeni na stakalca. Sekcije su početno peku na 65 ° C tijekom 2 h. Zatim, sekcije su deparafmizirani u 100% ksilen i rehidriraju opadajuće etanol serije (100%, 90%, 80% i 70% etanol) i destilirane vode u skladu sa standardnim protokolima. Nakon toga, sekcije su natopljeni u citratnom puferu antigenskom pohrane, grije u autoklavu i ostavi da se ohladi do sobne temperature. Nakon sekcije su isprane u PBS tri puta po pet minuta, doda se 3% vodikovim peroksidom radi blokiranja endogene peroksidaze aktivnost i nespecifično vezanje antigena na sobnoj temperaturi 20 min. Nakon ponovnog ispiranja s PBS, sekcije su inkubirane sa specifičnim antitijelima u vlažnoj komori tijekom noći na 4 ° C. korištene su slijedeće Primarna antitijela su: GOLPH3 antitijela na 1:100, p-mTOR antitijela na 1:200, p-Akt antitijela na 1:200, p-p70S6 antitijela na 1:100 i p-4E-BP1 antitijela na 1 :200. Za negativnu kontrolu, primarna antitijela je zamijenjeno s PBS-om, a preostali koraci provode se kao što je prethodno opisano. Uzorci su zatim isprani s PBS-om, a sredstvo polimerom pojačanje je dodan u dijelovima na sobnoj temperaturi 20 min. Nakon ispiranja, sekcije tkiva su tretirani s HRP označeni kozjim anti-zečjim IgG, biotiniliranog anti-zečjeg imunoglobulina, a streptavidin peroksidaze reagensa za 30 min. Sekcije su nakon toga vizualizirane u svježem 3-3 'diaminobenzidin otopine, hematoksilin counterstain, 0.1% klorovodične kiseline (radi separacije u boji). Konačno, stakalca su montirani u neutralnom guma i analiziraju sa svijetlo-polju mikroskopa. Pregled

Stupanj imunološko svake sekcije tkiva procijenjena je samostalno dva iskusna patologa koji su bili slijepi za kliničkih podataka pacijenata. Razina ekspresije proteina procijenjene su korištenjem semi-kvantitativnog sustava ocjenjivanja na osnovu ukupnog postotka pozitivno obojenih stanica tumora i intenzitet bojenja. Postotak pozitivno obojenih stanica je zabio u skladu sa sljedećim kriterijima: 0 (≤5% pozitivnih tumorskih stanica obojenih), 1 (6-25% pozitivnih tumorskih stanica obojeno), 2 (26-50% pozitivnih tumorskih stanica obojeno), 3 (≥51% pozitivnih tumorskih stanica obojeni). Intenzitet bojenja je ocijenjen korištenjem skale od 0 do 3 na sljedeći način: 0 (bez bojenje), 1 (slabo bojanje = svjetlo žuto), 2 (umjereno obojenje = žutosmeđi), 3 (intenzivno obojenje = smeđa). Za analizu, ukupnim rezultatom < 4 su definirani kao niska izraz, a rezultati ≥4 su definirani kao veliku ekspresiju pregled

Povratna transkripcija lančana reakcija polimeraze pregled

Ukupna RNA se ekstrahira iz svježeg tkiva koriste. Trizol reagensa (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) prema uputama proizvođača. RT-PCR početnice korištene u istraživanju namijenjeni su i pripravljeni Shanghai Sangon Biological Engineering Technology & Usluge Co. Ltd. β-aktin korišten kao interni standard. Informacije o sekvencijama korištene u istraživanju su prikazani u Tablici 4. RT-PCR je izveden primjenom metode u dva koraka. Jedan mikrogram ukupne RNA reverzno transkribiran u cDNA na 37 ° C tijekom 60 minuta do 85 ° C tijekom 5 sekundi. PCR je zatim proveden u skladu sa slijedećim uvjetima: grijanje na 95 ° C 5 min; 40 ciklusa denaturacije na 30 s na 95 ° C, zagrijavanje na 60 ° C 30 s, i produženje 30 s na 72 ° C; i finalna ekstenzija na 72 ° C tijekom 7 minuta, nakon čega je reakcijska smjesa čuva pri 4 ° C. Sedam mikrograma konačnog PCR produkta su naneseni na 2% -tnom agaroznom gelu za elektroforezu i analizu slike pod ultraljubičastim svjetlom. Količina jedan program (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) koristi se za mjerenje bendove i p-aktin sivi vrijednost PCR proizvoda. Pregled

Western blot pregled

kancerogeni , karcinom susjednih i Spareni uzorci normalne tkiva su izvagani i melju u male komadiće u tekućem dušiku. Prethodno ohlađeni PBS je korišten za pranje uzoraka, koji se zatim centrifugira na 5000 okretaja u minuti na 4 ° C tijekom 5 minuta. Nakon ispiranja tri puta s PBS-om, dodano je prethodno ohlađeni fosfatnog pufera i PMSF. Uzorak se stavi u ultrazvučnu kupelj na 180 W, na 4 ° C tijekom 5 min i centrifugirana na 1000 rpm na 4 ° C tijekom 5 minuta; supernatant se zatim odmah ukloni, a koncentrirani protein se kvantificira Bradford testu korištenjem komercijalnog pribora kupljen od Bio-Rad Laboratories. Supernatanti su pomiješani s pufera za nanošenje i kuha se na 100 ° C u trajanju od 5 minuta, denaturirati proteine. Jednake količine svakog uzorka su napunjeni u jažice 4-12% natrijevog gelu dodecilsulfat-poliakrilamid, elektroforeziran i prenese na membranu poliviniliden fluorida. Membrana je bila blokirana s 5% BSA pufera tijekom 1 h uz miješanje, a zatim se inkubira na 4 ° C preko noći s pojedinačnim primarnih protutijela razrijeđene u TBST. Korišteni su sljedeći Primarna antitijela: poliklonski zečji anti-humani GOLPH3 (1:1000, Abcam plc, Cambridge, UK), poliklonsko zečje anti-humani p-p70S6 (Thr389) (1:1000, stanično signaliziranje Technology, Inc Beverly, MA, USA), poliklonalni zečji anti-humani p-Akt (Ser473) (1:1000, Cell Signaling Technology, Inc. Beverly, MA, USA), monoklonsko anti-humani zečji p-mTOR (Ser2448) (1:1000, Cell Signaling Technology, Inc. Beverly, MA, USA) i monoklonska zečji anti-humani p-Akt (1:1000, Cell Signaling Technology, Inc. Beverly, MA, USA). Membrana je potom isprana s TBST pet puta tijekom pet minuta svaki te peroksidaza konjugirani kozji anti-zečje IgG sekundarno antitijelo (Santa Cruz Biotechnology, SC-2004) je dodan prije inkubacije na sobnoj temperaturi tijekom 1,5 sata uz tresenje. β-aktin korištena je kao interna kontrola. Nakon ispiranja s TBST tri puta po pet minuta, bend od interesa otkrivena je korištenjem ECL premijera Western blot-kit (Shanghai Pufei biotehnologiju, Šangaj, Kina), a količina One softver za analizu (Bio-Rad, CA, USA) je korišten za procjenu podataka denzitometrijskih. pregled

Statistički analizira pregled

Sve statističke analize provedene su pomoću statističkog paketa za društvene znanosti, verzija 17.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). RT-PCR i Western blotting Rezultati su prikazani kao srednja vrijednost ± SE. Jednosmjerna ANOVA slijedi LSD višestrukog raspona ispitivanja korišten je za analizu razlika između grupa. Odnosi između GOLPH3 i p-mTOR, p-Akt, p-4E-BP, i p-p70S6 ekspresije su utvrđene Pearsonov koeficijent korelacije. Povezanost između ekspresije proteina i klinikopatološkim varijable su analizirani korištenjem hi-kvadrat testa. P < 0,05 (dvosmjerni) je korišten kao razinu statističke značajnosti pregled

Rezultati pregled

Odnosi između kliničkopatološkim varijabli i razina ekspresije proteina imunohistokemijski Netlogu

Imunohistokemijska detekcija. su pokazali da GOLPH3, p-Akt i p-4E-BP1 su najčešće u citoplazmi, i fosforilira m-TOR (p-mTOR) je također bio prisutan u jezgri na niskoj razini. Međutim, p-p70S6 obojenje uočeno je samo u citoplazmi. GOLPH3 i fosforilirani Akt /mTOR puteva Proteini su još jako izražene u želučanoj skupine raka nego u tkivu para-karcinom i upareni normalnoj sluznici skupine (Slika 1, Tablica 5). Osim toga, odnosi između kliničkopatološkim varijabli i ekspresija proteina su ispitane i prikazani su u tablici 1, Tablica 2 i Tablica 3. Statistička analiza pokazala je da je pozitivan izraz stopa GOLPH3 u želučanoj skupini raka blisko povezan sa histološkog stupnja ( p pregled = 0,011), dubina invazije ( p pregled = 0,007), udaljena metastaza ( p pregled = 0,002), a zahvaćeni limfni čvorovi ( p pregled < 0,004), dok to nije značajno korelira s dobi i spolu ( p pregled = 0,801 i 0,833, respektivno). Zanimljivo je da su visoke razine ekspresije p-Akt, p-mTOR, p-4E-BP1 i p-p70S6 su opazili da se u skladu s visokim GOLPH3 izražavanja. Pregled

ekspresija mRNA za GOLPH3 i mTOR signalnog puta vezan uz geni pomoću RT-PCR

ekstrahirana smo RNA raka želuca, tkivo para-karcinom i odgovarajućih uzoraka normalnog tkiva od osamdeset bolesnika s karcinomom želuca. Razina ekspresije GOLPH3 i mTOR signalizaciju gene puta prijenosa vezane, uključujući Akt, mTOR, eukariotske prevođenje faktor inicijacije 4E vezujući protein 1 (4E-BP1) i p70 ribosomalni proteina S6 kinaze (p70S6), ocjenjuje se u tri grupe po RT -PCR. Razina ekspresije tih gena u želučanom karcinoma bili su viši nego u karcinoma susjednih tkiva i znatno više nego u normalnom upareni želučane tkiva. Prosječna gustoća i distribucija izraz GOPLH3, mTOR, Akt, 4E-BP1 i p70S6 prikazani su na Slici 2. Statistička analiza pokazala je da je razina ekspresije i GOLPH3 mTOR signalne gena signalnog puta povezanih bili značajno različiti u različitim tkivima želučanim ( p pregled. < 0,05) pregled

proteini izraz GOLPH3 i mTOR puta prijenosa signala srodnih proteina putem Western blot Netlogu

Western blot analiza je pokazala da GOLPH3, p-mTOR, p-Akt1 , p-4EB-P1 i p-p70S6 izrazili su u rak želuca, rak-u susjedstvu, a uparen normalne sluznice želuca skupine. Zanimljivo, progresivni porast zabilježen je u srednjim vrijednostima navedenim razinama ekspresije proteina iz uparenim normalnoj sluznici želuca skupine na želučanu skupine raka (Slika 3), a tu je značajna razlika između skupina ( p
. < 0,05) pregled

korelacija između ekspresije GOLPH3 i signaliziranje signalnog puta vezane uz proteine ​​pregled

Pearsonov korelacijska analiza je pokazala jaku korelaciju između ekspresije GOLPH3 i one iz signalnog puta (Tablica 6). Statistička analiza je pokazala da su Pearson proizvod trenutak Koeficijenti korelacije bili su pozitivni u želučanoj grupi raka. Zanimljivo, ekspresija GOLPH3 snažno povezan s p-mTOR, p-4E-BP1 i p-p70S6 ( r pregled = 0.410, 0.203 i 0.128, odnosno, p pregled < 0,05) ekspresije i pozitivna korelacija između GOLPH3 i p-Akt je gotovo značajan ( p pregled = 0,054). U međuvremenu, snažna korelacija je zapažena između ekspresije p-4E-BP1 i navedenih proteina s iznimkom p-mTOR. Fosforilirani mTOR ekspresija također je pozitivno povezana s p-Akt izraza ( r pregled = 0,521, p pregled = 0,027). Fosforilirani p70S6 ekspresija također je povezana s ekspresijom p-Akt ( r pregled = 0.274 p pregled < 0,001) i p-mTOR ( r pregled = 0,451, p pregled = 0,007). pregled

Rasprava pregled

Iako je incidencija karcinoma želuca opao u posljednjih nekoliko godina [2], i dalje je ozbiljna prijetnja za zdravlje ljudi. Većina pacijenata s rakom želuca dijagnosticira u naprednim fazama i imaju tendenciju da se predstaviti s tumorske invazije i metastaziranja. Tijekom proteklog desetljeća, nema velikih poboljšanja postignuta u vezi ranoj dijagnostici i liječenju raka želuca. Razumijevanje molekularne biologije u podlozi raka želuca još uvijek nedostaje. Od 2009. godine, GOLPH3 dobila je znatnu pažnju kao onkogena. Ovaj protein localizes za citoplazmatski lice trans-Golgi te je blisko povezana s tumorogenosti [3], [8]. Velikih istraživanja su pokazala da GOLPH3 pojačana ekspresija javlja u nekoliko humanih karcinoma, uključujući karcinom epitela jajnika, karcinom bubrežnih stanica, glioblastoma multiforme, karcinoma skvamoznih stanica jednjaka i rak oralni oblik jezika [12] - [16]. Dokazi ukazuju da GOLPH3 je uključen u nastanku tumora i korelira s lošom prognozom. Nadalje, istraživanje pokazuje da GOLPH3 pretjerana ekspresija je povezana s lošim klinički ishod u želučanog raka [17]. Međutim, točni mehanizmi koji su podloga ovaj odnos nejasni, a točan molekularni mehanizam, kojim GOLPH3 je uključen u rak želuca tumorigenezu invaziju i metastaziranje slabo razumije. Da bi istražili mogući molekularni mehanizam kojim GOLPH3 je uključen u rak želuca, prvo smo se imunohistokemije locirati izraz GOLPH3 u različitim želučanog tkiva. otkrili smo da GOLPH3 prvenstveno lokaliziran u citoplazmu, te je izražena u raka želuca, para karcinoma i upareni normalnim želuca tkiva. Zanimljivo je da su stope visoke GOLPH3 izražavanja su bili 75.00% (60 od 80) u želučanom tkivu raka, 43.75% (35 od 80) u kancerogenim susjednih tkiva i 12.50% (10 od 80) u normalnim tkivima, odnosno ( Tablica 5). Osim toga, prekomjerna ekspresija GOLPH3 uočeno u želučanom tkivu karcinoma te je vrlo odnosi na želučanu invaziju i metastaziranje raka. Naši rezultati sugeriraju da je ekspresija visoka GOLPH3 značajno je povezana s histološkog stupnja ( p pregled = 0,015), dubina invazije ( p izvoznici < 0,001), limfni čvor metastaze ( p
< 0,001), i udaljene metastaze ( p pregled = 0,006) u želučanom tkivu karcinoma (Tablica 1). Osim toga, Western blot i RT-PCR se provodi da bi se ekspresija GOLPH3 na razini proteina i mRNA. Zanimljivo, rezultati su bili slični onima kod analize imunohistokemijske. Navedeni rezultati pokazuju da povećana ekspresija GOLPH3 usko je povezan s učestalošću raka želuca, a GOLPH3 mogu biti uključeni u želučanoj invazije i metastaziranja raka. Pregled

U zadnje vrijeme, sve veći broj putevima prijenosa signala koji su izvijestili da uključeni u tumorskoj invaziji i metastaziranju. Sisavaca cilj rapamicina (mTOR), što je serin /treonin kinaze nizvodno od fosfatidilinozitol 3-kinaze (PI3K) /Akt signalnog puta i sadrži mTORC1 (mTOR /RAPTOR) i mTORC2 (mTOR /RICTOR) regulira sintezu proteina, stanice proliferacija, metabolizam stanica i diferencijacija [18], [19]. Aktivirani mTORC1 sekvencijalno izravno aktivira nizvodno ciljeve, uključujući p70S6 kinaze (S6K) i faktora eukariotske inicijacije 4E-vezujući protein 1 (4E-BP1) i mTORC2 pokazano je da igraju ključnu ulogu u Akt fosforilaciju na Ser473, što rezultira u potpunom aktivacije Akt [20], [21]. Iako Akt direktno aktivira mTOR /Raptor, ona također može izravno ili neizravno aktivirati p70S6 kinaza /4EBP1 stazu ovaj put od strane fosforilacije Tumor supresor TSC2 [22]. Akt /mTOR put pokazano je da se često aktivira u različitim malignih tumora, uključujući rak dojke, urothelial karcinom, karcinom jajnika, gušterače, neuroendokrini tumori, meduloblastom, ljudski melanom, karcinom endometrija i hepatocelularnog karcinoma; Stoga, ovaj put predstavlja moguću terapijsku metu kod mnogih oblika raka [23] - [30]. U našoj studiji, RT-PCR i Western blot pokazala da je mRNA i proteina nivoi p-Akt, p-mTOR, p-4E-BP1 i p-p70S6 u želučanom skupine raka bila je značajno veća nego u para karcinom tkiva i upareni normalno želučanih skupine tkiva (slika 2, slika 3). Da bi se odredilo da li je razina ekspresije P-Akt, p-mTOR, p-4E-BP1 i p-p70S6 su povezani s kritičnim klinikopatološkim karakteristike, proveli smo daljnje analize. U ovoj studiji, 81,25% od 80 pacijenata s rakom želuca je visok p-mTOR izraz, 77,50% ima visoku p-4E-BP izraz, 76,25% ima visoku p-p70S6 izraz, a samo 75,00% imalo visoku p-Akt izraz (Tablica 5). Iznenađujuće, primijećena je imunohistokemijska analiza pokazala je da je razina ekspresije ovih proteina izraza su značajno povezane s dubinom invazije, limfnih čvorova i udaljenih metastaza, i histološkog stupnja, ali nisu bili povezani s spol ili dob (Tablica 1, Tablica 2 i Tablica 3.) , Ovi rezultati pokazuju da je Akt /mTOR put aktiviran u karcinomu želuca i može imati značajnu ulogu u nastanku tumora želuca, raka invaziju i metastaziranje. Pregled

Nedavno, Scott et al. otkrila je da GOLPH3 mogu promovirati transformaciju stanica i rast tumora konstitutivno aktiviranjem mTOR signalni put u stanicama melanoma i da GOLPH3 stimulira mTOR signalni put preko mTORC1 i mTORC2 kompleksa, čime pospješuje rast tumorskih stanica i proliferacije [8]. Međutim, nije jasno da li je taj fenomen javlja se u želučanim tkiva raka. Prema našim saznanjima, naše istraživanje je prvi istražiti patogenezu GOLPH3 promovira tumorigenezi, invazije i metastaziranja raka želuca. Naši podaci pokazuju značajno pozitivnu korelaciju između ekspresije GOLPH3 i p-mTOR, p-4E-BP1 i p-p70S6 ( r pregled = 0.410, 0.203 i 0.128, odnosno p
0,05). Međutim, korelacija između ekspresije GOLPH3 i p-Akt nije bila značajna ( r pregled = 0,258, p izvoznici > 0,05) (tablica 6). Konkretno, znatno veći izraz GOLPH3 bio popraćen visokom ekspresijom p-mTOR, p-4E-BP1, i p-p70S6 u želučanog tkiva raka, a taj odnos je bio značajno povezan s dubinom invazije, histološkog stupnja i limfnog čvora i udaljene metastaze. Naši rezultati otkrili različite odnose između GOLPH3 i Akt /mTOR signalnih proteina, te pozitivna veza između GOLPH3 i p-Akt bio je gotovo značajna. Specifični uzroci tog odnosa GOLPH3 i p-Akt su nejasni i treba dalje istraživati. Mi nagađaju da je veličina uzorka može biti premala. Osim toga, GOLPH3 može prvenstveno aktiviraju Akt /mTOR signalizacije putem aktiviranog mTORC1 složene, a ne mTORC2 kompleksa, što je rezultiralo p70S6 i 4E-BP1 fosforilacije, a time utječu rak želuca. Ovi rezultati pokazuju da GOLPH3 mogu biti uključeni u želučanom raka tumorigenezi, invaziju i metastaziranje putem abnormalnog aktivacije Akt /mTOR signalne staze. Pregled

Zaključno, ovo istraživanje otkrili visoke razine ekspresije GOLPH3, p-Akt, p-mTOR, p-4E-BP1 i p-p70S6 u želučanoj skupine raka snažno koje povezano s histološkog stupnja, dubina invazije, udaljenih metastaza, te upletenost limfnih čvorova po klinikopatološkim varijable analizu i imunohistokemije. Nadalje, ekspresija GOPLH3 visoko korelira s aktivacijom Akt /mTOR signalnom putu u humanim uzorcima raka želuca. Na temelju tih rezultata, možemo nagađati da GOLPH3 može utjecati na napredovanje i metastaziranje raka želuca kroz aktivaciju Akt /mTOR signalnog puta. Osim toga, mi predlažemo da je inhibicija ekspresije gena u GOLPH3 i mTOR signalnog puta mogu predstavljati inovativan cilj za terapiju raka želuca. Konačno, invazija i migracija mehanizmi GOLPH3 u rak želuca, još uvijek je potrebno daljnje istraživanje. Pregled

• PLoS ONE: Prognostički značaj Neutrofil limfocita Omjer kod bolesnika s rakom želuca: A Meta-Analysis
• PLoS ONE: Izražavanje XPG proteina u razvoj, napredovanje i prognozi želučane Cancer