PLoS ONE: LAPTM4B-35, Rak-Povezano Gene, povezana je s lošom prognozom u TNM stadijima I-III rak želuca pacijenti

Sažetak pregled

Pozadina pregled

Lizosom povezane transmembranski protein 4β-35 (LAPTM4B-35), član 4-tetratransmembrane obuhvati proteina superfamilije sisavaca, objavljeno je da će izraženo u nekoliko vrsta raka. Međutim, ekspresija LAPTM4B-35 i njegova uloga u napredovanju raka želuca (GC), ostaje nepoznat. Cilj ovog istraživanja bio je ispitati LAPTM4B-35 izražavanje u GC, njegov potencijalni značaj za kliničko parametara i ulozi LAPTM4B-35 tijekom želučane karcinogeneze. Pregled

Metode

U ovom istraživanju, parafin analizirani su -embedded primjerci s GC (n = 240, uključujući 180 uparenih uzoraka) i 24 u paru svježe smrznute tkiva. QRT-PCR i imunohistokemijski (IHH) korištene su za analizu ekspresije LAPTM4B-35 u GC. Učinci LAPTM4B-35 na GC staničnu proliferaciju, migraciju i invaziju određena je prekomjernom ekspresijom i obaranje testovima. Pregled

Rezultati pregled

IHC pokazali da LAPTM4B-35 je izražen u 68,3% (123/180 ) GC tkiva, dok je u 16,1% (29/180) njihovih uparenih susjednih noncancerous želučanog tkiva ( P pregled = 0,000). LAPTM4B-35 pregled razine mRNA u GC tkiva također su značajno povišene u usporedbi sa svojim uparenih susjednih noncancerous tkiva ( P pregled = 0,017). Prekomjerna ekspresija LAPTM4B-35 je značajno povezana s stupnjem diferencijacije, dubina invazije, enzim imunoanaliza i limfnih čvorova metastaze ( P izvoznici < 0,05). Kaplan-Meier krivulje preživljavanja pokazala je da pacijenti s LAPTM4B-35 izražavanja imala značajan pad ukupnog preživljavanja (OS) u fazama I-III GC bolesnika ( P pregled = 0.006). Multivarijatna analiza pokazala je visoku izraz LAPTM4B-35 bio je neovisan prognostički čimbenik za OS u fazi I-III GC bolesnika ( P pregled = 0,025).

Zaključak pregled

Ova otkrića ukazuju na to da LAPTM4B-35 prekomjerna ekspresija može biti povezana s GC napredovanje i lošom prognozom, i na taj način može poslužiti kao nova predviđanja biljeg prognozu u GC pacijenata pregled

Izvor:. Cheng X, Zheng Z, Bu Z, Wu X , Zhang L, Xing X, et al. (2015) LAPTM4B-35, Rak-Povezano Gene, povezana je s lošom prognozom u TNM stadijima I-III rak želuca bolesnika. PLoS ONE 10 (4): e0121559. doi: 10,1371 /journal.pone.0121559 pregled

Akademska Urednik: Ken-ichi Mukaisho, Shiga Sveučilišta u medicinskoj znanosti, JAPAN pregled

Primljeno: 10. travnja 2014; Prihvaćeno: 12. veljača 2015; Objavljeno: 7. travnja 2015 pregled

Copyright: © 2015 Cheng et al. Ovo je otvoreno pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan pregled

Podaci Dostupnost: sve relevantne podatke su u radu i njegove popratne podatke datoteka pregled

Financiranje: Ovaj rad je podržan od strane Nacionalne zaklade prirodoslovni Kine (br 30471677 i 81141024) i nacionalni ključ tehnologije R &D program (Peking Općinski znanosti i tehnologije. Projekt Z121100007512010). U financijeri pridonijeli Studija dizajna, performansi, reagensa, materijale, analize podataka i odluka o objavljivanju pregled

U konkurenciji interese.. Autori su izjavili da ne postoje suprotstavljeni interesi pregled

Uvod pregled

Želučani karcinom je treći najčešći oblik raka u Kini, a vodeći uzrok raka povezanih smrti u Kini [1]. Većina GC pacijenata već su u poodmakloj fazi u vrijeme dijagnoze (faze III i IV), čineći prognozu da bude tužan, unatoč poboljšanju kirurške i adjuvantne pristup liječenju [2-5]. Bez obzira na kemoterapije i namijenjen ljekovito operaciju, gotovo 60% bolesnika s GC razviti ponovilo, i na kraju umrijeti od metastatske bolesti [6]. GC progresija je više faktora i više koraka u kojoj je naslijedio i okolišni čimbenici igraju važnu ulogu [7]. Prethodna promatranja pokazuju da je klasična biomarkeri i postavljanje sustava, na temelju kliničkih i patoloških nalaza, možda imaju ograničenja na kliničkim aplikacijama i potiču razvoj novih molekularnih biomarkera koji može predvidjeti ishod i liječenje bolesnika [8, 9]. Pregled

lizosoma protein povezan transmembranski 4 beta (LAPTM4B) je izvorno klonirana u hepatocelularnim karcinomima (HCCs) po Shao et al, koja se nalazi na kromosomu 8q22, područje često pojačan kod karcinoma dojke i HCC [10, 11]. Ona kodira dva proteina s različitom molekulskom masom, 24-kDa i 35-kDa proteina (LAPTM4B-24 i -35) s četiri pretpostavljenim transmembranskih područja [12]. Lokalizacija LAPTM4B-35 pronađen je ne samo u lizosoma, ali i plazma membrane i unutarnje organela kao što su Golgi aparata i endosomima [13]. To je izvijestio da je LAPTM4B-35 naširoko je izražena u različitim vrstama karcinoma. Prethodna izvješća ukazuju da prekomjerna ekspresija LAPTM4B-35 je povezana s nepovoljnim biološkim ponašanja i lošom prognozom u mnogim oblicima raka, poput raka dojke [14], HCC [15-17], žučnog mjehura karcinom [18, 19], raka debelog crijeva [20] te epitelnih karcinoma jajnika [21] i karcinoma endometrija [22]. Također je objavljeno da alelne varijacije LAPTM4B povezana je sa suscebtibilnosti GC [23]. Nadalje, prekomjerna ekspresija LAPTM4B-35 transfekcijom cDNA LAPTM4B potiče proliferaciju stanica, migracije, invazije u HCC ksenotransplantati u miševima i inducira rezistenciju [24]. Obaranje LAPTM4B s RNA interferencije obrnuto obrnuto svih tih malignih fenotipskih obilježja u HCC [24, 25]. Pregled

Međutim, LAPTM4B-35 ekspresija, njegova važnost za kliničko karakteristikama i biološka uloga LAPTM4B-35 u GC ostaju nejasni. U ovom istraživanju, željeli smo utvrditi LAPMT4B-35 izražavanje u GC i njegovu potencijalnu vezu s kliničkopatološkim mogućnosti, i njegov prognostički značaj. Osim toga, in vitro funkcionalni testovi provedeni su za karakterizaciju bioloških učinaka LAPTMEB-35 u želučanom torn smjeru. Pregled

Materijali i metode

Etika

Svi bolesnici su potpisali informirani pristanak za dobivanje uzoraka tkiva, a protokol istraživanja je odobren od strane kliničkih istraživanja Etičko povjerenstvo Peking University Cancer Hospital. pregled

primjerci ljudskog želuca tkiva

ukupno 240 (167 muškaraca i 73 žena, u dobi od 22-87 godina, a prosječna dob je 60 godina), formalin fiksiran uklopljeni u parafin GC tkiva, uključujući i 180 u paru kancerogeni i uskladiti susjedna noncancerous želučane sluznice tkiva, prikupljeni su iz GC bolesnika podvrgnutih gastrektomije na rak sveučilišne bolnice u Pekingu od siječnja 2003. do prosinca 2011. klinički i histološki informacije za svaki slučaj je također prikupljeni u skladu s odobrenim institucionalnih smjernica. U 1997 UICC-TNM kriteriji korišteni su za klasifikaciju želučanih karcinoma. Medijan praćenja trajanja, jer u vrijeme postavljanja dijagnoze bila je 26,2 mjeseci (raspon 2.4-119.0 mjeseci). Ukupno, 112 (46,7%) bolesnika umrlo u follow-up perioda. Pregled

Imunohistokem pregled

Parafinski rezovi (4 um) su odvoštiti i rehidrira u ksilema i etanola. Imunohistokemija je provedena kao što je opisano [16] pomoću anti-LAPTM4B-35 antitijelo (1: 200) (obdarena Pro RL Zhou.). Kao negativna kontrola, sekcije su obrađene kao istom protokolu osim što su inkubirani preko noći na 4 ° C u blokirajućoj otopini bez primarnog antitijela, pregled

Ekspresija LAPTM4B-35 je određena dva iskusna patologa (Y Sunce i B Dong), koji je radio samostalno i bili zaslijepljeni kliničkih ishoda pacijenata. Razlike između promatrača pronađeni su u manje od 10% pregledanih dijapozitiva, postignut je konsenzus nakon daljnje razmatranje. Bojenje procjena je samo koristio semikvantitativnih metoda za klasifikaciju LAPTM4B-35 izraza kao negativnim i pozitivnim obojenih imunološke reaktivnosti stanica. Omjer pozitivnosti ocijenjena je kao '' 0 '(< 10% pozitivnih tumorskih stanica) "," 1 "(10-50% pozitivnih tumorskih stanica), kao i' '2" (> 50% pozitivnih tumorskih stanica). Intenzitet bojenja ocijenjena je kao '' 0 "(bez bojanja ili slabo obojeno), '' 1" (umjerena bojanje) ili '' 2 "(jak bojenje). Zbroj bodova intenziteta bojenja i postotak rezultat je bio korišten za određivanje razine LAPMT4B izraz: 0-2, negativni izraz i 3-4, pozitivni izraz (14). Pozitivan izraz ocjenjuju samo po sekcijama s najmanje 10% pozitivnom području tumora. Pregled

Kultura stanica, LAPTM4B-35 plazmida ekspresije i hCas9 /gRNA transfekcija pregled

rak želuca stanične linije (SGC- 7901, BGC-823, MGC-803, MKN-28 i AGS) uzgojene su u DMEM (europski bizon Inc., St. Bruno, QC, Kanada) uz dodatak 10% fetalnog goveđeg seruma (FBS) (Hyclone, Logan, UT, USA) i 100 u /ml penicilina i 100 ug /ml streptomicina, na 37 ° C u atmosferi 5% CO _{2. pcDNA3 pregled. 0-AF pregled koji sadrži cijeli ORF LAPTM4B proizvodnju LAPTM4B-35 protein je nadaren prof RL Zhou [11]. Transfekcija je provedena s lipofektaminom 2000 (Invitrogen, Carlsbad, CA), sukladno protokolu proizvođača. Pozitivni klonovi su stanice dobivene su antibiotičku selekciju s G418 (Gibco, Grand Island, NY) u koncentraciji od 800 ng /ml. Pregled}

hCas9 i gRNA vektor se dobio iz Kine zebraste ribice Resource Center (CZRC). Puna dužina Cas9 cDNA je klonirana u vektor pXT7 i linearizirani i kapom mRNA sintetizira mMESSAGE mMACHINE mRNA sintezu transkripcije pribora (Life Technologies, Carlsbad, California, USA). U gRNA nizovi primera koji se koriste su: prednji primer, 5'-TACGACTCACTATAGGGGGATGGTGCCGGTGCGGACAGTTT TAGAGCTAGAAATAGC-3 ', a obrnuti primer: 5'-AGCACCGACTCGGTGCCACT-3'.The protokol je uslijedila prethodne objavljenom radu [26]. hCas9 mRNA (3 ng /ul) i gRNA (0.2 ng /ul) u transfektirano SGC-7901 stanice izvedena s lipofektaminom 2000 (Invitrogen, Carlsbad, CA). pregled

Izolacija RNA, kvantitativno stvarnom vremenu reverzna transkripcija PCR (QRT-PCR) pregled

Ukupna RNA je ekstrahirana pomoću trizolne reagens (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA), te reverzno transkribira u cDNA pomoću M-MLV reverzne transkriptaze (Promega, Madison, WI, USA) sukladno upute proizvođača. Real-time PCR je izvedena pomoću ABI 7500 Brzo real-time PCR sustav (Life Technologies, Carlsbad, Kalifornija, SAD). β-aktin korištena je kao interna kontrola. Sekvencijama korišteni su navedene u nastavku: LAPMT4B-35: naprijed primer: 5'-GGAAGCAGGACAGCCAACTT-3 ', obrnuti primer: 5'-TTATTCTCGATCTCACAACCAAAC-3'; β-aktin: prednji primer: 5 'CCTGTGGCATCCACGAAACT-3' okrenuti primer: 5'GAAGCATTTGCGGTGGACGAT-3 'pregled

Razmnožavanje stanica Test pregled

proliferacija stanica izmjeri brojanjem stanica Kit-8. (CCK-8) (Dojindo, Japan) u skladu s protokolom proizvođača. Volumen od 100 ul suspenzije stanica (3000 stanica po jamici) se inkubiraju u 96 jažica (Costar, Corning, NY) tijekom 24, 48, 72, 96 sati. 10 ul otopine CCK-8, dodano je u svaku jažicu i inkubirane 3 sata na 37 ° C. Vrijednosti apsorbancije svih jažica određene su pri 450 nm s referentnu valnu duljinu od 630nm u Microplate Reader (Bio-Rad, USA). Pokus je učinjeno u tri primjerka i ponovio dva puta. Pregled

zacjeljivanja rana Test pregled

migracija stanica mjerena je testom za liječenje rana od strane IncuCyte HD sustava (IncuCyte ZOOM, Essen BioScience, USA). Stanice su nasađene u ploče s 96 jažica u gustoći od 6 × 10 ^{4 stanica po udubljenju. Rana je napravljen po konfluentnih jednoslojnih stanica pribadače bloka i stanice su isprane s 1 x PBS, kultivirane u DMEM mediju s 10% fetalnog goveđeg seruma. Fotografije stanice su snimljene pomoću HD sustav IncuCyte na 4-satnim intervalima od 2 odvojena područja za dobro koristite 10x cilj. Vrijednosti od 2 krajevima svake jažice su skupljene, a prosječne vrijednosti za sve 3 ponavljanja pregled}

Transwell pokusima invazije pregled

transjažice (8μm pora veličina, Cell Biolabs, USA). Test se koristi za analizu stanične invazije u skladu s uputama proizvođača. 8 × 10 ^{4 stanice su stavljene u gornje komore u mediju bez seruma, a donje komore bili ispunjeni DMEM i 10% FBS. Nakon inkubacije tijekom 72 sata na 37 ° C, neinvazivni stanice na gornjoj površini membrane su uklonjene pamučnom krpom. Membrane su fiksirane s metanolom tijekom 10 minuta i obojeni s 0,5% kristalno ljubičastog 10 min. Stanice na donjoj strani filtra su iz Pet slučajno odabranih mikroskopski pregleda, su izbrojene. Pregled}

Western blot analiza pregled

Razina ekspresije proteina iz staničnih linija GC je mjerena Western blot analizom. Stanice su lizirane u prethodno ohlađeni RIPA puferu za lizu (Pierce Biotechnology, Rockford, IL), koji sadrži koktel inhibitora proteaze (Roche, Basel, Switzerland) kroz 30 minuta, nakon centrifugiranja na 15,000g tijekom 20 minuta, dobiva se supernatant. 50 ug proteinskih ekstrakata su razdvojeni sa 10% SDS poliakrilamid gel elektroforezom, i transferirana na 0.45μm polivinilidenfluorid (PVDF) membranu (Whatman, Njemačka). Membrana je bila blokirana tijekom 1 sata na sobnoj temperaturi s puferom za blokiranje (pH 7.6) koji sadrži 5% nemasnog suhog mlijeka, zatim su inkubirane s anti-LAPTM4B-35 antitijela (1: 800, obdareni prof RL Zhou) na 4 ° C preko noći , Mišji anti-humani β-aktin antitijelo (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) je primijenjen kao internom kontrolom. Imunološki reaktivne bendovi su vizualizirani pomoću sustava za detekciju chemiluminescence (Pierce Biotechnology, Rockford, IL). Pregled

Statistička analiza pregled

Hi-kvadrat test je korišten za usporedbu razlika u LAPTM4B-35 ekspresije proteina između GC tkiva i susjedne noncancerous tkiva. Bezuvjetni logističkih modela regresijske analize su korišteni za analizu odnosa između LAPTM4B-35 izražavanja i kliničkopatološkim parametrima prilagođene po spolu status. Razlika ekspresija LAPMT4B-35 mRNA pregled između GC i susjednih netumorskih tkiva analizirana je Wilcoxon testom parova. Pregled

Ukupno preživljavanje (OS) krivulja je izračunata sa Kaplan-Meier metodi i analizirana je log-rank testa. Relativni rizik (RRS) od smrti povezane s LAPTM4B-35 izražavanja i drugih prediktorskih varijabli procijenjene su iz univarijantne Cox proporcionalnih rizika modelu prvo. Multivarijatna Cox modeli su također izgrađene procijeniti RR za LAPMT4B-35 izražavanja. Sve statističke analize provedene su pomoću SPSS software statističkog paketa (verzija 20.0, SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Dvostrani P pregled vrijednost manja od 0,05 smatrala se statistički značajna. Pregled

Rezultati

Izražavanje analiza LAPTM4B-35 u staničnim linijama GC i GCS pregled

prvo ispitati ekspresiju LAPTM4B-35 pregled pomoću RT-PCR u 5 staničnim linijama GC (MGC-803, BGC-823, MKN-28, SGC-7901 i AGS), a zatim otkrije njegov ekspresija proteina Western blot. Rezultati su pokazali da LAPTM4B-35 je izražen u svim staničnim linijama u oba mRNA i proteina (Slika 1A, gornji i donji dio slike), a zatim smo odabrali BGC-823 i SGC-7901 stanica za naše sljedeće funkcije stanica testovima.

LAPTM4B-35 pregled, izraz je također otkriven u 24 parova reseciranih GC primjeraka po QRT-PCR. Kao što možemo vidjeti na slici 1B, LAPTM4B-35 pregled izraz u GC tkiva bila je značajno povišena u usporedbi s uparenim susjednim noncancerous tkiva ( P pregled = 0,017) (slika 1B).

LAPTM4B-35 ekspresija proteina je često opažene u ljudi GC

istraživali smo ekspresiju LAPTM4B-35 u GC i susjedna tkiva netumorskih pomoću imunohistokemijsku analizu. LAPTM4B-35 nije iskazao u normalnoj sluznici želuca (Slika 2A), izražena u intestinalnom metaplazije, displazija lezija (podaci nisu prikazani) i tumorske stanice, i uglavnom lokalizirana u citoplazmi, ili na staničnoj membrani (slika 2B i 2D -2H). LAPTM4B-35 češća kod GC tkiva u usporedbi s podudaranjem susjedne noncancerous sluznici (68,3% vs 16,1%, P pregled = 0,000) (Tablica 1). Pregled

Odnos između LAPTM4B-35 izražavanja i kliničkopatološkim karakteristike

analizirali smo odnos između LAPTM4B-35 izražavanja i kliničkopatološkim karakteristikama GC pacijenata. Kao spolu, predmeti u našem istraživanju ima svoje odstupanje (167 vs 73, tablica 2), izračunali smo njihov odnos prema logističke regresijske analize i prilagođen za ravnopravnost statusa. LAPTM4B-35 je češće uočeno slabo diferencirane GCS u usporedbi s umjerenim-dobro diferenciranih onih (65,4% vs 57,9%, P pregled = 0,017). Nadalje, LAPTM4B-35 ekspresija je povezana s enzim imunoanaliza ( P pregled = 0,000), dubina invazije ( P pregled = 0,016) i limfnih čvorova metastaze ( P pregled = 0,029) (Tablica 2). pregled

LAPTM4B-35 ekspresija i prognoza GC pacijenti

Slika 3 prikazuje analizu LAPTM4B-35 izražavanja i kliničkih ishoda. Kaplan-Meier krivulje preživljavanja pokazala je postojala tendencija kraće ukupno preživljavanje (OS) u GC bolesnika s LAPTM4B-35 pozitivnih izraza u odnosu na one negativne ( P pregled = 0,064, log-rank = 3,425) (slika 3A). Nakon što su pacijenti stratificiran prema TNM I-III ili bolesnika bez lypmphovascular invazije, bolesnici s LAPTM4B-35 pozitivnih izraza su pokazali znatno kraće OS od onih negativnih ( P pregled = 0,006 i P pregled = 0,001 ., respektivno) (slika 3B i 3D) pregled

Rezultati univarijatne i multivarijatne Cox modele za OS GC bolesnika u TNM stadija i-III izlagao tu dubinu invazije (RR = 3,103, 95% CI: 1,427 -6,748; P pregled = 0,004), limfni čvor metastaze (RR = 3,015, 95% CI: 1,552-5,858; P pregled = 0,001) i LAPTM4B-35 razina ekspresije (RR = 2,249 , 95% CI: 1,242-4,072; P pregled = 0,007) značajno utjecati na opstanak GC, odnosno (tablica 3); Nadalje, LAPTM4B-35 pozitivna ekspresija je bila samostalna prognostički čimbenik (RR = 1,897, 95% CI: 1,041-3,457; P pregled = 0,025). Limfnih čvorova metastaze (RR = 2,665, 95% CI: 1,362-5,213; P pregled = 0,001) i samostalno predvidio OS (tablica 3) pregled

LAPTM4B-35 promiče proliferaciju tumorskih stanica

kako bi se proučio učinak LAPMT4B-35 u funkciji stanične biologije, osnovane su dvije stanične linije. BGC-823 i SGC-7901 stanice koje predstavljaju relativno nižu ili višu ekspresiju LAPTM4B-35 posebno su odabrani za prekomjernu ekspresiju i obaranje testu (Sl 1A). U prvom, stanične linije BGC-823-AF ekspresijom LAPTM4B-35 stabilno uspostavljen, a MOCK je korišten kao kontrola za tu staničnu liniju. Drugo, LAPTM4B-35 je stabilno srušen towarding SGC-7901 (hCas9 /gRNA) prema tipu II grupirani redovito razmaknutih kratke palindromsku ponavlja (CRISPR) sustava, a rezultati su identificirani pomoću Western blot (slika 4a). Pregled

test stanične proliferacije je mjerena CCK-8 stanica za brojenje kit. Vrijednost apsorbancije od BGC-823-AF stanica na 72 sata nakon širenja bila je znatno viša od onih roditeljskih stanica i lažno stanica, a rezultat je bio upravo suprotan od kucaju dolje LAPTM4B-35 u SGC-7901 stanica (Slika 4b). pregled

LAPTM4B-35 poboljšane migracija stanica tumora i invazija sposobnost pregled

Nakon transfekcije s pcDNA3.0-AF i hCas9 /gRNA, smo obavili za liječenje rana test za analizu migracijske sposobnosti LAPTM4B-35 Prekomjerna ekspresija /obaranje želučane stanice raka (Slika 5a). Rezultati su pokazali da LAPTM4B-35 promaknut BGC-823 (BGC-823-AF) migraciju stanica u usporedbi s BGC-823 i lažno ( P izvoznici < 0,05), a dolje reguliranje LAPTM4B-35 izrazu mogla obrnuti ovaj fenomen u sGC 7901 stanica ( p pregled i 0,05, slika 5B) pregled

prema tome, učinak LAPTM4B-35 na invazivnost stanica tumora proučavana pomoću ispitivanja prerastanja. (Slika 6A). Otkrili smo da je broj provalila stanica bila je značajno viša u LAPTM4B-35-transficiranim BGC-823 stanica i niža u obaranje SGC-7901 stanica, nego u njihovim kontrolnim stanicama, odnosno ( P izvoznici < 0,05, slika 6B). Ovi rezultati ukazuju na to da LAPTM4B-35 potiče migraciju i invaziju želučanih stanica raka. Pregled

Rasprava pregled

GC je vrlo heterogena bolest u kojoj čak i slične klinički i patološki karakteristike dovesti do različitih ishoda [27, 28], što znači da je TNM sustav za GC ima svoje ograničenje i potaknuti na traženje novih molekularnih biomarkera koji može predvidjeti ishod i liječenje bolesnika. Onkogena LAPTM4B-35 nalazi se na kromosomu 8q22 i pojačanje broj DNK kopija na kromosomu 8q22 je čest nalaz u GC prema našem prethodnom istraživanju (neobjavljeni podaci). U karcinom dojke, prekomjerne ekspresije LAPTM4B-35 i 8q22 pojačanje su pridonijeli de Nove pregled kemijska otpornost na antraciklina i dopustiva za metastatski recidiva [29]. Pregled

U ovoj studiji ispitivali smo LAPTM4B-35 pregled izraz u 24. karcinoma želuca i njihovim uparenih noncancerous želučanih kirurških uzoraka po QRT-PCR i utvrdili da LAPTM4B-35 pregled mRNA razina ekspresije kod raka želuca bila je značajno povišena u usporedbi s onom u paru grupa noncancerous tkiva. Štoviše, imunohistokemijska analiza u 180 parova raka želuca je pokazao LAPTM4B-35 je izraženo u GC tkiva (68,3%) u usporedbi s njihovim uparenim noncancerous sluznici (16,1%). LAPTM4B-35 potiče tumorski rast i toleranciju na metaboličke i genetske stresa indukcijom autophagy [30, 31]. U ovoj studiji, funkcija LAPTM4B u karcinoma želuca ispitana je in vitro testovima. Prekomjerna ekspresija LAPTM4B-35 u BGC-823 stanicama također povećao stanica održivost u uvjetima slobodne kulture u serumu, kao dobro. Ako se ovaj fenomen uzrokovan autophage je potrebno da se istražiti. Pregled

Osim toga, mi također analizirali povezanost LAPTM4B-35 izražavanja s kliničkopatološkim parametara u raka želuca. Visoka LAPTM4B-35 izražavanje bilo značajno povezano sa stupnjem diferencijacije, enzim imunoanaliza, dubini invazije i limfnih čvorova metastaza, što ukazuje da LAPTM4B-35 može se intenzivno aktivira kod raka želuca, a može igrati važnu ulogu u želučanom karcinogeneze i progresiji tumora. Kao što je tumor enzim imunoanaliza i lymphonode metastaze su vrlo važne kliničke prognostički pokazatelji za recidiva tumora, napravili smo analizu preživljenja. Kaplan-Meier krivulje stratificiran prema LAPTM4B-35 izražavanja i tumora fazi ili enzim imunoanaliza pokazala je da LAPTM4B-35 pozitivnih pacijenata imaju znatno lošije OS u usporedbi s LAPTM4B-35 negativnih u TNM stadija I-III ili bez enzim imunoanaliza podskupine. Multivarijatna Cox regresijska analiza u ovoj podskupini pokazalo je da je među svim analiziranim faktora, LAPTM4B-35 ekspresija je nezavisni prognostički čimbenik u bolesnika s rakom želuca u TNM faze I-III, ali u stadiju IV. To je razumno, jer pacijent u fazi IV ne može primati radikalnu operaciju i mogu se liječiti i kod mnogih drugih različitih palijativne tretmana, a sve će utjecati na prognozu. Ovi rezultati pokazuju da je sklonost LAPTM4B-35 mogu posebno predviđa najagresivnije i kobne vrste raka želuca u slučajevima rano i bez distalne metastaza ili bez enzim imunoanaliza. Pregled

U ovoj studiji, otkrili smo da LAPTM4B -35 pozitivni izraz uglavnom u vezi s lošijim prognozama u GC pacijenata stratificiran prema stadiju tumora ili enzim imunoanaliza. Za funkciju LAPTM4B-35 u GC, što nadalje izvodi in vitro. Prekomjerna ekspresija LAPTM4B-35 u BGS-823 stanica je pokazala značajan porast u staničnu proliferaciju, migraciju i invaziju, a dolje reguliranje LAPMT4B-35 olovni na suprotnim rezultatima. Zhou i sur. je pokazao da LAPTM4B-35 pojačanom ekspresijom potiče preživljavanje stanica, deregulirane proliferaciju i migraciju u HCC stanicama [12]. Nedavne studije su izvijestili da LAPTM4B-35 bila je značajno povezana s lošijim kliničkim ishodom u mnogim ljudskim malignih bolesti, kao što su HCC [16], metastatski jajnika tumora [32], žučni mjehur [19, 33], ekstrahepatičkom holangiokarcinomom [34] i karcinoma endometrija [22]. Ovi akumulirani dokazi podupiru naše trenutne rezultate, što znači da LAPTM4B-35 prekomjerna ekspresija može igrati važnu ulogu u maligne transformacije i progresiju GC. Pregled

Molekularni mehanizmi LAPTM4B-35 u progresiju tumora svojstva su još uvijek nejasni. Neke prijašnje studije pokazale su da LAPTM4B-35 je potrebno za lizosoma homeostaze, zakiseljavanje i funkciju, a to LAPTM4B-35 čini tumorske stanice otporne na lizosoma posredovane stanične smrti izazvane ekološkim i genotoksičnih naprezanja [30, 31]. Prekomjerna ekspresija LAPTM4B-35 može aktivirati neke proto-onkogena, kao što je c-myc, c-jun i c-fos [35], te promicanje proliferaciju, migraciju i invaziju u nekim ljudskim linijama karcinoma koji će unaprijediti rast i metastaziranje HCC ksenografta u golih miševa [36]. Vezani istraga podrazumijeva da LAPTM4B može poboljšati stanične proliferacije ili preživljavanje kroz uključenost u signalnog puta, kao što je fosfatidilinozitol 3-kinaze-protein kinaze B putu. I LAPTM4B-35 može komunicirati s nekim rakom proteina, kao što je protein fosfataze 2A i protein kinaze C [10]. Li et al našli su da LAPTM4B-35 potiče višestruke rezistencije na lijekove stanica raka za promicanje efluks lijeka i anti-apoptozu aktivacijom PI3K /Akt signalizacije [24], što znači da LAPTM4B-35 može biti novi cilj terapije. Funkcionalna uloga i mehanizam LAPTM4B u GC je potrebno daljnje istraživanje. Pregled

U zaključku, trenutni studija pokazuje da LPTM4B-35 pojačanom ekspresijom igra važnu ulogu u promicanju proliferaciju, migraciju i invaziju u želučanim raka. LAPTM4B-35 pozitivno izraz u želučanom tkivu raka povezana s lošim ishodom, a pokazalo se da nezavisni prognostički čimbenik u podskupini GC pacijenta u TNM stadija I-III ili bez enzim imunoanaliza. Dakle, LAPTM4B-35 može predstavljati korisnu biomarkera u svrhu predviđanja prognoze u određenoj podskupini GC. Osim toga, kao što je uloga LAPTM4B-35 u ograničavanju lizosoma posredovana stanična smrt i promicanje autophagy imati značajan učinak na preživljavanje u stanicama raka, te LAPTM4B-35 je pretjerano izražen u velikom udjelu raka želuca, to bi moglo biti korisno meta za liječenje podtip skupinu raka želuca. pregled

popratne podatke
S1 podataka. Pojedinačni rezultati relativne mRNA LAPTM4B-35 izražavanja, staničnu proliferaciju, migraciju i invaziju, opstanak pathients i kliničkopatološkim features.
(Excel)
doi:10.1371/journal.pone.0121559.s001
(XLS)

Acknowledgments

We Hvala Guoshuang Feng (od kineske Centra za kontrolu i prevenciju bolesti) za ljubaznu pomoć u statistici podataka. pregled

• PLoS ONE: prekomjerna ekspresija receptora za glikozilacije krajnjih proizvoda (bijesa) povezana je s lošom prognozom u želučanom Cancer
• PLoS ONE: Utjecaj intratumoralno razine ekspresije fluorpirimidin-enzime koji metaboliziraju na tretman ishoda adjuvansa S-1, terapija u želučanom Cancer